(86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: ,PCT/EP99/06319 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
|
|
- Jakub Maciejewski
- 7 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) (21) Numer zgłoszenia: (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (22) Data zgłoszenia: (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: ,PCT/EP99/06319 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego: , WO00/14246 PCT Gazette nr 11/00 (51) Int.Cl. C12N 15/52 ( ) C12N 9/10 ( ) C12N 15/31 ( ) C12N 5/10 ( ) C12N 15/82 ( ) C12P 19/18 ( ) (54) Cząsteczka kwasu nukleinowego kodująca fruktozylotransferazę, wektor, komórka gospodarza, komórka rośliny, sposób wytwarzania rośliny, roślina, materiał propagacyjny rośliny, nadające się do zbiorów części roślin, żywność dla zwierząt, sposób wytwarzania komórek gospodarza, sposób wytwarzania fruktozylotransferazy, fruktozylotransferaza, sposób wytwarzania polifruktozy, sposób wytwarzania środka powierzchniowo czynnego, zastosowanie komórek gospodarza, zastosowanie fruktozylotransferazy i zastosowanie polifruktozy (30) Pierwszeństwo: ,DE, (73) Uprawniony z patentu: MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FÖRDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V.,Berlin,DE (43) Zgłoszenie ogłoszono: BUP 04/02 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono: WUP 06/09 (72) Twórca(y) wynalazku: Arnd G. Heyer,Berlin,DE Jochen Rehm,Berlin,DE Regina Wendenburg,Berlin,DE (74) Pełnomocnik: Urszula Bartnik, POLSERVICE, Kancelaria Rzeczników Patentowych Sp. z o.o. (57) W wynalazku opisano cząsteczkę kwasu nukleinowego kodującą fruktozylotransferazę, wektor, komórkę gospodarza i komórkę rośliny. Opisano także sposób wytwarzania rośliny, roślinę, materiał propagacyjny rośliny, nadające się do zbiorów części roślin, żywność dla zwierząt, sposób wytwarzania komórek gospodarza, sposób wytwarzania fruktozylotransferazy, fruktozylotransferazę, sposób wytwarzania polifruktozy, sposób wytwarzania środka powierzchniowo czynnego, zastosowanie komórek gospodarza, zastosowanie fruktozylotransferazy i zastosowanie polifruktozy. PL B1
2 2 PL B1 Opis wynalazku Przedmiotem wynalazku jest cząsteczka kwasu nukleinowego kodująca fruktozylotransferazę, wektor, komórka gospodarza, komórka rośliny, sposób wytwarzania rośliny, roślina, materiał propagacyjny rośliny, nadające się do zbiorów części roślin, żywność dla zwierząt, sposób wytwarzania komórek gospodarza, sposób wytwarzania fruktozylotransferazy, fruktozylotransferaza, sposób wytwarzania polifruktozy, sposób wytwarzania środka powierzchniowo czynnego, zastosowanie komórek gospodarza, zastosowanie fruktozylotransferazy i zastosowanie polifruktozy. Rozpuszczalne w wodzie polimery liniowe mogą służyć do różnych zastosowań, na przykład do zwiększania lepkości układów wodnych, jak detergenty, czynniki zawiesinowe lub do przyspieszania sedymentacji i kompleksowania lecz także do wiązania wody. Polimery na bazie sacharydów, na przykład polisacharydy fruktozylowe są szczególnie interesujące, jako materiały wyjściowe, ponieważ podlegają one rozkładowi biologicznemu. Poza ich zastosowaniem, jako surowcowe materiały odnawialne w produkcji przemysłowej i wytwórczej, polimery fruktozylowe są atrakcyjne, jako dodatki do żywności na przykład, jako słodziki. Do różnych zastosowań wymagane są polimery o różnych długościach łańcucha. O ile dla sektora spożywczego preferowane są polimery o łańcuchu średnim lub krótkim, o tyle techniczne zastosowania, na przykład do wytwarzania środków powierzchniowo czynnych wymagają polimerów z wysokim stopniem polimeryzacji (DP). Opisywane były różne sposoby produkcji polisacharydów fruktanowych w roślinach przez ekspresję fruktozylotransferaz pochodzenia bakteryjnego lub produkcji polifruktoz o średniej długości łańcucha poprzez ekspresję fruktozylotransferaz pochodzenia roślinnego. PCT/US89/02729 opisuje na przykład możliwość generowania węglowodanowych polimerów, zwłaszcza dekstranu lub polifruktozy w roślinach transgenicznych, a szczególnie w owocach roślin transgenicznych. W celu wytworzenia roślin, które są zmodyfikowane na takiej drodze proponuje się zastosowanie lewanu sacharozy z mikroorganizmów zwłaszcza z Aerobacer levanicum, Streptococcus salivarius i Bacillus subtilis lub dekstranu sacharozy z Leuconostoc mesenteroides. Nie opisano do tej pory ani generowania aktywnych enzymów ani wytwarzania lewanu lub dekstranu ani też produkcji roślin transgenicznych. PCT/EP93/02110 ujawnia sposób wytwarzania transgenicznych roślin posiadających ekspresję genu Isc lewanosacharozy z gram ujemnych bakterii Erwinia amylovora. Rośliny te wytwarzają wielkocząsteczkowy i silnie rozgałęziony lewan. PCT/NL93/00279 opisuje transformację roślin genami chimerycznymi, które zawierają gen sacb z Bacillus subtilis. Rośliny takie wytwarzają rozgałęziony lewan. Bakteryjne fruktozylotransferazy stosowane w PCT/US89/02729, PCT/EP93/02110 i PCT/NL93/00279 syntetyzują lewan - polimer fruktozylowy z wiązaniami β-2, 6, który ma liczne rozgałęzienia β-2,1. Jednakże, ponieważ lewan posiada wielokrotne rozgałęzienia, posiada on zdecydowanie niekorzystne cechy co dla technicznego jego wytwarzania i dlatego jest dużo mniej pożądany jako techniczny materiał początkowy niż inulina, która posiada wiązania β-2,1. Obecnie, tylko jeden gen bakteryjny jest znany jako gen, którego wytwór jest związany z syntezą inuliny, wspomnianym genem jest gen ftf z Streptococcus mutans. PCT/NL93/00279 opisuje transformację roślin wspomnianym genem, który syntetyzuje wielkocząsteczkową inulinę lecz w tak małych ilościach, że nie mogą one być ekonomicznie wykorzystane. Również PCT/EP97/02195 opisuje sposób wytwarzania transgenicznych, wytwarzających inulinę roślin z genem ftf z Streptococcus mutans. Podobnie jak rośliny opisane w PCT/NL93/00279 wydajność wielkocząsteczkowej inuliny jest niska. O ile ekspresja genu jest możliwa to w ogóle możliwa w roślinach, jeżeli gen ten był genetycznie wcześniej przetworzony, to wydajność inuliny jaką może uzyskać z transgenicznych roślin jest tak niska, że transgeniczne rośliny nie mogą być ekonomicznie wykorzystane. Ponadto PCT/NL96/00012 ujawnia sekwencje DNA, które kodują enzymy syntetyzujące polimer węglowodanowy, jak również wytwarzanie transgenicznych roślin przy zastosowaniu wspomnianych sekwencji DNA. Ujawnione sekwencje pochodzą z Helianthus tuberosus. Zgodnie z PCT/NL96/00012 ujawnione sekwencje mogą być stosowane do modyfikowania profilu fruktanowego petunii i ziemniaka lecz także do samego Helianthus tuberosus. Ekspresja ujawnionych sekwencji, które kodują zależną od sacharozy fruktozylotransferazę sacharozy (SST) lub transferazę fruktan fruktozyl w roślinach transgenicznych pozwala na produkcje inuliny. Jednak średni stopień polimeryzacji inuliny jest od DP=6 do DP=10. Z takim stopniem polimeryzacji inulina nie może być uważana za długołańcuchową. Sposób opisywany w PCT/NL96/00012 nie pozwala na produkcję inuliny o wysokim ciężarze cząsteczkowym.
