ANNALES. Piotr Janas, Eugenia Podgórska, Stanisław Mleko, Jacek Pielecki
|
|
- Halina Dąbrowska
- 8 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 ANNALES U N I V E R S I T A T I S MARIAE LUBLIN VOL. LIX, Nr * CURIE- S K Ł O D O W S K A POLONIA SECTIO E 200 Katedra Technologii Przemysłu Rolno-Spożywczego i Przechowalnictwa, Akademia Rolnicza w Lublinie, ul. Skromna Lublin, Poland Piotr Janas, Eugenia Podgórska, Stanisław Mleko, Jacek Pielecki Biosynteza enzymów proteolitycznych i ich wpływ na aktywność celulaz Trichoderma reesei Biosynthesis of proteolytic enzymes and its effect on the activity of cellulases of Trichoderma reesei ABSTRACT: Cultivation of three strains of Trichoderma reesei was performed in the presence of cellulose and casein. Maximum enzymatic activities of cellulases were estimated during the cultivation of all strains in the presence of cellulose as the source of carbon. The highest secretion of proteases was observed during the cultivation of strains with addition of casein to the medium. The proteases present in the culture fluids of T. reesei strongly affected cellulases activities. Current knowledge about the correlation between proteases and other enzymes is presented in the paper. This work is an introduction for future studies on the correlation between proteases and other enzymes in culture filtrates of Trichoderma reesei. KEY WORDS: Trichoderma reesei, cellulases, proteases, low-protease strains Jednymi z najlepszych producentów enzymów o znaczeniu przemysłowym, hydrolizujących ligninocelulozę są grzyby z rodzaju Trichoderma, a w szczególności takie gatunki, jak T. reesei QM 6a i jego mutanty, T. harzianum i T. viride. Celulazy nie są jednak jedynymi enzymami obecnymi w filtratach pohodowlanych tych gatunków. Duże znaczenie w hydrolizie biomasy roślinnej odgrywają ksylanazy, arabanazy i pektynazy, które są często syntetyzowane obok celulaz. Ważną rolę pełnią także enzymy lityczne, tj. proteazy, chitynazy i beta-,-glukanazy, oddziałujące na ściany komórkowe grzybów i drożdży. Ich obecność w filtratach pohodowlanych może wpływać niekorzystnie na wzrost i zdolności produkcyjne komórek. Jednak enzymy te okazują się niezwykle poannales UMCS, Sec. E, 200, 59,, 6 69.
2 62 mocne w otrzymywaniu enzymów wewnątrzkomórkowych, protoplastów, badaniach nad strukturą ściany komórkowej, degradacji glonów, klarowaniu piwa i wina. Są one także doskonałym narzędziem do otrzymywania protoplastów, wykorzystywanych następnie do transformacji, a także inżynierii genetycznej. W ostatnich latach uwaga badaczy koncentruje się na proteazach, które powodują posekrecyjne modyfikacje celulaz i wpływają na ich aktywności i stabilność podczas hodowli grzybów. Są one wykorzystywane do wydzielania składnika kompleksu celulolitycznego beta glukozydazy, związanego ze ścianą komórkową grzyba. Enzymy te mogą również uczestniczyć w degradacji białek heterologicznych. Nie ma jednoznacznej opinii na temat wpływu proteaz zawartych w filtratach pohodowlanych grzybów strzępkowych na potranslacyjne modyfikacje celulaz i innych enzymów zewnątrzkomórkowych. Według hipotezy Dunne [992] proteazy mogą wpływać na enzymy celulolityczne w trojaki sposób: kontrolować proces sekrecji enzymów zewnątrzkomórkowych, oddziaływać na ich aktywność i stabilność, brać udział w wytwarzaniu w wyniku posekrecyjnych modyfikacji pochodnych form celulaz. Występowanie lub brak potranslacyjnych modyfikacji celulaz może być związane z warunkami hodowli oraz właściwościami proteaz Trichoderma reesei, należącymi do podklasy proteaz aspartylowych przejawiających maksymalną aktywość przy ph poniżej. Potwierdzają to wyniki badań nad modyfikacjami proteolitycznymi celulaz podczas hodowli okresowych Trichoderma reesei QM 9, prowadzonych przez Hagspiel i in. [989]. Badacze ci przy użyciu przeciwciał monoklonalnych stwierdzili obecność w filtratach z końcowych okresów hodowli (niskie ph) grzyba obecność częściowo zmodyfikowanych w wyniku proteolizy pochodnych form celobiohydrolazy I i II. Podobnie odkrycia Dunne [982], który badał relacje pomiędzy zewnątrzkmórkowymi proteazami a zespołem celulaz Trichoderma reesei, sugerują, że kwaśne proteazy mogą być odpowiedzialne za powstawanie pochodnych form celulaz, ale tylko wtedy gdy ph hodowli jest niższe od. Pogląd ten kwestionują Labudova i Farkas [98] oraz i Kamel i Kubicek [985], którzy stwierdzili obecność licznych pochodnych form celulaz w bardzo wczesnych stadiach hodowli przy wyższych ph i braku proteolitycznej aktywności. Jeszcze inną hipotezę na temat wpływu proteaz na enzymy celulolityczne przedstawili Lovrien i in. [985]. Oznaczali oni aktywności proteolityczne i celulolityczne w dostępnych na rynku preparatach enzymatycznych. Na podstawie przeprowadzonych badań zasugerowali, że proteazy powodują aktywację enzymów celulolitycznych. Mogą one działać jak modulatory potranslacyjne, przekształcające nieaktywne zymogeny w aktywne enzymy. Trudności w prowadzeniu badań nad korelacjami między celulazami i proteazami Trichoderma reesei wynikają z niskich stężeń tych drugich w filtratach pohodowlanych grzyba oraz wzajemnego silnego połączenia tych dwóch grup enzymów.
