RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 2502635 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 18.06.2008 12172324.1 (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: 11.12.2013 Europejski Biuletyn Patentowy 2013/50 EP 2502635 B1 (13) (51) T3 Int.Cl. A61K 45/06 (2006.01) A61P 15/08 (2006.01) A23L 1/302 (2006.01) A23L 1/305 (2006.01) A61K 31/07 (2006.01) A61K 31/122 (2006.01) A61K 31/198 (2006.01) A61K 31/205 (2006.01) A61K 31/355 (2006.01) A61K 31/375 (2006.01) A61K 33/30 (2006.01) A61K 31/4415 (2006.01) (54) Tytuł wynalazku: Połączone preparaty do leczenia męskiej niepłodności (30) Pierwszeństwo: (43) Zgłoszenie ogłoszono: 26.09.2012 w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2012/39 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: 31.03.2014 Wiadomości Urzędu Patentowego 2014/03 (73) Uprawniony z patentu: Fasani, Roberto, Bergamo, IT (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP 2502635 T3 ROBERTO FASANI, Bergamo, IT (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Anna Grzelak WTS RZECZNICY PATENTOWI WITEK, ŚNIEŻKO I PARTNERZY ul. R. Weigla 12 53-114 Wrocław Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).
PZ/2292/AGR 1 EP 2 502 635 B1 Opis [0001] Niniejszy wynalazek odnosi się do preparatu złożonego z dwóch różnych preparatów do podawania osobno, z których jeden zawiera argininę, witaminę A, witaminę E, witaminę B6, witaminę B9 (tj. kwas foliowy), witaminę B12, koenzym Q10, a drugi zawiera karnitynę, argininę, witaminę C i cynk, do leczenia męskiej niepłodności. OPIS [0002] Niska jakość nasienia, nie połączona z dającymi się ustalić przyczynami, tak zwana idiopatyczna oligoastenoteratozoospermia (zespół OAT, ang. oligoasthenoteratozoospermia) odpowiada za 40-75% przypadków męskiej niepłodności. Do dzisiaj, zaproponowano różne terapie farmakologiczne przeciw zespołowi OAT. Jednakże, na dzień dzisiejszy, rygorystyczna ocena badań dostępnych w literaturze doprowadziła ostatnio autorów EAU Guidelines on Infertility 2007 (Zalecenia dot. niepłodności Europejskiego Towarzystwa Urologicznego 2007) do wniosku, że obecnie znane terapie nie zaspokajają potrzeb terapeutycznych dla takiej patologii. [0003] Na przykład, faktem jest, że badania przeprowadzone dla GnRH dają sprzeczne wyniki, podczas gdy te wykonane dla FSH okazały się bezowocne. Dodatkowo, dla leków aktywujących układ kininogenkinina jak dotąd nie udowodniono skuteczności, podczas gdy blokery komórek tucznych i anty-estrogeny wykazują bardzo niską skuteczność. Wreszcie, połączenie hcg/hmg, androgeny, bromokryptyny i alfaadrenolityki nie są zalecane, poza przypadkami hipogonadyzmu, ponieważ powodują działania niepożądane. [0004] Ponadto, w ciągu ostatnich lat klika badań wykazało znaczenie ROS (reaktywne formy tlenu, ang. Reactive Oxygen Species) w fizjologii reprodukcji: faktem jest, że wykazano, że stres oksydacyjny połączony z wysokimi poziomami ROS w płynie nasiennym (a w szczególności, choć nie wyłącznie, w trakcie stanów zapalnych prowadzących do dużej liczebności leukocytów) powoduje spadek ruchliwości plemników i uszkadza DNA komórkowy (Agarwal et al., 2006; Agarwal et al., 2002). [0005] Plemniki są bardzo wrażliwe na ROS z uwagi na to, że ich błona komórkowa zawiera wielonienasycone kwasy tłuszczowe (PUFA, ang. PolyUnsaturated Fatty Acid), które łatwo poddają się procesowi peroksydacji (Fraczek et al., 2007; Agarwal et al., 2005). Tak więc, uszkodzenie komórek następowałoby gdy wytwarzanie ROS przekroczy aktywność mechanizmów antyoksydacyjnych zwykle obecnych w plazmie nasiennej (Sheweita et al., 2005). W ciągu ostatnich lat wykonano różne badania dotyczące różnych związków o aktywności antyoksydacyjnej i pomocniczej w spermatogenezie u niepłodnych osobników, co pozwoliło na wyciągnięcie ważnych wniosków dotyczących antyoksydantów: - selen i witamina E, samodzielnie lub w połączeniu, powodują redukcję mechanizmów oksydacyjnych i poprawę ruchliwości plemników (Keskes-Ammar et al., 2003; Scott et al., 1998); - witamina C jest zdolna do poprawiania liczebności, ruchliwości i morfologii plemników (Akmal et al., 2006); - połączenie witaminy C i E prowadzi do redukcji uszkodzeń DNA (Greco et al., 2005);