3 PL B1 3 Ostatnio, Rehm i wsp. (J. Bacteriology 180 (1998), ) opisali wytwarzanie oligosacharydów w drożdżach przez wprowadzenie SST z Aspergillus foetidus. Jednakże stopień polimeryzacji produktu otrzymanego był jedynie DP=3. DE dotyczy wytwarzania 1-kestozy i nystozy stosując enzymy posiadające aktywność polimerazy fruktozylu. Tri- i tetra- sacharydy mogą być wytwarzane w roślinach transgenicznych. Wydajność jest wysoka i w ziemniakach odpowiada komórkowej zawartości sacharozy. Jednakże produkcja długołańcuchowej inuliny nie jest opisywana. Synteza polifruktoz przez grzyby jest również dyskutowana w wielu publikacjach. Barthomeuf i Pourrat (Biotechnology Letters 17 (1995), ), opisują na przykład preparat enzymatyczny Penicillium rugulosum, który posiada aktywność fruktozylotransferazy. Preparat ten przejawia różne właściwości enzymatyczne i dlatego nie reprezentuje czystej fruktozylotransferazy. Sekwencje DNA genu fruktozylotransferazy nie są znane. Cairns i wsp. (New Phytologist 129 (1995), ) opisują przejściową syntezę tri-, tetra- i penta- sacharydów z sacharozy w pożywce hodowlanej Monographella nivalis. Podkreślana enzymatyczna aktywność okazuje się być w głównej mierze natury hydrolitycznej, ponieważ polifruktozy są ponownie degradowane przez ten enzym wraz ze wzrostem wyczerpywania się substratu. Ponieważ nieznana jest sekwencja DNA nie można ocenić - w oparciu o homologię z fruktofuranozydazami (inwertazami) jak się cytuje - czy obecna jest fruktozylotransferaza we właściwym tego słowa znaczeniu czy też inwertaza. Wykazano dla grzybów Aspergillus sydowi IAM 2544, że zdolne są one do generowania polifruktoz typu inuliny. Harada i wsp. (w: Nishinari i Doi (Eds.), Food Hydrocolloids: Structures, Properties and Fructions, Plenum, New York (1994), 77-82) opisują na przykład syntezę inuliny przez konidia Aspergillus sydowi. 125 g konidii inkubowano w 25 l 20% roztworu sacharozy. Generowany produkt był oczyszczony na HPLC. Jednakże, taki proces sam nie prowadzi do produkcji inuliny na dużą skalę. Maramatsu i wsp. (Agric. Biol. Chem. 52 (1988), ) opisują wytwarzanie fruktooligosacharydów przez grzybnię tego samego szczepu grzyba (A. sydowi IAM 2544). Opisany stopień polimeryzacji wynosi od 3 do 13. Enzymy zaangażowane w tym procesie nie były w ogóle, lub tylko były tylko częściowo oczyszczone. Sekwencje aminokwasowe lub sekwencje DNA odpowiadających genów nie są znane. Instrukcje oczyszczania białek nie są podane lub są niepełne. Zagadnieniem, które rozwiązuje niniejszy wynalazek jest dlatego dostarczenie cząsteczek kwasu nukleinowego i sposobów pozwalających na wytworzenie genetycznie zmienionych organizmów, które zdolne są do generowania polifruktozy typu inuliny. Przedmiotem wynalazku jest cząsteczka kwasu nukleinowego kodująca fruktozylotransferazę wybrana z grupy obejmującej: (a) cząsteczki kwasu nukleinowego kodujące białko zawierające sekwencję aminokwasową wskazaną na SEQ ID nr 2; (b) cząsteczki kwasu nukleinowego zawierające sekwencję nukleotydową regionu kodującego wskazaną na SEQ ID nr 1 lub odpowiadającą sekwencję rybonukleotydową; (c) cząsteczki kwasu nukleinowego hybrydyzujące z nicią komplementarną do cząsteczek kwasu nukleinowego wspomnianych w (a) lub (b); i (d) cząsteczki kwasu nukleinowego sekwencji, nukleotydowej, której odchylenia od sekwencji cząsteczki kwasu nukleinowego wspomnianej w (c) związane są z degeneracją kodu genetycznego; jak również cząsteczki kwasu nukleinowego komplementarne do nich. Korzystnie cząsteczka kwasu nukleinowego jest cząsteczką DNA lub RNA. Bardziej korzystnie cząsteczka kwasu nukleinowego koduje polipeptyd grzybowy. Grzybem korzystnie może być grzyb z rodzaju Aspergillus. Korzystnie cząsteczka kwasu nukleinowego, specyficznie hybrydyzuje z cząsteczką kwasu nukleinowego według wynalazku lub z komplementarną do niej nicią, przy czym hybrydyzacja ma miejsce w następujących warunkach: hybrydyzacja w 50% formamidzie, 5xSSC, 5x roztwór Denhardt'a, 40 mm fosforan sodowy ph 6,8, 0,5% (w/v) BSA, 1% (w/v) SDS, 0,1 mg/ml DNA spermy śledzia w temperaturze hybrydyzacji 42 C i następnie przemywanie 0,5xSSC/0,5% w 60 C. Przedmiotem wynalazku jest również wektor zawierający cząsteczkę kwasu nukleinowego kodującą fruktozylotransferazę, jak zdefiniowano powyżej. W wektorze według wynalazku cząsteczka kwasu nukleinowego jest operacyjnie związana z elementami regulatorowymi, które zapewniają transkrypcję i syntezę ulegającego translacji RNA w komórkach pro- i/lub eukariotycznych. Bardziej korzystnie, cząsteczka kwasu nukleinowego zawiera region, który koduje sekwencję sygnałową, która zmienia lokalizację wewnątrz- lub pozakomórkową fruktozylotransferazy.
4 4 PL B1 Przedmiotem wynalazku jest również komórka gospodarza zawierająca cząsteczkę kwasu nukleinowego kodująca fruktozylotransferazę jak zdefiniowano powyżej lub wektor jak zdefiniowano powyżej, przy czym cząsteczka kwasu nukleinowego jest heterologiczna w stosunku do komórki gospodarza. Korzystnie komórka gospodarza według wynalazku jest komórką bakterii lub komórką grzyba. Przedmiotem wynalazku jest także komórka rośliny, która zawiera cząsteczkę kwasu nukleinowego kodującą fruktozylotransferazę lub wektor jak zdefiniowano powyżej, przy czym cząsteczka kwasu nukleinowego jest heterologiczna w stosunku do komórki rośliny. Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania rośliny, polegający na tym, że (a) modyfikuje się genetycznie komórkę rośliny przez wprowadzenie cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku lub wektora wektor według wynalazku przy czym cząsteczka kwasu nukleinowego jest heterologiczna w stosunku do komórki, i (b) regeneruje się roślinę z komórki; i ewentualnie (c) generuje się następne rośliny z komórki według regenerowanej zgodnie z etapem (b). Przedmiotem wynalazku jest także roślina zawierająca komórki roślinne według wynalazku. Korzystnie roślina ta jest rośliną użytkową. Przedmiotem wynalazku jest także materiał propagacyjny rośliny według wynalazku, który zawiera komórki roślinne według wynalazku. Kolejnym przedmiotem wynalazku są nadające się do zbiorów części roślin według wynalazku, przy czym część rośliny zawiera komórki roślinne zawierające cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku lub wektor według wynalazku. Następnym przedmiotem wynalazku jest żywność dla zwierząt i/lub ludzi zawierająca nadające się do zbiorów części roślin jak zdefiniowano powyżej. Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania komórek gospodarza zawierających cząsteczkę kwasu nukleinowego kodującą fruktozylotransferazę jak zdefiniowano powyżej polegający na tym, że odpowiednie komórki transformuje się cząsteczką kwasu nukleinowego według wynalazku lub wektorem według wynalazku. Następnym przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania fruktozylotransferazy, polegający na tym, że komórkę gospodarza lub komórkę roślinną, które zdefiniowano powyżej, hoduje się w warunkach pozwalających na syntezę fruktozylotransferazy i izoluje się fruktozylotransferazę z hodowanych komórek i/lub pożywki hodowlanej. Przedmiotem wynalazku jest również fruktozylotransferaza kodowana przez cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku dająca się otrzymać sposobem jak zdefiniowano powyżej. Następnym przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania polifruktozy zwłaszcza polifruktozy typu inuliny, polegający na tym, że (a) hoduje się komórkę gospodarza jak zdefiniowano powyżej lub gospodarza zawierającego taką komórkę w warunkach pozwalających na wytwarzanie fruktozylotransferazy i przekształca się ewentualnie dodaną sacharozę lub równoważnik substratowy w polifruktozę; i (b) otrzymuje się polifruktozę wytwarzaną w ten sposób z hodowanych komórek, z gospodarza lub z pożywki. Przedmiotem wynalazku jest też sposób wytwarzania polifruktozy zwłaszcza polifruktozy typu inuliny, polegający na tym, że (a) kontaktuje się sacharozę lub równoważnik substratowy, z fruktozylotransferazą jak zdefiniowano powyżej, w warunkach pozwalających na przekształcenie w polifruktozę; i (b) otrzymuje się polifruktozę wytwarzaną w ten sposób. Kolejno, przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania polifruktozy zwłaszcza polifruktozy typu inuliny, polegający na tym, że obejmuje etap ekstrakcji polifruktozy z komórki roślinnej zawierającej cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku lub wektor według wynalazku z rośliny jak zdefiniowano powyżej, lub z części takich roślin. Wynalazek dotyczy także sposobu wytwarzania środka powierzchniowo czynnego, który obejmuje etapy (a) i (b) sposobów wytwarzania polifruktozy oraz sposobu wytwarzania polifruktozy typu inuliny lub etap ekstrakcji sposobu wytwarzania polifruktozy typu inuliny. Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie komórek gospodarza według wynalazku lub komórek rośliny według wynalazku jako dodatków do żywności. Następnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie fruktozylotransferazy według wynalazku do wytwarzania polifruktozy zwłaszcza polifruktozy typu inuliny.
5 PL B1 5 Kolejnym przedmiotem wynalazku jest zastosowanie polifruktozy otrzymywanej sposobami według wynalazku do wytwarzania środków powierzchniowo czynnych do podwyższania lepkości układów wodnych, jako detergent, jak czynnik zawiesinowy, do przyspieszenia sedymentacji i kompleksowania lub do wiązania wody. Sekwencje przedstawione w SEQ ID nr 1 kodują zależny od sacharozy enzym fruktozylotransferazę fruktanu z Aspergillus sydowi, który prowadzi w komórkach roślinnych do syntezy długołańcuchowego polifruktanu typu inuliny. Nieoczekiwanie stwierdzono, że przy zastosowaniu wspomnianych sekwencji można wyprodukować długołańcuchowe polifruktany typu inuliny z dużą wydajnością w organizmach gospodarza, zwłaszcza w roślinach transgenicznych, bakteriach lub grzybach. W niniejszym wynalazku opracowano metodę oczyszczania tego enzymu z Aspergillus sydowi. Enzym był oczyszczony aż osiągnięcia jego homogeniczności, tak aby można było wykryć sekwencję aminokwasową. Na podstawie otrzymanej informacji o sekwencji wykryto primery dla polimerazowej reakcji łańcuchowej. Fragmenty genowe były amplifikowane za pomocą tych primerów, które były stosowane do przesiewowego badania bibliotek cdna. Poszczególne cząsteczki cdna z homologią sekwencji do produktów PCR były preparowane i porównywane. Większość otrzymanych cząsteczek miało inserty tego samego rozmiaru. Kompletność cząsteczek cdna była potwierdzona podczas funkcjonalnej ekspresji sekwencji DNA w Saccharomyces lub w ziemniakach. Oczyszczanie enzymów, zaprojektowanie starterów dla PCR, identyfikacja cząsteczek cdna i ekspresja heterologiczna opisano w przykładach. Izolowana sekwencja DNA i jej pochodne sekwencje białkowe są przedstawione odpowiednio na SEQ ID nr 1 i 2. Sekwencja DNA według wynalazku jest pierwszą, która koduje grzybową fruktozylotransferazę fruktanu zależną od sacharozy. Sekwencja DNA i sekwencja białka przez nią kodowana znacznie różni się od znanych już sekwencji DNA kodujących fruktozylotransferazy. Na przykład istnieje tylko 22,6% i 39% identyczności z fruktozylotransferazą z Aspergillus naeslundii lev j w poziomie białka i DNA. Podczas gdy istnieje tam 64 i 60,6 identyczność względem poziomu białka i DNA w porównaniu z inwertaza genu z Aspergillus niger to białko kodowane przez wspomniany gen ma całkowicie różną enzymatyczną aktywność. Pokazuje to, że cząsteczki kwasu nukleinowego i kodowane przez nie fruktozylotransferazy są cząsteczkami, które nie były dotąd opisane. W kontekście niniejszego wynalazku fruktozylotransferaza jest rozumiana jako białko, które jest