3 6 Celem pracy było porównanie aktywności enzymów proteolitycznych i celulolitycznych, wydzielanych do podłoża podczas hodowli szczepów Trich oderma reesei w obecności celulozy i kazeiny. Zbadano również wpływ proteaz na aktywność celulaz tego samego pochodzenia w zależności od stosunku objętości filtratów pohodowlanych i czasu inkubacji. METODY W badaniach wykorzystano mutanty Trichoderma reesei, pochodzące z różnych źródeł. mutanta MCG 77 wyselekcjonowanego po mutagenezie promieniami UV T. reesei QM 9 w Katedrze Technologii Przemysłu Rolno-Spożywczego i Przechowalnictwa Akademii Rolniczej w Lublinie, mutanty o symbolach:vtt-d i VTT-D-792 pochodzące z VTT-Collection of Industrial Microorganism, Technical Research Centre of Finland. Mutanty przechowywano na skosach brzeczkowych w temperaturze 2 C, okresowo je przeszczepiając. Hodowle mutantów prowadzono na zmodyfikowanym podłożu Mandels i Weber [969] o składzie (w g/dm ): dla produkcji enzymów proteolitycznych KH2PO (2,0), MgSO (0,), (NH )2 SO (,), CaCl2 (0,), Tween 80 (,0), ekstrakt drożdżowy (,0), sacharoza (9,0), kazeina (,0) roztwór mikroelementów 0,5 cm /dm zawierający: FeSO 7H2 O 5 g/dm MnSO H2 O,96 g/dm, ZnCl2,66 g/dm, CoCl2 2 g/dm, dla produkcji enzymów celulolitycznych: wszystkie składniki pożywki jak wyżej z wyjątkiem sacharozy i kazeiny zamiast których dodawano celulozę (0). Przygotowanie inokulum do hodowli grzybów. Hodowle poszczególnych mutantów Trichoderma reesei prowadzono w kolbach Erlenmayera o pojemności 500 cm, zawierających 00 cm pożywki wg Mandels i Weber [969]. ph pożywki ustalano po sterylizacji na poziomie 5. Jako źródło węgla stosowano laktozę w stężeniu 0,5%. Kolby zamykano korkami, będącymi jednocześnie filtrami mikrobiologicznymi, i sterylizowano w autoklawie w temperaturze 0 C przez 0 minut. Po ochłodzeniu kolby szczepiono kawałkami o po2 wierzchni cm ze skosu brzeczkowego z odpowiednim mutantem Trichoderma reesei. Umieszczano je następnie w pokoju termostatowym na wytrząsarce rotacyjnej (220 obr/min) i inkubowano w temperaturze 27 C aż do całkowitego wykorzystania źródła węgla (2-6 dób). Hodowle okresowe szczepów w kolbach Erlenmayera. Kolby Er lenmayera o pojemności 500 cm napełniano 00 cm pożywki wg Mandels i Weber [969] o ph 5 opisanej powyżej z odpowiednim źródłem węgla i azotu i sterylizowano w autoklawie w 0 C przez 0 minut. Kolby szczepiono cm
4 6 wcześniej przygotowanego inokulum z grzybnią odpowiedniego mutanta. Hodowle prowadzono na wytrząsarce rotacyjnej o częstości obrotów 250 obr./min w temperaturze 27 przez dób. Aby uzyskać klarowną ciecz pohodowlaną, próbki wirowano przez 0 minut przy 000 g. W filtratach oznaczano aktywności enzymatyczne proteaz i celulaz. Oznaczanie aktywności proteolitycznej odbyło się w następujący sposób: do probówek wprowadzano po 2,5 cm roztworu kazeinianu sodu ( g w dm bu foru Tris-HCL o ph 5,5). Następnie dodawano 0,5 cm filtratu pohodowlanego i in kubowano przez godzinę w temperaturze 50 C. Po upływie tego czasu do probówek wprowadzano cm 7,5% kwasu trójchlorooctowego. Po odwirowa niu białka pobierano 2 cm cieczy i dodawano cm mol Na2 CO i cm trzykrotnie rozcieńczonego odczynnika fenolowego Folina-Ciocalteu. Po 0 minutach odczytywano ekstynkcję na spektrofotometrze Spekol przy długości fali 720 nm wobec próby ślepej. Za jednostkę aktywności przyjęto taką ilość enzymu, która w opisywanych warunkach reakcji powodowała wzrost o 0, gęstości optycznej. Ogólną aktywność celulolityczną (FPU) cieczy pohodowlanych oznaczano w następujący sposób: 50 mg ( 6 cm) paski bibuły filtracyjnej Whatman No. umieszczano w probówkach i dodawano cm 0, mol buforu octanowego o ph =,8 i 0,5 cm odpowiednio rozcieńczonego filtratu pohodowlanego. Mieszaninę inkubowano przez godzinę w temperaturze 50 C. Ilość uwolnionych cukrów redukujących oznaczano metodą kolorymetryczną przy użyciu odczynnika za wierającego kwas,5-dwunitrosalicylowy. Aktywność celulaz w filtratach pohodo wlanych wyrażano w jednostkach FPU (Filtre Paper Unit) wg IUPAC [Ghose 987]. Za jednostkę FPU przyjęto ilość enzymu, zawartego w cm płynu pohodowlanego, która uwalnia mmol (80 mg) glukozy w ciągu minuty w warunkach reakcji. W celu zbadania wpływu proteaz na aktywność enzymów celulolitycznych dodawano do cieczy pohodowlanej zawierającej celulazy o określonej aktywności ciecz pohodowlaną z enzymami proteolitycznymi w różnych proporcjach :, :,5, :. Inkubację tak przygotowanych mieszanin prowadzono w temperaturze 50 C. przez godzinę, i 2 godziny. Następnie oznaczano aktywność celulaz według metody opisanej wcześniej. WYNIKI Zmiany aktywności enzymów proteolitycznych oznaczonych podczas hodowli trzech szczepów Trichoderma reesei w obecności celulozy i kazeiny przedstawiono w tabelach i 2. Maksymalne aktywności proteolityczne stwierdzono w filtratach pochodzących z szóstej doby hodowli T. reesei MCG 77 i VTT-D Filtrat szczepu VTT-D charakteryzował się maksymalną
5 65 aktywnością proteolityczną w siódmej dobie hodowli (6,6 jednostki). W następnych dobach aktywności proteaz wszystkich trzech szczepów malały, osiągając najniższe wartości w ostatnich dniach hodowli grzybów. W następnym eksperymencie zastosowano podłoże z dodatkiem celulozy. Aktywność proteolityczna badanych szczepów wzrastała do szóstej doby hodowli, osiągając maksymalne wartości, które wynosiły dla T. reesei MCG 77,9 jednostki, dla T. reesei VTT-D-7927,68 jednostki i dla T. reesei VTT-D-78085,2 jednostki. Wartości te były około,5 razy niższe od uzyskanych podczas hodowli grzybów na podłożu z dodatkiem kazeiny. W następnych dobach aktywność proteaz znacznie spadła, osiągając w jedenastej dobie wartości od 0, do 0,9 jednostki. W kolejnym doświadczeniu zbadano wpływ czasu hodowli w obecności kazeiny i celulozy na produkcję celulaz przez szczepy T. reesei (tab., ). Maksymalne aktywności celulolityczne, oznaczone po hodowlach grzybów na podłożach zawierających kazeinę, były około 6-krotnie niższe od stwierdzonych w cieczach po hodowlach z dodatkiem celulozy. Najwyższe aktywności podczas hodowli w obecności tego drugiego substratu oznaczono w siódmej dobie dla T reesei MCG 77 i VTT-D-7927 i w szóstej dobie dla VTT-D Tabela. Aktywności enzymów proteolitycznych wydzielanych podczas hodowli okresowych szczepów Trichoderma reesei do podłoża z kazeiną Table. Activities of proteolytic enzymes secreted during batch cultivation of Trichoderma reesei strains to the medium with casein Szczep Trichoderma reesei Strain of Trich oderma reesei MCG 77 VTT-D-7927 VTT-D Aktywności proteolityczne filtratów po dobie hodowli (U) Proteolytic activities of culture filtrates after the day of cultivation (U) ,02 0,92 0,75 2, 2,02,02,7 2,9 2,,8,9 2,67 5,7 5,2 2,8 6,9 7,6 5,07 6,05 6,9 6,6 5, 6,8 5,75,9 5,5 5,2,,92,52 2,2 2,,07 Tabela 2. Aktywności enzymów proteolitycznych wydzielanych podczas hodowli okresowych szczepów Trichoderma reesei do podłoża z celulozą Table 2. Activities of proteolytic enzymes secreted during batch cultivation of Trichoderma reesei strains to the medium with cellulose Szczep Trichoderma ree sei Strain of Tricho derma reesei MCG 77 VTT-D-7927 VTT-D Aktywności proteolityczne filtratów po dobie hodowli (U) Proteolytic activities of culture filtrates after the day of cultivation (U) ,2 0,25 0,25 0,6 0,5 0,52 0,69 0,75 0,7 0,92 0,97 0,9,0,9 0,97,9,68,2 0,9,5 0, ,6 0,505 0,55 0,96 0,69 0,5 0,6 0,52 0,57 0,9 0, 0,9
