(12) OPIS PATENTOWY (19) PL. (21) Num er zgłoszenia: (86) Data i num er zgłoszenia międzynarodowego: , PCT/EP96/01855

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA U rząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (21) Num er zgłoszenia: (2 2 ) Data zgłoszenia: (86) Data i num er zgłoszenia międzynarodowego: , PCT/EP96/01855 (87) Data i num er publikacji zgłoszenia m iędzynarodowego: , WO96/36311, PCT Gazette nr 51/96 (11) (13) B1 ( 5 1 ) IntCl7 A61K 7/043 A61K 31/4412 A61K 31/225 A61P 31/10 (54) Lakier do paznokci (30) Pierwszeństwo: ,DE, (73) Uprawniony z patentu: HOECHST AKTIENGESELLSCHAFT, Frankfurt nad Menem, DE (43) Zgłoszenie ogłoszono: BUP 12/97 (72) Twórcy wynalazku: Manfred Bohn, Hofheim, DE Karl Kraemer, Langen, DE Astrid Markus, Liederbach, DE (45) O udzieleniu patentu ogłoszono: WUP 11/02 (74) Pełnomocnik: Sulima Zofia, SULIMA*GRABOWSKA*SIERZPUTOWSKA, Biuro Patentów i Znaków Towarowych s.c. 1. Lakier do paznokci, stanowiący preparat przeciwgrzybiczy zaw ierający substancje czynne, substancję (57) błonotw órczą i ewentualnie substancje pom ocnicze, znamienny tym, że jako substancje czynne zawiera trioctan gliceryny i 1-hydroksy-2-pirydon o w zorze I PL B1 w którym R 1, R 2 i R3 są jednakow e lub różne i niezależnie oznacząją atom w odoru lub C 1-C4-alkil, a R4 oznacza nasycony rodnik C6-C9-w ęglow odorow y lub rodnik o wzorze II w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza atom wodoru lub co najwyżej 2 atomy chlorowca, takiego jak chlor i/lub brom, Z oznacza wiązanie pojedyncze lub dw uw artościow ą grupę O, S, -CR2- (R = H lub C 1-C 4-alkil) lub inną dwuwartościową grupę w postaci łańcucha zawierającego 2-10 atom ów węgla i ew entualnie tlenu i/lub siarki, przy czym gdy ta grupa zaw iera 2 lub w iększą liczbę atom ów tlenu i/lub siarki, to w ówczas m uszą być one oddzielone od siebie co najmniej 2 atomam i węgla, a 2 sąsiednie atom y w ęgla mogą być połączone wiązaniem podwójnym i wolne wartościowości tych atomów węgla m ogą być w ysycone atomami wodoru i/lub grupami C 1-C4-alkilowymi, A r zaś oznacza arom atyczny układ pierścieniow y o co najwyżej dwóch pierścieniach, ewentualnie podstawiony 1-3 podstawnikam i z grupy obejmującej atom fluoru, atom chloru, atom bromu, metoksyl, C 1-C4-alkil, trifluorom etyl i trifluorometoksyl.

2 Lakier do paznokci Zastrzeżenia patentowe 1. Lakier do paznokci, stanowiący preparat przeciwgrzybiczy zawierający substancje czynne, substancję błonotwórczą i ewentualnie substancje pomocnicze, znamienny tym, że jako substancje czynne zawiera trioctan gliceryny i 1-hydroksy-2-pirydon o wzorze I w którym R1, R2 i R3 są jednakowe lub różne i niezależnie oznaczają atom wodoru lub C 1-C4 alkil, a R4 oznacza nasycony rodnik C6-C9-węglowodorowy lub rodnik o wzorze II w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza atom wodoru lub co najwyżej 2 atomy chlorowca, takiego jak chlor i/lub brom, Z oznacza wiązanie pojedyncze lub dwuwartościową grupę O, S, -CR2- (R = H lub C 1-C4-alkil) lub inną dwuwartościową grupę w postaci łańcucha zawierającego 2-10 atomów węgla i ewentualnie tlenu i/lub siarki, przy czym gdy ta grupa zawiera 2 lub w ięk szą liczbę atomów tlenu i/lub siarki, to wówczas m uszą być one oddzielone od siebie co najmniej 2 atomami węgla, a 2 sąsiednie atomy węgla moga być połączone wiązaniem podwójnym i wolne wartościowości tych atomów węgla m ogą być wysycone atomami wodoru i/lub grupami C1-C4 alkilowymi, Ar zaś oznacza aromatyczny układ pierścieniowy o co najwyżej dwóch pierścieniach, ewentualnie podstawiony 1-3 podstawnikami z grupy obejmującej atom fluoru, atom chloru, atom bromu, metoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl i trifluorometoksyl. 2. Lakier według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera związek o wzorze I, w którym Ar oznacza układ bicykliczny pochodzący od bifenylu, difenyloalkanu lub eteru difenylowego. 3. Lakier według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera związek o wzorze I, w którym R4 oznacza cykloheksyl. 4. Lakier według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera związek o wzorze I, w którym R4 oznacza oktyl o wzorze -CH2-CH(CH3 )-CH2 -C(CH3)3. 5. Lakier według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera 6-[4-(4-chlorofenoksy)fenoksym etylo]-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6-cykloheksylo-2-pirydon lub l-hydroksy-4-metylo-6-(2,4,4-trimetylopentylo)-2-pirydon. 6. Lakier według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera trioctan gliceryny w ilości 0,1-25% wagowych. 7. Lakier według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera trioctan gliceryny w ilości 1-25% wagowych w przeliczeniu na ilość składników nielotnych.