zdolne do katalizowania wiązania β-2,1-glikozydowego i/lub β-2,6-glikozydowego pomiędzy jednostkami fruktozy. Reszta fruktozylowa, która jest przenoszona pochodzi z sacharozy. Reakcję katalizowaną przez zależną od sacharozy fruktozylotransferazę fruktanu według wynalazku można opisać następującym wzorem: N (G - F) G - F n + (n-1) G Na tym schemacie G = glukoza, F = fruktoza i G-F = sacharoza. Oznacza to, że enzym przenosi reszty fruktozowe z sacharozy na polifruktan, który jest tworzony zaczynając od cząsteczki sacharozy przez wiązanie β-2,1 glikozydowe, przy czym może także występować wiązanie β-2,6 glikozydowe. Polipeptyd z aktywnością fruktozylotransferazy kodowany przez cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku prowadzi do syntezy polifruktozy, a zwłaszcza w komórkach roślinnych prowadzi do syntezy polifruktozy typu inuliny (tutaj również opisywanej jako inulina). W kontekście niniejszego wynalazku polifruktoza jest rozumiana jako polifruktan, że stopniem polimeryzacji DP 4, korzystnie DP 6 i szczególnie DP 8. Polifruktoza typu inuliny lub inulina odnosi się do długołańcuchowego polimeru fruktanu, cząsteczki którego są połączone głównie wiązaniami β-2,1-glikozydowymi i ewentualnie posiadają także rozgałęzienia β-2,6. Określenie długołańcuchowy oznacza, że stopień polimeryzacji (DP) jest większy niż 20, korzystnie większy niż 50, bardziej korzystnie większy niż 100 i najbardziej korzystnie większy niż 200. Polimer fruktozylowy może nieść końcowe reszty glukozy, które są połączone poprzez grupę C-1 OH glukozy i grupę C-2 OH reszty fruktozy. W tym przypadku jedna cząsteczka sacharozy jest zawarta w polimerze fruktozylu. Jeżeli do syntezy polifruktanu in vitro stosowany jest enzym, to otrzymywany jest produkt oligomerowy (DP = 4 do 10). Enzym kodowany przez cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku może być zwłaszcza odróżniony od znanych fruktozylotransferaz dzięki reakcji katalizy. Na przykład, znana roślinna SSTs katalizuje reakcję: G - F + G - F G - F - F + G. Natomiast zależna od fruktanu fruktozylotransferaza fruktanu z roślin katalizuje następującą reakcję:
6 6 PL B1 G - F n + G - F m G - F n+1 + G - F m+1, która to reakcja jest całkowicie odwracalna. Bakteryjne fruktozylotransferazy, np. kodowane przez gen sacb z Bacillus subtilis, katalizuje także reakcję typu ng - F G - F n + (n-1) G. Jednakże enzymy te wytwarzają lewan, to znaczy polifruktan połączony β-2,6-glikozydowo z rozgałęzieniami β-2,1. Chociaż białko (FTF) kodowane przez gen ftf z Streptococcus mutans indukuje syntezę inuliny o ciężarze cząsteczkowym wielu milionów Daltonów to jednak gen ftf lub białko kodowane nie wykazuje znaczącej homologii do sekwencji kwasu nukleinowego opisanej na SEQ ID nr 1 (tylko 37,3%) lub sekwencji aminokwasowej opisanej na SEQ ID nr 2 (tylko 22,6%). W kontekście niniejszego wynalazku określenie hybrydyzacja oznacza hybrydyzację w konwencjonalnych warunkach hybrydyzacji, korzystnie w ścisłych warunkach hybrydyzacji, takich jak opisano w Sambrook i wsp., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Wydanie 2 (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY. Przykładem ścisłych warunków hybrydyzacji jest hybrydyzacja w 50% formamidzie 5 x SSC, 5 x roztwór Denhardt'a, 40 mm fosforanie sodu ph 6,8; 0,5% BSA (wag./obj.), 1% SDS (wag./obj.), 0,1 mg/ml DNA spermy śledziowej w temperaturze hybrydyzacji 42 C i następnie przemywano na filtrach w 0,5 x SSC/0,5% SDS w 60 C. Przykładem konwencjonalnych nie-ścisłych warunków hybrydyzacji jest hybrydyzacja w warunkach wspomnianych powyżej z tą różnicą, że 30% formamid jest stosowany zamiast 50% i filtry są następnie przemywane w 2xSSC/0,5% SDS w 56 C. Cząsteczki kwasu nukleinowego hybrydyzujące z cząsteczkami według wynalazku mogą być izolowane z bibliotek, na przykład genomowej lub cdna, które są korzystnie preparowane z grzybów. Takie cząsteczki kwasu nukleinowego mogą by identyfikowane i izolowane stosując cząsteczki według wynalazku lub fragmenty tych cząsteczek lub odwrotne komplementy tych cząsteczek, na przykład przez hybrydyzację według standardowej metody (patrz, na przykład Sambrook i wsp., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Wydanie 2 (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY). Cząsteczki kwasu nukleinowego mogą być stosowane jako sonda hybrydyzacyjna, która wykazuje dokładnie lub zasadniczo taką samą sekwencję nukleotydową opisaną na SEQ ID nr 1 lub fragmenty tej sekwencji. Fragmenty stosowane jako sonda hybrydyzacyjna mogą także być fragmentami hybrydyzacyjnymi, które były wytwarzane stosując techniki konwencjonalne syntezy oraz także taką sekwencją, która jest zasadniczo identyczna z sekwencją cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku. Cząsteczki hybrydyzujące z cząsteczkami kwasu nukleinowego według wynalazku zawierają także fragmenty, pochodne i warianty alleliczne opisanych powyżej, cząsteczek kwasu nukleinowego kodujących białko według wynalazku. Fragmenty są rozumiane jako części cząsteczek kwasu nukleinowego, które są wystarczająco długie do kodowania białka z aktywnością fruktozylotransferazy. Określenie pochodna tak jak stosuje się w niniejszym wynalazku oznacza, że sekwencje tych cząsteczek różnią się od sekwencji cząsteczek kwasu nukleinowego opisanych powyżej w jednej lub wielu pozycjach ale przejawiają wysoki stopień holologii do tych sekwencji. Homologia oznacza identyczność sekwencji w co najmniej 40%, zwłaszcza identyczność w co najmniej 60%, korzystnie więcej niż w 80%, i jeszcze bardziej korzystnie w więcej niż w 90%, i najkorzystniej w co najmniej w 95%. Odchylenia od opisanych powyżej cząsteczek kwasu nukleinowego mogą być wynikiem na przykład delecji, podstawienia, insercji i/lub rekombinacji. Cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku mogą być innymi pochodnymi sekwencji o pochodzeniu grzybowym. Derywatyzacja sekwencji może być wymagana jako ułatwienie ekspresji w pewnych komórkach gospodarzy. Cząsteczki kwasu nukleinowego, które są homologiczne do cząsteczek opisanych powyżej i reprezentują pochodne wspomnianych cząsteczek są regularnymi odmianami tych cząsteczek, które reprezentują modyfikacje wpływające na tą samą funkcję biologiczną. Odmiany te mogą być na przykład albo naturalnie występującymi sekwencjami z innych szczepów lub organizmów lub mutacjami. Mutacje te mogą zajść naturalnie lub mogą być wprowadzone specyficzną mutagenezą. Odmiany te mogą być także syntetycznie wytwarzanymi sekwencjami. Alleliczne warianty mogą być albo naturalnie występującymi wariantami lub syntetycznie wytwarzanymi lub generowanymi przez rekombinacyjne techniki DNA. Białka kodowane przez różne odmiany cząsteczek kwasu nukleinowego według wynalazku korzystnie mają pewną wspólną charakterystykę taką jak enzymatyczna aktywność, ciężar cząsteczko-
7 PL B1 7 wy, reaktywność immunologiczna lub konformacja lub właściwości fizyczne takie jak ruchliwość elektroforetyczna w elektroforezie żelowej, zachowanie się w chromatografii, współczynnik sedymentacji, rozpuszczalność, właściwości spektroskopowe, trwałość, optimum ph lub optimum temperatury. W korzystnym wykonaniu cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku kodują polipeptyd posiadający właściwości grzybowej fruktozylotransferazy, szczególnie korzystnie z Aspergillus i najbardziej korzystnie fruktozylotransferazy z Aspergillus sydowi. Cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku mogą być cząsteczkami albo DNA albo RNA. Przykładami odpowiednich cząsteczek DNA są cząsteczki genomowego DNA lub cdna. Cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku mogą być izolowane że źródeł naturalnych, na przykład grzybów, zwłaszcza Aspergillus a korzystnie z Aspergillus sydowi, lub mogą być one syntetyzowane zgodnie ze znanymi metodami. Możliwym jest także wprowadzenie różnych mutacji do cząsteczek kwasu nukleinowego według wynalazku na drodze technik konwencjonalnych biologii molekularnej (patrz, na przykład, Sambrook i wsp., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Wydanie 2 (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY). Takie wprowadzenie indukuje syntezę białek z potencjalnie zmodyfikowanymi właściwościami biologicznymi. Jednym podejściem jest generowanie mutantów delecyjnych, w których cząsteczki kwasu nukleinowego generowane są przez stopniową delecję przy końcu 5' lub końcu 3' kodującej sekwencji DNA, co prowadzi do syntezy odpowiednio skróconych białek. Innym podejściem jest produkcja określonych enzymów, które są zlokalizowane w różnych przedziałach w związku z dodatkowymi sekwencjami sygnałowymi. W celu osiągnięcia lokalizacji białek według wynalazku w cytozolu do sekwencji wskazanej w SEQ ID nr 2 nie dodaje się sekwencji sygnałowych. Z drugiej strony, miejsca mutacji mogą także być wprowadzone w tych pozycjach, gdzie modyfikacja sekwencji aminokwasowej zmienia, na przykład aktywność enzymatyczną lub kontrolę enzymu. W ten sposób mogą być wytwarzane na przykład mutanty ze zmodyfikowaną wartością K n, lub mutanty, które nie są dłużej przedmiotem mechanizmów kontrolnych przez regulację allosteryczną lub modyfikację kowalencyjną jakie zwykle występują w komórkach. Ponadto, mogą być wytwarzane mutanty ze zmodyfikowaną specyficznością w stosunku do substratu lub produktu. Co więcej, mogą być wytwarzane mutanty ze zmodyfikowanym profilem aktywności temperaturowej. W celu genetycznej manipulacji w komórkach priokariotycznych cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku lub fragmenty tych cząsteczek mogą być wbudowywane do plazmidów co pozwala na mutagenezę lub na modyfikację sekwencji przez rekombinację sekwencji DNA. Za pomocą standardowych technik (cf. Sambrook i wsp., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Wydanie 2 (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY) może być przeprowadzona wymiana zasad lub mogą być dodane naturalne lub syntetyczne sekwencje. W celu powiązania fragmentów DNA mogą być do nich przyłączone adaptery lub linkery. Ponadto można wykorzystać manipulacje, które oferują odpowiednie miejsca restrykcji lub które usuwają zbędne DNA lub miejsca restrykcji. Gdziekolwiek dokonany jest insert, delecja lub podstawienie, można stosować mutagenezę in vitro, primer repair, restrykcję lub ligację. Do badania stosowana jest głównie analiza sekwencji, analiza restrykcji lub inne biochemiczno molekularne metody. Wynalazek ponadto dotyczy wektorów, które zawierają cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku. Korzystnie wektorami tymi są plazmidy, kosmidy, wirusy, bakterofagi i inne powszechne w inżynierii genetycznej wektory. Korzystnie cząsteczka kwasu nukleinowego według wynalazku jest operacyjnie związana w wektorze według wynalazku z elementami regulatorowymi, które pozwalają na transkrypcję i syntezę dającego się odczytać RNA w pro- i/lub eukariotycznych komórkach. Na przykład wektor według wynalazku zawiera następujące elementy: 1. Promotor zapewniający transkrypcję poniżej regionów kodujących w komórkach organizmu gospodarza i ewentualnie elementy wzmacniające. 2. Region kodujący połączony przez fuzję z promotorem, który zawiera co najmniej jedną otwartą ramkę odczytu dla translacji polipeptydu. W niniejszym wynalazku regionem kodującym jest cząsteczka kwasu nukleinowego według wynalazku. 3. Ponadto, dodatkowe sekwencje przyłączone przez fuzję do regionu kodującego, na przykład sygnały zakończenia transkrypcji, jeżeli takie są potrzebne do pomyślnej ekspresji genu w pewnych organizmach gospodarza, lub sekwencje sygnałowe zmieniające subkomórkową lokalizację produktu genowego lub indukujące sekrecję tego białka.
