Czynniki warunkujące aktywność enzymów na przykładzie fosfatazy kwaśnej (EC fosfohydrolaza monoestrów ortofosforanowych kwaśne optimum).
|
|
- Wacława Gajda
- 7 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 Czynniki warunkujące aktywność enzymów na przykładzie fosfatazy kwaśnej (EC fosfohydrolaza monoestrów ortofosforanowych kwaśne optimum). Cel ćwiczenia Celem ćwiczenia jest wykazanie na przykładzie fosfatazy kwaśnej, że czynniki takie jak stężenie enzymu, temperatura, stężenie jonów wodorowych (ph) oraz inhibitory wpływają na szybkość reakcji enzymatycznych. Wprowadzenie Fosfatazy (fosfomonoesterazy) należą do enzymów klasy hydrolaz, podklasy esteraz i katalizują hydrolizę różnych estrów fosforanowych, zgodnie z reakcją: Rys.1. Ogólna reakcja katalizowana przez fosfatazy. Fosfatazy kwaśne charakteryzują się niską specyficznością substratową. Mogą katalizować defosforylację różnych naturalnych substratów, takich jak 3-fosfoglicerynian, fosfoenolopirogronian (PEP), fityna, ATP, czy ufosforylowane na tyrozynie białka. Ze względu na optimum ph działania fosfatazy zostały podzielone na dwie grupy: fosfatazy kwaśne, aktywne w zakresie ph 4,0 do 7,0; fosfatazy alkaliczne, aktywne w zakresie ph 9,0 do 11,0. Fosfatazy kwaśne występują w różnych organach roślin: w bulwach, nasionach, owocach, liścieniach, brodawkach korzeniowych i liściach. Na terenie komórki fosfatazy kwaśne zlokalizowane są w cytosolu, wakuolach lub ścianie komórkowej.. Funkcje biochemiczne fosfataz kwaśych w komórkach roślin nie zostały dokładnie poznane. Przypuszcza się, że uwalniają fosforan ze związków organicznych w warunkach niedoboru fosforanów, w warunkach stresu zasolenia lub deficytu wody, w warunkach stresu wywołanego atakiem patogenów, w ontogenezie. Do najbardziej poznanych enzymów roślinnych należą: fitaza oraz fosfatazy należące do nadrodziny fosfataz tyrozynowych. U zwierząt fosfataza kwaśna występuje głównie w lizosomach komórek kości, gruczołu krokowego, jelit, trzustki i nerek, w płytkach krwi i krwinkach czerwonych. Fosfataza kwaśna jest enzymem wskaźnikowym, wykorzystywanym w diagnostyce medycznej. Aktywność fosfatazy kwaśnej silnie wzrasta w niektórych chorobach nowotworowych, chorobach wątroby oraz w chorobach kości. Metody oznaczania aktywności fosfataz In vitro, aktywność fosfataz oznacza się zazwyczaj używając sztucznych substratów, takich jak: 2-glicerofosforan, fenylofosforan, fosforan fenoloftaleiny, p-nitrofenylofosforan (pnpp). Aktywność enzymu mierzy się ilością uwolnionego fosforanu lub części organicznej estru, po reakcji enzymu z substratem prowadzonej w ściśle określonych warunkach. Szczególnie dogodnym substratem jest p-nitrofenylofosforan, gdyż jeden z produktów reakcji po zalkalizowaniu środowiska przechodzi w formę barwną. Zasada metody oznaczania aktywności fosfatazy kwaśnej na ćwiczeniach Na ćwiczeniach wykorzystuje się wodny wyciąg fosfatazy kwaśnej z siewek pszenżyta. Substratem stosowanym na ćwiczeniach jest p-nitrofenylofosforan dwusodowy (pnpp). Reakcję hydrolizy tego związku przedstawia rysunek 2. Powstający produkt reakcji, p-nitrofenol (pnp), przyjmuje w środowisku zasadowym barwę żółtozieloną, a jego ilość jest miarą aktywności fosfatazy. 1
2 Rys. 2. Reakcja hydrolizy p-nitrofenylofosforanu katalizowana przez fosfatazę kwaśną. Sposoby wyrażania aktywności enzymów Miarą aktywności enzymu jest szybkość reakcji enzymatycznej (v 0 ) mierzona ilością substratu przekształconego w jednostce czasu lub ilością produktu wytworzonego w jednostce czasu. Aktywność enzymu wyraża się w jednostkach aktywności. Podstawową jednostką jest jednostka uniwersalna (standardowa). Za taką jednostkę przyjęto ilość enzymu, która katalizuje przemianę 1 µmola substratu w ciągu 1 min., w temperaturze 30 C i optymalnych warunkach ph oraz stężenia substratu. Na szybkość reakcji enzymatycznych wpływa szereg czynników, przede wszystkim stężenie substratu, stężenie enzymu, stężenie jonów wodorowych w środowisku reakcji, temperatura a także obecność inhibitorów. Odczynniki: 1. Ekstrakt enzymu z siewek pszenżyta M p-nitrofenylofosforan disodowy (pnpp) (substrat) 3. 0,1 M bufor Tris-octan o ph 4,0 4. 0,1 M bufor Tris-octan o ph 5,5 5. 0,1M bufor Tris-octan o ph 6,5 6. 0,1 M bufor Tris-octan o ph 8,0 7. 0,1 M NaOH 8. 0,02 M molibdenian amonu Studenci wykonują ćwiczenie w zespołach dwuosobowych. Na ćwiczeniach trzygodzinnych studenci badają wpływ stężenia enzymu, ph oraz inhibitorów na szybkość reakcji enzymatycznej. Na ćwiczeniach czterogodzinnych studenci badają wpływ wszystkich czynników na szybkość reakcji enzymatycznej. 1. Wpływ stężenia enzymu na szybkość przebiegu reakcji. W warunkach optymalnych szybkość reakcji enzymatycznej zmienia się proporcjonalnie do stężenia enzymu: im więcej jest cząsteczek enzymu, tym więcej cząsteczek substratu zostanie przekształconych w jednostce czasu. Badanie zależność szybkości reakcji od stężenia enzymu prowadzimy przy stałym wysokim stężeniu substratu, bo wówczas szybkość reakcji jest proporcjonalna do stężenia enzymu. Wykresem zależności szybkości reakcji od stężenia enzymu jest linia prosta (Rys. 3). Rys.3. Wpływ stężenia enzymu na szybkość reakcji. 2
3 Wykonanie. Do czterech ponumerowanych probówek (próby właściwe) odmierzyć kolejno po 0,25; 0,5; 0,75; i 1,0 ml ekstraktu enzymu (1), po 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4), a następnie uzupełnić ich zawartość wodą destylowaną do objętości 2 ml. Do probówki numer 5 (próba kontrolna) odmierzyć 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4) i 1,25 ml wody destylowanej. Wszystkie probówki umieścić na 5 min. w łaźni wodnej o temperaturze 30 o C. Po preinkubacji, nie wyjmując probówek z łaźni! dodać kolejno do wszystkich po 0,5 ml roztworu substratu (2), wymieszać i inkubować w łaźni jeszcze przez 15 min., licząc czas reakcji od momentu dodania substratu. Następnie przerwać reakcję dodając do wszystkich prób po 2,5 ml 0,1M NaOH (7), wymieszać. Zmierzyć absorbancję prób właściwych przy długości fali 420 nm w fotometrze ustawionym na zero wobec próby kontrolnej. Obliczenia: stężenia enzymu, dzieląc zmierzoną absorbancję przez współczynnik absorbancji dla 1µg p-nitrofenolu (p-np) równy 0,002, masę cząsteczkową p-nitrofenolu równą 139 oraz czas reakcji wynoszący 15 min., zgodnie z równaniem: 2. Wpływ ph na szybkość reakcji enzymatycznych. Enzymy białkowe zawierają w swoich cząsteczkach aminokwasy, których łańcuchy boczne mogą ulegać jonizacji, przez co umożliwiają zachowanie prawidłowej struktury przestrzennej. Ponadto, aminokwasy w centach aktywnych enzymów mogą pełnić swoje funkcje tylko w określonym stanie jonizacji. Jonizacja substratów oraz kompleksów ES także wpływa na szybkość reakcji enzymatycznych (rys.4). Stąd, wpływ ph na aktywność enzymu związany jest z wartością stałych dysocjacji: 1. grup czynnych w centrum aktywnym enzymu uczestniczących w wiązaniu substratu i katalizie. 2. grup funkcyjnych w cząsteczce substratu, którymi wiąże się on z enzymem. 3. innych grup w cząsteczce enzymu, których stan zjonizowania może gwarantować katalitycznie aktywną konformację. Każdy enzym posiada optymalną wartość ph, w której szybkość katalizowanej reakcji jest maksymalna. Niewielkie odchylenia od optimum powodują zmniejszenie szybkości reakcji, a duże odchylenia prowadzą do denaturacji białka enzymu i utraty aktywności. 3
