NOWOCZESNE TECHNIKI BADAWCZE W INŻYNIERII MATERIAŁOWEJ. Beata Grabowska, pok. 84A, Ip

Podobne dokumenty
Jakościowe i ilościowe oznaczanie alkoholi techniką chromatografii gazowej

Identyfikacja węglowodorów aromatycznych techniką GC-MS

Wpływ ilości modyfikatora na współczynnik retencji w technice wysokosprawnej chromatografii cieczowej

Ilościowa analiza mieszaniny alkoholi techniką GC/FID

GraŜyna Chwatko Zakład Chemii Środowiska

Podstawy chromatografii i technik elektromigracyjnych / Zygfryd Witkiewicz, Joanna Kałużna-Czaplińska. wyd. 6-1 w PWN. Warszawa, cop.

Techniki immunochemiczne. opierają się na specyficznych oddziaływaniach między antygenami a przeciwciałami

Identyfikacja alkoholi techniką chromatografii gazowej

Podstawy chromatografii i technik elektromigracyjnych / Zygfryd Witkiewicz, Joanna Kałużna-Czaplińska. wyd. 5, 4 dodr. Warszawa, 2015.

OZNACZENIE JAKOŚCIOWE I ILOŚCIOWE w HPLC

WPŁYW ILOŚCI MODYFIKATORA NA WSPÓŁCZYNNIK RETENCJI W TECHNICE WYSOKOSPRAWNEJ CHROMATOGRAFII CIECZOWEJ

Jakościowa i ilościowa analiza mieszaniny alkoholi techniką chromatografii gazowej

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

Kontrola produktu leczniczego. Piotr Podsadni

Chromatografia kolumnowa planarna

Materiał obowiązujący do ćwiczeń z analizy instrumentalnej II rok OAM

Cz. 5. Podstawy instrumentalizacji chromatografii. aparatura chromatograficzna w skali analitycznej i modelowej - -- w części przypomnienie -

Ćwiczenie 1 Analiza jakościowa w chromatografii gazowej Wstęp

ROZDZIELENIE OD PODSTAW czyli wszystko (?) O KOLUMNIE CHROMATOGRAFICZNEJ

CHROMATOGRAFIA CHROMATOGRAFIA GAZOWA

Pytania z Wysokosprawnej chromatografii cieczowej

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

HPLC? HPLC cz.1. Analiza chromatograficzna. Klasyfikacja metod chromatograficznych

Fazą ruchomą może być gaz, ciecz lub ciecz w stanie nadkrytycznym, a fazą nieruchomą ciało stałe lub ciecz.

4A. Chromatografia adsorpcyjna B. Chromatografia podziałowa C. Adsorpcyjne oczyszczanie gazów... 5

Spis treści CZĘŚĆ I. PROCES ANALITYCZNY 15. Wykaz skrótów i symboli używanych w książce... 11

Ślesin, 29 maja 2019 XXV Sympozjum Analityka od podstaw

Instrukcja ćwiczenia laboratoryjnego HPLC-2 Nowoczesne techniki analityczne

OPTYMALIZACJA EFEKTÓW ROZDZIELANIA W KOLUMNACH KAPILARNYCH DOBÓR PRĘDKOŚCI PRZEPŁYWU GAZU

ANALIZA ŚLADOWYCH ZANIECZYSZCZEŃ ŚRODOWISKA I ROK OŚ II. OznaczanieBTEX i n-alkanów w wodzie zanieczyszczonej benzyną metodą GC/FID oraz GC/MS 1

Kolumnowa Chromatografia Cieczowa I. 1. Czym różni się (z punktu widzenia użytkownika) chromatografia gazowa od chromatografii cieczowej?

Rys. 1. Chromatogram i sposób pomiaru podstawowych wielkości chromatograficznych

Prof. dr hab. inż. M. Kamiński 2006/7 Katedra Chemii Analitycznej Wydział Chemiczny PG. Ćwiczenie: LC / GC. Instrukcja ogólna

Metody chromatograficzne w chemii i biotechnologii, wykład 5. Łukasz Berlicki

Ćw. 5 Oznaczanie węglowodorów lekkich w powietrzu atmosferycznym

CHROMATOGRAFIA BARWNIKÓW ROŚLINNYCH

Metody chromatograficzne (rozdzielcze) w analizie materiału biologicznego (GC, HPLC)

3. Jak zmienią się właściwości żelu krzemionkowego jako fazy stacjonarnej, jeśli zwiążemy go chemicznie z grupą n-oktadecylodimetylosililową?