8 8 PL B1 Wektory takie mogą zawierać dodatkowe geny takie jak geny markerowe pozwalające na wyodrębnienie tego wektora w odpowiedniej komórce gospodarza i w odpowiednich warunkach. Ekspresja cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku obejmuje transkrypcje cząsteczki kwasu nukleinowego do nadającego się do transkrypcji mrna. Elementy regulatorowe pozwalające na ekspresję cząsteczki kwasu nukleinowego w komórkach prokariotycznych i eukariotycznych są znane fachowcom w tej dziedzinie. Możliwe elementy regulatorowe, które są właściwe dla ekspresji cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku w komórce gospodarza prokariotycznego obejmują na przykład promotor P L lac, trp lub tac w E.coli. Szczególnie korzystnie stosuje się promotor lacz, który można indukować w IPTG E.coli. Przykładami elementów regulatorowych pozwalających na ekspresję w komórkach gospodarza eukariotycznego są promotory drożdżowe AOX1 i promotory GAL1 lub CMV, SV40, RSV, wzmacniacz CMV, wzmacniacz SV40 lub intron globinowy w komórkach ssaczych lub innych komórkach zwierzęcych. Na przykład do ekspresji w drożdżach stosowany jest korzystnie promotor genu dehydrogenazy alkoholowej z Saccharomyces cerevisiae, który jest wysoce aktywny w drożdżach. Dalsze odpowiednie układy wektorowe opisano w stanie techniki, na przykład w Sambrook (Molecular Cloning, A Laboratory Manual, (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, N.Y. i w Ausubel, Current Protocols in Molecular Biology (1988) Green Publishing Associates i Wiley Intresience, N.Y. Elementami regulatorowymi do ekspresji cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku w komórkach roślinnych są zasadniczo każdy dowolny promotor, wzmacniacz, terminator itp., które jest aktywny w komórkach roślinnych. Promotor może być wybrany w taki sposób, że ekspresja zachodzi konstytutywnie lub w pewnych tkankach, w pewnym okresie czasu rozwoju rośliny lub w punkcie czasowym wyznaczonym czynnikami zewnętrznymi. W odniesieniu do roślin promotor może być homologiczny lub heterologiczny. Odpowiednimi promotorami do ekspresji konstytutywnej są na przykład promotory 35S RNA z Cauliflower Mosaic Virus (patrz, na przykład, US 5,352,605) i promotor ubiquityny (patrz, na przykład, US 5,614,399) do ekspresji konstytutywnej, promotor genu patatyny B33 (Rocha-Sosa, EMBO J. 8 (1989), 23-29) dla specyficznej dla bulw ekspresji w ziemniakach lub promotor, który zapewnia ekspresję tylko w aktywnych fotosyntetycznie tkankach, na przykład promotor ST-LS1 (Stockhaus, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84 (1987), ; Stockhaus EMBO J. 8 (1989), ), promotor Ca/b (patrz, na przyk3ad, US 5,656,496, US 5,639,952, Bansal, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89 (1992), ) i promotor Rubisco SSU (patrz, na przykład, US 5,034,322, US 4,962,028). Jakkolwiek, mogą być też stosowane promotory, które są aktywowane tylko w pewnym okresie czasu określonym warunkami zewnętrznymi (patrz, na przykład, WO 93/07279). Promotory białek szoku termicznego pozwalające na prostą indukcję, mogą być szczególnie interesujące. Także specyficzne dla nasion promotory takie jak promotor USP z Vicia faba, mogą być stosowane co pozwala na specyficzną dla nasion ekspresję w Vicia faba i innych roślinach (Fiedler, Plant Mol. Biol. 22 (1993), ; Bäumlein, Mol. Gen. Genet. 225 (1991), ). Ponadto promotory specyficzne dla owoców mogą być stosowane, jak opisano w WO 91/ Do ekspresji w dojrzewających owocach pomidora, są odpowiednie, na przykład elementy regulatorowe cis promotora poligalakturonazy pomidora, które są aktywne w zewnętrznej i wewnętrznej owocni (Nicholass i wsp., Plant Mol. Biol. 28 (1995), ; Montgomery i wsp., Plant Cell 5 (1993), ). Inny promotor specyficzny dla owoców, opisywany został dla pomidora przez Van Haaren'a i wsp. (Plant Mol. Biol. 21 (1993), ). Ponadto, mogą być stosowane promotory specyficznej dla bielma ekspresji, takie jak promotor gluteinowy (Leisy, Plant Mol. Biol. 14 (1990), 41-50; Zheng, Plant J. 4 (1993), ), promotor HMG pszenicy, promotor USP, promotor faseoliny lub promotory genów zeiny kukurydzy (Pedersen, Cell 29 (1982), ; Quattrocchio, Plant Mol. Biol. 15 (1990), 81-93) lub kurczliwy promotor 1 (sh-1) kukurydzy (Werr, EMBO J. 4 (1985), ). Ekspresja cząsteczek kwasu nukleinowego według wynalazku jest szczególnie korzystna w tych częściach rośliny, które mają podwyższoną zawartość sacharozy lub które magazynują sacharozę. Takimi organami są na przykład korzenie buraka cukrowego lub łodygi trzciny cukrowej lub słodkiego sorgo. Szczególnie korzystne są zatem promotory, pośredniczące w ekspresji w tych organach, takie jak promotor patatyny B33 w Solanum tuberosum. W celu uzyskania specyficznej ekspresji w łodydze trzciny cukrowej może być stosowany promotor ubiquityny w połączeniu z pierwszym intronem. Wektory według wynalazku mogą także posiadać dodatkowe jednostki funkcjonalne, które wpływają na stabilizację wektora w organizmie gospodarza, takie jak bakteryjne replikacyjne miejsce ori lub 2-mikron-DNA dla stabilizacji i replikacji autonomicznej w drożdżach. Mogą również zawierać
9 PL B1 9 lewy brzeg i prawy brzeg sekwencji agrobakteryjnego T-DNA, co pozwala na trwałą integrację genomu roślinnego. Mogą być również obecne sekwencje terminacji, które dostarczają prawidłowego zakończenia transkrypcji lub dodają koniec poli-a do transkryptu, o którym wiadomo, że posiada funkcje stabilizacji tych transkryptów. Takie elementy opisane są w literaturze (porównaj, na przykład, Gielen, EMBO J. 8 (1989), 23-29) i są łatwo wymienialne. W korzystnej postaci cząsteczka kwasu nukleinowego zawarta w wektorze według wynalazku obejmuje region, który zawiera funkcjonalną sekwencję sygnałową dla wydzielenia kodowanego enzymu. Sekwencje takie są znane. Przykładem peptydu sygnałowego pozwalającego na lokalizację tego białka w wodniczce jest peptyd sygnałowy karboksypeptydazy Y z drożdży (CPY). Opisany był odpowiedni gen, w na przykład Valls i wsp. (Cell 48, ). Roślinnymi sekwencjami sygnałowymi są na przykład geny lektyny z jęczmienia (Raikhel i Lerner, Dev. Genet. 12 (1991), ) lub 43 aminokwasy z regionu N-końcowego dojrzałej fitohemaaglutyniny fasoli (Tague i wsp., Plant Cell 2 (1990), ). Przykładem C-końcowego peptydu sygnałowego jest chitynaza (Neuhaus i wsp., Plant. J. 5 (1994), 45-54). Korzystną sekwencją sygnałową jest na przykład sekwencja sygnałowa genu inhibitora proteinazy II z ziemniaka. Można jednakże stosować inną dowolną sekwencję sygnałową prowadzącą do sekrecji polipeptydu w wybranym gospodarzu. Wydzielona fruktozylotransferazą może być otrzymywana z pożywki hodowlanej i zastosowana do syntezy in vitro. W szczególnie korzystnej postaci wynalazku cząsteczka kwasu nukleinowego zawarta w wektorze obejmuje region, który koduje sekwencję sygnałową do lokalizacji w wodniczce komórki roślinnej, korzystnie taką jak gen patatyny z ziemniaka (Sonnewald, Plant. J. 1 (1998), ). Pozwala to na subkomórkową lokalizację fruktozylotransferazy w wodniczce genetycznie zmienionych komórek roślinnych i w roślinach, takich jak na przykład burak cukrowy lub ziemniak i nagromadzenie w wodniczkach wielocząsteczkowych polifruktoz typy inuliny. Inne sekwencje sygnałowe zlokalizowane w wodniczce opisane były przez na przykład przez Matusoaka (Journal of Experimental Botany 50 (1999), ), Chrispeels (Cell 68 (1992), ), Matsuoka (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 (1991), ), Bednarek (Plant Cell 3 (1991), ), Nakamura (Plant Phys. 101 (1993), 1-5). W innej postaci wynalazku cząsteczka kwasu nukleinowego zawarta w wektorze obejmuje region, który koduje sekwencję sygnałową plastydowej lokalizacji w komórkach roślinnych. Jako sekwencja sygnałowa, może być stosowana na przykład sekwencja sygnałowa ferrodoksyny: NADP(+)-oksydoreduktaza (FNR) szpinaku. Sekwencja ta zawiera 5' nietranslacyjne regiony jak również sekwencję flankującą cdna peptydu przejściowego białka plastydowego ferodoksyna:nadp(+)-oksydoreduktaza (FNR) szpinaku (nukleotyd do + 165; Jansen, Current Genetics 13 (1988), ). Jako sekwencja sygnałowa może być także stosowany peptyd przejścia białka wosku kukurydzy plus pierwsze 34 aminokwasy dojrzałego białka wosku (Klösgen, Mol. Gen. Genet. 