(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2013/28 EP B1 (13) (1) T3 Int.Cl. A01N 47/12 ( ) A01N 47/30 ( ) A01N 43/00 ( ) A01N 41/ ( ) A01N 43/40 ( ) A01N 43/78 ( ) A01P 3/00 ( ) A01P 13/00 ( ) (4) Tytuł wynalazku: Synergistyczna kompozycja biobójcza (30) Pierwszeństwo: US P US P (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2012/24 (4) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 2013/12 (73) Uprawniony z patentu: Dow Global Technologies LLC, Midland, US (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 SANGEETA GANGULY, Chicago, US EMERENTIANA SIANAWATI, Vernon Hills, US (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Jolanta Mitura PATPOL KANCELARIA PATENTOWA SP. Z O.O. ul. Nowoursynowska 162 J Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 Opis [0001] To zgłoszenie zastrzega pierwszeństwo na mocy Tytułu 3 U.S.C. 119(e) tymczasowego zgłoszenia patentowego US o numerze 61/27330 złożonego sierpnia 2009 oraz tymczasowego zgłoszenia patentowego US o numerze 61/ złożonego maja 20. [0002] Ten wynalazek dotyczy kombinacji środków biobójczych, które mają silniejsze działanie niż można stwierdzić dla poszczególnych związków przeciwdrobnoustrojowych. [0003] Zastosowanie kombinacji co najmniej dwóch związków przeciwdrobnoustrojowych może rozszerzyć potencjalne rynki zbytu, zmniejszyć stosowane stężenia i koszty i zmniejszyć ilość odpadów. W niektórych przypadkach, dostępne w handlu związki przeciwdrobnoustrojowe nie mogą zapewnić skutecznego zwalczania mikroorganizmów, nawet przy stosowaniu ich w dużych stężeniach, z powodu słabej aktywności wobec pewnych typów mikroorganizmów, na przykład tych odpornych na pewne związki przeciwdrobnoustrojowe. W celu zapewnienia całościowego zwalczania mikroorganizmów w określonym środowisku końcowego zastosowania czasem stosuje się kombinacje różnych związków przeciwdrobnoustrojowych. Na przykład w patencie US o numerze ujawniono kombinację butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu (IPBC) i 2- (metoksykarbonyloamino)benzimidazolu, ale w tym odnośniku nie proponuje się żadnych spośród zastrzeganych tu kombinacji. Kombinacje przeciwdrobnoustrojowe, które zawierają związki fenylomocznikowe są znane; na przykład w EP 0349 A1, WO 2008/ A1 oraz WO 00/7267 A1 ujawniono kombinację 3- (3,4-dichlorofenylo)-1,1-dimetylomocznika (diuron) z IPBC. W EP 0349 również ujawniono kombinację diuronu z sulfonem dijodometylowo-p-tolilowym (DIMTS) lub pirytionem cynku (ZPT), a w WO 2008/ A1 dodatkowo ujawniono kompozycje zawierające IPBC i diuron z 2-n-oktylo-4-izotiazolin-3-onem (OIT) lub tiabendazolem (TBZ). Dodatkowo, kombinacja 2-n-oktylo-4-izotiazolin-3-on (OIT), karbaminian metylobenzimidazol-2-ilu i diuron stanowi składnik aktywny środka biobójczego ROCIMA 63 (Rohm and Haas). Ponadto istnieje zapotrzebowanie na kolejne kombinacje związków przeciwdrobnoustrojowych mających zwiększoną aktywność wobec różnych szczepów mikroorganizmów, w celu zapewnienia skutecznego ich zwalczania, zwłaszcza w powłokach z suchych warstw. Problemem rozwiązanym przez ten wynalazek jest dostarczenie takich kolejnych kombinacji związków przeciwdrobnoustrojowych. PODSUMOWANIE WYNALAZKU [0004] Niniejszy wynalazek dotyczy synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) butylokarbaminian 3-jodo-2-propynylu; oraz (b) fluometuron; przy czym stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do fluometuronu wynosi od :1 do 1:. [000] Niniejszy wynalazek ponadto dotyczy synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) butylokarbaminian 3-jodo-2-propynylu; (b) fluometuron; oraz (c) 4,-dichloro-2-n-oktylo-4-izotiazolin- 3-one (DCOIT); przy czym stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do fluometuronu wynosi od 3:1 do 1:2; a stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do 4,-dichloro-2-n-oktylo-4- izotiazolin-3-onu wagowy od 8:1 do 4:1. [0006] Niniejszy wynalazek dotyczy synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) butylokarbaminian 3-jodo-2-propynylu; (b) fluometuron oraz (c) sulfon dijodometylowo-p-tolilowy (DIMTS); przy czym stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do fluometuronu wynosi od 3:1 do 1:2; a stosunek wagowy butylokarbaminian 3-jodo-2-propynylu do sulfonu dijodometylowo-p-tolilowego wynosi od 8:1 do 4:1. 1

