wiczenie - Oznaczanie stenia magnezu w surowicy krwi metod kolorymetryczn



Podobne dokumenty
Oznaczanie kwasu moczowego kolorymetryczn metod enzymatyczn z urykaz i peroksydaz

Oznaczanie mocznika w płynach ustrojowych metodą hydrolizy enzymatycznej

Oznaczanie bilirubiny cakowitej w pynach ustrojowych metod utleniania z uyciem wanadanu jako czynnika utleniajacego

KREW: 1. Oznaczenie stężenia Hb. Metoda cyjanmethemoglobinowa: Zasada metody:

Spektrofotometryczne wyznaczanie stałej dysocjacji czerwieni fenolowej

OZNACZANIE STĘŻENIA GLUKOZY WE KRWI METODĄ ENZYMATYCZNĄ-OXY

Krew należy poddać hemolizie, która zachodzi pod wpływem izotonicznego odczynnika Drabkina.

ANALIZA INSTRUMENTALNA

OZNACZANIE ŻELAZA METODĄ SPEKTROFOTOMETRII UV/VIS

data ĆWICZENIE 12 BIOCHEMIA MOCZU Doświadczenie 1

CEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową procedurą odsalania oczyszczanych preparatów enzymatycznych w procesie klasycznej filtracji żelowej.

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

Próba kontrolna (PK) 1000 l 1000 l

BADANIE WŁASNOŚCI KOENZYMÓW OKSYDOREDUKTAZ

Spektroskopia molekularna. Ćwiczenie nr 1. Widma absorpcyjne błękitu tymolowego

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

CHEMIA ŚRODKÓW BIOAKTYWNYCH I KOSMETYKÓW PRACOWNIA CHEMII ANALITYCZNEJ. Ćwiczenie 5

OZNACZANIE ZAWARTOŚCI MANGANU W GLEBIE

ĆWICZENIE 11. ANALIZA INSTRUMENTALNA KOLORYMETRIA - OZNACZANIE Cr(VI) METODĄ DIFENYLOKARBAZYDOWĄ. DZIAŁ: Kolorymetria

KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY

Laboratorium 8. Badanie stresu oksydacyjnego jako efektu działania czynników toksycznych

KINETYKA HYDROLIZY SACHAROZY (REAKCJA ENZYMATYCZNA I CHEMICZNA)

LABORATORIUM Z KATALIZY HOMOGENICZNEJ I HETEROGENICZNEJ WYZNACZANIE STAŁEJ SZYBKOŚCI REAKCJI UTLENIANIA POLITECHNIKA ŚLĄSKA WYDZIAŁ CHEMICZNY

data ĆWICZENIE 7 DYSTRYBUCJA TKANKOWA AMIDOHYDROLAZ

Chemia i technologia materiałów barwnych BADANIE WŁAŚCIWOŚCI ZWIĄZKÓW BARWNYCH WYKORZYSTANIEM SPEKTROFOTOMETRII UV-VIS.

CHARAKTERYSTYKI SPEKTRALNE UTLENIONEJ I ZREDUKOWANEJ FORMY CYTOCHROMU C

Zastosowanie spektrofotometrii (UV-VIS) do oznaczania Fe(III) i Fe(II) w wodzie

3. Badanie kinetyki enzymów

ELEMENTY ANALIZY INSTRUMENTALNEJ. SPEKTROFOTOMETRII podstawy teoretyczne

ĆWICZENIE B: Oznaczenie zawartości chlorków i chromu (VI) w spoiwach mineralnych

ANALIZA ŚLADOWYCH ZANIECZYSZCZEŃ ŚRODOWISKA I ROK OŚ II

Oznaczanie żelaza i miedzi metodą miareczkowania spektrofotometrycznego

OZNACZANIE WAPNIA I MAGNEZU W PRÓBCE WINA METODĄ ATOMOWEJ SPEKTROMETRII ABSORPCYJNEJ Z ATOMIZACJA W PŁOMIENIU

Ćwiczenie 8 Wyznaczanie stałej szybkości reakcji utleniania jonów tiosiarczanowych