217 (1989), ). W korzystnej postaci wynalazku peptyd przejścia białka wosku kukurydzy stosowany jest bez tych pierwszych 34 aminokwasów dojrzałego białka wosku. W szczególnie korzystnej postaci wynalazku, wynalazek dotyczy plazmidów psk-as1, p112-as1, pa7-as1, p35-as1, p35-s3-as1, konstrukcja których jest opisana w przykładach (Fig. 1 do 5). Cząsteczki kwasu nukleinowego i wektory ekspresji według wynalazku pozwalają na produkcje polifruktoz typu inuliny w różnych organizmach gospodarzy zwłaszcza w roślinach, grzybach i bakteriach. Te kodowane enzymy mogą być także stosowane poza organizmami gospodarzy do wytwarzania polifruktoz typu inuliny. To znaczy, możliwe jest zastosowanie cząsteczek kwasu nukleinowego według wynalazku do wytwarzania kodowanych przez nie białek w dowolnych komórkach gospodarza w celu otrzymania białka z komórki gospodarza i/lub pożywki hodowlanej i do stosowania ich dla syntezy inuliny in vitro. Na przykład konstrukt, który zawiera promotor dehydrogenazy alkoholowej i cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku może być stosowany do transformacji Saccharomyces cerevisiae. Ponieważ drożdże nie są zdolne do pobierania sacharozy powinny być stosowane komórki, które posiadają ekspresję nośnika sacharozy będącego wynikiem wprowadzonej heterologicznej sekwencji DNA. Wytwarzanie takich komórek opisane było na przykład w Riesmeier i wsp. (EMBO J. 11 (1992), ). Drożdże transformowane powyżej opisanym konstruktem tworzą polifruktozy długołańcuchowe typu inuliny. Ponieważ fruktozylotransferaza z Aspergillus sydowi nie posiada peptydu sygnałowego, dlatego nie są one wydzielane. Dlatego polifruktozy długołańcuchowe są generowane w ko-
10 10 PL B1 mórkach drożdżowych. Komórki drożdżowe zawierające te polifruktozy mogą być używane bezpośrednio jako dodatki do żywności. Jeżeli polifruktozy te mają być otrzymane na drodze fermentacyjnej w pożywce hodowlanej, dla uzyskania sekrecji, sekwencja sygnałowa może być połączona przez fuzję z cząsteczką kwasu nukleinowego według wynalazku. W kolejnej postaci, wynalazek dotyczy komórek gospodarza, które przejściowo lub trwale zawierają cząsteczki kwasu nukleinowego lub wektory według wynalazku lub które pochodzą z takich komórek. Określenie komórka gospodarza dotyczy organizmu, który jest zdolny do pobierania in vitro rekombinowanego DNA i ewentualnie do syntetyzowania białek kodowanych przez cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku. Komórki gospodarza mogą być pochodzenia prokariotycznego albo eukariotycznego. Określenie prokariotyczny obejmuje wszystkie bakterie, które mogą być transformowane lub transfekowane cząsteczką kwasu nukleinowego według wynalazku i takie, które korzystnie pozwalają na ekspresję białek posiadających aktywność fruktozylotransferazy. Priokariotyczne komórki gospodarza obejmują na przykład zarówno bakterie gram ujemne jak i gram dodatnie, takie jak E.coli, S. typhimurium, Serratia marcescens i Bacillus subtilis. Określenie eukariotyczne obejmuje komórki owadzie, komórki grzybowe, komórki roślinne, komórki zwierzęce i ludzkie. Korzystnymi komórkami grzybowymi są na przykład te, które fermentują lub mogą być stosowane do fermentacji, zwłaszcza Saccharomyces, zwłaszcza korzystnie S. cerevisiae, Schizosaccharomyces, Kluyveromyces, Pichia itd. Korzystnie, taką komórką grzybową jest komórka rodzaju Aspergillus i szczególnie korzystnie z gatunku Aspergillus niger. Szczególnie interesującą jest ekspresja fruktozylotransferazy według wynalazku w tych komórkach w połączeniu z wydzielniczą sekwencją sygnałową, na przykład taką jak gen patatyny lub gen 1-SST z Aspergillus foetidus (Rehm i wsp., J. Bac. 180 (1998), ), pozwalającą na wydzielenie fruktozylotransferazy do pożywki. Stosowane są korzystnie komórki posiadające zredukowaną aktywność inwertazy lub całkowicie pozbawione aktywności inwertazy. Gatunki grzybów nieposiadające swojej własnej aktywności inwertazy, to na przykład Trichoderma reesei. Protokół ekspresji β-fruktofuranozydazy (inwertaza z A.niger) była opisana na przykład w Berges i wsp. (Curr. Genet. 24 (1993), 53-59). Cząsteczka kwasu nukleinowego według wynalazku, która koduje białko posiadające aktywność fruktozylotransferazy lub odnośny wektor, może być transfekowana lub transformowana do komórki gospodarza konwencjonalnymi technikami przez fachowców w tej dziedzinie. Sposoby wytwarzania połączonych przez fuzję, operacyjnie połączonych genów i ich ekspresji w odpowiednich komórkach gospodarzy są dobrze znane ze stanu techniki i opisane były na przykład w Sambrook lub Ausubel, patrz wyżej. Korzystnymi gospodarzami są E.coli, grzyby, zwłaszcza drożdże oraz komórki roślinne. Komórki według wynalazku korzystnie charakteryzują się tym, że cząsteczka wprowadzonego kwasu nukleinowego jest heterologiczna w odniesieniu do transformowanej komórki, to znaczy, że nie występuje ona naturalnie w tych komórkach lub że jest zlokalizowana w takim miejscu genomu, który różny jest od naturalnie występującej sekwencji. Jeżeli cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku ulegają ekspresji w roślinach zwykle możliwe jest, że zsyntetyzowane białko zlokalizowane jest w którymś z przedziałów komórki roślinnej. W celu osiągnięcia lokalizacji w specyficznym przedziale, cząsteczka kwasu nukleinowego według wynalazku może być połączona z sekwencjami DNA, które zapewniają lokalizację w pożądanym przedziale; patrz wyżej. Sekwencje takie są znane (patrz, na przykład, Braun, EMBO J. 11 (1992), ; Wolter, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 (1988), ; Sonnewald, Plant J. 1 (1991), ; Rocha-Sosa, EMBO J. 8 (1989), 23-29). Gospodarze według wynalazku zawierają zatem transgeniczne komórki roślinne, tkanki roślinne i rośliny, które są transformowane jednym lub wieloma cząsteczką(ami) kwasu nukleinowego według wynalazku, jak również transgeniczne komórki roślinne pochodzące z komórek transformowanych w ten sposób. Takie komórki zawierają jedną lub wiele cząsteczkę(ek) kwasu nukleinowego, która jest (są) korzystnie połączone z elementami regulatorowymi DNA pozwalającymi na transkrypcję w komórkach roślinnych, korzystnie z promotorem. Komórki takie mogą być odróżnione od naturalnie występujących komórek roślinnych w ten sposób, że zawierają one co najmniej jedną cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku, która nie występuje naturalnie w tych komórkach lub, że taka cząsteczka jest zlokalizowana w takim miejscu genomu tych komórek gdzie nie występuje ona naturalnie, to znaczy w innym otoczeniu genomowym. W kolejnej postaci wynalazku niniejszy wynalazek dotyczy komórek roślinnych zawierających w ich cytozolu białko według wynalazku. W tej postaci wynalazku, sekwencja wskazana jako SEQ ID nr 2 stosowana jest zwykle bez dodatkowych sekwencji sygnałowych.
11 PL B1 11 W następnej korzystnej postaci, wynalazek niniejszy dotyczy komórek roślinnych zawierających w ich plastydach białko według wynalazku. Aby dokonać lokalizacji białka według wynalazku w plastydowach, można zmodyfikować cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku i/lub wektory według wynalazku w powyżej opisany sposób. Ponieważ wodniczka jest zwykle zdolna do gromadzenia dużych ilości sacharozy, która stanowi substrat dla białka według wynalazku, ten przedział jest najbardziej odpowiedni do generowania komórek roślinnych, które w związku z aktywnością białka według wynalazku produkowały polifruktozę w wodniczkach. W szczególnie korzystnej postaci niniejszy wynalazek dotyczy zatem komórek roślinnych zawierających w wodniczce białko według wynalazku. Wyjaśniono już powyżej jak cząsteczki kwasu nukleinowego i/lub wektory według wynalazku muszą być skonstruowane w celu zmiany lokalizacji białka według wynalazku w wodniczce. Transgeniczne komórki roślinne i tkanki roślinne mogą być regenerowane do całych roślin sposobami znanymi fachowcom. Rośliny, które można otrzymać przez regenerację transgenicznych komórek roślinnych według wynalazku są także przedmiotem niniejszego wynalazku. Kolejnym przedmiotem niniejszego wynalazku są rośliny, które zawierają transgeniczne komórki roślinne opisane powyżej. Rośliny według wynalazku mogą ogólnie być roślinami dowolnego gatunku, korzystnie są one roślinami jednoliściennymi lub dwuliściennymi. Korzystnie komórki roślinne pochodzą z roślin użytecznych rolniczo, to znaczy roślin, które są uprawiane przez człowieka w celu zaopatrzenia w żywność lub w celach technicznych a zwłaszcza przemysłowych. Korzystnie wynalazek dotyczy produkujących włókna (na przykład len, konopie, bawełna), gromadzących olej (na przykład rzepak, słonecznik, soja), gromadzących cukier (na przykład burak cukrowy, trzcina cukrowa, słodkie sorgo, banany) i gromadzących białka (na przykład strączkowe) roślin. W następnej korzystnej postaci wynalazek dotyczy roślin pastewnych (na przykład traw na suchą paszę lub na kiszonkę, kurkumy, koniczyny itp.), warzyw (na przykład melona, pomidora, bananów, cykorii, pora, szparagów, marchwi) lub roślin gromadzących skrobię (pszenica, jęczmień, owies, żyto, ziemniaki, kukurydza, ryż, groszek, kasawa, fasola mungo). W następnej postaci wynalazek dotyczy komórek roślinnych z roślin zawierających sacharozę (na przykład burak cukrowy, ziemniaki, ryż, pszenica, trzcina cukrowa, itp.). Szczególnie korzystnymi są burak cukrowy, cykoria, ryż, kukurydza, ziemniaki, trzcina cukrowa i pszenica. Wynalazek dotyczy także materiału propagacyjnego i produktów zbieranych z roślin według wynalazku na przykład owoców, nasion, bulw, korzeni, siewek, zrazów, kallusów, hodowli komórkowych, itp. Niniejszy wynalazek dotyczy także sposobów wytwarzania roślin transgenicznych, w których: (a) komórka roślinna jest genetycznie zmodyfikowana przez wprowadzenie cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku i/lub wektora według wynalazku; i (b) roślina jest regenerowana z komórki; i ewentualnie (c) dalsze rośliny są generowane z roślin według (b). W kontekście niniejszego wynalazku określenie genetycznie zmodyfikowany oznacza, że ta komórka roślinna jest zmodyfikowana informacją genetyczną właściwą dla wprowadzonej cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku i że obecność lub ekspresja cząsteczek kwasu nukleinowego według wynalazku daje w wyniku modyfikację fenotypową. Modyfikacja fenotypowa korzystnie oznacza dającą się wykryć modyfikację jednej lub wielu funkcji komórek. Na przykład, genetycznie zmodyfikowane rośliny według wynalazku wykazują aktywność białka według wynalazku lub podwyższoną całkowitą aktywność fruktozylotransferazy. Rośliny mogą być regenerowane według etapu (b) zgodnie ze sposobem dobrze znanym fachowcom biegłym w tej dziedzinie. Generowanie następnych roślin według etapu (c) sposobu według wynalazku może być wykonane, na przykład albo wegetatywnie (na przykład, stosując sadzonki, bulwy lub hodowle kallusa i regenerację całych roślin) lub generatywnie. Propagację generatywną korzystnie przeprowadza się w kontrolowany sposób, to znaczy wybrane rośliny posiadające specyficzne właściwości są krzyżowane i rozmnażane. Niniejszy wynalazek dotyczy roślin dających się otrzymać zgodnie ze sposobem według wynalazku. Niniejszy wynalazek dotyczy także materiału propagacyjnego roślin według wynalazku jak też roślin transgenicznych wygenerowanych sposobem według wynalazku. Określenie materiał propagacyjny obejmuje te części roślin, które są odpowiednie do wytwarzania potomstwa albo na drodze
12 12 PL B1 wegetatywnej albo generatywnej. Dla propagacji wegetatywnej stosuje się, na przykład, owoce, nasiona, siewki, protoplasty, hodowle komórkowe itp. Korzystnie materiałem propagacyjnym są bulwy i nasiona. W innej postaci, niniejszy wynalazek dotyczy zbieranych-części roślin, według wynalazku, takich jak owoce, liście, korzenie zapasowe, korzenie, kwiaty, pączki, kiełki, łodygi, korzystnie nasiona i bulwy. W następnej korzystnej postaci niniejszy wynalazek dotyczy pożywienia dla zwierząt i/lub ludzi, które zawiera dające się zebrać części roślin według wynalazku, korzystnie nasiona i bulwy. Korzystnie, części roślin według wynalazku, po spożyciu, mają korzystny wpływ na zdrowie ludzi i/lub zwierząt, w porównaniu do odpowiednich części roślin, które nie były genetycznie modyfikowane w sposób opisany w wynalazku. To samo dotyczy pożywienia dla zwierząt i/lub ludzi opisanych w wynalazku. U ludzi konsumpcja żywności według wynalazku może na przykład prowadzić do poprawienia składu flory bakteryjnej w jelitach, zwłaszcza wzrostu zawartości bifidobakterii w jelicie, co jak wydaje się, ma pozytywny wpływ na ludzkie zdrowie (Izzo, Trends in Food Science & Technology 9 (1998), ). Te pozytywne wpływy są korzystnie wpływami profilaktycznymi lub wpływami wspierającymi wykorzystanie pożywienia. Wynalazek dotyczy też sposobu wytwarzania komórek gospodarza, w którym odpowiednie komórki gospodarza transformowane są kwasem nukleinowym według wynalazku. Omawiane tu sposoby transformowania różnych komórek gospodarza, są znane fachowcom biegłym w tej dziedzinie. W innej postaci niniejszy wynalazek dotyczy sposobów wytwarzania fruktozylotransferazy, w których gospodarz według wynalazku jest hodowany w warunkach wystarczających do ekspresji cząsteczek kwasu nukleinowego według wynalazku a następnie fruktozylotransferazę izoluje się z hodowli, to znaczy z komórek i/lub ewentualnie obecną z medium hodowlanego. W powyżej wspomnianym sposobie transformowane lub transfekowane komórki gospodarza są hodowane na przykład w fermentorach aż do uzyskania optymalnej gęstości komórkowej. Ewentualnie, w przypadku indukowalnych promotorów, ekspresja białka kodowanego przez cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku jest indukowana tylko na koniec etapu fermentacji. Białko wyrażane w ten sposób może być następnie oczyszczane z pożywki, lizatu komórkowego lub frakcji błon komórkowych zgodnie z technikami konwencjonalnymi. Białka, które były wyrażane na przykład mikrobiologicznie mogą być izolowane i oczyszczane metodami preparatywnej chromatografii lub oczyszczane immunologicznie, na przykład przez zastosowanie przeciwciał monoklonalnych lub poliklonalnych, które rozpoznają białko kodowane przez tą cząsteczkę kwasu nukleinowego według wynalazku. W tym kontekście powinno się wspomnieć, że białko posiadające aktywność fruktozylotransferazy i kodowane przez cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku może zawierać dodatkowe funkcjonalne sekwencje aminokwasowe, na przykład białka tag (GST, GFP, Flag, peptyd HA, His-tag), które mogą pochodzić z heterologicznych białek lub mogą być wytwarzane syntetycznie. Ponadto wynalazek dotyczy białek posiadających aktywność fruktozylotransferazy, to znaczy fruktozylotransferazy kodowanej przez cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku lub dające się otrzymać sposobem według wynalazku. Fruktozylotransferaza według wynalazku może korzystnie być stosowana do wytwarzania polifruktoz typu inuliny. Mogą one także służyć do produkcji przeciwciał, które mogą być stosowane do wykrywania i/lub oczyszczania fruktozylotransferazy. W kolejnym wykonaniu wynalazek dotyczy cząsteczek kwasu nukleinowego, które specyficznie hybrydyzują z cząsteczkami kwasu nukleinowego według wynalazku lub ich fragmentami. Cząsteczki te korzystnie są oligonukleotydami o długości co najmniej 10, korzystnie 15 a szczególnie korzystnie co najmniej 50 nukleotydów. Oligonukleotydy według wynalazku mogą na przykład być stosowane jako primery do reakcji PCR, jako sondy hybrydyzacyjne lub podobnie. Kolejną istotą wynalazku są sposoby wytwarzania polifruktoz, zwłaszcza typu inuliny, w którym komórki gospodarza według wynalazku lub zawierające je organizmy gospodarza, są hodowane w warunkach pozwalających na ekspresję fruktozylotransferazy według wynalazku jak również na syntezę polifruktozy. Dzięki dostarczeniu cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku stało się możliwe wytwarzanie na drodze techniki genowej - polifruktoz, zwłaszcza typu inuliny, w organizmach, takich w jakich nie było to możliwe do tej pory przy zastosowaniu metod konwencjonalnych. Jest zatem możliwe przeprowadzenie ekspresji cząsteczki kwasu nukleinowego według wynalazku w gospodarzach takich jak bakterie, grzyby lub komórki roślinne w celu podwyższenia aktywności odpowiadającej fruktozylotransferazie lub wprowadzenie jej do komórek, które normalnie nie mają ekspresji wspomnianego enzymu. Dzięki ekspresji lub ekspresji dodatkowej co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleino-
WYNALAZKI BIOTECHNOLOGICZNE W POLSCE. Ewa Waszkowska ekspert UPRP
WYNALAZKI BIOTECHNOLOGICZNE W POLSCE Ewa Waszkowska ekspert UPRP Źródła informacji w biotechnologii projekt SLING Warszawa, 9-10.12.2010 PLAN WYSTĄPIENIA Umocowania prawne Wynalazki biotechnologiczne Statystyka
Bardziej szczegółowoNowoczesne systemy ekspresji genów
Nowoczesne systemy ekspresji genów Ekspresja genów w organizmach żywych GEN - pojęcia podstawowe promotor sekwencja kodująca RNA terminator gen Gen - odcinek DNA zawierający zakodowaną informację wystarczającą
Bardziej szczegółowoDr. habil. Anna Salek International Bio-Consulting 1 Germany
1 2 3 Drożdże są najprostszymi Eukariontami 4 Eucaryota Procaryota 5 6 Informacja genetyczna dla każdej komórki drożdży jest identyczna A zatem każda komórka koduje w DNA wszystkie swoje substancje 7 Przy
Bardziej szczegółowo1. Biotechnologia i inżynieria genetyczna zagadnienia wstępne 13
Spis treści Przedmowa 11 1. Biotechnologia i inżynieria genetyczna zagadnienia wstępne 13 1.1. Wprowadzenie 13 1.2. Biotechnologia żywności znaczenie gospodarcze i społeczne 13 1.3. Produkty modyfikowane
Bardziej szczegółowoInżynieria genetyczna- 6 ECTS. Inżynieria genetyczna. Podstawowe pojęcia Część II Klonowanie ekspresyjne Od genu do białka
Inżynieria genetyczna- 6 ECTS Część I Badanie ekspresji genów Podstawy klonowania i różnicowania transformantów Kolokwium (14pkt) Część II Klonowanie ekspresyjne Od genu do białka Kolokwium (26pkt) EGZAMIN
Bardziej szczegółowoRok akademicki: 2014/2015 Kod: EIB-2-206-BN-s Punkty ECTS: 3. Kierunek: Inżynieria Biomedyczna Specjalność: Bionanotechnologie
Nazwa modułu: Genetyka molekularna Rok akademicki: 2014/2015 Kod: EIB-2-206-BN-s Punkty ECTS: 3 Wydział: Elektrotechniki, Automatyki, Informatyki i Inżynierii Biomedycznej Kierunek: Inżynieria Biomedyczna
Bardziej szczegółowoKlonowanie molekularne Kurs doskonalący. Zakład Geriatrii i Gerontologii CMKP
Klonowanie molekularne Kurs doskonalący Zakład Geriatrii i Gerontologii CMKP Etapy klonowania molekularnego 1. Wybór wektora i organizmu gospodarza Po co klonuję (do namnożenia DNA [czy ma być metylowane
Bardziej szczegółowoBłonnik pokarmowy: właściwości, skład, występowanie w żywności
Błonnik pokarmowy: właściwości, skład, występowanie w żywności Dr hab. Jarosława Rutkowska, prof. nadzwycz. SGGW Zakład Analiz Instrumentalnych Wydział Nauk o Żywieniu Człowieka i Konsumpcji, SGGW w Warszawie
Bardziej szczegółowowykład dla studentów II roku biotechnologii Andrzej Wierzbicki
Genetyka ogólna wykład dla studentów II roku biotechnologii Andrzej Wierzbicki Uniwersytet Warszawski Wydział Biologii andw@ibb.waw.pl http://arete.ibb.waw.pl/private/genetyka/ 1. Gen to odcinek DNA odpowiedzialny
Bardziej szczegółowoDR ŻANETA PACUD Zdolność patentowa roślin
DR ŻANETA PACUD Zdolność patentowa roślin czyli rzecz o brokułach i pomidorach Sposoby ochrony prawnej roślin wprowadzenie Ochrona prawna odmian roślin - Międzynarodowa konwencja o ochronie nowych odmian
Bardziej szczegółowoMożliwości współczesnej inżynierii genetycznej w obszarze biotechnologii
Możliwości współczesnej inżynierii genetycznej w obszarze biotechnologii 1. Technologia rekombinowanego DNA jest podstawą uzyskiwania genetycznie zmodyfikowanych organizmów 2. Medycyna i ochrona zdrowia
Bardziej szczegółowoPatentowanie wynalazków z dziedziny biotechnologii
chroń swoje pomysły 3 Kongres Świata Przemysłu Farmaceutycznego Poznań, 16-17 czerwca 2011 Patentowanie wynalazków z dziedziny biotechnologii dr Izabela Milczarek Czym jest biotechnologia? Biotechnologia,
Bardziej szczegółowoSpis treści. 1. Wiadomości wstępne Skład chemiczny i funkcje komórki Przedmowa do wydania czternastego... 13
Przedmowa do wydania czternastego... 13 Częściej stosowane skróty... 15 1. Wiadomości wstępne... 19 1.1. Rys historyczny i pojęcia podstawowe... 19 1.2. Znaczenie biochemii w naukach rolniczych... 22 2.
Bardziej szczegółowoAgenda: Wynalazek jako własnośd intelektualna. Co może byd wynalazkiem. Wynalazek biotechnologiczny. Ochrona patentowa
dr Bartosz Walter Agenda: Wynalazek jako własnośd intelektualna Co może byd wynalazkiem Wynalazek biotechnologiczny Ochrona patentowa Procedura zgłoszenia patentowego Gdzie, kiedy i jak warto patentowad
Bardziej szczegółowo(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 2135881 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 14.06.2006 09010789.7
Bardziej szczegółowoPytania Egzamin magisterski
Pytania Egzamin magisterski Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii UG i GUMed 1. Krótko omów jakie informacje powinny być zawarte w typowych rozdziałach publikacji naukowej: Wstęp, Materiały i Metody,
Bardziej szczegółowopaździernika 2013: Elementarz biologii molekularnej. Wykład nr 2 BIOINFORMATYKA rok II
10 października 2013: Elementarz biologii molekularnej www.bioalgorithms.info Wykład nr 2 BIOINFORMATYKA rok II Komórka: strukturalna i funkcjonalne jednostka organizmu żywego Jądro komórkowe: chroniona
Bardziej szczegółowoDrożdżowe systemy ekspresyjne
Drożdże Drożdżowe systemy ekspresyjne Zalety: możliwość uzyskania dużej biomasy modyfikacje postranslacyjne eksprymowanych białek transport eksprymowanych białek do pożywki Duża biomasa W przypadku hodowli
Bardziej szczegółowoBIOSYNTEZA ACYLAZY PENICYLINOWEJ. Ćwiczenia z Mikrobiologii Przemysłowej 2011
BIOSYNTEZA ACYLAZY PENICYLINOWEJ Ćwiczenia z Mikrobiologii Przemysłowej 2011 Acylaza penicylinowa Enzym hydrolizuje wiązanie amidowe w penicylinach Reakcja przebiega wg schematu: acylaza Reszta: fenyloacetylowa
Bardziej szczegółowoTransformacja pośrednia składa się z trzech etapów:
Transformacja pośrednia składa się z trzech etapów: 1. Otrzymanie pożądanego odcinka DNA z materiału genetycznego dawcy 2. Wprowadzenie obcego DNA do wektora 3. Wprowadzenie wektora, niosącego w sobie
Bardziej szczegółowoWykład 14 Biosynteza białek
BIOCHEMIA Kierunek: Technologia Żywności i Żywienie Człowieka semestr III Wykład 14 Biosynteza białek WYDZIAŁ NAUK O ŻYWNOŚCI I RYBACTWA CENTRUM BIOIMMOBILIZACJI I INNOWACYJNYCH MATERIAŁÓW OPAKOWANIOWYCH
Bardziej szczegółowo(62) Numer zgłoszenia, z którego nastąpiło wydzielenie: (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: , PCT/EP03/009145
PL 214792 B1 RZECZPOSPOLITA POLSKA Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 214792 (21) Numer zgłoszenia: 392183 (22) Data zgłoszenia: 15.08.2003 (62) Numer zgłoszenia,
Bardziej szczegółowoWPROWADZENIE DO GENETYKI MOLEKULARNEJ
WPROWADZENIE DO GENETYKI MOLEKULARNEJ Replikacja organizacja widełek replikacyjnych Transkrypcja i biosynteza białek Operon regulacja ekspresji genów Prowadzący wykład: prof. dr hab. Jarosław Burczyk REPLIKACJA
Bardziej szczegółowoOrganizmy Modyfikowane Genetycznie Rośliny transgeniczne
Organizmy Modyfikowane Genetycznie Rośliny transgeniczne Co to GMO? GMO to organizmy, których genom został zmieniony metodami inżynierii genetycznej w celu uzyskania nowych cech fizjologicznych (lub zmiany
Bardziej szczegółowoĆwiczenia 1 Wirtualne Klonowanie Prowadzący: mgr inż. Joanna Tymeck-Mulik i mgr Lidia Gaffke. Część teoretyczna:
Uniwersytet Gdański, Wydział Biologii Katedra Biologii Molekularnej Przedmiot: Biologia Molekularna z Biotechnologią Biologia II rok ===============================================================================================
Bardziej szczegółowoWPROWADZENIE DO GENETYKI MOLEKULARNEJ
WPROWADZENIE DO GENETYKI MOLEKULARNEJ Replikacja organizacja widełek replikacyjnych Transkrypcja i biosynteza białek Operon regulacja ekspresji genów Prowadzący wykład: prof. dr hab. Jarosław Burczyk REPLIKACJA
Bardziej szczegółowoGeny i działania na nich
Metody bioinformatyki Geny i działania na nich prof. dr hab. Jan Mulawka Trzy królestwa w biologii Prokaryota organizmy, których komórki nie zawierają jądra, np. bakterie Eukaryota - organizmy, których
Bardziej szczegółowoBiologia molekularna z genetyką
Biologia molekularna z genetyką P. Golik i M. Koper Konwersatorium 3: Analiza genetyczna eukariontów Saccharomyces cerevisiae Makrokierunek: Bioinformatyka i Biologia Systemów; 2016 Opracowano na podstawie
Bardziej szczegółowoInwestycja w przyszłość czyli znaczenie ochrony własności przemysłowej dla współczesnej biotechnologii
Inwestycja w przyszłość czyli znaczenie ochrony własności przemysłowej dla współczesnej biotechnologii Zdolność patentowa wynalazków biotechnologicznych aspekty praktyczne dr Małgorzata Kozłowska Ekspert
Bardziej szczegółowo(86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: , PCT/EP00/05666 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA () OPIS PATENTOWY (9) PL () 005 () Numer zgłoszenia: 35360 (3) B Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej () Data zgłoszenia: 0.06.000 (6) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego:
Bardziej szczegółowoBiotechnologia jest dyscypliną nauk technicznych, która wykorzystuje procesy biologiczne na skalę przemysłową. Inaczej są to wszelkie działania na
Biotechnologia jest dyscypliną nauk technicznych, która wykorzystuje procesy biologiczne na skalę przemysłową. Inaczej są to wszelkie działania na żywych organizmach prowadzące do uzyskania konkretnych
Bardziej szczegółowoBiologia Molekularna z Biotechnologią ===============================================================================================
Uniwersytet Gdański, Wydział Biologii Biologia i Biologia Medyczna II rok Katedra Genetyki Molekularnej Bakterii Katedra Biologii i Genetyki Medycznej Przedmiot: Katedra Biologii Molekularnej Biologia
Bardziej szczegółowoEkspresja genów heterogenicznych w drożdżach Pichia pastoris
Ekspresja genów heterogenicznych w drożdżach Pichia pastoris Ekspresja genów heterogenicznych w drożdżach Pichia pastoris Drożdże Pichia pastoris należą do drożdży metanolotroficznych tj. zdolnych do wykorzystywania
Bardziej szczegółowoCzy żywność GMO jest bezpieczna?
Instytut Żywności i Żywienia dr n. med. Lucjan Szponar Czy żywność GMO jest bezpieczna? Warszawa, 21 marca 2005 r. Od ponad połowy ubiegłego wieku, jedną z rozpoznanych tajemnic życia biologicznego wszystkich
Bardziej szczegółowoTematy- Biologia zakres rozszerzony, klasa 2TA,2TŻ-1, 2TŻ-2
Tematy- Biologia zakres rozszerzony, klasa 2TA,2TŻ-1, 2TŻ-2 Nr lekcji Temat Zakres treści 1 Zapoznanie z PSO, wymaganiami edukacyjnymi i podstawą programową PSO, wymagania edukacyjne i podstawa programowa
Bardziej szczegółowoWybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna
Wybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna Proteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich (lub prawie wszystkich) białek komórkowych Zalety analizy proteomu np. w porównaniu z analizą trankryptomu:
Bardziej szczegółowoKLONOWANIE DNA REKOMBINACJA DNA WEKTORY
KLONOWANIE DNA Klonowanie DNA jest techniką powielania fragmentów DNA DNA można powielać w komórkach (replikacja in vivo) W probówce (PCR) Do przeniesienia fragmentu DNA do komórek gospodarza potrzebny
Bardziej szczegółowoZnaczenie genetyki. Opracował A. Podgórski
Znaczenie genetyki Opracował A. Podgórski InŜynieria genetyczna InŜynieria genetyczna ingerencja w materiał genetyczny organizmów, w celu zmiany ich właściwości dziedzicznych. Istota inŝynierii genetycznej
Bardziej szczegółowoChemiczne składniki komórek
Chemiczne składniki komórek Pierwiastki chemiczne w komórkach: - makroelementy (pierwiastki biogenne) H, O, C, N, S, P Ca, Mg, K, Na, Cl >1% suchej masy - mikroelementy Fe, Cu, Mn, Mo, B, Zn, Co, J, F
Bardziej szczegółowoBloki licencjackie i studia magisterskie na Kierunkach: Biotechnologia, specjalność Biotechnologia roślinna oraz Genetyka
Bloki licencjackie i studia magisterskie na Kierunkach: Biotechnologia, specjalność Biotechnologia roślinna oraz Genetyka INSTYTUT BIOLOGII EKSPERYMENTALNEJ W Katedrze Genetyki Ogólnej, Biologii Molekularnej
Bardziej szczegółowo(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 1924600. (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 06.09.2006 06791878.