4 Rys.4. Wpływ ph na aktywność enzymu. (Witwicki, Ardelt Elementy enzymologii PWN 1984). Optimum ph może ulegać pewnym zmianom zależnie od stopnia czystości preparatu enzymatycznego i temperatury środowiska. Wartość optymalnego ph działania enzymów zależy od rodzaju organizmu oraz lokalizacji enzymu w tkance, a nawet w przedziale komórkowym (Rys. 4). Dlatego wartość ph wewnątrz komórki może stanowić jeden z czynników regulacji metabolizmu. Wykonanie Do czterech kolejno ponumerowanych probówek (próby właściwe) odmierzyć po 0,5 ml enzymu, dodać po 0,75 ml wody destylowanej oraz po 0,75 ml buforów: do pierwszej buforu Tris-octan o ph 4,0 (3), do drugiej o ph 5,5 (4); do trzeciej o ph 6,5 (5) i do czwartej o ph 8,0 (6). Do probówki numer 5 (próba kontrolna) odmierzyć 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4) oraz 1,25 ml wody destylowanej. Wszystkie probówki umieścić w łaźni wodnej o temperaturze 30 o C na 5 min. Po preinkubacji, nie wyjmując probówek z łaźni! dodać do wszystkich probówek po 0,5 ml roztworu substratu (2), wymieszać i inkubować jeszcze przez 15 min., licząc czas reakcji od momentu dodania substratu. Następnie przerwać reakcję dodając do wszystkich prób po 2,5 ml 0,1M NaOH (7). Po wymieszaniu, zmierzyć absorbancję prób właściwych przy długości fali 420 nm w fotometrze ustawionym na zero wobec próby kontrolnej. Obliczenia: ph, zgodnie z równaniem: dzieląc zmierzoną absorbancję przez współczynnik absorbancji dla 1µg p-nitrofenolu (p-np) równy 0,002, masę cząsteczkową p-nitrofenolu równą 139 oraz czas reakcji wynoszący 15 min. 3. Wpływ temperatury na aktywność enzymów Niska temperatura hamuje działanie enzymów z powodu niskiej energii kinetycznej reagujących cząsteczek. Szybkość reakcji enzymatycznych wzrasta wraz z podwyższeniem temperatury. Wiąże się to ze wzrostem energii kinetycznej reagujących cząstek i większą częstotliwością ich zderzeń. Wzrost aktywności enzymatycznej w zależności od temperatury opisuje współczynnik temperaturowy Q10, określający jak zmienia się szybkość reakcji przy 4
5 wzroście temperatury o 10 o C. Zgodnie z regułą van t Hoffa podwyższenie temperatury o 10 C około dwukrotnie przyspiesza reakcje enzymatyczne. W temperaturze optymalnej szybkość reakcji jest największa (Rys.5). Zakres wartości temperatury optymalnej może się zmieniać w zależności od czasu trwania reakcji, ph oraz obecności innych substancji w mieszaninie reakcyjnej. Przy wzroście temperatury powyżej optymalnej następuje gwałtowne obniżenie szybkości reakcji, co jest związane z denaturacją cieplną białka enzymu. Rys.5. Wpływ temperatury na aktywność enzymu. Współczynnik Q 10 ma zastosowanie jedynie w zakresie temperatur nie powodujących denaturacji białka enzymu. Zazwyczaj obecność substratu i optymalne ph środowiska reakcji zmniejszają podatność białka enzymu na denaturację. Wykonanie Do trzech kolejno ponumerowanych probówek (próby właściwe) odmierzyć po 0,5 ml ekstraktu enzymatycznego (1), po 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4) i uzupełnić je wodą destylowaną do objętości 2,0 ml. Następnie pierwszą umieścić w łaźni lodowej o temperaturze 4 o C, drugą w łaźni o temperaturze 25 o C, trzecią w łaźni o temperaturze 35 o C. Po 5 min. preinkubacji, nie wyjmując probówek z łaźni!, do każdej dodać po 0,5 ml p- nitofenylofosforanu (2), wymieszać zawartość i prowadzić reakcję w poszczególnych temperaturach jeszcze przez 15 min. Równolegle nastawić próby kontrolne dla każdej reakcji dodając do każdej z nich po 0,5ml ekstraktu enzymatycznego (1), 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4) i 1,25 ml wody destylowanej. Następnie przerwać reakcję dodając do wszystkich prób właściwych i kontrolnych po 2,5 ml 0,1M NaOH (7) i wymieszać zawartość. Zmierzyć absorbancję prób właściwych przy długości fali 420 nm w fotometrze ustawionym na zero wobec próby kontrolnej. Obliczenia ph, zgodnie z równaniem: dzieląc zmierzoną absorbancję przez współczynnik absorbancji dla 1µg p-nitrofenolu (p-np) równy 0,002, masę cząsteczkową p-nitrofenolu równą 139 oraz czas reakcji wynoszący 15 min. 5
6 2. Badanie termostabilności fosfatazy kwaśnej. Większość enzymów ulega powolnej denaturacji nawet w temperaturach optymalnych. Podatność enzymu na denaturację cieplną, tak zwana termostabilność zależy od struktury molekularnej oraz pochodzenia enzymu. Cecha termostabilności enzymu zapisana jest w genie. Jak wykazały badania, struktura enzymów pochodzących z organizmów termofilnych jest stabilizowana dużą ilością wiązań jonowych oraz silnym upakowaniem hydrofobowego wnętrza cząsteczki. Najwyższa temperatura, w której jeszcze nie zachodzi termiczna inaktywacja enzymu w danych warunkach określa termostabilność enzymu. Enzymy termostabilne znalazły zastosowanie w technikach rekombinacji DNA, w przemyśle papierniczym, w przemyśle chemicznym czy przetwórczym Termostabilność enzymu badamy inkubując roztwór enzymu w różnych temperaturach przez określony czas. Następnie doprowadzamy roztwór enzymu do temperatury optymalnej, dodajemy substrat i pozostałe składniki reakcji, oznaczamy aktywność i porównujemy z aktywnością tego enzymu w optymalnych warunkach. Wykonanie Do trzech kolejno ponumerowanych probówek (próby właściwe) odmierzyć po 0,5 ml ekstraktu enzymatycznego (1), a następnie pierwszą umieścić w łaźni wodnej o temperaturze 30 o C, drugą w łaźni o temperaturze 45 o C, trzecią w łaźni o temperaturze 60 o C i przetrzymywać przez 30 min. Następnie, po schłodzeniu w lodzie przez 5 min., wszystkie probówki umieścić w łaźni o temperaturze 30 o C dodać do każdej z nich po 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4), po 0,75 ml H 2 O dest. i po 5 min. preinkubacji, nie wyjmując probówek z łaźni!, dodać do każdej z nich po 0,5 ml p-nitrofenylofosforanu (2), wymieszać zawartość i inkubować jeszcze przez 15 min. Do probówki czwartej (próba kontrolna) odmierzyć 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4) i 1,25 ml H 2 O dest. oraz 0,5 ml p-nitrofenylofosforanu (2). Próbę kontrolną inkubować razem z próbami właściwymi. Po 15 min. przerwać reakcję dodając do wszystkich czterech probówek po 2,5 ml 0,1M NaOH (7) i wymieszać. Następnie zmierzyć absorbancję prób właściwych przy długości fali 420 nm w fotometrze ustawionym na zero wobec próby kontrolnej. Obliczenia temperatury, zgodnie z równaniem: dzieląc zmierzoną absorbancję przez współczynnik absorbancji dla 1µg p-nitrofenolu (p-np) równy 0,002, masę cząsteczkową p-nitrofenolu równą 139 oraz czas reakcji wynoszący 15 min. 2. Inhibicja aktywności enzymów. Aktywność wielu enzymów może być hamowana poprzez związanie działających w sposób specyficzny inhibitorów. Inhibitory hamują działanie enzymów wywołując zmiany w obrębie centrum aktywnego. Inhibitorami mogą być metabolity komórkowe, leki, trucizny lub inne substancje obce dla organizmu (ksenobiotyki). W zależności od sposobu działania inhibitora wyróżniamy inhibicję nieodwracalną i odwracalną. 6
