(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (13) T3 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2009/17 EP B1 (51) Int. Cl. A61K33/30 A61K33/04 A61K31/23 A61P31/12 A61K31/198 A61P37/04 (54) Tytuł wynalazku: Antywirusowa i immunostymulująca kompozycja oleju z ryb morskich (30) Pierwszeństwo: HU (43) Zgłoszenie ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2007/37 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 09/2009 (73) Uprawniony z patentu: Sinnex Müszaki Fejlesztö es Tanacsado KFT, Budapest, HU (72) Twórca (y) wynalazku: PL/EP T3 KOLTAI Ernöné, Budapest, HU BÍRÓ Katalin, Budapest, HU JEDNÁKOVITS Andrea, Szentendre, HU SZILBEREKY Jenö, Budapest, HU ORBÁN Gyula, Szekszárd, HU (74) Pełnomocnik: Przedsiębiorstwo Rzeczników Patentowych Patpol Sp. z o.o. rzecz. pat. Hawrylak Jolanta Warszawa 130 skr. poczt. 37 Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 Opis [0001] Niniejszy wynalazek dotyczy nowej antywirusowej i immunostymulującej farmaceutycznej kompozycji. [0002] Wiadomo, że ω-3-polinienasycone kwasy tłuszczowe, między nimi kwas 5,8,11,14,17- eikozapentaenowy (dalej oznaczany jako EPA) jak również kwas 4,7,10,13,16,19-dokosaheksaenowy (dalej oznaczany jako DHA) wykazują działanie antywirusowe. Początkowe doświadczenia in vitro (patrz na przykład publikacja Antimicrobial Agents and Chemotherapy 12, 523 (1977)) zostały potwierdzone zarówno doświadczeniami in vivo na zwierzętach (patrz, na przykład patent USA o numerze US ) jak i danymi klinicznymi (patrz, na przykład publikacja J. of Immumology 134, 1914 (1985), albo Clin. Exp. Immunol. 65, 473 (1986)). [0003] Także wiadomo było, że 1-lizyna hamuje w warunkach in vitro replikację wirusa Herpes simplex (wirus opryszczki) (HSV) w ludzkich komórkach (patrz publikacja J. Vact. 87, 609 (1964)). Jednak w klinicznych badaniach ustalono, że 1-lizyna wywołuje tylko marginalne działanie lecznicze w zakażeniach HSV (patrz publikacja Dermatologica, 156, 257 (1978)). [0004] W literaturze jest ogólnie przyjęte, że replikacja HSV razem z innymi wirusowymi zakażeniami jest powiązana z upośledzeniem układu immunologicznego. Także wiadomo, że zarówno EPA jak i DHA, i ich pochodne, mają wpływ na układ immunologiczny przez hamowanie układu prostaglandyny. Oznacza to, że takie środki są zdolne do hamowania i/albo korygowania braku odporności, pewnych autoimmunologicznych procesów i nowotworów wywoływanych przez wiek, oraz/albo szkodliwe działania środowiskowe (patrz publikacja J. of Immunology 134, 1914 (1985), albo Immunology 46, 819 (1982), albo Eur. J. Clin. Nutr. 56 Suppl. 3, (2002)). [0005] Interesujące odkrycie zostało ujawnione w publikacji patentu Węgierskiego HU-199,775, zgodnie z którym sole kwasów tłuszczowych C18 do 24 zawierających co najmniej dwa wiązania podwójne z aminokwasami (korzystnie z 1-lizyną, 1-tyrozyną, 1-histydyną, 1-alaniną albo 1-ornityną) są odpowiednie jako aktywne składniki antywirusowych kompozycji. Ta informacja została poparta doświadczeniami in vitro skuteczności takich kompozycji w hamowaniu proliferacji wirusów. Najbardziej znaczące wyniki były opisane dla soli tyrozyny z polinienasyconymi kwasami tłuszczowymi. Niekorzystną cechą tego wynalazku jest to, tworzenie soli często skutkuje powstawaniem produktów podobnych do pasty, które są trudne do oczyszczenia i scharakteryzowania (patrz na przykład Przykłady cytowanego opisu patentowego). Nawet najłatwiej krystalizujące sole miały nieokreśloną temperaturę topnienia. Zgodnie z tym, produkty otrzymane tym sposobem ujawnione w cytowanym opisie patentowym często wykazywały zmieniające się zabarwienie wskazując na zanieczyszczenie