ĆWICZENIE 3. I. Analiza miareczkowa mocnych i słabych elektrolitów

Laboratorium Podstaw Biofizyki

1. PRZYGOTOWANIE ROZTWORÓW KOMPLEKSUJĄCYCH

Opracował dr inż. Tadeusz Janiak

6. Wykorzystanie tyrozynazy otrzymywanej z pieczarki dwuzarodnikowej (Agaricus Bisporus) do produkcji L-DOPA

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

SZYBKOŚĆ REAKCJI JONOWYCH W ZALEŻNOŚCI OD SIŁY JONOWEJ ROZTWORU

WYZNACZANIE STAŁEJ DYSOCJACJI p-nitrofenolu METODĄ SPEKTROFOTOMETRII ABSORPCYJNEJ

Pracownia analizy ilościowej dla studentów II roku Chemii specjalność Chemia podstawowa i stosowana Dobór metody analitycznej

ANALIZA TŁUSZCZÓW WŁAŚCIWYCH CZ II

Biochemia Ćwiczenie 7 O R O P

Adsorpcja błękitu metylenowego na węglu aktywnym w obecności acetonu

BADANIE ZAWARTOŚCI ZWIĄZKÓW AZOTU. OZNACZANIE AZOTU AZOTANOWEGO(V) METODĄ KOLORYMETRYCZNĄ.

Szkoła Letnia STC Łódź 2013 Oznaczanie zabarwienia cukru białego, cukrów surowych i specjalnych w roztworze wodnym i metodą MOPS przy ph 7,0

Genomic Midi AX Direct zestaw do izolacji genomowego DNA (procedura bez precypitacji) wersja 1215

II. ODŻELAZIANIE LITERATURA. Zakres wiadomości obowiązujących do zaliczenia przed przystąpieniem do wykonania. ćwiczenia:

Karta przedmiotu. obowiązuje studentów rozpoczynających studia w roku akademickim 2012/2013. Forma studiów: Stacjonarne Kod kierunku: 12.

SPEKTROFOTOMETRYCZNA ANALIZA

1. Oznaczanie aktywności lipazy trzustkowej i jej zależności od stężenia enzymu oraz żółci jako modulatora reakcji enzymatycznej.

Spis treści. Wstęp. Twardość wody

Katedra Chemii Fizycznej Uniwersytetu Łódzkiego. Spektrofotometryczne oznaczanie stężenia jonów żelaza(iii) opiekun mgr K. Łudzik

Katedra Chemii Fizycznej Uniwersytetu Łódzkiego. Wyznaczanie stałej szybkości i rzędu reakcji metodą graficzną. opiekun mgr K.

ĆWICZENIE NR 3 BADANIE MIKROBIOLOGICZNEGO UTLENIENIA AMONIAKU DO AZOTYNÓW ZA POMOCĄ BAKTERII NITROSOMONAS sp.

STĘŻENIE JONÓW WODOROWYCH. DYSOCJACJA JONOWA. REAKTYWNOŚĆ METALI

OZNACZANIE AKTYWNOŚCI ALKALICZNEJ DIFOSFATAZY (PIROFOSFATAZY)

ĆWICZENIE II Kinetyka reakcji akwatacji kompleksu [Co III Cl(NH 3 ) 5 ]Cl 2 Wpływ wybranych czynników na kinetykę reakcji akwatacji

RÓWNOWAGI REAKCJI KOMPLEKSOWANIA

Robert Olek Gdańsk, 09/10/2015. Realizacja: semestr I, 2015/2016, rok studiów 1 / kierunek fizjoterapia / studia stacjonarne / stopień 2

ĆWICZENIE 2 WSPÓŁOZNACZANIE WODOROTLENKU I WĘGLANÓW METODĄ WARDERA. DZIAŁ: Alkacymetria

EKSTRAHOWANIE KWASÓW NUKLEINOWYCH JAK ZMIERZYĆ ILOŚĆ KWASÓW NUKLEINOWYCH PO IZOLACJI? JAK ZMIERZYĆ ILOŚĆ KWASÓW NUKLEINOWYCH PO IZOLACJI?

Techniki immunoenzymatycznego oznaczania poziomu hormonów (EIA)

ĆWICZENIE 4. Oczyszczanie ścieków ze związków fosforu

Kierunek studiów: Analityka medyczna Studia stacjonarne jednolite Rok: III Przedmiot: Chemia kliniczna

Deproteinizacja jako niezbędny etap przygotowania próbek biologicznych

KATALITYCZNE OZNACZANIE ŚLADÓW MIEDZI

Otrzymany w pkt. 8 osad, zawieszony w 2 ml wody destylowanej rozpipetować do 4 szklanych probówek po ok. 0.5 ml do każdej.

Laboratorium 4. Określenie aktywności katalitycznej enzymu. Wprowadzenie do metod analitycznych. 1. CZĘŚĆ TEORETYCZNA

Trichlorek fosforu. metoda oznaczania dr EWA GAWĘDA Centralny Instytut Ochrony Pracy Państwowy Instytut Badawczy Warszawa ul.

Plasmid Mini AX Gravity

Przebieg ćwiczeń z Oceanografii Chemicznej w roku akademickim 2012/2013

PODSTAWY LABORATORIUM PRZEMYSŁOWEGO. ĆWICZENIE 3a

SPRAWOZDANIE Z ĆWICZEŃ Z HIGIENY, TOKSYKOLOGII I BEZPIECZEŃSTWA ŻYWNOŚCI

ĆWICZENIE 7 WSPÓŁOZNACZANIE WAPNIA I MAGNEZU I OBLICZANIE TWARDOŚCI WODY. DZIAŁ: Kompleksometria

Pomiar zawartości krzemionki w pyle w środowisku miejsca pracy

Laboratorium Budownictwa WBiA

Na tej pracowni wyjątkowo odpowiedzi na zadania należy udzielić na osobnym arkuszu odpowiedzi.

OZNACZANIE INDEKSU FENOLOWEGO W WODZIE

Laboratorium 3 Toksykologia żywności

PROGRAM NAUCZANIA PRZEDMIOTU (ĆWICZENIA LABORATORYJNE) CHEMIA KLINICZNA

Hipokaliemia. Kierownik Kliniki: Prof. dr hab. n. med. Anna Wasilewska. Hipokaliemia (1)

WETERYNARIA.

ĆWICZENIE 5 MECHANIZMY PROMUJĄCE WZROST ROŚLIN

ĆWICZENIE 2 KONDUKTOMETRIA

Oznaczanie aktywności - i β- amylazy słodu metodą kolorymetryczną

WŁASNOŚCI SPEKTRALNE NUKLEOTYDÓW PIRYDYNOWYCH (NAD +, NADP + ) OZNACZANIE AKTYWNOŚCI TRANSAMINAZY ALANINOWEJ

Imię i nazwisko studenta:...

Jod. Numer CAS:


ASMAG B 20 mg jonów magnezu + 0,25 mg pirydoksyny chlorowodorku, tabletki Magnesii hydroaspartas + Pyridoxini hydrochloridum

ĆWICZENIE NR 3 POMIARY SPEKTROFOTOMETRYCZNE

Ćw. 5 Absorpcjometria I

Utylizacja i neutralizacja odpadów Międzywydziałowe Studia Ochrony Środowiska

PODSTAWOWE TECHNIKI PRACY LABORATORYJNEJ: WAŻENIE, SUSZENIE, STRĄCANIE OSADÓW, SĄCZENIE

OPIS MODUŁU ZAJĘĆ/PRZEDMIOTU (SYLABUS) I.