3 Lakier według zastrz. 1 albo 2, albo 3, albo 4, albo 5, znam ienny tym, że zawiera związek o wzorze I w ilości 2-80% wagowych, korzystnie 10-60% wagowych, a zwłaszcza 20-40% wagowych, w przeliczeniu na ilość składników nielotnych. * * * Przedmiotem wynalazku jest lakier do paznokci, stanowiący preparat przeciwgrzybiczy. Choroby grzybicze paznokci (grzybice) należą do chorób zakaźnych, które są dotychczas niełatwe do wyleczenia. Aczkolwiek u pacjentów przebiegają one bez bólu, istnienie permanentnego ogniska zapalnego stwarza bezwarunkową potrzebę leczenia. Do czynników sprzyjających chorobom paznokci należą obok zaburzeń związanych z przekrwieniem i urazów także zaburzenia immunologiczne oraz określone zaburzenia przemiany materii (Diabetes mellitus). Choroba atakuje przede wszystkim paznokcie palców u nóg, a zwłaszcza paznokcie dużego i małego palca. Analiza spektrum czynników chorobotwórczych wykazuje, że grzybice są wywoływane przede wszystkim przez dermatofity (np. Trichophyton rubrum), a także drożdże (np. Candida albicans) lub pleśnie (np. Scopulariopsis brevicaulis). Za wyjątkiem białych grzybic powierzchownych większość infekcji występuje pod płytką paznokciową, w łożysku paznokcia lub w o- bszarze łożyska paznokcia. W zależności od klinicznego obrazu objawów i stopnia nasilenia infekcji stosuje się leczenie układowe, miejscowe lub złożone. Najszybszą i wywierającą najmniejsze działanie uboczne metodą leczenia jest miejscowe leczenie dotkniętych chorobą paznokci. Z europejskiego opisu patentowego EP znany jest preparat przeciwgrzybiczy w postaci lakieru do paznokci, zawierający co najmniej substancję przeciwgrzybiczą i co najmniej nierozpuszczalną w wodzie substancję błonotwórczą. Wadą tego rodzaju preparatów jest to, że wykazują one słabe przenikanie w kierunku bocznym, a w ięc skuteczne leczenie zarażonego łożyska paznokcia i znajdującego się pod płytką paznokciową obszaru łożyska paznokcia jest możliwe tylko w niewielkim stopniu. Trioctan gliceryny (octan propano-1,2,3-triylu) znajduje zastosowanie przede wszystkim jako zmiękczacz do preparatów lakierniczych i taką funkcję pełni również w preparacie według EP Poza tym trioctan gliceryny ma właściwości fungistatyczne i z tego względu był czasami stosowany, zwłaszcza w Stanach Zjednoczonych Ameryki, do leczenia powierzchownych chorób grzybiczych skóry, lecz nie był stosowany do leczenia grzybic (Martindale The Extra Pharmcopoeia, wydanie 30, 1993; Roche Lexikon Medizin 3. Auflage, 1993). Z europejskiego opisu patentowego EP znany jest lakier do paznokci zawierający nierozpuszczalną w wodzie substancję błonotwórczą i przeciwgrzybiczo skuteczną ilość 1-hydroksy-2-pirydonu o wzorze I, przy czym jako dodatki stosowano między innymi zmiękczacze na bazie ftalanów i kamfory. Takie związki o właściwościach fungistatycznych można wytwarzać sposobem przedstawionym w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr , zgodnie z którym co najmniej jeden nienasycony 5-ketoester poddaje się reakcji z hydroksyloaminą lub jej solą addycyjną z kwasem, w temperaturze C, korzystnie w obecności kwasu, takiego jak kwas mineralny, a następnie powstały związek pośredni poddaje się cyklizacji. Nieoczekiwanie stwierdzono, że preparat zawierający trioctan gliceryny w połączeniu z 1-hydroksy-2-pirydonem znakomicie nadaje się do leczenia grzybic, gdyż wykazuje dobre przenikania w kierunku bocznym przez paznokieć, co umożliwia skuteczną profilaktykę i leczenie łożyska paznokcia i znajdującego się pod płytką paznokciową obszaru łożyska paznokcia, zarażonych dermatofitami. Tak więc wynalazek dotyczy lakieru do paznokci, stanowiącego preparat przeciwgrzybiczy, zawierający substancje czynne, substancję błonotwórczą i ewentualnie substancje pomocnicze, który jako substancje czynne zawiera trioctan gliceryny i 1-hydroksy-2-pirydon o wzorze I

4 w którym R1, R2 i R3 są jednakowe lub różne i niezależnie oznaczają atom wodoru lub C 1-C4-alkil, a R4 oznacza nasycony rodnik C6-C9-węglowodorowy lub rodnik o wzorze II w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, Y oznacza atom wodoru lub co najwyżej 2 atomy chlorowca, takiego jak chlor i/lub brom, Z oznacza wiązanie pojedyncze lub dwuwartościową grupę O, S, -CR2- (R = H lub C1-C4-alkil) lub inną dwuwartościową grupę w postaci łańcucha zawierającego 2-10 atomów węgla i ewentualnie tlenu i/lub siarki, przy czym gdy ta grupa zawiera 2 lub większą liczbę atomów tlenu i/lub siarki, to wówczas muszą być one oddzielone od siebie co najmniej 2 atomami węgla, a 2 sąsiednie atomy węgla mogą być połączone wiązaniem podwójnym i wolne wartościowości tych atomów węgla m ogą być wysycone atomami wodoru i/lub grupami C1-C4-alkilowymi, Ar zaś oznacza aromatyczny układ pierścieniowy o co najwyżej dwóch pierścieniach, ewentualnie podstawiony 1-3 podstawnikami z grupy obejmującej atom fluoru, atom chloru, atom bromu, metoksyl, C1-C4-alkil, trifluorometyl i trifluorometoksyl. Lakier do paznokci korzystnie zawiera związek o wzorze I, w którym Ar oznacza układ bicykliczny pochodzący od bifenylu, difenyloalkanu lub eteru difenylowego. Lakier do paznokci korzystnie zawiera związek o wzorze I, w którym R4 oznacza cykloheksyl. Lakier do paznokci korzystnie zawiera związek o wzorze I, w którym R4 oznacza oktyl o wzorze -CH2-CH(CH3)-CH2-C(CH3)3. Lakier do paznokci korzystnie zawiera 6- [4- (4-chloro-fenoksy)fenoksymetylo]-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6-cykloheksylo-2-pirydon lub 1-hydroksy-4-metylo-6-(2,4,4-trimetylopentylo)-2-pirydon. Lakier do paznokci korzystnie zawiera trioctan gliceryny w ilości 0,1-25% wagowych. Lakier do paznokci zawiera trioctan gliceryny korzystnie w ilości 1-25% wagowych w przeliczeniu na ilość składników nielotnych, to jest łączną ilość substancji błonotwórczych, ewentualnie obecnych pigmentów, zmiękczaczy i innych nielotnych dodatków. Lakier do paznokci korzystnie zawiera związek o wzorze I w ilości 2-80% wagowych, korzystnie 10-60% wagowych, a zwłaszcza 20-40% wagowych, w przeliczeniu na ilość składników nielotnych. Zawartość związku o wzorze I w lakierze do paznokci według wynalazku zależy od budowy użytego związku o wzorze I, a zatem od jego zdolności uwalniania się z błony lakierowej, właściwości przenikania w paznokciu i właściwości przeciwbakteryjnych. Określenie nienasycony oznacza tutaj taką grupę, która nie zawiera żadnych wiązań w ielokrotnych oraz żadnych wiązań etylenowych lub acetylenowych. W grupach Z członami łańcucha węglowego są korzystnie grupy CH2. Gdy grupy CH2 są podstawione grupami C 1-C4-alkilowymi, to wówczas korzystnymi podstawnikami są CH3 i C2H5. Przykładowymi grupami Z są -O-, -S-, -CH2-, -(CH2)m- (m = 2-10), -C(CH3)2-, -CH2O-, -OCH2-, -CH2S-, -SCH2-, -SCH(C2H5)-, -CH=CH-CH2O-, -O-CH2-CH=CH-CH2O-, -OCH2