PZ/2292/AGR 2 EP 2 502 635 B1 - połączenie L-karnityny i acetylo-l-karnityny okazało się skuteczne w poprawianiu postępowej ruchliwości plemników, w poprawianiu zdolności antyoksydacyjnej w plazmie nasiennej i w poprawianiu częstości ciąż dla mężczyzn z zespołem OAT (Li et al., 2005; Balercia et al., 2005; Lenzi et al., 2004), mimo że często zaprzecza się klinicznemu lub zasadniczo istotnemu wpływowi na ruchliwość lub całkowitą liczebność ruchliwych plemników u mężczyzn dotkniętych idiopatyczną astenospermią (Sigman et al., 2006); a, względem innych związków o aktywności pomocniczej: - kwas foliowy i siarczan cynku, osobno, prowadzą do zasadniczej poprawy liczebności plemników u osobników o obniżonej płodności i płodnych (Ebisch et al., 2006; Wong et al., 2002); - dodawanie L-argininy i poliamin in vitro, do plemników otrzymanych od mężczyzn z astenospermią okazało się korzystne dla ruchliwości plemników (Morales et al., 2003); - witamina B12, przy wysokich dawkach i długotrwałym traktowaniu (16 tygodni) jest bardzo użyteczna dla pacjentów dotkniętych oligozoospermią (Moriyama et al., 1987); - traktowanie osobników, dotkniętych różnym stopniem oligoastenospermii, argininą otworzyło znaczące perspektywy względem możliwości tej ostatniej (Aydin et al., 1995). - poziom koenzymu Q10 w plazmie nasiennej skorelowano z liczebnością i ruchliwością plemników (Mancini et al., 1994). [0006] Przedmiotem niniejszego wynalazku jest preparat złożony z dwóch różnych preparatów do podawania osobno, z których jeden zawiera argininę, witaminą A, witaminę E, witaminę A, witaminę B6, witaminę B9 (tj. kwas foliowy), witaminę B12, koenzym Q10, a drugi zawiera karnitynę, argininę, witaminę C i cynk. Faktem jest, że taki preparat okazał się użyteczny w leczeniu męskiej niepłodności, w szczególności w leczeniu oligoastenoteratozoospermii (zespołu OAT). [0007] Korzystnie, wymieniony wyżej pierwszy preparat zawiera 300 do 500 części wagowych argininy, 350 do 550 części wagowych witaminy A, 1 do 3 części wagowych witaminy B6, 0,0005 do 0,002 części wagowych witaminy B12, 0,1 do 0,3 części wagowych witaminy B9, 10 do 30 części wagowych koenzymu Q10 i 0,07 do 0,009 części wagowych selenu, podczas gdy wymieniony drugi preparat zawiera 100 do 300 części wagowych karnityny, 100 do 300 części wagowych argininy, 0,05 do 0,15 części wagowych witaminy C i 10 do 20 części wagowych cynku. Korzystniej, wymieniony pierwszy preparat zawiera 400 mg argininy, 450 mg witaminy A, 30 mg witaminy E, 2 mg witaminy B6, 0,001 mg witaminy B12, 0,2 mg witaminy B9, 20 mg koenzymu Q10, 0,0825 mg selenu, a wymieniony drugi preparat zawiera 200 mg karnityny, 200 mg argininy, 100 mg witaminy C, 15,2 mg cynku. [0008] Dodatkowo, preparat według niniejszego wynalazku może również zawierać znane zaróbki i/lub substancje pomocnicze, takie jak, na przykład, środki wypełniające, przeciwzbrylające, wiążące i/lub barwniki. W szczególności, preparat według niniejszego wynalazku obejmuje celulozę mikrokrystaliczną jako środek wypełniający, stearynian magnezu i/lub dwutlenek krzemu jako środki przeciwzbrylające i chlorofil i/lub kurkumę jako barwniki.
