(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:

Transkrypt

1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: (13) (51) T3 Int.Cl. C07D 475/04 ( ) A61K 31/519 ( ) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: Europejski Biuletyn Patentowy 2013/22 EP B1 (54) Tytuł wynalazku: Sposób wytwarzania L-biopteryny (30) Pierwszeństwo: JP (43) Zgłoszenie ogłoszono: w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2007/37 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: Wiadomości Urzędu Patentowego 2013/10 (73) Uprawniony z patentu: Shiratori Pharmaceutical Co., Ltd., Narashino, JP Daiichi Sankyo Company, Limited, Tokyo, JP (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP T3 SHINNOSUKE TAZAWA, Chiba, JP (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Aleksandra Twardowska KANCELARIA PATENTOWA KULIKOWSKA & KULIKOWSKI SP.J. SKR. POCZT Warszawa 12 Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).

2 22629/EP/13 EP B1 Opis Dziedzina wynalazku [0001] Wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania L-biopteryny na skalę przemysłową. Stan techniki [0002] L-biopteryna jest znana w dziedzinie jako surowiec do wytwarzania chlorowodorku sapropteryny (sól chlorowodorkowa L-tetrahydrobiopteryny). Chlorowodorek sapropteryny jest lekiem stosowanym do leczenia atypowej hiperfenyloalaninemii. Mimo, że chlorowodorek sapropteryny zazwyczaj wytwarza się przez redukcję L-biopteryny, istnieje coraz większe zapotrzebowanie na opracowanie ulepszonego sposobu wytwarzania tego materiału wyjściowego, a mianowicie L- biopteryny, w sposób dostosowany do jego produkcji na dużą skalę. [0003] Dotychczas znane jest wytwarzanie L-biopteryny z użyciem 1',1'-dietylosulfonylo-L-ramnozy (tlenek REM) jako materiału wyjściowego i prowadzi się je przez związek fenylohydrazonowy jako jego produkt pośredni. (Patrz literatura niepatentowa 1.) Znane w stanie techniki sposoby syntezy tego związku fenylohydrazonowego jako syntetycznego półproduktu L- biopteryny obejmują otrzymywanie związku fenylohydrazonowego z L-ramnozy jako materiału wyjściowego poprzez dietylo tioacetal L-ramnozę (REM), a następnie 5-deoksy-L-arabinozę (5-DA) jako produkty pośrednie (patrz literatura patentowa 1 i 2 literatura niepatentowa) uzyskując związek

3 2 fenylohydrazonowy z L-arabinozy przez 5-DA (patrz literatura patentowa 2.) uzyskując związek fenylohydrazonowy z kwasu winowego (patrz literatura niepatentowa 3 i 4), uzyskując związek fenylohydrazonowy z R-rybozy (patrz literatura patentowa 3). [0004] Jednak znany ze stanu techniki sposób przygotowywania fenylohydrazonowego związku rybozy z kwasu winowego lub R- rybozy nie jest odpowiedni do produkcji na skalę przemysłową, gdyż taka metoda obejmuje dłuższy proces i mniejszą wydajność i gdyż niskotemperaturowy etap lub etap rafinacji w żelu krzemionkowym jest częścią tego procesu. Jednocześnie, opisany powyżej inny sposób wytwarzania związku fenylohydrazonoego bezpośrednio z L-ramnozy lub z L-ramnozy poprzez 5-DA wymaga takich procesów, które są niekorzystne z punktu widzenia produkcji na skalę przemysłową, w tym zatężania z wody i rafinacji w żywicy przez odsalanie w celu wydzielenia 5-DA, i zatężanie roztworu reakcyjnego za pomocą RO (odwrócona osmoza) lub podobnego wyposażenia. [0005] Otrzymany związek fenylohydrazonowy poddaje się reakcji ze środkiem acetylującym w pirydynie do uzyskania triacetylowanego związku, który następnie kondensuje się i poddaje cyklizacji z 6-hydroksy-2,4,5-triaminopirymidyną (TAU) w obecności wraz z octanem sodu w celu otrzymania pochodnej biopteryny. Po utlenieniu z użyciem jodu lub innego odczynnika utleniającego, pochodną biopteryny poddaje się deacetylacji (hydrolizie) do wytworzenia L-biopteryny. Jednakże proces acetylowania stosowany w opisanym powyżej stanie techniki wymaga użycia nadmiernej ilości pirydyny z ogromnym wzrostem ilości mieszaniny reakcyjnej stosowanej