RP WPROWADZENIE. M. Kamiński PG WCh Gdańsk Układy faz odwróconych RP-HPLC, RP-TLC gdy:

POTWIERDZANIE TOŻSAMOSCI PRZY ZASTOSOWANIU RÓŻNYCH TECHNIK ANALITYCZNYCH

Pytania z Chromatografii Cieczowej

CHROMATOGRAFIA II 18. ANALIZA ILOŚCIOWA METODĄ KALIBRACJI

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

4. WYZNACZENIE IZOTERMY ADSORPCJI METODĄ ECP

ANALIZA ŚLADOWYCH ZANIECZYSZCZEŃ ŚRODOWISKA I ROK OŚ II

Wysokosprawna chromatografia cieczowa w analizie jakościowej i ilościowej

PODSTAWY CHROMATOGRAFII GAZOWEJ

Wysokosprawna chromatografia cieczowa dobór warunków separacji wybranych związków

PORÓWNANIE FAZ STACJONARNYCH STOSOWANYCH W HPLC

Oznaczanie lekkich węglowodorów w powietrzu atmosferycznym

5. WYZNACZENIE KRZYWEJ VAN DEEMTER a I WSPÓŁCZYNNIKA ROZDZIELENIA DLA KOLUMNY CHROMATOGRAFICZNEJ

-- w części przypomnienie - Gdańsk 2010

Techniki analityczne. Podział technik analitycznych. Metody spektroskopowe. Spektroskopia elektronowa

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

Wysokosprawna chromatografia cieczowa instrukcja do ćwiczenia.

OFERTA TEMATÓW PROJEKTÓW DYPLOMOWYCH (MAGISTERSKICH) do zrealizowania w Katedrze INŻYNIERII CHEMICZNEJ I PROCESOWEJ

Techniki Rozdzielania Mieszanin

Przemysłowe laboratorium technologii ropy naftowej i węgla II

WYZNACZANIE ZAKRESU WYKLUCZANIA DLA WYPEŁNIEŃ STOSOWANYCH W WYSOKOSPRAWNEJ CHROMATOGRAFII WYKLUCZANIA (HPSEC)

OZNACZANIE ŻELAZA METODĄ SPEKTROFOTOMETRII UV/VIS

Paration metylowy metoda oznaczania

Fenol, o-, m- i p-krezol metoda oznaczania

Jolanta Jaroszewska-Manaj 1. i identyfikacji związków organicznych. Jolanta Jaroszewska-Manaj 2

Chromatograf gazowy z detektorem uniwersalnym i podajnikiem próbek ciekłych oraz zaworem do dozowania gazów

Zakład Chemii Analitycznej

CHROMATOGRAFIA GAZOWA (GC)

RP WPROWADZENIE. M. Kamioski PG WCh Gdaosk 2013

BADANIE ZAWARTOŚCI WIELOPIERŚCIENIOWYCH WĘGLOWODORÓW AROMATYCZNYCH (OZNACZANIE ANTRACENU W PRÓBKACH GLEBY).

OD HPLC do UPLC. Prof. dr hab. inż. Agata Kot-Wasik. Katedra Chemii Analitycznej Wydział Chemiczny, Politechnika Gdańska

masy cząsteczkowej polimerów nisko i średnio polarnych, a także lipidów, fosfolipidów itp.. silanizowanyżel krzemionkowy

Ćwiczenie 5 Wyznaczanie parametrów makrocząsteczki za pomocą chromatografii żelowej.

ZASTOSOWANIE CHROMATOGRAFII CIECZOWEJ W BIOTECHNOLOGII ŚRODOWISKOWEJ

analiza chemiczna jakościowa ilościowa

Zakres zastosowań chromatografii wykluczania

Materiał obowiązujący do ćwiczeń z analizy instrumentalnej II rok WF (kierunek farmacja)

ZAKŁAD CHEMII ANALITYCZNEJ

CHROMATOGRAFIA W UKŁADACH FAZ ODWRÓCONYCH RP-HPLC

Zastosowanie chromatografii żelowej w skali preparatywnej do otrzymywania niskodyspersyjnych

Chemia Analityczna. Chromatografia. Tłumaczyła: inż. Karolina Hierasimczyk

ANALIZA INSTRUMENTALNA MATERIAŁU BIOLOGICZNEGO ANALIZA INSTRUMENTALNA MATERIAŁU BIOLOGICZNEGO

Chromatogramy Załącznik do instrukcji z Technik Rozdzielania Mieszanin

Metody chromatograficzne w chemii i biotechnologii, wykład 6. Łukasz Berlicki

Disulfid allilowo-propylowy

dr hab. inż. Józef Haponiuk Katedra Technologii Polimerów Wydział Chemiczny PG

Chromatografia. Chromatografia po co? Zastosowanie: Podstawowe rodzaje chromatografii. Chromatografia cienkowarstwowa - TLC

2-Metylonaftalen. metoda oznaczania UWAGI WSTĘPNE

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

Strona 1 z 6. Wydział Chemii Uniwersytetu Jagiellońskiego Podstawy Chemii - Laboratorium Rozdzielanie Substancji - Wprowadzenie

Chromatografia. Chromatografia po co? Zastosowanie: Optymalizacja eluentu. Chromatografia kolumnowa. oczyszczanie. wydzielanie. analiza jakościowa

ĆWICZENIE 3: CHROMATOGRAFIA PLANARNA

IDENTYFIKACJA SUBSTANCJI W CHROMATOGRAFII CIECZOWEJ

2-(Dietyloamino)etanol

Adsorpcyjne oczyszczanie gazów z zanieczyszczeń związkami organicznymi

2-Cyjanoakrylan metylu metoda oznaczania

2-Metyloazirydyna. metoda oznaczania UWAGI WSTĘPNE

SPECYFIKACJA TECHNICZNA ZESTAWU DO ANALIZY TERMOGRAWIMETRYCZNEJ TG-FITR-GCMS ZAŁĄCZNIK NR 1 DO ZAPYTANIA OFERTOWEGO

Metody spektroskopowe:

