Oznaczenie Hevylite polega na rozpoznaniu epitopów pomiędzy stałymi regionami ciężkich i lekkich łańcuchów. lg oznacza lgg, A lub M.

Transkrypt

1 Unikatowy test do dokładnego oznaczania kompletnych cząsteczek immunoglobulin. Hevylite umożliwia lepsze monitorowanie pacjentów ze szpiczakiem mnogim. Łańcuch lekki κ Łańcuch lekki λ docelowy epitop dla testów Hevylite cząsteczka immunoglobuliny lg κ Łańcuchy ciężkie cząsteczka immunoglobuliny lg λ docelowy epitop dla testów Hevylite Oznaczenie Hevylite polega na rozpoznaniu epitopów pomiędzy stałymi regionami ciężkich i lekkich łańcuchów. lg oznacza lgg, A lub M. The Specialist Protein Company

2 Testy Hevylite pozwalają na lepsze monitorowanie pacjentów ze szpiczakiem mnogim. Hevylite pozwala identyfikować różne typy łańcuchów lekkich poszczególnych klas immunoglobulin np. IgGκ, IgGλ, IgAκ, IgAλ, IgMκ, IgMλ. Cząsteczki immunoglobulin są oznaczane w parach, np. IgGκ/IgGλ, a wartość stosunku stężenia par łańcucha ciężkiego/lekkiego odzwierciedla produkcję tych immunoglobulin, podobnie jak stosunek wolnych lekkich łańcuchów κ/λ w testach Freelite. Wynik stosunku Hevylite dokładnie wykazuje produkcję monoklonalnego białka ponad produkcję poliklonalnych protein dając informację o immunosupresji. Zastosowanie testów Hevylite: 1. Kiedy monitorujemy pacjentów ze szpiczakiem mnogim z białkiem monoklonalnym, które trudno określić ilościowo za pomocą elektroforezy. 2. Do identyfikacji choroby resztkowej i do wczesnego rozpoznania wznowy choroby. 3. Z testami Freelite dla optymalnego monitorowania leczenia. Dlaczego wyniki elektroforezy mogą być trudne do interpretacji? 1a Monoklonalne białka mogą migrować z innymi białkami surowicy 14 surowic pacjentów ze szpiczakiem mnogim IgA Wyniki elektroforezy białek surowicy (SPE) 14 pacjentów ze szpiczakiem mnogim IgA. Wiele spośród próbek zawiera białko monoklonalne, które wędruje w regionie β, powodując, że ocena wyniku SPE jest niedokładna. Szczególnie u pacjentów 1,2,3, białko monoklonalne może w ogóle nie być zmierzone z powodu jednoczesnej migracji. Około 50% pacjentów ze szpiczakiem IgA i 5% pacjentów ze szpiczakiem IgG nie może być dokładnie monitorowanych za pomocą elektroforezy z powodu ograniczeń jednoczesnej migracji. 1 Usuń subiektywność interpretacji SPE / IFE

3 1b SPE nie jest liniowa i saturacja barwnika może prowadzić do niedoszacowania wyników Przykład białka monoklonalnego, którego wynik w rozdziale elektroforetycznym (SPE) wynosi 44,9 g/l, jakkolwiek całkowite IgG wynosi 64,9 g/l. Wynik białka monoklonalnego w rozdziale SPE jest niedoszacowany z powodu saturacji barwnika w żelu. W ten sposób 30% monoklonalnych immunoglobulin w monitorowaniu odpowiedzi na leczenie zostanie pominięte używając techniki elektroforezy białek surowicy. PEL - elektroforeza białek IFE - immunofiksacja Katzmann & Kyle, Manual of Molecular and clinical Laboratory Immunology, 7th Edison, ASM Press, Washington, DC Używaj testów Hevylite aby pokonać nieliniowość i problemy z saturacją barwnika w eletroforezie 1c Elektroforeza białek surowicy (SPE) jest niedokładna poniżej 20 g/l Rysunek 1c pokazuje ograniczoną czułość SPE, która jest niedokładna przy stężeniu poniżej 20 g/l. Im niższe stężenie tym większa zmienność, co sprawia, że ilościowe oznaczenie białka monoklonalnego jest niedokładne przy niskich stężeniach. 2 Reprodukcja za zgodą American Association for Clinical Chemistry. Używaj Hevylite dla dokładnego monitorowania pacjentów z niskim poziomem białka monoklonalnego Używaj testów Hevylite do bieżącego monitorowania pacjentów Zapytaj o testy