4 3 w kolejnych procesach, co powoduje zmniejszenie wydajności. Ponadto, opisana powyżej cyklizacja dostarczona zasadniczo jako kontynuacja poprzedniego procesu nieuchronnie pociąga za sobą stosowanie ogromnej ilości roztworu reakcyjnego, przy czym zmniejszanie objętości rozpuszczalnika reakcji powoduje znaczne obniżenie wydajności, ze względu na rozpuszczalność TAU. Ponadto opisany powyżej sposób znany ze stanu techniki nie jest odpowiedni do produkcji na dużą skalę przemysłową L- biopteryny, ponieważ jod stosowany jako środek utleniający w procesie utleniania jest nie tylko kosztowny, ale również wykazuje sublimację i toksyczność mogącą powodować problemy w odniesieniu do bezpieczeństwa zdrowotnego pracy i oczyszczania ścieków. [Literatura patentowa 1] Japońskie opublikowane niebadane zgłoszenie patentowe JP S [Literatura patentowa 2] Europejska opublikowane niebadane zgłoszenie patentowe EP [Literatura patentowa 3] Europejska opublikowane niebadane zgłoszenie patentowe EP [Literatura niepatentowa 1] Helv. Chim. Acta 68 (6), 1639/43 (1985) [Literatura Niepatentowa 2] J. Org. Chem. 1996, 61, [Literatura niepatentowa 3] J. Org. Chem. 1997, 62, Ujawnienie wynalazku Problemy rozwiązane przez wynalazek [0006] Celem wynalazku jest dostarczenie sposobu wytwarzania L-biopteryny w sposób dostosowany do produkcji przemysłowej na dużą skalę przy użyciu odczynnika, który jest niedrogi i łatwy w użyciu, bez konieczności stosowania jakiegokolwiek

5 4 szczególnego urządzenia lub wyposażenia. Ponadto, wynalazek dostarcza taki sposób wytwarzania L-biopteryny, który jest przystosowany do jej produkcji przemysłowej na dużą skalę, który pozwala na zmniejszenie objętości roztworu reakcji, w celu poprawy wydajności. Środki do rozwiązania problemów [0007] W wyniku szeregu badań przeprowadzonych w celu dostarczenia sposobu wytwarzania L-biopteryny w objętości z dobrą wydajnością, twórcy stwierdzili, że przekształcenie w wodnym rozpuszczalniku 5-DA w związek hydrazonowy i rozmieszczanie go w organicznym rozpuszczalniku oddzielając od wody pozwala na uzyskanie sposobu, w którym rezygnuje się z wydzielenia 5-DA i tym samym unika się wszelkich przemysłowo niekorzystnych procesów, takich jak proces zatężania z wody. Ponadto, twórcy stwierdzili, że przeprowadzenie reakcji środka acetylującego ze związkiem hydrazonowym w postaci rozpuszczonej w rozpuszczalniku organicznym umożliwia acetylację tego związku z użyciem tylko katalitycznej ilości dialkiloaminopirydyny. Ponadto, stwierdzono, że w procesie cyklizacji wydajność może ulec poprawie, a objętość stosowanego rozpuszczalnika dla odczynnika może być zmniejszona przez poddanie związku hydrazonowego kondensacji z TAU pod katalizującym wpływem kwasu Lewisa. Co więcej stwierdzono, że w celu uzyskania reakcji utleniającej w procesie utleniania można stosować niedrogi nadtlenek wodoru, i niniejszy wynalazek został dokonany w oparciu o te stwierdzenia wynalazców.