ZASTOSOWANIE WYSOKOSPRAWNEJ CHROMATOGRAFII CIECZOWEJ DO OZNACZANIA BENZOESANU SODU W PRODUKTACH SPOŻYWCZYCH

4-Metylopent-3-en-2-on

Inżektory i detektory w chromatografii gazowej

Transkrypt:

NOWOCZESNE TECHNIKI BADAWCZE W INŻYNIERII MATERIAŁOWEJ Beata Grabowska, pok. 84A, Ip http://home.agh.edu.pl/~graboska/

Chromatografia

Chromatografia Chromatografia gazowa jest jedną z metod rozdziału mieszanin jednorodnych. Umożliwia rozdział oraz jakościową i ilościową analizę substancji złożonych, które podczas przeprowadzania pomiaru mają postać cieczy lub gazów.

Chromatografia grec. chroma - barwa 1906 M. Cwiet (rosyjski botanik Warszawa) - rozdzielenie mieszaniny barwników w ekstrakcie roślinnym na kolumnie z węglanem wapnia (kredą) chromatografia kolumnowa (cieczowa) LC 1941 Martin i Synge - chromatografia bibułowa PC - NOBEL 1952 James i Martin chromatografia gazowa GC Michaił Cwiet (1872-1919) 1956 Stahl chromatografia cienkowarstwowa TLC koniec lat 60-ych początek lat 80-ych Wysokosprawna chromatografia cieczowa HPLC Chromatografia wykluczania przestrzennego SEC

Metody chromatograficzne chromatografia cieczowa LC liquid chromato graphy bibułowa PC paper chromato graphy cienkowarswowa TLC thin layer chromatography -normalny układ faz (adsorpcyjna) -odwrócony układ faz (podziałowa) -wysokociśnieniowa HP-TLC (high perssure...) gazowa GC gas chromatography -adsorpcyjna (gazciało stałe) -podziałowa (gazciecz, GLC) wysokosprawnacieczowa HPLC high performance liquid chromatography -normalny układ faz (adsorpcyjna i podziałowa) -odwrócony układ faz (podziałowa) jonowymienna -wykluczania przestrzennego, żelowa SEC, GPC (size exclusion chromatography, gel permeation chromatography) fluidalna SFC

Metody chromatograficzne Podział ze względu na stan skupienia fazy stacjonarnej

Metody chromatograficzne Chromatografia klasyczna www.waters.com/waters/en_pl/hplc

Chromatografia Rozdzielana mieszanina Faza ruchoma Faza nieruchoma Schemat rozdzielania chromatograficznego mieszaniny 2-składnikowej

Chromatografia W chromatografii spotykamy dwa rodzaje faz: ruchomą i stacjonarną. Fazy ruchome: gaz nośny (chromatografia gazowa GC); ciecz (chromatografia cieczowa LC); fluid nadkrytyczny (chromatografia fluidalna). Fazy stacjonarne: ciało stałe (chromatografia adsorpcyjna); ciecz (chromatografia podziałowa).

Chromatografia Faza ruchoma Gazy nośne stosowane w GC: wodór azot argon hel ksenon mieszaniny gazów Warunki jakie musi spełniać faza ruchoma: obojętność w stosunku do składników próbki wymagania związane z rodzajem zastosowanego detektora bezpieczeństwo pracy dostępność i cena

Chromatografia Faza stacjonarna: Fazy stacjonarne zbudowane są z następujących grup związków: adsorbenty nieorganiczne (naturalne i syntetyczne zeolity, sadze grafityzowane) węglowodory silikony poliglikole estry ciekłe kryształy cyklodekstryny

Chromatografia Czas retencji (t R ) jest to czas, w którym substancja przechodzi przez kolumnę. Czas retencji przypisany jest pikowi odpowiadającemu danej substancji. Czas zatrzymania składnika jest miarą ilości czasu jaki substancja rozpuszczona spędza w kolumnie. Jest sumą czasu spędzonego w fazie stacjonarnej i w fazie ruchomej. Współczynnik retencji (k) jest inną miarą retencji. Jest to stosunek ilości czasu jaki substancja rozpuszczona spędza w fazie stacjonarnej i ruchomej (gaz nośny). KSZTAŁT PIKU Na początku profile substancji rozpuszczonej maja kształt symetrycznych pików, profile stężenia jednak ulegają w czasie zmianom i przybierają odpowiednio różne kształty: Pik gausowski ogonowanie Rozmycie przedniej części

Chromatografia Ilość poszczególnej substancji zasorbowanej przez fazę stacjonarną zależy od stężenia w fazie ruchomej. Stosunek pomiędzy ilością zasorbowaną a stężeniem w fazie ruchomej, przy stałej temperaturze, nazywany jest izoterma sorpcji. Izoterma sorpcji a kształt piku Rysunki przedstawiają przebieg izotermy gdy stosunek pomiędzy stężeniem badanej substancji w fazie stacjonarnej (Cs) i stężeniem substancji rozpuszczonej w fazie ruchomej (Cm) jest liniowy. Stosunek Cs / Cm określa nachylenie krzywej. C s K = C S C m Stężenie w kolumnie C m Izoterma sorpcji Dystans wzdłuż kolumny Rozdział składników w kolumnie