7 W inhibicji nieodwracalnej inhibitor wiąże się kowalencyjnie z enzymem. Przykładem takiego inhibitora jest penicylina, która wytwarza wiązanie kowalencyjne z grupą OH Ser w centrum aktywnym transpeptydazy peptydoglikanu, enzymu uczestniczącego w syntezie ściany komórkowej bakterii i w rezultacie powoduje śmierć bakterii. Podobne działanie wykazuje DFP diizopropylofluorofosforan, stosowany jako pestycyd, który blokuje grupy OH seryny (Ser) w centrum aktywnym esterazy acetylocholinowej (Rys.6). Esteraza acetylocholinowa jest enzymem, który uczestniczy w przekazywaniu sygnałów w układzie nerwowym zwierząt. Rys. 6. Kompleks DFP (kolor niebieski) z grupą OH Ser w centrum aktywnym esterazy cholinowej. Inhibicję odwracalną charakteryzuje szybka dysocjacja kompleksu enzym-inhibitor. Wyróżniamy dwa typy inhibicji odwracalnej: współzawodniczą (kompetycyjną) i niewspółzawodniczą (niekompetycyjną). Inhibitor kompetycyjny (Rys.7) przyłącza się tylko do wolnego enzymu (E) i blokuje jego centrum aktywne, przez co zmniejsza liczbę cząsteczek enzymu wiążących substrat. Ten typ inhibitora zwiększa wartość liczbową stałej Michaelisa (K m ) ale nie zmienia wartości Vmax (szybkości maksymalnej reakcji). Przy określonym stężeniu inhibitora można cofnąć inhibicję kompetycyjną poprzez zwiększenie stężenia substratu. Wiele leków działa jako inhibitory współzawodnicze kluczowych enzymów przemian metabolicznych. Rys. 6. Przykłady inhibitorów kom petycyjnych dehydrogenazy bursztynianowej. Stosowany na ćwiczeniach molibdenian amonu jest inhibitorem kompetycyjnym fosfatazy kwaśnej. Rys.8. Wzór molibdenianu amonu. Inhibitor niewspółzawodniczy (niekompetycyjny) może przyłączyć się zarówno do wolnego enzymu (E) jak i do kompleksu enzym-substrat (ES). Inhibitor niekompetycyjny obniża wartość V max ale nie zmienia wartości K m ponieważ nie zmniejsza liczby cząsteczek enzymu wiążących substrat. Tego typu inhibicji nie można cofnąć poprzez zwiększenie stężenia substratu, lecz należy zastosować związki reagujące z inhibitorem. Przykładem inhibitora niekompetycyjnego jest pepstatyna A (Rys.9) hamująca aktywność reniny, enzymu 7
8 uczestniczącego w mechanizmie regulacji ciśnienia tętniczego krwi lub jony metali, które mogą reagować z grupami SH w białku enzymu powodując zmiany konformacyjne. Rys.9. Pepstatyna A inhibitor niekompetycyjny enzymu reniny. Wykonanie Do dwu ponumerowanych probówek (próby właściwe) odmierzyć po 0,5 ml enzymu oraz po 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4). Następnie do probówki pierwszej dodać 0,25 ml molibdenianu amonu (8). Obie probówki wstawić do łaźni wodnej o temperaturze 30 o C. Po 10 min. inkubacji zawartość obu probówek uzupełnić wodą destylowaną do objętości 2,0 ml. Jednocześnie nastawić próby kontrolne. Do probówki numer 3 (pierwsza próba kontrolna) odmierzyć 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5., 0,25 ml molibdenianu amonu (8) oraz 1,0 ml wody destylowanej, a do probówki numer 4 (druga próba kontrolna) odmierzyć 0,75 ml buforu Tris-octan o ph 5,5 (4), oraz 1,25 ml wody destylowanej. Następnie nie wyjmując probówek z łaźni! do wszystkich prób, dodać po 0,5 ml p-nitrofenylofosforanu (2), wymieszać i inkubować w łaźni jeszcze przez 15 min, licząc czas reakcji od momentu dodania substratu. Po 15 min. przerwać reakcję dodając do wszystkich prób po 2,5 ml 0,1 M NaOH (7). Wymieszać zawartość probówek i zmierzyć absorbancję prób właściwych przy długości fali 420 nm w fotometrze ustawionym na zero wobec odpowiednich prób kontrolnych. Obliczenia ph, zgodnie z równaniem: dzieląc zmierzoną absorbancję przez współczynnik absorbancji dla 1µg p-nitrofenolu (p-np) równy 0,002, masę cząsteczkową p-nitrofenolu równą 139 oraz czas reakcji wynoszący 15 min. Opracowanie wyników 1. Sporządzić wykresy zależności szybkości reakcji od stężenia enzymu, wartości ph oraz temperatury odkładając na osi OY (rzędnych) szybkość reakcji (v 0 ), a na osi OX ( odciętych) odpowiednio ml enzymu, wartości ph, wartości temperatury. 2. Porównać wartości v 0 uzyskane dla poszczególnych temperatur i obliczyć ile razy wzrosła szybkość reakcji prowadzonej w t=35 o C w porównaniu do wyniku uzyskanego w t=25 o C. 3. W doświadczeniu dotyczącym badania termostabilności fosfatazy kwaśnej, wyrazić w procentach zmiany aktywności enzymu przetrzymywanego w temperaturze 45 o C i 8
9 60 o C w stosunku do aktywności enzymu przetrzymywanego w temperaturze 30 o i sformułować odpowiedni wniosek. 4. Porównując aktywność fosfatazy kwaśnej w reakcji bez inhibitora (probówka druga) z aktywnością enzymu w obecności inhibitora (probówka pierwsza) obliczyć procent zahamowania reakcji przez zastosowany inhibitor. Pytania 1. Podaj ogólną reakcję katalizowaną przez fosfatazy oraz klasę enzymów do której należą. 2. Wymień czynniki kinetyczne wpływające na aktywność enzymów. Omów działanie jednego z nich. 3. Podaj przykłady naturalnych substratów fosfatazy kwaśnej. Co może być miarą aktywności enzymu. Podaj definicję jednostki uniwersalnej. 4. Napisz reakcję zachodzącą podczas oznaczania fosfatazy kwaśnej na ćwiczeniach. Podaj nazwy substratu i produktów reakcji. 5. Podczas oznaczania aktywności fosfatazy kwaśnej w mieszaninie reakcyjnej wykryto 200 μmoli p-nitrofenolu. Oblicz ile μg substratu uległo rozłożeniu. 6. Oblicz ile μmoli p-nitrofenylofosforanu uległo hydrolizie z udziałem fosfatazy kwaśnej, jeżeli po 15 min. reakcji wartość absorbancji wynosiła 0,35, a 1 μg p-nitrofenolu daje absorbancję równą 0,002. Literatura 1. Berg, J.M., Tymoczko J.L., Stryer L. Biochemia. Wydawnictwo Naukowe PWN Witwicki J. Ardelt W. Elementy enzymologii PWN Senna R., Simonin V., Silva-Neto M.A.C., Fialho E Induction of acid phosphatase activity during germination of maize (Zea mays) seeds. Plant Phys. Bioch. 44, Van Etten R.L., Waymack D.M., Rehkop D.M Transition metal ion inhibition of enzyme-catalyzed phosphate ester displacement reactions. J.Am. Chem. Soc. 96,