4 2 Hevylite pozwalają zidentyfikować chorobę resztkową i wcześnie dostarczyć informacji o wznowie. Wysoka czułość Hevylite pozwala ujawnić obecność choroby resztkowej u pacjentów, którzy według innych metod wykazują odpowiedź całkowitą. "Stosunek HLC może być szczególnie istotny przy ocenie choroby resztkowej" 3 Co więcej, pacjenci w stanie wznowy mogą mieć białko monoklonalne niewykrywalne przy pomocy SPE i IFE, ze względu na ich ograniczoną czułość. W takich przypadkach proces wznowy może zostać przeoczony. Hevylite umożliwiają wykrycie supresji immunoglobulin, prowadzącej do nieprawidłowego stosunku Hevylite. Dzięki temu Hevylite mają większą czułość niż elektroforeza w diagnostyce choroby resztkowej. Omówienie przypadku pacjenta z IgAκ, u którego stwierdzono odpowiedź całkowitą po terapii. 1 Dzień 0 SPE dodatnie Dzień 18 SPE dodatnie Dzień 298 SPE ujemne Dzień 467 SPE ujemne Dzień 538 SPE ujemne Dzień 594 SPE wątpliwe Dzień 740 SPE dodatnie 7 months 5 1 /2 months Czerwone liczby - wynik nieprawidłowy IF - Immunofiksacja Dzień 467 Pacjent miał ujemny wynik elektroforezy i prawidłowy stosunek HLC Używaj Hevylite by wykryć wznowę we wczesnym stadium, mimo ujemnych wyników SPE i IFE Dzień miesięcy później wartość stosunku HLC była nieprawidłowa, wskazując na nawrót choroby Dzień 594 Wynik IFE był dodatni dopiero 5 1 /2 miesiąca po uzyskaniu nieprawidłowego stosunku HLC Dzień 740 Otrzymano pozytywny wynik SPE. Stosunek HLC przyjmuje coraz wyższe wartości

5 3 Dlaczego powinieneś używać testy Freelite i Hevylite razem? W szpiku kostnym pacjentów ze szpiczakiem mnogim znajdują się klony komórek produkujące: (a) tylko kompletne cząsteczki immunoglobulin, (b) tylko wolne lekkie łańcuchy, (c) pełne cząsteczki immunoglobulin i wolne lekkie łańcuchy (FLC) Freelite i Hevylite są dwoma niezależnymi biomarkerami w szpiczaku mnogim: Freelite mierzą wolne lekkie łańcuchy (mg/l) Hevylite mierzą cząsteczki immunoglobulin (g/l) Poniżej studium przypadku pacjenta ze szpiczakiem mnogim IgA kappa, który pokazuje dlaczego ważne jest monitorowanie pacjentów za pomocą Hevylite obok testów Freelite. stosunek IgA Hevylite górny zakres stosunku Hevylite stężenie κflc górny zakres stężenia κflc Komórki plazmatyczne produkujace lekkie łańcuchy Komórki plazmatyczne produkujące immunoglobuliny Pacjent z nieprawidłowymi HLC i FLC. Po leczeniu zarówno stosunek HLC jak i stężenie kappa FLC normalizują się. Po 900 dniach u pacjenta doszło do nawrotu choroby ze wzrostem stosunku IgA Hevylite lecz z niewielkimi zmianami w poziomie kappa FLC. Po dalszym leczeniu stosunek HLC nie normalizuje się. Kolejny nawrót obserwowano około 2000 dnia ze wzrostem stosunku HLC i stężenia kappa FLC. Komórki szpiczaka z biopsji szpiku kostnego pacjenta mogą produkować albo kompletne immunoglobuliny, wolne lekkie łańcuchy lub obydwa te składniki co, pozwala założyć, że prognostyczne informacje dostarczone przez nowe markery (FLC i HLC) określające składniki M-białka mogą się wzajemnie uzupełniać 4 Freelite i Hevylite razem zapewniają najlepsze rozwiązanie monitorowania pacjentów ze szpiczakiem mnogim Bibliografia: 1. Ludwig H, et al. Immunoglobulin heavy/light chain ratios improve para protein detection and monitoring, identify residua disease and correlate with survival in multiple myeloma patients. Leuk 2013, 27: Katzmann J, et. Al. Long-Term Biological Variation of Serum Protein Electrophoresis M-Spike, Urine M-Spike, and Monoclonal Serum Free Light Chain Quantification: Implications for Monitoring Monoclonal Gammopathies. Clin Chem 2011, 57: Chae M, et al. Evaluation of the heavy/light chain assay for the diagnosis and monitoring of multiple myeloma. Int JnI Lab Hem 2013; 1-3doi:10.111/ijlh Koulieris E, et al. ratio of involved/uninvolved immunoglobulin quantification by Heavylite assay: Clinical and prognostic impact in Multiple Myeloma. Exp Hem and Onc ;1;9

