Sprawozdanie ze spotkania Sekcji Mikrobiologicznej ICUMSA w Cambridge, lipiec 2012. Dr inż. Agnieszka Papiewska Instytut Chemicznej Technologii Żywności PŁ Zakład Cukrownictwa
V spotkanie europejskich mikrobiologów pracujących dla przemysłu cukrowniczego odbyło się w Cambridge 16 lipca 2012 podczas 28 sesji ICUMSA 2
3 S12=S6 Microbiology: Referee Dr Maritta Jacobs Pfeifer & Langen Rozwój/Technologia/Analityka Elsdorf Associate Referees Virginie Adam (Francja) Wim Antheunis (Belgia) Dr Christer Bergwall (Szwecja) Miriam van den Bliek (Holandia) Dr Claudia Graue (Niemcy) B. Forse (Guyana) Mark Goddard (Wielka Brytania) Eva Horváth (Węgry) Dr Michael Klingeberg (Niemcy) Prof. Dr Diego Matteuzzi (Włochy) Dr S. S. Nimbalkar (Indie) Dr Agnieszka Papiewska (Polska) Marja Pelo (Finlandia) Indrani S. Samaraweera (USA) S. Saumtally (Mauritius) Jiri Smolik (Czechy) Dr Eberhard Stoppok (Niemcy) Defne Süral (Turcja)
Uczestnicy spotkania: Wim Antheunis - Südzucker, Cukrownia Tienen, Belgia Christer Bergwall - Nordzucker Group (Nordic Sugar) Miriam van den Bliek - COSUN (Food Technology Centre), Holandia Mark Goddard - British Sugar, Cukrownia Wissington Anglia Claudia Graue - fuel21 (Nordzucker), Niemcy 4 Maritta Jacobs - Pfeifer & Langen, Niemcy Michael Klingeberg - ZAFES Südzucker, Niemcy
Goście: Veronique Breyne - Coca Cola Services, European Quality Centre Brussels Liz Liddar - Supplier Quality Manager of Coca Cola Enterprises Barbara Kimborowicz - Tate&Lyle Sugars Philip Naylor - British Sugar, Quality & Food Safety Manager 5
Przegląd 2011/2012 Dr Maritta Jacobs - Pfeifer & Langen podsumowała pytania pojawiające się w ostatnim czasie: metody mikrobiologiczne ICUMSA nigdy nie zostały poddane walidacji. Zostają one uznane za "oficjalne, nie ma specjalnej metody ICUMSA do wykrywania Staphylococcus aureus w cukrze i należy użyć na przykład metody ISO przeznaczonej do badania żywności 6
Oznaczanie osmotolerancyjnych drożdży Miriam van den Bliek COSUN (Food Technology Centre) krótki przegląd literatury i wyniki badań własnych nt. oznaczania osmotolerancyjnych drożdży: 7 nie stosowanie podłoża Fruktoza agar o niskiej a w =0,82 stosowane do wykrywania organizmów osmotolerancyjnych; otrzymywanie lepszych wyników przy DG-18 agar (Oxoid CM 729 oraz Oxoid SR 78) a w =0,96 lub DG-agar 18 S, który zawiera również 20% sacharozy i 5% glukozy a w = 0,93
Oznaczanie osmotolerancyjnych drożdży c.d. Miriam van den Bliek - COSUN (Food Technology Centre) krótki przegląd literatury i wyniki badań własnych nt. oznaczania osmotolerancyjnych drożdży: jako płynu do rozcieńczania oznaczanych mikroorganizmów jak i płukania urządzenia stosowanego w metodzie filtracyjnej należy używać 20% roztworu sacharozy zapobiegnie to rozrywaniu komórek drożdży przyzwyczajonych do wysokiego ciśnienia osmotycznego 8
Oznaczanie osmotolerancyjnych drożdży c.d. Miriam van den Bliek - COSUN (Food Technology Centre) krótki przegląd literatury i wyniki badań własnych nt. oznaczania osmotolerancyjnych drożdży: 9 Wniosek: uczestnicy zdecydowali o stworzeniu nowej metody ICUMSA do oznaczania osmotolerancyjnych drożdży stosując: podłoże Agar DG-18 S 20% roztwór sacharozy jako płyn do rozcieńczeń inkubację 30 C przez 5 do 7 dni
10 Alicyclobacillus Od 2009 roku europejscy producenci cukru przebadali próby cukru krystalicznego, syropu z cukru inwertowanego i inne syropy na obecność Alicyclobacillus. Żaden z uczestników nie zgłosił wyników obecności Alicyclobacillus lub szczepów tworzących gwajakol w 50g (suchej masy) cukru wyprodukowanego z buraków cukrowych. Veronique Breyne (Coca Cola) przedstawiła informacje o pozytywnych wynikach w niektórych próbach przy czym były to małe liczby. Alicyclobacillus nie spowoduje żadnych problemów w roztworach zawierających CO 2, ale pojawiły się problemy w napojach nie konserwowanych. Dlatego Coca Cola utworzyła nową specyfikację dla cukru, w której zawarato wymogi odnośnie TAB czyli termofilnych bakterii kwasolubnych takich jak Alicyclobacillus.
Alicyclobacillus można wykryć w surowym cukrze trzcinowym. W rafinowanym cukrze buraczanym wykrycie jest bardzo rzadkie. Wytwarzanie krystalicznego cukru przeprowadza się w temperaturze i przy wartości ph, przy której nawet przetrwalniki Alicyclobacillus trudno przeżywają. Nawet jeżeli doszłoby do wtórnego zanieczyszczenia produktu przez Alicyclobacillus, to wzrost komórek będzie utrudniony ze względu na zbyt niską aktywność wody w krystalicznym cukrze. 11
Specyfikacja Coca Coli TAB <1000 jtk w 50 g cukru s.s. dla próby płynnej w równoważnej objętości zawierającej 50 g cukru TAB produkujące gwajakol nieobecny w 50 g cukru s.s. dla próby płynnej w równoważnej objętości zawierającej 50 g cukru 12
Mark Goddard poinformował uczestników, że LGC zamierza wprowadzić do standardów próbkę zawierającą Alicyclobacillus w Sugar Proficiency Scheme czyli Programie Biegłości Cukru 13 SUPS system badań biegłości (mikrobiologia)
Rekomendacja ICUMSA Method GS2/3-50 (2012) The Determination of Thermophilic Acidophilic Bacteria (TAB), especially Alicyclobacillus in Refined Sugar Products obecnie sprawdzana w badaniach międzylaboratoryjnych 14
Legionella w wodzie wież chłodniczych Christer Bergwall (Szwecja) stosuje metodę PCR do oznaczania bakterii Legionella, która jest wymagana przez prawo i jest jedyną akceptowaną metodą do urzędowej kontroli. Granica wykrywalności tej metody wynosi około 100 jtk/litr. 15 Czasami, Legionella może być wykryta w wodzie wież chłodniczych w cukrowni lub z innych dołączonych zespołów fabrycznych. Badania tej pory pokazują konkurencję między różnymi rodzajami bakterii im wyższa całkowita liczba, tym mniejsza liczba bakterii Legionella
Legionella w wodzie wież chłodniczych Chemical Oxygen Demand (mg/l) Biofilm Total Count (cfu/ml) Legionella (cfu/ml) Leg + <50-1,000 10,000 > 10,000 Leg - 200 1,500 +++ > 1,000,000 < 10 16 PCR - (ang. polymerase chain reaction) łańcuchowa reakcja polimerazy to reakcja służąca do amplifikacji (namnożenia) wybranego fragmentu DNA in vitro
Enterobacteriaceae Do tej pory nie było metody ICUMSA odnośnie wykrywania Enterobacteriaceae / Bakterie coli typu kałowego / E.coli. Dlatego też uczestnicy zdecydowali, że nowa metoda ICUMSA powinna zostać skonfigurowana - wnioski będą omawiane podczas spotkania w przyszłym roku. 17