(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (13) (1) T3 Int.Cl. A61P 3/00 (06.01) A61K 31/377 (06.01) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 14/28 EP B1 (4) Tytuł wynalazku: Związki izoksazolowe do leczenia raków przewodu pokarmowego (30) Pierwszeństwo: EP (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr /1 (4) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 14/12 (73) Uprawniony z patentu: Novartis AG, Basel, CH (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 PATRICK CHENE, Mulhouse, FR CARLOS GARCIA-ECHEVERRIA, Saint-Cloud, FR MICHAEL RUGAARD JENSEN, Basel, CH CORNELIA QUADT, Allschwil, CH THOMAS RADIMERSKI, Tecknau, CH JOSEPH SCHOEPFER, Basel, CH (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Sebastian Walkiewicz LDS ŁAZEWSKI DEPO I WSPÓLNICY SP.K. ul. Okopowa 8/ Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 1 EP Z-12379/ Związki izoksazolowe do leczenia raków przewodu pokarmowego [0001] Wynalazek dotyczy zastosowania etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylofenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu do przygotowania farmaceutycznej kompozycji użytecznej w leczeniu raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego, etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)- izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu do zastosowania w leczeniu raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego np. nowotwory podścieliskowe przewodu pokarmowego. Ponadto, opisano leczenie zwierząt ciepłokrwistych w tym ludzi cierpiących na raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego, poprzez podawanie wspomnianemu zwierzęciu wymagającemu takiego leczenia, efektywnej dawki etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4- morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu. [0002] Leczenie raka pęcherza moczowego, okrężnicy, wątroby, płuc, np. międzybłoniaka opłucnej, np. nie drobnokomórkowego, np. drobnokomórkowego, piersi, jajników, trzustki, nerek, żołądka, przewodu pokarmowego, np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego, prostaty, głowy i szyi, mózgu, np. glejaka, krwi, np. raka hematologicznego, np. białaczki np. ostrej białaczki szpikowej, np. szpiczaka mnogiego i/lub czerniaka jest poważnym problemem. [0003] Białko szoku cieplnego 90 (Hsp90) jest rozpoznawane jako nowy cel anty-rakowy. Hsp90 to wszechobecne, wysoce liczne (1-2% całkowitych białek komórkowych), niezbędne białko, które działa jako cząsteczkowe białko opiekuńcze zapewniające stabilność konformacyjną, kształt i funkcję białek docelowych. Hamowanie aktywności wewnętrznej ATPazy Hsp90 zakłóca interakcję Hsp90-białko docelowe co prowadzi do jego degradacji w szlaku ubikwityna-proteasom. Podzbiór białek docelowych Hsp90, takich jak Raf, AKT, CDK4 i rodzina EGFR zawierająca ErbB2, są onkogennymi cząsteczkami sygnałowymi krytycznie zaangażowanymi we wzrost komórek, różnicowanie i apoptozę, procesy, które mają podstawowe znaczenie w komórkach rakowych. Uważa się, że równoczesny rozkład wielu onkoprotein wytwarza efekty przeciwnowotworowe obserwowane z inhibitorami Hsp90. [0004] Rodzina białek opiekuńczych Hsp90 składa się z czterech członków: Hsp90α i Hsp90β obydwu zlokalizowanych w cytozolu, GRP94 w retikulum endoplazmatycznym, i TRAP1

3 w mitochondriach (Csermely et al., 1998). Hsp90 (o ile nie zaznaczono inaczej, Hsp90 odnosi się do Hsp90α i Hsp90β) jest najobficiej występującym komórkowym białkiem opiekuńczym, co stanowi około 1%-2% wszystkich białek (Jakob and Buchner, 1994). Wśród białek stresowych, Hsp90 jest unikatowe, ponieważ nie jest wymagane w biogenezie większości polipeptydów (Nathan et al., 1997). Jego cele komórkowe, nazywane także białkami docelowymi, są nietrwałymi konformacyjnie przetwornikami sygnału odgrywającymi kluczową rolę w kontroli wzrostu, przetrwaniu komórki i rozwoju tkanek (Pratt and Toft, 03). [000] Białka opiekuńcze Hsp 90, które wykazują zabezpieczone miejsce wiązania ATP na ich N-końcowej domenie (Chene, 02) należą do małej podrodziny ATPaz znanych jako Gyraza DNA, Hsp90, Kinazy Histydynowe i podrodzina MutL (GHKL) (Dutta and Inouye, 00). Aktywność opiekuńcza (zawijania) Hsp90 zależy od aktywności ATPazy, która jest słabo izolowanym enzymem. Jednakże wykazano, że aktywność ATPaz Hsp90 jest zwiększona przy współpracy z białkami znanymi jako białka ko-opiekuńcze (co-chaperones) (Kamal et al., 03). Dlatego też, w warunkach in vivo białka Hsp90 pracują jako podjednostki dużych, dynamicznych kompleksów białkowych. Hsp90 jest niezbędne dla przetrwania komórek eukariotycznych i ulega nadekspresji w wielu nowotworach. [0006] Etyloamid kwasu -(2,4-Dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego jest inhibitorem Hsp90, jego synteza została opisana na przykład w WO 04/071, przykład 78. [0007] Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, że etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy-- izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomer lub farmaceutycznie akceptowalna sól lub hydrat lub solwat są użyteczne w leczeniu raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego, np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego. [0008] Zgodnie z tym, niniejszy wynalazek zapewnia zastosowanie etyloamidu kwasu -(2,4- dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu do wytwarzania farmaceutycznej kompozycji użytecznej w leczeniu raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego, np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego. [0009] Dalej opisane jest leczenie ludzi cierpiących na raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego, które obejmuje podawanie wspomnianemu człowiekowi potrzebującemu takiego leczenie, dawki etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu skutecznej wobec raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego, np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego.

4 3 1 [00] W następnym aspekcie niniejszy wynalazek zapewnia preparat farmaceutyczny do użycia w leczeniu raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego zawierający etyloamid kwasu - (2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego akceptowalną sól lub hydrat lub solwat i co najmniej jeden farmaceutycznie akceptowalny nośnik. [0011] Zależnie od gatunku, rasy, indywidualnego stanu, rodzaju leczenia i danego obrazu klinicznego, człowiekowi podaje się efektywne dawki dla przykładu tygodniowe dawki od około 2 do 300 mg, korzystnie 0 do 160 mg etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylofenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego. [0012] Ponadto, ujawniono metodę podawania ludziom mających raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, przewodu pokarmowego np. nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4- ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu, która obejmuje podawanie człowiekowi farmaceutycznie skutecznej ilości etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4- (4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego lub jego tautomeru lub farmaceutycznie akceptowalnej soli lub hydratu lub solwatu około raz w tygodniu. [0013] Poniższy opis przedstawiony jest tylko w drodze przykładu. Przykład 1: Ocena In vitro NVP-AUY922 na panelu linii komórek nowotworowych [0014] Zostało użytych trzydzieści siedem rakowych linii komórkowych (BT474, MDA-MB-361, MDA-MB-43, SKBr3, T47D, MCF7, MDA-MB-231, MDA-MB-468, SK-MEL-, A37, MALME-3M, SK-MEL-28, WM266.4, RPM18226, U266, BE, Colo, HCT116, HT29, MAWI, RKO, U87MG, HN, RPMI-8226, A49, MV22, NCI-H1299, NCI-H460, 41M, A2780, CH1, NCI-N87, SKOV3, PC3, MO7e, GIST882 and Baf3) do zbadania efektu etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy-- izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego. Linie komórkowe są komercyjnie dostępne z American Type Culture Collection (ATCC). Te linie obejmują następujących dwanaście typów raka lub nowotworu: piersi, czerniaka, szpiczaka mnogiego (MM), okrężnicy, glejaka, głowy i szyi, białaczki, płuc, jajnika, prostaty, żołądka i nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego (GIST). Po podziale i wymianie pożywki, komórki z kultury macierzystej, hodowano na płytkach przez około 18 godzin, aby umożliwić im wzrost i zaczepienie przed rozpoczęciem testu. Pierwszego dnia testu, etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)- izoksazolo-3-karboksylowego został dodany do pożywki w różnych stężeniach do μm. Komórki były hodowane do 72 lub 96 godzin i proliferacja komórek została określona komercyjnie dostępnymi zestawami do badania proliferacji komórek.

5 4 [001] Tabela 1 przedstawia stężenia (nm) etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy-- izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego, które hamowały proliferację komórek o 0% (IC 0 ). Komórki były ciągle wystawione na działanie etyloamidu kwasu -(2,4-Dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)- izoksazolo-3-karboksylowego, każda do 72 lub 96 godzin i wzrost komórek został określony przy pomocy komercyjnie dostępnych zestawów, każdy bazujących na metodach SRB, Alamar blue, błękit metylenowy lub WST-1. Tabela 1 Rodzaj nowotworu Linia komórkowa IC 0 (nm) Piersi BT474 2,8 MDA-MB MDA-MB-43 3,9 SKBr3 2,3 T47D 2,6 MCF7 2,3 MDA-MB-231 7,7 MDA-MB-468 3, Czerniak SK-MEL- 3 A37 3 MALME-3M 7,7 SK-MEL-28 8 WM ,2 Szpiczak mnogi (MM) RPMI ,7 U266 23,3 Okrężnicy BE 2,8 Colo 6,2 HCT HT29 30 MAWI 0 RKO 3,1 Glejak U87MG 6 Głowy i szyi HN 8 Białaczka RPMI ,3 Płuc A49 11,7 MV22 8,1 NCI-H1299,7

6 NCI-H Jajnika 41M 3 A2780 6,1 CH1 2,8 SKOV3 3,7 Prostaty PC3 Żołądka NCI-N87 0,2 Podścieliskowy nowotwór przewodu pokarmowego (GIST) MO7e,6 GIST882 6,2 Baf3 22,4 1 2 Przykład 2: Ocena wpływu etyloamidu kwasu -(2,4-Dihydroksy--izopropylofenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego na panel podstawowych ludzkich komórek nowotworowych in vitro. [0016] Aktywność antyrakową etyloamidu kwasu -(2,4-Dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4- (4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego została określona na 30 ludzkich ksenoprzeszczepach nowotworowych in vitro używając testu klonogennego. W tym oznaczeniu ludzkie komórki pobrane z raka pacjentów zostały ocenione pod względem zdolności etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)- izoksazolo-3-karboksylowego do hamowania formowania koloni w trzech wymiarach. Należą do nich komórki nowotworowe posiadające potencjał wzrostu niezależnego od zaczepienia w półstałej pożywce. Ksenoprzeszczepy nowotworowe, które nigdy nie były hodowane w naczyniach do hodowli komórkowych z tworzywa sztucznego zostały wyizolowane z myszy nagiej. Zawiesina komórek nowotworowych została przygotowana i inkubowana w 24 dołkowych płytkach zawierających warstwę miękkiego agaru. W tych warunkach specjalna subpopulacja komórek selektywnie rośnie do kolonii. Etyloamid kwasu -(2,4- dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego został zbadany w 6 stężeniach do μm. Nowotworowy panel testowy zawierał od 1 do 6 modeli różnych ludzkich rodzajów nowotworów lub raków, którymi były rak pęcherza, okrężnicy, wątroby, nie drobnokomórkowy rak płuc (gruczolakorak, rak nabłonka płaskiego i rak z dużych komórek), drobnokomórkowy rak płuc, rak sutka, rak jajnika, rak trzustki, czerniak i międzybłoniak opłucnej. Efekty przeciwnowotworowe zostały zaobserwowane jako hamowanie formowania kolonii w stosunku do nieleczonej kontroli. Stężenie, które powoduje 0% redukcję hamowania kolonii (IC 0 ) zostało przedstawione w Tabeli 2. Dalsze informacje o tej metodzie zostały opublikowane (Burger et al., 04; Fiebig et al., 04; Smith et al., 0).

7 6 [0017] Tabela 2, przedstawia stężenie (nm) etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy-- izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego, które hamuje formowanie kolonii o 0% (IC 0 ). Komórki ciągle wystawiono na działanie etyloamidu kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylo-fenylo)-izoksazolo-3- karbo-ksylowego oraz określono formowanie kolonii. Tabela 2 Rodzaj nowotworu Model Histologia IC 0 (nm) nowotworu Pęcherza BXF 1218 Rak przejściowokomórkowy 27 BXF 1228 Rak przejściowokomórkowy 630 Okrężnicy CXF 13 Gruczolakorak 13 CXF 18 Gruczolakorak 369 CXF 1729 Rak 467 CXF 1784 Rak 418 CXF 609 Gruczolakorak Wątroby LIXF 7 Rak wątrobowokomórkowy 34 Płuc, LXFA 297 Gruczolakorak 28 nie drobnokomórkowy LXFA 26 Gruczolakorak LXFA 629 Gruczolakorak 3 LXFA 983 Gruczolakorak 126 LXFE 1422 Rak komórek nabłonka płaskiego 48 LXFL 1647 Rak dużych komórek płuc 34 Płuc, LXFS 61 Rak drobnokomórkowy płuc 30 drobnokomórkowy LXFS 60 Rak drobnokomórkowy płuc 2 Piersi MAXF 1162 Inwazyjny rak przewodowy 304 MAXF 1322 Pap. Gruczolakorak 29 MAXF 1384 Gruczolakorak 9 MAXF 401 Pap. Gruczolakorak 78 MAXF 83 Przewodowy gruczolakorak 333 Czerniak MEXF 139 Czerniak 3 MEXF 462 Czerniak bezbarwnikowy 24 MEXF 3 Czerniak bezbarwnikowy 43 MEXF 672 Czerniak bezbarwnikowy 18 MEXF 989 Czerniak bezbarwnikowy 2 Jajnika OVXF 133 Gruczolakorak 26 OVXF 144 Rak 3

8 Trzustki PAXF 167 Gruczolakorak 39 7 Międzybłoniak opłucnej PXF 1118 Dwufazowy międzybłoniak opłucnej 223 Novartis AG, Szwajcaria Pełnomocnik:

9 8 Zastrzeżenia patentowe EP Z-12379/ Etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego akceptowalna sól lub hydrat lub solwat do zastosowania w spspobie leczenia raka okrężnicy, wątroby, trzustki, żołądka, i/lub przewodu pokarmowego. 2. Etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego w sposobie leczenia raka okrężnicy. 3. Etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego w sposobie leczenia raka wątroby. 4. Etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego w sposobie leczenia raka trzustki.. Etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego w sposobie leczenia raka żołądka. 6. Etyloamid kwasu -(2,4-dihydroksy--izopropylo-fenylo)-4-(4-morfolin-4-ylometylofenylo)-izoksazolo-3-karboksylowego w sposobie leczenia raka przewodu pokarmowego. 30 Novartis AG, Szwajcaria Pełnomocnik: