(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (13) (1) T3 Int.Cl. A61K 31/473 (06.01) A61K 31/343 (06.01) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 11/40 EP B1 (4) Tytuł wynalazku: Kompozycje do leczenia infekcji pochwy z przewlekłym zapaleniem () Pierwszeństwo: (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 09/1 (4) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 12/03 (73) Uprawniony z patentu: Indena S.p.A., Milano, IT (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 EZIO BOMBARDELLI, Gropello Cairoli, IT GABRIELE FONTANA, Milano, IT ANDREA GIORI, MILANO, IT PAOLO MORAZZONI, Milano, IT ANTONELLA RIVA, MILANO, IT MASSIMO RONCHI, Milano, IT (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Elżbieta Ostrowska POLSERVICE KANCELARIA RZECZNIKÓW PATENTOWYCH SP. Z O.O. ul. Bluszczańska Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 2 Opis Streszczenie [0001] Niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji na bazie związków benzofuranu i alkaloidów benzofenantrydyny, które posiadają działanie przeciwzapalne, przeciwbakteryjne i przeciwgrzybiczne, użyteczne w leczeniu infekcji pochwy i wynikających z nich stanów zapalnych. Stan techniki 1 2 [0002] Zapalenie pochwy jest często początkowo bezobjawowe, ale z czasem może przerodzić się w infekcje, które mogą być niebezpieczne. Infekcje sromu i pochwy, czy to pochodzenia wirusowego, bakteryjnego, grzybicznego lub pierwotniakowego (opryszczka, rzęsistkowica, kandydoza) wywołują świąd sromu, pieczenie, podrażnienia i uszkodzenia, a następnie zewnętrzne trudności w oddawaniu moczu i dyspareunii sromu. Zapalenie pochwy może prowadzić do szeregu poważnych zdarzeń, z nawracającymi zakażeniami, takich jak toksyczność w stosunku do innych narządów i aparatów. Zjawisko to jest szczególnie ważne w wielu krajach rozwijających się, gdzie te zdarzenia predysponują chorego na ryzyko zakażenia HIV lub innych chorób przenoszonych drogą płciową. [0003] Objawy występujące w rzęsistkowicy to żółtawy wysięk ropny z podrażnieniem pochwy, zapaleniem nabłonka pochwy i sromu, i wybroczynowe zmiany szyjki macicy. Wartość ph wydzieliny jest większa niż, a zatem wspiera rozwój Trichomonas. W kandydozie występuje ostry świąd sromu z rumieniem i obrzękiem, a wydzieliny są cuchnące, jak w przypadku bakteryjnego zapalenia pochwy. Zaburzenia te leczy się podając doustne antybiotyki i leki przeciwgrzybiczne w dużych dawkach, lub żele do miejscowego leczenia. Takie leczenia zawsze trwają bardzo długo, i mogą powodować działania uboczne. [0004] Alkaloidy benzofenantrydyny wyizolowane z Macleaya cordata, Macleaya microcarpa, Sanguinaria canadensis i Chelidonia majus są szczególnie aktywne wobec szczepów bezpośrednio zaangażowanych w infekcjach pochwy, takich jak Trichomonas vaginalis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa i tym podobne. [000] Według wynalazku, związki benzofuranu mają następujący wzór

3 3 w którym R może oznaczać atom wodoru lub liniowy lub rozgałęziony łańcuch alkilowy z 2 do 6 atomów węgla, lub łańcuch alkilowy podstawiony przez grupy aminowe, nitrowe; R korzystnie oznacza atom wodoru lub alkil C1-C3. [0006] Wspomniane związki benzofuranu są znane i mogą być otrzymywane znanymi sposobami, na przykład w reakcji fenolu odpowiednio podstawionego z 2-fenoksy-2',4'- dimetoksyacetofenonem w warunkach podanych w Chimie Therapeutique 1973, 8, 398, a następnie cyklizację w obecności kwasu polifosforowego w ksylenie i hydrolizę grup metoksylowych i hydroksylowych. Związki benzofuranu stosowane w kompozycjach według wynalazku mają wzór strukturalny 1 oraz posiadają silne działanie przeciwbakteryjne i przeciwgrzybiczne wobec wielu szczepów Candida. 1 Opis wynalazku [0007] Niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji opartej na: 2 a) alkaloidach benzofenantrydyny; i b) związkach benzofuranu; c) wyciągu z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia; które posiadają działanie przeciwzapalne, przeciwbakteryjne i przeciwgrzybiczne, użyteczne w leczeniu infekcji pochwy i wynikających z nich stanów zapalnych, zwłaszcza zapalenia pochwy różnego pochodzenia z towarzyszącymi im problemami zapalnymi. [0008] Bardziej szczegółowo, niniejszy wynalazek dotyczy preparatów opartych na: a) alkaloidach benzofenantrydyny wybranych z sangwinaryny i/lub chelerytryny i/lub ich pochodnych; i b) związkach benzofuranu jak określono powyżej; c) wyciągu z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia.

4 4 [0009] Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, że kompozycje według wynalazku posiadają działanie przeciwbakteryjne, przeciwgrzybiczne i przeciwenzymatyczne większe niż suma poszczególnych składników podawanych osobno. Wspomniany efekt może być spowodowany mechanizmem działania synergicznego, które zachodzi pomiędzy różnymi składnikami połączenia, o którym mowa. Kompozycje według wynalazku szybko eliminują te zakażenia, eliminując obecność saprofitów i zmniejszając stan zapalny, swędzenie i wartość ph w pochwie. [00] Według wynalazku, kompozycje będą zawierać różne składniki w następujących zakresach (wagowo na dawkę jednostkową): 1 a) alkaloidy benzofenantrydyny: od 0,1 mg do 1 mg; i b) związki benzofuranu: od 0,2 do 2 mg; c) wyciąg z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia: od 0,1 do mg. [0011] Według szczególnie korzystnego aspektu, kompozycje, o których mowa, będą zawierać różne składniki w następujących zakresach (wagowo na jednostkę dawki): a) alkaloidy benzofenantrydyny: od 0,4 do mg, i b) związki benzofuranu: od 0,4 do mg; c) wyciąg z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia: od 0,2 do mg. 2 [0012] Alkaloidy benzofenantrydyny sangwinaryna i chelerytryna mogą występować w postaci wolnej lub postaci soli, jako takie w zasadniczo czystej postaci lub w postaci wyciągów z Sanguinaria canadensis, Macleaya cordata, Macleaya microcarpa lub Chelidonia majus. Według korzystnego aspektu, alkaloidy benzofenantrydyny będą obecne w postaci soli z kwasem luteinowym. Wspomniane sole, które otrzymuje się w reakcji siarczanów lub chlorków alkaloidów z solą sodową lub potasową kwasu luteinowego i następnie krystalizację, okazały się szczególnie skuteczne dla celów niniejszego wynalazku. W szczególności, sangwinaryna jest potężnym czynnikiem antyangiogennym, który przyczynia się do zmniejszenia stanu zapalnego (Jong-Pil Eun 04). In vivo,