Odczynniki. dzieląc zmierzoną absorbancję przez współczynnik absorbancji dla 1µg p-nitrofenolu
Wyznaczanie stałej Michaelisa (Km), Vmax oraz określanie typu inhibicji aktywności fosfatazy kwaśnej (EC 3.1.3.2 fosfohydrolaza monoestrów ortofosforanowych kwaśne optimum). Cel ćwiczenia Celem ćwiczenia
Bardziej szczegółowoWłaściwości kinetyczne fosfatazy kwaśnej z ziemniaka
Właściwości kinetyczne fosfatazy kwaśnej z ziemniaka Celem ćwiczenia jest zapoznanie się metodyką wyznaczania szybkości reakcji Vmax oraz stałej Michaelisa Menten dla fosfatazy kwaśnej z ziemniaka WPROWADZENIE
Bardziej szczegółowoPrzemiana materii i energii - Biologia.net.pl
Ogół przemian biochemicznych, które zachodzą w komórce składają się na jej metabolizm. Wyróżnia się dwa antagonistyczne procesy metabolizmu: anabolizm i katabolizm. Szlak metaboliczny w komórce, to szereg
Bardziej szczegółowo1. Oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej i jej zależności od stężenia enzymu oraz żółci jako modulatora reakcji enzymatycznej.
ĆWICZENIE OZNACZANIE AKTYWNOŚCI LIPAZY TRZUSTKOWEJ I JEJ ZALEŻNOŚCI OD STĘŻENIA ENZYMU ORAZ ŻÓŁCI JAKO MODULATORA REAKCJI ENZYMATYCZNEJ. INHIBICJA KOMPETYCYJNA DEHYDROGENAZY BURSZTYNIANOWEJ. 1. Oznaczanie
Bardziej szczegółowoKINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY
Ćwiczenie nr 2 KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY I. Kinetyka hydrolizy sacharozy reakcja chemiczna Zasada: Sacharoza w środowisku kwaśnym ulega hydrolizie z wytworzeniem -D-glukozy i -D-fruktozy. Jest to reakcja
Bardziej szczegółowoLaboratorium 5. Wpływ temperatury na aktywność enzymów. Inaktywacja termiczna
Laboratorium 5 Wpływ temperatury na aktywność enzymów. Inaktywacja termiczna Prowadzący: dr inż. Karolina Labus 1. CZĘŚĆ TEORETYCZNA Szybkość reakcji enzymatycznej zależy przede wszystkim od stężenia substratu
Bardziej szczegółowoKINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA)
Ćwiczenie nr 2 KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA) ĆWICZENIE PRAKTYCZNE I. Kinetyka hydrolizy sacharozy reakcja chemiczna Zasada: Sacharoza w środowisku kwaśnym ulega hydrolizie
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 14 i 15. zjazd 2 ćwiczenie nr 2 dla e-rolnictwa
Ćwiczenie 14 i 15. zjazd 2 ćwiczenie nr 2 dla e-rolnictwa Badanie wpływu róŝnych czynników na szybkość reakcji enzymatycznej. Wyznaczanie wartości stałej Michaelisa-Menten w reakcji katalizowanej przez
Bardziej szczegółowoENZYMY. KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH
Ćwiczenie 7 ENZYMY. KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH Część doświadczalna obejmuje: - wyznaczenie optimum ph dla reakcji katalizowanej przez kwaśną fosfatazę - wyznaczenie szybkości początkowej reakcji katalizowanej
Bardziej szczegółowoProjektowanie Procesów Biotechnologicznych
Projektowanie Procesów Biotechnologicznych wykład 14 styczeń 2014 Kinetyka prostych reakcji enzymatycznych Kinetyka hamowania reakcji enzymatycznych 1 Enzymy - substancje białkowe katalizujące przemiany
Bardziej szczegółowoBadanie termostabilności oraz wpływu aktywatorów i inhibitorów na działanie α-amylazy [EC ]
Badanie termostabilności oraz wpływu aktywatorów i inhibitorów na działanie α-amylazy [EC 3.2.1.1.] Termostabilność enzymów Dla większości enzymów zmiany denaturacyjne zachodzą bardzo intensywnie powyżej
Bardziej szczegółowoEnzymologia SYLABUS A. Informacje ogólne
Enzymologia A. Informacje ogólne Elementy sylabusu Nazwa jednostki prowadzącej kierunek Nazwa kierunku studiów Poziom kształcenia Profil studiów Forma studiów Kod Język Rodzaj Rok studiów /semestr Wymagania
Bardziej szczegółowoWpływ ph i temperatury na aktywność enzymów na przykładzie α-amylazy [EC ]
Wpływ ph i temperatury na aktywność enzymów na przykładzie α-amylazy [EC 3.2.1.1.] Szybkość katalizowanej przez enzym przemiany danego substratu w określony produkt jest ściśle uzależniona od stężenia
Bardziej szczegółowodata ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ Amidohydrolazy (E.C.3.5.1 oraz E.C.3.5.2) są enzymami z grupy hydrolaz o szerokim powinowactwie
Bardziej szczegółowoBiochemia Ćwiczenie 7 O R O P
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /2 podpis asystenta ĆWICZENIE 6 FSFATAZY SCZA KRWI Wstęp merytoryczny Fosfatazy są enzymami należącymi do klasy hydrolaz, podklasy fosfomonoesteraz. Hydrolizują
Bardziej szczegółowoBliskie spotkania z biologią METABOLIZM. dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW. Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki
Bliskie spotkania z biologią METABOLIZM dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki Metabolizm całokształt przemian biochemicznych i towarzyszących
Bardziej szczegółowo3. Badanie kinetyki enzymów
3. Badanie kinetyki enzymów Przy stałym stężeniu enzymu, a przy zmieniającym się początkowym stężeniu substratu, zmiany szybkości reakcji katalizy, wyrażonej jako liczba moli substratu przetworzonego w
Bardziej szczegółowoBiochemia Ćwiczenie 4
Imię i nazwisko Uzyskane punkty Nr albumu data /2 podpis asystenta ĆWICZENIE 4 KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH Wstęp merytoryczny Peroksydazy są enzymami występującymi powszechne zarówno w świecie roślinnym
Bardziej szczegółowoMechanizmy działania i regulacji enzymów
Mechanizmy działania i regulacji enzymów Enzymy: są katalizatorami, które zmieniają szybkość reakcji, same nie ulegając zmianie są wysoce specyficzne ich aktywność może być regulowana m.in. przez modyfikacje
Bardziej szczegółowoANALIZA TŁUSZCZÓW WŁAŚCIWYCH CZ II
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska ANALIZA TŁUSZCZÓW WŁAŚCIWYCH CZ II ĆWICZENIE 8 ZADANIE 1 HYDROLIZA LIPIDÓW MLEKA ZA POMOCĄ LIPAZY TRZUSTKOWEJ Lipazy (EC 3.1) to enzymy należące
Bardziej szczegółowoOZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY)
Ćwiczenie 8 OZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY) Część doświadczalna obejmuje: - sączenie Ŝelowe ekstraktu uzyskanego z bielma niedojrzałych nasion kukurydzy - oznaczanie aktywności
Bardziej szczegółowoEnzymy katalizatory biologiczne
Enzymy katalizatory biologiczne Kataliza zjawisko polegające na obniżeniu energii aktywacji reakcji i zwiększeniu szybkości reakcji chemicznej i/lub skierowaniu reakcji na jedną z termodynamicznie możliwych
Bardziej szczegółowoOznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska Oznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną ĆWICZENIE 5 OZNACZANIE AKTYWNOŚCI -AMYLAZY SŁODU METODĄ KOLORYMETRYCZNĄ Enzymy
Bardziej szczegółowoKinetyka chemiczna jest działem fizykochemii zajmującym się szybkością i mechanizmem reakcji chemicznych w różnych warunkach. a RT.