3 [0007] Niniejszy wynalazek dotyczy synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) fluometuron oraz (b) 2-n-oktylo-4-izotiazolin-3-on (OIT); przy czym stosunek wagowy fluometuronu do OIT wynosi od 1:1 do 1:2. [0008] Niniejszy wynalazek dotyczy synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) fluometuron oraz (b) pirytion cynku (ZPT); przy czym stosunek wagowy fluometuronu do ZPT wynosi od :1 do 1:1. [0009] Niniejszy wynalazek dotyczy ponadto synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) fluometuron oraz (b) tiabendazol (TBZ); przy czym stosunek wagowy fluometuronu do TBZ wynosi od :1 do 1:1. [00] Niniejszy wynalazek dotyczy ponadto synergistycznej kompozycji przeciwdrobnoustrojowej zawierającej (a) fluometuron oraz (b) sulfon dijodometylowo-p-tolilowy (DIMTS); przy czym stosunek wagowy fluometuronu do DIMTS wynosi od :1 do 1:1. SZCZEGÓŁOWY OPIS WYNALAZKU [0011] Stosowane tu, poniższe określenia mają określone znaczenia, o ile kontekst wyraźnie nie wskazuje inaczej. jest to 1,1-dimetylo-3-(α,α,α-trifluoro-m-tolilo)mocznik. Określenie "związek przeciwdrobnoustrojowy" dotyczy związku mogącego zahamować lub zwalczać wzrost mikroorganizmów; związki przeciwdrobnoustrojowe obejmują bakteriocydy, bakteriostatyki, fungicydy, fungistatyki, algicydy i algistatyki, w zależności od zastosowanego poziomu dawki, warunków układu i żądanego poziomu hamowania mikroorganizmów. Określenie "mikroorganizm" obejmuje na przykład grzyby (takie jak drożdże i pleśń), bakterie oraz algi. W niniejszym opisie stosuje się następujące skróty: ppm = części na milion wagowo (wag./wag.), ml = mililitr, ATCC = American Type Culture Collection oraz MIC = minimalne stężenie hamujące. O ile nie wskazano inaczej, temperatury są podawane w stopniach Celsiusa ( C), procenty (%) oznaczają procenty wagowe. Procenty związków przeciwdrobnoustrojowych w kompozycji według wynalazku są podane w oparciu o całkowity ciężar składników aktywnych w kompozycji, to jest samych związków przeciwdrobnoustrojowych, wyłączając każdą ilość rozpuszczalników, nośników, środków dyspergujących, stabilizatorów lub innych substancji, które mogą być obecne. [0012] W niektórych wykonaniach wynalazku, w których kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawiera IPBC i fluometuron, stosunek wagowy IPBC do fluometuronu wynosi od 8:1 do 1:7, korzystnie od 6:1 do 1:, korzystnie od :1 do 1:; korzystnie od 6:1 do 1:4, korzystnie od :1 do 1:4; korzystnie od 4:1 do 1:4; korzystnie od :1 do 1:3; korzystnie od 4:1 do 1:3. [0013] W niektórych wykonaniach wynalazku, w których kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawiera IPBC, fluometuron i DCOIT, stosunek wagowy IPBC do fluometuronu wynosi od 2:1 do 1:2; korzystnie od 3:1 do 1:1; korzystnie od 2:1 do 1:1; a stosunek wagowy IPBC do DCOIT wynosi od 7:1 do 4:1; korzystnie od 8:1 do :1; korzystnie od 7:1 do :1; korzystnie od 6:1 do :1. [0014] W niektórych wykonaniach wynalazku, w których kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawiera IPBC, fluometuron i DIMTS, stosunek wagowy IPBC do DIMTS wynosi od 2:1 do 1:2; korzystnie od 3:1 do 1:1; korzystnie od 2:1 do 1:1; a stosunek wagowy IPBC do DIMTS wynosi od 7:1 do 4:1; korzystnie od 8:1 do :1; korzystnie od 7:1 do :1; korzystnie od 6:1 do :1. 2

4 [001] W niektórych wykonaniach wynalazku, w których kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawiera fluometuron i ZPT, stosunek wagowy fluometuronu do ZPT wynosi od :1 do 1:12, korzystnie od 8:1 do 1:12, korzystnie od :1 do 1:; korzystnie od 8:1 do 1:, korzystnie od 7:1 do 1:; korzystnie od 6:1 do 1:. [0016] W niektórych wykonaniach wynalazku, w których kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawiera fluometuron i TBZ, stosunek wagowy fluometuronu do TBZ wynosi od :1 do 1:12, korzystnie od 8:1 do 1:12, korzystnie od :1 do 1:; korzystnie od 8:1 do 1:, korzystnie od 7:1 do 1:; korzystnie od 6:1 do 1:. [0017] W niektórych wykonaniach wynalazku, w których kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawiera fluometuron i DIMTS, stosunek wagowy fluometuronu do DIMTS wynosi od :1 do 1:12, korzystnie od 8:1 do 1:12, korzystnie od :1 do 1:; korzystnie od 8:1 do 1:, korzystnie od 7:1 do 1:; korzystnie od 6:1 do 1:. [0018] W niektórych wykonaniach wynalazku, kombinacje przeciwdrobnoustrojowe według tego wynalazku są włączone do ciekłych kompozycji, zwłaszcza dyspersji polimerów w środowiskach wodnych. Kombinacje biobójcze są szczególnie użyteczne do konserwacji materiałów budowlanych, na przykład klejów, szczeliwa, masy szpachlowej, masy uszczelniającej, płyty ściennej itd., farb, powłok, polimerów, tworzyw sztucznych, kauczuku syntetycznego i naturalnego, produktów papierowych, arkuszy włókna szklanego, izolacji, zewnętrznych izolacyjnych systemów wykończeniowych, papy dachowej i podkładów podłogowych, tynków budowlanych, produktów drewnianych i kompozytów drewno-tworzywo sztuczne. W niektórych wykonaniach wynalazku, kompozycje przeciwdrobnoustrojowe stanowią farby lateksowe lub inne ciekłe kompozycje powłokowe zawierające ujawnione tu kombinacje biobójcze. Kombinacje biobójcze są użyteczne do konserwowania powłoki z suchych warstw, uzyskanej po naniesieniu farby lub innej ciekłej kompozycji powłokowej. W niektórych wykonaniach, kompozycję przeciwdrobnoustrojową stanowi akrylowa farba lateksowa, obejmująca jedną lub więcej ujawnionych tu kombinacji biobójczych lub powłoka z suchych warstw uzyskana po naniesieniu tej farby na powierzchnię. [0019] Typowo ilość kombinacji biobójczych według niniejszego wynalazku dla zahamowania wzrostu mikroorganizmów wynosi od 0 ppm do 000 ppm składnika aktywnego. W niektórych wykonaniach wynalazku składniki aktywne kompozycji są obecne w ilości co najmniej 300 ppm, korzystnie co najmniej 00 ppm, korzystnie co najmniej 600 ppm, korzystnie co najmniej 700 ppm. W niektórych wykonaniach składniki aktywne kompozycji są obecne w ilości nie większej niż 8000 ppm, korzystnie nie większej niż 6000 ppm, korzystnie nie większej niż 000 ppm, korzystnie nie większej niż 4000 ppm, korzystnie nie większej niż 3000 ppm, korzystnie nie większej niż 200 ppm, korzystnie nie większej niż 2000 ppm, korzystnie nie większej niż 1800 ppm, korzystnie nie większej niż 1600 ppm. Stężenia wymienione powyżej dotyczą ciekłej kompozycji zawierającej kombinacje biobójcze; poziomy środków biobójczych w powłokach z suchych warstw będą wyższe. [0020] Niniejszy wynalazek obejmuje również sposób zapobiegania wzrostowi mikroorganizmów w materiałach budowlanych, zwłaszcza w powłokach z suchych warstw, przez włączenie dowolnej z zastrzeganych kombinacji środków biobójczych do tych materiałów. [0021] można łączyć z jednym lub więcej spośród IPBC, DCOIT, OIT, ZPT, DIMTS oraz TBZ w celu wytworzenia synergistycznych potrójnych lub wyższych kombinacji nie ujawnionych tu w innym miejscu. 3

5 PRZYKŁADY 1 [0022] Wytwarzanie próbek: Próbki białej akrylowej farby lateksowej wolnej od środków biobójczych wytworzono w 0 ml porcjach. Każdy środek biobójczy dodano później, aby uzyskać niezbędne stężenie składnika aktywnego w farbie. Badanymi całkowitymi stężeniami środków biobójczych były 70, 100, 200 i 000 ppm. Po dodaniu środków biobójczych, każdą próbkę mieszano ręcznie przez minimum 30 s, a następnie przez 3 min w mieszalniku do farb (RED DEVIL). Każdą z próbek farby, a także próbkę kontrolną (niezawierającą środka biobójczego), wykorzystano do wytworzenia powłok na czarnych panelach z kopolimerowego tworzywa sztucznego chlorek/octan winylu (LENETA, Mahwah, NJ), stosując 3 milicalowy aplikator sztabkowy typu bird. Panele dokładnie suszono przez dni, unikając bezpośredniego wystawienia na działanie promieni słonecznych. Z każdego panelu wycięto kwadratowe płytki (1 mm 2 ) i wykorzystano jako podłoże do badań skuteczności przeciw grzybom i algom. Taka wielkość próbki umożliwiała obecność obrąbka agaru, gdy próbkę umieszczono w studzience płytki testowej. Warunki testu: W celu utrzymania wzrostu mikroorganizmów stosowano odpowiednie pożywki (BOLD 3N dla zielenic, BG-11 dla cyjanobakterii oraz PDA dla grzybów). Dla alg, płytki testowe utrzymywano przez 3 tygodnie w temperaturze pokojowej (2 C - 26 C), w otoczeniu z cyklami światło-ciemność. W celu zagrzybienia, płytki testowe utrzymywano przez 3 tygodnie w temperaturze 30 C. W końcu okresu inkubacyjnego próbki oceniono pod względem procentu powierzchni pokrytej w widoczny sposób przez mikroorganizmy w wyniku ich wzrostu. Inokulum alg 20 [0023] Organizmy Skrót Typ Gleocapsa sp. Gs ATCC 2919 Jednokomórkowe, cyjanobakterie kolonialne Pożywka do badania BG-11 Oscillatoria sp. Os ATCC 2913 Cyjanobakterie nitkowate BG-11 Nostoc commune Nc CCAP 143/29 Trentepohlia aurea + Trentepohlia odorata Chlorella sp. UTEX + Chlorella kessleri Ta+To Cs+Ck UTEX LB CCAP 483/4 ATCC ATCC Jednokomórkowa, zielenica cenobialna Zielenica nitkowa Zielenica jednokomórkowa Calothrix parientina Cp UTEX LB 192 Cyjanobakterie nitkowate Bold Bold Bold Bold Inokulum grzybów [0024] Organizmy Skrót ATCC Pożywka do wzrostu i badania Aspergillus niger An 9642 PDA Penicillium funiculosum Pf PDA Cladosporium herbarum Ch PDA Aureobasidium pullulans Ap 9348 PDA 4

6 (kontynuacja) Organizmy Skrót ATCC Pożywka do wzrostu i badania Alternaria alternata Aa PDA Stachybotris chartarum Sc PDA Badanie skuteczności przeciw algom zmodyfikowana metoda ASTM 89 [002] ASTM 89 jest standardową metodą przyspieszonego testu dla określenia odporności różnych powłok (w tym farb) na zanieczyszczenie algami. W celu dostosowania do wysokowydajnego badania przesiewowego, metodę tę przeskalowano z płytek Petriego do płytek 12 studzienkowych. Pojedynczą wyciętą próbkę umieszczano za pomocą pary sterylnych szczypczyków na środku krążka agarowego (na górze) z pomalowaną powierzchnią skierowaną ku górze. Każdą studzienkę inokulowano 10 µl organizmów (1 X 8 cfu/ml), upewniając się, że cała powierzchnia (warstwa farby, a także otaczający ją agar) została równo pokryta. Płytki inkubowano w temperaturze pokojowej (2 C - 26 C) z cyklicznym wystawianiem na działanie światła (model OTL4012P OTT-Lite, 40 W, 26 klm) i fazami ciemności przez okres trzech tygodni. Całkowitą pokrytą powierzchnię oceniano w końcu każdego tygodnia, na podstawie procentu pokrytej powierzchni, z dokładnością do %. Oceniając płytki, prowadzono zapisy dla obszarów zahamowania. Badanie skuteczności przeciw grzybom zmodyfikowana metoda ASTM [0026] ASTM 90 jest standardową metodą przyspieszonego testu dla określenia odporności różnych powłok (w tym farb) na zanieczyszczenie grzybami. W celu dostosowania do wysokowydajnego badania przesiewowego, metodę tę przeskalowano z płytek Petriego do płytek 12-studzienkowych. W celu przygotowania do badania, krążek agarowy umieszczono na dnie każdej studzienki sterylnej płytki 12-studzienkowej. Pojedynczą wyciętą próbkę umieszczano za pomocą pary sterylnych szczypczyków na środku krążka agarowego (na górze) z pomalowaną powierzchnią skierowaną ku górze. Każdą studzienkę inokulowano 10 µl organizmów (1 X 8 cfu/ml), upewniając się, że cała powierzchnia (warstwa farby, a także otaczający ją agar) była równo pokryta. Płytki inkubowano w temperaturze 30 C w obecności wilgoci przez okres trzech tygodni. Całkowite pole powierzchni oceniano i zapisywano w końcu każdego tygodnia po 2 tygodniu, z dokładnością do %. 2 Indeks synergii (SI) [0027] SI jest obliczony w oparciu o metodę F. C. Kulla i współ. (Applied Microbiology, tom 9 (1961)). W tym badaniu SI był obliczony według poniższego wzoru z wybranym minimalnym stężeniem hamującym w oparciu o procent hamowania wykazany przez poszczególne środki biobójcze wobec każdego z badanych mikroorganizmów. 30

7 Qa = Stężenie środka biobójczego A w mieszaninie QA = Stężenie środka biobójczego A jako jedynego środka biobójczego Qb = Stężenie środka biobójczego B w mieszaninie QB = Stężenie środka biobójczego B jako jedynego środka biobójczego Qc = Stężenie środka biobójczego C w mieszaninie QC = Stężenie środka biobójczego C jako jedynego środka biobójczego Wartość SI < 1 we wzorze wskazuje, że istnieje synergizm zmieszanych środków biobójczych. Przykład 1. 1 [0028] To badanie przeprowadzono w celu określenia działania mieszanin IPBC i fluometuronu o stosunkach wagowych IPBC do fluometuronu (Fluo) od 4:1 do 1:1. Mieszaniny te wykazały bardzo dobry synergizm przeciw szerokiemu spektrum grzybów i alg. Każda testowana mieszanina wykazała synergię przeciw co najmniej jednemu organizmowi, przy wszystkich badanych stosunkach IPBC do fluometuronu. Wyniki po trzech tygodniach wystawienia na działanie mikroorganizmów są przedstawione w Tabeli 1 dla alg i Tabeli 2 dla grzybów. Tabela 1 (Algi) Cs+Ck Nc Cp Ta+To Gs Os 1IPBC:1 Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 9 97, 97, 87, 0 9 SI 1, 0,7 1,3 2,17 1 0,6 2IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 0 0 SI 1,33 0,67 1,07 1,78 1 0,3 3IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 9 97, SI 1,2 0,63 0,9 1,8 1 0,48 4IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, SI 2 0,6 0,88 0,88 1 0,44 IPBC Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, 87, 97, Stężenie całkowite, ppm % zahamowania

8 Tabela 2 (Grzyby) Przykład 2 Ap Ch Pf An Aa Tv 1IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, , SI 0,6 0,6 1,3 0,6 0,6 0,7 2IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm , 0 SI 0,6 0,77 1,3 0,77 0,77 0,83 3IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 0 97, , SI 0,3 0,83 1,6 0,83 0,83 0,88 4IPBC:1Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 0 9 SI 0,3 0,86 1,72 0,86 0,86 0,9 IPBC Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, 7 97, 87, 97, 90 Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, 90 97, 3 2 7, [0029] To badanie przeprowadzono w celu określenia działania mieszanin IPBC i fluometuronu o stosunku wagowym IPBC do fluometuronu (Fluo) od 1:2 do 1:3. Te mieszaniny wykazały bardzo dobry synergizm przeciw szerokiemu spektrum grzybów i alg. Każda badana mieszanina wykazała synergię przeciw co najmniej jednemu organizmowi, przy wszystkich badanych stosunkach IPBC do fluometuronu. Wyniki po trzech tygodniach wystawienia na działanie mikroorganizmów są przedstawione w Tabeli 3 dla alg i Tabeli 4 dla grzybów. Tabela 3 (Algi) Cs+Ck Nc Cp Ta+To Gs Os 1IPBC:3Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 9 97, 9 8 2,0 72, SI 0,3 0,83 0,82 0,88 1 2,33 1IPBC:2Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 0 6 SI 0, 0,77 0,77 0,83 1 0,37 7

9 (kontynuacja) Cs+Ck Nc Cp Ta+To Gs Os IPBC Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 0 62, Stężenie całkowite, ppm 000, % zahamowania 90, , 42, 62, Tabela 4 (Grzyby) Ap Ch Pf An Aa Tv 1IPBC:3Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 70 82, 72, 90 62, 72, SI 0,79 0,41 0,24 0,24 0,3 0,24 1IPBC:2Fluo Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 9 87, 82, 8 82, 82, SI 0,72 0,38 0,27 0,27 0,1 0,27 IPBC Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , Przykład 3: Trójskładnikowe mieszaniny środków biobójczych [0030] Te mieszaniny również wykazały synergię przeciw różnym organizmom przy każdym badanym sto- sunku wagowym, jak opisano w Tabelach i 6. Tabela (Algi) Cs+Ck Nc Cp Ta+To Gs Os 6IPBC:3Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 7 97, 87, 90 67, 80 SI 0,32 0,8 0,88 1,27 0,7 0,6 IPBC: Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , SI 0,64 0,68 0,83 0,82 0,6 0,98 8

10 (kontynuacja) Cs+Ck Nc Cp Ta+To Gs Os 6IPBC:3Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 82, 77, 9 SI 0,4 0,99 0,88 0,72 0,7 0,28 IPBC:Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , SI 0,3 0,6 1,14 0,78 0,32 0,2 IPBC Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 80 77, Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , 67, 82, DCOIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 70 82, 7 72, 77, 80 DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania , Tabela 6 (Grzyby) Ap Ch Pf An Aa Tv Sc 6IPBC:3Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 82, SI 0,3 0,7 0,3 0,24 0,6 0,42 0,48 IPBC:Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, 72, 82, , 0 SI 0,3 0,29 0,3 0,22 0,22 0,39 0,44 6IPBC:3Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, 0 77, , SI 0,39 0,37 0,64 0,6 0,63 0,42 0,33 IPBC:Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 97, 82, 92, 87, IPBC Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 87, , 82, 9

11 (kontynuacja) Ap Ch Pf An Aa Tv Sc Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 80 72, , 72, 6 DCOIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 77, 67, 82, 7 87, 60 32, DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania 77, 72, 82, 7 77, 90 0 Przykład 4: Kolejne mieszaniny środków biobójczych 1 20 [0031] Organizmy i pożywki dla ich wzrostu są takie, jak podano we wcześniejszych przykładach. Wytwarzanie próbek: Pojedynczy środek biobójczy lub ich mieszaninę dodano później do białej akrylowej farby lateksowej, wolnej od środków biobójczych, w celu uzyskania maksymalnego całkowitego badanego stężenia składnika aktywnego/składników aktywnych. Tę farbę następnie rozcieńczono wolną od środków biobójczych farbą lateksową o stężeniach w zakresie od 7 do 12, % wag./wag. w celu uzyskania żądanego stężenia do badania. W zależności od typu badanych mieszanin środków biobójczych całkowite stężenie środków biobójczych wynosiło od 200 do 000 ppm. Po dodaniu środków biobójczych lub rozcieńczeniu, każdą próbkę mieszano ręcznie przez co najmniej minutę, aż do uzyskania jednorodności. Każdą z próbek farby, a także próbkę kontrolną (niezawierającą środka biobójczego) wykorzystano do wytworzenia powłok na czarnych panelach z kopolimerowego tworzywa sztucznego chlorek/octan winylu (LENETA, Mahwah, NJ), stosując 3 milicalowy aplikator sztabkowy typu bird. Panele dokładnie suszono przez co najmniej 2 dni, unikając bezpośredniego wystawienia na działanie promieni słonecznych. Z każdego panelu wycięto kwadratowe płytki (0, cala 2, 13 mm 2 ) i wykorzystano jako podłoże do badań skuteczności przeciw grzybom i algom. Taka wielkość próbki umożliwiała obecność obrąbka agaru, gdy próbkę umieszczono w studzience płytki testowej. Każdą próbkę badano w dwóch egzemplarzach. Warunki badania: W celu utrzymania wzrostu mikroorganizmów stosowano odpowiednie pożywki (BOLD 3N dla zielenic, BG-11 dla cyjanobakterii i PDA dla grzybów). Dla alg, płytki testowe utrzymywano przez cztery tygodnie w temperaturze pokojowej (2 C - 26 C), w otoczeniu z cyklami światło-ciemność. W celu zagrzybienia, płytki testowe utrzymywano przez cztery tygodnie w temperaturze 30 C. W końcu okresu inkubacyjnego oceniono próbki pod względem procentu powierzchni pokrytej w widoczny sposób przez mikroorganizmy w wyniku ich wzrostu. Badanie skuteczności przeciw algom zmodyfikowana metoda ASTM [0032] ASTM 89 jest standardową metodą przyspieszonego testu dla określenia odporności różnych powłok (w tym farb) na zanieczyszczenie algami. W celu dostosowania do badania o dużym zakresie metodę tę przeskalowano z płytek Petriego do płytek 6-studzienkowych. Pojedynczą wyciętą próbkę umieszczano za pomocą pary sterylnych szczypczyków na środku krążka agarowego (na górze) z pomalowaną powierzchnią skierowaną ku górze. Inokula alg wytworzono mieszając równe stężenia (1 X 6 cfu/ml) i równe objętości (w zależności od liczby próbek do inokulacji) podobnie wzrastających organizmów. W tym badaniu

12 Gloeocapsa sp. i Oscillatoria sp. stanowiły mieszankę cyjanobakterii hodowanych w pożywce BG-11. Chlorella sp., Chlorella kessleri i Nostoc commune są zielenicami jednokomórkowymi, które zmieszano i hodowano w pożywce Bold. Trentepohlia aurea, Trentepohlia odorata i Calotrix parientina są algami nitkowatymi, które zmieszano i hodowano w pożywce Bold. Każdą studzienkę inokulowano 400 µl mieszanki organizmów (1X 6 cfu/ml), upewniając się, że cała powierzchnia (warstwa farby, a także otaczający ją agar) została równo pokryta. Płytki inkubowano w temperaturze pokojowej (2 C - 26 C) z cyklicznym wystawieniem na działanie światła (model OTL4012P OTT-Lite, 40 W, 26 klm) i fazami ciemności przez okres czterech tygodni. Całkowitą pokrytą powierzchnię oceniano na końcu każdego tygodnia na podstawie procentu pokrytej powierzchni z dokładnością do %. Oceniając płytki, prowadzono zapisy dla obszarów zahamowania. Badanie skuteczności przeciw grzybom zmodyfikowana metoda ASTM [0033] ASTM 90 jest standardową metodą przyspieszonego testu dla określenia odporności różnych powłok (w tym farb) na zanieczyszczenie grzybami. W celu dostosowania do wysokowydajnego badania przesiewowego, metodę tę przeskalowano z płytek Petriego do płytek 6-studzienkowych. W celu przygotowania do badania, krążek agarowy umieszczono na dnie każdej studzienki sterylnej płytki 6-studzienkowej. Pojedynczą wyciętą próbkę umieszczano za pomocą pary sterylnych szczypczyków na środku krążka agarowego (na górze) z pomalowaną powierzchnią skierowaną ku górze. Inokula grzybów wytworzono mieszając równe stężenia (1 X 6 cfu/ml) i równe objętości (w zależności od liczby próbek do inokulacji) podobnie wzrastających organizmów. Cladosporium herbarum zmieszano z Aureobasidium pullulans. Aspergillus niger zmieszano z Penicillium funiculosum. Alternaria alternata zmieszano z Trichoderma viride. Każdą studzienkę inokulowano 400 µl mieszanki organizmów (1X 6 cfu/ml), upewniając się, że cała powierzchnia (warstwa farby, a także otaczający ją agar) została równo pokryta. Płytki inkubowano w temperaturze 30 C,w obecności wilgoci, przez okres czterech tygodni. Całkowitą pokrytą powierzchnię oceniano w końcu każdego tygodnia po 2 tygodniu, z dokładnością do %. Wyniki są przedstawione w Tabelach 7-11 poniżej. 2 Tabela 7 - Badanie synergii fluometuron:dcoit Aa+Ap Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 2,2Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm 2737, 912, 2737, 912, SI 1,4 1,0 3,0 3,0 2,9Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm 221,9 1681, 1681,2 420,3 SI 1,1 1,8 1,8 1,4 4,3Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm ,37 SI 1,2 3,0 3,0 1,2 11

13 (kontynuacja) Aa+Ap Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 1,1Fluo:1DCOIT Stężenie całkowite, ppm SI <0,8 0,8 0,8 4,0 1Fluo:1,8DCOIT Stężenie całkowite, ppm 132,3 1331,2 1331,2 887, SI 1,1 1,9 1,9 3,0 1Fluo:DCOIT Stężenie całkowite, ppm , 632, 126 % zahamowania 1, SI 1,0 1,9 4,4 Stężenie całkowite, ppm , % zahamowania DCOIT Stężenie całkowite, ppm 862, , Uwaga: Ponieważ maksymalne stężenie fluometuronu testowanego przeciw grzybom wynosi 000 ppm, to stężenie jest wykorzystane do obliczenia przewidywanego SI, Korekcja przez zastosowanie znaku mniejszy niż (<) jest włączona tylko do stosownych danych, SI < 1, NE = brak punktu końcowego przy badanym stężeniu Tabela 8 - Badanie synergii fluometuron:oit Aa+Ap An+Pf Ch+Tv Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 1Fluo:1OIT Stężenie całkowite, ppm SI 1,4 <0,9 0,9 1,7 1,2 4,4 1Fluo:2OIT Stężenie całkowite, ppm SI < 0,9 2,3 2,3 2,3 1,7 2,3 1Fluo:3OIT Stężenie całkowite, ppm SI 1,4 2,6 2,6 2,3 2,3 2,0 1Fluo:OIT Stężenie całkowite, ppm SI 1,8,1,1 1,9 1,9 2,8 12

14 (kontynuacja) Aa+Ap An+Pf Ch+Tv Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 3Fluo:1OIT Stężenie całkowite, ppm SI NE 1,7 1,7 1,4 1,4 63 2Fluo:1OIT Stężenie całkowite, ppm SI NE 1,2 1,2 1,6 1,1 3,2 Stężenie całkowite, ppm , % zahamowania OIT Stężenie całkowite, ppm % zahamowania Tabela 9 - Badanie synergii fluometuron:zpt Aa+Ap An+Pf Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 1Fluo:1ZPT Stężenie całkowite, ppm NE SI < 0,4 0,9 1,2 1,8 1Fluo:3ZPT Stężenie całkowite, ppm SI < 0, 1,0 1,1 1,2 1, 1Fluo:ZPT Stężenie całkowite, ppm SI < 0,6 1,1 1,1 0,6 1,4 1Fluo:ZPT Stężenie całkowite, ppm , 687, 687, 0 SI 1,1 1,0 1,1 0,6 1,2 6Fluo:1ZPT Stężenie całkowite, ppm NE SI < 0,8 0,2 0,6 2,2 4Fluo:1ZPT Stężenie całkowite, ppm NE 2437, , SI < 0,8 1,6 1,3 2,3 13

15 (kontynuacja) Aa+Ap An+Pf Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 2Fluo:1ZPT Stężenie całkowite, ppm SI < 0,2 < 0,9 2,4 1,2 2,0 Stężenie całkowite, ppm , % zahamowania ZPT Stężenie całkowite, ppm Tabela - Badanie synergii fluometuron:tiabendazol (TBZ) Aa+Ap An+Pf Ch+Tv Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 1Fluo:1TBZ Stężenie całkowite, ppm % zahamowania SI < 0,9 2,7 < 0, 0,9 2,4 3,4 1Fluo:3TBZ Stężenie całkowite, ppm % zahamowania SI 1,0 2, < 0,6 0,2 2,4 1,0 1Fluo:TBZ Stężenie całkowite, ppm NE NE 3000 % zahamowania SI < 0,8 2,7 < 0,7 2,1 1Fluo:7TBZ Stężenie całkowite, ppm NE NE % zahamowania SI 1,0,7 < 0,7 1,1 1Fluo:TBZ Stężenie całkowite, ppm NE , NE % zahamowania SI 4,3 < 0,8 1,0 1,7 6Fluo:1TBZ Stężenie całkowite, ppm NE NE SI < 0,7 1,3 1,3 7,3 4Fluo:1TBZ Stężenie całkowite, ppm 2812, NE % zahamowania SI < 0,7 < 0,9 0,3 1,4 4,9 14

16 (kontynuacja) Aa+Ap An+Pf Ch+Tv Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 2Fluo:1TBZ Stężenie całkowite, ppm 2812, NE 468,7 468, % zahamowania SI < 0,6 < 0,3 0,3 2, 4,1 Stężenie całkowite, ppm , % zahamowania TBZ Stężenie całkowite, ppm % zahamowania Tabela 11 - Badanie synergii fluometuronu i DIMTS Aa+Ap An+Pf Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 1Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania SI 1,1 < 0,7 0, 1,8 1,4 1Fluo:3DIMTS Stężenie całkowite, ppm NE SI 1,2 < 0,9 0,9 1,2 1Fluo:DIMTS Stężenie całkowite, ppm NE SI 1,1 2,1 0,9 0,6 1Fluo:7DIMTS Stężenie całkowite, ppm SI < 0, 1,1 0,4 0,6 1,3 1Fluo:DIMTS Stężenie całkowite, ppm SI 1,1 1,1 0,4 0,6 2,4 6Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm NE 1400 NE % zahamowania SI < 0,6 0,6 3,9 4Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm, NE 812, % zahamowania SI < 0,4 1,7 1,8 4,3 1

17 (kontynuacja) Aa+Ap An+Pf Cp+To+Ta Cs+Ck+Nc Gs+Os 2Fluo:1DIMTS Stężenie całkowite, ppm NE SI < 0, 1,6 0,6 1,7 Stężenie całkowite, ppm , % zahamowania DIMTS Stężenie całkowite, ppm % zahamowania Zastrzeżenia patentowe 1. Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca (a) butylokarbaminian 3-jodo-2- propynylu oraz (b) fluometuron; przy czym stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do fluometuronu wynosi od :1 do 1:. 2. Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca (a) butylokarbaminian 3-jodo-2- propynylu; (b) fluometuron oraz (c) 4,-dichloro-2-n-oktylo-4-izotiazolin-3-on; przy czym stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do fluometuronu wynosi od 3:1 do 1:2; a stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do 4,-dichloro-2-n-oktylo-4-izotiazolin-3-onu wynosi od 8:1 do 4:1. 3. Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca (a) butylokarbaminian 3-jodo-2- propynylu; (b) fluometuron oraz (c) sulfon dijodometylowo-p-tolilowy; przy czym stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynylu do fluometuronu wynosi od 3:1 do 1:2; a stosunek wagowy butylokarbaminianu 3-jodo-2-propynyl do sulfonu dijodometylowo-p-tolilowego wynosi od 8:1 do 4: Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca:(a) fluometuron oraz (b) 2-n-oktylo-4- izotiazolin-3-on; przy czym stosunek wagowy fluometuronu do 2-n-oktylo-4-izotiazolin-3-onu wynosi od 1:1 do 1:2.. Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca (a) fluometuron oraz (b) pirytion cynku; przy czym stosunek wagowy fluometuronu do pirytionu cynku wynosi od :1 do 1: Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca (a) fluometuron oraz (b) tiabendazol; przy czym stosunek wagowy fluometuronu do tiabendazolu wynosi od :1 do 1:1. 7. Synergistyczna kompozycja przeciwdrobnoustrojowa zawierająca (a) fluometuron oraz (b) sulfon dijodometylowo-p-tolilowy; przy czym stosunek wagowy fluometuronu do sulfonu dijodometylowo-p-tolil wynosi od :1 do 1:1. 16

18 ODNOŚNIKI CYTOWANE W OPISIE Listę cytowanych przez zgłaszającego odnośników zamieszczono jedynie dla wygody czytającego. Lista ta nie stanowi części dokumentu patentu europejskiego. Niezależnie od uwagi, którą poświęcono w celu zestawienia tych odnośników, nie wyklucza się błędów i pomyłek i EPO zrzeka się odpowiedzialności w tym względzie. Dokumenty patentowe cytowane w opisie Cytowana w opisie literatura nie-patentowa 17