6 66 Tabela. Niespecyficzne aktywności celulolityczne (FPU) enzymów wydzielanych podczas hodowli szczepów Trichoderma r eesei do podłoża z kazeiną Table. Nonspecific cellulolytic Activities of enzymes secreted during batch cultivation of Trichoderma reesei strains to the medium with casein Szczep Trichoderma reesei Strain of Trich oderma reesei MCG 77 VTT-D-7927 VTT-D Niespecyficzne aktywności celulolityczne filtratów po dobie hodowli FPU/cm Nonspecific cellulolytic activities of culture filtrates after the day of cultivation FPU/cm ,0 0,06 0,0 0,2 0,75 0,27 0,2 0,098 0,07 0,069 0,057 0,07 0,067 0, 0,9 0,8 0,27 0,8 0,2 0, 0,092 0,09 0,05 0,085 0,5 0,67 0,22 0,0 0,227 0,27 0,7 0,09 0,056 Tabela. Niespecyficzne aktywności celulolityczne (FPU) enzymów wydzielanych podczas hodowli szczepów Trichoderma reesei do podłoża z celulozą Table. Nonspecific cellulolytic activities of enzymes secreted during batch cultivation of Trichoderma reesei strains to the medium with cellulose Szczep Trichoderma reesei Strain of Tricho derma reesei MCG 77 VTT-D-7927 VTT-D Niespecyficzne aktywności celulolityczne filtratów po dobie hodowli FPU/cm Nonspecific cellulolytic activities of culture filtrates after the day of cultivation FPU/cm ,2 0,5 0,69 0,9,2,,5,5,07 0,88 0,22 0,5 0,86,02,5,67,82,6,7 0,05 0,2 0,5 0,75 0,99,29,05,22,2 0,68 0,9 0,65 0,7 0,7 W celu zbadania wpływu proteaz na aktywność celulaz przeprowadzono doświadczenia, do których wybrano ciecze pohodowlane o najwyższych aktywnościach proteolitycznych i celulolitycznych. W przypadku T. reesei MCG 77 były to ciecze z siódmej doby hodowli w obecności celulozy (maksymalna aktywność celulolityczna) i szóstej doby hodowli w obecności kazeiny (maksymalna aktywność proteolityczna). Podobnie w przypadku T. reesei VTT-D-7927 filtraty pochodziły z szóstej doby hodowli w obecności kazeiny i siódmej doby hodowli w obecności celulozy. W przypadku szczepu VTT-D filtraty pochodziły z sześciu dób hodowli w obecności kazeiny i celulozy. Na filtraty uzyskane po hodowlach w obecności celulozy o najwyższej aktywności celulolitycznej oddziaływano filtratami wykazującymi maksymalne aktywności proteolityczne. Stosowano następujące proporcje filtratów pohodowlanych z celulazami i proteazami: :, :,5, :. Inkubację prowadzono przez godzinę, i 2 godziny. Następnie oznaczano aktywność celulolityczną w badanych filtratach. Wyniki przedstawiono w tabeli 5. Analizując wyniki, stwierdzono, że dodanie cieczy pohodowlanych zawierających proteazy o najwyższych aktywnościach do cieczy
7 67 o maksymalnych aktywnościach celulolitycznych spowodowało obniżenie aktywności tych ostatnich enzymów średnio o około 62% w przypadku T. reesei MCG 77, 6% w przypadku T. reesei VTT-D-7927 i 58% w przypadku T. reesei VTT-D Najwyższe aktywności FPU oznaczono, kiedy objętości cieczy z proteazami i celulazami były jednakowe. W miarę zwiększania objętości cieczy zawierającej enzymy proteolityczne,5- i -krotnie w stosunku do objętości cieczy z celulazami aktywność FPU zmalała o około 62% i około 76% w stosunku do aktywności wyjściowej filtratów. Badając zależność aktywności celulolitycznej badanych filtratów od czasu inkubacji, stwierdzono, że w miarę wydłużania czasu oddziaływania proteaz na celulazy aktywność FPU spadała średnio o około 62% w przypadku godzin i około 70% w przypadku wydłużenia czasu inkubacji do 2 godzin. Wartości te obliczono w stosunku do aktywności uzyskanej po godzinie inkubacji. Tabela 5. Wpływ enzymów proteolitycznych na aktywność celulaz tego samego pochodzenia Table 5. Effect of proteolytic enzymes on the activity of cellulases of the same descent Aktywność celulolityczna mmol glukozy/min cm Czas inkubacellulolytic activity mmol glucose/min cm cji Stosunek obj. cieczy pohodowl. z celulazami do objętości cieczy Szczep (h) pohodowl. z proteazami Strain Time of Ratio of culture filtrate volume of cellulases to culture filtrate incubation volume of proteases : :,5 : Trichoderma,05 0,8 0,8 reesei 0,90 0,62 0, MCG ,8 0,25 0,2 Trichoderma,26 0,98 0,6 reesei 0,8 0,57 0,0 VTT-D ,5 0,2 0,28 Tricho derma,0 0,79 0,9 reesei 0,76 0,50 0,26 VTT-D ,5 0,27 0,20 Badania nad zależnościami między proteazami i różnymi enzymami z filtratów pohodowlanych były prowadzone u innych mikroorganizmów (grzybów strzępkowych i bakterii). Fiedurek i in. [985] otrzymał po mutagenizacji przy użyciu promieniowania UV i działania NTG szczepu rodzicielskiego Aspergillus niger C sześć mutantów. Pięć z nich charakteryzowało się obniżeniem lub całkowitym brakiem aktywności proteolitycznej. Aktywność enzymu glukoamylazy i sekrecja białka u badanych mutantów były proporcjonalne do ich aktywności proteolitycznych. Na podstawie analizy elektroforetycznej białek u nisko-
8 68 proteazowych mutantów stwierdzono obecność dwóch frakcji glukoamylazy spośród czterech rozdzielonych u szczepu rodzicielskiego. Sugeruje to, że proteazy mogą być odpowiedzialne za powstawanie pochodnych izoenzymatycznych form glukoamylazy. Proteazy mogą również wpływać na produkcję białek homologicznych i heterologicznych przez grzyby strzępkowe i bakterie. Stosuje się różne sposoby w celu przezwyciężenia tych problemów. Papagianni i Moo-Young [2002] badali wpływ morfologii grzybni na sekrecję proteaz przez dziki szczep Aspergillus niger producenta homologicznej glukoamylazy. Zmiany poziomu i jakości inokulum miały wpływ na morfologię grzyba. Wzrost mycelium w postaci dużych skupisk (pellets ang) był związany z obniżeniem aktywności proteaz i jednoczesnym podwyższeniem glukoamylazy. Zmniejszenie sekrecji proteaz obserwowano podczas immobilizowanej hodowli Aspergillus niger [Liu i in. 998]. Lehmbeck [J. Lehmbeck, 997. Filamentous fungus with reduced or lacking endogenous recombinant alkaline protease activity. Patent No ] inaktywował przez delecję, insercję i substytucję geny kodujące alkaliczne proteazy u licznych grzybów, jak: Aspergillus oryzae, Aspergillus niger, Aspergillus awamori, Aspergillus phoenicis, Aspergillus nidulans, Trichoderma reesei, Trichoderma harzianum, Humicola insolens, Candida sp, Fusasarium solani. Grzyby te były wykorzystywane do sekrecji wielu rekombinowanych białek, m.in.: beta amylazy, celulaz, endo-,-beta-ksylanaz, alfagalaktozydazy. Escherichia coli jest również dobrym gospodarzem do ekspresji białek rekombinowanych. Liczne proteazy są obecne w różnych kompartmentach komórkowych bakterii (cytoplazmie, przestrzeni periplazmatycznej, wewnętrznej i zewnętrznej błonie cytoplazmatycznej). Endoproteazy te mogą spełniać wiele ważnych funkcji. Dla przykładu są one odpowiedzialne za degradację nieprawidłowo sfadowanych białek w przestrzeni periplazmatycznej. Enzymy te są także zaangażowane w degradację wielu rekombinowanych białek syntetyzowanych w Escherichia coli (proteaza OmT). Jiang i in. [2002] zamienił gen kodujący OmT genem oporności na chloramfenikol. Otrzymane w ten sposób rekombinanty charakteryzowały się zwiększoną stabilnością biosyntezy białka fosfolipazy D. Janas i in [200] po mutagenizacji promieniowaniem uv i NTG szczepu Trichoderma reesei M-7 i selekcji na podłożu z dodatkiem żelatyny wyizolował około 960 niskoproteazowych mutantów. Testowany podczas hodowli ciągłej niskoproteazowy mutant o symbolu Mp5 charakteryzował się dużą opornością na zmiany temperatury [Janas 200]. Aktywności FPU filtratów pohodowlanych były stabilne w szerokim zakresie temperatury hodowli (26 C).
9 69 WNIOSKI. Praca potwierdziła indukcyjny wpływ celulozy na produkcję celulaz przez Trichoderma reesei. 2. Najwyższe aktywności proteaz oznaczono w szóstej dobie hodowli Trichoderma reesei VTT-D-7927 w obecności kazeiny.. Po inkubacji cieczy pohodowlanych grzybów o najwyższych aktywnościach proteolitycznych i celulolitycznych stwierdzono obniżenie aktywności celulaz o od 58% do 76% (w zależności od szczepu, stosunku objętości filtratów pohodowlanych i czasu inkubacji). PIŚMIENNICTWO Dunne C.P Relationship between extracellular proteases and the cellulase complex of Trichoderma reesei. In: Chibata J., Fukui S. and Wingard L.B. Jr., (Eds), Enzyme Engineering. Vol. 6 Plenum. Press. New York, Fiedurek J., Paszczyński A., Ilczuk Z The effect of proteases on the synthesis of glucoamylase by mutants of Aspergillus niger C. Acta. Microbiol. Pol.,, Ghose T.K Measurement of cellulase activities. Pure Appl. Chem. 55, Hagspiel K., Haab D., Kubicek C.P Protease activity and proteolytic modification of cellulases from a Trichoderma reesei QM 9 selectant. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2, Janas P Production of extracellular enzymes by low-protease mutants of Trichoderma reesei. Acta Scientiarum Polonorum 2, 0. Janas P., Fiedurek J., Targoński Z., Mleko S Izolacja i wstępna charakterystyka niskoproteazowych mutantów Trichoderma reesei. Żywność 2, Jiang X., Oohira K., Iwasaki Y., Nakano H., Ichihara S., Yamane T Reduction of protein degradation by use of protease-deficient mutants in cell-free protein synthesis system in Escherichia coli. J. Biosc. Bioeng. 9,, Kammel W.P., Kubicek C.P Absence of postsecretional modification in extracellular proteins of Trichoderma reesei during growth on cellulose. J. Appl. Biochem. 7, 8. Labudova I., Farkas V. 98. Multiple enzyme forms in the cellulase system of Trichoderma reesei during its growth on cellulose. Biochim. Biophys. Acta. 7, 5 0. Liu F., Ridgway D., Gu T., Moo-Young M Inhibition of extracellular protease secretion by Aspergillus niger using cell immobilization. Biotechnol. Lett. 20, Lovrien R.E., Gusek T., Hart B Cellulase and protease specific activities of cemmercialy available cellulase preparations. J. Appl. Biochem. 7, Mandels M., Weber J The production of cellulase. In: Cellulase and Their Application. Adv. Chem. Ser., ed. G. J. Hajny, E. T. Reese, 95, 9. Papagianni H., Moo-Young H Protease secretion in glucoamylase producer Asper gillus niger cultures: Fungal morphology and inoculum effect. Proc. Biochem. 7,
10
PIOTR JANAS, JAN FIEDUREK, ZDZISŁAW TARGOŃSKI, STANISŁAW MLEKO IZOLACJA I WSTĘPNA CHARAKTYRYSTYKA NISKOPROTEAZOWYCH MUTANTÓW TRICHODERMA REESEI
ŻYWNOŚĆ 2(35), 2003 PIOTR JANAS, JAN FIEDUREK, ZDZISŁAW TARGOŃSKI, STANISŁAW MLEKO IZOLACJA I WSTĘPNA CHARAKTYRYSTYKA NISKOPROTEAZOWYCH MUTANTÓW TRICHODERMA REESEI Streszczenie Po mutagenizacji promieniowaniem
PIOTR JANAS, MONIKA KORDO W SKA-WIATER, STANISŁAW MLEKO
Ż Y W N O Ś Ć 4(29), 2001 PIOTR JANAS, MONIKA KORDO W SKA-WIATER, STANISŁAW MLEKO IZOLACJA PROTOPLASTÓW Z TR1CHODERMA REESEIM-7 PRZY UŻYCIU ENZYM ÓW LITYCZNYCH Z TRICHODERMA VIRIDE F-19 Streszczenie Wysokie
BIOSYNTEZA BETA-GLUKANAZ PRZEZ MUTANTY TRICHODERMA REESEI PODCZAS HODOWLI OKRESOWYCH
ŻYWNOŚĆ 2(31), 2002 PIOTR JANAS, ZDZISŁAW TARGOŃSKI, TERESA RUDNICKA-PIŁAT BIOSYNTEZA BETA-GLUKANAZ PRZEZ MUTANTY TRICHODERMA REESEI PODCZAS HODOWLI OKRESOWYCH Streszczenie Cztery mutanty T. reesei były
HODOWLA PERIODYCZNA DROBNOUSTROJÓW
Cel ćwiczenia: Celem ćwiczenia jest porównanie zdolności rozkładu fenolu lub wybranej jego pochodnej przez szczepy Stenotrophomonas maltophilia KB2 i Pseudomonas sp. CF600 w trakcie prowadzenia hodowli
Roman Marecik, Paweł Cyplik
PROGRAM STRATEGICZNY ZAAWANSOWANE TECHNOLOGIE POZYSKIWANIA ENERGII ZADANIE NR 4 Opracowanie zintegrowanych technologii wytwarzania paliw i energii z biomasy, odpadów rolniczych i innych Roman Marecik,
KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY
Ćwiczenie nr 2 KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY I. Kinetyka hydrolizy sacharozy reakcja chemiczna Zasada: Sacharoza w środowisku kwaśnym ulega hydrolizie z wytworzeniem -D-glukozy i -D-fruktozy. Jest to reakcja
Oznaczanie aktywności proteolitycznej trypsyny metodą Ansona
Oznaczanie aktywności proteolitycznej trypsyny metodą Ansona Wymagane zagadnienia teoretyczne 1. Enzymy proteolityczne, klasyfikacja, rola biologiczna. 2. Enzymy proteolityczne krwi. 3. Wewnątrzkomórkowa
Oznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska Oznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną ĆWICZENIE 5 OZNACZANIE AKTYWNOŚCI -AMYLAZY SŁODU METODĄ KOLORYMETRYCZNĄ Enzymy
woda do 1000 ml ph=6,9-7,1. Po sterylizacji dodać nystatynę (końcowe stężenie ok. 50 μg/ml). Agar z wyciągiem glebowym i ekstraktem drożdżowym (YS)
Ćwiczenie 1, 2, 3, 4 Skrining ze środowiska naturalnego: selekcja promieniowców zdolnych do produkcji antybiotyków. Testowanie zdolności do syntezy antybiotyków przez wyselekcjonowane szczepy promieniowców
WPŁYW ŹRÓDŁA WĘGLA I AZOTU NA PRODUKJĘ KSANTANU I ENZYMÓW ZEWNĄTRZKMÓRKOWYCH PRZEZ PENICYLINOOPORNEGO MUTANTA XANTHOMONAS CAMPESTRIS
ŻYWNOŚĆ. Nauka. Technologia. Jakość, 2007, 1 (50), 161 172 PIOTR JANAS, ZDZISŁAW TARGOŃSKI WPŁYW ŹRÓDŁA WĘGLA I AZOTU NA PRODUKJĘ KSANTANU I ENZYMÓW ZEWNĄTRZKMÓRKOWYCH PRZEZ PENICYLINOOPORNEGO MUTANTA
PL 216012 B1. UNIWERSYTET PRZYRODNICZY WE WROCŁAWIU, Wrocław, PL 11.10.2010 BUP 21/10
PL 216012 B1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 216012 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 391223 (22) Data zgłoszenia: 14.05.2010 (51) Int.Cl.
KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA)
Ćwiczenie nr 2 KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA) ĆWICZENIE PRAKTYCZNE I. Kinetyka hydrolizy sacharozy reakcja chemiczna Zasada: Sacharoza w środowisku kwaśnym ulega hydrolizie
1. Biotechnologia i inżynieria genetyczna zagadnienia wstępne 13
Spis treści Przedmowa 11 1. Biotechnologia i inżynieria genetyczna zagadnienia wstępne 13 1.1. Wprowadzenie 13 1.2. Biotechnologia żywności znaczenie gospodarcze i społeczne 13 1.3. Produkty modyfikowane
BIOSYNTEZA WYBRANYCH ENZYMÓW LITYCZNYCH W PODŁO U ZAWIERAJ CYM ODPADOWE KACZANY KUKURYDZIANE PRZEZ GRZYBY STRZ PKOWE Z RODZAJU TRICHODERMA
Acta Sci. Pol., Biotechnologia 7(1) 2008, 17-25 BIOSYNTEZA WYBRANYCH ENZYMÓW LITYCZNYCH W PODŁO U ZAWIERAJ CYM ODPADOWE KACZANY KUKURYDZIANE PRZEZ GRZYBY STRZ PKOWE Z RODZAJU TRICHODERMA Anna Kancelista,
BADANIA NAD DEGRADACJĄ β-glukanów PRZY UDZIALE POZAKOM ÓRKOW YCH HYDROLAZ GRZYBÓW TRICHODERMA
ŻYWNOŚĆ 3(20)Supl., 1999 AGNIESZKA MAJ, DANUTA WITKOWSKA BADANIA NAD DEGRADACJĄ β-glukanów PRZY UDZIALE POZAKOM ÓRKOW YCH HYDROLAZ GRZYBÓW TRICHODERMA Streszczenie Przedmiotem pracy było porównanie efektywności
ĆWICZENIE 5 MECHANIZMY PROMUJĄCE WZROST ROŚLIN
ĆWICZENIE 5 MECHANIZMY PROMUJĄCE WZROST ROŚLIN CZĘŚĆ TEORETYCZNA Mechanizmy promujące wzrost rośli (PGP) Metody badań PGP CZĘŚĆ PRAKTYCZNA 1. Mechanizmy promujące wzrost roślin. Odczyt. a) Wytwarzanie
E.coli Transformer Zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli
E.coli Transformer Zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli Wersja 0211 6x40 transformacji Nr kat. 4020-240 Zestaw zawiera komplet odczynników do przygotowania sześciu
BIOSYNTEZA ACYLAZY PENICYLINOWEJ. Ćwiczenia z Mikrobiologii Przemysłowej 2011
BIOSYNTEZA ACYLAZY PENICYLINOWEJ Ćwiczenia z Mikrobiologii Przemysłowej 2011 Acylaza penicylinowa Enzym hydrolizuje wiązanie amidowe w penicylinach Reakcja przebiega wg schematu: acylaza Reszta: fenyloacetylowa
POLSKIE TOWARZYSTWO TECHNOLOGÓW ŻYWNOŚCI ZYWNOSC NAUKA«TECHNOLOGIA* JAKOŚĆ. Nr 2 (35) Kraków 2003 Rok 10
POLSKIE TOWARZYSTWO TECHNOLOGÓW ŻYWNOŚCI ZYWNOSC NAUKA«TECHNOLOGIA* JAKOŚĆ Nr 2 (35) Kraków 2003 Rok 10 ŻYWNOŚĆ Organ nauko w y PTTŻ - k w a rta ln ik Nr 2 (35) Kraków 2003 Rok 10 SPIS TREŚCI Od Redakcji...3
E.coli Transformer Kit
E.coli Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli. Metoda chemiczna. wersja 1117 6 x 40 transformacji Nr kat. 4020-240 Zestaw zawiera komplet odczynników
ĆWICZENIA Z MECHANIZMÓW DZIAŁANIA WYBRANYCH GRUP LEKÓW
UNIWERSYTET MARII CURIE-SKŁODOWSKIEJ WYDZIAŁ BIOLOGII I BIOTECHNOLOGII ZAKŁAD BIOLOGII MOLEKULARNEJ ĆWICZENIA Z MECHANIZMÓW DZIAŁANIA WYBRANYCH GRUP LEKÓW dla studentów I roku II 0 biotechnologii medycznej
Biotechnologia interdyscyplinarna dziedzina nauki i techniki, zajmująca się zmianą materii żywej i poprzez wykorzystanie
Biotechnologia interdyscyplinarna dziedzina nauki i techniki, zajmująca się zmianą materii żywej i poprzez wykorzystanie organizmów żywych, ich części, bądź pochodzących od nich produktów, a także modeli
Typy bioreaktorów najczęściej stosowanych w biotechnologii farmaceutycznej
Typy bioreaktorów najczęściej stosowanych w biotechnologii farmaceutycznej Najczęściej stosowana technika: hodowla wgłębna w podłożach płynnych inokulum skala laboratoryjna skala pilotowa/ produkcyjna
BIOTECHNOLOGIA, podstawy mikrobiologiczne i biochemiczne Aleksander Chmiel, PWN 1998
Wykłady - tematy Biotechnologia farmaceutyczna definicja i znaczenie. Typy procesów biotechnologicznych, biokatalizatory. Fermentacja tlenowa - przykład najczęściej stosowanego procesu biotechnologicznego.
NEURALNA PREDYKCJA WYNIKÓW PROCESU RÓWNOCZESNEJ BIOSYNTEZY INULINAZY I INWERTAZY PRZEZ ASPERGILLUS NIGER W WARUNKACH WYBRANYCH STRESÓW ABIOTYCZNYCH
InŜynieria Rolnicza 14/2005 Jacek Pielecki*, Jacek Skwarcz** *Katedra Technologii Przemysłu Rolno SpoŜywczego i Przechowalnictwa **Katedra Podstaw Techniki, Akademia Rolnicza w Lublinie NEURALNA PREDYKCJA
Krew należy poddać hemolizie, która zachodzi pod wpływem izotonicznego odczynnika Drabkina.
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 13 BIOCHEMIA KRWI Doświadczenie 1 Cel: Oznaczenie stężenia Hb metodą cyjanmethemoglobinową. Hemoglobina (Hb) i niektóre jej
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19)PL (11)164743 (13) B1. (21) Numer zgłoszenia: 286648
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19)PL (11)164743 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 286648 (22) Data zgłoszenia: 28.08.1990 (54) IntCl5: C12J 1/04 C12P
FUNGISTATYCZNE ODDZIAŁYWANIE SZCZEPU BACILLUS COAGULANS W PORÓWNANIU Z ODDZIAŁYWANIEM WYBRANYCH FUNGICYDÓW
Progress in Plant Protection / Postępy w Ochronie Roślin, 47 (2) 2007 FUNGISTATYCZNE ODDZIAŁYWANIE SZCZEPU BACILLUS COAGULANS W PORÓWNANIU Z ODDZIAŁYWANIEM WYBRANYCH FUNGICYDÓW BARBARA STACHOWIAK 1, KRYSTYNA
PROTEOLYTIC ACTIVITY OF Bacillus cereus STRAINS
Proceedings of ECOpole Vol., No. Małgorzata NABRDALIK, Katarzyna GRATA and Adam LATAŁA PROTEOLYTIC ACTIVITY OF Bacillus cereus STRAINS AKTYWNOŚĆ PROTEOLITYCZNA SZCZEPÓW Bacillus cereus Abstract: The aim
Technika fluorescencyjnego oznaczania aktywności enzymów. Wstęp:
Technika fluorescencyjnego oznaczania aktywności enzymów Wstęp: Wśród technik biologii molekularnej jedną z najczęściej stosowanych jest technika fluorescencyjna. Stosując technikę fluorescencyjną można
Biosynteza witamin. B 2, B 12, A (karotenów), D 2
Biosynteza witamin B 2, B 12, A (karotenów), D 2 Witamina B 2 ryboflawina 1. szczepy produkujące do 100 mg witaminy na 1L pożywki 2. szczepy produkujące od 500 do 1000 mg/1l 3. szczepy wytwarzające do
1 X. dx dt. W trakcie hodowli okresowej wyróżnia się 4 główne fazy (Rys. 1) substrat. czas [h]
stężenie [g l -1 ] Ćwiczenie 3: Bioreaktor mikrobiologiczny Cel ćwiczenia: Wyznaczanie równania kinetycznego wzrostu mikroorganizmów oraz współczynników stechiometrycznych w hodowli okresowej szczepu Bacillus
Licealista w świecie nauki
Zespół Szkół Ponadgimnazjalnych w Chojnie V EDYCJA PROJEKTU EDUKACYJNEGO Licealista w świecie nauki Uczestnicy projektu: 1. Hanna Babiarz 2. Ilona Brzezińska 3. Wiktoria Bujak 4. Oliwia Gramburg 5. Łucja
Oznaczanie dekstranu w sokach cukrowniczych
Oznaczanie dekstranu w sokach cukrowniczych mgr inż. Aneta Antczak Instytut Chemicznej Technologii Żywności Specjalistyczne Laboratorium Analityki Cukrowniczej Instytut Chemicznej Technologii Żywności
WYTWARZANIE FITAZ, CELULAZ I KSYLANAZ PRZEZ WYBRANE SZCZEPY GRZYBÓW STRZĘPKOWYCH
ŻYWNOŚĆ. Nauka. Technologia. Jakość, 2007, 1 (50), 150 160 DANUTA WITKOWSKA, ANITA RYWIŃSKA, MICHAŁ PIEGZA WYTWARZANIE FITAZ, CELULAZ I KSYLANAZ PRZEZ WYBRANE SZCZEPY GRZYBÓW STRZĘPKOWYCH S t r e s z c
Saccharomyces Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Saccharomyces cerevisiae. Metoda chemiczna.
Saccharomyces Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Saccharomyces cerevisiae. Metoda chemiczna. wersja 0916 6 x 20 transformacji Nr kat. 4010-120 Zestaw zawiera
KREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb. Metoda cyjanmethemoglobinowa: Zasada metody:
KREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb Metoda cyjanmethemoglobinowa: Hemoglobina i niektóre jej pochodne są utleniane przez K3 [Fe(CN)6]do methemoglobiny, a następnie przekształcane pod wpływem KCN w trwały związek
BADANIE WŁASNOŚCI KOENZYMÓW OKSYDOREDUKTAZ
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska BADANIE WŁASNOŚCI KOENZYMÓW OKSYDOREDUKTAZ ĆWICZENIE 2 Nukleotydy pirydynowe (NAD +, NADP + ) pełnią funkcję koenzymów dehydrogenaz przenosząc jony
C 6 H 12 O 6 2 C 2 O 5 OH + 2 CO 2 H = -84 kj/mol
OTRZYMYWANIE BIOETANOLU ETAP II (filtracja) i III (destylacja) CEL ĆWICZENIA: Celem ćwiczenia jest przeprowadzenie procesu filtracji brzeczki fermentacyjnej oraz uzyskanie produktu końcowego (bioetanolu)
Do jednego litra medium dodać 10,0 g skrobi ziemniaczanej lub kukurydzianej i mieszać do uzyskania zawiesiny. Sterylizować w autoklawie.
Ćwiczenie 3. Izolacja laseczek przetrwalnikujących z gleby Cel ćwiczenia: Izolacja i testowanie przydatności biotechnologicznej laseczek z rodzaju Bacillus występujących w glebie. Odczynniki i podłoża:
SCLEROTIUM SP. WOJCIECH CZUB, MARIANNA TURKIEWICZ BIOSYNTEZA SKLEROGLUKANU PRZEZ SZCZEP
ŻYWNOŚĆ 3(20)Supl., 1999 WOJCIECH CZUB, MARIANNA TURKIEWICZ BIOSYNTEZA SKLEROGLUKANU PRZEZ SZCZEP SCLEROTIUM SP. Streszczenie Wytwarzanie zewnątrzkomórkowych polisacharydów przez grzyby strzępkowe jest
PL B1. Nowy szczep bakterii Bacillus subtilis i sposób otrzymywania α-amylazy przy użyciu nowego szczepu
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 211354 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 374396 (22) Data zgłoszenia: 14.04.2005 (51) Int.Cl. C12N 1/20 (2006.01)
Ingredients Research Concepts Consultancy Production for the dairy industry. Milase Premium. Marta Misiuwianiec-Królikiewicz
Ingredients Research Concepts Consultancy Production for the dairy industry Milase Premium Marta Misiuwianiec-Królikiewicz Zawartość Obecne na rynku koagulanty Koagulacja mleka Milase Premium Koagulanty
BIOTECHNOLOGIA OGÓLNA
BIOTECHNOLOGIA OGÓLNA 1. Wprowadzenie do biotechnologii. Rys historyczny. Zakres i znaczenie nowoczesnej biotechnologii. Opracowanie procesu biotechnologicznego. 7. Produkcja biomasy. Białko mikrobiologiczne.
Sposób otrzymywania białek o właściwościach immunoregulatorowych. Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania fragmentów witellogeniny.
1 Sposób otrzymywania białek o właściwościach immunoregulatorowych Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania fragmentów witellogeniny. Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle spożywczym i
TERMOSTABILNOŚĆ PEPTYDAZ I INHIBITORÓW PEPTYDAZ NASION ROŚLIN SPOŻYWANYCH PRZEZ CZŁOWIEKA
BROMAT. CHEM. TOKSYKOL. XLV, 2012, 3, str. 654 658 Marta Siergiejuk, Marek Gacko TERMOSTABILNOŚĆ PEPTYDAZ I INHIBITORÓW PEPTYDAZ NASION ROŚLIN SPOŻYWANYCH PRZEZ CZŁOWIEKA Klinika Chirurgii Naczyń i Transplantacji,
BIOSYNTEZA ERYTRYTOLU Z GLICEROLU PRZEZ SZCZEP YARROWIA LIPOLYTICA WRATISLAVIA K1-UV21 W RÓŻNYCH SYSTEMACH HODOWLANYCH 1
Acta Sci. Pol., Biotechnologia 12 (1) 2013, 37-50 ISSN 1644 065X (print) ISSN 2083 8654 (on-line) BIOSYNTEZA ERYTRYTOLU Z GLICEROLU PRZEZ SZCZEP YARROWIA LIPOLYTICA WRATISLAVIA K1-UV21 W RÓŻNYCH SYSTEMACH
ALGALTOXKIT F Procedura testu
ALGALTOXKIT F Procedura testu 1 PRZYGOTOWANIE STANDARDOWEJ POŻYWKI A B C D - KOLBKA MIAROWA (1 litr) - FIOLKI Z ROZTWORAMI POŻYWEK A (2 fiolki), B, C, D - DESTYLOWANA (lub dejonizowana) WODA 2 A PRZENIEŚĆ
Z BADAŃ ODDZIAŁYWANIA WYBRANYCH MIKROORGANIZMÓW NA KOMPOZYTY PP Z BIOCYDEM SEANTEX
SPRAWOZDANIE Z BADAŃ ODDZIAŁYWANIA WYBRANYCH MIKROORGANIZMÓW NA KOMPOZYTY PP Z BIOCYDEM SEANTEX /zlecenie 514010/ wykonane w WOJSKOWYM INSTYTUCIE CHEMII I RADIOMETRII w Warszaawie 1. Materiały i metody
Składniki podłoża hodowlanego
Składniki podłoża hodowlanego 35-40 pierwiastków niezbędne w odżywianiu drobnoustrojów Makroelementy: C, O, H, N, P, S, K i Mg stanowią 98% s.s. bakterii i grzybów Mikroelementy niezbędne: Zn, Mn, Fe,
Technologia bioprocesów. procesy up-stream
Technologia bioprocesów procesy up-stream 1. Metody statyczne (okresowe, ang. batch fermentation) polegające na tym, że w czasie rozwoju mikroorganizmów nie doprowadza się świeżych substancji odżywczych
relacje ilościowe ( masowe,objętościowe i molowe ) dotyczące połączeń 1. pierwiastków w związkach chemicznych 2. związków chemicznych w reakcjach
1 STECHIOMETRIA INTERPRETACJA ILOŚCIOWA ZJAWISK CHEMICZNYCH relacje ilościowe ( masowe,objętościowe i molowe ) dotyczące połączeń 1. pierwiastków w związkach chemicznych 2. związków chemicznych w reakcjach
47 Olimpiada Biologiczna
47 Olimpiada Biologiczna Pracownia biochemiczna zasady oceniania rozwia zan zadan Część A. Identyfikacja zawartości trzech probówek zawierających cukry (0 21 pkt) Zadanie A.1 (0 13 pkt) Tabela 1 (0 7 pkt)
BIOTECHNOLOGIA OGÓLNA
BIOTECHNOLOGIA OGÓLNA 1. Wprowadzenie do biotechnologii. Rys historyczny. Zakres i znaczenie nowoczesnej biotechnologii. Opracowanie procesu biotechnologicznego. 7. Produkcja biomasy. Białko mikrobiologiczne.
data ĆWICZENIE 12 BIOCHEMIA MOCZU Doświadczenie 1
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 12 BIOCHEMIA MOCZU Doświadczenie 1 Cel: Wyznaczanie klirensu endogennej kreatyniny. Miarą zdolności nerek do usuwania i wydalania
Aktywność przeciwgrzybowa bakterii z rodzaju Lactobacillus w obecności polioli i ich galaktozylowych pochodnych
dr hab. inż. Anna Zadernowska Olsztyn 07.07.2018 Katedra Mikrobiologii Przemysłowej i Żywności Wydział Nauki o Żywności Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie RECENZJA rozprawy doktorskiej mgr inż.
Instrukcje do ćwiczeń oraz zakres materiału realizowanego na wykładach z przedmiotu Inżynieria bioprocesowa na kierunku biotechnologia
1 Zakład Mikrobiologii UJK Instrukcje do ćwiczeń oraz zakres materiału realizowanego na wykładach z przedmiotu Inżynieria bioprocesowa na kierunku biotechnologia 2 Zakład Mikrobiologii UJK Zakres materiału
K05 Instrukcja wykonania ćwiczenia
Katedra Chemii Fizycznej Uniwersytetu Łódzkiego K05 Instrukcja wykonania ćwiczenia Wyznaczanie punktu izoelektrycznego żelatyny metodą wiskozymetryczną Zakres zagadnień obowiązujących do ćwiczenia 1. Układy
Laboratorium 8. Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych
Laboratorium 8 Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych Literatura zalecana: Jakubowska A., Ocena toksyczności wybranych cieczy jonowych. Rozprawa doktorska, str. 28 31.
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa tel. 22 572 0735, 606448502
BARTOSZ SOŁO WIEJ, JACEK PIELECKI, DOMINIK SZWAJGIER
ŻYWNOŚĆ 2(35)Supl., 2003 BARTOSZ SOŁO WIEJ, JACEK PIELECKI, DOMINIK SZWAJGIER PREDYKCJA WYNIKÓW JEDNOCZESNEJ PRODUKCJI INULINAZY I INWERTAZY PRZEZ SZCZEPY ASPERGILLUS NIGER I KLUYVEROMYCES MARXIANUS PRZY
Planowanie Projektów Odnawialnych Źródeł Energii Biomasa (odpady fermentowalne)
Slajd 1 Lennart Tyrberg, Energy Agency of Southeast Sweden Planowanie Projektów Odnawialnych Źródeł Energii Biomasa (odpady fermentowalne) Prepared by: Mgr inż. Andrzej Michalski Verified by: Dr inż. Andrzej
DEZINTEGRACJA ULTRADŹWIĘKOWA
DEZINTEGRACJA ULTRADŹWIĘKOWA Ćwiczenie nr 4 Dezintegracja ultradźwiękowa Cel ćwiczenia: Celem ćwiczenia jest zbadanie wpływu ultradźwięków na komórki bakterii Bacillus substilis Wstęp Metody dezintegracji
SYLABUS. Wydział Biologiczno - Rolniczy. Katedra Biotechnologii i Mikrobiologii
SYLABUS 1.1. PODSTAWOWE INFORMACJE O PRZEDMIOCIE/MODULE Nazwa przedmiotu/ modułu Podstawy biotechnologii Kod przedmiotu/ modułu* Wydział (nazwa jednostki prowadzącej kierunek) Nazwa jednostki realizującej
PL B1. INSTYTUT AGROFIZYKI IM. BOHDANA DOBRZAŃSKIEGO POLSKIEJ AKADEMII NAUK, Lublin, PL
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 228759 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 409138 (22) Data zgłoszenia: 08.08.2014 (51) Int.Cl. C12N 1/14 (2006.01)
3. Badanie kinetyki enzymów
3. Badanie kinetyki enzymów Przy stałym stężeniu enzymu, a przy zmieniającym się początkowym stężeniu substratu, zmiany szybkości reakcji katalizy, wyrażonej jako liczba moli substratu przetworzonego w
Postępy Nauki i Technologii Przemysłu Rolno-Spożywczego 2015 t. 70 nr 3
WPŁYW ZMIAN OBJĘTOŚCI HODOWLI INOKULACYJNEJ STREPTOVERTICILLIUM MOBARAENSE NA AKTYWNOŚĆ TRANSGLUTAMINAZY POCHODZENIA MIKROBIOLOGICZNEGO Damian Pietracha, Filip Zdziennicki, Anna Misiewicz, Klaudia Szewczuk,
PL B1. POLITECHNIKA WARSZAWSKA, Warszawa, PL BUP 24/15. JOLANTA MIERZEJEWSKA, Warszawa, PL ALEKSANDRA MULARSKA, Ząbki, PL
PL 226680 B1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 226680 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 408170 (22) Data zgłoszenia: 09.05.2014 (51) Int.Cl.
liczba godzin 2 MIKROBIOLOGIA KOSMETOLOGICZNA dla studentów II roku, studiów I st. kierunku KOSMETOLOGIA półpłynne stałe
MIKROBIOLOGIA KOSMETOLOGICZNA dla studentów II roku, studiów I st. kierunku KOSMETOLOGIA Ćwiczenie 6 i 7 6 Fizjologia drobnoustrojów Wymagania metaboliczne bakterii. Rodzaje podłóż mikrobiologicznych.
(12) OPIS PATENTOWY (19) PL
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 169335 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 2 9 4 2 2 3 (22) Data zgłoszenia: 1 3.0 4.1 9 9 2 (51) IntCl6: A01N
data ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ Amidohydrolazy (E.C.3.5.1 oraz E.C.3.5.2) są enzymami z grupy hydrolaz o szerokim powinowactwie
INSTRUKCJA TECHNOLOGICZNA PROCESU OTRZYMYWANIA DROŻDŻY EKOLOGICZNYCH
INSTRUKCJA TECHNOLOGICZNA PROCESU OTRZYMYWANIA DROŻDŻY EKOLOGICZNYCH Na podstawie wyników przeprowadzonych prac badawczych i w oparciu o doświadczenie w zakresie produkcji drożdży w systemie konwencjonalnym
WYNALAZKI BIOTECHNOLOGICZNE W POLSCE. Ewa Waszkowska ekspert UPRP
WYNALAZKI BIOTECHNOLOGICZNE W POLSCE Ewa Waszkowska ekspert UPRP Źródła informacji w biotechnologii projekt SLING Warszawa, 9-10.12.2010 PLAN WYSTĄPIENIA Umocowania prawne Wynalazki biotechnologiczne Statystyka
Zakład Biologii Sanitarnej i Ekotechniki ĆWICZENIE 2 BUDOWA I FUNKCJE ENZYMÓW. ZASTOSOWANIE BADAŃ ENZYMATYCZNYCH W INŻYNIERII ŚRODOWISKA.
