(86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego , PCT/JP97/02728

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) (2 1) Numer zgłoszenia: (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (22) Data zgłoszenia (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego , PCT/JP97/02728 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia mi ędzynarodowego , W098/05343, PCT Gazette nr 06/98 (51) IntCl7 A61K 35/20 A23L 1/30 A61P 25/00 (54) Zastosowanie fermentowanego kwaśnego mleka do wytwarzania środka lub produktu żywnościowego zapobiegającego lub łagodzącego objawy stresu (30) Pierwszeństwo: , JP, (73) Uprawniony z patentu: CALPIS CO, LTD, Tokyo, JP GROUPE DANONE, Paris, FR (43) Zgłoszenie ogłoszono: BUP 15/99 (72) Twórcy wynalazku: Akihiro Masuyama, Yokohama, JP Masaaki Yasui, Yokohama, JP (45) O udzieleniu patentu ogłoszono: WUP 12/05 (74) Pełnomocnik: Kulikowski Jarosław, KULIKOWSKA & KULIKOWSKI PL B1 (57) 1. Zastosowanie fermentowanego kwaśnego mleka do wytwarzania środka lub produktu żywnościowego zapobiegającego lub łagodzącego objawy stresu, które jako fermentowane kwaśne mleko zawierają mleko pochodzenia zwierzęcego i/lub roślinnego fermentowane za pomocą bakterii kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus F ig 2

2 Zastosowanie fermentowanego kwaśnego mleka do wytwarzania środka lub produktu żywnościowego zapobiegającego lub łagodzącego objawy stresu Zastrzeżenia patentowe 1. Zastosowanie fermentowanego kwaśnego mleka do wytwarzania środka lub produktu żywnościowego zapobiegającego lub łagodzącego objawy stresu, które jako fermentowane kwaśne mleko zawierają mleko pochodzenia zwierzęcego i/lub roślinnego fermentowane za pomocą bakterii kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus 2. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym wymieniony środek lub produkt żywnościowy zapobiegające lub łagodzące objawy stresu podawane są doustnie w dawce nie mniejszej niż 0,1 g na kg wagi ciała dziennie w przeliczeniu na wysuszony produkt z fermentowanego mleka. 3. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 2, w którym bakterie kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus są bakteriami Lactobacillus helveticus 4. Zastosowanie według zastrz. 3, w którym Lactobacillus helveticus jest szczepem zdeponowanym pod numerem akcesyjnym ATCC8205 lub ATCC Zastosowanie według zastrz. 1, w którym fermentowane kwaśne mleko obejmuje mleko zwierzęce i/lub roślinne fermentowane zarówno za pomocą bakterii kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus jak i drożdży. 6. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 5, w którym fermentowane kwaśne mleko jest w postaci żywej. 7. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 5, w którym fermentowane kwaśne mleko jest w postaci sterylizowanej. 8. Zastosowanie według zastrz. 1 albo 5, w którym wymieniony produkt żywnościowy zawiera fermentowane kwaśne mleko w ilości 10 do 100% wagowo. 9. Zastosowanie według zastrz. 8, w którym produkt żywnościowy jest w postaci jogurtu, kwaśnych napoi zawierających mleko, sera, przetworzonej żywności zawierającej kwaśne mleko, zdrowej żywności, sproszkowanej żywności i granulowanej żywności. 10. Zastosowanie według zastrz 9, w którym produkt żywnościowy ponadto ewentualnie zawiera składnik wybrany z grupy obejmującej cukry, białka, lipidy, witaminy, sole mineralne, aromaty, środki barwiące i ich mieszaniny. * * * Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie fermentowanego kwaśnego mleka do wytwarzania środka lub produktu żywnościowego zapobiegającego lub łagodzącego objawy stresu. W szczególności wynalazek dotyczy środka przeciw stresowego o działaniu zapobiegającym i łagodzącym psychiczne i fizyczne objawy powodowane przez stres, oraz produktu żywnościowego, który przygotowuje się przez dodanie środka przeciw stresowego do produktu żywnościowego takiego jak jogurt, do zawierających mleko zakwaszanych napojów, sera, różnych przetworów żywnościowych, zdrowej żywności, do żywności sproszkowanej lub granulowanej We współczesnym świecie ludzie podlegają różnego rodzaju stresom powodowanym przez kontakt z wysoko rozwiniętą i skomplikowaną technologią lub przez drastycznie zmieniające się warunki społeczne. Tworzące się złożone współzależności międzyludzkie powodują stres psychiczny, który wywołuje szereg niekorzystnych objawów. Wiadomo, ze stres psychiczny ma duży wpływ na układ krążenia. Jednakże, naukowe znaczenie i definicja stresu nie zostały dotąd jednoznacznie ustalone, zatem istnieje wciąż wiele problemów związanych z oszacowaniem stresu, połączonych z trudnościami metodologicznymi. Z tego względu, w ostatnich latach podjęto badania nad stresem z medycznego punktu widzenia.

