RAPORT Z BADAŃ 164/Z/ /D/JOGA. Dostarczony materiał: próbki tworzyw sztucznych. Ilość próbek: 1. Rodzaj próbek: tworzywo

Wielkość: px

Rozpocząć pokaz od strony:

Download "RAPORT Z BADAŃ 164/Z/20110825/D/JOGA. Dostarczony materiał: próbki tworzyw sztucznych. Ilość próbek: 1. Rodzaj próbek: tworzywo"

Jerzy Leszczyński
8 lat temu
Przeglądów:

Blirt S.A. 80-172 Gdańsk, ul. Trzy Lipy 3/1.38 RAPORT Z BADAŃ Dział DNA-Gdańsk Nr zlecenia 164/Z/20110825/D/JOGA NAZWA I ADRES KLIENTA GROUND-Therm spółka z o.o. ul. Stepowa 30 44-105 Gliwice Tytuł zlecenia: Badanie aktywności przeciwdrobnoustrojowej tworzyw sztucznych.

1 Blirt S.A Gdańsk, ul. Trzy Lipy 3/1.38 RAPORT Z BADAŃ Dział DNA-Gdańsk Nr zlecenia 164/Z/ /D/JOGA NAZWA I ADRES KLIENTA GROUND-Therm spółka z o.o. ul. Stepowa Gliwice Tytuł zlecenia: Badanie aktywności przeciwdrobnoustrojowej tworzyw sztucznych. Dostarczony materiał: próbki tworzyw sztucznych Ilość próbek: 1 Rodzaj próbek: tworzywo Wykonawcy Badania: dr inż. Izabela Łącka Kierownik Badania: dr inż. Krzysztof Kur Strona 1/7

o.o. ul. Stepowa 30 44-105 Gliwice Tytuł zlecenia: Badanie aktywności przeciwdrobnoustrojowej tworzyw sztucznych.

2 I. Dostarczone próbki Dostarczone próbki Opis i zdjęcie Fragmenty rury z tworzywa o kształcie prostokątów: próbki traktowane aktywnym środkiem biobójczym oraz próbki nietraktowane II. Metody badawcze Metody badawcze Nr 1. Opis PN-EN ISO 846:2002 Tworzywa sztuczne. Ocena działania mikroorganizmów Strona 2/7

biobójczym oraz próbki nietraktowane II.

3 III. Postępowanie doświadczalne Metody B i B - Oznaczanie efektu grzybostatycznego Przygotowanie szczepu Aspergillus niger ATCC 6275 W badaniu wykorzystano zarodniki zebrane z kultur przetrwalnikowych za pomocą roztworu soli mineralnych. Zawiesinę zarodników przemyto i odwirowano zgodnie z zaleceniami normy. Przygotowanie próbek Zgodnie z wytycznymi normy PN-EN ISO 846:2002, próbek przeznaczonych do badania metodą B i B nie oczyszczano. Próbki zostały wyjałowione promieniami UV w komorze laminarnej, ekspozycji zostały poddane obie strony badanych próbek. Do badania włączono także próbki kontrolne, nietraktowane substancją biobójczą (partia I k ). Przygotowano trzy partie próbek, po pięć w każdej: Partia 0: próbki kontrolne, przechowywane w temperaturze pokojowej, Partia I: próbki zaszczepione drobnoustrojami i inkubowane, Partia S: próbki sterylne, przechowywane w tych samych warunkach, co partia I. Inokulacja Zawiesinę zarodników doprowadzono za pomocą jałowego roztworu soli mineralnych do gęstości ~ 10 6 kom/ml. Na powierzchnię każdej próbki partii I i powierzchnię agaru naniesiono pipetą zawiesinę zarodników w roztworze soli mineralnych z glukozą. Dla metody B drobnoustrojami posiano jedynie powierzchnię agaru, próbki umieszczono na powierzchni dopiero, gdy pożywka była całkowicie porośnięta, lecz przed pojawieniem się zarodników (Fot.1). Próbki partii S zaszczepiono drobnoustrojami, a następnie naniesiono na nie roztwór bakteriobójczy (mieszanina etanolu z wodą, proporcja wagowa 70:30). Inkubacja Wszystkie próbki z wyjątkiem partii 0 inkubowano przez 4 tygodnie w temperaturze 29 C± 1 C w komorze klimatycznej KBK-30W, WAMED. Strona 3/7

Przygotowanie próbek Zgodnie z wytycznymi normy PN-EN ISO 846:2002, próbek przeznaczonych do badania metodą B i B nie oczyszczano.

4 Fot.1 Dla metody B drobnoustrojami posiano jedynie powierzchnię agaru, próbki umieszczono na powierzchni dopiero, gdy pożywka była całkowicie porośnięta, lecz przed pojawieniem się zarodników. Wyniki Po zakończeniu okresu inkubacji stwierdzono: Partia 0: brak zmian w porównaniu do stanu sprzed inkubacji brak wzrostu pleśni Partia S: brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek intensywność wzrostu 0 Partia I metoda B: brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek (Fot.2) intensywność wzrostu 0, słaby wzrost grzybni pod oraz wokół badanej próbki Próbki nietraktowane związkiem (partia I k ) biobójczym pokryte pleśnią intensywność wzrostu 2 (Fot.2). Partia I metoda B : brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek intensywność wzrostu 0, brak zarodników na powierzchni grzybni mającej kontakt z próbką (Fot.3), zarodnikowanie wokół próbek Fot.2 Próbki partii I po zakończeniu okresu inkubacji. Po lewej próbki traktowane środkiem biobójczym brak śladów wzrostu na powierzchni próbek, po prawej nietraktowana kontrola I k wzrost pleśni na powierzchni próbek intensywność wzrostu 2. Strona 4/7

wzrostu 0 Partia I metoda B: brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek (Fot.

5 Fot.3 Próbki partii I dla metody B - brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek, brak zarodnikowania na powierzchni agaru mającej kontakt z próbką, zarodnikowanie wokół próbek. Metoda C - Badanie z udziałem bakterii Przygotowanie szczepów Staphylococcus aureus ATCC 6538P Escherichia coli ATCC 8739 Hodowle bakterii zostały przed analizą dwukrotnie odświeżone poprzez przesianie na skosy z agarem odżywczym i inkubowane przez 24h w temperaturze 29 C ± 1 C. Następnie przesiano je do bulionu zawierającego wyciąg mózgowo-sercowy i inkubowane w temperaturze 29 C ± 1 C przez kolejne 24h. Przygotowanie próbek Metoda C normy zakłada ułożenie próbek na warstwie pożywki agarowej, a następnie zalaniu odpowiednią ilością agaru tak, by warstwa okalająca próbkę miała grubość 10 mm. W związku z faktem, iż badane próbki nie są płaskie, lecz wypukłe, niemożliwe było posianie i inkubowanie ich w szalkach Petriego. Badanie przeprowadzono w jałowych 100 ml pojemnikach (Fot.4). Próbki zostały oczyszczone mieszaniną etanolu z wodą, wszystkie czynności wykonywano ze szczególną uwagą, by uniknąć zanieczyszczenia próbek materiałem organicznym. Strona 5/7

przesianie na skosy z agarem odżywczym i inkubowane przez 24h w temperaturze 29 C ± 1 C.

6 Fot.4 Zdjęcie pojemników, w których wykonano badanie z udziałem bakterii. Inokulacja Zawiesinę komórek bakterii doprowadzono za pomocą jałowego roztworu buforowego do gęstości ~ 10 6 kom/ml. Niepełnowartościową pożywkę agarową (bez dodatku glukozy) zaszczepiono komórkami (każdy szczep oddzielnie do gęstości ok kom/ml. W przypadku próbek partii I do pojemników nalano warstwę zaszczepionego agaru o grubości 5 mm, po zestaleniu ułożono na niej próbkę i przykryto kolejną warstwą zaszczepionego agaru (grubość 10 mm). Analogicznie postępowano z próbkami partii I k. Sterylne próbki kontrolne partii S układano na warstwie niezaszczepionego agaru, ponownie dezynfekowano i przykrywano kolejną warstwą niezaszczepionego agaru. Inkubacja Wszystkie próbki inkubowano przez 2 tygodnie w temperaturze 29 C ± 1 C i wilgotności względnej 90% w komorze klimatycznej KBK-30W, WAMED przez 2 tygodnie do momentu, aż wzrost komórek dla partii I k stał się widoczny nieuzbrojonym okiem. Wyniki Po zakończeniu okresu inkubacji stwierdzono: Partia 0: partia wspólna z metodami B i B - brak zmian w porównaniu do stanu sprzed inkubacji Partia S: brak wzrostu komórek na powierzchni próbek oraz w całej objętości agaru Partia I: Escherichia coli powierzchnia próbek bez zmian w porównaniu do próbek partii O i S, nieznaczne zmętnienie agaru Staphylococcus aureus powierzchnia próbek bez zmian w porównaniu do próbek partii O i S, delikatne zmętnienie agaru w odległości ok. 5 mm od badanej powierzchni Strona 6/7

W przypadku próbek partii I do pojemników nalano warstwę zaszczepionego agaru o grubości 5 mm, po zestaleniu ułożono na niej próbkę i przykryto kolejną warstwą zaszczepionego agaru (grubość 10 mm).

7 Próbki nietraktowane związkiem (partia I k ) - w przypadku obu szczepów wzrost drobnych komórek w całej objętości agaru, widoczne komórki na powierzchni agaru (Fot.5). I: S. aureus I: E. coli I k : S. aureus I k : E. coli Fot.5 Próbki partii I i I k dla obu szczepów po zakończeniu inkubacji. IV. WNIOSKI Wyniki analiz przeprowadzonych metodą B i B brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek, zahamowanie wzrostu na powierzchni mającej kontakt z próbkami traktowanymi substancją biobójczą (przy jednoczesnym wzroście pleśni obserwowanym dla próbek nietraktowanych) wskazują na aktywność grzybostatyczną badanych próbek. Wyniki badania metodą C brak zmian powierzchni próbek oraz brak widocznego wzrostu komórek w pobliżu próbek dowodzą, że badane próbki nie zawierają żadnych składników odżywczych. Data zakończenia badania Wykonawcy badania dr inż. Izabela Łącka Kierownik badania dr inż. Krzysztof Kur Strona 7/7

WNIOSKI Wyniki analiz przeprowadzonych metodą B i B brak wzrostu pleśni na powierzchni próbek, zahamowanie wzrostu na powierzchni mającej kontakt z próbkami traktowanymi substancją biobójczą (przy

Podobne dokumenty

RAPORT Z BADAŃ 01369/2015/D/AGST. Blirt S.A Gdańsk, ul. Trzy Lipy 3/1.38. Dział DNA-Gdańsk. Nr zlecenia

RAPORT Z BADAŃ 01369/2015/D/AGST. Blirt S.A Gdańsk, ul. Trzy Lipy 3/1.38. Dział DNA-Gdańsk. Nr zlecenia Strona1/7 Blirt S.A. 80-172 Gdańsk, ul. Trzy Lipy 3/1.38 RAPORT Z BADAŃ Dział DNA-Gdańsk Nr zlecenia 01369/2015/D/AGST NAZWA I ADRES KLIENTA Zenon Koszorz Ground-Therm Sp z o.o. Ul. Stepowa 30 44-105 Gliwice