6 5 [0008] W szczególności, przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania pochodnej biopteryny przedstawionej wzorem (6): [0009] w którym podstawniki R 1 i R 2, które są takie same lub różne, mogą oznaczać atom wodoru, grupę alkilową lub grupę arylową, obejmujący: [0010] reakcję związku należącego do hydrazonów triacetoksy- 5-deoksy-L-arabinozy przedstawionych wzorem (4): [0011] w którym R 1 i R 2 są takie same jak określono powyżej, z 6-hydroksy-2,4,5-triaminopirymidyną (5) pod katalizującym wpływem kwasu Lewisa w rozpuszczalniku wodnym. [0012] Ponadto, przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 1,2'-O-diacetylo-L-biopteryny, obejmujący utlenianie pochodnej biopteryny przedstawionej powyższym wzorem (6) otrzymanej sposobem opisanym tuż powyżej.

7 6 [0013] Dalej, przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania L-biopteryny, obejmujący hydrolizę 1,2'-O-diacetylo-Lbiopteryny otrzymanej sposobem opisanym powyżej. [0014] Według wynalazku związek o powyższym wzorze (4), jest otrzymany w reakcji związku o wzorze (3): w którym R 1 i R 2 są takie same jak określono powyżej, ze środkiem acetylującym w obecności katalitycznej ilości dialkiloaminopirydyny. W sposobie wytwarzania związku o powyższym wzorze (4), związek o powyższym wzorze (3) otrzymuje się w reakcji 5- deoksy-l-arabinozy ze związkiem hydrazynowym przedstawionym wzorem (2) (2) w którym R 1 i R 2 są takie same jak zdefiniowano powyżej, w warunkach kwasowych w wodnym lub wodno-organicznym dwuwarstwowym rozpuszczalniku. [0015] Co więcej, opisany jest sposób wytwarzania hydrazonu 5-deoksy-L-arabinozy przedstawionego wzorem (3):

8 7 [0016] w którym R 1 i R 2, które są takie same lub różne, każdy oznacza atom wodoru, grupę alkilową lub grupę arylową, obejmujący: [0017] prowadzenie reakcji 5-deoksy-L-arabinozy ze związkiem hydrazynowym przedstawionym wzorem (2): [0018] (2) w którym R 1 i R 2 są takie same jak zdefiniowano powyżej, w warunkach kwasowych w dwuwarstwowym wodno-organicznym rozpuszczalniku. [Korzystne efekty wynalazku] [0019] Według wynalazku, L-biopteryna może być wytwarzana na skalę przemysłową z użyciem odczynnika, który jest niedrogi i łatwy w użyciu, bez konieczności stosowania jakiegokolwiek konkretnego wyposażenia lub instalacji. Ponadto, wydajność wytwarzania może być znacznie zwiększona dzięki zmniejszonej ilości roztworu reakcyjnego użytego w procesie. [Najlepszy sposób realizacji wynalazku]

9 8 [0020] Sposób wytwarzania L-biopteryny według wynalazku prowadzi się w kilku etapach sposobem przedstawionym poniżej. Poniżej, te etapy sposobu według wynalazku zostaną szczegółowo opisane. [0021] [Wzór chemiczny 7] w którym R 1 i R 2, które są takie same lub różne, oznaczają atom wodoru, grupę alkilową lub grupę arylową [0022] W serii etapów procesu pokazanych powyżej, 5-deoksy-Larabinozę (1) można otrzymać przez utlenianie tioacetalu dietylo L-ramnozy (REM) do wytworzenia 1',1'- dietylosulfonylo-l-ramnozy i poddanie otrzymanej 1',1'- dietylosulfonylo-l-ramnozy hydrolizie, na przykład, zgodnie ze sposobem według Maxa Viscontini, i wsp. opisanym w