6 Co mówią eksperci: Białka monoklonalne migrujące jako szerokie prążki mogą być trudne do rozróżnienia, a ilościowe oznaczenie par immunoglobulin HLC dostarcza informacji na temat syntezy klonalnej Donato et al. Clin Chem. 2011;57(12): Obok klinicznej ewaluacji, test ten będzie z pewnością stosowany w celu potwierdzenia obecności i ilościowego oznaczenia immunoglobulin monoklonalnych, oceny odpowiedzi na leczenie, wczesnej wznowy i pomoże w rozpoznaniu choroby resztkowej u pacjentów ze szpiczakiem mnogim Ludwig et al. Leukemia 2013; 27: Testy HLC otwierają nowe drogi badania biologii komórek plazmatycznych i ich chorób. Jesteśmy w stanie zidentyfikować nieprawidłowości, które dotąd były przed nami ukryte.. Katzmann et al. Leukemia 2013;27:1-2 Testy HLC to ważny dodatek do zestawu narzędzi pozwalających wykrywać i mierzyć białko monoklonalne. Dostarczają odtwarzalnych informacji ilościowych na temat M-białka, wraz z określeniem typu HLC M-białka Donato et al. Clin Chem. 2011;57(12): Hevylite dostępne na aparatach SPAPLUS oraz BN II: Analizator Opis Liczba testów Kod Binding Site SPAPLUS Hevylite IgG Kappa kit 50 test NK621.S Hevylite IgG Lambda kit 50 test NK622.S Hevylite IgA Kappa kit 50 test NK623.S Hevylite IgA Lambda kit 50 test NK624.S Hevylite IgM Kappa 50 test NK625.S Hevylite IgM Lambda 50 test NK626.S Analizator Opis Liczba testów Kod Hevylite IgG Kappa kit 50 test NK621.T Hevylite IgG Lambda kit 50 test NK622.T Hevylite IgA Kappa kit 50 test NK623.T Siemens Hevylite IgA Lambda kit 50 test NK624.T BN TM II Hevylite IgM Kappa 50 test NK625.T Hevylite IgM Lambda 50 test NK626.T Więcej informacji na stronie: The Binding Site Group Ltd. 8 Calthorpe Rd, Edgbaston, Birmingham, B15 1QT, UK. Tel: +44 (0) Fax: +44 (0) info@bindingsite.co.uk W Europie i USA, Freelite i Hevylite są zarejestrowane jako nazwa handlowa The Binding Site Group Ltd, Birmingham, UK Biokom ul. Wspólna 3, Janki k / Warszaway. Tel/fax: info@biokom.com.pl