3 Ustalono na przykład, ze u osobnika podlegającego stresowi, wzrastają poziomy angiotensyn II i wazopresyny, a wewnątrzustrojowy poziom sodu staje się nadmierny na skutek zwrotnego wchłaniania sodu, co powoduje wzrost ciśnienia krwi (Osamu Mobara i in., Taisha, 28, 2, 323, 1991). Jednakże stres nie tylko powoduje wzrost ciśnienia krwi, ale również wpływa na różne inne czynniki. Uważa się, ze stres powoduje wrzody żołądka, niedokrwienne choroby serca, choroby naczyniowe mózgu, nadciśnienie, hiperlipemię lub podobne. Dlatego tez, chociaż badania zalezności pomiędzy stresem a nadciśnieniem są ważne, nie uważa się, aby samo obniżenie ciśnienia krwi mogło wywołać działanie przeciw stresowe Obecnie jako czynnik zapobiegający i łagodzący psychiczne i fizyczne objawy powodowane przez stres stosuje się leki otrzymywane drogą syntezy chemicznej, takie jak leki uspakajające, środki przeciw lękowe i tabletki nasenne. Jednakże, leki te stwarzają problemy polegające na powstawaniu uzaleznień i występowaniu działań ubocznych a codzienne ich stosowanie jest niekorzystne dla organizmu. Zatem, pożądane są i opracowywane produkty pochodzenia naturalnego, które można bezpiecznie przyjmować wielokrotnie i codziennie bez jakichkolwiek problemów i które mogą łagodzić i zapobiegać psychicznym i fizycznym objawom powodowanym przez stres. Na przykład, w japońskim wyłożeniowym zgłoszeniu patentowym numer zaproponowano czynnik przeciw stresowy, zawierający jako składnik aktywny L-teaninę zawartą w liściach krzewu herbacianego, który można domieszać do napojów smakowych (napojów uzupełniających składniki odżywcze) do codziennego użycia. Ponadto, opisano również łagodzący wpływ aromatów na stres (FRAGRANCE JOUR- NAL: , 44). Jednakże, nie ujawniono dotychczas, aby mleko uzyskane w wyniku fermentacji przez bakterie mlekowe miało działanie łagodzące i zapobiegające psychicznym i fizycznym stanom powodowanym przez stres Celem wynalazku było uzyskanie środka przeciw stresowego, spełniającego wspomniane oczekiwania, który można bezpiecznie przyjmować wielokrotnie i codziennie bez jakichkolwiek problemów i który może łagodzić i zapobiegać psychicznym i fizycznym objawom powodowanym przez stres. Innym celem wynalazku było zapewnienie produktów żywnościowych o działaniu zapobiegającym i łagodzącym stres, które można bezpiecznie przyjmować jako pokarm wielokrotnie i codziennie bez jakichkolwiek problemów. Podczas badań nad znalezieniem substancji, która może spełniać wspomniane powyżej oczekiwania, którą można stosować w żywności i przyjmować wielokrotnie bez jakichkolwiek problemów zauwazono, ze uzyskane przez fermentację kwaśne mleko posiada znakomite działanie przeciw stresowe i spełnia cele niniejszego wynalazku. Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie fermentowanego kwaśnego mleka do wytwarzania środka lub produktu żywnościowego zapobiegającego lub łagodzącego objawy stresu, w którym fermentowane kwaśne mleko zawiera mleko pochodzenia zwierzęcego i/lub roślinnego, fermentowane za pomocą bakterii kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus Korzystnie, wymieniony środek lub produkt żywnościowy zapobiegające lub łagodzące objawy stresu podawane są doustnie w dawce nie mniejszej niż 0,1 g na kg wagi ciała dziennie w przeliczeniu na suchy produkt z fermentowanego mleka. Szczególnie odpowiednie bakterie kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus są bakteriami Lactobacillus helveticus zdeponowanymi