5 CH2O-, -OCH2-CH2CH2O-, -SCH2CH2S-, -SCH2CH2CH2CH2O-, -SCH2CH2OCH2CH2O-, -SCH2CH2OCH2CH2O-CH2CH2S- lub -S-CH2-C(CH3)2 -CH2-S-. Grupa S oznacza atom siarki, grupa O oznacza atom tlenu. Symbol Ar oznacza fenyl i układy skondensowane, takie jak naftyl, tetrahydronaftyl i indenyl, oraz układy pochodzące od bifenylu, difenyloalkanów, eterów difenylowych i tioeterów difenylowych. We wzorze I grupa węglowodorowa R4 stanowi grupę alkilową lub cykloheksylową, ewentualnie związaną poprzez grupę metylenową lub etylenow ą z pierścieniem pirydonowym lub zawierającą grupę endometylową. R4 może również oznaczać grupę aromatyczną, która jednak korzystnie jest związana poprzez co najmniej jeden alifatyczny atom węgla z grupą pirydonową. Preparat przeciwgrzybiczy według wynalazku korzystnie zawiera związek o wzorze I w y- brany z grupy obejmującej: 6-[4-(4-chlorofenoksy)fenoksymetylo]-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 6-[4-(2,4-dichlorofenoksy)fenoksymetylo]-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 6-(bifenylilo-4- -oksymetylo)-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 6-(4-benzylofenoksymetylo)-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 6-[4-(2,4-dichlorobenzyloksy)fenoksymetylo]-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 6- -[4-(4-chlorofenoksy)fenoksymetylo]-1-hydroksy-3,4-dimetylo-2-pirydon, 6-[4-(2,4-dichlorobenzylo)fenoksymetylo]-1-hydroksy-3,4-dimetylo-2-pirydon, 6-[4-(cynamyloksy)fenoksymetylo]-1-hydroksy-4-metylo-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6- [4-(4-trifluorometylofenoksy) fenoksymetylo]-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6-cykloheksylo-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6-(2,4,4-trimetylopentylo)-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6-n-heksylo-, -6-izoheksylo-, -6-n-heptylo- lub -6-izoheptylo-2-pirydon, 1-hydroksy-4-metylo-6-oktylo- lub -6-izooktylo- -2-pirydon, a zwłaszcza 1-hydroksy-4-metylo-6-cykloheksylometylo- lub -6-cykloheksyloetylo-2-pirydon, przy czym grupa cykloheksylową w każdym z tych związków może być podstawiona grupą metylową, 1-hydroksy-4-metylo-6-(2-bicyklo[2,2,1]heptylo)-2-pirydon, 1- -hydroksy-3,4-dimetylo-6-benzylo- lub -6-dimetylobenzylo-2-pirydon albo 1-hydroksy-4-metylo-6-(β-fenyloetylo)-2-pirydon. Preparat przeciwgrzybiczy według wynalazku zapewnia gruntowne wyleczenie, zw łaszcza w przypadku leczenia grzybic łożyska paznokcia, przy czym paznokieć normalnie odrasta bez deformacji, ponieważ zwalczono dermatofity w korzeniu paznokcia. Jest to niezwykle w ażne osiągnięcie, mając na uwadze dotychczasowe złe doświadczenia w leczeniu grzybic paznokci. Preparat przeciwgrzybiczy według wynalazku można stosować w profilaktyce przeciw grzybicom paznokci, przy czym osiąga się wystarczająco wysoki stopień nagromadzenia się substancji czynnej w paznokciu, dzięki czemu w przypadku zakażenia grzybami nie dochodzi do wystąpienia choroby paznokci wywoływanej przez grzyby. Lakier do paznokci według wynalazku, w zawierającej rozpuszczalnik postaci użytkowej, zazwyczaj zawiera związek o wzorze I w ilości 0,5-20% wag., a korzystnie 2-15% wag., w przeliczeniu na ilość lotnych i nielotnych składników. Zawartość związku o wzorze I w leczniczych lakierach do paznokci stosowanych w terapii wynosi zazwyczaj 4% wag; lakiery stosowane w profilaktyce zawierają zazwyczaj poniżej 4% wag., a korzystnie co najmniej 1 % wag. związku o wzorze I. Lakiery do paznokci według wynalazku oprócz rozpuszczonego w fizjologicznie dopuszczalnym rozpuszczalniku lub mieszaninie takich rozpuszczalników trioctanu gliceryny oraz 1-hydroksy-2-pirydonu o wzorze I, zawierają ponadto, jako niezbędne składniki, substancję błonotwórczą, która po wyschnięciu preparatu tworzy nierozpuszczalną w wodzie błonę na paznokciu. Jako substancje błonotwórcze stosuje się, np. substancje na bazie azotanu celulozy lub fizjologicznie dopuszczalne polimery na ogół stosowane w kosmetykach, korzystnie w postaci mieszaniny z azotanem celulozy. Do takich polimerów należą, np. polioctan winylu i częściowo zmydlony polioctan winylu, kopolimery octanu winylu i kwasu akrylowego lub kwasu krotonowego lub estru monoalkilowego kwasu maleinowego, trójskładnikowe kopolimery octanu winylu, kwasu krotonowego i neodekanianu winylu albo octanu winylu, kwasu krotonowego i propionianu winylu, kopolimery eteru m etylowo-winylowego i estru monoalkilowego kwasu m aleinowego, a zwłaszcza estru monobutylowego kwasu maleinowego, kopolimery estru winylowego

6 kwasu tłuszczowego i kwasu akrylowego lub kwasu metakrylowego, kopolimery N-winylopirolidonu, kwasu metakrylowego i estru alkilowego kwasu metakrylowego, kopolimery kwasu akrylowego i kwasu metakrylowego lub estru alkilowego kwasu akrylowego lub estru alkilowego kwasu metakrylowego, a zwłaszcza kopolimery zawierające czwartorzędowe grupy amoniowe, albo polimery, kopolimery i mieszaniny, zawierające akrylan etylu, metakrylan metylu lub chlorek trimetyloamoniometakrylanu etylu, albo poliacetale winylowe i polimaślany winylowe, alkilo-podstawione poli-n-winylopirolidony, estry alkilowe kopolimerów olefin i bez- wodnika maleinowego oraz produkty reakcji kalafonii z kwasem akrylowym. Grupy alkilowe w estrach są grupami o krótkim łańcuchu i zazwyczaj zawierają nie więcej niż 4 atomy węgla. Jako fizjologicznie dopuszczalne rozpuszczalniki można wymienić substancje zwykle stosowane w kosmetykach, takie jak węglowodory, chlorowcowane węglowodory, alkohole, etery, ketony i estry, a zwłaszcza estry kwasu octowego i alkoholi jednowodorotlenowych, takie jak octan etylu lub butylu, ewentualnie w mieszaninie z węglowodorami aromatycznymi, takimi jak toluen, i/lub alkoholami, takimi jak etanol lub izopropanol. Jak wiadomo mieszanina rozpuszczalników ma istotne znaczenie dla czasu schnięcia, rozprowadzalności i innych ważnych właściwości lakieru lub błony lakierowej. Układ rozpuszczalników korzystnie stanowi optymalna mieszanina cieczy niskowrzących (rozpuszczalników o temperaturze wrzenia do 100 C) i cieczy o średniej temperaturze wrzenia (rozpuszczalników o temperaturze wrzenia do 200 C). Lakiery do paznokci według wynalazku mogą ponadto zawierać substancje pomocnicze stosowane w kosmetykach, takie jak zmiękczacze na bazie fitalanów lub kamfory, barwniki lub pigmenty, środki nadające perłowy połysk, środki opóźniające sedymentację, żywice sulfonoamidowe, krzemiany, substancje zapachowe, środki sieciujące, takie jak sól sodowa sulfobursztynianu dioktylu, pochodne lanoliny, środki przeciwsłoneczne, takie jak 2-hydroksy-4-metoksybenzofenon, substancje przeciwbakteryjne i substancje o działaniu keratolitycznym i/lub keratoplastycznym, takie jak siarczyn amonowy, ester lub sól kwasu