Szkoła: Gimnazjum nr 24 w Olszytynie

HTML
DOWNLOAD

Wielkość: px

Rozpocząć pokaz od strony:

Download "Szkoła: Gimnazjum nr 24 w Olszytynie"

Mirosław Leśniak
8 lat temu
Przeglądów:

1 Mleko żyje projekt w ramah zadania Naukowy, nauzyiele i inijatorzy społezeństwa oywatelskiego na rzez innowayjnyh metod nauzania młodzieży w zakresie adań mikroiologiznyh żywnośi Szkoła: Gimnazjum nr w Olszytynie autorzy opraowania: Edyta Dej, Monika Jakuisiak, Klaudia Kadzewiz, Justyna Kempisty, Kamila Łoaz, Mihał Mazuhowski, Małgorzata Mihalska, Mateusz Puzel, Mateusz Tałan, Adrian Zyskowski opiekun: mgr Bożena ewandowska

2 Teren adań Próki mleka do adań mikroiologiznyh zerano w trzeh miejsowośiah położonyh na oszarze Pojezierza Olsztyńskiego. Były to Naterki położone w okoliah Olsztyna oraz Żegoty i Franknowo położone w okoliah Jezioran (Ry. 1). Ry. 1 Stanowiska pooru próek mleka Ry. 2 Bakterie atoaillus Ry. 3 Bakterie atoous

3 Materiał i metody Materiałem yły próki mleka krowiego porane od krów hodowanyh w gospodarstwah przydomowyh. Łąznie pozyskano trzy próki mleka, po jednej z każdej miejsowośi. W dniu w Franknowie krowa nr 19, w Naterkah krowa nr 20 i w Żegotah krowa nr 21. Do każdej próki dołązono następująe informaje: data zerania mleka, nazwa szkoły, klasy, nazwisko opiekuna grupy, lokalizaja geografizna gospodarstwa, rodzaj gospodarstwa, rodzaj mleka, unikatowe oznazenie zwierzęia. W/w informaje zostały umieszzone zarówno na proówkah z prókami jak i w formie pisemnej. Zerane próki przez pierwszą no przetrzymywano w temperaturze pokojowej w elu ukwaszenia a następnie przehowywano w lodówe w temp. 4 o C. Shłodzone próki mleka przewieziono w pierwszym dniu adań do laoratorium, gdzie poddano je dalszej oróe. Przygotowane próki zostały wysiane przez każdą parę uzniów za pomoą plastikowej ezy na jedną płytkę GM17-agar i jedną płytkę MRS-agar. Szalki inkuowano przez godz.: GM17 w temp. 30 o C w warunkah tlenowyh a szalki MRS w 37 o C w warunkah eztlenowyh. Po okresie inkuaji sprawdzono zystość mikroiologizną mleka. Wyrane, różnorodne kolonie akteryjne odpowiadająe akteriom mlekowym z rodzaju atoous i atoaillus ponownie wysiano metodą posiewu redukyjnego na szalki GM17-agar i MRS-agar inkuowane w warunkah identyznyh jak podzas pierwszego posiewu. Z uzyskanyh kolonii każda para sporządza 8 preparatów mikroskopowyh: po ztery z akterii z rodzaju atoous i atoaillus (Ry. 2, 3). Po oserwajah każda para uzniów wyiera do dalszyh testów jedną akterię z rodzaju atoous i jedną akterię z rodzaju atoaillus. Dla wyranyh akterii każda para wykonuje dwa testy API (standaryzowany test do identyfikaji akterii) inkuowane przez godz. w temperaturah jak przy wześniejszyh inkuajah. Po i godz. inkuaji odzytujemy i zapisujemy uzyskane wyniki. Zmiany zaarwienia proówek umożliwiają ustalenie zy sustraty są rozkładane zy też nie. Znakiem + oznazamy reakję pozytywną, znakiem - reakję negatywną a znakiem v reakję słao pozytywną. Z testowanyh przez sieie szzepów każda para sporządza dwie hodowle płynne: jedna hodowla płynna akterii z rodzaju atoous na płynnym GM17 i hodowla płynna akterii z rodzaju atoaillus na płynnym podłożu MRS, które inkuowane są przez godz. w temperaturah jak wześniej. Po okresie inkuaji określamy typ wzrostu akterii: zmętnienie, osad, przejaśnienie i kożuszek. Następnie dokonano oeny aktywnośi proteolityznej poszzególnyh szzepów poprzez naniesienie analizowanyh akterii na szalki z mlekiem. Przygotowane szalki inkuujemy przez 2-3

4 dni w warunkah odpowiednih dla danego rodzaju akterii. Po inkuaji znakiem + oznazamy reakję pozytywną, znakiem - reakję negatywną Kolejnym zadaniem jest oena aktywnośi antymikroiologiznej mająa za zadanie ustalić zy wyizolowane szzepy produkują sustanje o działaniu antyakteryjnym. Przygotowane wg szzegółowej proedury szalki inkuujemy przez dwa dni w warunkah jak wześniej. W przypadku aktywnośi, za pomoą linijki mierzymy średnię zahamowania wzrostu a wyniki notujemy. W elu zahowania materiału adawzego do sterylnyh plastikowyh fiolek o ojętośi 1,8 ml dodajemy 1 ml płynnyh hodowli akteryjnyh i uzupełniamy 600 μl 50% glierolu. Po wymieszaniu proówki zamrażamy w temp. 20 o C. Wyniki Analiza zystośi mleka wykazała, że próki mleka yły generalnie zyste. Tylko w jednej próe na 10 analizowanyh pojawiła się pleśń i próka to została uznana jako zakażona (Ta. 1). We wszystkih prókah yły widozne kolonie akterii mlekowyh. Ta. 1 Stan zystośi mikroiologiznej mleka analizowanego przez poszzególne zespoły Zespół Oeność pleśni Bakterie mlekowe Czystość mleka Zyskowski + + Dej + + Kempisty + + Łoas Kadzewiz + + Jakuisiak + + Mazuhowski + + Mihalska + + Puzel + + Tałan + + Suma Po godz. inkuaji w każdej analizowanej próie wzrosła ilość rozkładanyh ukrów (Ta. 2). Zazwyzaj więej ukrów rozkładanyh yło w prókah, w któryh znajdowały się akterie z rodzaju atoaillus (Ta. 2). Jedynie w próe 19 oserwowano odwrotne zjawisko (Ry. 4) a w próe 21a liza rozkładanyh ukrów przez oa szzepy akterii yła podona (Ta. 2).

5 Suma po dla.. Suma po dla.. Suma po dla.. Suma po dla.. Czas Nr testu Tałan Puzel Mihalska Mazuhowski Jakuisiak Kadzewiz Łoas Kempisty Dej Zyskowski Zespół Rozł. ukry Próa Ta. 2 Wyniki testu API 50 dla poszzególnyh zespołów (pominięto testy z wynikami negatywnymi) 4 v v v + + v v + + v v v v v + v v v v v v v v v v v v + + v v v + v v v v + v v + + v v v v v + v v v + v v v + + v v + v v v v v + + v v v v v v v v v v v v v v 1 39 v + v v v v v v v v v v v v v v v v a 19a 20 19

6 W połowie próek określono typ wzrostu jako osad. W trzeh przypadkah oserwowano kominaję: zmętnienie osad i po jednym przypadku kominaje: osad przejaśnienie i zmętnienie przejaśnienie kożuszek (Ta. 3). Ta. 3. Typy wzrostu analizowanyh szzepów akterii z rodzaju atoaillus zespołów i atoous w hodowlah płynnyh poszzególnyh Zespół Szzep akterii Zmętnienie Osad Przejaśnienie Kożuszek Zyskowski atoaillus + Dej atoous + + Kempisty atoaillus + Łoas atoous + + Kadzewiz atoaillus + + Jakuisiak atoous + + Mazuhowski atoaillus Mihalska atoous + Puzel atoaillus + Tałan atoous + + Suma We wszystkih prókah oserwowano aktywność proteolityzną (Ta. 4). Tylko w dwóh przypadkah oserwowano aktywność akteriostatyzną (Ta. 4). Dotyzyło to tylko i wyłąznie akterii z rodzaju atoaillus (Ry. 5). Strefa zahamowania dla tyh dwóh przypadków wyniosła 1,5mm i 2mm gdy dla pró kontrolnyh wynosiła zazwyzaj 1mm (Ta. 4). Ta. 4. Aktywność proteolityzna i antyakteriostatyzna analizowanyh szzepów akterii z rodzaju atoaillus i atoous w próah poszzególnyh zespołów Zespół Szzep akterii Aktywność proteolityzna Aktywność antyakteriostatyzna Szalka kontrolna Szalka mlekiem Zyskowski atoaillus + 1 Dej atoous + 1 Kempisty atoaillus ,5 Łoas atoous + 1 Kadzewiz atoaillus + 1 Jakuisiak atoous + 1 Mazuhowski atoaillus Mihalska atoous + 2 Puzel atoaillus + 1 Tałan atoous + 2 z

7 Wnioski: - stan zystośi mikroiologiznej mleka jest dory - we wszystkih prókah yły akterie mlekowe - większą aktywność wykazywały akterie z rodzaju atoaillus - dłuższy zas inkuaji wpływa pozytywnie na aktywność akterii - najzęstszym typem wzrostu w hodowlah płynnyh ył osad - we wszystkih prókah oserwowano aktywność proteolityzną - aktywność aktriostatyzna yła oserwowana sporadyznie Ry. 4 Test API dla atoous Ry. 5 Kolonie atoaillus

Podobne dokumenty

RESPECT Index III Etap weryfikacji Jak udokumentować odpowiedzi na pytania zawarte w ankiecie?

RESPECT Index III Etap weryfikaji Jak udokumentować odpowiedzi na pytania zawarte w ankieie? Ankieta RESPECT VIII Edyja Ogólne założenia Pytania ankietowe Pytania zawarte w ankieie RESPECT Index przypisane