Produkty Genomic Essentials 2014

Transkrypt

1 Produkty Genomic Essentials 2014 GCTA+

2 2 ŻYWA PAGINA / POSZCZEGÓLNE ROZDZIAŁY GENOMIC ESSENTIALS: KLUCZ DO SUKCESU W BADANIACH Ciekawość, dobry pomysł i odwaga są często kluczem do sukcesu. Biochemik William A. Linton w 1978 roku dostrzegł wśród naukowców potrzebę wykorzystania fragmentów DNA i zaoferował sprzedaż samodzielnie wyprodukowanych enzymów restrykcyjnych. Mając przed oczyma tę samą wizję wspieranie naukowców w ich codziennej pracy w laboratorium firma Promega odpowiednio wcześnie poszerza swoją ofertę produktów do zastosowania w genomice. Po pojedynczych produktach, takich jak RNAsin czy polimeraza Taq DNA w latach osiemdziesiątych, przyszła kolej na pierwsze zestawy, jak Wizard Mini-DNA czy system SV Total RNA. Stanowiły one wstęp do obszernego asortymentu kluczowych produktów dla biologów molekularnych. Dzisiaj, po ponad 35 latach, Promega oferuje ponad 3000 produktów przeznaczonych do zastosowania w badaniach podstawowych, farmakologii, kryminalistyce i diagnostyce molekularnej, przy czym firma nadal koncentruje się na kluczowym obszarze swojej działalności: niezbędnych odczynnikach do badań genomicznych, czyli GENOMIC ESSENTIALS. Dlaczego o tym mówimy? Naukowcy z dziedziny genomiki potrzebują prostych, skutecznych i niezawodnych produktów, aby móc szybko znaleźć odpowiedzi na pytania naukowe. Firma Promega, jeden z największych producentów odczynników biologicznych na świecie, opracowuje produkty z serii Genomic Essentials w ścisłej współpracy z ich użytkownikami. Sprawdzone i wzajemnie dopasowane produkty Genomic Essentials pozwalają zyskać więcej czasu na to, co jest naprawdę istotne. Warto skorzystać z wieloletniego doświadczenia firmy Promega w każdej z dziedzin, którymi się zajmujemy. Z Genomic Essentials stworzą Państwo podstawę swojego sukcesu! GCTA+ Wybrane z całej oferty Promega produkty do zastosowania w genomice stanowią idealną podstawę badań zapraszamy do zapoznania się z Genomic Essentials. Przejrzyste prezentacje produktów wraz z opisem ich zalet, wskazówki dotyczące narzędzi i aplikacji oraz wszystkie informacje niezbędne do złożenia zamówienia.

3 SPIS TREŚCI 3 Kontakt Doradztwo techniczne: Jeśli coś nie od razu się udaje lub jeśli potrzebna jest porada dotycząca korzystania z produktów, prosimy o kontakt: tel pl_techserv@promega.com Telefoniczne składanie zamówień: tel Składanie zamówień faksem: fax Składanie zamówień przez pl_custserv@promega.com Składanie zamówień w sklepie internetowym: 2% rabatu w sklepie internetowym NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Aplikacja Promega Darmowa aplikacja Promega dostarcza naukowcom danych referencyjnych i pomocnych narzędzi. Obejmuje praktyczny kalkulator do stosowania na stole laboratoryjnym, filmy ukazujące protokoły oraz szczegółowe dane referencyjne z kluczowych dziedzin biologii molekularnej i biologii komórki. BioMath Calculators Szybkie wyliczanie temperatury topnienia, molarności, rozcieńczenia, stężenia DNA lub białka oraz wiele innych możliwości. Protocols & Application Guide Tutaj można znaleźć informacje z dziedziny biologii molekularnej i biologii komórki, jak również powszechnie stosowane protokoły. W poszczególnych sekcjach omówiono zagadnienia apoptozy, klonowania, szlaków sygnałowych w komórce, oczyszczania DNA, amplifikacji z zastosowaniem reakcji PCR, reporterów bioluminescencyjnych i transfekcji. Multimedia Filmy z protokołami i animowane prezentacje sprzętu. Można je przeglądać poprzez Protocols & Application Guide lub w osobnym menu. Custom PCR-Protocol Tworzenie i zapisywanie protokołów PCR oraz dodawanie do nich komentarzy i wysyłanie ich poprzez . Restriction Enzyme Tool Wyszukiwanie enzymów restrykcyjnych według nazwy, rozpoznawanej sekwencji lub wystających końców. Szybkie i łatwe wyszukiwanie enzymów do podwójnego trawienia bez konieczności wprowadzania każdego enzymu z osobna. OCZYSZCZANIE 4 Oczyszczanie DNA 5 Oczyszczanie RNA 10 Oczyszczanie bez odwirowywania 13 Oczyszczanie automatyczne / System Maxwell KWANTYFIKACJA ORAZ WYKRYWANIE 18 Kwantyfikacja 19 Wykrywanie 21 PCR 22 Rutynowe reakcje PCR 23 PCR typu hot-start 24 PCR długich sekwencji 24 PCR ze sprawdzaniem poprawności 24 dntp 25 RT-PCR 26 Odwrotne transkryptazy 27 Systemy do odwrotnej transkrypcji 28 Oligonukleotydy i startery 29 INHIBITORY RYBONUKLEAZY 30 PCR W CZASIE RZECZYWISTYM 32 Zastosowania poszczególnych technologii PCR w czasie rzeczywistym PCR w czasie rzeczywistym z użyciem barwnika PCR w czasie rzeczywistym z użyciem sond 34 SYSTEMY KLONOWANIA 36 Klonowanie produktów PCR 37 System klonowania Flexi 39 Biblioteka cdna 40 Interferencja RNA 41 MARKERY 42 Markery DNA z serii BenchTop 43 Równoodstępowe drabinki DNA 44 Drabinki DNA 45 Konwencjonalne markery DNA 46 Markery RNA 47 ENZYMY RESTRYKCYJNE 48 ENZYMY MODYFIKOWANE 54 Fosfatazy alkaliczne 55 Polimerazy 55 Ligazy 56 Kinazy i systemy znakowania DNA 56 Nukleazy 57 Inne enzymy 57 WEKTORY EKSPRESYJNE 58 Wektory ekspresyjne Flexi 59 Standardowe wektory MCS 61 KOMPETENTNE KOMÓRKI 62 Wszystkie produkty z tym znakiem można umieszczać w zamrażarce, lodówce lub szafie utrzymującej temperaturę pokojową marki Helix. Więcej informacji na temat produktów Helix można znaleźć na stronie

4 4 OCZYSZCZANIE OCZYSZCZANIE Oczyszczanie kwasów nukleinowych stanowi fundament wszystkich innych prac badawczych. Produkty do oczyszczania Genomic Essentials firmy Promega to podstawa sukcesu Państwa doświadczeń. Od wyboru odpowiednich produktów do oczyszczania zależy powodzenie dalszych etapów doświadczenia. Firma Promega oferuje odpowiednie produkty do szerokiego zakresu materiałów wyjściowych i zastosowań, w tym DNA i RNA, fragmentów i plazmidów, protokołów ręcznych i automatycznych! Produkty są skuteczne i łatwe w użyciu co więcej dołączane są do nich protokoły zastosowania w postaci przejrzystych protokołów skróconych, dzięki czemu rutynowe czynności laboratoryjne są jeszcze prostsze i wydajniejsze. NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Wybór produktu do oczyszczania kwasów nukleinowych Który zestaw do oczyszczania firmy Promega będzie odpowiedni? Pomoc online w wyborze produktu: Objaśnienie symboli 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

5 OCZYSZCZANIE 5 Oczyszczanie DNA Oczyszczanie plazmidów od Mini do Maxi PureYield Plasmid System Szybkie oczyszczanie DNA plazmidowego do uzyskania jakości odpowiedniej do transfekcji Protokół próżniowy pozwala zmniejszyć nakład czasu potrzebny do izolacji w porównaniu z metodami wykorzystującymi żele krzemionkowe i kolumny membranowe. Specjalny bufor płuczący oddziela zanieczyszczenia w postaci białek, RNA i endotoksyn Lepsze wyniki w zastosowaniach o dużej czułości, na przykład transfekcji, transkrypcji in vitro lub sprzężonej transkrypcji / translacji in vitro Brak konieczności wytrącania w izopropanolu lub odwirowywania oczyszczonego DNA plazmidowego PureYield Plasmid Miniprep System Do kultur bakteryjnych o objętości od 600 µl do 3 ml 10 min 30 µg M A szt. zł 621, A szt. zł 1.0, PureYield Plasmid Midiprep System Do kultur bakteryjnych o objętości ml 40 min 200 µg M A szt. zł 710, A szt. zł 2.559, A szt. zł 6.520, Film o produkcie Przedstawiamy, jak szybkie i łatwe jest stosowanie produktu. PureYield Plasmid Maxiprep System Do kultur bakteryjnych o objętości do 250 ml 60 min 1 mg M A szt. zł 659, A szt. zł 1.522, Wizard Plus SV Miniprep DNA Purification System Do kultur bakteryjnych o objętości 1 10 ml System na bazie membrany krzemionkowej Oczyszczone DNA można bezpośrednio zastosować do automatycznego sekwencjonowania fluorescencyjnego lub innych standardowych technik biologii molekularnej A10 50 szt. zł 310, A szt. zł 1.0, A szt. zł 4.480, Nie jest wymagana ekstrakcja z użyciem fenolu ani etap wytrącania SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold 45 min 20 µg M

6 6 OCZYSZCZANIE Wizard SV 96 Plasmid DNA Purification System System na bazie membrany krzemionkowej na płytce 96-dołkowej Oczyszczone DNA plazmidowe można bezpośrednio zastosować do automatycznego sekwencjonowania fluorescencyjnego lub innych standardowych technik biologii molekularnej A szt. zł 1.046, A szt. zł 4.356, A szt. zł.545, Do zastosowań ręcznych lub automatycznych na aparatach Beckman Coulter lub PerkinElmer SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold 45 min 20 µg M/A Wizard MagneSil Plasmid DNA Purification System Wysokoprzepustowy format 96-dołkowy Oczyszczone DNA można bezpośrednio zastosować do automatycznego sekwencjonowania fluorescencyjnego lub innych standardowych technik biologii molekularnej A szt. zł 2.151, A szt. zł 4.101, A szt. zł , Paramagnetyczne cząstki do klarowania lizatu i izolowania DNA. Etap wirowania lub zastosowania próżni staje się zbędny Zaleta: idealny system do w pełni automatycznych zastosowań na różnych aparatach 45 min 20 µg A Komórki, tkanki, rośliny do każdego z zastosowań! ReliaPrep gdna Tissue Miniprep System Czyste, niezdegradowane gdna bez konieczności wytrącania alkoholem, pozyskiwane z 25 mg tkanki, wymazu z błony śluzowej jamy ustnej (policzka) lub 1 cm ogona mysiego A szt. zł 1.157, A szt. zł 2.532, Odczynniki gotowe do użycia Wysoka wydajność i czystość w eluacie o objętości zaledwie 50 μl Lepsze wyniki A260 / A230 w porównaniu z konwencjonalnymi systemami oczyszczania min 30 µg M Wizard Genomic DNA Purification Kit Łatwa metoda izolacji DNA z roztworu, użyteczna przy badaniu białych ciałek krwi, kultur komórkowych, tkanek zwierzęcych i roślinnych, drożdży, bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych Kultury komórkowe o zawartości do komórek NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATALOGOWA A oczyszczeń 300 µl zł 837, A oczyszczeń 300 µl zł 1.842, A oczyszczeń 10 ml zł 4.586, 11 mg wątroby mysiej, 0,5 1 cm ogona mysiego lub 40 mg liścia pomidora Objętości odczynników można indywidualnie dostosowywać do ilości badanego materiału 60 min V M 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

7 O C Z YS ZCZA NIE Wizard SV Genomic DNA Purification System Kultury komórkowe o zawartości do komórek Szybka, łatwa i wysoce wydajna metoda na bazie membrany do izolacji czystego DNA NR KATALOG. A2360 A2361 min 20 µg M Średnia wydajność (µg) 45 CENA K ATALOGOWA 4 Oczyszczanie DNA z zł 510, 5 50 szt. Oczyszczanie RNA szt. Oczyszczanie bez odwirowywania z zł 2.163, 13 Oczyszczanie automatyczne / System Maxwell KWANTYFIKACJA ORAZ WYKRYWANIE 18 Odpowiednia do komórek, ogona mysiego lub tkanki roślinnej do 20 mg SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold OCZYSZCZANIE ILOŚĆ Kwantyfikacja 19 Wykrywanie 21 PCR 22 Rutynowe reakcje PCR PCR typu hot-start PCR długich sekwencji PCR ze sprawdzaniem poprawności dntp RT-PCR Odwrotne transkryptazy 27 Metoda Systemy dooczyszczenia odwrotnej transkrypcji 28 Oligonukleotydy i startery 29 Wydajność oczyszczania DNA: porównanie systemów Wizard SV i SV 96: średni uzysk genomowego DNA (w µg) z 20 mg próbki ogona mysiego. INHIBITORY RYBONUKLEAZY 30 PCR W CZASIE RZECZYWISTYM 32 Tkanki / skrawki utrwalone w formalinie i zatopione w poszczególnych parafinietechnologii to takie Zastosowania PCR w czasie rzeczywistym proste! PCR w czasie rzeczywistym z użyciem barwnika ReliaPrep FFPE gdna Miniprep System Skrawki tkankowe 5 50 µm Uniwersalna metoda do utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie skrawków tkankowych Nie ma konieczności stosowania szkodliwych dla zdrowia rozpuszczalników ani prowadzenia całonocnego trawienia Minimalny nakład czasu do przeprowadzenia procedury (krótki czas pracy i niewiele etapów wykonywanych ręcznie) Zoptymalizowana liza odwraca modyfikacje, które zachodzą podczas utrwalania Rezultat: niezdegradowane, zdolne do namnażania DNA 2,5 h V M NR KATALOG. A2351 A2352 PCR w czasie rzeczywistym z użyciem sond 34 ILOŚĆ SYSTEMY 10KLONOWANIA szt. Klonowanie produktów PCR 100 szt. System klonowania Flexi Biblioteka cdna Interferencja RNA MARKERY CENA K ATALOGOWA z zł 360, zzł 1.422, Markery DNA z serii BenchTop 43 Równoodstępowe drabinki DNA 44 Drabinki DNA 45 Konwencjonalne markery DNA 46 Markery RNA 47 ENZYMY RESTRYKCYJNE 48 ENZYMY MODYFIKOWANE Fosfatazy alkaliczne Polimerazy Ligazy Kinazy i systemy znakowania DNA Nukleazy Inne enzymy WEKTORY EKSPRESYJNE Wektory ekspresyjne Flexi 59 Standardowe wektory MCS 61 KOMPETENTNE KOMÓRKI Produkty GE NO M I C E S S E NT I A LS