Ćwiczenie 12, 13. Kinetyka chemiczna. Kinetyka chemiczna jest działem fizykochemii zajmującym się szybkością i mechanizmem reakcji chemicznych w różnych warunkach. Szybkość reakcji chemicznej jest związana
Bardziej szczegółowoWydział Chemiczny Politechniki Gdańskiej Katedra Technologii Leków i Biochemii
Wydział Chemiczny Politechniki Gdańskiej Katedra Technologii Leków i Biochemii Badanie wpływu temperatury, ph, aktywatorów i inhibitorów na aktywność α-amylazy Wstęp Szybkość reakcji enzymatycznej jest
Bardziej szczegółowoENZYMOLOGIA. Ćwiczenie 4. α-amylaza (cz. I) Oznaczanie aktywności enzymu metodą kolorymetryczną
ENZYMOLOGIA Wydział Nauk o Żywności i Rybactwa Centrum Bioimmobilizacji i Innowacyjnych Materiałów Opakowaniowych ul. Klemensa Janickiego 35 71-270 Szczecin Ćwiczenie 4 α-amylaza (cz. I) Oznaczanie aktywności
Bardziej szczegółowoRoztwory buforowe (bufory) (opracowanie: dr Katarzyna Makyła-Juzak)
Roztwory buforowe (bufory) (opracowanie: dr Katarzyna Makyła-Juzak) 1. Właściwości roztworów buforowych Dodatek nieznacznej ilości mocnego kwasu lub mocnej zasady do czystej wody powoduje stosunkowo dużą
Bardziej szczegółowoKINETYKA INWERSJI SACHAROZY
Dorota Warmińska, Maciej Śmiechowski Katedra Chemii Fizycznej, Wydział Chemiczny, Politechnika Gdańska KINETYKA INWERSJI SACHAROZY Wstęp teoretyczny Kataliza kwasowo-zasadowa Kataliza kwasowo-zasadowa
Bardziej szczegółowoLaboratorium 8. Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych
Laboratorium 8 Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych Literatura zalecana: Jakubowska A., Ocena toksyczności wybranych cieczy jonowych. Rozprawa doktorska, str. 28 31.
Bardziej szczegółowoOznaczanie aktywności proteolitycznej trypsyny metodą Ansona
Oznaczanie aktywności proteolitycznej trypsyny metodą Ansona Wymagane zagadnienia teoretyczne 1. Enzymy proteolityczne, klasyfikacja, rola biologiczna. 2. Enzymy proteolityczne krwi. 3. Wewnątrzkomórkowa
Bardziej szczegółowoPRZEWODNIK DYDAKTYCZNY PRZEDMIOTU
PRZEWODNIK DYDAKTYCZNY PRZEDMIOTU (SYLABUS) NAZWA JEDNOSTKI PROWADZĄCEJ KIERUNEK: Zakład Biologii Molekularnej NAZWA KIERUNKU: Biotechnologia PROFIL KSZTAŁCENIA: ogólnoakademicki SPECJALNOŚĆ: Biotechnologia
Bardziej szczegółowoOZNACZANIE STĘŻENIA GLUKOZY WE KRWI METODĄ ENZYMATYCZNĄ-OXY
OZNACZANIE STĘŻENIA GLUKOZY WE KRWI METODĄ ENZYMATYCZNĄ-OXY ZASADA OZNACZENIA Glukoza pod wpływem oksydazy glukozowej utlenia się do kwasu glukonowego z wytworzeniem nadtlenku wodoru. Nadtlenek wodoru
Bardziej szczegółowoBadanie szybkości hydrolizy lipidów mleka i oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej
Badanie szybkości hydrolizy lipidów mleka i oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej Cel ćwiczenia Celem ćwiczenia jest poznanie alkacymetrycznej metody oznaczania aktywności lipazy trzustkowej z użyciem
Bardziej szczegółowoCzynniki wpływające na szybkość reakcji enzymatycznych. Rozdział barwników roślinnych.
Regulamin porządkowy pracy w laboratorium w Katedrze Biochemii. 1. Do udziału w zajęciach laboratoryjnych dopuszczeni są studenci/uczniowie po przeszkoleniu w zakresie BHP w związku z wykonywaniem czynności
Bardziej szczegółowoHYDROLIZA SOLI. 1. Hydroliza soli mocnej zasady i słabego kwasu. Przykładem jest octan sodu, dla którego reakcja hydrolizy przebiega następująco:
HYDROLIZA SOLI Hydroliza to reakcja chemiczna zachodząca między jonami słabo zdysocjowanej wody i jonami dobrze zdysocjowanej soli słabego kwasu lub słabej zasady. Reakcji hydrolizy mogą ulegać następujące
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 8 Wyznaczanie stałej szybkości reakcji utleniania jonów tiosiarczanowych
CHEMI FIZYCZN Ćwiczenie 8 Wyznaczanie stałej szybkości reakcji utleniania jonów tiosiarczanowych W ćwiczeniu przeprowadzana jest reakcja utleniania jonów tiosiarczanowych za pomocą jonów żelaza(iii). Przebieg
Bardziej szczegółowoBADANIE WŁASNOŚCI KOENZYMÓW OKSYDOREDUKTAZ
KATEDRA BIOCHEMII Wydział Biologii i Ochrony Środowiska BADANIE WŁASNOŚCI KOENZYMÓW OKSYDOREDUKTAZ ĆWICZENIE 2 Nukleotydy pirydynowe (NAD +, NADP + ) pełnią funkcję koenzymów dehydrogenaz przenosząc jony
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 14. Maria Bełtowska-Brzezinska KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH
Ćwiczenie 14 aria Bełtowska-Brzezinska KINETYKA REAKCJI ENZYATYCZNYCH Zagadnienia: Podstawowe pojęcia kinetyki chemicznej (szybkość reakcji, reakcje elementarne, rząd reakcji). Równania kinetyczne prostych
Bardziej szczegółowoInżynieria Środowiska
ROZTWORY BUFOROWE Roztworami buforowymi nazywamy takie roztwory, w których stężenie jonów wodorowych nie ulega większym zmianom ani pod wpływem rozcieńczania wodą, ani pod wpływem dodatku nieznacznych
Bardziej szczegółowoKINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH Wyznaczenie stałej Michaelisa i maksymalnej szybkości reakcji hydrolizy sacharozy katalizowanej przez inwertazę.
KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH Wyznaczenie stałej Michaelisa i maksymalnej szybkości reakcji hydrolizy sacharozy katalizowanej przez inwertazę. (Chemia Fizyczna I) Maria Bełtowska-Brzezinska, Karolina
Bardziej szczegółowoOznaczanie mocznika w płynach ustrojowych metodą hydrolizy enzymatycznej
Oznaczanie mocznika w płynach ustrojowych metodą hydrolizy enzymatycznej Wprowadzenie: Większość lądowych organizmów kręgowych część jonów amonowych NH + 4, produktu rozpadu białek, wykorzystuje w biosyntezie
Bardziej szczegółowoĆwiczenie IX KATALITYCZNY ROZKŁAD WODY UTLENIONEJ
Wprowadzenie Ćwiczenie IX KATALITYCZNY ROZKŁAD WODY UTLENIONEJ opracowanie: Barbara Stypuła Celem ćwiczenia jest poznanie roli katalizatora w procesach chemicznych oraz prostego sposobu wyznaczenia wpływu
Bardziej szczegółowo6. Wykorzystanie tyrozynazy otrzymywanej z pieczarki dwuzarodnikowej (Agaricus Bisporus) do produkcji L-DOPA
6. Wykorzystanie tyrozynazy otrzymywanej z pieczarki dwuzarodnikowej (Agaricus Bisporus) do produkcji L-DOPA L-DOPA (L-3,4-dihydroksyfenyloalanina) jest naturalnym prekursorem dopaminy, jednego z najważniejszych
Bardziej szczegółowoOznaczenie aktywności aminotransferazy alaninowej.
Oznaczenie aktywności aminotransferazy alaninowej. Zajęcia 3 godzinne w parach, zajęcia 4 godzinne indywidualnie. Cel ćwiczenia Ćwiczenie ma na celu zapoznanie się z metodą oznaczenia aktywności aminotransferazy
Bardziej szczegółowoKINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH
ĆWICZENIE 8 KINETYKA REAKCJI ENZYMATYCZNYCH Wyznaczanie stałej Michaelisa i szybkości maksymalnej reakcji utleniania gwajakolu przez H 2 2, katalizowanej przez peroksydazę chrzanową. Badanie wpływu siarczanu
Bardziej szczegółowoSprawozdzanie z ćwiczenia nr 3 - Kinetyka enzymatyczna
Sprawozdzanie z ćwiczenia nr 3 - Kinetyka enzymatyczna Imię i nazwisko..... Data... UZYSKANE WYNIKI LICZBOWE (wartości liczbowe i wymiar) Stała Michaelisa dla H 2 O 2, Km:... Prędkość maksymalna Vmax:...
Bardziej szczegółowoOZNACZANIE ŻELAZA METODĄ SPEKTROFOTOMETRII UV/VIS
OZNACZANIE ŻELAZA METODĄ SPEKTROFOTOMETRII UV/VIS Zagadnienia teoretyczne. Spektrofotometria jest techniką instrumentalną, w której do celów analitycznych wykorzystuje się przejścia energetyczne zachodzące
Bardziej szczegółowoKinetyka reakcji hydrolizy sacharozy katalizowanej przez inwertazę
Kinetyka reakcji hydrolizy sacharozy katalizowanej przez inwertazę Prowadzący: dr hab. inż. Ilona WANDZIK mgr inż. Sebastian BUDNIOK mgr inż. Marta GREC mgr inż. Jadwiga PASZKOWSKA Miejsce ćwiczenia: sala
Bardziej szczegółowoOZNACZANIE ZAWARTOŚCI MANGANU W GLEBIE
OZNACZANIE ZAWARTOŚCI MANGANU W GLEBIE WPROWADZENIE Przyswajalność pierwiastków przez rośliny zależy od procesów zachodzących między fazą stałą i ciekłą gleby oraz korzeniami roślin. Pod względem stopnia
Bardziej szczegółowoSEMINARIUM 8:
SEMINARIUM 8: 24.11. 2016 Mikroelementy i pierwiastki śladowe, definicje, udział w metabolizmie ustroju reakcje biochemiczne zależne od aktywacji/inhibicji przy udziale mikroelementów i pierwiastków śladowych,
Bardziej szczegółowoHYDROLIZA SOLI. ROZTWORY BUFOROWE
Ćwiczenie 9 semestr 2 HYDROLIZA SOLI. ROZTWORY BUFOROWE Obowiązujące zagadnienia: Hydroliza soli-anionowa, kationowa, teoria jonowa Arrheniusa, moc kwasów i zasad, równania hydrolizy soli, hydroliza wieloetapowa,
Bardziej szczegółowoa) hydroliza octanu n-butylu b) hydroliza maślanu p-nitrofenylu 4/7 O O PLE bufor ph 7,20 OH H 2 aceton O PLE O N O N O bufor ph 7,20 acetonitryl
znaczanie aktywności właściwej PLE W reakcjach biotransformacji najczęściej wykorzystuje się preparaty enzymatyczne będące mieszaninami różnych białek i substancji balastowych. Izolacja enzymu w postaci
Bardziej szczegółowoKREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb. Metoda cyjanmethemoglobinowa: Zasada metody:
KREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb Metoda cyjanmethemoglobinowa: Hemoglobina i niektóre jej pochodne są utleniane przez K3 [Fe(CN)6]do methemoglobiny, a następnie przekształcane pod wpływem KCN w trwały związek
Bardziej szczegółowoKARTA KURSU. Kod Punktacja ECTS* 2
KARTA KURSU Nazwa Nazwa w j. ang. BIOCHEMIA BIOCHEMISTRY Kod Punktacja ECTS* 2 Koordynator Prof. dr hab. Maria Filek Zespół dydaktyczny dr Anna Barbasz dr Elżbieta Rudolphi-Skórska dr Apolonia Sieprawska
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa tel. 22 572 0735, 606448502
Bardziej szczegółowo1 Kinetyka reakcji chemicznych
Podstawy obliczeń chemicznych 1 1 Kinetyka reakcji chemicznych Szybkość reakcji chemicznej definiuje się jako ubytek stężenia substratu lub wzrost stężenia produktu w jednostce czasu. ν = c [ ] 2 c 1 mol
Bardziej szczegółowoReakcje enzymatyczne. Co to jest enzym? Grupy katalityczne enzymu. Model Michaelisa-Mentena. Hamowanie reakcji enzymatycznych. Reakcje enzymatyczne
Reakcje enzymatyczne Enzym białko katalizujące reakcje chemiczne w układach biologicznych (przyśpieszają reakcje przynajmniej 0 6 raza) 878, Wilhelm uehne, użył po raz pierwszy określenia enzym (w zaczynie)
Bardziej szczegółowoLABORATORIUM Z KATALIZY HOMOGENICZNEJ I HETEROGENICZNEJ WYZNACZANIE STAŁEJ SZYBKOŚCI REAKCJI UTLENIANIA POLITECHNIKA ŚLĄSKA WYDZIAŁ CHEMICZNY
POLITECHNIKA ŚLĄSKA WYDZIAŁ CHEMICZNY KATEDRA FIZYKOCHEMII I TECHNOLOGII POLIMERÓW WYZNACZANIE STAŁEJ SZYBKOŚCI REAKCJI UTLENIANIA JONÓW TIOSIARCZANOWYCH Miejsce ćwiczenia: Zakład Chemii Fizycznej, sala
Bardziej szczegółowoSTĘŻENIE JONÓW WODOROWYCH. DYSOCJACJA JONOWA. REAKTYWNOŚĆ METALI
Ćwiczenie 8 Semestr 2 STĘŻENIE JONÓW WODOROWYCH. DYSOCJACJA JONOWA. REAKTYWNOŚĆ METALI Obowiązujące zagadnienia: Stężenie jonów wodorowych: ph, poh, iloczyn jonowy wody, obliczenia rachunkowe, wskaźniki
Bardziej szczegółowoBIOCHEMICZNE ZAPOTRZEBOWANIE TLENU
BIOCHEMICZNE ZAPOTRZEBOWANIE TLENU W procesach samooczyszczania wód zanieczyszczonych związkami organicznymi zachodzą procesy utleniania materii organicznej przy współudziale mikroorganizmów tlenowych.