Mechanizm rozdziału chromatograficznego Współczynnik podziału (stała podziału): 160 0 0 0 0 0 0 0 0 0 80 0 0 0 0 80 0 0 0 0 K = C C faza ruc homa faza stacjonarna 0 80 0 0 0 80 0 0 0 0 40 40 0 0 0 40 40 0 0 0 Model układu chromatograficznego złożony jest z szeregu półek, na których osiągany jest stan równowagi. Transport substancji wzdłuż układu odbywa się w fazie ruchomej. 0 40 40 0 0 40 40 0 0 0 20 40 20 0 0 20 40 20 0 0 0 20 40 20 0 20 40 20 0 0 10 30 30 10 0 10 30 30 10 0 Przykład dla K =1 0 10 30 30 10 10 30 30 10 0 5 20 30 20 5 5 20 30 20 5

8 15 22 29 36 43 50 57 64 71 78 85 92 99 1 Mechanizm rozdziału chromatograficznego K=1 krok 5 krok 20 krok 50 krok 100 K=4 krok 5 krok 20 krok 50 krok 100 1 8 15 22 29 36 43 50 57 64 71 78 85 92 99 półka półka K=2 krok 5 krok 20 krok 50 krok 100 K=10 krok 5 krok 20 krok 50 krok 100 1 8 15 22 29 36 43 50 57 64 71 78 85 92 99 1 8 15 22 29 36 43 50 57 64 71 78 85 92 99 półka półka

Chromatografia Zależność sprawności kolumny od prędkości przepływu fazy ruchomej niejednorodne procesy przepływu (dyfuzja wirowa) dyfuzja osiowa (większe znaczenie w chromatografii gazowej) brak równowagi w wyniku oporów przenoszenia masy (powolna dyfuzja w ziarnach, może być też adsorpcja desorpcja na powierzchni) B H = A + + Cv v wysokość półki teoretycznej 0 1 2 3 4 prędkość przepływu, ml/min. sprawność kolumny

Chromatografia cieczowa

Techniki chromatografii cieczowej (LC) kolumnowa wysokosprawna (HPLC) planarna (TLC, PC) fluidalna (SFC) adsorpcyjna (LAC) krytyczna (LCCC) wykluczania przestrzennego, żelowa (SEC, GPC) odwrotna, inwersyjna (ISEC)

Chromatografia cieczowa Wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) jest uniwersalna technika analityczna, stosowana głównie do separacji wieloskładnikowych próbek, zwłaszcza zawieraja cych nielotne, takzė wielkocza steczkowe zwia zki chemiczne, takie jak białka czy kwasy nukleinowe. W chromatografii cieczowej faza stacjonarna, nieruchoma jest zwykle porowate wypełnienie a faza ruchoma (eluentem) ciecz. HPLC rózṅi sie od klasycznej chromatografii cieczowej wysokim cisńieniem fazy ruchomej koniecznym do uzyskania przepływu tej fazy przez kolumne chromatograficzna.

Chromatografia cieczowa We wczesnych latach 70-tych komercyjnie dostępne były kolumny wypełnione nieporowatym, o nieregularnych kształtach żelem krzemianowym o wymiarach około 40 μm. Ich sprawność była delikatnie mówiąc niska przy 1 metrze złoża liczba półek teoretycznych wynosiła około 1000. W latach 80-tych znane już były popularne obecnie kolumny z żelem krzemionkowym ze sferycznym, porowatym ziarnem, o średnicy 5 μm. Charakteryzuje się ono przyzwoitą sprawnością wynoszącą około 12.000 półek teoretycznych przy długości kolumny 150 mm.

Chromatografia cieczowa Chromatograf cieczowy (HPLC, SEC) zespół pryzmatów detektor spektrofotometryczny UV detektor refraktometryczny źródło światła czujnik czujnik celka pomiarowa lampa deuterowa kolumna I kolumna II zlewki eluent filtr płuczka ultradźwiękowa zespół pomp zawór odpowietrzający piec pętla dozująca zawór dozujący

Chromatografia cieczowa Detektory w chromatografii HPLC UV-VIS spektrofotometr UV-VIS, dość uniwersalny, dobra czułość, szeroki zakres liniowości, możliwość pracy przy różnej długości fali DAD jw. z matrycą diodową, jednoczesny pomiar w całym spektrum RID refraktometr różnicowy, najbardziej uniwersalny, mała czułość, wrażliwy na zmiany parametrów eluentu PMDE elektrochemiczny, duża selektywność i czułość TEA chemiluminescencyjny, selektywny na nitrozwiązki CI-MS spektrometr mas z jonizacją chemiczną TSP-MS spektrometr mas z odparowaniem rozpuszczalnika DVD wiskozymetr różnicowy pomiar lepkości stosowany w SEC LALLS detektor rozpraszania światła do pomiaru masy cząsteczkowej w SEC

Chromatografia cieczowa Fazy stacjonarne w HPLC OH Si HO O O O Si Si O OH Si O OH Si O Si OH O C 18 H 37 O O O O Si polarna (normal phase NP) podstawowy eluent: n-heksan, cykloheksan modyfikatory: 2-propanol, chloroform, dichlorometan, THF Si O OH niepolarna (reverse phase RP) podstawowy eluent: woda modyfikatory: metanol, acetonitryl, THF, bufory, sole

Chromatografia cieczowa Cechy dobrego eluentu: nie powinien działać szkodliwie na rozdzielane związki i wypełnienie kolumn; powinien dobrze rozpuszczać analizowaną mieszaninę i umożliwiać detekcję jej składników; powinien charakteryzować się dużą czystością; mała lepkość w temperaturze pomiaru przy detekcji spektrofotometrycznej przezroczystość w badanym zakresie UV wysoka higroskopijność eluentu może powodować zmianę jego właściwości przed analizą powinien być odgazowany ponieważ pęcherzyki gazu mogą przeszkadzać przy detekcji i spowodować spadek sprawności kolumny rozpuszczalniki niskowrzące mają tendencję do tworzenia pęcherzyków w kolumnie i detektorze

Chromatografia cieczowa Odgazowanie ogrzewanie eluentu do temperatury zbliżonej do jego temperatury wrzenia - zmniejszenie rozpuszczalności gazów ultradźwięki - fala podłużna rozprzestrzeniając się w ośrodku powoduje jego drgania i lokalne zmiany ciśnienia - obniżenie ciśnienia powoduje wydzielenie gazów, ponowne ich rozpuszczenie przy wzroście ciśnienia jest znacznie wolniejsze, co pozwala im opuścić roztwór przedmuchiwanie gazem obojętnym - najlepsze wyniki daje He

Chromatografia gazowa

Chromatografia gazowa Schemat chromatografii gazowej Gaz nośny 4 5 3 Gaz nośny 1 2 1 blok regulacji gazów, 2 termostat kolumny, 3 kolumna, 4 dozownik, 5 detektor

Chromatografia gazowa Schemat linii gazu nośnego w GC 2 5 6 8 9 1 3 4 7 1 butla ze sprężonym gazem, 2 zawór redukcyjny, 3 filtry, 4 regulator przepływu gazu, 5 wskaźnik ciśnienia gazu, 6 dozownik, 7 kolumna, 8 detektor, 9 wylot gazu nośnego

Chromatografia gazowa Dozownik Próbkę można dozować do GC w postaci: -gazowej zawór dozujący (pętla dozownicza) lub strzykawka; -ciekłej mikrostrzykawka (1-10 μl).

Chromatografia gazowa Kolumny: pakowane; kapilarne (70%). Materiał z którego wykonano kolumnę: metalowe (stal, miedź, aluminium), szklane, Kwarcowe. Kolumny różnią się także: rodzajem i sposobem wypełnienia, długością, średnicą wewnętrzną, grubością filmu, stopniem usieciowana.

Chromatografia gazowa Kolumny średnica wewnętrzna Średnica wewnętrzna Rozdzielczość Szybkość rozdziału Pojemność sorpcyjna 100 μm Bardzo wysoka Bardzo wysoka Dostateczna 250 μm 320 μm Wysoka Wysoka Wysoka 530 μm Dostateczna Wysoka Bardzo wysoka

Chromatografia gazowa Kolumny Ważnymi parametrami, które charakteryzują fazy stacjonarne to: zakres temperatur pracy, polarność. Substancje polarne rozdzielamy na polarnej fazie stacjonarnej. Substancje niepolarne rozdzielamy na niepolarnej fazie stacjonarnej. Na fazach stacjonarnych niepolarnych substancje niepolarne są eluowane z kolumny w kolejności ich temperatur wrzenia (ich lotności). Wypełnienie stałe Faza ciekła 0,25 mm Kolumna pakowania Kolumna kapilarna

Chromatografia gazowa Fazy stacjonarne w chromatografii gazowej 100% methylsilicon poly(dimethylsiloxane) O CH 3 Si O CH 3 Si O CH 3 Si O CH 3 Si O CH 3 Si O CH 3 Si O CH 3 Si phenyl Si cyanopropyl CH 3 CH 3 CH 3 trifluoropropyl CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 N-2-methylpropionyl- -L-valin-t-butylamid Si Si Si vinyl CH 2 Si CH CH 2 CH 2 CH 2 CN F CH CH CH 2 F F O CH 3 C CH CH 3 CH 3 CH 2 CH N H H C C O H N CH 3 CH 3 C CH 3 polyethylenglycol O CH 2 CH 2 O CH 2 CH2 O CH 2 CH 2 O CH 2 CH2 O CH 2 NO 2 O polyethylenglycol-2-nitroterephtalate C O O CH 2 CH 2 O O CH 2 CH2 O C O

Chromatografia gazowa Detektory stosowane w GC Detektory stężeniowe reagują na zmianę stężenia próbki oznaczanej w jednostce czasu i wymagające w związku z tym bardzo precyzyjnego ustalenia szybkości przepływu gazu nośnego przez detektor (TCD). Detektory masowe ich odpowiedz jest proporcjonalna do całkowitej masy komponentu eluowanego z kolumny i są niewrażliwe na wahania szybkości przepływu gazu nośnego (FID). Detektory cechują następujące parametry: Selektywność działanie selektywne w odniesieniu do jednej lub kilku grup związków np.: ECD, FPD (uniwersalne TCD, FID) Czułość najmniejsza ilość substancji wywołująca sygnał dwukrotnie większy od poziomu szumów układu. Liniowość detektora wyrażana stosunkiem największego sygnału do najmniejszego, odczytana z krzywej zależności wskazań detektora od wielkości próbki, w zakresie jej prostoliniowego przebiegu.