10 9 literaturze niepatentowej 1, który został wymieniony tutaj powyżej jako odnośnik. Korzystnie, otrzymaną w ten sposób 5- deoksy-l-arabinozę (1) poddaje się etapowi (a), bez wyodrębniania jej z mieszaniny reakcyjnej. [0023] W etapie (a) poddaje się 5-deoksy-L-arabinozę (1) reakcji ze związkiem hydrazynowym (2) do wytworzenia związku hydrazonowego (3). W tym etapie (a) można zrezygnować z izolacji 5-deoksy-L-arabinozy (1) dzięki przeprowadzeniu hydrazonowania w warunkach kwasowych, w wodzie i oddzielenie związku hydrazonowego osadzając go przez filtrację. Poza tym, poprzez zastosowanie dwuwarstwowego wodno-organicznego rozpuszczalnika jako rozpuszczalnika reakcji tak, aby rozmieścić wytworzony związek hydrazonowy (3) w rozpuszczalniku organicznym, proces może być przeprowadzany w sposób ciągły. Grupy alkilowe reprezentowane przez R 1 i R 2 w powyższym wzorze (2) są prostymi lub rozgałęzionymi niższymi grupami alkilowymi mającymi od 1 do 7 atomów węgla, takimi jak, na przykład, grupa metylowa i etylowa, z których korzystna jest grupa metylowa. Grupy arylowe reprezentowane przez R 1 i R 2 obejmują takie grupy arylowe o 6 do 14 atomach węgla, takie jak, na przykład, grupa fenylowa i grupa naftylowa, spośród których korzystna jest grupa fenylowa. W odniesieniu do grup reprezentowanych przez R 1 i R 2 atom wodoru lub grupa fenylowa są szczególnie korzystne. Związki hydrazynowe korzystnie stosowane w tym etapie obejmują, na przykład, hydrazynę, 1,1- dimetylo diazynę i fenylohydrazynę, spośród których szczególnie korzystna jest fenylohydrazyna.

11 10 Jako rozpuszczalnik stosowany w tym etapie, korzystny jest wodny lub dwuwarstwowy wodno-organiczny rozpuszczalnik, a szczególnie korzystny jest ten ostatni rozpuszczalnik. Użyteczne do tego celu rozpuszczalniki organiczne obejmują: octan metylu, octan etylu, octan propylu, i podobne octany alkilu; chloroform, chlorek metylenu, dichloroetan, i podobne halogenki niższego alkilu; benzen, toluen, i podobne węglowodory aromatyczne; i eter dietylowy, eter t- butylometylowy, eter izopropylowy, i podobne etery, wśród których szczególnie korzystny jest octan etylu. Stosunek mieszania (wagowo) wody i organicznych rozpuszczalników, korzystnie zawiera się w zakresie od około 1:0,5 do około 1:50, a szczególnie korzystnie od około 1:0,5 do około 1:1. Reakcję w tym etapie prowadzi się w warunkach kwasowych, korzystnie w ph od około 4,0 do około 6,5. Kwasy, które dodaje się do rozpuszczalnika reakcji w tym etapie, obejmują kwasy organiczne, takie jak kwas octowy oraz kwasy nieorganiczne takie jak kwas solny i kwas siarkowy. Korzystnie, reakcję prowadzi się w temperaturze od około 0 C do 50 C przez około od 1 do 3 godzin. Po zakończeniu reakcji fazę wodną roztworu reakcyjnego ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym do wytworzenia roztworu zawierającego związek hydrazonowy, i ten ostatni roztwór wprowadza się do kolejnego etapu procesu. [0024] W etapie (b) procesu pokazanego powyżej acetyluje się podawany z poprzedniego etapu związek hydrazonowy (3) i tworzy się związek triacetoksy-5-deoksy-l-arabinozę hydrazonu przedstawioną powyższym wzorem (4). Acetylację można przeprowadzić w reakcję środka acetylującego w roztworze