Bardziej szczegółowoKatedra Chemii Nieorganicznej i Analitycznej Uniwersytet Łódzki ul.tamka 12, Łódź. Dr Paweł Krzyczmonik
Katedra Chemii Nieorganicznej i Analitycznej Uniwersytet Łódzki ul.tamka 12, 91-403 Łódź Dr Paweł Krzyczmonik Łódź, kwiecień 2015 Plan wykładu Detekcja optyczna w biosensorach Biosensory optyczne - przykłady
Bardziej szczegółowoBliskie spotkania z biologią METABOLIZM. dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW. Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki
Bliskie spotkania z biologią METABOLIZM dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki Metabolizm całokształt przemian biochemicznych i towarzyszących
Bardziej szczegółowoSZCZEGÓŁOWE KRYTERIA OCENIANIA Z CHEMII DLA KLASY II GIMNAZJUM Nauczyciel Katarzyna Kurczab
SZCZEGÓŁOWE KRYTERIA OCENIANIA Z CHEMII DLA KLASY II GIMNAZJUM Nauczyciel Katarzyna Kurczab CZĄSTECZKA I RÓWNANIE REKCJI CHEMICZNEJ potrafi powiedzieć co to jest: wiązanie chemiczne, wiązanie jonowe, wiązanie
Bardziej szczegółowoInhibicja enzymatyczna
Inhibicja enzymatyczna Każdą substancję, która zmniejsza szybkość reakcji katalizowanej przez enzym można uważać za inhibitor. Hamowanie aktywności enzymów jest jednym z głównych sposobów regulacji metabolizmu
Bardziej szczegółowoPrzedmiot: Chemia budowlana Zakład Materiałoznawstwa i Technologii Betonu
Przedmiot: Chemia budowlana Zakład Materiałoznawstwa i Technologii Betonu Ćw. 4 Kinetyka reakcji chemicznych Zagadnienia do przygotowania: Szybkość reakcji chemicznej, zależność szybkości reakcji chemicznej
Bardziej szczegółowoEFEKT SOLNY BRÖNSTEDA
EFEKT SLNY RÖNSTED Pojęcie eektu solnego zostało wprowadzone przez rönsteda w celu wytłumaczenia wpływu obojętnego elektrolitu na szybkość reakcji zachodzących między jonami. Założył on, że reakcja pomiędzy
Bardziej szczegółowoEKOFIZJOLOGIA MIKROORGANIZMÓW WODNYCH
EKOFIZJOLOGIA MIKROORGANIZMÓW WODNYCH I. AKTYWNOŚĆ ENZYMATYCZNA PLANKTONU JEZIORNEGO Prowadzący ćwiczenia: Mgr Tomasz Kaliński 1 Aktywność enzymatyczna mikroplanktonu Uwagi ogólne Aktywność ektoenzymów
Bardziej szczegółowoENZYMOLOGIA. Ćwiczenie 3 Lipaza. Oznaczanie aktywności enzymu metodą miareczkową. Centrum Bioimmobilizacji i Innowacyjnych Materiałów Opakowaniowych
ENZYMOLOGIA Wydział Nauk o Żywności i Rybactwa Centrum Bioimmobilizacji i Innowacyjnych Materiałów Opakowaniowych ul. Klemensa Janickiego 35 71-270 Szczecin Ćwiczenie 3 Lipaza. Oznaczanie aktywności enzymu
Bardziej szczegółowoKLUCZ ODPOWIEDZI KONKURS PRZEDMIOTOWY DLA UCZNIÓW SZKÓŁ GIMNAZJALNYCH WOJEWÓDZTWA PODKARPACKIEGO Przedmiot: CHEMIA C A C C B A B B D B C D A A
KLUCZ ODPOWIEDZI KONKURS PRZEDMIOTOWY DLA UCZNIÓW SZKÓŁ GIMNAZJALNYCH WOJEWÓDZTWA PODKARPACKIEGO Przedmiot: CHEMIA /etap wojewódzki/ Możliwa do uzyskania liczba punktów: 74 pkt Zadania zamknięte: 1 2 3
Bardziej szczegółowoOznaczanie żelaza i miedzi metodą miareczkowania spektrofotometrycznego
Oznaczanie żelaza i miedzi metodą miareczkowania spektrofotometrycznego Oznaczanie dwóch kationów obok siebie metodą miareczkowania spektrofotometrycznego (bez maskowania) jest możliwe, gdy spełnione są
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE NR 3 BADANIE MIKROBIOLOGICZNEGO UTLENIENIA AMONIAKU DO AZOTYNÓW ZA POMOCĄ BAKTERII NITROSOMONAS sp.
ĆWICZENIE NR 3 BADANIE MIKROBIOLOGICZNEGO UTLENIENIA AMONIAKU DO AZOTYNÓW ZA POMOCĄ BAKTERII NITROSOMONAS sp. Uwaga: Ze względu na laboratoryjny charakter zajęć oraz kontakt z materiałem biologicznym,
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 1: BUFORY 1. Zapoznanie z Regulaminem BHP 2. Oznaczanie ph 2.1. metoda z zastosowaniem papierków wskaźnikowych
ĆWICZENIE 1: BUFORY 1. Zapoznanie z Regulaminem BHP 2. Oznaczanie ph 2.1. metoda z zastosowaniem papierków wskaźnikowych Zasada metody Wykrywanie stęŝenia jonów wodorowych przy zastosowaniu papierków wskaźnikowych
Bardziej szczegółowoBliskie spotkania z biologią METABOLIZM. dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW. Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki
Bliskie spotkania z biologią METABOLIZM dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki Metabolizm całokształt przemian biochemicznych i towarzyszących
Bardziej szczegółowoRepetytorium z wybranych zagadnień z chemii
Repetytorium z wybranych zagadnień z chemii Mol jest to liczebność materii występująca, gdy liczba cząstek (elementów) układu jest równa liczbie atomów zawartych w masie 12 g węgla 12 C (równa liczbie
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 2 KONDUKTOMETRIA
ĆWICZENIE 2 KONDUKTOMETRIA 1. Oznaczanie słabych kwasów w sokach i syropach owocowych metodą miareczkowania konduktometrycznego Celem ćwiczenia jest ilościowe oznaczenie zawartości słabych kwasów w sokach
Bardziej szczegółowoCZYNNIKI WPŁYWAJĄCE NA SZYBKOŚĆ REAKCJI CHEMICZNYCH. ILOŚCIOWE ZBADANIE SZYBKOŚCI ROZPADU NADTLENKU WODORU.
CZYNNIKI WPŁYWAJĄCE NA SZYBKOŚĆ REAKCJI CHEMICZNYCH. ILOŚCIOWE ZBADANIE SZYBKOŚCI ROZPADU NADTLENKU WODORU. Projekt zrealizowany w ramach Mazowieckiego programu stypendialnego dla uczniów szczególnie uzdolnionych
Bardziej szczegółowoLaboratorium 4. Określenie aktywności katalitycznej enzymu. Wprowadzenie do metod analitycznych. 1. CZĘŚĆ TEORETYCZNA
Laboratorium 4 Określenie aktywności katalitycznej enzymu. Wprowadzenie do metod analitycznych. Prowadzący: dr inż. Karolina Labus 1. CZĘŚĆ TEORETYCZNA Enzymy to wielkocząsteczkowe, w większości białkowe,
Bardziej szczegółowopobrano z www.sqlmedia.pl
ODPOWIEDZI Zadanie 1. (2 pkt) 1. masy atomowej, ładunku jądra atomowego 2. elektroujemności, masy atomowej, ładunku jądra atomowego Zadanie 2. (1 pkt) 1. Pierwiastek I jest aktywnym metalem. Reaguje z
Bardziej szczegółowoTemat ćwiczenia: Techniki stosowane w badaniach toksyczności in vitro
Temat ćwiczenia: Techniki stosowane w badaniach toksyczności in vitro Miarą aktywności cytotoksycznej badanej substancji jest określenie stężenia hamującego, IC 50 (ang. inhibitory concentration), dla
Bardziej szczegółowoWPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW
WPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW Wstęp W przypadku trudno rozpuszczalnej soli, mimo osiągnięcia stanu nasycenia, jej stężenie w roztworze jest bardzo małe i przyjmuje się, że ta
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa IZOLACJA DNA Z HODOWLI KOMÓRKOWEJ.