tioglikolowego, mocznik, alantoina, enzymy i kwas salicylowy. Barwione lub pigmentowane lakiery do paznokci mają przykładowo tę zaletę, że preparat według wynalazku można dostosować do upodobań estetycznych pacjentów. Lakier do paznokci zawierający trioctan gliceryny oraz 1-hydroksy-2-pirydon o wzorze I wytwarza się w znany sposób drogą zmieszania poszczególnych składników i, w razie potrzeby, dalszej obróbki w zależności od rodzaju preparatu. Przykład 1 ilustruje preparat zawierający jako substancję czynną trioctan gliceryny, przykłady 2 i 3 ilustrują preparat przeciwgrzybiczy według wynalazku, w przykładzie 4 zaś opisano próbę skuteczności. Przykład 1 Preparat wytworzono z następujących składników: Trioctan gliceryny 6,0 % wag. Alkohol izopropylowy 47,0 % wag. Octan etylu 32,0 % wag. Kopolimer eteru metylowo-winylowego 15,0 % wag. i estru monobutylowego kwasu maleinowego Lakier wytworzono drogą rozpuszczania różnych składników w rozpuszczalnikach. Przykład 2 Preparat wytworzono z następujących składników: Trioctan gliceryny 2,5 % wag. l-hydroksy-4-metylo-6-cykloheksylo-2-pirydon 5,0 % wag. Alkohol izopropylowy 46,5 % wag. Octan etylu 36,0 % wag. Kopolimer eteru metylowo-winylowego 10,0 % wag. i estru monobutylowego kwasu maleinowego

7 Przykład 3 Preparat wytworzono z następujących składników: Trioctan gliceryny 2,5 % wag. 1-Hydroksy-4-metylo-6-(2,4,4-trimetylopentylo)-2-pirydon 2,5 % wag. Alkohol izopropylowy 47,5 % wag. Octan etylu 40,0 % wag. Kopolimer eteru m etylowo-winylowego i 7,5 % wag. estru monobutylowego kwasu maleinowego Przykład 4 Próba skuteczności Próbę określenia bocznego przenikania trioctanu gliceryny przez substancję keratynową przeprowadzono z użyciem preparatów z przykładów 1-3 w następujący sposób. Ze zrogowaciałej części rogu krowiego przygotowano płytki o wielkości 1,5 x 3 cm i grubości około 0,5 mm. Połowę jednej strony każdej płytki poddawano działaniu zawierającego substancję czynną preparatu przez 5 kolejnych dni. Następnie płytki umieszczono w wilgotnej komorze na metalowym cylindrze około 0,5 cm nad powierzchnią wodnego roztworu agaru, przy czym strona płytki, której połowa została poddana działaniu preparatu, była skierowana ku dołowi. Całą zwróconą ku górze stronę płytki zaszczepiono wielopunktowo zawiesiną mikrokonidiów Trichophyton mentagrophytes, po czym obserwowano tworzenie się kolonii w 28 C przez 10 dni. Wyniki W wyniku 5-krotnego działania preparatami według wynalazku z przykładów 1-3 na dolną powierzchnię płytki rogowej nastąpiło całkowite zahamowanie procesu wytwarzania zarodników grzyba na całej górnej powierzchni. Nawet punkty szczepienia na całej górnej pow ierzchni nie były już widoczne makroskopowo. Tak więc działanie preparatu według wynalazku rozciągało się w kierunku bocznym od obszaru poddanego działaniu preparatu na całą górną powierzchnię płytki rogowej. Płytki kontrolne, nie poddane działaniu preparatu według wynalazku, po zaszczepieniu wykazywały pełny wzrost grzyba na górnej powierzchni płytki rogowej. Jedna z płytek kontrolnych, poddana działaniu preparatu zawierającego preparat z przykładu 2 lecz bez trioctanu gliceryny, nie wykazała wzrostu grzyba bezpośrednio nad powierzchnią płytki poddaną działaniu preparatu, natomiast na drugiej połowie płytki (nie poddanej działaniu preparatu) zaobserwowano wzrost grzyba.

8 Departam ent W ydawnictw UP RP. N akład 50 egz. Cena 2,00 zł.