PRÓBKI Kr¹ ków tych nie mo na u ywaæ bezpoœrednio do próbek klinicznych lub innych Ÿróde³ zawieraj¹cych florê mieszan¹ Aby przeprowadziæ wstêpn¹ ident

Transkrypt

1 BBBL Taxo ONPG Discs do wykrywania drobnoustrojów powoduj¹cych fermentacjê laktozy Zobacz objaœnienie symboli na koñcu ulotki /10 Polski U PRZEZNACZENIE Kr¹ ki Taxo ONPG Discs s¹ stosowane do wykrywania drobnoustrojów powoduj¹cych fermentacjê laktozy S¹ wykorzystywane g³ównie do wykrywania drobnoustrojów, które z trudem wywo³uj¹ fermentacjê laktozy na niektórych tradycyjnych pod³o ach, takich jak Triple Sugar Iron Agar (TSI Agar) lub Kligler Iron Agar STRESZCZENIE I OBJAŒNIENIE Fermentacja laktozy jest powszechnie stosowan¹ biochemiczn¹ metod¹ do ró nicowania drobnoustrojów, ³¹cznie z Enterobacteriaceae Szybkoœæ fermentacji zale y od permeazy laktozy, która aktywnie przenosi laktozê przez b³ony komórkowe, oraz obecnoœci w komórce enzymu β-galaktozydazy hydrolizuj¹cego laktozê Drobnoustroje niewywo³uj¹ce fermentacji laktozy nie zawieraj¹ enzymu β-galaktozydazy Jednak pewne drobnoustroje fermentuj¹ce laktozê, które nie posiadaj¹ permeazy, s¹ niezdolne do fermentacji, poniewa dyfuzja laktozy do komórki przebiega powoli i nie mo e byæ wykryta na pod³o u fermentacji wêglowodanów 1 Zastosowanie substratu chromogennego hydrolizowanego przez β-galaktozydazê, ale niezale nego od obecnoœci permeazy pozwala na szybkie wykrycie fermentacji laktozy na podstawie barwy podczas reakcji ZASADA PROCEDURY β-galaktozydaza jest enzymem indukcyjnym, wystêpuj¹cym w drobnoustrojach fermentuj¹cych laktozê, które powoduj¹ hydrolizê laktozy do galaktozy i dekstrozy 2 Enzym hydrolizuje tak e substrat orto-nitrofenylo-β-d-galaktozydazê (ONPG), który nie wymaga obecnoœci permeazy laktozy, aby wejœæ do komórki W wyniku hydrolizy ONPG powstaje ó³ty produkt, ortonitrofenol Test mo na przeprowadzaæ bezpoœrednio na gêstej zawiesinie bakteryjnej w soli lub na pod³o u inkubowanym w bulionie peptonowym, np Trypticase Soy Broth lub Tryptophan (Trypticase) Broth, 1% Po dodaniu do zawiesiny lub hodowli kr¹ ka Taxo ONPG Disc probówkê nale y inkubowaæ w temperaturze 35 C przez 4-6 h i sprawdzaæ, czy pojawia siê ó³ta barwa ODCZYNNIKI Kr¹ ki Taxo ONPG Discs o œrednicy 6 mm s¹ wykonane z wysokiej jakoœci papieru absorpcyjnego, impregnowanego oko³o 100 µg o-nitrofenylo-β-d-galaktopiranozydem na kr¹ ek Ostrze enia i œrodki ostro noœci: Do stosowania w diagnostyce in vitro Podczas wykonywania wszystkich procedur nale y przestrzegaæ zasad aseptyki i obowi¹zuj¹cych œrodków ostro noœci, dotycz¹cych zagro enia mikrobiologicznego Po u yciu probówki oraz inne ska one materia³y nale y przed wyrzuceniem poddaæ sterylizacji w autoklawie Instrukcja przechowywania: Po otrzymaniu przechowywaæ w temperaturze od -20 do +8 C Po u yciu przechowywaæ w temperaturze od 2 do 8 C, aby zachowaæ trwa³oœæ produktu Data wa noœci dotyczy nieotwartych pojemników przechowywanych zgodnie z zaleceniami Nie otwieraæ do chwili u ycia Nale y zu yæ najpierw najstarsze kr¹ ki, a przeterminowane odrzuciæ Przed otwarciem nale y pozostawiæ fiolki do uzyskania temperatury pokojowej Fiolki z niezu ytymi kr¹ kami w³o yæ z powrotem do ch³odziarki Wyrzuciæ fiolkê, z której w ci¹gu tygodnia czêsto wyjmowano kr¹ ki Wyrzuciæ wszystkie fiolki pozostawione w temperaturze pokojowej przez noc

2 PRÓBKI Kr¹ ków tych nie mo na u ywaæ bezpoœrednio do próbek klinicznych lub innych Ÿróde³ zawieraj¹cych florê mieszan¹ Aby przeprowadziæ wstêpn¹ identyfikacjê drobnoustrojów, nale y je najpierw wyizolowaæ jako odrêbne kolonie, nanosz¹c próbki na odpowiednie pod³o a hodowlane, i wykonywaæ polecenia zgodnie z opisem zawartym w rozdziale Procedura testowa PROCEDURA Dostarczane materia³y: Kr¹ ki Taxo ONPG Discs Materia³y wymagane, ale niedostarczane: Pomocnicze pod³o a hodowlane, odczynniki, szczepy do kontroli jakoœci i sprzêt laboratoryjny wymagany do wykonania tej procedury Procedura testowa: Test jest zazwyczaj stosowany do badania drobnoustrojów po posiewach na skoœnych pod³o ach TSI Agar lub Kligler Iron Agar Jest szczególnie przydatny w badaniu hodowli niewykazuj¹cych fermentacji lub wykazuj¹cych jedynie fermentacjê dekstrozy na tych dwóch powszechnie stosowanych pod³o ach 1 Przygotowaæ probówki zawieraj¹ce 0,5 ml Trypticase Soy Broth lub Tryptophan (Trypticase) Broth, roztwór 1% Zamiast tego mo na przygotowaæ probówki zawieraj¹ce 0,2 ml soli fizjologicznej (roztwór chlorku sodu 0,85 %) 2 Wykonaæ w probówce z bulionem lub roztworem soli posiew z zagêszczonego inokulum badanych mikroorganizmów pobranego ze skosu z agarem TSI lub agarem Kligler Iron, ewentualnie z powierzchni œwie ej p³ytki z hodowl¹ pochodn¹ 3 Stosuj¹c technikê aseptyczn¹, umieœciæ po jednym kr¹ ku ONPG w ka dej probówce z posiewem i w jednej probówce kontrolnej bez posiewu 4 Inkubowaæ probówki w temperaturze 35 C 5 Po 4-6 h od inkubacji odczytaæ i zapisaæ reakcje (pojawienie siê ó³tej barwy lub jej brak) Przed wyrzuceniem probówek okreœlonych jako ujemne inkubowaæ probówki wykazuj¹ce reakcjê ujemn¹ w ci¹gu 24 h Kontrola jakoœci przez u ytkownika: Podczas u ywania sprawdziæ skutecznoœæ przy u yciu czystych hodowli stabilnych szczepów kontrolnych, wywo³uj¹cych znane, po ¹dane reakcje Zalecane jest zastosowanie nastêpuj¹cych szczepów kontrolnych: SZCZEPY TESTOWE Escherichia coli ATCC Morganella morganii ATCC 8019 OCZEKIWANE WYNIKI + (kolor ó³ty) (brak zmiany barwy) Musz¹ byæ spe³nione wymagania dotycz¹ce kontroli jakoœci okreœlone w odpowiednich przepisach lokalnych i/lub krajowych albo warunkach akredytacji; konieczne jest przestrzeganie standardowych wewnêtrznych procedur kontroli jakoœci danego laboratorium Zaleca siê, aby u ytkownik stosowa³ siê do odpowiednich zaleceñ CLSI (dawniej NCCLS) i przepisów CLIA, dotycz¹cych sposobów kontroli jakoœci WYNIKI Pojawienie siê koloru ó³tego wskazuje reakcjê fermentacji laktozy OGRANICZENIA PROCEDURY1, 2 Aby uzyskaæ wysokie stê enie enzymu oraz szybki przebieg reakcji, niezbêdny jest posiew o du ym stê eniu Testu nie nale y stosowaæ do badania bakterii zabarwionych ó³to, chyba e przed interpretacj¹ wyników zawiesina najpierw zostanie odwirowana CHARAKTERYSTYKA WYNIKÓW Przed dopuszczeniem do u ycia wszystkie serie kr¹ ków Taxo ONPG sprawdza siê pod wzglêdem skutecznoœci Próbki reprezentatywne danej serii dla ka dego badanego drobnoustroju nale y umieœciæ w probówkach z bulionem Tryptophan Broth, 1%, i w soli fizjologicznej W probówkach nale y nastêpnie wykonaæ posiew hodowl¹ Escherichia coli (ATCC 25922), Morganella morganii (ATCC 8019) i Shigella sonnei (ATCC 9290) o du ym stê eniu Po wykonaniu posiewu nale y inkubowaæ probówki w temperaturze 35 ± 2 C Po 4-6 h inkubacji probówki s¹ kontrolowane pod k¹tem pojawienia siê ó³tego zabarwienia Probówki, w których wyst¹pi³a reakcja ujemna, s¹ dodatkowo inkubowane przez h przed pozbyciem siê ich jako ujemne Bakterie E coli i S sonnei cechuj¹ siê dodatni¹ reakcj¹ z kr¹ kami ONPG, co sygnalizuje 2

3 pojawienie siê ó³tej barwy w probówkach W przypadku bakterii M morganii w probówkach brak jest ó³tej barwy, co oznacza reakcjê ujemn¹ DOSTÊPNOŒÆ Nr kat Opis Taxo ONPG Discs, pojedyncza fiolka zwieraj¹ca 50 kr¹ ków Taxo ONPG Discs, opakowanie 6 fiolek PIŒMIENNICTWO 1 Baron, E J, L R Peterson, and S M Finegold 1995 Bailey & Scott s diagnostic micro biology, 9th ed Mosby Year Book, Inc, St Louis 2 MacFaddin, J F 2000 Biochemical tests for identification of medical bacteria, 3rd ed Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore 3

4 m e r A I 0 Manufacturer / Výrobce / Producent / Fabrikant / Tootja / Valmistaja / Fabricant / Hersteller / ÊáôáóêåõáóôÞò / Gyártó / Ditta produttrice / Gamintojas / Producent / Fabricante / Výrobca / Tillverkare Use by / Spotøebujte do / Anvendes før / Houdbaar tot / Kasutada enne / Viimeinkäyttöpäivä / A utiliser avant / Verwendbar bis / Çìåñïìçßá ëþîçò / Felhasználhatóság dátuma / Usare entro / Naudokite iki / Brukes før / Stosowaæ do / Utilizar em / Použite do / Usar antes de / Använd före / YYYY-MM-DD / YYYY-MM (MM = end of month) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = konec mìsíce) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutning af måned) / JJJJ-MM-DD / JJJJ-MM (MM = einde maand) AAAA-KK-PP / AAAA-KK (KK = kuu lõpp) VVVV-KK-PP / VVVV-KK (kuukauden loppuun mennessä) AAAA-MM-JJ / AAAA-MM (MM = fin du mois) / JJJJ-MM-TT / JJJJ-MM (MM = Monatsende) / ÅÅÅÅ-ÌÌ-ÇÇ / ÅÅÅÅ-ÌÌ (ÌÌ = ôýëïò ôïõ ìþvá) / ÉÉÉÉ-HH-NN / ÉÉÉÉ-HH (HH = hónap utolsó napja) AAAA-MM-GG / AAAA-MM (MM = fine mese) / MMMM-MM-DD / MMMM-MM (MM = mënesio pabaiga) ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutten av måneden) RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec miesi¹ca) AAAA-MM-DD / AAAA-MM (MM = fim do mês) / RRRR-MM-DD / RRRR-MM (MM = koniec mesiaca) aaaa-mm-dd / aaaa-mm (mm = fin del mes) / ÅÅÅÅ-MM-DD / ÅÅÅÅ-MM (MM = slutet på månaden) Catalog number / Katalogové èíslo / Katalognummer / Catalogusnummer / Kataloogi number / Tuotenumero / Numéro catalogue / Bestellnummer / Áñéèìüò êáôáëüãïõ / Katalógusszám / Numero di catalogo / Katalogo numeris / Numer katalogowy / Número do catálogo / Katalógové èíslo / Número de catálogo Authorized Representative in the European Community / Autorizovaný zástupce pro Evropskou unii / Autoriseret repræsentant i EU / Erkend vertegenwoordiger in de Europese Unie / Volitatud esindaja