Zastosowanie spektrofotometrii w nadfiolecie i świetle widzialnym (UV-VIS) do oznaczania fenoli w wodzie

Ćwiczenie 3: Ocena fizykochemiczna nawozów stałych fosforowych różne formy P 2 O 5

Transkrypt:

wiczenie - Oznaczanie stenia magnezu w surowicy krwi metod kolorymetryczn Wprowadzenie Magnez wystpuje we wszystkich tkankach i pynach ustrojowych, a znaczna cz znajduje si w tkance kostnej. Razem z wapniem uczestniczy w prawidowym funkcjonowaniu tkanki nerwowej i miniowej. Bierze udzia w przekazywaniu impulsów nerwowych. Uczestniczy w syntezie i stabilizacji kwasów nukleinowych. Jest niezbdnym kofaktorem wielu enzymów. Zasadniczo wszystkie enzymy dziaaj&ce na nukleotydy, tj. ATP, s& aktywne w obecnoci jonów Mg 2+ ; jony te odgrywaj& szczególn& rol w wi&zaniu i stabilizowaniu fragmentów polifosforanowych. Na st.enie magnezu ma wpyw poda. w pokarmach, wchanianie w przewodzie pokarmowym oraz wydalanie z moczem. Pomiar st.enia magnezu w surowicy jest badaniem przydatnym w diagnostyce zaburze/ nerwowo-miniowych i zaburze/ rytmu serca, w monitorowaniu terapii diuretykami i lekami nefrotoksycznymi, niewydolnoci nerek i.ywienia pozajelitowego. Zarówno niedobór magnezu (hipomagnezemia) jak i nadmiar magnezu (hipermagnezemia) prowadz& do zaburze/ ukadu nerwowego i miniowego, a szczególnie minia sercowego (zaburzenia rytmu i przewodzenia). Hipomagnezemia najczciej jest efektem dziaania niepo.&danym leków moczopdnych (wzrost wydalania nerkowego) i zwykle prowadzi do hipokalcemii oraz jest zwi&zana z hipokalemi&. Objawy kliniczne niedoboru magnezu obserwuje si, je.eli jego st.enie jest ni.sze ni. 0,5 mmol/l. Hipermagnezemia jest najczciej konsekwencj& zwikszonej poda.y lub niewydolnoci nerek. Kliniczne objawy hipermagnezemi wystpuj& powy.ej 2,5 mmol/l, za przy st.eniu powy.ej 5 mmol/l dochodzi do pora.enia mini oddechowych.

Co istotne, prawidowe st.enie magnezu w surowicy nie wyklucza jego niedoboru wewn&trzkomórkowego. Cel wiczenia: Celem wiczenia jest wykonanie praktycznego oznaczenia stenia magnezu w surowicy krwi ludzkiej metod spektrofotometryczn. W metodzie tej wykorzystuje si reakcj magnezu z bkitem ksylidylowym w rodowisku alkalicznym, w wyniku której tworzy si purpurowo zabarwiony zwizek. Intensywno zabarwienia jest wprost proporcjonalna do stenia magnezu w badanej próbie. Oznaczenia absorbancji wykonuje si wobec próby zerowej przy 520 nm. Sprzt i materia y: magnezu 2 mg/dl (0,82 mmol/l) 2-STANDARD, Surowica krwi ludzkiej, Zestaw diagnostyczny do oznaczania st.enia MAGNEZU Lquick Cor-MG. Skad i st.enie skadników w odczynniku roboczym : Bkit ksylidylowy 0,15 mmol/l EGTA 0,1 mmol/l Bufor (ph 11,5) Detergent 6 Probówek typu eppendorf, Pipety automatyczne o pojemnoci 1000 µl, 10 µl oraz ko/cówki do pipet, 1 Kuweta polistyrenowa (poj. 800 µl) do pomiarów spektrofotometrycznych (d = 10 mm),