Bardziej szczegółowodata ĆWICZENIE 8 KINETYKA RERAKCJI ENZYMATYCZNEJ Wstęp merytoryczny
Imię i nazwisko Uzyskane punkty albumu data /3 podpis asystenta ĆWICZENIE 8 KINETYKA RERAKCJI ENZYMATYCZNEJ Wstęp merytoryczny Peroksydazy są enzymami naleŝącymi do klasy oksydoreduktaz. Ich grupą prostetyczną
Bardziej szczegółowoMechanizm działania buforów *
Mechanizm działania buforów * UNIWERSYTET PRZYRODNICZY Z doświadczenia nabytego w laboratorium wiemy, że dodanie kropli stężonego kwasu do 10 ml wody powoduje gwałtowny spadek ph o kilka jednostek. Tymczasem
Bardziej szczegółowoMODELOWANIE SZLAKÓW METABOLICZNYCH
MODELOWANIE SZLAKÓW METABOLICZNYCH 1. Zagadnienia do samodzielnego przygotowania a. W jakiej postaci gromadzona jest energia w komórce? Dlaczego ATP może wykonać pracę? b. Na czym polega mechanizm syntezy
Bardziej szczegółowoWPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW
WPŁYW SUBSTANCJI TOWARZYSZĄCYCH NA ROZPUSZCZALNOŚĆ OSADÓW Wstęp Mianem rozpuszczalności określamy maksymalną ilość danej substancji (w gramach lub molach), jaką w danej temperaturze można rozpuścić w określonej
Bardziej szczegółowoChemiczne składniki komórek
Chemiczne składniki komórek Pierwiastki chemiczne w komórkach: - makroelementy (pierwiastki biogenne) H, O, C, N, S, P Ca, Mg, K, Na, Cl >1% suchej masy - mikroelementy Fe, Cu, Mn, Mo, B, Zn, Co, J, F
Bardziej szczegółowoZadanie: 2 Zbadano odczyn wodnych roztworów następujących soli: I chlorku baru II octanu amonu III siarczku sodu
Zadanie: 1 Sporządzono dwa wodne roztwory soli: siarczanu (VI) sodu i azotanu (III) sodu Który z wyżej wymienionych roztworów soli nie będzie miał odczynu obojętnego? Uzasadnij odpowiedź i napisz równanie
Bardziej szczegółowoĆWICZENIE 4. Oczyszczanie ścieków ze związków fosforu
ĆWICZENIE 4 Oczyszczanie ścieków ze związków fosforu 1. Wprowadzenie Zbyt wysokie stężenia fosforu w wodach powierzchniowych stojących, spiętrzonych lub wolno płynących prowadzą do zwiększonego przyrostu
Bardziej szczegółowoScenariusz lekcji chemii w klasie III gimnazjum. Temat lekcji: Białka skład pierwiastkowy, budowa, właściwości i reakcje charakterystyczne
Scenariusz lekcji chemii w klasie III gimnazjum Temat lekcji: Białka skład pierwiastkowy, budowa, właściwości i reakcje charakterystyczne Czas trwania lekcji: 2x 45 minut Cele lekcji: 1. Ogólny zapoznanie
Bardziej szczegółowoOznaczanie aktywności proteolitycznej trypsyny Zajęcia 3-godzinne część A, zajęcia 4-godzinne część A i B
znaczanie aktywności proteolitycznej trypsyny Zajęcia 3-godzinne część A, zajęcia 4-godzinne część A i B el ćwiczenia elem ćwiczenia jest zapoznanie się z metodą oznaczania aktywności endopeptydaz na przykładzie
Bardziej szczegółowoBeata Mendak fakultety z chemii II tura PYTANIA Z KLASY PIERWSZEJ
Beata Mendak fakultety z chemii II tura Test rozwiązywany na zajęciach wymaga powtórzenia stężenia procentowego i rozpuszczalności. Podaję również pytania do naszej zaplanowanej wcześniej MEGA POWTÓRKI
Bardziej szczegółowoWykład 2. Kinetyka reakcji enzymatycznych.
Wykład 2 Kinetyka reakcji enzymatycznych. Kofaktory enzymów wd_2 2 Ryboflawina witamina B 2 Ryboflawina wit. B 2 FAD dinukleotyd flawinoadeninowy wd_2 3 Niacyna witamina PP (B 3 ) NAD + dinukleotyd nikotynamidoadeninowy
Bardziej szczegółowoSpektrofotometryczne wyznaczanie stałej dysocjacji czerwieni fenolowej
Spektrofotometryczne wyznaczanie stałej dysocjacji czerwieni fenolowej Metoda: Spektrofotometria UV-Vis Cel ćwiczenia: Celem ćwiczenia jest zapoznanie studenta z fotometryczną metodą badania stanów równowagi
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 1: Wyznaczanie warunków odporności, korozji i pasywności metali
Ćwiczenie 1: Wyznaczanie warunków odporności, korozji i pasywności metali Wymagane wiadomości Podstawy korozji elektrochemicznej, wykresy E-pH. Wprowadzenie Główną przyczyną zniszczeń materiałów metalicznych
Bardziej szczegółowoTransport przez błony
Transport przez błony Transport bierny Nie wymaga nakładu energii Transport aktywny Wymaga nakładu energii Dyfuzja prosta Dyfuzja ułatwiona Przenośniki Kanały jonowe Transport przez pory w błonie jądrowej
Bardziej szczegółowoKinetyka reakcji chemicznych. Dr Mariola Samsonowicz
Kinetyka reakcji chemicznych Dr Mariola Samsonowicz 1 Czym zajmuje się kinetyka chemiczna? Badaniem szybkości reakcji chemicznych poprzez analizę eksperymentalną i teoretyczną. Zdefiniowanie równania kinetycznego
Bardziej szczegółowoCEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową procedurą odsalania oczyszczanych preparatów enzymatycznych w procesie klasycznej filtracji żelowej.
LABORATORIUM 3 Filtracja żelowa preparatu oksydazy polifenolowej (PPO) oczyszczanego w procesie wysalania siarczanem amonu z wykorzystaniem złoża Sephadex G-50 CEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową
Bardziej szczegółowoWodorotlenki. n to liczba grup wodorotlenowych w cząsteczce wodorotlenku (równa wartościowości M)
Wodorotlenki Definicja - Wodorotlenkami nazywamy związki chemiczne, zbudowane z kationu metalu (zazwyczaj) (M) i anionu wodorotlenowego (OH - ) Ogólny wzór wodorotlenków: M(OH) n M oznacza symbol metalu.
Bardziej szczegółowoTechniki oznaczania aktywności cytotoksycznej związków chemioterapeutycznych in vitro
Fizjologiczne techniki badań Techniki oznaczania aktywności cytotoksycznej związków chemioterapeutycznych in vitro Wstęp: Oznaczanie cytotoksyczności związków chemioterapeutycznych wobec komórek w hodowlach
Bardziej szczegółowo