Euroopa Nõukogus / Valtuutettu edustaja Euroopan yhteisössä / Représentant agréé pour la C E E / Autorisierte EG- Vertretung / ÅîïõóéïäïôçìÝíïò áíôéðñüóùðïò óôçí ÅõñùðáúêÞ Êïéíüôçôá / Hivatalos képviselet az Európai Unióban / Rappresentante autorizzato nella Comunità europea / Ágaliotasis atstovas Europos Bendrijoje / Autorisert representant i EU / Autoryzowane przedstawicielstwo w Unii Europejskiej / Representante autorizado na União Europeia / Autorizovaný zástupca v Európskom spoloèenstve / Representante autorizado en la Comunidad Europea / Auktoriserad representant i EU In Vitro Diagnostic Medical Device / Lékaøské zaøízení urèené pro diagnostiku in vitro / In vitro diagnostisk medicinsk anordning / Medisch hulpmiddel voor in vitro diagnose / In vitro diagnostika meditsiiniaparatuur / Lääkinnällinen in vitro - diagnostiikkalaite / Dispositif médical de diagnostic in vitro / Medizinisches Invitro-Diagnostikum / In vitro äéáãíùóôéêþ éáôñéêþ óõóêåõþ / In vitro diagnosztikai orvosi eszköz / Dispositivo medico diagnostico in vitro / In vitro diagnostikos prietaisas / In vitro diagnostisk medisinsk utstyr / Urz¹dzenie medyczne do diagnostyki in vitro / Dispositivo médico para diagnóstico in vitro / Medicínska pomôcka na diagnostiku in vitro / Dispositivo médico de diagnóstico in vitro / Medicinsk anordning för in vitro-diagnostik Temperature limitation / Teplotní omezení / Temperaturbegrænsning / Temperatuurlimiet / Temperatuuri piirang / Lämpötilarajoitus / Température limite / Zulässiger Temperaturenbereich / ¼ñéï èåñìïêñáóßáò / Hõmérsékleti határ / Temperatura limite / Laikymo temperatûra / Temperaturbegrensning / Ograniczenie temperatury / Limitação da temperatura / Ohranièenie teploty / Limitación de temperatura / Temperaturbegränsning 4

5 L Batch Code (Lot) / Kód (èíslo) šarže / Batch kode (Lot) / Chargenummer (lot) / Partii kood / Eräkoodi (LOT) / Code de lot (Lot) / Chargencode (Chargenbezeichnung) / Êùäéêüò ðáñôßäáò (Ðáñôßäá) / Tétel száma (Lot) / Codice del lotto (partita) / Partijos numeris (Lot) / Batch-kode (Serie) / Kod partii (seria) / Código do lote (Lote) / Kód série (šarža) / Código de lote (Lote) / Satskod (parti) T Contains sufficient for <n> tests / Dostateèné množství pro <n> testù / Indeholder tilstrækkeligt til <n> test / Voldoende voor <n> tests / Küllaldane <n> testide jaoks / Sisältöon riittävä <n> testejä varten / Contenu suffisant pour <n> tests / Ausreichend für <n> Tests / ÐåñéÝ åé åðáñêþ ðïóüôçôá <n> åîåôüóåéò / <n> teszthez elegendõ / Contenuto sufficiente per <n> test / Pakankamas kiekis atlikti <n> testø / Innholder tilstrekkelig for <n> tester / Zawiera iloœæ wystarczaj¹c¹ do <n> testów / Contémo suficiente para <n> testes / Obsah vystaèí na <n> testov / Contenido suficiente para <n> pruebas / Räckertill <n> antal tester m Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland USA A BENEX Limited Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon, County Clare, Ireland Tel: Fax: ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD, BD Logo, Taxo, Trypticase and BBL are trademarks of Becton, Dickinson and Company 2005 BD