8 8 OCZYSZCZANIE Krew zawsze odpowiednia postać ReliaPrep Blood gdna Miniprep System Uzyskiwanie ze świeżych lub zamrożonych próbek krwi czystego i niezdegradowanego gdna bez wytrącania etanolem Zestaw odczynników gotowych do użycia Wysoka wydajność i czystość w eluacie o objętości zaledwie 50 μl Lepsze wyniki A260 / A230 w porównaniu z konwencjonalnymi systemami oczyszczania 200 µl <30 min 20 µg M Uzysk gdna (µg) A szt. zł 980, A szt. zł 2.154, { { frisch(4ºc) gefroren MA Ausbeute A 260 /A 280 A 260 /A 230 Oczyszczanie z systemem ReliaPrep umożliwia wydajne uzyskiwanie dużego stężenia genomowego DNA: próbki krwi można zastosować bezpośrednio lub po 3 cyklach zamrażania i rozmrażania. Wizard Genomic DNA Purification Kit Łatwa metoda izolacji DNA z roztworu, użyteczna przy badaniu białych ciałek krwi, komórek ssaków, tkanek zwierzęcych i roślinnych, drożdży, bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych Objętości odczynników można indywidualnie dostosowywać do ilości badanego materiału. 50 µl 10 ml NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATALOGOWA A oczyszczeń 300 µl zł 837, A oczyszczeń 300 µl zł 1.842, A oczyszczeń 10 ml zł 4.586, 60 min V M ReliaPrep HT gdna Isolation System W pełni automatyczna izolacja DNA z próbek krwi o objętości wejściowej w zakresie 1 ml 10 ml (możliwość jednoczesnej pracy z próbkami o różnej objętości) Izolacja DNA z frakcji białych krwinek po odwirowaniu próbki krwi, z osadu komórkowego i z innych typów próbek Od 1 do 32 osobnych próbek Kompletny system ze stacją roboczą Freedom EVO HSM Workstation powstał przy współpracy z firmą Tecan Kompletny system obejmuje platformę zautomatyzowaną i odczynniki. Ceny i zamówienia Freedom EVO HSM Workstation 4 h µg A Film o produkcie 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

9 OCZYSZCZANIE 9 Fragmenty z żelu i po reakcji PCR Wizard SV Gel and PCR Clean-Up System Wyekstrahowane i oczyszczone fragmenty DNA o wielkości od 100 bp do 10 kb ze standardowego żelu agarozowego lub żelu agarozowego o niskiej temperaturze topnienia System jest ponadto odpowiedni do bezpośredniego oczyszczania produktów reakcji PCR i trawienia enzymami restrykcyjnymi uzyskuje się wskaźnik odzyskiwania na poziomie 95% i wiązanie do 40 μg DNA DNA może następnie zostać wykorzystane w takich technikach, jak zautomatyzowane sekwencjonowanie fluorescencyjne, klonowanie, wyznakowywanie lub transkrypcja/translacja in vitro, bezpośrednio bez dalszego przetwarzania Do 300 mg fragmentów żelu agarozowego lub do 1 ml reakcji enzymatycznej SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold 15 min 95% M A szt. zł 383, A szt. zł 1.692, A szt. zł 5.750, WIELKOŚĆ FRAGMENTÓW ODZYSK 55 bp 26% 70 bp 39% 85 bp 55% 100 bp 84% 500 bp 89% 1000 bp 92% 3199 bp 95% 9416 bp 95% bp 47% Wizard SV 96 PCR Clean-Up System Wysokoprzepustowa izolacja produktów reakcji PCR o długości od 100 bp do 10 kb Oddzielanie nukleotydów, starterów i dimerów starterów z wydajnością ponad 90% Oczyszczone DNA może następnie zostać wykorzystane w takich technikach, jak zautomatyzowane sekwencjonowanie fluorescencyjne, klonowanie, wyznakowywanie, trawienie enzymami restrykcyjnymi lub analiza mikromacierzowa, bezpośrednio bez dalszego przetwarzania A szt. zł 599, A szt. zł 2.010, A szt. zł 3.625, A szt. zł , Dostępne są protokoły automatycznego oczyszczania na aparatach firm Beckman Coulter, Eppendorf, PerkinElmer i Tecan Reakcje PCR do 2 ml SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold 20 min 90% M Wizard MagneSil Sequencing Reaction Clean-Up System Wysokoprzepustowy system oczyszczania produktów reakcji sekwencjonowania, również przy stosowaniu zestawu BigDye Terminator A szt. zł 1.777, A szt. zł 3.366, A szt. zł 38.6, Oczyszczanie przebiega z udziałem cząstek MagneSil GREEN Paramagnetic Particles na niepowlekanych, standardowych 96-dołkowych płytkach do amplifikacji Nie wymaga działań ze strony użytkownika do momentu, gdy próbka jest gotowa do umieszczenia w aparacie do sekwencjonowania Dostępne są protokoły automatycznego oczyszczania na aparatach firm Beckman Coulter, Eppendorf, PerkinElmer i Tecan 2 µl mieszaniny reakcyjnej do sekwencjonowania min 650 par zasad A DNA Analysis Notebook Wprowadzenie do różnych technik laboratoryjnych analizy DNA, w tym oczyszczania genomowego DNA, oczyszczania produktów reakcji PCR i klonowania. Przejrzysty, napisany w dostępny sposób poradnik.

10 10 OCZYSZCZANIE Oczyszczanie RNA Komórki, tkanki, rośliny do każdego z zastosowań! ReliaPrep RNA Miniprep Systeme Jedyna w swoim rodzaju kolumna ze złożem wiążącym RNA, bardzo wydajna, nawet w przypadku niewielkich ilości materiału wyjściowego Wyizolowane RNA można uzyskać przy mniej niż 15 μl eluentu Obróbka DNazą następuje bezpośrednio na membranie minikolumny w ten sposób można wydajnie oddzielać substancje, które zaburzają końcowe wyniki doświadczeń Bez konieczności prowadzenia ekstrakcji z użyciem fenolu i chloroformu lub wytrącania etanolem Zaleta: uzyskuje się czyste, całkowite RNA, odpowiednie do bezpośredniego użycia w różnych wymagających zastosowaniach bez potrzeby dalszego zatężania ReliaPrep RNA Cell Miniprep System Od 100 do komórek ssaków min 0,5 ng 1,34 µg M Z szt. zł 247, Z szt. zł 1.062, Z szt. zł 4.248, ReliaPrep RNA Tissue Miniprep System Od 0,25 do 20 mg tkanki min 30 µg M Z szt. zł 247, Z szt. zł 1.062, Z szt. zł 4.248, SV Total RNA Isolation System Szybka i łatwa preparatyka niezdegradowanego, całkowitego RNA z tkanek, komórek lub białych ciałek krwi Obróbka DNazą w minikolumnach membranowych ogranicza zanieczyszczenia genomowym DNA, które zakłócałyby wyniki późniejszych reakcji PCR Z szt. zł 247, Z szt. zł 906, Z szt. zł 3.728, Bez konieczności prowadzenia ekstrakcji z użyciem fenolu i chloroformu lub wytrącania etanolem Szczególna zaleta: brak opóźnień spowodowanych koniecznością obróbki wyizolowanego RNA DNazą SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym W przypadku komórek: do komórek ssaczych W przypadku tkanek: do mg SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold 60 min 0,27 5,3 µg/mg M Analiza czystości RNA po oczyszczeniu z użyciem zestawu SV Total RNA: izolaty RNA z wątroby myszy zostały poddane odwrotnej transkrypcji, amplifikacji i analizie w żelu agarozowym. W przeciwieństwie do konkurencyjnego produktu (ścieżki 7 12) system SV Total RNA (ścieżki 1 6) umożliwił uzyskanie próbki bez zanieczyszczeń genomowym DNA (widoczne jako paski odpowiadające 1123 bp) przy uzyskaniu porównywalnej wydajności. Ścieżka C: kontrola dodatnia. 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

11 OCZYSZCZANIE 11 SV 96 Total RNA Isolation System Wysokoprzepustowa technika ze specjalnym urządzeniem próżniowym zapobiega częstemu zmienianiu końcówek, co ogranicza stosowanie jednorazowych materiałów z tworzyw sztucznych Z szt. zł 1.101, Z szt. zł 5.228, Nowy projekt płytek zapobiega zanieczyszczeniom krzyżowym DNaza wyraźnie zmniejsza ryzyko zanieczyszczenia genomowym DNA Szczególna zaleta: brak konieczności prowadzenia ekstrakcji z użyciem fenolu i chloroformu lub wytrącania etanolem W przypadku komórek: do komórek ssaczych W przypadku tkanek: do mg SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym, np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold <1 h 0, 0,44 µg / 10 5 komórek M/A MagneSil Total RNA Mini-Isolation System Wysokoprzepustowy format 96/384-dołkowy, który umożliwia szybką i łatwą preparatykę niezdegradowanego, całkowitego RNA z komórek, lizatów tkankowych lub świeżo pobranych próbek krwi Z szt. zł 3.941, Protokół umożliwia automatyczne, wysokoprzepustowe oczyszczanie z użyciem szerokiej gamy stacji do obróbki płynów Brak konieczności filtrowania próżniowego, odwirowywania lub wytrącania Niewielkie objętości eluatu: zaledwie 15 μl tj. stężone RNA do takich zastosowań, jak RT-PCR lub RT-PCR w czasie rzeczywistym W przypadku tkanek: do 2 mg lizatu tkankowego w 100 µl W przypadku komórek: do komórek 30 min 2 µg / 10 5 komórek A PureYield RNA Midiprep System Niezdegradowane, czyste RNA z niemal każdej próbki odpowiednie do wielu różnych zastosowań, w tym RT-PCR Z szt. zł 455, Z szt. zł 2.016, Nowo opracowany bufor umożliwia szybkie oczyszczanie bez użycia DNazy i bez pozostawiania wykrywalnych zanieczyszczeń genomowym DNA Brak konieczności stosowania rozpuszczalników organicznych, trawienia proteazami czy wytrącania alkoholem Opracowany do stosowania z wirówkami lub urządzeniami próżniowymi (np. Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold 3 strona 13) Tkanka liścia do 300 mg <2 h 0, 0,44 µg / 10 5 komórek M

12 12 OCZYSZCZANIE Tkanki / skrawki utrwalone w formalinie i zatopione w parafinie to takie proste! ReliaPrep FFPE Total RNA Miniprep System Uniwersalna metoda do utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie skrawków tkankowych. Nie ma konieczności stosowania szkodliwych dla zdrowia rozpuszczalników ani całonocnego trawienia Całkowite RNA z utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie tkanek można szybko wyizolować przy krótkim czasie poświęconym na pracę Wynik: niezdegradowane, odpowiednie do amplifikacji RNA o wysokiej jakości Skrawki tkankowe 5 50 µg 90 min V M Z reakcji zł 494, Z reakcji zł 2.623, Całkowite RNA jest izolowane z następujących po sobie skrawków wątroby mysiej o grubości 10 µm, utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie, a następnie badane z użyciem aparatu Agilent Bioanalyzer. Dzięki systemowi ReliaPrep FFPE Total RNA Miniprep System można wyizolować dłuższe fragmenty RNA, niż z użyciem konkurencyjnych zestawów. Krew zawsze odpowiednia postać! SV Total RNA Isolation System Szybka i łatwa preparatyka niezdegradowanego, całkowitego RNA z tkanek, komórek lub białych ciałek krwi Obróbka DNazą w minikolumnach membranowych ogranicza zanieczyszczenia genomowym DNA, które zakłócałyby wyniki reakcji PCR Z szt. zł 247, Z szt. zł 906, Z szt. zł 3.728, Bez konieczności prowadzenia ekstrakcji z użyciem fenolu i chloroformu lub wytrącania etanolem Szczególna zaleta: brak opóźnień spowodowanych koniecznością obróbki preparatu RNA DNazą SV = do stosowania z mikrowirówkami (w protokole wirowania) lub w protokole próżniowym 100 µl krwi 60 min 0,27 5,3 µg /mg M MagneSil Total RNA Mini-Isolation System Wysokoprzepustowy format 96/384-dołkowy, który umożliwia szybką i łatwą preparatykę niezdegradowanego, całkowitego RNA z komórek ssaków, lizatów tkankowych lub świeżo pobranych próbek krwi Z szt. zł 3.941, Protokół umożliwia automatyczne, wysokoprzepustowe oczyszczanie z użyciem szerokiej gamy stacji do obróbki płynów Brak konieczności filtrowania próżniowego, odwirowywania lub wytrącania Niewielkie objętości eluatu: zaledwie 15 μl tj. stężone RNA do zastosowań, takich jak RT-PCR lub RT-PCR w czasie rzeczywistym Do 20 µl krwi 30 min 2 µg / 10 5 komórek A RNA Analysis Notebook Wprowadzenie do różnych technik laboratoryjnych analizy RNA, w tym: oczyszczania RNA, amplifikacji w technice RT-PCR, wytarzania RNA in vitro i analizy mikromacierzowej RNA min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

13 OCZYSZCZANIE 13 Oczyszczanie bez wirowania stanowisko pracy z próżnią Stacja próżniowa Vac-Man Dzięki podciśnieniu praca idzie jak z płatka: korzystając ze stacji próżniowej Vac-Man i pompy próżniowej można błyskawicznie oczyszczać kwasy nukleinowe przy użyciu podciśnienia. Zalety w porównaniu ze stosowanymi zwykle protokołami obejmującymi wirowanie: Szybsze uzyskiwanie DNA i RNA Do 20 oczyszczeń prowadzonych równolegle Brak konieczności czekania na koniec wirowania Dzięki pompie próżniowej Uzyskuje się podciśnienie i utrzymuje jego stałą wartość Nie marnuje się wody Pakiet startowy do oczyszczania obejmuje: Odczynniki do oczyszczania Vac-Man (stacja próżniowa) Vakuum-Eluator (w zależności od pakietu do oczyszczania) Pompę próżniową o wartości 500 dodajemy gratis Aby ułatwić rozpoczęcie stosowania protokołów próżniowych do oczyszczania firma Promega oferuje atrakcyjne pakiety startowe. Można w ten sposób otrzymać wartą 500 pompę próżniową gratis Pakiety do oczyszczania plazmidowego PAKIET STARTOWY DO OCZYSZCZANIA Pure Yield Minipreps ZAWARTOŚĆ PAKIETU NR KATALOG. CENA KATALOGOWA 750 szt. (3 A1222) + Vac-Man (A7231) + pompa próżniowa gratis! A6812 zł 4.730, PureYield Midipreps 100 szt. (1 A2495) + Vac-Man (A7231) + 4 Eluatoren (1 A1071) + pompa próżniowa gratis! A6742 zł 3.859, PureYield Maxipreps 50 szt. (1 A2393) + Vac-Man (A7231) + 4 Eluatoren (1 A1071) + pompa próżniowa gratis! A6732 zł 4.254, Wizard Plus SV Minipreps 750 szt. (3 A1470) + Vac-Man (A7231) + odpowiedni adapter (A11) + pompa próżniowa gratis! A6762 zł 4.837,

14 14 OCZYSZCZANIE Pakiety do oczyszczania genomowego DNA PAKIET STARTOWY DO OCZYSZCZANIA Wizard SV Genomic DNA Purification System ZAWARTOŚĆ PAKIETU NR KATALOG. CENA KATALOGOWA 500 szt. (2 A2361) + Vac-Man (A7231) + odpowiedni adapter (A11) + pompa próżniowa gratis! A6772 zł 5.258, Wizard SV 96 Genomic 4 96 szt. (1 A2371) + Vac-Man 96 (A2291) + pompa próżniowa gratis! A6782 zł 5.688, Pakiety do oczyszczania fragmentów DNA PAKIET STARTOWY DO OCZYSZCZANIA Wizard SV Gel and PCR Clean- -Up System ZAWARTOŚĆ PAKIETU NR KATALOG. CENA KATALOGOWA 500 szt.(1 A9282) + Vac-Man (A7231) + odpowiedni adapter (A11) + pompa próżniowa gratis! A6752 zł 4.203, Wizard SV 96 PCR Clean-Up 8 96 szt. (A9342) + Vac-Man 96 (A2291) + pompa próżniowa gratis! A6792 zł 5.729, Pakiety do oczyszczania RNA PAKIET STARTOWY DO OCZYSZCZANIA SV Total RNA Isolation System ZAWARTOŚĆ PAKIETU NR KATALOG. CENA KATALOGOWA 250 szt. (1 Z3105) + Vac-Man (A7231) + odpowiedni adapter (A11) + pompa próżniowa gratis! Z82 zł 4.469, PureYield RNA Midipreps 100 szt. (2 Z3741) + Vac-Man (A7231) + 4 Eluatoren (1 A1071) + pompa próżniowa gratis! Z72 zł 5.241, Vac-Man Laboratory Vacuum Manifold, 20sample-capacity A sztuka zł 744, Vac-Man 96 Vacuum Manifold A sztuka zł 2.104, One-Way Luer-Lok Stopcocks A sztuk zł 157, 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

15 OCZYSZCZANIE 15 Vakuum-Eluator Vakuum-Eluator sprawia, że ostatni etap wirowania nie jest już potrzebny do uzyskania preparatu. Teraz można wszystkie etapy pracy wykonać bezpośrednio na stole laboratoryjnym. Oto jak działa Eluator! Wysoka wydajność: 20% więcej plazmidów w eluacie dzięki zmniejszeniu martwej objętości Praktyczność: mniej etapów pipetowania dzięki elucji bezpośrednio do próbówki Eppendorfa Szybkość: elucja w mniej niż 1 minutę Eluator Vacuum Elution Device A sztuki zł 557, Elucja przy użyciu wirówki Eluator Uzysk w µg 500 System Eluator zapewnia większą szybkość i wydajność Do oczyszczania z systemem próżniowym Eluator przeznaczone są następujące zestawy: PureYield Plasmid Midiprep System Strona 5 PureYield Plasmid Maxiprep System Strona 5 PureYield RNA Midiprep System Strona Objętość eluatu w µl Rys.: Oczyszczanie w systemie PureYield Plasmid Midiprep: przy różnych objętościach elucji mierzono wydajność obu metod i porównywano je. Wydajność metody z użyciem systemu Eluator jest wyraźnie wyższa w porównaniu z metodą obejmującą wirowanie dla każdej zmierzonej objętości.

16 16 OCZYSZCZANIE Oczyszczanie automatyczne z systemem Maxwell 16 Izolacja i oczyszczanie automatyczne DNA i RNA z różnych próbek z odtwarzalnymi wynikami i wysoką wydajnością. Szybie, pewne i przyjazne użytkownikowi metody oczyszczania kwasów nukleinowych dla każdego laboratorium. Urządzenie Maxwell 16 jest kompaktowe, zajmuje podobną powierzchnię co laptop i łatwo wpasuje się do każdego laboratorium. System Maxwell 16 korzysta z techniki oczyszczania bazującej na cząstkach paramagnetycznych w zapełnianych fabrycznie jednorazowych kartuszach. Fabrycznie zainstalowane protokoły i ekran dotykowy sprawiają, że system jest przyjazny użytkownikowi Szybkość: 1 do 16 próbek w ok. 30 minut Niezawodność: zawsze taka sama wydajność pracy Bezpieczeństwo: brak zanieczyszczeń krzyżowych Wszechstronność: automatyczna homogenizacja próbek stałych, np. tkanek lub kału Przy stosowaniu urządzenia Maxwell dostępna jest szeroka gama zoptymalizowanych zestawów do ekstrakcji z różnego rodzaju próbek: tkanek, krwi, preparatów utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie, wirusów, roślin, kultur komórkowych, kału, wymazów i innych próbek biologicznych, kryminalistycznych lub medycznych. Istnieje wiele przetestowanych protokołów pracy dostosowanych do różnych materiałów wyjściowych i odpowiadających im parametrom. Przykłady: Całkowite kwasy nukleinowe z osocza RNA z tkanek lub komórek Wirusowe kwasy nukleinowe z próbek kału DNA z krwi w diagnostyce zakażeń DNA z wymazów do typowania HLA DNA lub RNA z utrwalonych w formalinie, zatopionych w parafinie tkanek DNA z próbek kryminalistycznych DNA zbóż do wykrywania GMO Maxwell 16 Geräte NR KATALOG. ZESTAW OPIS KOMENTARZ AS2000 Aparat Maxwell 16 Standardowe urządzenie Maxwell Do wszystkich zestawów z wyjątkiem zestawów do diagnostyki in vitro AS3000 Maxwell MDx Urządzenie do diagnostyki i wielu innych zastosowań AS3050 Maxwell 16 MDx (CE- IVD) Urządzenie z certyfikatem CE do diagnostyki in vitro AS3060 Aparat Maxwell 16 Forensic Urządzenie do zastosowań w kryminalistyce Do wszystkich zestawów z wyjątkiem zestawów do diagnostyki in vitro Z systemem rejestrowania kodów kreskowych, ekranem dotykowym i lampą UV Do wszystkich zestawów Z systemem rejestrowania kodów kreskowych, ekranem dotykowym i lampą UV CE IVD Specjalnie przystosowane do zadań kryminalistycznych Z systemem rejestrowania kodów kreskowych, ekranem dotykowym i lampą UV 30 min Czas obróbki 1 mg Wydajność *z=zmienna A/M Format Automatyczny / ręczny

17 O C Z YS ZCZA NIE OCZYSZCZANIE 4 Dzięki systemowi Maxwell 16 izolacja DNA i/lub RNA ze skrawków utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafioczyszczanie DNA 5 nie (FFPE) staje się niezwykle prosta. Oczyszczanie RNA 10 Oczyszczanie bez odwirowywania 13 Oczyszczanie automatyczne / System Maxwell KWANTYFIKACJA ORAZ WYKRYWANIE 18 Kwantyfikacja 19 Wykrywanie 21 PCR 22 Rutynowe reakcje PCR PCR typu hot-start PCR długich sekwencji PCR ze sprawdzaniem poprawności dntp RT-PCR Odwrotne transkryptazy 27 Systemy do odwrotnej transkrypcji 28 Oligonukleotydy i startery 29 INHIBITORY RYBONUKLEAZY Oszczędność czasu i pieniędzy Oszczędność PCRprzestrzeni W CZASIE RZECZYWISTYM 32 Zastosowania poszczególnych technologii PCR w czasie rzeczywistym PCR w czasie rzeczywistym z użyciem barwnika PCR w czasie rzeczywistym z użyciem sond 34 kolumna (ręcznie) SYSTEMY KLONOWANIA Klonowanie produktów PCR System klonowania Flexi Biblioteka cdna Interferencja RNA koszt czas koszt czas % udział -50 %* l 30 kartusz (automatycznie) * koszt całkowity = cena + czas pracy MARKERY Markery DNA z serii BenchTop Nieduże urządzenie stołowe wielkości laptopa 43 Równoodstępowe drabinki DNA 44 Drabinki DNA 45 Konwencjonalne markery DNA 46 Markery RNA 47 ENZYMY RESTRYKCYJNE Zestawy Maxwell ENZYMY MODYFIKOWANE NR KATALOG. ZESTAW AS1010 Maxwell 16 Blood DNA Purification Kit AS1020 Maxwell 16 Cell DNA Purification Kit AS1030 Maxwell 16 Tissue DNA Purification Kit AS1050 Maxwell 16 Total RNA Purification Kit AS1220 Maxwell 16 Tissue LEV Total RNA Purification Kit AS1225 Maxwell 16 Cell LEV Total RNA Purification Kit AS1150 Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification Kit Fosfatazy alkaliczne Polimerazy Ligazy Kinazy i systemy znakowania DNA Nukleazy Inne enzymy WEKTORY EKSPRESYJNE 54 ILOŚĆ szt szt szt szt szt. 58 Wektory ekspresyjne Flexi 48 szt. 59 Standardowe wektory MCS szt. KOMPETENTNE KOMÓRKI 48 szt. 62 AS1290 Maxwell 16 LEV Blood DNA Kit AS1140 Maxwell 16 Cell LEV DNA Purification Kit 48 szt. AS1270 Maxwell 16 LEV simplyrna Cells Kit 48 szt. AS1280 Maxwell 16 LEV simplyrna Tissue Kit 48 szt. AS1135 Maxwell 16 LEV FFPE Plus LEV DNA Purification Kit 48 szt. AS1260 Maxwell 16 LEV RNA FFPE Kit 48 szt. AS1015 Maxwell 16 Clinical Blood DNA Purification Kit, CE IVD 48 szt. AS1155 Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification Kit, CE IVD 48 szt. AS1240 Maxwell 16 DNA IQ Casework Pro Kit 48 szt. Produkty GE NO M I C E S S E NT I A LS

18 18 KWANTYFIKACJA I WYKRYWANIE KWANTYFIKACJA I WYKRYWANIE Wiarygodna kwantyfikacja kwasów nukleinowych na poziomie pikogramów Kwantyfikacji DNA i RNA nie należy pozostawiać przypadkowi. Dzięki produktom Genomic Essentials można określić z dokładnością do pikograma ilości potrzebne do przeprowadzenia doświadczeń, uzyskując wiarygodne wyniki. Fluorescencyjne kwantyfikacje DNA i RNA wykazują znacząco większą czułość od metod opartych na pomiarze absorbancji. Produkty QuantiFluor zawierają szeroką gamę różnych barwników, które wiążą się swoiście z jedno- lub dwuniciowymi kwasami nukleinowymi i w ten sposób umożliwiają dokładniejsze oznaczenie w porównaniu z pomiarem absorbancji przy 260 nm. Z tego powodu metody kwantyfikacji oparte na pomiarze fluorescencji są szczególnie użyteczne przy przygotowywaniu próbek do zastosowań w biologii molekularnej, szczególnie w sekwencjonowaniu nowej generacji. Barwniki można stosować z czytnikiem płytek mikrotitracyjnych lub fluorymetrem jednoprobówkowym, jak na przykład Quantus firmy Promega.

19 KWANTYFIKACJA I WYKRYWANIE 19 Kwantyfikacja Kompletny pakiet do kwantyfikacji kwasów nukleinowych Fluorymetr Quantus i system QuantiFluor Dye doskonale współgrają ze sobą i są przeznaczone do czułej kwantyfikacji jedno- lub dwuniciowego DNA lub RNA. Urządzenie jest kompatybilne z innymi zestawami do kwantyfikacji bazującymi na pomiarze fluorescencji. Dzięki darmowemu oprogramowaniu Quantus można przesyłać dane w czasie rzeczywistym: wystarczy podłączyć urządzenie do komputera. Stosując fluorymetry Quantus z barwnikami QuantiFluor można uzyskać nawet razy większą czułość w porównaniu z metodami bazującymi na pomiarze absorbancji. Przy wyższej czułości i szerokim linearnym zakresie pomiarowym system Quantus idealnie nadaje się do próbek z małą ilością DNA lub RNA, np. tkanek utrwalonych w formalinie i zatopionych w parafinie (skrawków FFPE), jak również próbek do sekwencjonowania nowej generacji. Barwniki QuantiFluor można też stosować z innymi fluorymetrami, np. Qubit 2.0 lub GloMax Multi-Mode Reader. 50pg /ml TIMES 10 MORE Sensitive pg /ml Detection Limit 500pg /ml 40,000 TIMES MORE Sensitive dsdna Concentration (ng/ml) 2µg/ml Quantus Fluorometer QuantiFluor -ST Fluorometer Qubit 2.0 Fluorometer * NanoDrop 2000 Spectrophotometer ** * Qubit jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Life Technologies ** NanoDrop jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy NanoDrop Technologies Ogólne informacje na temat aparatu GloMax Multi-Mode Reader: MC Fluorymetr Quantus Długości fal: Filtr ekstynkcji: czerwony, 640 nm Shortpass, niebieski, 495 nm Shortpass Filtr emisji: czerwony, nm, niebieski, nm E sztuka zł 6.719,

20 20 KWANTYFIKACJA I WYKRYWANIE QuantiFluor One dsdna Dye Zakres wykrywalności i czułość: E ml zł 251, Próbka*: 0,2 400 ng /µl Oznaczenie: ng /ml QuantiFluor dsdna System Zakres wykrywalności i czułość: E ml zł 975, Próbka*: 0,1 200 ng / µl Oznaczenie: 0, ng / ml QuantiFluor ssdna System Zakres wykrywalności i czułość: E ml zł 1.240, Próbka*: 0,2 400 ng / µl Oznaczenie: ng / ml QuantiFluor RNA System Zakres wykrywalności i czułość: E10 1 ml zł 1.192, Próbka*: 0,1 500 ng / µl Oznaczenie: 0, ng / ml * Na podstawie wyników dla próbki 1 µl NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Analiza danych z systemów QuantiFluor Dye Analiza danych z systemów QuantiFluor Dye jest łatwa i wygodna dzięki arkuszom kalkulacyjnym Excel. Arkusz kalkulacyjny zawiera format płytki, aby sporządzać plan doświadczenia lub wprowadzać wyniki pojedynczych pomiarów, jak również przeprowadzać analizę wyników uzyskanych z zastosowaniem barwników fluorescencyjnych QuantiFluor ONE, QuantiFluor dsdna, ssdna lub RNA Dye. -analysis Wprowadzanie i ocena wyników pomiarów w formacie 96-dołkowym Wyliczanie stężenia wyjściowego Sprawdzanie wiarygodności wyników poprzez odnoszenie zmierzonych wartości stężenia do krzywej wzorcowej Wybór pomiędzy pomiarami prostymi i wykonywanymi w trzech powtórzeniach

21 KWANTYFIKACJA I WYKRYWANIE 21 Wykrywanie Diamond Nucleic Acid Dye Barwnik fluorescencyjny o dużej czułości, który wiąże się z jedno- lub dwuniciowym DNA i RNA Wykrywanie minimalnych ilości kwasów nukleinowych Do wybarwiania i wizualizacji kwasów nukleinowych w żelu H µl zł 368, Odpowiedni do stosowania zarówno w żelu agarozowym, jak i poliakrylamidowym Znacząco mniejsze działanie mutagenne od bromku etydyny (poziom bezpieczeństwa porównywalny z barwnikiem SYBR Safe*) Stabilność w temperaturze pokojowej * SYBR jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Molecular Probes Barwienie DNA barwnikiem Diamond Nucleic Acid Dye w 1,2% żelu E-gel **: w pierwszej ścieżce znajduje się 10 µl markera 1 kb DNA BenchTop typu drabinka (G7541). Przy serii rozcieńczeń w ścieżkach 2 12 stosowano każdorazowo połowę ilości z poprzedniej ścieżki z barwnikiem 1X Blue/Orange Loading Dye (G1881). Po elektroforezie inkubowano żel przez 20 minut w barwniku Diamond Nucleic Acid Dye. Prążki w żelu uwidoczniono w systemie Molecular Imager Gel Doc XR+ z oprogramowaniem Image Lab *** i aplikacją SYBR Gold TA ** E-gel jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Life Technologies *** Molecular Imager Gel Doc XR+ i Lab Software są zastrzeżonymi znakami towarowymi firmy Bio-Rad

22 22 PCR PCR Bezkonkurencyjne wyniki, odtwarzalne w każdych warunkach: dzięki produktom z serii GoTaq firmy Promega. Odczynniki PCR firmy Promega zapewniają optymalne wyniki w szerokim spektrum zastosowań. Stosuje się je np. w identyfikacji genetycznej, w ramach zapewnienia jakości w przedsiębiorstwach przemysłowych oraz w diagnostyce. Polimerazy DNA GoTaq G2 są dostępne we wszystkich powszechnie stosowanych formach: jako pojedynczy enzym, w postaci mieszaniny Master Mix i w wersji spersonalizowanej, w której można dowolnie dobierać stężenie MgCl2, lub jako kompletny bufor reakcyjny. Do każdej polimerazy dodawany jest bufor bezbarwny i bufor zielony. Zielony bufor służy jako kontrola przebiegu elektroforezy i przy jego stosowaniu produkty reakcji PCR można przenosić bezpośrednio na żel. Przy zastosowaniach, które wymagają pomiaru absorbancji lub fluorescencji produktów reakcji PCR przed oczyszczeniem, należy stosować bufor bezbarwny. Zakupy bez ryzyka z gwarantowaną satysfakcją podczas przeprowadzania reakcji PCR! Jeśli nie będą Państwo zadowoleni z naszych produktów do PCR, zwrócimy Państwu pieniądze!

23 PCR 23 Rutynowy PCR GoTaq G2 DNA Polymerase Zawsze wysoka wydajność, niezależnie od sekwencji docelowej Amplifikacja najmniejszych ilości DNA dzięki dużej czułości Stężenie MgCl 2 : 1,5 mm M U zł 166, M U zł 676, M U (5 500 U) zł 2.873, GoTaq G2 Flexi DNA Polymerase Zawsze wysoka wydajność, niezależnie od sekwencji docelowej Amplifikacja najmniejszych ilości DNA dzięki dużej czułości Stężenie MgCl 2 można dopasować indywidualnie M U zł 166, M U zł 676, M U (5 500 U) zł 2.873, M U ( U) zł 5.517, GoTaq G2 Green Master Mix Gotowa do użycia mieszanina zawierająca polimerazę DNA GoTaq G2, dntp i bufor reakcyjny M reakcji zł 2, M reakcji zł 2.601, Marker barwny w buforze do bezpośredniej kontroli w żelu GoTaq G2 Colorless Master Mix Gotowa do użycia mieszanina zawierająca polimerazę DNA GoTaq G2, dntp i bufor reakcyjny M reakcji zł 2, M reakcji zł 2.601, Bezbarwny bufor reakcyjny NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW BioMath Calculators Szybkie wyliczanie temperatury topnienia, molarności, rozcieńczenia, stężenia DNA lub białka oraz wiele innych możliwości.

24 24 PCR PCR typu hot-start GoTaq G2 Hot Start Polymerase Większa procesywność, czułość i swoistość Konfiguracja w temperaturze pokojowej Stężenie MgCl 2 można dopasować indywidualnie M U zł 213, M U zł 965, M U (5 500 U) zł 4.174, M U ( U) zł , GoTaq G2 Hot Start Green Master Mix Gotowa do użycia mieszanina zawierająca polimerazę GoTaq G2 Hot Start Polymerase, dntp i bufor reakcyjny o optymalnym stężeniu MgCl 2 M reakcji zł 344, M reakcji zł 2.724, Marker barwny w buforze do bezpośredniej kontroli w żelu GoTaq G2 Hot Start Colorless Master Mix Gotowa do użycia mieszanina zawierająca polimerazę GoTaq G2 Hot Start Polymerase, dntp i bufor reakcyjny o optymalnym stężeniu MgCl 2 M reakcji zł 344, M reakcji zł 2.724, Bezbarwny bufor reakcyjny PCR długich sekwencji GoTaq Long PCR Master Mix Amplifikacja sekwencji ludzkiego DNA genomowego o długości do 30 kb lub mniej złożonych sekwencji matrycowych o długości do 40 kb, np. DNA faga Lambda M reakcji zł 802, Gotowa do użycia mieszanina zawierająca polimerazę GoTaq G2 Hot Start i termostabilną polimerazę sprawdzającą poprawność parowania zasad, dntp i MgCl 2 w optymalnym stężeniu PCR ze sprawdzaniem poprawności Pfu DNA Polymerase Aktywność egzonukleazy 3 q 5 (sprawdzanie poprawności) Najwyższy poziom bezbłędności wśród termostabilnych polimeraz DNA M U zł 468, M U zł 1.761, Produkty reakcji PCR z tępymi końcami

25 PCR 25 dntp Zestaw nukleotydów: datp, dctp, dgtp, dttp Osobne pojemniki Mieszaniny poszczególnych nukleotydów dostępne na żądanie Wysoki poziom czystości (<98%) Dostępne również inne zestawy i pojedyncze nukleotydy (patrz Katalog całościowy) U µm (100 mm) zł 2, U µm (100 mm) zł 625, U µm (100 mm) zł 922, U µm (100 mm) zł 4.565, dntp Mix Gotowa do użycia mieszanina nukleotydów: datp, dctp, dgtp i dttp Wysoki poziom czystości (<98%) U µl (10 mm) zł 106, U µl (10 mm) zł 438, PCR Nucleotide Mix Gotowa do użycia mieszanina nukleotydów: datp, dctp, dgtp i dttp Wysoki poziom czystości (<98%) C µl (10 mm) zł 247, C µl (10 mm) zł 941, Swoiste QC Przetestowane do stosowania w reakcji PCR Woda wolna od nukleaz Nuclease-Free Water Brak zawartości inhibitorów: woda nie zawiera chemicznych dodatków i nie była poddawana obróbce chemicznej P ml (2 25 ml) zł 217, P ml zł 574, Gwarantowany brak zawartości nukleaz dzięki ścisłej kontroli jakości Małe opakowania (2 25 ml) zapobiegające zanieczyszczeniom podczas pracy NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Custom PCR Protokoll Tworzenie i zapisywanie protokołów PCR oraz dodawanie do nich komentarzy i wysyłanie ich poprzez . (To narzędzie należy także do aplikacji Promega App, która jest dostępna bezpłatnie poprzez App Store pod systemy Apple i Android).

26 26 RT-PCR RT-PCR Zestaw czy enzym? Zawsze odpowiedni produkt do syntezy cdna lub RT-PCR Od ponad 25 lat Promega wytwarza produkty do syntezy cdna i RT-PCR. Zachęcamy do skorzystania z wieloletniego doświadczenia firmy i przejrzenia naszej uznanej oferty w celu wybrania potrzebnych produktów. Odwrotne transkryptazy i zestawy do RT-PCR umożliwiają łatwą i niezawodną syntezę pełnej długości cdna. Produkty Genomic Essentials są niezawodne w wydajnej transkrypcji mrna, zarówno przy niskim, jak i wysokim poziomie ekspresji również jeśli tworzy on złożone struktury drugorzędowe.

27 RT-PCR 27 Odwrotne transkryptazy AMV Reverse Transcriptase M U zł 386, M U zł 1.032, M-MLV Reverse Transcriptase M U zł 268, M U zł 1.019, M-MLV Reverse Transcriptase RNase H-, Point Mutant M U zł 199, M U zł 720, M U zł 2.666, GoScript Reverse Transcriptase A reakcji zł 1.183, A reakcji zł 4.682, WŁAŚCIWOŚCI AMV Reverse Transcriptase M-MLV Reverse Transcriptase M-MLV Reverse Transcriptase RNase H-, Point Mutant GoScript Reverse Transcriptase TEMPERATURA REAKCJI C C C C AKTYWNOŚĆ RNAZY H występuje niewielka nie występuje niewielka DŁUGOŚĆ cdna do 4 kb do 5 kb do 7,5 kb do 9 kb UŻYTECZNOŚĆ W PRZY PADKU WYSTĘPOWANIA DRUGO RZĘDOWYCH STRUKTUR RNA LICZBA BŁĘDÓW ok. 5 błędów na zasad ok. 1 błędu na zasad ok. 1 błędu na zasad nd. CZUŁOŚĆ GŁÓWNE ZASTOSOWA NIA RT Wydłużanie starterów / RACE RT Wydłużanie starterów / RACE RT Wydłużanie starterów / RACE RT-PCR Wbudowywanie wyznakowanych nukleotydów Wydłużanie starterów / RACE ZALETY Użyteczność przy matrycach z drugorzędowymi strukturami Do cdna o długości do 4 kb Duża procesywność Niska aktywność RNazy H Do cdna o długości do 5 kb Brak aktywności RNazy H Do cdna o długości Niski koszt w przeliczeniu na powyżej 7,5 kb reakcję Użyteczność do 55 C Duża stabilność Duża selektywność Niska aktywność RNazy H Do cdna o długości do 9 kb Optymalne warunki do jednoprobówkowej reakcji RT-PCR w systemie GoScript Reverse Transcription INHIBITORY Aktynomycyna D (50 µg / ml) rrna i trna Glicerol <10% Kompleksy rybonukleozydów z wanadylem (2 mm) Imid kwasu N-etylomaleinowego Nieorganiczne fosforany i pirofosforany Aktynomycyna D (50 µg / ml) Spermidyna Nieorganiczne fosforany i pirofosforany Aktynomycyna D (50 µg / ml) Spermidyna Nieorganiczne fosforany i pirofosforany Aktynomycyna D (50 µg / ml) Spermidyna JEDNOSTKI NA REAKCJĘ U / 25 µl 200 U / 25 µl 200 U / 25 µl 25 µl / reakcję

28 28 RT-PCR Porównanie GoScript Reverse Transcriptase z innymi produktami A B C D Czułość: transkrybuje trudne matryce Wydajność: transkrybuje długie odcinki mrna w całości Wygoda: bezpośrednie wykorzystanie mieszaniny reakcyjnej w qpcr Niezawodność: transkrybuje matryce bogate w GC Czułość odwrotnej transkryptazy GoScript jest większa lub równa czułości innych przetestowanych produktów. GoScript wykazuje na każdym poziomie transkrypcji taką samą lub większą czułość. (Seria rozcieńczeń mysiego RNA w reakcji RT z losowymi starterami) Dane pomiarowe: Szkoła Wyższa w Mannheim, Instytut Biologii Molekularnej i Komórkowej, M. Ammerschläger, P. Kioschis Systemy do odwrotnej transkrypcji Reverse Transcription System NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATALOGOWA A reakcji zł 2.059, GoScript Reverse Transcription System NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATALOGOWA A reakcji zł 1.153, A reakcji zł 2.228, Access RT-PCR System NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATALOGOWA A reakcji zł 546, A reakcji zł 1.912, A reakcji zł 8.119, AccessQuick RT-PCR System NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATALOGOWA A reakcji zł 520, A reakcji zł 2.059, A reakcji zł 8.705,

29 RT-PCR 29 RÓŻNE TYPY REAKCJI PCR POPRZEDZONE ODWROTNĄ TRANSKRYPCJĄ ODWROTNA TRANSKRYPCJA I PCR PROWADZONE JEDNOCZEŚNIE WŁAŚCIWOŚCI Reverse Transcription System GoScript Reverse Transcription System Access RT-PCR System AccessQuick RT-PCR System ZAKRES ZASTOSOWAŃ / WŁAŚCIWOŚCI MATERIA ŁU WYJŚCIOWEGO Liczne / złożone struktury drugorzędowe Więcej niż jedna reakcja PCR po RT Mała liczba kopii mrna Syntetyczny RNA Długie konstrukty Wbudowywanie zmodyfikowanych nukleotydów (wyznakowanych Cy3 / Cy5 do zastosowania w mikromacierzach) RT i PCR w pojedynczej reakcji RT-PCR swoiste genowo Mała liczba kopii mrna Złożone struktury drugorzędowe RT i PCR w pojedynczej reakcji RT-PCR swoiste genowo Mała liczba kopii mrna Złożone struktury drugorzędowe Niewiele etapów wymagających pipetowania SZCZEGÓLNE WŁAŚCI WOŚCI Do trudnych matryc ze strukturami drugorzędowymi Możliwość prowadzenia różnych reakcji PCR Najwyższa czułość Dodatek Taq umożliwia stosowanie w reakcjach jednoetapowych Wykonanie RT i PCR w pojedynczym etapie bez konieczności pipetowania pomiędzy tymi reakcjami Duża czułość Wykonanie RT i PCR w pojedynczym etapie bez konieczności pipetowania pomiędzy tymi reakcjami Składniki przygotowane w formie mieszaniny Master Mix Duża czułość ZALECANY STARTER RT Oligo(dT)15 lub losowe heksamery Oligo(dT)15, losowe heksamery lub startery swoiste genowo Startery swoiste genowo Startery swoiste genowo DOSTARCZONE STARTERY Oligo(dT)15 i losowe heksamery Oligo(dT)15, losowe heksamery i starter kontrolny Starter kontrolny RT-PCR OPTYMALNA TEMPERA TURA REAKCJI AKTYWNOŚĆ RNAZY H DŁUGOŚĆ UZYSKIWANEGO cdna C C C C Do 5 kb Do 9 kb Do 5 kb Do 5 kb CZUŁOŚĆ 1 µg całkowitego RNA lub 1 pg 1 µg poli(a)+ RNA 1 pg-1 µg całkowitego RNA, 10 kopii 1 pg 1 µg całkowitego RNA 1 10 ng poli(a)+ RNA 1 pg 1 µg całkowitego RNA 1 10 ng poli(a)+ RNA MATERIAŁ WYJŚCIOWY Całkowity RNA Poli(A)+ RNA Całkowity RNA Poli(A)+ RNA Syntetyczny RNA Całkowity RNA Poli(A)+ RNA Całkowity RNA Poli(A)+ RNA Oligonukleotydy i startery Oligo(dT)15 Primer Starter do syntezy pierwszej nici cdna z użyciem odwrotnej transkryptazy C μg zł 251, Hybrydyzacja z ogonem poli(a) cząsteczki mrna Random Primers Starter do syntezy pierwszej nici cdna i klonowania C μg zł 156, Woda wolna od nukleaz Nuclease-Free Water Brak zawartości inhibitorów: woda nie zawiera chemicznych dodatków i nie była poddawana obróbce chemicznej P ml (2 25 ml) zł 217, P ml zł 574, Gwarantowany brak zawartości nukleaz dzięki ścisłej kontroli jakości Małe opakowania (2 25 ml) zapobiegające zanieczyszczeniom podczas pracy

30 30 INHIBITORY RYBONUKLEAZY INHIBITORY RYBONUKLEAZY RNasin oryginalny produkt firmy Promega Produkt RNasin był wzmiankowany w ponad 9000 publikacji w ciągu 25 lat, z czego wynika, że jest najczęściej stosowanym inhibitorem RNaz. RNasin chroni RNA przed rozkładem przez Rnazy A, B i C. Promega zapewnia bezpieczną pracę z RNA również w przypadku cennych materiałów wyjściowych. Zaleca się stosowanie RNasin każdorazowo podczas izolacji RNA, RT-PCR, transkrypcji in vitro oraz innych technik pracy z RNA.

31 INHIBITORY RYBONUKLEAZY 31 Czy myślą Państwo o ochronie RNA podczas pracy? Jest to konieczne! Dziewięć próbek wolnych od RNaz buforów i wody z laboratoriów akademickich przetestowano pod kątem zanieczyszczenia RNazami. Próbki były w użyciu przez 1 do 14 miesięcy. Z każdej próbki pobrano 35 µl, podzielono na dwie części i do obu dodano 5 µg RNA oraz 10 X bufor RNase ONE. Do jednej części każdej z próbek dodano 40 U RNasin i inkubowano wszystkie przez noc w 37 C. Ścieżka 1: marker, ścieżka 2: kontrola RNA, ścieżki 3 11: próbki z laboratoriów. Szczegółowy opis doświadczenia: 9,0 kb 5,0 kb 3,0 kb 1,5 kb 1,0 kb 0,5 kb 9,0 kb 5,0 kb 3,0 kb Bez dodatku RNasin Z dodatkiem RNasin ,5 kb 1,0 kb 0,5 kb Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor Inhibitor RNaz A, B i C oraz ludzkiej RNazy łożyskowej Nie stanowi inhibitora innych RNaz ani zmodyfikowanych enzymów, w tym odwrotnych transkryptaz N U zł 434, N U zł 1.175, Zwiększa wydajność ekstrakcji RNA oraz poprawia skuteczność reakcji RT-PCR, syntezy cdna, technik mikromacierzowych oraz transkrypcji / translacji in vitro RNasin Plus RNase Inhibitor Wypróbowane właściwości produktu Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor N U zł 607, N U zł 1.444, Większa stabilność w środowisku utleniającym i w wysokiej temperaturze, co zwiększa ogólną stabilność i wydłuża czas użytkowania produktu Szczególnie użyteczny w ochronie długo przechowywanych próbek RNA

32 32 PCR W CZASIE RZECZYWISTYM PCR W CZASIE RZECZYWISTYM Pełna gama produktów do prowadzenia reakcji qpcr i RT-qPCR, zarówno z zastosowaniem sond, jak i barwnika. PCR w czasie rzeczywistym przeprowadza się nie po to, aby udowodnić obecność jakiejś sekwencji, lecz aby odpowiedzieć na pytanie, ile cząsteczek o danej sekwencji znajduje się w próbce. Produkty z linii Genomic Essentials pomogą w uzyskaniu odpowiedzi na to pytanie i zapewnią najwyższą jakość kwantyfikacji. Do PCR w czasie rzeczywistym z użyciem barwników polecamy jasny i czuły, a zarazem niezwykle trwały barwnik BRYT Green. Zapewnia on też uzyskanie niezawodnych i czułych danych z użyciem sondy. Na kolejnych stronach można się dowiedzieć, które z tych technologii najlepiej nadają się do zastosowania w Państwa pracy.

33 PCR W CZASIE RZECZYWISTYM Zastosowania poszczególnych technologii PCR w czasie rzeczywistym PRODUKT PCR W CZASIE RZECZYWISTYM Z UŻYCIEM BARWNIKA GoTaq qpcr Master Mix GoTaq RT-qPCR Systeme PCR W CZASIE RZECZYWISTYM Z UŻYCIEM SOND GoTaq Probe qpcr Master Mix GoTaq Probe RT-qPCR Systeme TECHNOLOGIA Barwniki wiążące dsdna, np. BRYT Green Dye, umożliwiają wykrywanie przyrostu produktów PCR w czasie trwania reakcji. Sondy swoiste dla danej sekwencji, wyznakowane barwnikiem fluorescencyjnym i barwnikiem wygaszającym, ulegają podczas reakcji PCR hydrolizie, dzięki czemu możliwa jest detekcja produktów PCR. SWOISTOŚĆ Średnia Wysoka CZUŁOŚĆ (NAJMNIEJSZA WYKRYWALNA LICZBA KOPII) Zmienna 1 10 kopii ODTWARZALNOŚĆ Średnia Wysoka MULTIPLEKSOWANIE Nie Tak (wyznakowanie różnymi barwnikami fluorescencyjnymi) ANALIZA KRZYWEJ TOPNIENIA (ODZWIERCIEDLA SWOISTOŚĆ AMPLIFIKACJI) Tak Nie (swoistość zapewniana przez użycie sondy) ZASTOSOWANIA Ekspresja genów Kwantyfikacja DNA ChIP Ekspresja genów Kwantyfikacja DNA ChIP Genotypowanie SNP Zmienność liczby kopii Analiza szlaków sygnałowych Wykrywanie mikro- i małocząsteczkowego RNA Wykrywanie mutacji Analiza białek Multipleksowanie PCR w czasie rzeczywistym z użyciem barwnika Barwnik BRYT Green zapewnia silną fluorescencję Nowy barwnik, który wykazuje ściślejszą zależność pomiędzy wzrostem stężenia dsdna i fluorescencją, a jednocześnie w mniejszym stopniu zakłóca reakcję PCR niż SYBR * Green. Prowadzi to do niższych wartości Cq i większego zakresu liniowości, niż przy stosowaniu innych systemów qpcr bazujących na barwnikach. Do wykrywania stosowane są te same zestawy filtrów, jak w przypadku barwników SYBR * Green i ROX ** * SYBR jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Molecular Probes ** ROX jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Applera Corporation Delta Rn Delta Rn vs. Cycle 0.01ng 0.1ng 1ng 10ng 100ng Cycle Number Nowy barwnik: większe przyrosty fluorescencji przy wiązaniu dsdna Czułość: niska wartość Cq, również przy niewielkiej ekspresji sekwencji docelowej Wiarygodność: optymalne połączenie buforu i polimerazy Hot Start zapewnia odtwarzalne wyniki Wygoda: pełna kompatybilność z protokołem SYBR * Green I 8277TA GoTaq Master Mix Company A 100ng 10ng 1ng 0.1ng 0.01ng

34 34 PCR W CZASIE RZECZYWISTYM GoTaq qpcr Master Mix 2X GoTaq qpcr Master Mix zawierający produkty GoTaq G2 Hot Start Polymerase, BRYT Green, MgCl2, dntp i bufor Barwnik referencyjny CXR w mieszaninie lub osobno A reakcja po 50 µl (1 5 ml) A reakcja po 50 µl (25 1 ml) zł 1.127, zł 4.769, GoTaq 1-Step RT-qPCR System System do analizy ilościowej RNA A reakcji zł 1.821, GoTaq 2-Step RT-qPCR System Dwuetapowy system RT-qPCR do kwantyfikacji RNA Synteza cdna w systemie GoScript Reverse Transcription i kwantyfikacja z użyciem GoTaq qpcr Master Mix A reakcji RT reakcji qpcr zł 1.561, PCR w czasie rzeczywistym z użyciem sond System GoTaq Probe qpcr Master Mix został zoptymalizowany do ilościowej reakcji PCR z użyciem sond (np. TaqMan Probes)*. Produkt jest dwukrotnie zatężoną, gotową mieszaniną, która zawiera wszystkie potrzebne składniki w tym sondę, startery i matrycę. Reakcję qpcr z użyciem sondy można szybko i łatwo rozpocząć. Produkt GoTaq Probe qpcr Master Mix jest odpowiedni do stosowania ze wszystkimi znanymi termocyklerami zarówno w protokołach standardowych, jak i przyspieszonych. * TaqMan jest zastrzeżonym znakiem towarowym firmy Life Technologies Porównanie: protokół standardowy i przyspieszony Delta Rn vs. Cycle Delta Rn vs. Cycle Protokół Standard Cycling standardowy Protokół Fast Cyclingprzyspieszony Delta Rn Delta Rn Cycle Number Cycle Number Stabilność: optymalne połączenie buforu i polimerazy GoTaq G2 Hot Start zapewnia odtwarzalne wyniki Wydajność: wysokowydajna synteza pełnego cdna również w obecności inhibitorów Uniwersalność: odpowiedni do stosowania zarówno w standardowym, jak i przyspieszonym protokole

35 PCR W CZASIE RZECZYWISTYM 35 GoTaq Probe qpcr Master Mix 2X GoTaq Probe qpcr Master Mix zawierający produkty GoTaq G2 Hot Start Polymerase, MgCl2, dntp i bufor Barwnik referencyjny CXR osobno A reakcja po 20 µl (1 2 ml) A reakcja po 20 µl (10 1 ml) zł 477, zł 1.951, GoTaq Probe 1-Step RT-qPCR System System do analizy ilościowej RNA z odwrotną transkrypcją i ilościową reakcją PCR w jednym etapie (RT-qPCR) A reakcji zł 1.214, Formuła zawiera dutp. Ograniczenie zanieczyszczeń DNA możliwe dzięki zastosowaniu uracylo-dna-glikozylazy (UNG) GoTaq Probe 2-Step RT-qPCR System Dwuetapowy system RT-qPCR do kwantyfikacji RNA Synteza cdna w systemie GoScript Reverse Transcription i kwantyfikacja z użyciem GoTaq qpcr Master Mix A reakcji RT reakcji qpcr zł 954, Woda wolna od nukleaz Nuclease-Free Water Brak zawartości inhibitorów: woda nie zawiera chemicznych dodatków i nie była poddawana obróbce chemicznej P ml (2 25 ml) zł 217, P ml zł 574, Gwarantowany brak zawartości nukleaz dzięki ścisłej kontroli jakości Małe opakowania (2 25 ml) zapobiegające zanieczyszczeniom podczas pracy NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Amplification Product Selector Który produkt firmy Promega do przeprowadzenia reakcji PCR wybrać? Udzielamy pomocy online w podejmowaniu decyzji:

36 36 SYSTEMY KLONOWANIA SYSTEMY KLONOWANIA Oferujemy szeroką gamę systemów klonowania, w tym systemy pgem -T Vector do klonowania produktów reakcji PCR, system ptarget Mammalian Expression Vector do ekspresji genów w komórkach ssaczych czy system Flexi Vector Cloning do klonowania otwartych ramek odczytu (ORF) w celu uzyskania ekspresji białek. Dzięki systemowi Universal RiboClone cdna Synthesis można szybko i łatwo tworzyć biblioteki cdna. Do klonowania ludzkich sekwencji docelowych w celu uzyskania ekspresji krótkich cząsteczek RNA o strukturze spinki do włosów (shrna) polecamy system GeneClip U1 Hairpin Cloning.

37 SYSTEMY KLONOWANIA 37 Klonowanie produktów PCR Wypróbowane systemy T-Vektor umożliwiają szybkie i wydajne klonowanie produktów reakcji PCR. Podczas reakcji PCR na końcach amplifikatów powstają zwykle reszty A. Klonowanie w wektorze mającym w postaci liniowej komplementarne do nich reszty T na końcach jest rozwiązaniem z wyboru w trudnych przypadkach. Stąd też nazwano tego typu systemy wektorami T. Firma Promega oferuje różne wektory T do klonowania prostego z rozbudowanymi polilinkerami, z kompetentnymi komórkami w zestawie lub bez nich i w wersji specjalnie dostosowanej do ekspresji w komórkach ssaczych. pgem -T Vector System I System do prostego klonowania produktów reakcji PCR (z ogonem A na końcu 3 ) Wektor pgem -5Zf(+) w postaci liniowej Wektor z resztami T na końcach 3' po obu stronach Bufor do szybkiej ligacji skraca czas klonowania do 1 h w temperaturze pokojowej Bez komórek kompetentnych A reakcji zł 689, XmnI 1994 ScaI 1875 Amp r pgem -T Vector (3000bp) ori NaeI 2692 f1 ori T7 1 start ApaI AatII SphI BstZI lacz NcoI 37 T T SacII SpeI NotI BstZI PstI SalI NdeI SacI BstXI NsiI SP6 0356VA04_3A pgem -T Vector System II Zestaw pgem -T Vector System I z komórkami kompetentnymi JM109 A reakcji zł 1.127, XmnI 1994 ScaI 1875 Amp r pgem -T Vector (3000bp) ori NaeI 2692 f1 ori T7 1 start ApaI AatII SphI BstZI lacz NcoI 37 T T SacII SpeI NotI BstZI PstI SalI NdeI SacI BstXI NsiI SP6 0356VA04_3A

38 38 SYSTEMY KLONOWANIA pgem -T Easy Vector System I System klonowania produktów reakcji PCR Ma właściwości systemu pgem -T Vector System I. Dodatkowe miejsca cięcia przez enzymy restrykcyjne wokół miejsca insercji Bufor do szybkiej ligacji skraca czas klonowania do 1 h w temperaturze pokojowej Bez komórek kompetentnych A reakcji zł 858, XmnI 2009 ScaI 1890 Amp r pgem -T Easy Vector (3015bp) ori f1 ori lacz NaeI 2707 T T T7 ApaI AatII SphI BstZI NcoI BstZI NotI SacII EcoRI SpeI EcoRI NotI BstZI PstI SalI NdeI SacI BstXI NsiI SP6 1 start VA05_6A pgem -T Easy Vector System II Zestaw pgem -T Easy Vector System I z komórkami kompetentnymi JM109 A reakcji zł 1.305, XmnI 2009 ScaI 1890 Amp r pgem -T Easy Vector (3015bp) ori f1 ori lacz NaeI 2707 T T T7 ApaI AatII SphI BstZI NcoI BstZI NotI SacII EcoRI SpeI EcoRI NotI BstZI PstI SalI NdeI SacI BstXI NsiI SP6 1 start VA05_6A ptarget Mammalian Expression Vector System System łatwego klonowania produktów reakcji PCR Bezpośrednia ekspresja sklonowanych sekwencji w komórkach ssaczych A reakcji zł 1.608, Ampr ori Synthetic poly(a) Neo BglII 5665 CMV Enhancer/Promoter ptarget Vector (5670bp) Intron fl ori SV40 Enhancer/ EarlyPromoter SgfI 664 SV40 Late poly (A) I-PpoI 851 T T lacz T7 EcoRI BamHI NheI XhoI MluI SmaI KpnI SalI AccI NotI EcoRI lacz T overhangs VA07_6A

39 SYSTEMY KLONOWANIA 39 Flexi Cloning System System Flexi Vector stanowi metodę celowanego klonowania sekwencji kodujących białka, bazującą na dwóch rzadko tnących enzymach restrykcyjnych: SgfI i PmeI. Umożliwia szybki i wydajny transfer sekwencji pomiędzy wektorami bez konieczności ponownego sekwencjonowania. Łatwa reakcja transferu jest szczególnie istotna przy tworzeniu konstruktów do ekspresji N- lub C-końcowych białek fuzyjnych. SgfI protein-coding region PCR PmeI System klonowania Flexi gwarantuje maksymalną elastyczność, jako że raz sklonowana sekwencja docelowa może zostać łatwo przeniesiona z użyciem innego wektora Flexi bez konieczności powtórnego sekwencjonowania. Elastyczne tworzenie N- lub C-końcowych struktur fuzyjnych stanowi ważną zaletę tego systemu klonowania w porównaniu z innymi produktami. Dostępna jest szeroka gama wektorów (patrz rozdział Wektory ekspresyjne, 3 strona 59) SgfI PmeI DNA Purification Digestion with Flexi Enzyme Blend SgfI lethal gene PmeI SgfI DNA Purification PmeI Acceptor Flexi Vector lethal gene Digestion with Flexi Enzyme Blend Ligation Transformation and Selection protein-coding region SgfI PmeI 4599MA Klonowanie sekwencji kodujących białka w wektorze Flexi SgfI proteincoding region PmeI SgfI Kan r lethal gene PmeI SgfI proteincoding region PmeI Transfer regionu kodującego białko z jednego wektora Flexi do kolejnego: system Flexi Vector stanowi elastyczną metodę klonowania celowanego, umożliwiającą tworzenie plazmidów do ekspresji białek. Wektory Flexi zawierają letalny gen barnazy i marker oporności na antybiotyk, umożliwiający selekcję dodatnich kolonii. Transfer pomiędzy wektorami Flexi do ekspresji natywnych lub wyznakowanych na N-końcu białek fuzyjnych jest możliwy w dwóch kierunkach. Amp r SgfI lethal gene PmeI Kan r Amp r 4597MA

40 40 SYSTEMY KLONOWANIA SgfI Amp r proteincoding region PmeI SgfI Kan r lethal gene EcolCRI SgfI Kan r proteincoding region 4824MB Transfer sekwencji kodującej białko z natywnego lub N-końcowego wektora Flexi do C-końcowego wektora Flexi : C-końcowe wektory Flexi zawierają miejsca cięcia przez enzymy SgfI i EcoICRI i służą do uzyskiwania białek wyznakowanych na C-końcu. Ligacja tępych końców uzyskanych po trawieniu enzymami PmeI i EcoCRI prowadzi do dezaktywacji kodonu stop, który znajduje się w miejscu cięcia przez PmeI. Tym samym uzyskuje się otwartą ramkę odczytu pomiędzy sekwencją kodującą białko i znacznikiem C-końcowym. Miejsca cięcia przez PmeI i EcoCRI zostają zniesione poprzez klonowanie tępych końców. Transfer sekwencji kodującej białko z C-końcowych wektorów Flexi do N-końcowych lub natywnych wektorów Flexi nie jest więc możliwy Flexi System, Entry /Transfer C reakcji wprowadzenia i 20 reakcji transferu zł 1.214, Flexi System, Transfer C reakcji transferu zł 3.750, Carboxy Flexi System, Transfer C reakcji transferu zł 1.795, Artykuł branżowy na temat systemu Flexi Vector Biblioteka cdna Universal RiboClone cdna Synthesis System Tworzenie biblioteki cdna z RNA uzyskanego w ekstrakcji C system zł 3.069, W zestawie znajdują się wszystkie odczynniki potrzebne do syntezy dwuniciowego cdna z mrna a następnie wprowadzenia go do wektora z miejscem cięcia EcoRI

41 SYSTEMY KLONOWANIA 41 Interferencja RNA System GeneClip Hairpin Cloning jest opartym na DNA systemie RNAi (ddrnai), opracowanym w celu ekspresji krótkich cząsteczek RNA o strukturze spinki do włosów w komórkach ssaczych. System umożliwia szybkie i wydajne klonowanie i ekspresję shrna przy poszukiwaniu optymalnych sekwencji docelowych podczas pracy z RNA. Wektory pgeneclip basic i pgeneclip hmgpf zalecane są do transfekcji przejściowej, a wektory pgeneclip Puromycin/Hygromycin/Neomycin z genami oporności na antybiotyki są zalecane do tworzenia stabilnych komórek. GeneClip U1 Hairpin Cloning System-Basic C system zł 1.222, GeneClip U1 Hairpin Cloning System-Puromycin C system zł 1.222, GeneClip U1 Hairpin Cloning System-Hygromycin C system zł 1.222, GeneClip U1 Hairpin Cloning System-Neomycin C system zł 1.222, GeneClip U1 Hairpin Cloning System-hMGFP C system zł 1.782,

42 42 MARKERY MARKERY Czy może zdarzyło się Państwu zostawić marker na noc na stole laboratoryjnym? Nie ma problemu. W naszej ofercie znajdują się, oprócz markerów konwencjonalnych, zapewniające wygodę stosowania markery DNA z serii BenchTop, które można przechowywać w temperaturze pokojowej. U nas każdy znajdzie coś dla siebie.

43 MARKERY 43 Markery DNA z serii BenchTop Markery DNA z serii BenchTop są dostarczane w stabilizującym roztworze 1X Blue/Orange Loading Dye. Mogą dzięki temu być przechowywane w temperaturze pokojowej (22 25 C) i nie ma potrzeby dodawania ich do buforu obciążającego przed naniesieniem na żel agarozowy. Fragmenty DNA można wybarwiać bromkiem etydyny lub barwnikiem Diamond Nucleic Acid Dye. bp bp bp bp 1,353 1, / ,645 1,605 1, /65 [51,36] bp 1, ,000 8,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,500 2,000 1,500 1, , 253 1,500 1, TA 2% agarose 2% agarose 2% agarose 0.7% agarose 2% agarose BenchTop φx174 DNA/HaeIII Markers Cat.# G7511 Load 5µl/lane. BenchTop pgem DNA Markers Cat.# G7521 Load 5µl/lane. BenchTop PCR Markers Cat.# G7531 Load 6µl/lane. BenchTop 1kb DNA Ladder Cat.# G7541 Load 6µl/lane. BenchTop 100bp DNA Ladder Cat.# G8291 Load 6µl/lane. BenchTop X174 DNA/HaeIII Markers G µl zł 464, BenchTop pgem DNA Markers G µl zł 438, BenchTop PCR Markers G µl zł 460, BenchTop 1kb DNA Ladder G µl zł 434, BenchTop 100bp DNA Ladder G µl zł 208,

44 44 MARKERY Równoodstępowe drabinki DNA Równoodstępowe drabinki DNA są markerami DNA, w przypadku których odległości pomiędzy poszczególnymi prążkami są takie same. Każda drabinka jest dostarczana z buforem obciążającym 6X Blue/Orange Dye. Fragmenty DNA można wybarwiać bromkiem etydyny lub barwnikiem Diamond Nucleic Acid Dye. bp 4,000 3,900 3,800 3,700 3,600 3,500 3,400 3,300 3,200 3,100 3,000 2,900 2,800 2,700 2,600 2,500 2,400 2,300 2,200 2,100 2,000 1,900 1,800 1,700 1,600 1,500 1,400 1,300 1,200 1,100 1, [ ] 1% agarose bp [6,400, 6,600] 6,200 5,800 5,400 5,000 4,600 4,200 3,800 3,400 3,000 2,800 2,600 2,400 2,200 2,000 1,800 1,600 1,400 1,200 1, % agarose bp 10,000 9,000 8,000 7,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,000 1, % agarose 8653TA 10bp DNA Step Ladder G ,5 µg zł 243, 25bp DNA Step Ladder G µg zł 243, 50bp DNA Step Ladder G µg zł 243, 100bp DNA Step Ladder G µg zł 507, 200bp DNA Step Ladder G µg zł 455, 1kb DNA Step Ladder G µg zł 303,

45 MARKERY 45 Drabinki DNA Drabinki DNA składają się z fragmentów o długości dobranej w taki sposób, że odległości pomiędzy prążkami na żelu są w przybliżeniu równe. Są dostarczane z buforem obciążającym 6X Blue/Orange Dye. Fragmenty DNA można wybarwiać bromkiem etydyny lub barwnikiem Diamond Nucleic Acid Dye. bp bp bp 1, ,500 1, ,000 8,000 6,000 5,000 4,000 3,000 2,500 2,000 1,500 1, , TA05_3A 0973TC03_5A 1409TA03_6A 8654TA 2% agarose PCR Markers Cat.# G3161 Load 5µl/lane. 2% agarose 100bp DNA Ladder Cat.# G2101 Load 5µl/lane. 0.7% agarose 1kb DNA Ladder Cat.# G5711 Load 5µl/lane. PCR Markers G μl zł 390, 100bp DNA Ladder G μl zł 329, 1kb DNA Ladder G μl zł 399,

46 46 MARKERY Konwencjonalne markery DNA Konwencjonalne markery DNA uzyskuje się poprzez pełne trawienie enzymami restrykcyjnymi DNA faga Lambda, DNA faga X174 (postać replikacyjna) lub DNA plazmidowego. Fragmenty DNA można wybarwiać bromkiem etydyny lub barwnikiem Diamond Nucleic Acid Dye. bp 1258TB09_5A bp 23,130 9,416 6,557 4,361 2,322 2,027 [564, 125] 0.7% agarose 1258TA09_5A bp 0.7% agarose 21,226 7,421 5,804 5,643 4,878 3, TC09_5A bp 21,226 5,148 4,973 4,268 3,530 1,584 1, % agarose 2,027 1,904 [564, 125] 1238TA09_5A 1,353 1, [72] 8% acrylamide 0265TA05_2A bp % acrylamide TA05_1A bp 2,645 1,605 1, [36] 8% acrylamide 8655TA Lambda DNA/HindIII Markers G µg zł 191, Lambda DNA/EcoRI Markers G µg zł 191, Lambda DNA/EcoRI + HindIII Markers G µg zł 191, X174 DNA/HaeIII Markers G µg zł 646, X174 DNA/HinfI Markers G µg zł 646, pgem DNA Markers G µg zł 490,

47 MARKERY 47 Markery RNA Markery RNA firmy Promega służą do oznaczania długości jednoniciowego RNA w zakresie 0,28-6,58 kb, w żelu agarozowym z glioksalem lub formaldehydem. Po elektroforezie można uwidocznić fragmenty, korzystając z wybarwienia bromkiem etydyny. bases 6,583 4,981 3,638 2,604 1,908 1, TB09_4A 281 1% formaldehyde-agarose RNA Markers G μl zł 637,

48 48 ENZYMY RESTRYKCYJNE ENZYMY RESTRYKCYJNE W 1978 roku biochemik William A. Linton rozpoczął samodzielną produkcję enzymów restrykcyjnych, które sprzedawał wśród naukowców w ten sposób stworzył on podstawę sukcesu firmy Promega. Do dziś stanowią one nieodłączny element oferty Genomic Essentials, zapewniając szybkie trawienie DNA w korzystnej cenie. NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Restriction Enzyme Tool Wyszukiwanie enzymów restrykcyjnych według nazwy, rozpoznawanej sekwencji lub wystających końców. Szybkie i łatwe wyszukiwanie enzymów do podwójnego trawienia bez konieczności wprowadzania każdego z enzymów z osobna. (To narzędzie należy także do aplikacji Promega App, która jest dostępna bezpłatnie poprzez App Store pod systemy Apple i Android).

49 ENZYMY RESTRYKCYJNE 49 Szybkie trawienie DNA w korzystnej cenie Enzymy restrykcyjne firmy Promega to oszczędność czasu bez dodatkowych kosztów. Wydajne trawienie DNA bez specjalistycznych buforów Potrzebują Państwo enzymów restrykcyjnych, które szybko i wydajnie tną DNA? Firma Promega przetestowała najczęściej stosowane enzymy restrykcyjne pod kątem trawienia DNA w ciągu 15 minut lub krócej. Stosowano wyłącznie standardowe enzymy i bufory. SZYBKIE TRAWIENIE ZALECANY BUFOR INAKTYWACJA TERMICZNA TEMPERTURA INKUBACJI ENZYM NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATA LO GOWA SEKWENCJA AccI R U z ł 299, GT5(A/C)(T/G) AC CA (T/G)(A/C)1TG R U z ł 1.066, AKTYWNOŚĆ W BUFORZE A B C D E H G 50 75% 25 50% 25 50% 10 25% < 10% < 10% 25 50% 37 C MULTI CORE AccIII R U z ł 364, T5CCGG A A GGCC1T Acc65I R U z ł 277, G5GTAC C C CATG1G AgeI R U z ł 264, A5CCGG T T GGCC1A AluI R U z ł 230, AG5CT TC1GA ApaI R U z ł 247, G GGCC5C C1CCGG G R U z ł 949, F < 10% 10 25% 25 50% 25 50% b.d. b.d. < 10% 65 C D 10 25% 50 75% % 100% % %** 100% 37 C K 25 50% 25 50% 25 50% 50 75% b.d. b.d. 100% 37 C B % 100% % 10 25% b.d. b.d % 37 C A 100% 50 75% 50 75% < 10% 10 25% < 10% % 37 C AvaII R U z ł 130, G5G(A/T)C C C C(T/A)G1G R U z ł 746, C 50 75% 50 75% 100% 25 50% b.d. b.d % 37 C BalI R U z ł 381, TGG5CCA ACC1GGT R U z ł 1.483, G 10 25% < 10% < 10% < 10% b.d. b.d. < 10% 37 C BamHI R U z ł 52, G5GATC C C CTAG1G R U z ł 212, E %* % % 50 75% 100% 50 75% % 37 C * Niezalecane z racji możliwej aktywności gwiezdnej ** Aktywność w jednostkach na podstawie testów z zalecanym buforem. W buforze H niektóre enzymy wykazują podwyższoną aktywność B.d.= brak danych

50 50 ENZYMY RESTRYKCYJNE SZYBKIE TRAWIENIE ZALECANY BUFOR INAKTYWACJA TERMICZNA TEMPERTURA INKUBACJI ENZYM NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATA LO GOWA SEKWENCJA BanI R U z ł 234, G5G(T/C)(A/G)C C C C(A/G)(T/C)G1G BclI R U z ł 230, T5GATC A A CTAG1T BglI R U z ł 126, GCCN NNN5NGGC CGGN1NNN NCCG R U z ł 503, BglII R U z ł 156, A5GATC T T CTAG1A R U z ł 577, R U z ł 1.782, BsrSI R U z ł 256, ACTG GN5 TGAC1CN BssHII R U z ł 191, G5CGCG C C GCGC1G R U z ł 728, BstEII R U z ł 234, G5GTNAC C C CANTG1G BstOI R U z ł 182, CC5(A/T) GG GG (T/A)1CC BstXI R U z ł 186, CCAN NNNN5NTGG GGTN1NNNN NACC R U z ł 624, BstZI R U z ł 234, C5GGCC G G CCGG1C CfoI R U z ł 303, G CG5C C1GC G ClaI R U z ł 134, AT5CG AT TA GC1TA R U z ł 538, DdeI R U z ł 117, C5TNA G G ANT1C R U z ł 438, DpnI R U z ł 52, G me A5TC CT1 me AG DraI R U z ł 212, TTT5AAA AAA1TTT Eco47III R U z ł 295, AGC5GCT TCG1CGA EcoICRI R U z ł 169, GAG5CTC CTC1GAG AKTYWNOŚĆ W BUFORZE A B C D E H G 25 50% 25 50% 10 25% < 10% b.d. b.d. 100% 50 C MULTI CORE C 10 25% % 100% 50 75% 50 75% 50 75% 10 25% 50 C D 10 25% 25 50% % 100% 25 50% % 100% 37 C D 25 50% % % 100% b.d. b.d. < 10% 37 C D 10 25% 25 50% 10 25% 100% b.d. b.d. 100% 65 C H % 50 75% % 50 75% b.d. 100% % 50 C D 25 50% 50 75% 50 75% 100% b.d. b.d. 100% 60 C C 10 25% 25 50% 100% 25 50% b.d. b.d. < 10% 60 C D < 10% 10 25% 25 50% 100% 100% % 10 25% / 50 C D < 10% < 10% 10 25% 100% 10 25% % 10 25% 50 C B % 100% % 25 50% b.d. b.d. 100% / 37 C C % % 100% % 100% 50 75% 100% 37 C D 25 50% 25 50% 50 75% 100% b.d. b.d % / 37 C B 50 75% 100% % 50 75% b.d. b.d. 100% 37 C B % 100% % 50 75% b.d. b.d % 37 C D < 10% 25 50% 50 75% 100% b.d. b.d % 37 C B 10 25% 100% % < 10% 25 50% b.d. 100% 37 C

51 ENZYMY RESTRYKCYJNE 51 EcoRI R U z ł 104, G5AATT C C TTAA1G R U z ł 251, H 25 50% 50 75% 50 75% 50 75% % 100% 100%* 37 C EcoRV R U z ł 126, GAT5ATC CTA1TAG R U z ł 503, D 10 25% 25 50% 50 75% 100% 25 50% 50 75% 100% 37 C HaeII R U z ł 199, (A/G) GCGC5(T/C) (T/C)1CGCG (A/G) HaeIII R U z ł 230, GG5CC CC1GG R U z ł 715, B 50 75% 100% 50 75% 10 25% b.d. b.d. 100% 37 C C % % 100% 50 75% b.d. b.d. 100% 37 C HhaI R U z ł 165, G CG5C C1GC G HincII R U z ł 160, GT(T/C)5(A/G)AC CA(A/G)1(T/C)TG R U z ł 616, C 50 75% % 100% 50 75% b.d. b.d % 37 C B 25 50% 100% 25 50% 50 75% % 50 75% 100% 37 C R U z ł 2.081, HindIII R U z ł 104, A5AGCT T T TCGA1A R U z ł 256, E 25 50% 100% % 10 25% 100% 25 50% 50 75% 37 C HinfI R U z ł 160, G5ANT C C TNA1G R U z ł 585, B 50 75% 100% % % b.d. b.d % 37 C HpaI R U z ł 191, GTT5AAC CAA1TTG R U z ł 720, J 25 50% 50 75% 25 50% 10 25% b.d. b.d. 100% 37 C HpaII R U z ł 277, C5CG G G GC1C R U z ł 1.053, A 100% 50 75% 50 75% 10 25% b.d. b.d. 100% 37 C Hsp92I R U z ł 204, G(A/G)5CG (T/C)C C(T/C) GC1(A/G)G Hsp92II R U z ł 267, CATG5 1GTAC I-PpoI R U z ł 447, CTCTC TTAA5GGTAGC GAGAG1AATT CCATCG KpnI R U z ł 212, G GTAC5C C1CATG G R U z ł 590, F 10 25% % 50 75% 25 50% b.d. b.d % 37 C K 10 25% 25 50% 25 50% < 10% b.d. b.d. < 10% 37 C I-PpoI 10 25% 25 50% 25 50% 25 50% b.d. b.d. b.d. 37 C J 100%* 25 50% 25 50% < 10% 25 50% < 10% % / 37 C MboI R U z ł 225, 5GATC CTAG1 MboII R U z ł 208, GAAGA(N)85 CTTCT(N)71 MluI R U z ł 212, A5CGCG T T GCGC1A C 10 25% % 100% 50 75% b.d. b.d. < 10% 37 C B 10 25% 100% 50 75% % b.d. b.d. 100% 37 C D 10 25% 25 50% 50 75% 100% 25 50% %** 10 25% / 37 C * Niezalecane z racji możliwej aktywności gwiezdnej ** Aktywność w jednostkach na podstawie testów z zalecanym buforem. W buforze H niektóre enzymy wykazują podwyższoną aktywność B.d.= brak danych

52 52 ENZYMY RESTRYKCYJNE SZYBKIE TRAWIENIE ZALECANY BUFOR INAKTYWACJA TERMICZNA TEMPERTURA INKUBACJI ENZYM NR KATALOG. ILOŚĆ CENA KATA LO GOWA SEKWENCJA MspI R U z ł 212, C5CG G G GC1C R U z ł 780, MspA1I R U z ł 286, C(A/C)G5C(G/T)G G(T/G)C1G(C/A)C NarI R U z ł 186, GG5CG CC CC GC1GG NciI R U z ł 256, CC5(C/G) GG GG (G/C)1CC NcoI R U z ł 251, C5CATG G G GTAC1C R U z ł 902, NdeI R U z ł 342, CA5TA TG GT AT1AC NheI R U z ł 212, G5CTAG C C GATC1G R U z ł 811, NotI R U z ł 121, GC5GGCC GC CG CCGG1CG R U z ł 486, NruI R U z ł 212, TCG5CGA AGC1GCT NsiI R U z ł 217, A TGCA5T T1ACGT A PstI R U z ł 82, C TGCA5G G1ACGT C R U z ł 4, PvuI R U z ł 61, CG AT5CG GC1TA GC R U z ł 234, PvuII R U z ł 160, CAG5CTG GTC1GAC R U z ł 542, RsaI R U z ł 195, GT5AC CA1TG SacI R U z ł 126, G AGCT5C C1TCGA G R U z ł 503, SacII R U z ł 191, CC GC5GG GG1CG CC SalI R U z ł 4, G5TCGA C C AGCT1G R U z ł 1.127, AKTYWNOŚĆ W BUFORZE A B C D E H B % 100% % 25 50% b.d. b.d % 37 C MULTI CORE C 25 50% 100%* 100% 10 25% b.d. b.d. 100% 37 C G % 50 75% % 25 50% b.d. b.d % 37 C B 100%* 100% 25 50% 25 50% b.d. b.d % 37 C D 50 75% % % 100% 100% %** % 37 C D < 10% < 10% 25 50% 100% b.d. b.d % 37 C B % 100% % 10 25% % 10 25% 100% 37 C D < 10% 10 25% 25 50% 100% 25 50% %** 25 50% 37 C K < 10% < 10% < 10% 50 75% b.d. b.d % 37 C D 10 25% 50 75% 50 75% 100% 25 50% < 125 %** 10 25% / 37 C H 10 25% 50 75% 50 75% 50 75% 25 50% 100% 25 50% 37 C D 10 25% 25 50% 50 75% 100% b.d. b.d. < 10% 37 C B 25 50% 100% 50 75% 25 50% b.d. b.d % 37 C C % % 100% < 10% b.d. b.d. < 10% 37 C J % 25 50% 25 50% < 10% 100% 25 50% 100% 37 C C 100% 50 75% 100% 50 75% 25 50% < 125 %** < 10% 37 C D < 10% 10 25% 25 50% 100% 25 50% 25 50% < 10% 37 C

53 ENZYMY RESTRYKCYJNE 53 Sau3AI R U z ł 152, 5GATC CTAG1 R U z ł 590, B 25 50% 100% % < 10% b.d. b.d. 100% 37 C ScaI R U z ł 199, AGT5ACT TCA1TGA SfiI R U z ł 195, GGCCN NNN5NGGCC CCGGN1NNN NCCGG K < 10% 100%* 50 75% % b.d. b.d % 37 C B % 100% % 25 50% % 50 75% % 50 C SgfI R U z ł 264, GCG AT5CGC CGC1TA GCG SmaI R U z ł 121, CCC5GGG GGG1CCC R U z ł 486, C 25 50% 25 50% 100% < 10% b.d. b.d. < 10% / 37 C J < 10% < 10% < 10% < 10% < 10% < 10% 100% 25 C SnaBI R U z ł 204, TAC5GTA ATG1CAT R U z ł 798, B 50 75% 100% 50 75% < 10% b.d. b.d. 100% 37 C SpeI R U z ł 251, A5CTAG T T GATC1A R U z ł 980, B % 100% % % 100% 25 50% 100% 37 C SphI R U z ł 4, G CATG5C C1GTAC G R U z ł 1.218, K % % 100%* % 100% < 125 %** 10 25% 37 C SspI R U z ł 303, AAT5ATT TTA1TAA StuI R U z ł 186, AGG5CCT TCC1GGA TaqI R U z ł 186, T5CG A A GC1T R U z ł 993, E 10 25% 50 75% 50 75% % 100% %** 50 75% 37 C B % 100% % 50 75% b.d. b.d % 37 C E 10 25% 25 50% 50 75% 50 75% 100% b.d. 100% 65 C Tru9I R U z ł 256, T5TA A A AT1T VspI R U z ł 173, AT5TA AT TA AT1TA XbaI R U z ł 195, T5CTAG A A GATC1T R U z ł 759, F % 50 75% % 25 50% b.d. b.d % 65 C D < 10% 25 50% % 100% b.d. b.d. < 10% 37 C D 50 75% % % 100% 100% %** 100% 37 C XhoI R U z ł 173, C5TCGA G G AGCT1C R U z ł 477, D 25 50% % % 100% 25 50% %** 10 25% 37 C XmaI R U z ł 234, C5CCGG G G GGCC1C R U z ł 880, B 50 75% 100% 25 50% < 10% 25 50% < 10% 50 75% 37 C XmnI R U z ł 195, GAANN5NNT TC CTTNN1NNAAG R U z ł 741, B % 100% % 10 25% b.d. b.d % 37 C * Niezalecane z racji możliwej aktywności gwiezdnej ** Aktywność w jednostkach na podstawie testów z zalecanym buforem. W buforze H niektóre enzymy wykazują podwyższoną aktywność B.d.= brak danych

54 54 ENZYMY MODYFIKOWANE ENZYMY MODYFIKOWANE Niezbędne narzędzie w biologii molekularnej nastawionej na wysoką jakość. Niczego nie wolno pozostawiać przypadkowi. Również enzymy uważane za proste muszą być najwyższej jakości. Produkty firmy Promega stanowią podstawę sukcesu. Oferujemy termostabilne fosfatazy, różne polimerazy DNA i RNA, ligazy oraz kinazy.

55 ENZYMY MODYFIKOWANE 55 Fosfatazy alkaliczne Fosfatazy alkaliczne katalizują hydrolizę grup 5 -fosforanowych cząsteczek DNA, RNA oraz trifosforanów rybo- i dezoksy rybonukleozydów. Podczas klonowania są one stosowane, aby zapobiec ponownej ligacji linearyzowanych wektorów. Porównanie fosfataz alkalicznych TSAP CIAP Aktywacja termiczna Temperatura inaktywacji 74 C n.d. Czas inkubacji 15 min 2 30min Wymagany/zalecany specjalistyczny bufor Aktywność we wszystkich buforach do enzymów restrykcyjnych firmy Promega Wymagane ilości w jednostkach enzymatycznych w buforach do enzymów restrykcyjnych 1 2 n.d. Użyteczność w selekcji białych/niebieskich kolonii TSAP = Thermosensitive Alkaline Phosphatase (termoczuła fosfataza alkaliczna) CIAP = Calf Intestinal Alkaline Phosphatase (fosfataza alkaliczna z jelita cielęcego) Alkaline Phosphatase, Calf Intestinal (CIAP) M U zł 303, TSAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase M U zł 329, Polimerazy DNA Polymerase I Zależna od DNA polimeraza DNA z aktywnością egzonukleazy 5 a3 i 3 a5 M U zł 399, M U zł 1.639, Odpowiednia do licznych zastosowań, Np. znakowania radioaktywnego DNA metodą nick translation i syntezy dwuniciowego cdna DNA Polymerase I Large (Klenow) Fragment Zależna od DNA polimeraza DNA z aktywnością egzonukleazy 3 a5 i bez aktywności egzonukleazy 3 a5 M U zł 273, M U zł 581, Wypełnianie wystających końców 5 wyznakowanymi lub niewyznakowanymi dntp, sekwencjonowanie jedno- lub dwuniciowych matryc DNA i wiele innych zastosowań DNA Polymerase I Large (Klenow) Fragment, Exonuclease Minus M U zł 160, Zależna od DNA polimeraza DNA bez aktywności egzonukleazy Znakowanie losowych starterów Tworzy wystający koniec 3 długości 1 bp T4 DNA Polymerase Katalizuje syntezę 3 a5 drugiej nici DNA na matrycy jednoniciowego DNA ze starterem M U zł 295, M U zł 1.053, Do zastosowań, w których błędy parowania zasad są niedopuszczalne

56 56 ENZYMY MODYFIKOWANE SP6 RNA Polymerase Ekstremalnie wysokie powinowactwo do sekwencji promotora SP6 i ekstremalnie duża swoistość P U zł 672, P U zł 2.393, Czystość >90% potwierdzona elektroforezą w żelu poliakrylamidowym w obecności SDS Wbudowywanie trifosforanów nukleozydów wyznakowanych 32P, P, 3H i 35S T3 RNA Polymerase Ekstremalnie wysokie powinowactwo do sekwencji promotora T3 i ekstremalnie duża swoistość P U zł 191, Czystość >90% potwierdzona elektroforezą w żelu poliakrylamidowym w obecności SDS Wbudowywanie trifosforanów nukleozydów wyznakowanych 32P, P, 3H i 35S T7 RNA Polymerase Ekstremalnie wysokie powinowactwo do sekwencji promotora T7 i ekstremalnie duża swoistość P U zł 212, P U zł 837, Czystość >90% potwierdzona elektroforezą w żelu poliakrylamidowym w obecności SDS Wbudowywanie trifosforanów nukleozydów wyznakowanych 32P, P, 3H i 35S Ligazy T4 DNA Ligase Katalizuje ligację dwóch nici DNA poprzez grupy 5 -fosforanową i 3 -hydroksylową M U zł 108, M U zł 412, Znajduje zastosowanie przy wklejaniu wstawek DNA z wystającymi końcami 5 lub 3 oraz z tępymi końcami Użyteczność w selekcji białych/niebieskich kolonii LigaFast Rapid DNA Ligation System Ligacja wystających końców w 5 min i tępych końców 15 min w temperaturze pokojowej M reakcji zł 507, M reakcji zł 2.085, Użyteczność w selekcji białych/niebieskich kolonii T4 RNA Ligase Katalizuje zależną od ATP ligację jednoniciowego RNA lub DNA do ufosforylowanych końców 5 jednoniciowego RNA lub DNA M U zł 5, Kinazy i systemy znakowania DNA T4 Polynucleotide Kinase Katalizuje przeniesienie grupy γ-fosforanowej z ATP na koniec 5 polinukleotydu M U zł 113, M U zł 629, DNA 5 End-Labeling System Kompletny system znakowania jedno- i dwuniciowego RNA lub DNA U reakcji zł 373,

57 ENZYMY MODYFIKOWANE 57 Nukleazy Exonuclease III Tworzenie jednoniciowego DNA Katalizuje odcinanie kolejnych mononukleotydów M U zł 295, M U zł 1.058, Szybkość degradacji można regulować, stosując różne temperatury inkubacji Możliwa inaktywacja termiczna w 75 C Ribonuclease H Hydrolizuje swoiście wiązania fosfodiestrowe RNA zhybrydyzowanego do DNA; tworzy produkty o końcach 3 -OH i 5 -P M U zł 728, M U zł 2.558, Mung Bean Nuclease Katalizuje cięcie endonukleotyczne jednoniciowego DNA i RNA, pozostawiając produkty z końcem 5 -P M U zł 325, RNase ONE Ribonuclease Katalizuje cięcie RNA M U zł 468, M U zł 1.608, RQ1 RNase-Free DNase Deoksyrybonukleaza I trawiąca jedno- lub dwuniciowe DNA do uzyskania nukleotydów 3 -OH M U zł 234, Produkt jest odpowiedni do zastosowań, przy których istotne jest otrzymanie RNA S1 Nuclease Rozcina endonukleolitycznie jednoniciowe DNA i RNA do uzyskania produktów o końcach 5 -P M U zł 165, Dwuniciowe kwasy nukleinowe mogą ulec degradacji wyłącznie przy skrajnie wysokim stężeniu enzymu Inne enzymy Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, Recombinant Katalizuje dobudowywanie mononukleotydów do końca 3 -OH DNA przy jednoczesnym odcinaniu grup fosforanowych M U zł 290, M U zł 1.023, Topoisomerase I Usuwa ujemne superskręcenie z koliście zamkniętej cząsteczki DNA M U zł 551,

58 58 WEKTORY EKSPRESYJNE WEKTORY EKSPRESYJNE Promega oferuje wybór różnych wektorów ekspresyjnych do syntezy białek zarówno w układzie bezkomórkowym, jak i komórkowym. Wektory Flexi : maksymalna elastyczność i łatwość tworzenia białek fuzyjnych N- lub C-końcowych Standardowe wektory MCS: do konwencjonalnego klonowania z użyciem polilinkera (MCS)