Chromatografia gazowa Detektory w chromatografii gazowej TCD termokonduktometryczny pomiar zmiany przewodności drutu umieszczonego w strumieniu gazu nośnego uniwersalny, ale mała czułość FID płomieniowo-jonizacyjny pomiar prądu jonizacji wykrywa związki spalające się w płomieniu (nie wykrywa np. wody), mała czułość ECD wychwytu elektronów zawiera źródło radioaktywne selektywny wobec związków zawierających ugrupowania łatwo polaryzowalne, jak chlorowce lub grupy nitrowe, wysoka czułość, mały zakres liniowości NPD, FTD azotowo-fosforowy, płomieniowo-termojonowy zawiera sól alkaliczną (Rb lub Cs), której obecność ułatwia jonizację związków azotu i fosforu, duża czułość na związki zawierające N lub P FPD płomieniowo-fotometryczny rejestruje światło o charakterystycznej długości fali, emitowane przez związki siarki i fosforu TEA pirolityczno-chemiluminescencyjny selektywny detektor NO MS spektrometr mas

Chromatografia gazowa Metody sprzężone UWAGA! Warunki zapewniające skuteczność sprzężenia innych metod analitycznych z GC: 1. Dopasowanie warunków ciśnienia i temperatury gazu opuszczającego kolumnę do tych, które są wymagane w komorze pomiarowej spektrometru; 2. Próg wykrywalności metody spektroskopowej musi być niższy od stężenia analizowanej substancji w gazie nośnym; 3. Urządzenie pośrednie sprzęgające z chromatograf ze spektrometrem musi być tak skonstruowane, aby nie następowało zbytnie rozmycie pasma chromatograficznego; 4. Czas rejestrowania widma każdego składnika nie może przekraczać czasu jego elucji z kolumny chromatograficznej.

Chromatografia gazowa Analiza Chromatografia gazowa należy do najdoskonalszych metod rozdzielania lotnych substancji, jednak jej możliwości w zakresie określania struktury lub identyfikacji związków chemicznych bez przeprowadzania dodatkowych badań innymi technikami analitycznymi są dość ograniczone. UWAGI Tylko w nielicznych przypadkach analiza chromatograficzna może być przeprowadzona w temperaturze otoczenia. W większości zastosowań proces chromatograficzny wymaga podwyższenia, a rzadziej obniżenia temperatury. W wielu przypadkach celowa jest programowana zmiana temperatury kolumny GC podczas analizy. Analizę programową temperatury prowadzi się w przypadkach, gdy różnice lotności składników analizowanej mieszaniny są znaczne.

Chromatografia gazowa Analiza jakościowa Chromatografia gazowa jest jedną z nielicznych metod analitycznych, które umożliwiają wykonanie analizy jakościowej i ilościowej złożonych mieszanin w jednym procesie. Oznaczenie jakościową wykonuje się wykorzystując: czasy retencji, reakcje chemiczne, detektory selektywne, połączenie chromatografii gazowej z innymi metodami analitycznymi.

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa Chromatografia gazowa jest jedną z nielicznych metod analitycznych, które umożliwiają wykonanie analizy jakościowej i ilościowej złożonych mieszanin w jednym procesie. Dokładność analizy zależy od: jakości chromatografu; rodzaju detektora (i zakresu liniowości jego wskazań); sposobu wykonania analizy, zbierania i przeliczania danych. O ilości substancji w mieszaninie można wnioskować na podstawie powierzchni i wysokości piku. Stosunek proporcjonalności jest różny dla poszczególnych substancji.

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa Istnieje kilka metod analizy ilościowej próby: 1. Metoda kalibracji bezwzględnej (wzorca zewnętrznego), 2. Metoda wzorca wewnętrznego, 3. Metoda wzorca wewnętrznego z dodatkiem substancji oznaczanej, 4. Metoda normalizacji wewnętrznej.

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 1. metoda kalibracji bezwzględnej Kalibracja bezwzględna (wzorca zewnętrznego) może być stosowana w każdym przypadku chromatografowania, także gdy: nie wszystkie składniki są obecne na chromatogramie, jeden lub kilka składników są trwale zatrzymywane na kolumnie, niektóre piki nie są rozdzielone. Bezwzględnie wymagane są: dobry przyrząd (powtarzalne warunki rozdziału), powtarzalne wskazania detektora (bez zmian przez cały czas sporządzania wykresu kalibracyjnego oraz wykonania analizy).

Chromatografia Analiza ilościowa 1. metoda kalibracji bezwzględnej C = 15 mm C = 10 mm C = 6 mm C = 3 mm C = 1 mm stężenie 15 10 5 0 0 20 40 60 80 powierzchnia piku Kalibracji bezwzględnej (wzorca zewnętrznego) - na podstawie roztworów wzorcowych wykonywana jest krzywa kalibracyjna zależności pola piku od ilości oznaczanej substancji - szybka i poprawna pod warunkiem stosowania aparatu dobrej jakości oraz powtarzalnego dozowania

Chromatografia gazowa Sposób wykonania analizy ilościowej Do kolumny dozuje się ściśle określone ilości pojedynczej substancji wzorcowej (lub mieszaniny) o dokładnie znanej zawartości substancji wzorcowej. Substancja wzorcowa musi być taka sama jak substancja oznaczana. Każde dozowanie powtarza się 2-3 razy. 600 Na podstawie otrzymanych średnich rysuje się wykres zależności powierzchni pików od objętości lub stężenia zadozowanego wzorca. Powierzchnia piku 500 400 300 200 100 0 0 1 2 3 4 5 6 Stężenie analizowanej substancji [mg/l]

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 2. metoda wzorca wewnętrznego Metoda wzorca wewnętrznego jest stosowana bardzo często, ponieważ przy tym sposobie kalibracji nie jest wymagany przyrząd bardzo wysokiej klasy i oznaczenie może być wykonane w krótszym czasie niż sposobem wzorca zewnętrznego. Jako wzorzec wewnętrzny stosuje się substancję nie występującą w próbie, a której pik na chromatogramie jest położony blisko pików oznaczanych składników mieszaniny. Ściśle odmierzoną ilość wzorca dodaje się do dokładnie znanej ilości próbki. Otrzymaną mieszaninę dozuje się do kolumny, biorąc do obliczeń wartości średnie z kilku pomiarów.

Chromatografia Analiza ilościowa 2. metoda wzorca wewnętrznego C = 15 mm C = 10 mm C = 6 mm C = 3 mm C = 1 mm 15 stężenie 10 5 0 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 stosunek powierzchni pików: substancja badana / wzorzec Wzorca wewnętrznego - krzywa kalibracyjna opisuje zależność między ilością oznaczanej substancji a stosunkiem pól pików substancji i wprowadzonego do próbki wzorca - dłuższa niż poprzednia, ale daje poprawne wyniki niezależnie od wielkości zadozowanej próbki

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 2. metoda wzorca wewnętrznego Procentową zawartość oznaczanego składnika oblicza się zależności: G W - masa wzorca dodanego do próbki S i powierzchnia piku oznaczanego składnika f i względny współczynnik korekcyjny oznaczanego składnika w odniesieniu do wzorca wewnętrznego G p mas analizowanej próbki (bez dodanego wzorca) S w powierzchnia piku wzorca

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 3. metoda wzorca wewnętrznego z dodatkiem substancji oznaczanej S i1 powierzchnia piku oznaczanego składnika na chromatogramie próbki bez dodatku wzorca S i2 powierzchnia piku oznaczanego składnika na chromatogramie próbki z dodatkiem wzorca G p - masa próbki G W - masa wzorca dodanego do próbki w 1 /w 2 stosunek masowy zadozowanych próbek (bez wzorca i dodanym wzorcem) S j1 powierzchnia piku substancji j na chromatogramie próbki bez dodatku wzorca S j2 powierzchnia piku substancji j na chromatogramie próbki z dodatkiem wzorca

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 3. metoda wzorca wewnętrznego z dodatkiem substancji oznaczanej Sposób normalizacji wewnętrznej wymaga, aby na chromatogramie znajdowały się rozdzielone piki odpowiadające wszystkim składnikom obecnym w próbce. Po 2-3 zadozowaniach próbki mierzy się powierzchnie poszczególnych pików i sumuje się ich wartości średnie. Suma stanowi 100%, a stosunek powierzchni wszystkich pików wyraża zawartość procentową odpowiadających im substancji w próbce C i.

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 4. metoda normalizacji wewnętrznej S i powierzchnia piku i tej substancji k liczba składników w próbce Otrzymane w taki sposób wyniki są obarczone dość dużym błędem i można je przyjąć tylko wtedy, gdy właściwości fizykochemiczne składników próbki są podobne i podobna jest odpowiedz detektora względem każdego z nich.

Chromatografia gazowa Analiza ilościowa 4. metoda normalizacji wewnętrznej W celu uzyskania wyników bardziej wiarygodnych wprowadza się współczynniki korekcyjne f i tym celu dodatkowo rozdziela się mieszaninę kalibracyjną zawierającą składniki obecne w próbce. Następnie dla każdego składnika i wyznacza się współczynnik korekcyjny. %S ip obliczone pierwotne procentowe zawartości składników w próbce %S iwz obliczone pierwotne procentowe zawartości składników w mieszaninie wzorcowej

Chromatografia metody sprzężone

Chromatografia gazowa Metody sprzężone Zaletą GC jest możliwość połączenia rozdziału chromatograficznego z innymi metodami analitycznymi. Metody spektroskopowe: Spektrofotometria cząsteczkowa w zakresie podczerwieni (IR) Spektrometria masowa (MS) Spektrometria magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR) Emisyjna spektrometria atomowa (AAS)

Chromatografia przykłady badań

Chromatografia - zastosowania Oznaczanie metali. Analiza jakościowa i ilościowa złożonych mieszanin lotnych związków organicznych występujących w normalnych warunkach jako gazy ciecze i ciała stałe. Ocena czystości i jakości materiałów, produktów żywnościowych i farmaceutycznych. Automatyczna kontrola i sterowanie procesami przemysłowymi. Preparatywne wydzielanie składników mieszanin. Badania fizykochemiczne. Wyznaczanie średnich mas cząsteczkowych polimerów. ale też w odlewnictwie Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Chromatografia w odlewnictwie Z technologią odlewnicza wiąże się wiele procesów, podczas których dochodzi do wydzielania substancji gazowych do atmosfery. Należą do nich: Magazynowanie, transport i przeładunek składników mas odlewniczych Wytwarzanie form i rdzeni odlewniczych Wytapianie metalu w piecu odlewniczym Odlewanie, chłodzenie i wybijanie odlewu z formy Oczyszczanie i wykańczanie odlewów Obróbka cieplna i mechaniczna odlewów Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Chromatografia w odlewnictwie Gazy procesu zalewania i stygnięcia form odlewniczych nieorganiczne Związki chemiczne występujące w postaci gazów organiczne Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Chromatografia w odlewnictwie Gromadzenie gazów procesu zalewania i stygnięcia form odlewniczych Schemat stanowiska pomiarowego do określania emisji gazów podczas zalewania i stygnięcia formy odlewniczej, które zostało wykonane według oryginalnej na Wydziale Odlewnictwa Akademii Górniczo- Hutniczej w Krakowie. próbka wlew główny węgiel aktywny system stem osuszający gaz ciecz pojemnik 1 waga rejestrator, komputer pojemnik 2 forma Warstwa kontrolna (dodatkowa) węgla aktywnego Warstwa pomiarowa (właściwa) węgla aktywnego Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Chromatografia w odlewnictwie Przygotowanie próbki do badań na chromatografie gazowym Dwusiarczek węgla Węgiel aktywny Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Chromatografia w odlewnictwie Opis potrzebnych czynności do przygotowania chromatografu gazowego firmy Thermo Scientific TRACE Ultra GC do wstępnych badań: Stanowisko pomiarowe do oznaczania objętości wydzielanych gazów (gazotwórczości) i emisji BTEX z mas opracowane przez zespół prof. M. Holtzera [3] Chromatograf gazowy firmy Thermo Scientific TRACE Ultra GC kalibracja aparatury wzorcem gazowym mieszanką BTEX do badań za pomocą pętli gazowej 250 ml, pomiar stężenia BTEX w mieszaninie gazowej z wykorzystaniem zmiennych parametrów metody chromatograficznej, pomiar zawartości BTEX w powietrzu atmosferycznym w laboratorium chromatografii gazowej i spektrometrii masowej na Wydziale Odlewnictwa Akademii Górniczo - Hutniczej, rejestracja chromatogramów, przedstawienie uzyskanych wyników w postaci raportów i ich omówienie. Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Chromatografia w odlewnictwie Wyniki badań BTEX we wzorcowej mieszaninie gazów Wyniki pomiaru stężenia BTEX w mieszaninie gazowej z wykorzystaniem zmiennych parametrów metody chromatograficznej:

Chromatografia w odlewnictwie Wyniki badań zawartości BTEX w masie ze spoiwem polimerowym 5.0e5 4.0e5 user modified Sig. 1 in C:\HPCHEM\...\002F0101.D Wyniki pomiarów zawartości związków BTEX w masie formierskiej zawierającej spoiwo polimerowe: 3.0e5 2.0e5 Benzen 7.048 1.0e5 0 Toluen 9.660 Etylobenzen 12.775 m+p Ksylen 13.080 o Ksylen 13.739 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Time(min.) 1.0e5 8.0e4 6.0e4 user modified Sig. 1 in C:\HPCHEM\...\006F0101.D 4.0e4 2.0e4 0 Benzen 7.031 Toluen 9.641 Etylobenzen 12.760 m+p Ksylen 13.080-2.0e4 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Time(min.) Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska

Źródła 1. Witkiewicz Z., Kałużna-Czaplińska J.: Podstawy chromatografii i technik elektromigracyjnych, WNT, 2013. 2. Cygański A.: Podstawy metod elektroanalitycznych, WNT Warszawa 1999. 3. Szczepaniak W.: Metody instrumentalne w analizie chemicznej, PWN Warszawa 2011. 4. Saba J.: Wybrane metody instrumentalne stosowane w chemii analitycznej, UMCS 2008. 5. Loch J., Grabowska B., Kaczmarska B.: BTEX emissions from BioCo2 bonded moulding sands, Metallurgy and Foundry Engineering, 2013 vol. 39 no. 1, s. 23 29. 6. Loch J.: Wykorzystanie chromatografii gazowej w odlewnictwie, Praca Magisterska, Promotor: B. Grabowska, AGH, Kraków 2012. 7. http://staging-laborant.biotechnologia.pl Wykład WO AGH : Nowoczesne Techniki Badawcze w Inżynierii Materiałowej, dr hab. Beata Grabowska