ĆWICZENIE 2 BUDOWA I FUNKCJE ENZYMÓW. ZASTOSOWANIE BADAŃ ENZYMATYCZNYCH W INŻYNIERII ŚRODOWISKA. /Opiekun merytoryczny: dr hab. Teodora M. Traczewska, prof. nadzw. PWr modyfikacja: dr inż. Agnieszka Trusz-Zdybek
Spis treści. asf;mfzjf. (Jan Fiedurek)
asf;mfzjf Spis treści 1. Informacje wstępne 11 (Jan Fiedurek) 1.1. Biotechnologia w ujęciu historycznym i perspektywicznym... 12 1.2. Biotechnologia klasyczna i nowoczesna... 18 1.3. Rozwój biotechnologii:
X. Diagnostyka mikrobiologiczna bakterii chorobotwórczych z rodzaju: Corynebacterium, Mycobacterium, Borrelia, Treponema, Neisseria
X. Diagnostyka mikrobiologiczna bakterii chorobotwórczych z rodzaju: Corynebacterium, Mycobacterium, Borrelia, Treponema, Neisseria Maczugowce (rodzaj Corynebacterium) Ćwiczenie 1. Wykonanie preparatu
Oznaczanie żelaza i miedzi metodą miareczkowania spektrofotometrycznego
Oznaczanie żelaza i miedzi metodą miareczkowania spektrofotometrycznego Oznaczanie dwóch kationów obok siebie metodą miareczkowania spektrofotometrycznego (bez maskowania) jest możliwe, gdy spełnione są
Dr hab. Anna Bębenek Warszawa,
Dr hab. Anna Bębenek Warszawa, 14.01. 2018 Instytut Biochemii i Biofizyki PAN Ul. Pawińskiego 5a 02-106 Warszawa Recenzja pracy doktorskiej Pana mgr Michała Płachty Pod Tytułem Regulacja funkcjonowania
Kuratorium Oświaty w Lublinie
Kuratorium Oświaty w Lublinie KOD UCZNIA ZESTAW ZADAŃ KONKURSOWYCH Z CHEMII DLA UCZNIÓW GIMNAZJÓW ROK SZKOLNY 2015/2016 ETAP WOJEWÓDZKI Instrukcja dla ucznia 1. Zestaw konkursowy zawiera 12 zadań. 2. Przed
Biochemia Ćwiczenie 7 O R O P
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /2 podpis asystenta ĆWICZENIE 6 FSFATAZY SCZA KRWI Wstęp merytoryczny Fosfatazy są enzymami należącymi do klasy hydrolaz, podklasy fosfomonoesteraz. Hydrolizują
OZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY)
Ćwiczenie 8 OZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY) Część doświadczalna obejmuje: - sączenie Ŝelowe ekstraktu uzyskanego z bielma niedojrzałych nasion kukurydzy - oznaczanie aktywności
Oznaczanie mocznika w płynach ustrojowych metodą hydrolizy enzymatycznej
Oznaczanie mocznika w płynach ustrojowych metodą hydrolizy enzymatycznej Wprowadzenie: Większość lądowych organizmów kręgowych część jonów amonowych NH + 4, produktu rozpadu białek, wykorzystuje w biosyntezie
Ekspresja genów heterogenicznych w drożdżach Pichia pastoris
Ekspresja genów heterogenicznych w drożdżach Pichia pastoris Ekspresja genów heterogenicznych w drożdżach Pichia pastoris Drożdże Pichia pastoris należą do drożdży metanolotroficznych tj. zdolnych do wykorzystywania
ANALIZA TŁUSZCZÓW WŁAŚCIWYCH CZ II
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska ANALIZA TŁUSZCZÓW WŁAŚCIWYCH CZ II ĆWICZENIE 8 ZADANIE 1 HYDROLIZA LIPIDÓW MLEKA ZA POMOCĄ LIPAZY TRZUSTKOWEJ Lipazy (EC 3.1) to enzymy należące
VII. Pałeczki Gram-dodatnie: Corynebacterium, Listeria, Erysipelothtix, Lactobacillus - ćwiczenia praktyczne
VII. Pałeczki Gram-dodatnie: Corynebacterium, Listeria, Erysipelothtix, Lactobacillus - ćwiczenia praktyczne Ćwiczenie 1. Wykonanie barwionych preparatów mikroskopowych preparat barwiony metodą Grama z
Dekstran i dekstranaza w przerobie buraków zdegradowanych
Dekstran i dekstranaza w przerobie buraków zdegradowanych Aneta Antczak, Maciej Wojtczak Dekstran Zawartość dekstranu soku surowym zdrowe buraki
Biotechnologia farmaceutyczna
Sylabus - Biotechnologia farmaceutyczna 1. Metryczka Nazwa Wydziału Program kształcenia Wydział Farmaceutyczny z Oddziałem Medycyny Laboratoryjnej Farmacja, jednolite studia magisterskie, forma studiów:
d[a] = dt gdzie: [A] - stężenie aspiryny [OH - ] - stężenie jonów hydroksylowych - ] K[A][OH
1 Ćwiczenie 7. Wyznaczanie stałej szybkości oraz parametrów termodynamicznych reakcji hydrolizy aspiryny. Chemiczna stabilność leków jest ważnym terapeutycznym problemem W przypadku chemicznej niestabilności
BIOTECHNOLOGIA OGÓLNA
BIOTECHNOLOGIA OGÓLNA 1. Wprowadzenie do biotechnologii. Rys historyczny. Zakres i znaczenie nowoczesnej biotechnologii. Opracowanie procesu biotechnologicznego. 7. Produkcja biomasy. Białko mikrobiologiczne.
1. Oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej i jej zależności od stężenia enzymu oraz żółci jako modulatora reakcji enzymatycznej.
ĆWICZENIE OZNACZANIE AKTYWNOŚCI LIPAZY TRZUSTKOWEJ I JEJ ZALEŻNOŚCI OD STĘŻENIA ENZYMU ORAZ ŻÓŁCI JAKO MODULATORA REAKCJI ENZYMATYCZNEJ. INHIBICJA KOMPETYCYJNA DEHYDROGENAZY BURSZTYNIANOWEJ. 1. Oznaczanie
WYŻEJ OPISANA CZĘŚĆ DOŚWIADCZENIA JEST PRZYGOTOWANA EOZYNA ŻÓŁTAWA
ĆWICZENIE 6 Gospodarka wodna Szybkość dyfuzji barwników organicznych w żelatynie Materiał: a/ odczynniki: 20 % roztwór żelatyny, tusz, 1-2 mm roztwory eozyny żółtawej, błękitu metylenowego, oranżu metylowego
OZNACZANIE ŻELAZA METODĄ SPEKTROFOTOMETRII UV/VIS
OZNACZANIE ŻELAZA METODĄ SPEKTROFOTOMETRII UV/VIS Zagadnienia teoretyczne. Spektrofotometria jest techniką instrumentalną, w której do celów analitycznych wykorzystuje się przejścia energetyczne zachodzące
Badanie szybkości hydrolizy lipidów mleka i oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej
Badanie szybkości hydrolizy lipidów mleka i oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej Cel ćwiczenia Celem ćwiczenia jest poznanie alkacymetrycznej metody oznaczania aktywności lipazy trzustkowej z użyciem
Laboratorium 5. Wpływ temperatury na aktywność enzymów. Inaktywacja termiczna
Laboratorium 5 Wpływ temperatury na aktywność enzymów. Inaktywacja termiczna Prowadzący: dr inż. Karolina Labus 1. CZĘŚĆ TEORETYCZNA Szybkość reakcji enzymatycznej zależy przede wszystkim od stężenia substratu
Nowoczesne systemy ekspresji genów
Nowoczesne systemy ekspresji genów Ekspresja genów w organizmach żywych GEN - pojęcia podstawowe promotor sekwencja kodująca RNA terminator gen Gen - odcinek DNA zawierający zakodowaną informację wystarczającą
The Role of Maf1 Protein in trna Processing and Stabilization / Rola białka Maf1 w dojrzewaniu i kontroli stabilności trna
Streszczenie rozprawy doktorskiej pt. The Role of Maf1 Protein in trna Processing and Stabilization / Rola białka Maf1 w dojrzewaniu i kontroli stabilności trna mgr Tomasz Turowski, promotor prof. dr hab.
PL B1. UNIWERSYTET EKONOMICZNY W POZNANIU, Poznań, PL BUP 26/15. RENATA DOBRUCKA, Poznań, PL JOLANTA DŁUGASZEWSKA, Poznań, PL
PL 226007 B1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 226007 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 417124 (22) Data zgłoszenia: 16.06.2014 (62) Numer zgłoszenia,
CEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową procedurą odsalania oczyszczanych preparatów enzymatycznych w procesie klasycznej filtracji żelowej.
LABORATORIUM 3 Filtracja żelowa preparatu oksydazy polifenolowej (PPO) oczyszczanego w procesie wysalania siarczanem amonu z wykorzystaniem złoża Sephadex G-50 CEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową
SPRAWOZDANIE Z BADAŃ MIKROBIOLOGICZNYCH Nr 20006/11859/09
SPRAWOZDANIE MOŻE BYĆ POWIELANE TYLKO W CAŁOŚCI. INNA FORMA KOPIOWANIA WYMAGA PISEMNEJ ZGODY LABORATORIUM. SPRAWOZDANIE Z BADAŃ MIKROBIOLOGICZNYCH Nr 20006/11859/09 BADANIA WŁASNOŚCI PRZECIWDROBNOUSTROJOWYCH
ĆWICZENIE II Kinetyka reakcji akwatacji kompleksu [Co III Cl(NH 3 ) 5 ]Cl 2 Wpływ wybranych czynników na kinetykę reakcji akwatacji
ĆWICZENIE II Kinetyka reakcji akwatacji kompleksu [Co III Cl(NH 3 ) 5 ]Cl 2 Wpływ wybranych czynników na kinetykę reakcji akwatacji Odczynniki chemiczne związek kompleksowy [CoCl(NH 3 ) 5 ]Cl 2 ; stężony