59 WEKTORY EKSPRESYJNE 59 Wektory ekspresyjne Flexi Wszystkie wektory Flexi zawierają letalny dla bakterii gen barnazy, który jest unieczynniany po wprowadzeniu klonowanego DNA. Umożliwia to pozytywną selekcję produktów zakończonej powodzeniem ligacji wstawki. Gwarancja maksymalnej elastyczności Celowane klonowanie otwartych ramek odczytu (ORF) Łatwy transfer ORF do szerokiej gamy wektorów bez konieczności ponownego sekwencjonowania DNA Szybkie i uniwersalne generowanie białek fuzyjnych wyznakowanych na N- lub C-końcu Wybór z oferty wektorów Flexi E. coli Komórki ssacze Transkrypcja/translacja w systemie bezkomórkowym N-koniec C-koniec PRODUKT MARKER SELEKCYJNY ZASTOSOWANIE PROMOTOR EKSPRESJI MARKER BIAŁKA FUZYJNEGO NR KATA LOG. pf1a T7 Flexi Vector Ampicylina Indukowalna ekspresja natywnych T7 T7 C8441 zł pf1k T7 Flexi Vector Kanamycyna białek C8451 zł pfn2a (GST) Flexi Vector Ampicylina Ekspresja rozpuszczalnych T7 T7 GST C8461 zł pfn2k (GST) Flexi Vector Kanamycyna białek i oczyszczanie dzięki znacznikowi GST na N-końcu C8471 zł pf3a WG (BYDV) Flexi Vector pf3k WG (BYDV) Flexi Vector Ampicylina Ekspresja in vitro natywnych białek w ekstrakcie z kiełków pszenicy CENA T7, SP6 L5671 zł Kanamycyna L5681 zł pf25a ICE T7 Flexi Vector Ampicylina Ekspresja in vitro natywnych T7 L1061 zł pf25k ICE T7 Flexi Vector Kanamycyna białek w ekstrakcie z komórek owadzich L1081 zł pfn6a (HQ) Flexi Vector Ampicylina Indukowalna ekspresja białek T7 T7 HQHQHQ C8511 zł pfn6k (HQ) Flexi Vector Kanamycyna i oczyszczanie ich na niklowej kolumnie powinowactwa C8521 zł pfc7a (HQ) Flexi Vector Ampicylina Indukowalna ekspresja białek T7 T7 HQH- C8531 zł i oczyszczanie ich na niklowej QHQ pfc7k (HQ) Flexi Vector Kanamycyna C8541 zł kolumnie powinowactwa pf4a CMV Flexi Vector Ampicylina Wysoka konstytutywna ekspresja CMV T7 C8481 zł pf4k CMV Flexi Vector Kanamycyna natywnych białek C8491 zł pf5a CMV-neo Flexi Vector pf5k CMV-neo Flexi Vector pf9a CMV hrluc-neo Flexi Vector pfn10a (ACT) Flexi Vector pn11a (BIND) Flexi Vector Ampicylina/ neomycyna Kanamycyna/neomycyna M Ampicylina Neomycyna M Ampicylina/ neomycyna Wysoka konstytutywna ekspresja natywnych białek z markerem selekcyjnym stabilnej ekspresji Wysoka konstytutywna ekspresja natywnych białek z markerem selekcyjnym stabilnej ekspresji Interakcje białko-białko in vivo w systemach komórek ssaczych CMV T7 C9401 zł C9411 zł CMV T7 C9361 zł CMV CMV T7 T7 Domena aktywacji HSV VP16 Domena GAL4 wiążąca DNA C91 C9341 zł zł pf12a RM Flexi Vector Ampicylina Regulowana ekspresja białek 12λOP- C9431 zł pf12k RM Flexi Vector Ampicylina ssaczych Mini CMV C9441 zł pfn18a HaloTag T7 Flexi Vector pfn18k HaloTag T7 Flexi Vector Kanamycyna Analiza interakcji białkowych i oczyszczanie białek T7 T7 HaloTag G2751 zł Ampicylina G2681 zł

60 60 WEKTORY EKSPRESYJNE Wybór z oferty wektorów Flexi E. coli Komórki ssacze Transkrypcja/translacja w systemie bezkomórkowym N-koniec C-koniec PRODUKT pfn19a HaloTag T7 SP6 Flexi Vector pfn19k HaloTag T7 SP6 Flexi Vector pfc20a HaloTag T7 SP6 Flexi Vector pfc20k HaloTag T7 SP6 Flexi Vector pfc14a HaloTag CMV Flexi Vector pfc14k HaloTag CMV Flexi Vector pfc15a HaloTag CMVd1 Flexi Vector pfc15k HaloTag CMVd1 Flexi Vector pfc16a HaloTag CMVd2 Flexi Vector pfc16k HaloTag CMVd2 Flexi Vector pfc17a HaloTag CMVd3 Flexi Vector pfc17k HaloTag CMVd3 Flexi Vector pfn21a HaloTag CMV Flexi Vector pfn21k HaloTag CMV Flexi Vector pfn22a HaloTag CMVd1 Flexi Vector pfn22k HaloTag CMVd1 Flexi Vector pfn23a HaloTag CMVd2 Flexi Vector pfn23k HaloTag CMVd2 Flexi Vector pfn24a HaloTag CMVd3 Flexi Vector pfn24k HaloTag CMVd3 Flexi Vector pfn29a His6HaloTag T7 Flexi Vector pfn29k His6HaloTag T7 Flexi Vector pfc30a His6HaloTag T7 Flexi Vector pfc30k His6HaloTag T7 Flexi Vector pfc27a HaloTag CMV-neo Flexi Vector pfc27k HaloTag CMV-neo Flexi Vector MARKER SELEKCYJNY ZASTOSOWANIE PROMOTOR EKSPRESJI MARKER BIAŁKA FUZYJNEGO NR KATA LOG. Kanamycyna Analiza interakcji białkowych T7 T7, SP6 HaloTag G1891 zł Ampicylina G1841 zł Kanamycyna Analiza interakcji białkowych T7 T7, SP6 Halo- Tag G1681 CENA zł Ampicylina G1691 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; wysoka ekspresja konstytutywna CMV T7 Halo- Tag G9651 zł Ampicylina G9661 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; umiarkowana ekspresja konstytutywna T7 CMVd1 T7, SP6 Halo- Tag G1611 zł Ampicylina G1601 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; niska ekspresja konstytutywna T7 CMVd2 T7, SP6 Halo- Tag G1591 zł Ampicylina G1571 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; bardzo niska ekspresja konstytutywna T7 CMVd3 T7, SP6 Halo- Tag G1551 zł Ampicylina G1321 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; wysoka ekspresja konstytutywna CMV T7 HaloTag G2821 zł Ampicylina G2831 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; umiarkowana ekspresja konstytutywna T7 CMVd1 T7, SP6 HaloTag G2841 zł Ampicylina G2851 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; niska ekspresja konstytutywna T7 CMVd2 T7, SP6 HaloTag G2861 zł Ampicylina G2871 zł Kanamycyna Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; bardzo niska ekspresja konstytutywna T7 CMVd3 T7, SP6 HaloTag G2881 zł Ampicylina G2981 zł Kanamycyna Indukowalna ekspresja białek i oczyszczanie ich na niklowej kolumnie powinowactwa lub z użyciem HaloTag T7 T7 His(6) HaloTag G8261 zł Ampicylina G81 zł Kanamycyna Indukowalna ekspresja białek i oczyszczanie ich na niklowej kolumnie powinowactwa lub z użyciem HaloTag T7 T7 His(6) Halo- Tag G8321 zł Ampicylina G8381 zł Kanamycyna Ampicylina/ neomycyna M Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; wysoka ekspresja konstytutywna z markerem selekcyjnym stabilnej ekspresji CMV T7 Halo- Tag G8421 G8431 zł zł

61 WEKTORY EKSPRESYJNE 61 NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Flexi Primer Design Tool Narzędzie Flexi Primer Design Tool generuje startery PCR do amplifikacji wybranej sekwencji kodującej, tak aby była odpowiednia do zastosowania w wektorach Flexi Standardowe wektory MCS Służą do konwencjonalnego klonowania z użyciem polilinkera (MCS). Wybór z oferty standardowych wektorów MCS E. coli Komórki ssacze Transkrypcja/translacja w systemie bezkomórkowym N-koniec C-koniec PRODUKT ph6htn His6HaloTag T7 Vector ph6htc His6HaloTag T7 Vector phtc HaloTag CMV-neo Vector phtn HaloTag CMV-neo Vector MARKER SELEKCYJNY Ampicylina ZASTOSOWANIE PROMOTOR EKSPRESJI MARKER BIAŁKA FUZYJNEGO Indukowalna ekspresja białek i oczyszczanie ich na niklowej kolumnie powinowactwa lub z użyciem HaloTag T7 T7 His(6) HaloTag Ampicylina T7 T7 His(6) Halo- Tag Ampicylina/ neomycyna M Obrazowanie komórek i analiza interakcji białkowych; wysoka ekspresja konstytutywna z markerem selekcyjnym stabilnej ekspresji CMV T7 Halo- Tag NR KATA LOG. G7971 G8031 G7711 CENA zł zł zł Ampicylina CMV T7 HaloTag G7721 zł pci-neo Mammalian Expression Vector psi Mammalian Expression Vector Wysoka konstytutywna ekspresja natywnych białek z markerem selekcyjnym stabilnej ekspresji Wysoka konstytutywna ekspresja natywnych białek CMV T7 E1841 zł 1.530, SV40 T7 E1721 zł 1.530, Monster Green Fluorescent Protein phmgfp Vector Obrazowanie komórek i inne bazujące na fluorescencji zastosowania fuzji białek badanych z białkami o podwyższonej fluorescencji zielonej CMV T7 MGFP E6421 zł 2.662, Zestawienie wszystkich naszych wektorów znajduje się również na naszej stronie internetowej pod adresem:

62 62 KOMPETENTNE KOMÓRKI KOMPETENTNE KOMÓRKI Nasze komórki są nie tylko bardzo kompetentne i odpowiednie do zastosowań klientów istnieje również możliwość wyboru!

63 KOMPETENTNE KOMÓRKI 63 Kompetentne komórki Transformacja kompetentnych komórek E.coli nowo skonstruowanymi plazmidami umożliwia wybór i namnażanie żądanych klonów. Kompetentne komórki bakteryjne są w stanie przyjmować obce DNA i powielać je. Wysokiej jakości komórki E.coli są istotnym elementem skutecznych protokołów klonowania. Komórki Single-Use Competent Cells są komórkami E.coli o wysokim stopniu kompetencji, uzyskanej metodami chemicznymi, które są dostarczane w praktycznych porcjach po 50 µl. Transformację prowadzi się bezpośrednio w próbówce. W ten sposób można pominąć dodatkowe etapy dzielenia produktu na porcje, co pozwala uniknąć spadku wydajności transformacji, spowodowanego ponawianym zamrażaniem i rozmrażaniem. Gen oporności na ampicylinę (Amp R ) 1. DNA plazmidowe i wstawka podlegają cięciu tym samym enzymem restrykcyjnym Gen β-galaktozydazy (lacz) Plazmid Miejsca restrykcyjne Obce DNA Miejsca restrykcyjne Komórki Single-use Pro 5-alpha umożliwiają wydajną transformację niezmetylowanym DNA z reakcji PCR, syntezy cdna i wielu innych źródeł. Nieswoista aktywność endonukleazy I (enda1) została wyeliminowana, aby umożliwić przygotowanie plazmidów najwyższej jakości. Szczep jest oporny na fagi T1 (fhua2) i odpowiedni do prowadzenia selekcji białych/niebieskich kolonii poprzez α-komplementację genu β-galaktozydazy (Rys. 1). JM109 jest reca- i enda-ujemnym szczepem K, co minimalizuje rekombinację i poprawia jakość DNA plazmidowego. Ponadto komórki zawierają episom F, co umożliwia selekcję białych i niebieskich kolonii. Rysunek: Schemat prowadzenia selekcji kolonii białych i niebieskich, umożliwiający wyszukiwanie wektorów z wstawką DNA 2. Ligacja wstawki inaktywuje gen lacz 3. Transformacja rekombinowanymi plazmidami z genem oporności na ampicylinę 4. Wszystkie poddawane transformacji bakterie wysiewa się na płytkach z pożywką z dodatkiem ampicyliny i substratu β-galaktozydazy 5. Białe kolonie zawierają wstawkę, niebieskie nie Rekombinowany plazmid Bakteria 12112MA Single-Use Pro 5-alpha Competent Cells, >109cfu/µg L ml zł 1.214, Single-Use JM109 Competent Cells, >108cfu/µg L ml zł 698, Single-Use HB101 Competent Cells, >108cfu/µg L ml zł 6, JM109 Competent Cells, >107cfu/μg L ml zł 377, JM109 Competent Cells, >108cfu/μg L ml zł 538, Dane dotyczące genotypów Dane dotyczące genotypów można znaleźć na naszej stronie w części Dane techniczne

64 64 KOMPETENTNE KOMÓRKI NARZĘDZIA PROMEGA DLA PROFESJONALISTÓW Promega Colony Counter Aplikacja Colony Counter firmy Promega to narzędzie do szybkiego i łatwego zliczania kolonii na płytce agarowej. Wystarczy sfotografować płytkę, a aplikacja zliczy kolonie w ciągu kilku sekund. Dane można szybko przetwarzać, zaznaczając dodatkowe kolonie i wykluczając artefakty w postaci odbłysków. Zliczanie pojedynczych płytek lub uśrednianie wyników kilku płytek Powiększanie wybranego obszaru płytki, aby regulować zliczanie Ręczne dodawanie kolonii i usuwanie wyników fałszywie dodatnich Zapisywanie zdjęć płytek i zliczanie kolonii bez ograniczeń czasowych

65 KOMPETENTNE KOMÓRKI 65 Notatki

66 66 SERWIS Składanie zamówień przez faks: Zamawiam (w sposób wiążący) następujące produkty: (Prosimy wypełniać formularz drukowanymi literami). ILOŚĆ NR KATALOG. Osoba do kontaktu Pani Pan Tytuł naukowy Nazwisko Imię Przedsiębiorstwo / Uczelnia Oddział / Instytut Telefon Faks Adres Numer klienta (jeśli znany) Adres do rozliczeń Towar dostarczyć na adres do rozliczeń Przedsiębiorstwo / Uczelnia Oddział / Instytut Ulica + numer lokalu Kod pocztowy + miejscowość Adres dostawy (jeśli jest inny) Przedsiębiorstwo / Uczelnia Oddział / Instytut Ulica + numer lokalu Data Podpis Kod pocztowy + miejscowość Podane ceny plus VAT obowiązują do Wysyłka zgodnie z Ogólnymi warunkami handlowymi podanymi na stronie Zastrzega się możliwość wystąpienia błędów.

67 ŻYWA PAGINA / POSZCZEGÓLNE ROZDZIAŁY 67 Wszystko, co trzeba, zawsze na czas. Helix swoboda prowadzenia badań! Helix to spersonalizowane miejsce przechowywania produktów Promega w laboratorium. Zamrażarka, lodówka i szafa utrzymująca temperaturę pokojową w inteligentnej technologii zaopatrywania magazynu i rozliczania zasobów. Pełne zaopatrzenie w te produkty firmy Promega, które są potrzebne w danym laboratorium. Helix gwarantuje klientom nieograniczoną dostępność produktów 24 godziny na dobę, 7 dni w tygodniu. Wszystkie produkty z tym znakiem można umieszczać w zamrażarce, lodowce lub szafi e utrzymującej temperaturę pokojową marki Helix. Więcej informacji na temat produktow Helix można znaleźć na stronie Promega Corporation. All Rights Reserved