pod numerem akcesyjnym ATCC8205 lub ATCC Fermentowane kwaśne mleko stosowane według wynalazku obejmuje mleko zwierzęce i/lub roślinne fermentowane zarówno za pomocą bakterii kwasu mlekowego rodzaju Lactobacillus jak i drożdży. Mleko to może być w postaci żywej lub w postaci sterylizowanej. Jesli fermentowane kwaśne mleko jest w postaci produktu żywnościowego to wymieniony produkt żywnościowy może zawierać fermentowane kwaśne mleko w ilości od około 10 do 100% wagowo. Produkt żywnościowy może być w postaci jogurtu, kwaśnych napoi zawierających mleko, sera, przetworzonej żywności zawierającej kwaśne mleko, zdrowej żywności, żywności sproszkowanej i granulowanej do odtworzenia po dodaniu płynu. Ponadto, produkt żywnościowy może ewentualnie zawierać składnik wybrany z grupy obejmującej cukry, białka, lipidy, witaminy, sole mineralne, aromaty, środki barwiące i ich mieszaniny.

4 Wynalazek, zapewnia bezpieczny sposób łagodzenia lub leczenia stresu u człowieka lub zwierzęcia, przez doustne podawanie środka przeciw stresowego lub produktu żywnościowego zawierającego fermentowane kwaśne mleko. Wytworzony środek na bazie fermentowanego kwaśnego mleka poddano badaniom i wyniki przedstawiono na załączonych wykresach. Figura 1 przedstawia wykres pokazujący fluktuacje rozkurczowego ciśnienia krwi podczas okresu testowania pamięciowego testu arytmetycznego w doświadczeniu 1 w przykładzie 1. Na osi rzędnych przedstawiono rozkurczowe ciśnienie krwi w mmhg, podczas gdy na osi odciętych przedstawiono czas w minutach. Figura 2 przedstawia wykres pokazujący zmianę profilu stanu nastroju (POMS) po zakończeniu pamięciowego testu arytmetycznego w doświadczeniu 1 w przykładzie 1. Na osi rzędnych przedstawiono zmianę punktacji w teście POMS w procentach (%). Figura 3 przedstawia wykres pokazujący fluktuacje rozkurczowego ciśnienia krwi podczas okresu testowania pamięciowego testu arytmetycznego na osobnikach, którzy otrzymywali napój ze sfermentowanego kwaśnego mleka w ciągu jednego tygodnia w przykładzie 1. Na osi rzędnych przedstawiono rozkurczowe ciśnienie krwi w mmhg, podczas gdy na osi odciętych przedstawiono czas w minutach. Figura 4 przedstawia wykres pokazujący fluktuacje częstości akcji serca podczas okresu testowania pamięciowego testu arytmetycznego na osobnikach, którzy otrzymywali napój ze sfermentowanego kwaśnego mleka w ciągu jednego tygodnia w przykładzie 1. Na osi rzędnych przedstawiono częstość akcji serca na minutę w ilości uderzeń/minutę, podczas gdy na osi odciętych podano czas w minutach. Poniżej przedstawiono wynalazek bardziej szczegółowo. Środek przeciw stresowy do stosowania według wynalazku wytwarzany jest z przynajmniej jednego sfermentowanego kwaśnego mleka. Działanie przeciw stresowe tego środka określano przez badanie wzrostu ciśnienia krwi, wzrostu częstości akcji serca i zmianę profilu stanu nastroju (POMS) lub podobne wskaźniki, w celu stwierdzenia występowania hamującego wpływu środka na takie wzrosty i zmiany, które mierzono przed i po przyjęciu środka na bazie fermentowanego kwaśnego mleka. Jako sfermentowane kwaśne mleko stanowiące czynnik aktywny w środku przeciw stresowym według wynalazku, stosowano mleko sfermentowane przez bakterie mlekowe, którego bezpieczne stosowanie przy wielokrotnym codziennym spożywaniu potwierdzono w standardowy sposób. Sfermentowane kwaśne mleko można przygotować, na przykład, przez sporządzenie najpierw roztworu podstawowego zawierającego mleko. Mleko zawarte w roztworze podstawowym może być pochodzenia zwierzęcego lub roślinnego. Można stosować, na przykład, mleko zwierzęce, takie jak mleko krowie, mleko kozie, mleko owcze lub mleko końskie, bądź mleko roślinne z soi lub podobnych roślin. Jeśli chodzi o mleko, materiałem wyjściowym może być mleko pełnotłuste lub mleko odtłuszczone, serwatka, mleko w proszku i/lub mleko rekonstytuowane. Roztwór podstawowy zawierający mleko nie jest ograniczony do płynu, w którym mleko jest rozpuszczone lub zawieszone i rozproszone. Roztworem podstawowym może być materiał, taki jak pasta przygotowana przez zmieszanie mleka w proszku lub materiału zawierającego mleko z wodą lub roztworem soli. Dodatkowo, roztwór podstawowy zawierający mleko może ewentualnie zawierać podłoże dla bakterii mlekowych, ekstrakty drożdźowe, witaminy, składniki mineralne, cukry, lipidy, środki smakowe lub czynniki barwiące. Następnie zawierający mleko roztwór podstawowy poddawany jest fermentacji bakteriami mlekowymi lub symbiotycznej fermentacji bakteriami mlekowymi i drożdżami dla poprawienia smaku produkowanej żywności, otrzymując w ten sposób sfeimentowane kwaśne mleko. Bakteriami mlekowymi są korzystnie bakterie mlekowe z rodzaju Lactobacillus. Można stosować na przykład Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbruekki subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum lub Lactobacillus casei subsp casei. W szczególności, można stosować szczep Lactobacillus helveticus ATCC8205, Lactobacillus helveticus ATCC5796, Lactobacillus delbruekki subsp. bulgaricus ATCC 11842, Lactobacil-

5 lus acidophilus ATCC4356, Lactobacillus fermentum ATCC14931 lub Lactobacillus casei subsp casei ATCC393. Spośród nich szczególnie korzystny jest Lactobacillus helyeticus. Drożdżami, które można stosować do symbiotycznej fermentacji z bakteriami mlekowymi mogą być drożdże z rodzaju Saccharomyceces rodzaju Candida lub rodzaju Kluyveromyces Na przykład, można stosować taki szczep, jak Saccharomyces cerevisiae Candida utilis lub Kluyveromyces marxianus var lactis. Warunki hodowli do prowadzenia fermentacji uwzględniają wyjaławianie zawierającego mleko roztworu podstawowego przez ogrzewanie, schładzanie wyjałowionego roztworu podstawowego do uprzednio określonej temperatury hodowli i domieszanie do roztworu podstawowego startera składającego się z uprzednio wyhodowanych bakterii mlekowych lub z uprzednio wyhodowanych bakterii mlekowych i drożdży. Temperatura hodowli może wynosić 20 do 50 C, korzystnie 30 do 45 C, a czas hodowli może wynosić 3 do 48 godzin, korzystnie 6 do 24 godzin. Czas zakończenia hodowli można określić na podstawie liczby bakterii mlekowych wynoszącej 108 komórek/g lub więcej i kwasowości kwasu mlekowego 1 lub wyzszej. Ilość starterowych bakterii mlekowych do inokulacji hodowli korzystnie wynosi 10 komórek/g do 107 komórek/g przeliczając na bakterie mlekowe w odniesieniu do podłoża. Środek przeciw stresowy wytworzony według wynalazku może mieć postać roztworu hodowlanego per se, zawierającego sfermentowane kwaśne mleko jako składnik aktywny, lub postać roztworu hodowlanego, z którego odpowiednio wydzielono składniki inne, niż sfermentowane kwaśne mleko i bakterie mlekowe. W drugim przypadku, bakterie mlekowe lub bakterie mlekowe razem z drożdżami w mleku utrzymuje się żywe, tj. w postaci żywej. Alternatywnie, roztwór hodowlany lub wydzielony roztwór hodowlany można wyjaławiać przez ogrzewanie do temperatury 80 C w celu przygotowania czynnika przeciw stresowego w postaci jałowej. Ponadto, powyższy wyjałowiony lub nie wyjałowiony roztwór hodowlany można oczyszczać w celu otrzymania sfermentowanego kwaśnego mleka; można go sproszkować przez liofilizację, suszenie rozpyłowe lub suszenie w suszarce bębnowej; lub następnie można mu nadać postać tabletek, stosując zaróbki lub nośniki. Środek przeciw stresowy do stosowania według wynalazku można podawać doustnie ludziom lub zwierzętom w dowolnym czasie przed stresem, podczas trwania stresu i po przebytym stresie, i można go podawać codziennie. Górna granica dawki skutecznej czynnika przeciw stresowego nie jest szczególnie ograniczona i można ją dostosować do potrzeb. Nie mniej jednak, dawka skuteczna do wystarczającego łagodzenia lub zapobiegania stresowi, gdy czynnik przeciw stresowy podaje się ludziom, korzystnie wynosi nie mniej niż 0,1 g na kg wagi ciała na dzień przeliczając na suchy produkt sfermentowanego kwaśnego mleka. Produkt żywnościowy mający działanie przeciw stresowe stosowany według wynalazku zawiera wyżej wymieniony środek przeciw stresowy, który może mieć postać wspomnianego powyżej roztworu hodowlanego per se lub po odpowiednim przetworzeniu, z bakteriami mlekowymi lub bakteriami mlekowymi razem z drożdżami w stanie żywym; może mieć postać wyjałowioną, przygotowaną przez wyjałowienie drogą ogrzewania do temperatury 80 C, lub postać sproszkowaną, przygotowaną przez liofilizację, suszenie rozpyłowe lub suszenie w suszarce bębnowej. W odniesieniu do produktu żywnościowego nie ma szczególnie żadnych ograniczeń dopóki zawiera wspomniany powyżej środek przeciw stresowy. Środek przeciw stresowy można dodawać po wyprodukowaniu żywności, podczas produkcji żywności lub na jakimkolwiek etapie produkcji żywności. Ponadto, specjalna żywność przeciw stresowa może zawierać cukry, białka, lipidy, witaminy, składniki mineralne, środki smakowe lub środki barwiące, zależnie od rodzaju żywności. Ilość środka przeciw stresowego stosowanego w żywności według wynalazku nie jest szczególnie ograniczona, ale zazwyczaj pozostaje w korzystnym zakresie 10 do 100% w/w przeliczając na sfermentowane kwaśne mleko. Produkt żywnościowy według wynalazku może mieć postać jogurtu, zawierających mleko zakwaszanych napojów, sera, przemysłowo przetworzonej żywności zawierającej sfermentowane kwaśne mleko, zdrowej żywności lub sproszkowanej bądź granulowanej żywności.

6 Skuteczna ilość produktu żywnościowego stosowanego według wynalazku do łagodzenia i zapobiegania stresowi wynosi, w przypadku człowieka, korzystnie nie mniej niż 0,1 g na kg wagi ciała na dzień przeliczając na suchy produkt sfermentowanego kwaśnego mleka. Środek przeciw stresowy może być stosowany do produkcji leku przeciwstresowego w postaci stałej lub płynnej, zwłaszcza w postaci tabletek, granulek lub napojów z suplementami żywieniowymi. Środek przeciw stresowy i zawierające go produkty żywnościowe są w wysokim stopniu bezpieczne, można je spożywać wielokrotnie i codziennie wpływając na łagodzenie i zapobieganie psychicznym i fizycznym objawom powodowanym przez stres. Niniejszy wynalazek zostanie teraz bardziej szczegółowo wyjaśniony w ponizszych przykładach. Przykład 1 2 kg odtłuszczonego mleka (o 9% wagowo zawartości składników stałych) wyjałowionego przez ogrzewanie do temperatury 90 C zaszczepiono 40 g uprzednio wyhodowanych starterowych bakterii Lactobaciłłus heheticus ATCC8205, i hodowano w temperaturze 37 C przez 24 godziny w celu przygotowania drugiego startera. Następnie 4,5 kg odtłuszczonego mleka w proszku rozpuszczano w 45,5 kg wody i otrzymany w wyniku roztwór wyjaławiano przez ogrzewanie do temperatury 90 C, po czym schłodzono do temperatury pokojowej. Następnie roztwór zaszczepiono drugim starterem i hodowano w temperaturze 37 C przez 24 godziny otrzymując 52 kg sfermentowanego kwaśnego mleka. Po wyjałowieniu sfermentowanego kwaśnego mleka w temperaturze 80 C w ciągu 10 minut przez ogrzewanie, do sfermentowanego kwaśnego mleka domieszano Aspartame (znak towarowy, produkcji Ajinomoto K.K.) w ilości 0,04% wagowego wagi całkowitej, dla ułatwienia picia, otrzymując w ten sposób środek przeciw stresowy. Z otrzymanym środkiem przeciw stresowym przeprowadzono następujące doświadczenia. Doświadczenie 1. Otrzymany powyżej środek przeciw stresowy i próbę kontrolną składającą się z mieszaniny mleka odtłuszczonego i kwasu mlekowego o takim samy stężeniu jak w sfermentowanym kwaśnym mleku, podano w postaci napoju grupie piętnastu (15) zdrowych osobników (7 mężczyzn, 8 kobiet, wiek od 24 do 32 lat) i na osobnikach tych przeprowadzono pamięciowy test arytmetyczny, jak opisano poniżej. Osobnicy otrzymali albo środek przeciw stresowy albo próbę kontrolną, w ilości 100 g każdy, o godzinie 18:00 i 24:00 na dzień przed pomiarem, o 7:00 w dniu pomiaru i 30 minut przed rozpoczęciem testu (10:00), tj. łącznie cztery (4) razy w łącznej ilości 400 g. Następnie w innych dniach osobnicy otrzymali drugi środek przeciw stresowy i próbę kontrolną zgodnie z tym samym schematem czasowym. Testy przeprowadzono jako ślepą próbę tak, ze kolejność dawek nie powinna wpłynąć na wyniki testu. W celu przystosowania osobników do otoczenia, w którym będzie przeprowadzany test, osobnicy wchodzili do pomieszczenia dziesięć minut przed rozpoczęciem testu i wyciszali się w warunkach wypoczynku przed rozpoczęciem testu. W chwili rozpoczęcia testu osobnicy przebywali w warunkach wypoczynku przez piętnaście (15) minut, a następnie rozpoczynali pracę obliczeniową w ciągu 30 minut, od piętnastej (15-tej) minuty do czterdziestej piątej (45-tej) minuty od rozpoczęcia testu. W trakcie testowania (od minuty 0 do minuty 45-tej) w ciągły sposób mierzono ciśnienie krwi osobników. Ponadto, przed rozpoczęciem testu i po zakończeniu pracy obliczeniowej, osobników poddano ocenie metodą określania profilu stanu nastroju (POMS), za pomocą której ocenia się psychologiczne warunki podczas upływu czasu, w celu poznania ich warunków psychologicznych. Wyniki testów przedstawiono w następujący sposób: w odniesieniu do ciśnienia krwi, poprzez zmianę ciśnienia krwi w stosunku do ciśnienia w warunkach wypoczynku; oraz w odniesieniu do POMS, przez zmianę punktacji w stosunku do punktacji przed rozpoczęciem testu. Różnice statystyczne określano jako test t dla wyników sparowanych. Fluktuacje rozkurczowego ciśnienia krwi w okresie testowania (od minuty 0 do 45-tej minuty) przedstawiono na fig. 1. Rozkurczowe ciśnienie krwi oceniano przy obciążeniu pracą obliczeniową. W przypadku, w którym osobnicy otrzymywali środek przeciw stresowy wytworzony według wynalazku, wzrost rozkurczowego ciśnienia krwi podczas stresu związanego z obciążeniem pracą obliczeniową był hamowany. Szczególnie, w dwudziestej (20-tej)

7 minucie po rozpoczęciu testu, wzrost rozkurczowego ciśnienia krwi był znacząco hamowany w porównaniu z występującym w przypadku próby kontrolnej, z 5% poziomem istotności (*). Wyniki testu POMS przedsiawiono na fig. 2. Przez porównanie wyników testu POMS przed rozpoczęciem testu i po pracy obliczeniowej stwierdzono, ze napięcie i depresja wykazywały tendencję do zmniejszenia, zmęczenie wykazywało tendencję do złagodzenia, a rozstrój emocjonalny wykazywał tendencję do stabilizacji, w przypadku, w którym osobnicy otrzymywali środek przeciw stresowy wytworzony według wynalazku. W szczególności, napięcie uległo znaczącemu zmniejszeniu w porównaniu z próbami kontrolnymi z 5% poziomem istotności (*). Doświadczenie 2. Grupa czterech (4) zdrowych osobników (3 mężczyzn, 1 kobieta, wiek od 25 do 35 lat) otrzymywała środek przeciw stresowy w postaci napoju, w ciągu 7 kolejnych dni, i przed oraz po przyjęciu środka przeciw stresowego przeprowadzono pamięciowy test arytmetyczny. Pierwszego dnia przeprowadzono na osobnikach pamięciowy test arytmetyczny od 10:30, w taki sam sposób jak w doświadczeniu 1. Następnie, po południu tego samego dnia, osobnicy otrzymali 100 g środka przeciw stresowego. Kolejno od drugiego dnia do szóstego dnia otrzymywali 100 g środka przeciw stresowego rano i po południu. Siódmego dnia osobnicy otrzymali 100 g środka przeciw stresowego o 7:00 i od 10:00 przeprowadzono na nich ten sam pamięciowy test arytmetyczny, jak w doświadczeniu 1. Wyniki tego testu przedstawiono przez zmianę ciśnienia krwi i częstości akcji serca w stosunku do tych wartości w stanie odpoczynku. Różnice statystyczne określono za pomocą testu t dla wyników sparowanych. Fluktuacje rozkurczowego ciśnienia krwi podczas okresu testowania (od minuty 0 do 45 minuty) przedstawiono na fig. 3. Rozkurczowe ciśnienie krwi oceniano przy obciążeniu pracą obliczeniową. W teście po przyjęciu przez osobników środka przeciw stresowego według wynalazku kolejno w ciągu jednego tygodnia, wzrost rozkurczowego ciśnienia krwi podczas obciążenia pracą obliczeniową ulegał hamowaniu w porównaniu z ciśnieniem w teście przeprowadzonym zanim osobnicy otrzymywali środek przeciw stresowy. Dalej, fluktuacje częstości akcji serca podczas okresu testowania (od minuty 0 do 45-tej minuty) przedstawiono na fig. 4. Częstość akcji serca oceniano przy obciążeniu pracą obliczeniową. W teście po przyjęciu przez osobników środka przeciw stresowego według wynalazku kolejno w ciągu jednego tygodnia, wzrost częstości akcji serca podczas obciążenia pracą obliczeniową ulegał hamowaniu w porównaniu z częstością akcji serca w teście przeprowadzonym zanim osobnicy otrzymali środekk przeciw stresowy. Przykład 2 Sfermentowane kwaśne mleko przygotowane w przykładzie 1 wyjałowiono przez ogrzewanie w temperaturze 80 C w ciągu 10 minut. Następnie produkty wyjściowe zmieszano i otrzymano mieszaninę o składzie w % wagowych 75% wyjałowionego sfermentowanego kwaśnego mleka, 13,3% roztworu zawierającego 3% pektyny HM, 3,03% roztworu zawierającego 30% cytrynianu sodowego, 4,5% roztworu zawierającego 1% Aspartame, 0,25% zmiesznych środków smakowych i 3,92% wody. Mieszaninę wyjałowiono przez ogrzewanie do temperatury 85 C, po czym gorącą umieszczono w butelkach o barwie brązowej po 100 g w każdej, otrzymując w ten sposób napój ze sfermentowanego kwaśnego mleka. Otrzymany napój ze sfermentowanego kwaśnego mleka poddano testom jak w przykładzie 1 dla potwierdzenia, ze wykazuje on podobne działanie na ciśnienie krwi, częstość akcji serca i POMS.

8

9 Fig. 3 Fig. 4

10 Fig. 1 Fig.2 Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 50 egz Cena 2,00 zł.