12 11 zawierającym związek hydrazonowy otrzymany w poprzednim etapie (a), który może być acetylowany przez poddanie go reakcji ze środkiem acetylującym w obecności katalitycznej ilości dialkiloaminopirydyny. Środki acetylujące korzystnie stosowane w reakcji w tym etapie obejmują bezwodnik octowy i octan halogenku, z których szczególnie korzystny jest bezwodnik octowy. Dialkiloaminopirydyny stosowane jako katalizator w tym etapie obejmują C 1 -C 5 dialkiloaminopirydyny takie jak, na przykład, dimetyloaminopirydyna (DMAP), i korzystniej stosowana jest DMAP. Korzystnie reakcję prowadzi się w temperaturze od około 0 C do 50 C przez około 1 do 24 godzin. Po zakończeniu reakcji roztwór zawierający triacetylatowany związek (4) otrzymany tutaj wprowadza do kolejnego etapu procesu. Ponieważ etap ten przeprowadza się bez zatężania roztworu zawierającego hydrazon otrzymany w etapie (a), można zapobiec zwiększaniu objętości przez rozpuszczalnik reakcyjny. [0025] W etapie (c) prowadzi się reakcję triacetylowanego związku (4) otrzymanego w poprzednim etapie z 6-hydroksy- 2,4,5-triaminopirymidyną (5) w celu otrzymania pochodnej biopteryny przedstawionej wzorem (6) powyżej. Reakcję prowadzi się w wodnym rozpuszczalniku pod katalitycznym wpływem kwasu Lewisa. Jako rozpuszczalnik stosowany w tym etapie, korzystnie stosuje się rozpuszczalnik stanowiący wodę lub mieszaninę woda-niższy alkohol, a zwłaszcza korzystny jest ten ostatni rozpuszczalnik. Korzystne są niższe alkohole, na przykład

13 12 metanol, etanol i izopropanol, spośród których szczególnie korzystny jest metanol. Katalizatory będące kwasem Lewisa korzystnie stosowane reakcji w tym etapie obejmują katalizatory będące wodnymi kwasami Lewisa, takie jak, na przykład, nadchloran litu, nadchloran sodu i podobne nadchlorany metali alkalicznych; trifluorometanosulfonian litu, trifluorometanosulfonianu sodu i podobne sulfoniany metali alkalicznych, laurylosiarczan sodu i podobne siarczany metali alkalicznych oraz jodan litu, jodan sodu i podobne halogenki metali alkalicznych. Spośród nich, szczególnie korzystne są nadchloran litu i trifluorometanosulfonian litu. Korzystnie reakcję prowadzi się w temperaturze od około 20 C do 80 C przez około 2 do 24 godzin. Ten etap procesu umożliwia utrzymanie wydajności wytwarzania pochodnej biopteryny (6), nawet przy zmniejszonej ilości rozpuszczalnika, tak że może on być znacząco ograniczony. [0026] W etapie (d) procesu utlenia się pochodną biopteryny (6) podawaną z poprzedniego etapu i wytwarza się związek o wzorze (7) przedstawionym powyżej. Reakcję utleniania korzystnie prowadzi się dodając do mieszaniny środek utleniający, gdzie środki utleniające korzystnie stosowane w tej reakcji obejmują, na przykład tlen i nadtlenek wodoru i podobne nieorganiczne kwasy nadtlenowe i kwas nadoctowy, i podobne organiczne nadkwasy, spośród których szczególnie korzystny jest nadtlenek wodoru. Korzystnie reakcję prowadzi się w temperaturze od około 0 C do 50 C przez około 5 do 24 godzin. Po zakończeniu reakcji, osadzone kryształy oddziela się konwencjonalnymi środkami

14 13 rozdziału ciała stałego od cieczy (takimi jak filtr lub wirówka) w celu otrzymania związku przedstawionego powyżej wzorem (7). Poza tym, ten etap procesu powoduje rozszczepienie hydrazyny dodanej w poprzednim etapie (a). [0027] W etapie (e) procesu hydrolizuje się związek (7) otrzymany w poprzednim etapie w celu wytworzenia L-biopteryny przedstawionej wzorem (8) pokazanym powyżej. Korzystnie, hydrolizę prowadzi się w obecności kwasu chlorowodorowego. Korzystnie również reakcję prowadzi się w tym etapie w temperaturze od około 40 C do 60 C przez około 1 do 2 godzin. Po zakończeniu reakcji, osadzone kryształy po zobojętnieniu oddziela się konwencjonalnymi środkami do rozdzielania ciał stałych od cieczy, i suszy się w celu uzyskania L-biopteryny przedstawionej wzorem (8) powyżej. W każdym etapie wyżej wymienionych procesów (a) do (c) w kolejnym etapie może być stosowany roztwór zawierający produkt, otrzymany w poprzednim etapie, bez etapu oczyszczania. [0028] Zgodnie z wynalazkiem, ponieważ wszystkie z wyżej wymienionych etapów procesu można osiągnąć całkowicie w jednym urządzeniu, możliwe jest wytwarzanie L-biopteryny na dużą skalę przemysłową z lepszą wydajnością. [0029] W przypadku, gdy L-biopterynę wytwarza się w wyżej opisany sposób w oparciu o sposób według wynalazku, w urządzeniu reakcyjnym o pojemności 1000 l można wytwarzać 14 kg lub więcej L-biopteryny, w porównaniu z uzyskiem 3 kg, który może być osiągnięty przy użyciu tego samego urządzenia

15 14 według znanego sposobu (patrz Literatura niepatentowa 1: Helv. Chim. Acta 68 (6), 1639/43 (1985)). [Korzystne przykłady] [0030] Dalej wynalazek zostanie opisany bardziej szczegółowo w odniesieniu do korzystnych jego przykładów, należy zauważyć, że różne przykłady opisane w niniejszym dokumencie są przedstawione jedynie dla celów ilustracyjnych i nie stanowią ograniczenia wynalazku. Przykład 1 (1) 1',1'-dietylosulfonylo-L-ramnoza [0031] 1,2 g stężonego kwasu chlorowodorowego rozpuszcza się w 580 g kwasu octowego, po czym w uzyskanym roztworze zawiesza się 100 g (0,370 mola) dietylo tioacetalu L-ramnozy. Następnie dodaje się 200 g (2,06 mola) 35% roztworu nadtlenku wodoru wkraplając go do zawiesiny w ciągu 30 minut, po czym miesza się w temperaturze otoczenia wynoszącej 15 C przez 3 dni. Do tej mieszaniny dodaje się wodny roztwór 4,0 g octanu sodu w 50 ml wody. Po dodaniu do mieszaniny reakcyjnej wodorosiarczynu sodu, aby dezaktywować nadmiar nadtlenku wodoru, mieszaninę poddaje się próżniowemu zatężeniu w temperaturze otoczenia 40 C do uzyskania 1,1 - detylosulfonylo-l-ramnozy jako surowego produktu. (2) 5-deoksy-L-arabinoza [0032] 1,1 -dietylosulfonylo-l-ramnozę otrzymaną w poprzednim etapie rozpuszczano w 500 ml wody w temperaturze otoczenia wynoszącej 40 0 C. Po ochłodzeniu, otrzymany roztwór alkalizowano za pomocą 28% wody amoniakalnej. Zalkalizowany roztwór poddaje się mieszaniu przez noc w temperaturze otoczenia wynoszącej 20 0 C. Następnie osadzone kryształy

16 15 oddziela się przez odsączenie i przemywa wodą. Kolejno, stosując octan etylu, warstwę wodną oddziela się i przemywa dwa razy, aby uzyskać wodny roztwór 5-deoksy-L-arabinozy. (3) Fenylohydrazon 5-deoksy-L-arabinozy [0033] Wodny roztwór 5-deoksy-L-arabinozy otrzymany w poprzednim etapie zakwasza się kwasem octowym i miesza się z 500 ml octanu etylu dodanym do niego. Następnie dodaje się 52,0 g (0,480 mola) fenylohydrazyny wkraplając do roztworu w temperaturze otoczenia wynoszącej 10 C, po czym miesza się przez 2 godziny w tej samej temperaturze otoczenia. Po zobojętnieniu za pomocą 20% wodnego roztworu wodorotlenku sodu, roztwór rozdziela się pomiędzy warstwę wodną i warstwę organiczną, z których warstwę wodną ekstrahuje się 250 ml octanu etylu. Warstwę organiczną łączy się z ekstraktem i suszy się nad bezwodnym siarczanem sodu, aby uzyskać roztwór fenylohydrazonu 5-deoksy-L-arabinozy w octanie etylu. Przykład 2 Fenylohydrazon triacetoksy-5-deoksy-l-arabinozy [0034] Do roztworu fenylohydrazonu 5-deoksy-L-arabinozy w octanie etylu otrzymanego w etapie (3) z poprzedniego przykładu, dodaje się 9,0 g (0,074 mola) 4- dimetyloaminopirydyny (DMAP) i rozpuszcza się w tym roztworze. Następnie dodaje się do roztworu 120,82 g (1,183 mola) bezwodnika octowego wkraplając w temperaturze otoczenia wynoszącej 10 C. Po mieszaniu przez noc w tej samej temperaturze otoczenia, do roztworu dodaje się 250 ml wody, który następnie miesza się przez 30 minut. Po pozostawieniu roztworu do odstania, roztwór rozdziela się na warstwę wodną i warstwę organiczną, i do warstwy organicznej dodaje się 20%

17 16 wodny roztwór wodorotlenku sodu w celu jej zobojętnienia. Następnie po pozostawieniu roztworu do odstania, jego warstwę organiczną oddzielono i osuszono nad bezwodnym siarczanem sodu. Gdy w ten sposób traktowany roztwór w octanie etylu poddano zatężeniu próżniowemu otrzymano roztwór fenylohydrazonu triacetoksy-5-deoksy-l-arabinozy w octanie etylu. Przykład 3 Pochodna tetrahydropteryny [0035] Do roztworu fenylohydrazonu triacetoksy-5-deoksy-larabinozy w octanie etylu otrzymanego w poprzednim przykładzie, dodaje się 500 ml metanolu, 41,74 g (0,296 mola) 6-hydroksy-2,4,5-triaminopirymidyny i 300 ml wody w podanym porządku. Ponadto, dodano 23,73 g (0,140 mola) triwodzianu nadchloranu litu rozpuszcza się w 200 ml wody i uzyskany roztwór miesza się w temperaturze 50 C przez 6 godzin w celu uzyskania wodnego roztworu pochodnej tetrahydropteryny. Przykład 4 1',2'-O-diacetylo-L-biopteryna [0036] 35% roztwór nadtlenku wodoru (1,405 mola) dodaje się wkraplając do wodnego roztworu pochodnej tetrahydropteryny otrzymanego w poprzednim przykładzie, i powstałą mieszaninę miesza się w temperaturze 20 0 C przez 8 godzin. Osadzone kryształy oddziela się przez odsączenie i przemywa wodą i metanolem w celu uzyskania 1,2'-O-diacetylo-L-biopteryny. Przykład 5 L-biopteryna [0037] 1,2'-O-diacetylo-L-biopterynę otrzymaną w poprzednim przykładzie 3 zawiesza się w kwasie solnym o stężeniu 3 mol/l

18 17 i otrzymaną zawiesinę miesza się w temperaturze 50 C przez 2 godziny. Po odbarwieniu węglem aktywnym, roztwór reakcyjny zobojętnia się 28% wodą amoniakalną. Następnie, osadzone kryształy rozdziela się przez odsączenie i suszy się, otrzymując 23,13 g L-biopteryny.

19 /EP/13 EP B1 Zastrzeżenia patentowe 1. Sposób wytwarzania pochodnej biopteryny przedstawionej wzorem (6): w którym R 1 i R 2, które są takie same lub różne, każdy oznacza atom wodoru, grupę alkilową albo grupę arylową, obejmujący: reakcję związku należącego do fenylohydrazonów triacetoksy-5- deoksy-l-arabinozy przedstawionych wzorem (4): w którym R 1 i R 2 są takie same, jak określono powyżej, z 6-hydroksy-2,4,5-triaminopirymidyną (5) pod wpływem katalitycznym kwasu Lewisa w rozpuszczalniku wodnym. 2. Sposób według zastrz. 1, w którym wodnym rozpuszczalnikiem jest woda lub mieszany rozpuszczalnik wodaniższy alkohol.

20 19 3. Sposób według zastrz. 1 albo 2, w którym kwas Lewisa jest wodnym katalizatorem kwasem Lewisa. 4. Sposób według któregokolwiek z zastrz. od 1 do 3, w którym wodny katalizator kwas Lewisa jest wybrany z grupy obejmującej nadchlorany metali alkalicznych, sulfoniany metali alkalicznych, siarczany metali alkalicznych i halogenki metali alkalicznych. 5. Sposób wytwarzania l',2'-o-diacetylo-l-biopteryny, obejmujący utlenianie pochodnej biopteryny przedstawionej powyższym wzorem (6) otrzymanej sposobem określonym w dowolnym z zastrzeżeń od 1 do Sposób według zastrz. 5, w którym etap utleniania prowadzi się z użyciem nadtlenku wodoru. 7. Sposób wytwarzania L-biopteryny, obejmujący hydrolizę l',2'-o-diacetylo-l-biopteryny otrzymanej sposobem określonym zastrzeżeniem 5 lub Sposób według zastrz. 7, w którym etap hydrolizy prowadzi się w obecności kwasu solnego. 9. Sposób według któregokolwiek z zastrz. od 1 do 8, w którym związek o powyższym wzorze (4) otrzymuje się w: reakcji związku o wzorze (3): w którym R 1 i R 2, które są takie same lub różne, oznaczają atom wodoru, grupę alkilową albo grupę arylową,

21 20 z czynnikiem acetylującym w obecności katalitycznej ilości dialkiloaminopirydyny. 10. Sposób według zastrz. 9, w którym środek acetylujący jest wybrany z grupy składającej się z bezwodnika octowego i halogenków acetylu. 11. Sposób według zastrz. 9 albo 10, w którym związek o powyższym wzorze (3) otrzymuje się w: reakcji 5-deoksy-L-arabinozy ze związkiem hydrazynowym przedstawionym wzorem (2): w którym R 1 i R 2, które są takie same lub różne, każdy oznacza atom wodoru, grupę alkilową lub grupę arylową, w kwasowych warunkach w wodno-organicznym dwuwarstwowym rozpuszczalniku. 12. Sposób według zastrz. 11, w którym rozpuszczalnik organiczny jest wybrany z grupy obejmującej octany alkilowe, halogenki niższych związków alkilowych, węglowodory aromatyczne i etery.

22 21 DOKUMENTY PRZYTOCZONE W OPISIE Lista przytoczonych przez Zgłaszającego dokumentów została zamieszczona wyłącznie do informacji czytelnika i nie stanowi części składowej europejskiego dokumentu patentowego. Została ona zestawiona z największą starannością; EUP nie ponosi jednakże żadnej odpowiedzialności za ewentualne błędy lub braki. Literatura patentowa przytoczona w opisie Literatura patentowa przytoczona w opisie