PZ/2292/AGR 3 EP 2 502 635 B1 [0009] Dwa powyżej wymienione preparaty podawane są w odstępach czasowych w zakresie od 8 do 14 godzin jeden od drugiego, korzystnie w zakresie od 10 do 12 godzin. [0010] W szczególności, wymieniony pierwszy preparat podawany jest rano, korzystnie przed śniadaniem, podczas gdy drugi preparat podawany jest wieczorem, korzystnie po kolacji. [0011] Wymienione preparaty podawane są przez okres czasu w zakresie od 4 do 8 miesięcy, korzystnie przez 6 miesięcy. [0012] Według dalszego wykonania wynalazku, powyżej wymieniony preparat jest połączonym preparatem do podawania równoczesnego, oddzielnego lub kolejnego, zdolnym do znaczącego poprawiania jakości nasienia u pacjentów dotkniętych zespołem OAT. [0013] Preparaty według niniejszego wynalazku korzystnie są wskazane do podawania doustnego, korzystniej w postaci tabletki, kapsułki lub granulki. [0014] Kolejnym przedmiotem niniejszego wynalazku jest zastosowanie dwóch różnych preparatów, które można podawać osobno, z których pierwszy zawiera argininę, witaminę A, witaminę E, witaminę B6, witaminę B9 (tj. kwas foliowy), witaminę B12, koenzym Q10, a drugi zawiera karnitynę, argininę, witaminę C i cynk, do leczenia męskiej niepłodności, w szczególności leczenia idiopatycznej oligoastenoteratozoospermii (zespołu OAT). [0015] W szczególności, dwa wspomniane wyżej preparaty podawane są w odstępach czasowych w zakresie od 8 do 14 godzin jeden od drugiego, korzystnie od 10 do 12 godzin. [0016] W szczególności, wymieniony pierwszy preparat podawany jest rano, korzystnie przed śniadaniem, podczas gdy wymieniony drugi preparat podawany jest wieczorem, korzystnie po kolacji. [0017] Wymienione preparaty podawane są przez okres czasu w zakresie od 4 do 8 miesięcy, korzystnie przez 6 miesięcy. PRZYKŁADY Przykład 1 [0018] Skład tabletki, do przyjmowania co rano, przed śniadaniem arginina 400 mg witamina A 450 mg witamina E 30 mg witamina B6 2 mg witamina B12 0,0011 mg witamina B9 (kwas foliowy) 0,2 mg koenzym Q10 20 mg selen 0,0825 mg celuloza mikrokrystaliczna 135,52 mg stearynian magnezu 15 mg
PZ/2292/AGR 4 EP 2 502 635 B1 dwutlenek krzemu 8 mg kurkuma 5 mg Przykład 2 [0019] Skład tabletki do przyjmowania co wieczór, po kolacji karnityna 200 mg arginina 200 mg witamina C 100 mg cynk 15,2 mg celuloza mikrokrystaliczna 106 mg stearynian magnezu 20 mg dwutlenek krzemu 10 mg chlorofil 2 mg CZĘŚĆ EKSPERYMENTALNA [0020] Włączono różne niepłodne pary i poddano je następującym testom wstępnym - dwa testy nasienia, wykonane w tym samym laboratorium, w odstępie około 2 miesiąca od siebie, z okresem abstynencji seksualnej na 4-5 dni przed i z zebraniem ejakulatu, całkowicie wydzielonego z cewki moczowej, od perineum do ujścia cewki, w trakcie okresu dobrego stanu zdrowia osobnika od przynajmniej dwóch poprzedzających miesięcy. Każdą próbkę nasienia sprawdzano, wyliczając następujące jej parametry, zgodnie z normami WHO 1999: objętość ejakulatu (ml), stężenie plemników/mm 3, całkowita ruchliwość (%) przy 45, przy 120 i przy 180 (odpowiednio rozdzielana na: ruch szybki postępowy (%), wolny postępowy (%), w miejscu (%), nieobecny (%)), normalna morfologia (%). - obliczano Współczynnik Nasienia (SI) (ang. Sperm Index) dla każdej próbki nasienia, w celu ułatwienia analiz statystycznych, według następującego wzoru: ( ) przy czym V to objętość ejakulatu (ml), C to stężenie plemników/ml, mot a to ruchliwość z ruchem szybkim postępowym (%), mot b to ruchliwość z ruchem wolnym postępowym (%), N to normalne kształty (%). W skrócie, SI jest próbą przedstawienia, w formie pojedynczej wartości liczbowej, całkowitej liczebności plemników o dobrej ruchliwości i normalnym kształcie w ejakulacie. Na przykład, ejakulat mający każdy parametr o minimalnej wartości w normie według WHO 1999 V = 2 ml; C = 20000000 plemników/ml; mot a = 25%; mot b = 25%; normalne kształty = 15%) ma SI = 1,8, jednakże rzeczywiście normalne nasienie będzie mieć SI 5,0.