i niepewną jakość aktywnego składnika. [0006] Próby wyeliminowania wad wyżej wspomnianego sposobu zostały podjęte przez autorów patentu węgierskiego HU-209,973. W tym sposobie zamiast stosowania soli kwasów tłuszczowych z aminokwasami 1-lizynę, 1-tyrozynę, albo ich pochodne, zmieszano z ω-3-polinienasyconymi kwasami tłuszczowymi, albo ich solami, w stosunku molowym 1:4-4:1. Otrzymaną w ten sposób mieszaninę służącą jako aktywny składnik, przekształcano stosując standardowe procedury wytwarzania leków w farmaceutyczną kompozycję. Takie kompozycje wymienione w opisie wykazywały działanie immunostymulujące, jednak jako wada, nawet dwie najbardziej skuteczne kompozycje (mieszaniny 1-tyrozyna-kwas tłuszczowy i monohydrat 1-lizyny-kwas tłuszczowy) musiały być stabilizowane przeciwutleniaczem. Poza stosowaniem stabilizatorów, jak wykazano w naszych własnych doświadczeniach, mieszaniny wytworzone zgodnie z opisem z 1

3 powyższego patentu, wykazały, że są niestabilne jako komponenty farmaceutycznej kompozycji o wystarczającej trwałości. [0007] Są dane podające, że wirusy HSV wydzielone z klinicznych próbek mogą być inaktywowane w pewnym stopniu przez traktowanie in vitro solą cynku. Stopień inaktywowania zależy od szczepu HSV, stężenia soli cynku oraz czasu traktowania (Max Arens i Sharon Travis: J. of Clinical Microbiology, 38, (2000)). [0008] Selen, poza pełnieniem kluczowej roli w aktywacji enzymu peroksydazy glutationu a przez to w warunkach stresu utleniającego, może, w postaci selenoprotein, oddziaływać na replikację wirusa. Wykazano, że w chronicznie zainfekowanych T-limfocytach dzięki wprowadzeniu selenu in vitro zahamowano replikację wirusa HIV (Hori i in.: AIDS Res. Human Retroviruses 13,: (1997)). Celem niniejszego wynalazku jest wytworzenie farmaceutycznej kompozycji o zwiększonej skuteczności, która byłaby pozbawiona nie tylko wszystkich problemów związanych z technologią w dużej skali, składem i stabilnością nieodłącznie związanymi ze znanymi procedurami, ale także oferowałaby cenne dodatkowe korzyści. [0009] Niniejszy wynalazek opiera się na stwierdzeniu, że powyższe cele można zrealizować jeśli, zamiast wolnych ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych mianowicie EPA oraz DHA zastosuje się ich estry, ponadto że działanie takich estrów zwiększa się w synergistyczny sposób przez dodanie 1-lizyny, albo jej soli, ewentualnie przez dodawanie soli cynku, albo selenu, albo związku selenu. Nieoczekiwanie, otrzymane w ten sposób kombinacje, wykazują w porównaniu ze znanymi kompozycjami niższą toksyczność i większą skuteczność, innymi słowy terapeutyczne wskaźniki kombinacji wytworzonych na bazie wynalazku ujawnionego powyżej są bardziej korzystne niż dla jakiejkolwiek znanej podobnej kompozycji. [0010] Zatem niniejszy wynalazek dotyczy nowej antywirusowej i immunostymulującej farmaceutycznej kompozycji która zawiera, jako aktywny składnik 20-85% masowych estru etylowego albo glicerolowego ω- 3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego, w szczególności 20-70% masowych koncentratu oleju rybnego zawierającego estry kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego oraz kwasu 4,7,10,13,16,19- dokozaheksaenowego, 1-lizynę albo jej chlorowodorek, fumaran, maleinian albo szczawian, korzystnie chlorowodorek, ewentualnie sól cynku, selen albo związek selenu, jak również składnik dodatkowe /pomocnicze/ oraz nośnikowe. [0011] Ilość estru etylowego albo glicerolowego ω-3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego w koncentracie oleju rybnego korzystnie wynosi 30 do 70% masowych, bardziej korzystnie 40 do 60% masowych, najbardziej korzystnie 55 do 60% masowych, przy czym specyficznie dostarcza się 20 do 70% masowych, korzystnie 25 do 45% masowych, bardziej korzystnie 30 do 40% masowych, najbardziej korzystnie 31 do 35% masowych kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego oraz 20 do 70% masowych, korzystnie 25 do 45% masowych, bardziej korzystnie 30 do 40% masowych, najbardziej korzystnie 31 do 35% masowych kwasu 4,7,10,13,16,19-dokozaheksaenowego. Ilość wyżej wymienionej soli lizyny mieści się w zakresie jednej czwartej do równo molowej ilości wyżej wymienionego estru ω-3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego do czterokrotnej jego ilości. [0012] Stężenie soli cynku wynosi 1 do 10% masowych, korzystnie 2 do 6% masowych. [0013] W innym wykonaniu niniejszego wynalazku, kompozycja zawiera jako sól cynku glukonian cynku albo mleczan cynku, jako związek selenu jeden, albo więcej, naturalnych związków selenu zawartych w naturalnych drożdżach. [0014] Wyżej wymienione estry ω-3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego stosowane jako składniki 2

4 kompozycji przedstawionej w niniejszym wynalazku można głównie znaleźć w olejach otrzymanych z ryb z Morza Północnego. Z takich olejów rybnych można wytworzyć znanymi procedurami (patrz, na przykład publikacja J. Am. Chem. Soc, 59, 117 (1982)) koncentraty oleju rybnego zawierające 50-65% masowych estrów ω-3-polinienasycnonych kwasów tłuszczowych z których 20-70% to estry kwasu 5,8,11,14,17- eikozapentaenowego oraz kwasu 4,7,10,13,16,19-dokozaheksaenowego. [0015] Innym niezbędnych składnikiem kompozycji opisanej w niniejszym wynalazku jest 1-lizyna, albo dowolna wyżej wymieniona sól 1-lizyny, korzystnie z kwasem octowym, albo kwasem solnym (patrz, na przykład publikacja US Pharmacopoeia 27-NF 22 Supplement 2.) [0016] Trzecim składnikiem kompozycji jest sól cynku, korzystnie glukonian cynku, albo mleczan cynku (patrz, na przykład publikacja US Pharmacopoeia 27-NF 22 Supplement 2). [0017] Dalszym, ale ewentualnym komponentem kompozycji opisanej w niniejszym wynalazku jest związek selenu, którym może być związek selenu zawarty w naturalnych drożdżach, albo dowolny inny związek selenu. Stężenie selenu wynosi 0,05 do 0,30% masowych, korzystnie 0,1 do 0,2% masowych, ale nie więcej niż 75 µg. [0018] Wyżej podane aktywne składniki można formułować stosując metody ogólnie znane do wytwarzania farmaceutycznych kompozycji dla otrzymania kompozycji sformułowanej znanymi per se, korzystnie jako zamknięte w żelatynowych kapsułkach. Jako składniki dodatkowe i/albo materiały pomocnicze, można korzystnie stosować żel krzemionkowy, glicerol, barwniki i inne substancje. [0019] Antywirusowe i immunostymulujące działanie kompozycji opisanej w niniejszy wynalazku jest zweryfikowane jak przedstawiono poniżej: A. Opis testowanych substancji i metod testowania I. Kody dla i skład testowanych substancji [0020] S1N-E1: Sól ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych z monohydratem 1-lizyny (patrz: Przykład 1 Węgierskiego patentu 209,973). SIN-E2: ester ω-3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego + 1-lizyna.HCl (patrz: Przykład 3 niniejszego zgłoszenia). SIN-E3: ester kwasu ω-3-polinienasyconego + 1-lizyna.HCl + glukonian wapnia (patrz: Przykład 1 niniejszego zgłoszenia). II. Testowe metody 1. Test toksyczności na hodowli pierwotnej komórek nerki małpy /primary monkey kidney cell culture/ [0021] Komórki hodowli pierwotnej nerki małpy traktowano różnymi rozcieńczeniami (1:3, 1:10, 1:30, 1:100) testowanych substancji SIN-E1, SIN-E2 oraz SIN-E3. Po inkubowaniu przez 3 godziny badano ewentualne toksyczne działanie substancji na tkance (patrz publikacja Arens, M. i Travis, S.: J. of Clinical Microbiology, 38, (2000)). 2. Badania antywirusowego działania testowanych substancji [0022] Badania zakażenia hodowli wtórnych komórek nerki małpy wirusem wstępnie traktowanych testowanymi substancjami SIN-E1, SIN-E2 oraz SIN-E3. [0023] Wirusy w różnych rozcieńczeniach inkubowano przez 1 godzinę z różnymi rozcieńczeniami testowanych substancji w taki sposób, że wymieszano je w stosunku 1:1, odpowiadającym rozcieńczeniu 0.5% (patrz Tabela 1), a następnie zakażano wtórną hodowlę komórek nerki małpy wcześniej obrobionym wirusem. Siódmego dnia określano działanie cytopatogeniczne wirusa Herpes simplex (HSV) na komórkach 3

5 nerki małpy przez badanie mikroskopowe dla obu nietraktowanych wirusem i tych wstępnie traktowanych testowanymi substancjami SIN-E1, SIN-E2 oraz SIN-E3. Celem tego testu było określenie kierunku antywirusowego działania testowanych substancji na komórkach (patrz publikacja Lawetz, C., Liuzzi, M.: Antiviral Res. 39 (1), (1998)). 3. Badanie wpływu surowicznych białek na działanie inaktywujące wirusa testowanych substancji SIN-E1, SIN-E2 oraz SIN-E3. [0024] Dla rozcieńczeń wykazujących całkowitą inaktywację w doświadczeniach opisanych w punkcie 2, jak również z następnym wyższym rozcieńczeniem powtórzono doświadczenia z hodowlanym medium zawierającym 10% surowicy cielęcej i ze ślepą próbką bez surowicy, a w siódmym dniu doświadczenia prowadzono ocenę jak w punkcie Ocena [0025] Komórki obserwowano pod inwersyjnym mikroskopem, w przypadku badania toksyczności po 3 godzinach inkubowania, i po 7 dniach w przypadku badania działania antywirusowego. Zapisywano zmiany w morfologii, rozwój jam, rozdzielanie, jak również uszkodzenie ścianek komórkowych. B. Badania skuteczności 1. badanie toksyczności testowanych substancji w hodowlach tkankowych [0026] Tkanka: wtórna hodowla komórek nerki małpy, liczba komórek wynosi 5x10 6. Ciągłe rozcieńczenia w skali 2 zostały przygotowane ze wszystkich trzech testowanych substancji, stosowano je na tkankę, a następnie inkubowano w temperaturze 37C przez 3 godziny, Ślepa próbka zawierała tylko tkankę, po 3 godzinach materiał odciągano, dodawano 100 µl medium hodowlanego Parker'a zawierającego 2% surowicy cielęcej do całej płytki, i zapisywano morfologiczne zmiany pod mikroskopem, w oparciu o badanie po 3 godzinach substancja SIN-E1 wykazała, że jest nie-toksyczna w rozcieńczeniu 1:32768, podczas gdy substancje SIN-E2 oraz S1N-E3 były nie-toksyczne w rozcieńczeniu 1:2048, następnego dnia powtarzano badanie mikroskopowe i otrzymano takie same wyniki, poniżej SIN-E1 w rozcieńczeniu 1:32768 jest oznaczane jako "stężony" a SIN-E2 oraz SIN-E3 w rozcieńczeniu 1:2048. (zapisane wyniki są przedstawione w Tabeli 1.) Tabela 1 Porównanie toksyczności substancji SIN-E1, SIN-E2 oraz Sin-E3 1:128 1:256 1:512 1:1024 1:2048 1:4096 1:8192 1: : : : SIN SIN SIN SIN SIN SIN SIN SIN SIN Ujemna

6 kontrolna Ujemna kontrolna Symbole stosowane w Tabeli 1: + = dawka cytotoksyczna - = dawka jeszcze nie cytotoksyczna Ocena testów: [0027] Przeprowadzone badania toksyczności wyraźnie pokazały, że substancja SIN-E1 była bardziej toksyczna o co najmniej jeden rząd wielkości niż substancje SIN-E2 oraz SIN-E3. Oczywiste jest, że toksyczność zanika dla testowanej substancji SIN-1 w końcowym rozcieńczeniu 1:32768 standardowego roztworu, podczas gdy dla substancji SIN-E2 oraz SIN-E3 zanika dla końcowego rozcieńczenia już 1:2048. W poniższych badaniach powyższe końcowe rozcieńczenia wybrano jako bazowe. 2. Badanie antywirusowego działania testowanych substancji [0028] Tkanka: wtórna hodowla komórek nerki małpy, liczba komórek: 5x10 6. Przygotowano rozcieńczenia wirusa i określano jego zakaźne miano. W Tabeli 2 podano ujemny logarytm /0.1 ml zakaźnego miana. Przygotowano rozcieńczenia 1:32768 z testowanej substancji SIN-E1, i przygotowano rozcieńczenia 1:2048 testowanych substancji SIN-E2 oraz SIN-E3, odpowiednio. Te rozcieńczenia oznaczano jako "stężone". Przeprowadzano testy z rozcieńczeniami 1:3, 1:10, 1:30 oraz 1:100 dla "stężonych" rozcieńczeń. Rozcieńczenia wirusa i testowanej substancji zmieszano w stosunku 1:1. Następnie inkubowano przez 1 godzinę. Potem odciągano hodowlane medium znad tkanki i podawano 100 µl porcje do odpowiednich rzędów rozcieńczeń mieszaniny wirusa i testowanej substancji. Następnie inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37 C. Substancje odciągano i dodawano 100 µl hodowlanego medium Parker'a zawierającego 2% surowicy cielęcej. Próbkę przechowywano w temperaturze 37 C i oceniano mikroskopowo po 7 dniach, i porównywano z próbką nietraktowanego wirusa. Wyniki są przedstawione w Tabeli 2. Tabela 2 Testowanie antywirusowej aktywności Rozcieńczenie testowanych 1:3 1:10 1:30 1:100 Kontrolna substancji, mg/ml 1,5 0,5 0,15 0,05 z wirusem SIN-E1 0* 0* p<0,01 4,0 5,15 5,15 SIN-E2 0* 0* p<0,01 3,2 4,8 5,15 0* 5

7 Testowanie antywirusowej aktywności SIN-E3 0* 0* p<0,01 p<0,01 w stosunku do kontrolnej 3,5 5,15 p<0,05 w stosunku do SIN-E2 Symbole w Tabeli 2: 0* = całkowite zahamowanie Ocena wyników [0029] Przeprowadzone badania wykazały, że wszystkie trzy testowane substancje całkowicie zahamowały proliferację wirusa w rozcieńczeniach 1:3 (1.5 mg/ml) oraz 1:10 (0.5 mg/ml). Częściowa inaktywacja w ciągu 1 godziny mogłaby być obserwowana nawet przy rozcieńczeniach 1:30 (0.15 mg/ml) dla substancji SIN-E1 oraz SIN-E2, podczas gdy dla SIN-E3 całkowite zahamowanie zaobserwowano nawet w tym rozcieńczeniu, co było znaczące w porównaniu do obu SIN-E2 oraz kontrolnej. Dla SIN-E3 częściową inaktywację stwierdzono przy rozcieńczeniu 1:100 (0.05 mg/ml), ale ten wynik jest statystycznie nieznaczący. 3. Badania wpływu surowiczych białek na inaktywujące wirus działanie substancji SIN-E1, SIN-E2, oraz SINE-3. [0030] Przeprowadzono doświadczenia jak opisane w punkcie 2. Tabela 3 Antywirusowa aktywność testowanych substancji w obecności surowicy cielęcej Rozcieńczenie testowanych 1:3 1:10 1:30 1:100 kontrolna substancji, mg/ml 1,5 0,5 0,15 0,05 z wirusem SIN-E1 0* 0* p<0,01 4,0 5,15 5,15 SIN-E2 0* 0* p<0,01 3,2 4,8 5,15 0* SIN-E3 0* 0* p<0,01 p<0,0 1 w stosunku do kontrolnej 3,5 5,15 p<0,05 w stosunku do SIN-E2 Symbole w Tabeli 3: 0* = całkowite zahamowanie Tabela 4 Antywirusowa aktywność testowanych substancji w medium pozbawionym surowicy cielęcej Rozcieńczenie testowanych 1:3 1:10 1:30 1:100 Kontrolna substancji, mg/ml z wirusem SIN-E1 0* 0* p< SIN-E2 0* 0* p< * SIN-E3 0* 0* p<0.01 p<0.01 w stosunku do kontrolnej

8 Antywirusowa aktywność testowanych substancji w medium pozbawionym surowicy cielęcej p<0.05 w stosunku do SIN-E2 Symbole w Tabeli 4: 0* = całkowite zahamowanie Ocena testów [0031] Na aktywność inaktywowania testowanych związków w kierunku wirusa opryszczki nie wpływa obecność białka, ponieważ manifestuje się ona zarówno w medium pozbawionym surowicy (patrz Tabela 4) jak i w medium zawierającym 10% płodowej surowicy cielęcej (patrz Tabela 3). [0032] Podsumowując, można stwierdzić, że zgodnie z badaniami wpływu surowiczych białek, kompozycje objęte niniejszym wynalazkiem wykazują znaczącą dodatkową aktywność w porównaniu do wcześniejszych danych literaturowych (patrz, na przykład patent USA o numerze US-4,513,008, twórca, E. Recivi i in.), zastrzegający, że zakaźność wirusów z kapsydami była upośledzona, albo całkowicie wyeliminowana, przez różne kompozycje nienasyconego kwasu tłuszczowego z powodu dezintegracji powierzchniowych struktur wirusa. Zgodnie z innymi danymi literaturowymi (patrz, na przykład publikacja Vollenbroich, D. i in.: Biologicals. Sept.; 25 (3): (1997)) aktywność inaktywowania wirusów stosowanych nienasyconych kwasów tłuszczowych była zniesiona przez minimalną ilość surowiczych białek, i dlatego były one nieużyteczne w leczeniu. Przeciwnie do tego, w naszych własnych doświadczeniach z tkankami pierwotnej hodowli komórek nerki małpy działanie inaktywujące wirusa opryszczki naszych kompozycji nie było hamowane nawet przez obecność 10% płodowej surowicy cielęcej. [0033] Korzyści nowych farmaceutycznych kompozycji zastrzeganych w niniejszym zgłoszeniu można podsumować następująco: Przeciwnie do stanu techniki, niniejszy wynalazek pozwala na wytwarzanie trwałej farmaceutycznej kompozycji o długim okresie przydatności mającej taką korzystną cechę, że skutecznie zapobiega się utlenianiu ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych podczas przechowywania, Stosowanie sposobu opisanego w niniejszym zgłoszeniu dostarcza prostego i ekonomicznego sposobu wytwarzania dodatkowych kombinacji zawierających inne, oraz/albo nowe, środki antywirusowe, Udowodniono, że toksyczność estrów ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych, jak również kompozycji je zawierających, jest mniejsza niż dla macierzystych ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych, albo zawierających je kompozycji, Kombinacje wytworzone zgodnie z niniejszym wynalazkiem umożliwiają biologicznie bardziej wszechstronne i bardziej elastyczne antywirusowe leczenie, które dostarcza, w tym samym czasie, bardziej skutecznego hamowania replikacji wirusa, ponadto, Procedura opisana w niniejszym zgłoszeniu eliminuje technologiczne problemy związane z wytwarzaniem soli ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych z zasadowymi komponentami, oraz koszty powodowane przez wspomniane trudności. [0034] Kompozycje wytworzone zgodnie z niniejszym wynalazkiem są zilustrowane w poniższych przykładach: Przykład 1 Wytwarzanie w kapsułkowanej postaci (zakodowany jako SIN-E3 w Tabelach) 7

9 [0035] Mieszaninę estrów ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych pochodzących z wzbogaconego oleju z ryb morskich (362 g), zawierającą 35% masowych estru etylowego kwasu 5,8,11,14,17- eikozapentaenowego (EPA ester etylowy), oraz 25% masowych estru etylowego kwasu 4,7,10,13,16,19- dokozaheksaenowego (DHA ester etylowy), zmieszano w pokojowej temperaturze z chlorowodorkiem 1- lizyny (203 g) i glukonianem cynku (30 g). W ten sposób otrzymano jednorodną mieszaninę, którą następnie uzupełniono koloidalnym żelem krzemionkowym (25 g) i lecytyną (1 g). Po dalszej homogenizacji substancją napełniano, stosując proces znany jako taki, 1000 miękkich żelatynowych kapsułek. Przykład 2 Wytwarzanie w kapsułkowanej postaci [0036] Powtórzono dokładnie procedurę opisaną w Przykładzie 1 z taką różnicą, że kompozycja zawierała mieszaninę estrów etylowych ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych (362 g) składającą się z 32.8% masowych estru etylowego kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego (EPA ester etylowy), oraz 22.2% masowych estru etylowego kwasu 4,7,10,13,16,19-dokozaheksaenowego (DHA ester etylowy), i aktywne składniki oraz substancje dodatkowe jak wymienione w Przykładzie 1 ale także uzupełnione selenem wprowadzonym w naturalnych drożdżach (1 g). Przykład 3 Wytwarzanie w postaci kapsułkowanej (zakodowany jako SIN-E2 w Tabelach) [0037] Mieszaninę estrów ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych pochodzących z wzbogaconego oleju z ryb morskich (362 g), zawierającą 35% masowych estru etylowego kwasu 5,8,11,14,17- eikozapentaenowego (EPA ester etylowy), oraz 25% masowych estru etylowego kwasu 4,7,10,13,16,19- dokozaheksaenowego (DHA ester etylowy) zmieszano w pokojowej temperaturze z chlorowodorkiem 1- lizyny (203 g). W ten sposób otrzymano jednorodną mieszaninę, którą następnie uzupełniono koloidalnym żelem krzemionkowym (25 g) i lecytyną (1 g). Po dalszym homogenizowaniu substancją napełniano stosując proces znany jako taki miękkich żelatynowych kapsułek. Przykład 4 Wytwarzanie w kapsułkowanej postaci [0038] Powtórzono dokładnie procedurę opisaną w Przykładzie 1, z wyjątkiem tego, że zamiast mieszaniny estrów etylowych ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych, stosowano mieszaninę triglicerydowego estru kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego (EPA ester triglicerydowy) oraz estru triglicerydowego kwasu 4,7,10,13,16,19-dokozaheksaenowego (DHA ester triglicerydowy). Zastrzeżenia patentowe: 1. Antywirusowa i immunostymulująca farmaceutyczna kompozycja, znamienna tym, że zawiera jako aktywne składniki 20-85% masowych etylowych lub glicerolowych estrów ω-3-polinienasyconych kwasów tłuszczowych, w koncentracie oleju z ryb morskich zawierającym 20-70% masowych estru kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego i estru kwasu 4,7,10,13,16,19-dokosaheksaenowego, ponadto 1-lizynę, albo jej chlorowodorek, fumaran, maleinian albo szczawian, korzystnie chlorowodorek, ewentualnie 1 do 10% masowych, korzystnie 2 do 6% masowych, soli cynku, ewentualnie 0,05 do 0,30% masowych, korzystnie 0,1 do 0,2% masowych, ale nie więcej niż 75 µg, selenu, albo związku selenu, jak również pewne środki pomocnicze albo nośnikowe. 2. Farmaceutyczna kompozycja według zastrzeżenia 1, znamienna tym, że zawiera jako aktywny składnik korzystnie 30 do 70% masowych, bardziej korzystnie 40 do 60% masowych, najbardziej 8

10 korzystnie 55 do 60% masowych, etylowego albo glicerolowego estru ω-3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego w koncentracie oleju rybnego, przy czym występuje 20 do 70% masowych, korzystnie 25 do 45% masowych, bardziej korzystnie 30 do 40% masowych, bardziej korzystnie 31 do 35% masowych, kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego i 20 do 70% masowych, korzystnie 25 do 45% masowych, bardziej korzystnie 30 do 40% masowych, najbardziej korzystnie 31 do 35% masowych, kwasu 4,7,10,13,16,19-dokozaheksanowego. 3. Produkt według zastrzeżenia 1 do 2, znamienny tym, że zawiera jako sól cynku glukonian cynku, albo mleczan cynku. 4. Produkt według zastrzeżenia 1 do 3, znamienny tym, że zawiera jako związek selenu naturalny związek selenu, albo związki selenu zawarte w naturalnych drożdżach. 5. Farmaceutyczna kompozycja według zastrzeżenia 1 do 4 do stosowania jako lek. 6. Zastosowanie 20-85% masowych estru etylowego albo glicerolowego ω-3-polinienasyconego kwasu tłuszczowego, w koncentracie oleju z ryb morskich zawierającym 20-70% masowych estru kwasu 5,8,11,14,17-eikozapentaenowego oraz estru kwasu 4,7,10,13,16,19-dokozaheksaenowego, ponadto 1- lizynę, albo jej chlorowodorek, fumaran, maleinian albo szczawian, korzystnie jej chlorowodorek, ewentualnie 1 do 10% masowych, korzystnie 2 do 6% masowych, soli cynku, oraz 0,05 do 0,30% masowych, korzystnie 0,1 do 0,2% masowych, ale nie więcej niż 75 µg, selenu, albo związku selenu, do wytwarzania farmaceutycznej kompozycji do leczenia infekcji wirusowych. Pełnomocnik: 9