5 1 2 sangwinaryna hamuje powstawanie naczyń włosowatych w Matrigel i błonie kosmówkowo-omoczniowej zarodka kurzego. (Jong-Pil Eun 04). [0013] Wspomniane alkaloidy benzofenantrydyny nie tylko wykazują znaczne działanie przeciwbakteryjne, przeciwgrzybiczne i przeciwrzęsistkowe, ale także dużą aktywność przeciw wirusowi cytomegalii i wirusowi brodawczaka. Z tego powodu archetypy tych alkaloidów, sangwinaryna, chelerytryna i chelidonina, które także mają działanie przeciwbólowe, są bardzo przydatne w leczeniu zapalenia pochwy o różnej etiologii. Związki te działają w synergii ze sobą zmniejszając stan zapalny, a tym samym objawy i powstrzymują chorobę. [0014] Związki o strukturze benzofuranu, opisane powyżej, mogą być obecne jako takie lub w postaci wyciągów, które je zawierają, takich jak wyciągi z Krameria triandra, Eupomatia laurina i Piper sp. Związkami wyizolowanymi z Krameria triandra, które okazały się szczególnie aktywne są Eupomatenoid 6 i neolignan 2-(2,4-dihydroksyfenylo)- -(E)-propenylo-benzofuran, które wykazały działanie przeciwbakteryjne i przeciwgrzybiczne wobec wiele szczepów bakterii Gram +, grzybów i bakterii beztlenowych. [001] Według szczególnie korzystnego aspektu, kompozycje, o których mowa będą również zawierać wyciąg z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia, aby pomóc wyeliminować swędzenie i/lub ból, jeśli występują. Działanie to jest wynikiem obecności izobutyloamidów, które wiążą receptory kannabinoidowe CB2 i CB1. Preparaty według wynalazku można otrzymać według znanych konwencjonalnych metod, takich jak te opisane w "Remington s Pharmaceutical Handbook", Mack Publishing Co, N.Y., USA, wraz z odpowiednimi zaróbkami. [0016] Kompozycje według wynalazku można dogodnie przygotować w emulsjach woda/olej z innymi kompatybilnymi zaróbkami dla zewnętrznego leczenia okolic odbytowo-płciowych; do zabiegów wewnętrznych związki zawiesza się w olejach w miękkich kapsułkach żelatynowych, które rozpadają się łatwo po wprowadzeniu do ujścia pochwy. [0017] Przykłady preparatów według wynalazku obejmują kremy, maści, proszki, płyny i tym podobne, krążki dopochwowe lub równoważne preparaty, w tym kapsułki, które rozpuszczają się w wewnętrznej temperaturze ciała. [0018] Przykłady przedstawione poniżej ilustrują wynalazek, nie ograniczając jego zakresu.

6 6 Przykład 1 - Otrzymywanie związków benzofuranu Etap A. Otrzymywanie 2-fenoksy-2',4'-dimetoksyacetofenonu (a) [0019] Roztwór 2-bromo-2',4'-dimetoksyacetofenonu ( g, 19,1 mmola) w 2 ml 2- butanonu dodano do zawiesiny fenolu (1,8 g, 19,1 mmola), K 2 CO 3 (2,6 g, 19,1 mmola) i KI (41, mg, 0,2 mmola) w,0 ml tego samego rozpuszczalnika. Następnie roztwór ogrzewano do wrzenia przez godzin. Mieszaninę przesączono i rozpuszczalnik usunięto pod próżnią. Otrzymaną pozostałość rozpuszczono w EtOAc i przemyto z % wodnym roztworem NaOH, i następnie z wodą. Ekstrakt organiczny wysuszono nad Na 2 SO 4, przesączono i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Wreszcie, surową pozostałość przemyto Et 2 O i wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 4,4 g (wydajność 84%) tytułowego związku. 1 Etap B. Otrzymywanie 2-(2',4'-dimetoksyfenylo)benzofuranu (b) [00] Kwas polifosforowy 12 g dodano do roztworu związku otrzymanego w Etapie A (4,4 g, 16,2 mmola) w 1,0 ml ksylenu. Mieszaninę ogrzewano do wrzenia przez 2 godziny, a następnie pozostawiono do ochłodzenia w temperaturze otoczenia. Następnie roztwór zdekantowano i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Uzyskaną pozostałość (3,7 g, wydajność: 90%) zastosowano w następnym etapie bez dalszego oczyszczania. 2 Etap C. Otrzymywanie 2-(2',4'-dihydroksyfenylo) benzofuranu (1) [0021] Mieszaninę związku otrzymanego w Etapie B (3,7 g, 14, mmola) i chlorowodorku pirydyny (11,1 g, 96,4 mmoli) ogrzewano do 22 C przez 4 minut. Utworzony czerwony produkt wylano do % HCl. Mieszaninę przemyto kilkakrotnie z EtOAc; połączone warstwy organiczne wysuszono nad Na 2 SO 4 i odparowano. Pozostałość oczyszczono metodą chromatografii kolumnowej (heksan / EtOAc = 7:3). Końcowy związek otrzymano z wydajnością 41% (1,36 g) po krystalizacji z benzenu. Przykład preparatu 1

7 7 Oleista zawiesina do miękkich kapsułek żelatynowych do wkładania do ujścia pochwy [0022] Macleaya cordata wyciąg lipofilowy (7%) mg 2,4-Dihydroksyfenylo-3-benzofuran Lecytyna sojowa Wosk Olej roślinny qs mg 60 mg 0 mg 800 mg Przykład Preparatu 2 Krem (emulsja olej-w-wodzie) [0023] Wyciąg z Krameria triandra Frakcja alkaloidu Macleaya cordata 0,4 g 0,4 g Zanthoxylum bungeanum wyciąg lipofilowy 0,2 g Glikol propylenowy Mirystynian izopropylowy Alkohol cetylowy Polisorbat 80 Karbomer Parahydroksybenzoesan metylu Parahydroksybenzoesan propylu Oczyszczona woda qs do,00 g,00 g,00 g 3,00 g 0,40 g 0, g 0,0 g 0 g Przykład Preparatu 3 Krążki dopochwowe 1 [0024]

8 8 2,4-Dihydroksyfenylo-3-benzofuran mg Frakcja alkaloidu Macleaya 3 mg Glicerydy kwasów tłuszczowych qs do 2,0 g Zastrzeżenia patentowe 1. Kompozycje oparte na: a) alkaloidach benzofenantrydyny; i b) związkach benzofuranu o wzorze w którym R może oznaczać atom wodoru lub liniowy lub rozgałęziony łańcuch alkilowy z 2 do 6 atomów węgla, lub łańcuch alkilowy podstawiony przez grupy aminowe, nitrowe; c) wyciąg z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia Kompozycje według zastrz. 1, oparte na: a) alkaloidach benzofenantrydyny wybranych spośród sangwinaryny, chelerytryny lub chelidoniny lub ich pochodnych; i b) związkach benzofuranu jak określono powyżej; c) wyciągu z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia Kompozycje według zastrz. 1 i 2, w których różne składniki występują w następujących zakresach (wagowo na dawkę jednostkową): a) alkaloidy benzofenantrydyny: od 0,1 mg do 1 mg; i b) związki benzofuranu: od 0,2 do 2 mg;

9 9 c) wyciąg z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia: od 0,1 do mg. 4. Kompozycje według zastrz. 3, w których różne składniki występują w następujących zakresach (wagowo na dawkę jednostkową): a) alkaloidy benzofenantrydyny: od 0,4 mg do mg; i/lub b) związki benzofuranu: od 0,4 do mg; c) wyciąg z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia: od 0,2 do mg. 1. Kompozycje według poprzednich zastrzeżeń, w których alkaloidy benzofenantrydyny sangwinaryna i chelerytryna występują w postaci wolnej lub postaci soli, jako takie w zasadniczo czystej postaci lub w postaci wyciągów z Sanguinaria canadensis, Macleaya cordata, Macleaya microcarpa lub Chelidonia majus. 6. Kompozycje według zastrz., w których alkaloidy benzofenantrydyny występują w postaci soli z kwasem luteinowym. 7. Kompozycje według zastrz. 1-4, w których związki benzofuranu występują jako takie lub w postaci wyciągów, które je zawierają Kompozycje według zastrz. 7, w których związki benzofuranu występują w postaci wyciągów z Krameria triandra, Eupomatia laurina i Piper sp. 9. Preparaty według któregokolwiek z zastrz. 1 do 8, w postaci emulsji woda/olej, miękkich kapsułek żelatynowych, krążków dopochwowych lub równoważnych preparatów, kremów, maści, proszków, płynów, i tym podobnych.. Zastosowanie: a) alkaloidów benzofenantrydyny; i b) związków benzofuranu; c) wyciągu z Zanthoxylum bungeanum lub Echinacea angustifolia

10 do wytwarzania preparatów do stosowania miejscowego do leczenia infekcji pochwy i wynikających z nich stanów zapalnych. 11. Zastosowanie według zastrz., w którym infekcje pochwy są stanem zapalnym pochwy różnego pochodzenia z towarzyszącymi problemami zapalnymi. INDENA S.P.A. Pełnomocnik: