Osteoarthritis & Cartilage (1)

Podobne dokumenty
możliwie jak najniższą lepkość oraz / lub niską granicę płynięcia brak lub bardzo mały udział sprężystości we właściwościach przepływowych

RHEOTEST Medingen Reometr rotacyjny RHEOTEST RN oraz lepkościomierz kapilarny RHEOTEST LK Zastosowanie w chemii polimerowej

Właściwości reologiczne

Projektowanie elementów z tworzyw sztucznych

Sprawozdanie. z ćwiczeń laboratoryjnych z przedmiotu: Współczesne Materiały Inżynierskie. Temat ćwiczenia

Płyny newtonowskie (1.1.1) RYS. 1.1

RHEOTEST Medingen Reometr RHEOTEST RN - Artykuły farmaceutyczne i kosmetyczne.

ZAKŁAD POJAZDÓW SAMOCHODOWYCH I SILNIKÓW SPALINOWYCH ZPSiSS WYDZIAŁ BUDOWY MASZYN I LOTNICTWA

Instrukcja do wykonania symulacji numerycznych CFD w programie PolyFlow 14.0 przepływu płynów nienewtonowskich o właściwościach lepkosprężystych

(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Adsorpcja błękitu metylenowego na węglu aktywnym w obecności acetonu

Laboratorium Podstaw Biofizyki

Lepkosprężystość. Metody pomiarów właściwości lepkosprężystych materii

modele ciał doskonałych

Katedra Chemii Fizycznej Uniwersytetu Łódzkiego. Wpływ stężenia kwasu na szybkość hydrolizy estru

1. PRZYGOTOWANIE ROZTWORÓW KOMPLEKSUJĄCYCH

STATYCZNA PRÓBA ROZCIĄGANIA

Technologia Materiałów Drogowych ćwiczenia laboratoryjne

Metoda analityczna oznaczania chlorku winylu uwalnianego z materiałów i wyrobów do żywności

Lepkosprężystość, Pełzanie i badania oscylacyjne. Zachowanie lepkosprężyste. Zachowanie lepkosprężyste. Powody lepkosprężystości

dr hab. inż. Józef Haponiuk Katedra Technologii Polimerów Wydział Chemiczny PG

. Cel ćwiczenia Celem ćwiczenia jest porównanie na drodze obserwacji wizualnej przepływu laminarnego i turbulentnego, oraz wyznaczenie krytycznej licz

Wskaźnik szybkości płynięcia termoplastów

PRZECIWZUŻYCIOWE POWŁOKI CERAMICZNO-METALOWE NANOSZONE NA ELEMENT SILNIKÓW SPALINOWYCH

dr hab. inż. Józef Haponiuk Katedra Technologii Polimerów Wydział Chemiczny PG

VI Podkarpacki Konkurs Chemiczny 2013/2014

SPRAWOZDANIE Z BADAŃ

Politechnika Białostocka INSTRUKCJA DO ĆWICZEŃ LABORATORYJNYCH

PODSTAWY OBLICZEŃ CHEMICZNYCH.. - należy podać schemat obliczeń (skąd się biorą konkretne podstawienia do wzorów?)

wyodrębnia zjawisko z kontekstu, wskazuje czynniki istotne substancji

K02 Instrukcja wykonania ćwiczenia

PEŁZANIE WYBRANYCH ELEMENTÓW KONSTRUKCYJNYCH

13. TERMODYNAMIKA WYZNACZANIE ENTALPII REAKCJI ZOBOJĘTNIANIA MOCNEJ ZASADY MOCNYMI KWASAMI I ENTALPII PROCESU ROZPUSZCZANIA SOLI

ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ŚRODOWISKA 1)

MECHANIKA PŁYNÓW LABORATORIUM

wyodrębnia zjawisko z kontekstu, wskazuje czynniki istotne substancji

INSTRUKCJA DO ĆWICZEŃ LABORATORYJNYCH

Teoria błędów. Wszystkie wartości wielkości fizycznych obarczone są pewnym błędem.

(imię i nazwisko) GRANULACJA 1) GRANULACJA NA MOKRO - PRZYGOTOWANIE GRANULATU PROSTEGO. Ilość substancji na 100 g granulatu [g]

Metody Badań Składu Chemicznego

Analiza korelacyjna i regresyjna

Ćwiczenie 5: Wyznaczanie lepkości właściwej koloidalnych roztworów biopolimerów.

RHEOTEST Medingen Reometr RHEOTEST RN: Zakres zastosowań Smary

Wyznaczanie współczynnika sprężystości sprężyn i ich układów

WYTRZYMAŁOŚĆ RÓWNOWAŻNA FIBROBETONU NA ZGINANIE

ĆWICZENIE 15 WYZNACZANIE (K IC )

Politechnika Białostocka INSTRUKCJA DO ĆWICZEŃ LABORATORYJNYCH

Modele materiałów

POLITECHNIKA POZNAŃSKA ZAKŁAD CHEMII FIZYCZNEJ ĆWICZENIA PRACOWNI CHEMII FIZYCZNEJ

Sprawozdzanie z ćwiczenia nr 3 - Kinetyka enzymatyczna

CEL ĆWICZENIA: Zapoznanie się z przykładową procedurą odsalania oczyszczanych preparatów enzymatycznych w procesie klasycznej filtracji żelowej.

DZIAŁ TEMAT NaCoBeZu kryteria sukcesu w języku ucznia

Analiza niestabilności powstających w trakcie procesu wytłaczania

POLITECHNIKA BIAŁOSTOCKA

SPRAWDZENIE PRAWA HOOKE'A, WYZNACZANIE MODUŁU YOUNGA, WSPÓŁCZYNNIKA POISSONA, MODUŁU SZTYWNOŚCI I ŚCIŚLIWOŚCI DLA MIKROGUMY.

Nauka o Materiałach. Wykład VIII. Odkształcenie materiałów właściwości sprężyste. Jerzy Lis

3. Badanie kinetyki enzymów

1. Zaproponuj doświadczenie pozwalające oszacować szybkość reakcji hydrolizy octanu etylu w środowisku obojętnym

IR II. 12. Oznaczanie chloroformu w tetrachloroetylenie metodą spektrofotometrii w podczerwieni

INSTRUKCJA DO CWICZENIA NR 5

Asfalty modyfikowane polimerami pod kontrolą

METODY CHEMOMETRYCZNE W IDENTYFIKACJI ŹRÓDEŁ POCHODZENIA

EGZAMIN POTWIERDZAJĄCY KWALIFIKACJE W ZAWODZIE Rok 2018 ZASADY OCENIANIA

Instrukcja do ćwiczeń laboratoryjnych

DOKUMENTACJA SYSTEMU ZARZĄDZANIA LABORATORIUM. Procedura szacowania niepewności

Laboratorium Inżynierii Bioreaktorów

Kopolimery statystyczne. Kopolimery blokowe. kopolimerów w blokowych. Sonochemiczna synteza -A-A-A-A-A-A-A-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B- Typowe metody syntezy:

Badanie zależności temperatury wrzenia wody od ciśnienia

BADANIE PARAMETRÓW WYTRZYMAŁOŚCIOWYCH DZIANIN LEWO-PRAWYCH WYKONANYCH Z PRZĘDZ DZIANYCH. Wojciech Pawłowski

Walidacja metody analitycznej podejście metrologiczne. Waldemar Korol Instytut Zootechniki-PIB, Krajowe Laboratorium Pasz w Lublinie

O 2 O 1. Temat: Wyznaczenie przyspieszenia ziemskiego za pomocą wahadła rewersyjnego

Politechnika Białostocka

WSKAZÓWKI DO WYKONANIA SPRAWOZDANIA Z WYRÓWNAWCZYCH ZAJĘĆ LABORATORYJNYCH

LABORATORIUM REOLOGICZNE PODSTAWY TECHNOLOGII POLIMERÓW ĆWICZENIE NR 3 WŁAŚCIWOŚCI REOLOGICZNE POLIMERÓW (OZNACZANIE KRZYWEJ PŁYNIĘCIA)

POLITECHNIKA POZNAŃSKA ZAKŁAD CHEMII FIZYCZNEJ ĆWICZENIA PRACOWNI CHEMII FIZYCZNEJ

ODPORNOŚĆ KOROZYJNA STALI 316L W PŁYNACH USTROJOWYCH CZŁOWIEKA

NISKO- I WYSOKOTEMPERATUROWE WŁAŚCIWOŚCI LEPISZCZY ASFALTOWYCH A WYMAGANIA KLIMATYCZNE POLSKI

Kinetyka chemiczna jest działem fizykochemii zajmującym się szybkością i mechanizmem reakcji chemicznych w różnych warunkach. a RT.

Widmo akustyczne radia DAB i FM, porównanie okien czasowych Leszek Gorzelnik

Laboratorium Telewizji Cyfrowej

Nazwa kwalifikacji: Obsługa maszyn i urządzeń przemysłu chemicznego Oznaczenie kwalifikacji: A.06 Numer zadania: 01

dr hab. inż. Józef Haponiuk Katedra Technologii Polimerów Wydział Chemiczny PG

KALIBRACJA. ważny etap procedury analitycznej. Dr hab. inż. Piotr KONIECZKA

RHEOTEST Medingen Reometr RHEOTEST RN i wiskozymetr RHEOTEST LK przeznaczone do badań farb, lakierów i innych materiałów malarskich

Laboratorium 5. Wpływ temperatury na aktywność enzymów. Inaktywacja termiczna

Procedura szacowania niepewności

Nazwy pierwiastków: A +Fe 2(SO 4) 3. Wzory związków: A B D. Równania reakcji:

ĆWICZENIE NR 9. Zakład Budownictwa Ogólnego. Stal - pomiar twardości metali metodą Brinella

INSTRUKCJA LABORATORYJNA NR 2-OP BADANIE OGNIW PALIWOWYCH

Dobór materiałów konstrukcyjnych cz. 9

Walidacja metod analitycznych Raport z walidacji

Ćwiczenie N 13 ROZKŁAD CIŚNIENIA WZDŁUś ZWĘśKI VENTURIEGO

INSTRUKCJA DO ĆWICZEŃ LABORATORYJNYCH

Nazwisko i imię: Zespół: Data: Ćwiczenie nr 1: Wahadło fizyczne. opis ruchu drgającego a w szczególności drgań wahadła fizycznego

RHEOTEST Medingen. Lepkościomierz laboratoryjny RHEOTEST LK do kontrolowania stężenia roztworów chłodzących w urządzeniach do hartowania.

Instrukcja ćwiczenia laboratoryjnego HPLC-2 Nowoczesne techniki analityczne

Nazwisko i imię: Zespół: Data: Ćwiczenie nr 11: Moduł Younga

ĆWICZENIE 1 STATYCZNA PRÓBA ROZCIĄGANIA METALI - UPROSZCZONA. 1. Protokół próby rozciągania Rodzaj badanego materiału. 1.2.

K05 Instrukcja wykonania ćwiczenia

d[a] = dt gdzie: [A] - stężenie aspiryny [OH - ] - stężenie jonów hydroksylowych - ] K[A][OH

Transkrypt:

Osteoarthritis & Cartilage (1) "Badanie porównawcze właściwości fizykochemicznych dostawowych Kwasów Hialuronowych" Odpowiedzialny naukowiec: Dr.Julio Gabriel Prieto Fernandez Uniwersytet León,Hiszpania León, PAŹDZIERNIK 2016 i

PRZEDSTAWIONE CELE: Konkretne cele niniejszego projektu są następujące: 1. Przygotowanie i przeprowadzenie charakterystyki reologicznej poprzez moduł sprężystości i moduł lepkości (G' i G') kwasu hialuronowego "Chondrovital Gel 2,5%, 3 ml 2. Określenie masy cząsteczkowej tychże kwasów hialuronowych, poprzez HPLC techniką SEC. ZASTOSOWANY MATERIAŁ: Aby zrealizować założone cele projektu, postępowaliśmy zgodnie z protokołem, według którego przeprowadzone zostały trzy powtórzenia dla każdego pomiaru badanej próbki Chondrovital Gel 2,5% (SERIA: CGP35300, DATA WAŻN. 2018-09). 1. Właściwości reologiczne: W celu pomiaru właściwości reologicznych zastosowano tryb oscylacyjny, jako że dla produktów lepkosprężystych jest on bardziej adekwatny. Zastosowana została częstotliwość wzrastająca od 0,01Hz do 20Hz z naprężeniem (20 Pa), które zostało wybrane dla celów badania zgodnie z wynikami otrzymanymi w badaniu wstępnym, w którym zostało określone naprężenie dla lepkosprężystości liniowej (VLR), jako średnia naprężeń między różnymi konsystencjami cieczy do badań. Zastosowana została geometria najbardziej odpowiednia do otrzymania dobrej powtarzalności pomiarów, czyli stożekpłytka (40 mm). Parametry, takie jak moduł dynamiczny sprężystości lub moduł przechowywania (G') (który oznacza przechowywanie sprężyste energii odnawialnej odkształcenia w ciele stałym elastycznym) i moduł lepkości lub moduł stratności (G") (który opisuje rozpraszanie elastyczne lub stratność energii poprzez stałe odkształcanie cieczy), które m.in. są bardzo przydatne w charakteryzowaniu lepkosprężystych właściwości roztworów polimerowych, w naszym badaniu kwasu hialuronowego, oraz również chciano podkreślić funkcję biomechaniczną tych cieczy przeznaczonych do uzupełniania płynu stawowego. W laboratorium przeprowadzone zostały badania próbek kwasu hialorunowego opisanego powyżej, z którego w wyniku różnych powtórzeń otrzymano średnie wartości. Wykresy mogą pokazać następujące wyniki: Odnośnie lepkosprężystości, może być przedstawiona w łatwy sposób za pomocą wykresu modułów lepkości i sprężystości vs częstotliwość, ukazując oba składniki produktów lepkosprężystych (Tabela 1 i Rys. 1): Na Rys. 1 przedstawione są modele reologiczne w zestawieniu, w porównaniu z innymi wynikami doświadczeń otrzymanymi przez naszą grupę w innych kwasach hialuronowych (zaznaczonych A, B, C. D, E). Trzeba wziąć pod uwagę, że im mniejsze będą częstotliwości, przy których produkt osiągnie punkt podziału pasma ("cross over point"), tym większe będzie miał właściwości sprężyste. Oczekuje się, że przy zwiększeniu masy cząsteczkowej i stężenia, punkt podziału 2 pasma

zostanie osiągnięty przy niższych częstotliwościach. W naszym przypadku otrzymujemy efekt synergiczny obu parametrów (wysoka m. cz. i wysokie stężenie). Tabela 1. "Cross Over point" Produkty Częst. (Hz) G'=G"(Pa) A 0,07 28,21 B 0,185 83,10 C 0,165 30,43 D 0,51 111,93 E 0,60 268,10 Chondrovital Gel 0,06 ± 0,006 182,23 ± 6,40 Rysunek 1 3

1. - Badanie odporności na degradację: 1.1 - Degradacja chemiczna z rodnikami OH, przez zastosowanie reakcji Fentona. Z każdej próbki pobrano równo 200mg, które zostały zinkubowane w 37 C przez 24 godziny, następnie dodano 10 pl H2O2, po czym mieszając energicznie przez 1 min, kontynuowano kinetykę degradacji metodą HPLC opisaną w projekcie. Wyniki będą mierzone w różnych odstępach czasu między 0 a 90 minutami (0, 15, 30, 45, 60, 75, y 90) po uprzednim dodaniu H2O2. Badania zostały przeprowadzone trzykrotnie. Wykres porównujący wszystkie próbki, otrzymany jako średni wynik trzech powtórzeń: Tabela 2. t reakcja % rem prom 0 100 15 93,5 ± 4,8 30 92,6 ± 4,6 45 91,5 ± 4,9 60 91,2 ± 4,4 75 90,4 ± 4,6 90 90,2 ± 4,5 1.2 - Degradacja enzymatyczna, poprzez reakcję z hialuronidazą. Z każdej próbki pobrano równo 150 mg, które wprowadzono w reakcję z 50UI otrzymując objętość końcową hialuronidazy z jądra wołu (H3884 - Sigma), gdzie kinetyka reakcji była mierzona co 15 minut w HLPC w temperaturze 37 C w strumienicy. Jako początek reakcji ustanawia się fiolkę z próbkę bez reakcji, przyjmując jako wartość reakcji 0 (t 0 ). W Tabeli 3 przedstawiono degradację w procentach: Tabela 3. t reakcja % rem prom 0 100 15 95,1 ± 3,4 30 88,6 ± 3,0 45 86,3 ± 3,1 60 84,6 ± 3,0 75 83,5 ± 2,7 90 82,6 ± 2,2 4

2. - Określenie masy cząsteczkowej: Masa cząsteczkowa obliczana jest za pomocą uprzedniej budowy wzorca standardowego, w którym użyte zostały wzorce Kwasu hialuronowego o znanej masie cząsteczkowej (pochodzące z Life Score) poprzez HPLC techniką SEC (GPC), która oparta jest na określaniu czasu retencji dla każdej użytej masy cząsteczkowej. Otrzymano reprezentację liniową przedstawiając Log m.cz. vs czas retencji (tr) Otrzymane równanie dla krzywej standardowej: Y (Log m. cz.) = -0,4829 x tr + 6,5644 (R 2 = 0,9943) Jako że tr dla Chondrovital Gel wynosi 6,45 zastosowanie tego równania pozwala nam otrzymać wartość przybliżoną dla jej masy cząsteczkowej 2840 KDa. Wnioski Wyniki otrzymane w badaniu reologicznym wskazują na bardzo korzystne zachowanie lepkosprężyste jako konsekwencję efektu synergicznego wysokiego stężenia kwasu hialuronowego i stosunkowo dużej masy cząsteczkowej, nie będąc produktem wynikającym z procesów crossing-over. Otrzymano wysoką twardość (182,23 Pa) w punkcie podziału pasma, gdzie występuje zmiana w zachowaniu z "lepkiego" na "sprężysty". Ta wysoka twardość ukazuje zdolność zmniejszania ścinania się stawu podczas chodzenia i oferowania większej lubrykacji, aby zapobiec uszkodzeniu chrząstki, a tym samym w celu jej ochrony. W odniesieniu do właściwości sprężystych, produkt wykazuje wysoką sprężystość przy niskiej częstotliwości (0,06Hz), umieszczając go w tym zakresie na czele kwasów hialuronowych o największej sprężystości, które są dostępne obecnie na rynku (Rysunek 1). 5