Wytrz&sarka typu Vortex, Spektrofotometr UV-Vis Wykonanie wiczenia: 1. zerowa: do probówki typu eppendorf doda 1 ml odczynnika 1-MG. Pozostawi do osi&gnicia temperatury pokojowej (okoo 10 min). Nastpnie doda 10 µl roztworu wody dejonizowanej. Wymiesza i przenie 800 µl roztworu do kuwetki. 2. wzorcowa: do probówki typu eppendorf doda 1 ml odczynnika 1-MG. Pozostawi do osi&gnicia temperatury pokojowej. Pozostawi do osi&gnicia temperatury pokojowej. Nastpnie doda 10µl roztworu wzorcowego. Wymiesza i pozostawi na 5 min. Przenie 800 µl roztworu do kuwetki. Wykona pomiar absorbancji przy dugoci fali 520 nm wzgldem próby zerowej jako próby odniesienia. Pomiar wykona czterokrotnie. 3. badana: do probówki typu eppendorf doda 1 ml odczynnika 1-MG. Pozostawi do osi&gnicia temperatury pokojowej. Nastpnie doda 10µl surowicy krwi ludzkiej. Wymiesza i pozostawi na 5 min. Przenie 800 µl roztworu do kuwetki. Wykona pomiar absorbancji przy dugoci fali 520 nm wzgldem próby zerowej jako próby odniesienia. Pomiar wykona czterokrotnie. Skadniki badana wzorcowa zerowa Odczynnik roboczy 1-MG 1000 µl 1000 µl 1000 µl Surowica krwi ludzkiej 10 µl - - Wzorzec - 10 µl - H 2 O destylowana - - 10 µl Dokadnie wymiesza. Po 5minutach µ

! "dczyta absorbancj przy =520 nm dla próby badanej (A PB ) i wzorcowej (A PW ) wobec próby zerowej. Pomiar powtórzy czterokrotnie. Opracowanie wyników: Obliczy st.enie magnezu w badanej próbie korzystaj&c ze wzoru: St.enie magnezu = A PB) / A PW x st.enie wzorca Przeprowadzi analiz statystyczn& wyników, obliczaj&c redni& zawarto cholesterolu w próbce, odchylenie standardowe oraz procentowy b&d oznaczenia. WARTO%CI PRAWID)OWE (surowica/osocze) Noworodki 2 4 dni 1,5 2,2 mg/dl (0,62 0,91 mmol) Dzieci 5 m-cy 6 lat 1,7 2,3 mg/dl (0,70 0,95 mmol) 6 12 lat 1,7 2,1 mg/dl (0,70 0,86 mmol/l) 12 20 lat 1,7 2,2 mg/dl (0,70 0,91 mmol/l) Doroli powy.ej 20 lat 1,7 2,3 mg/dl (0,66 1,07 mmol/l) Zalecane jest opracowanie przez ka.de laboratorium wasnych zakresów wartoci prawidowych charakterystycznych dla lokalnej populacji. Literatura uzupe niajca: 1. W. Szczepaniak, Metody instrumentalne w analizie chemicznej, PWN Warszawa 1996. 2. S. J. Lippard, J. M. Berg Podstawy chemii bionieorganicznej, PWN Warszawa 1998. 3. A. Dembi/ska Kie, J.W Naskalski, Diagnostyka laboratoryjna z elementami biochemii klinicznej, Elsevier Urban & Partner, 2002. 4. L. Kyszejko-Stefanowicz, 1wiczenia z biochemii, PWN Warszawa 1999. 5. L. Stryer, Biochemia, PWN Warszawa 1999.

Zagadnienia: 1. Magnez (znaczeniu jonów magnezu dla organizmu ludzkiego, poznanie zagro.e/ wynikaj&cych z zachwiania równowagi magnezu w organizmie, metody oznaczania magnezu we krwi). 2. Spektrofotometria UV-Vis (prawa absorpcji i odchylenia od tych praw, aparatura). 3. Opracowanie wyników i ich ocena statystyczna. #