PZ/2292/AGR 5 EP 2 502 635 B1 - Dodatkowo, wykonano następujące dodatkowe testy na każdej próbce nasienia: a) test z błękitem anilinowym, w celu oceny kondensacji i dojrzałości chromatyny plemników (wartość w normie: <50%) (Terquem i Dadoune, 1983); b) test z oranżem akrydyny, który wylicza uszkodzenia helisy DNA plemników (wartość w normie: <30%) (Tejada et al., 1984) c) test pęcznienia, który identyfikuje plemniki nieprawidłowe czynnościowo, czyli te o niższej zdolności do zapłodnienia, jak również plemniki o wyższej częstości niepowodzenia implantacji (wartość w normie: >60% (Check, 2006); d) test ARIC (reakcji akrosomalna po stymulacji jonoforem, ang. Acrosome Reaction to Ionophore Challenge), który ocenia zdolność plemników do penetracji do oocytów (wartość w normie: >14%). (Cummins et al., 1991). - Doppler moszny w kolorze, w celu zidentyfikowania istotnych patologii miąższu jąder, zmian chorobowych najądrzy potencjalnie podejrzewanych o tworzenie zatorów oraz obecności ciągłych refluksów żylnych przy hipotonii ortostatycznej wzdłuż wewnętrznych żył powrózka nasiennego. - Ultrasonografia przezodbytnicza, w celu zidentyfikowania istotnych patologii gruczołu krokowego, takich jak łagodny przerost gruczołu krokowego lub podejrzane zmiany nowotworowe oraz podejrzanych sygnałów świadczących o (pod-)niedrożnościach i/lub kamicy przewodów ejakulacyjnych i problemów z opróżnianiem bańki pęcherzyka nasiennego. - Kariotyp [0021] Ponadto, wykonano następujące dodatkowe badania: - cytologię i test hodowli z wydzieliny po masażu gruczołu krokowego (Colpi et al., 1982), po 7 dniach abstynencji, jedynie dla pacjentów, u których wywiad lub dane obiektywne lub ich wyniki ultrasonografii przezodbytniczej wskazywały lub rodziły podejrzenie występowania stanu patologicznego gruczołu krokowego w związku ze stanem zapalnym/zakażeniem. - FSH, LH, Testosteron, Prolaktyna, Estradiol z osocza, jedynie dla pacjentów ze stężeniem plemników poniżej 20000 plemników/mm 3. - Poszukiwanie mikrodelecji w Yq, jedynie u pacjentów ze stężeniem plemników poniżej 5000 plemników z witką/mm 3. [0022] Kryteria włączenia w niniejszym badaniu: - SI 5; - brak istotnych patologii, na podstawie dopplera moszny w kolorze (patrz wyżej); - brak istotnych patologii, na podstawie ultrasonografii przezodbytniczej (patrz wyżej); - normalny kariotyp i negatywny wynik poszukiwania mikrodelecji w Yq, w przypadkach wymagających takiego testu (patrz wyżej);
PZ/2292/AGR 6 EP 2 502 635 B1 - negatywny wynik testu cytologii dla wydzieliny z gruczołu krokowego lub pozytywny wynik testu cytologii (ale z negatywnym wynikiem z testu hodowli), po 2 tygodniach od zakończenia terapii antybiotykami, która trwała przez przynajmniej 30 dni; - normalny testosteron, prolaktyna i estradiol, w przypadkach gdy takie testy były wymagane (patrz wyżej); - FSH nie będący poniżej zakresu normalnego, w przypadkach gdzie wymagane było jego sprawdzenie (patrz wyżej), ponieważ niskie wartości dawałyby podstawy do terapii hormonalnej. [0023] W sumie włączono 40 randomizowanych pacjentów, którym podawano kompozycję z przykładu 1 każdego ranka, a kompozycję z przykładu 2 podawano każdego wieczoru, przez okres 6 miesięcy. [0024] Na koniec leczenia wszystkich pacjentów poproszono o poddanie się nowemu badaniu nasienia, według sposobów przedstawionych powyżej. WYNIKI [0025] Leczenie było dobrze tolerowane i nie obserwowano objawów powiązanych z terapią u żadnego z pacjentów. [0026] Objętość nasienia wzrosła znacznie z 4,07 ± 1,83 ml (X±SD, średnia ± odchylenie standardowe) przed leczeniem, do 4,55 ± 1,86 ml po leczeniu (p<0,001). [0027] Stężenie plemników wzrosło w bardzo istotny sposób z 26525 ± 25251 mm 3 (X±SD) przed leczeniem, do 34200 ± 28254 po leczeniu (p<0,0001). [0028] Całkowita Ruchliwość Plemników wzrosła z 47,40 ± 9,125% (X±SD) przed leczeniem, do 51,08 ± 11,711% po leczeniu przy 45 (p=0,011), z 44,10 ± 9,092% do 47,28 ± 10,238% przy 120 (p=0,018) oraz z 39,95 ± 9,546% do 44,90 ± 11,600% przy 180 (p=0,003) (test Wilcoxona). [0029] Plemniki z Normalną Morfologią wzrosły znacząco z 8,18 ± 4,454% (X±SD) przed leczeniem, do 10,15 ± 4,828% po leczeniu (p=0,001) (test Wilcoxona). [0030] Współczynnik Nasienia poprawił się znacząco, przechodząc od 0,820 ± 1,015 (X±SD) przed leczeniem, do 1,52±1,760 po leczeniu (p<0,001) (test dwustronny). [0031] Plemniki z dodatnim Testem Pęcznienia (dla 38 badanych pacjentów) nie zmieniały się znacząco, od 66,18 ± 11,392% (X±SD) przed leczeniem, do 67,11 ± 12,944% po leczeniu (p=0,34). [0032] Plemniki z dodatnim testem ARIC (dla 34 badanych pacjentów) wzrosły w sposób bardzo znaczący z 7,71 ± 3,928% (X±SD) przed leczeniem, do 10,15 ± 4,279% po leczeniu (p<0,001). [0033] Plemniki z nieprawidłowościami dojrzewania chromatyny, za testem z błękitem anilinowym (dla 39 badanych pacjentów) nie zmieniały się znacząco, przechodząc od 48,51 ± 15,841% (X±SD) przed leczeniem, do 45,72 ± 15,970% po leczeniu (p=0,113).
PZ/2292/AGR 7 EP 2 502 635 B1 [0034] Plemniki z nieprawidłowościami w DNA, wykrywanymi testem z oranżem akrydyny (dla 36 badanych pacjentów) spadły istotnie z 31,03 ± 13,185% (X±SD) przed leczeniem, do 25,36 ± 14,137 po leczeniu (p=0,013). [0035] Preparat według niniejszego wynalazku był tym samym skuteczny pod względem istotnego poprawiania wszystkich poszczególnych parametrów ocenianych w standardowym badaniu nasienia, w tym także Współczynnika Nasienia, który ma tą zaletę, że podsumowuje całkowitą liczebność obecnych w ejakulacie plemników o dobrej ruchliwości i normalnie ukształtowanych, w postaci pojedynczej wartości liczbowej. [0036] Szczególnie znacząca jest istotna wywołana terapią poprawa dla procentu nieprawidłowych plemników, zgodnie z testem z oranżem akrydyny, szczególnie obecnie, gdy integralność DNA w plemniku jest uznawana za znaczącą dla celu uzyskania ciąży donoszonej, zarówno spontanicznej jak i w wyniku technik wspomaganego rozrodu. [0037] Równie ważna jest istotna poprawa procentu plemników z pozytywnym wynikiem testu AIRC, co jest znakiem poprawionej zdolności plemników do zapładniania oocytu, a informacje takie są istotne zarówno przy próbach uzyskania spontanicznego zapłodnienia, jak i przy poszukiwaniu prawidłowych wskazań do zastosowania inseminacji domacicznej. [0038] Podsumowując, w dziedzinie leczenia męskiej niepłodności, w której obecnie obserwuje się prawie systematyczne stosowanie technik wspomaganego rozrodu a zwłaszcza ICSI, możliwość uzyskania istotnej poprawy plemników z zastosowaniem, u pacjentów dotkniętych idiopatyczną oligoastenoteratozoospermią (wstępnie właściwie wyselekcjonowanych, w zależności od możliwych czynników sprawczych ich dysspermii) terapii witaminami i związkami mineralnymi, gdy taka terapia jest prosta i bezpieczna, wydaje się całkiem interesujące, ponieważ zasadniczo brak do niej przeciwskazań.
PZ/2292/AGR 8 EP 2 502 635 B1 Zastrzeżenia 1. Preparat złożony z dwóch różnych preparatów do podawania osobno, z których jeden zawiera argininę, witaminę A, witaminę E, witaminę B6, witaminę B9, witaminę B12, koenzym Q10, a drugi zawiera karnitynę, argininę, witaminę C i cynk, do zastosowania w leczeniu męskiej niepłodności. 2. Preparat do zastosowania według zastrz. 1, w którym wymieniony pierwszy preparat zawiera 300 do 500 części wagowych argininy, 350 do 550 części wagowych witaminy A, 1 do 3 części wagowych witaminy B6, 0,0005 do 0,002 części wagowych witaminy B12, 0,1 do 0,3 części wagowych witaminy B9, 10 do 30 części wagowych koenzymu Q10 i 0,07 do 0,09 części wagowych selenu, a wymieniony drugi preparat zawiera 100 do 300 części wagowych karnityny, 100 do 300 części wagowych argininy, 0,05 do 0,15 części wagowych witaminy C i 10 do 20 części wagowych cynku. 3. Preparat do stosowania według zastrz. 1 i 2, w którym wymieniony pierwszy preparat zawiera około 400 mg argininy, około 450 mg witaminy A, około 30 mg witaminy E, około 2 mg witaminy B6, około 0,001 mg witaminy B12, około 0,2 mg witaminy B9, około 20 mg koenzymu Q10 i około 0,0825 mg selenu, a wymieniony drugi preparat zawiera około 200 mg karnityny, około 200 mg argininy, około 100 mg witaminy C i około15,2 mg cynku. 4. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, zawierający ponadto zaróbki i/lub substancje pomocnicze. 5. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, w którym wymienione preparaty są wskazane do podawania doustnego. 6. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, w którym wymienione preparaty są w postaci tabletki, kapsułki lub granulki. 7. Preparat według zastrz. 1 do zastosowania w leczeniu idiopatycznej oligoastenoteratozoospermii. 8. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, przy czym wymienione preparaty podawane są w odstępie czasowym w zakresie 8 do 14 godzin. 9. Preparat do zastosowania według zastrz. 8, przy czym wymienione preparaty podawane są w odstępie czasowym w zakresie 10 do 12 godzin. 10. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, przy czym wymieniony pierwszy preparat podawany jest rano, a wymieniony drugi preparat jest podawany wieczorem. 11. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, przy czym wymieniony pierwszy preparat podawany jest przed śniadaniem, a wymieniony drugi preparat podawany jest po kolacji. 12. Preparat do zastosowania według któregokolwiek z poprzedzających zastrzeżeń, przy czym podawanie następuje przez okres czasu w zakresie od 4 do 8 miesięcy.
PZ/2292/AGR 9 EP 2 502 635 B1 13. Preparat do zastosowania według zastrz. 12, przy czym podawanie następuje przez okres czasu wynoszący 6 miesięcy.