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 1924600 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 06.09.06 06791878.9
Bardziej szczegółowoInwestycja w przyszłość czyli znaczenie ochrony własności przemysłowej dla współczesnej biotechnologii
Inwestycja w przyszłość czyli znaczenie ochrony własności przemysłowej dla współczesnej biotechnologii Zdolność patentowa wynalazków biotechnologicznych dr Małgorzata Kozłowska Ekspert w UPRP dr Ewa Waszkowska
Bardziej szczegółowoZawartość. Wstęp 1. Historia wirusologii. 2. Klasyfikacja wirusów
Zawartość 139585 Wstęp 1. Historia wirusologii 2. Klasyfikacja wirusów 3. Struktura cząstek wirusowych 3.1. Metody określania struktury cząstek wirusowych 3.2. Budowa cząstek wirusowych o strukturze helikalnej
Bardziej szczegółowoKonstrukcja wektora plazmidowego DNA do klonowania genów i/lub wektora plazmidowego do sekrecji w bakteriach mlekowych
Konstrukcja wektora plazmidowego DNA do klonowania genów i/lub wektora plazmidowego do sekrecji w bakteriach mlekowych Łukasz Tranda Promotor: doc. dr hab. Jacek Bardowski, IBB Promotor: dr hab. Edward
Bardziej szczegółowoInżynieria genetyczna
Inżynieria genetyczna i technologia rekombinowanego DNA Dr n. biol. Urszula Wasik Zakład Biologii Medycznej Inżynieria genetyczna świadoma, celowa, kontrolowana ingerencja w materiał genetyczny organizmów
Bardziej szczegółowo(86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: ,PCT/GB00/00248 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 202462 (21) Numer zgłoszenia: 349486 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (22) Data zgłoszenia: 28.01.2000 (86) Data i numer zgłoszenia
Bardziej szczegółowoMożliwości współczesnej inżynierii genetycznej w obszarze biotechnologii
Możliwości współczesnej inżynierii genetycznej w obszarze biotechnologii 1. Transgeneza - genetycznie zmodyfikowane oraganizmy 2. Medycyna i ochrona zdrowia 3. Genomika poznawanie genomów Przełom XX i
Bardziej szczegółowoTATA box. Enhancery. CGCG ekson intron ekson intron ekson CZĘŚĆ KODUJĄCA GENU TERMINATOR. Elementy regulatorowe
Promotory genu Promotor bliski leży w odległości do 40 pz od miejsca startu transkrypcji, zawiera kasetę TATA. Kaseta TATA to silnie konserwowana sekwencja TATAAAA, występująca w większości promotorów
Bardziej szczegółowo(86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: , PCT/EP99/03292 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 197407 (21) Numer zgłoszenia: 344751 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (22) Data zgłoszenia: 12.05.1999 (86) Data i numer zgłoszenia
Bardziej szczegółowoInżynieria Genetyczna ćw. 3
Materiały do ćwiczeń z przedmiotu Genetyka z inżynierią genetyczną D - blok Inżynieria Genetyczna ćw. 3 Instytut Genetyki i Biotechnologii, Wydział Biologii, Uniwersytet Warszawski, rok akad. 2018/2019
Bardziej szczegółowowykład dla studentów II roku biotechnologii Andrzej Wierzbicki
Genetyka ogólna wykład dla studentów II roku biotechnologii Andrzej Wierzbicki Uniwersytet Warszawski Wydział Biologii andw@ibb.waw.pl http://arete.ibb.waw.pl/private/genetyka/ Wykład 5 Droga od genu do
Bardziej szczegółowoBadanie funkcji genu
Badanie funkcji genu Funkcję genu można zbadać różnymi sposobami Przypadkowa analizy funkcji genu MUTACJA FENOTYP GEN Strategia ukierunkowanej analizy funkcji genu GEN 1. wprowadzenie mutacji w genie 2.
Bardziej szczegółowoTechniki molekularne w mikrobiologii SYLABUS A. Informacje ogólne
Techniki molekularne w mikrobiologii A. Informacje ogólne Elementy sylabusu Nazwa jednostki prowadzącej kierunek Nazwa kierunku studiów Poziom kształcenia Profil studiów Forma studiów Rodzaj Rok studiów
Bardziej szczegółowoLaboratorium Pomorskiego Parku Naukowo-Technologicznego Gdynia.
Laboratorium Pomorskiego Parku Naukowo-Technologicznego Gdynia www.ppnt.pl/laboratorium Laboratorium jest częścią modułu biotechnologicznego Pomorskiego Parku Naukowo Technologicznego Gdynia. poprzez:
Bardziej szczegółowoProteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich lub prawie wszystkich białek komórkowych
Proteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich lub prawie wszystkich białek komórkowych Zalety w porównaniu z analizą trankryptomu: analiza transkryptomu komórki identyfikacja mrna nie musi jeszcze oznaczać
Bardziej szczegółowoSACHARYDY MONOSACHARYDY POLISACHARYDY OLIGOSACHARYDY
SACHARYDY MONOSACHARYDY POLISACHARYDY OLIGOSACHARYDY C x H 2y O y y = 2-10 Oligosacharydy oligomery węglowodanowe, które zawierają od 2 do 10 monomerów, którymi są cukry proste (monosacharydy), np. glukoza,
Bardziej szczegółowoTRANSKRYPCJA - I etap ekspresji genów
Eksparesja genów TRANSKRYPCJA - I etap ekspresji genów Przepisywanie informacji genetycznej z makrocząsteczki DNA na mniejsze i bardziej funkcjonalne cząsteczki pre-mrna Polimeraza RNA ETAP I Inicjacja
Bardziej szczegółowoKsięgarnia PWN: B. Alberts, D. Bray, K. Hopkin, A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, P. Walter Podstawy biologii komórki. Cz.
Księgarnia PWN: B. Alberts, D. Bray, K. Hopkin, A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, P. Walter Podstawy biologii komórki. Cz. 1 ROZDZIAŁ 1. KOMÓRKI WPROWADZENIE 1 Jedność i różnorodność komórek 1
Bardziej szczegółowo2. Enzymy pozwalające na manipulację DNA a. Polimerazy DNA b. Nukleazy c. Ligazy
Metody analizy DNA 1. Budowa DNA. 2. Enzymy pozwalające na manipulację DNA a. Polimerazy DNA b. Nukleazy c. Ligazy 3. Klonowanie in vivo a. w bakteriach, wektory plazmidowe b. w fagach, kosmidy c. w drożdżach,
Bardziej szczegółowoĆwiczenia 1 Wirtualne Klonowanie. Prowadzący: mgr Anna Pawlik i mgr Maciej Dylewski. Część teoretyczna:
Uniwersytet Gdański, Wydział Biologii Biologia i Biologia Medyczna II rok Katedra Biologii Molekularnej Przedmiot: Biologia Molekularna z Biotechnologią ===============================================================================================
Bardziej szczegółowoMaking the impossible possible: the metamorphosis of Polish Biology Olympiad
Making the impossible possible: the metamorphosis of Polish Biology Olympiad Takao Ishikawa Faculty of Biology, University of Warsaw, Poland Performance of Polish students at IBO Gold Silver Bronze Merit
Bardziej szczegółowoObserwacje, doświadczenia, hodowle - aktywny uczeń na lekcjach biologii w klasie piątej
Obserwacje, doświadczenia, hodowle - aktywny uczeń na lekcjach biologii w klasie piątej Anna Kimak-Cysewska 2018 Samodzielne przeprowadzenie nawet bardzo prostego doświadczenia lub obserwacji dostarcza
Bardziej szczegółowo(86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: , PCT/EP00/03259 (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 201818 (21) Numer zgłoszenia: 356055 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (22) Data zgłoszenia: 12.04.2000 (86) Data i numer zgłoszenia
Bardziej szczegółowoBiologia Molekularna Podstawy
Biologia Molekularna Podstawy Budowa DNA Budowa DNA Zasady: Purynowe: adenina i guanina Pirymidynowe: cytozyna i tymina 2 -deoksyryboza Grupy fosforanowe Budowa RNA Budowa RNA Zasady: purynowe: adenina
Bardziej szczegółowoNiestandardowe wykorzystanie buraków cukrowych
Niestandardowe wykorzystanie buraków cukrowych Stanisław Wawro, Radosław Gruska, Agnieszka Papiewska, Maciej Stanisz Instytut Chemicznej Technologii Żywności Skład chemiczny korzeni dojrzałych buraków
Bardziej szczegółowoWybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna
Wybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna Proteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich (lub prawie wszystkich) białek komórkowych Zalety analizy proteomu w porównaniu z analizą trankryptomu:
Bardziej szczegółowoRośliny modyfikowane genetycznie (GMO)
Rośliny modyfikowane genetycznie (GMO) Organizmy modyfikowane genetycznie Organizm zmodyfikowany genetycznie (międzynarodowy skrót: GMO Genetically Modified Organizm) to organizm o zmienionych cechach,
Bardziej szczegółowo"Dlaczego NIE dla GMO w środowisku rolniczym" Prof. zw. dr hab. inż. Magdalena Jaworska
"Dlaczego NIE dla GMO w środowisku rolniczym" Prof. zw. dr hab. inż. Magdalena Jaworska Kierownik Katedry Ochrony Środowiska Rolniczego Uniwersytet Rolniczy w Krakowie Ekspert EU Biotechnology in Agriculture
Bardziej szczegółowoWYKŁAD: Klasyczny przepływ informacji ( Dogmat) Klasyczny przepływ informacji. Ekspresja genów realizacja informacji zawartej w genach
WYKŁAD: Ekspresja genów realizacja informacji zawartej w genach Prof. hab. n. med. Małgorzata Milkiewicz Zakład Biologii Medycznej Klasyczny przepływ informacji ( Dogmat) Białka Retrowirusy Białka Klasyczny
Bardziej szczegółowoWYMAGANIA EDUKACYJNE Z BIOLOGII KLASA 5 DOBRY. DZIAŁ 1. Biologia jako nauka ( 4godzin)
WYMAGANIA EDUKACYJNE Z BIOLOGII KLASA 5 DOPUSZCZAJĄCY DOSTATECZNY DOBRY BARDZO DOBRY CELUJĄCY DZIAŁ 1. Biologia jako nauka ( 4godzin) wskazuje biologię jako naukę o organizmach wymienia czynności życiowe
Bardziej szczegółowoKsięgarnia PWN: Biotechnologia roślin, redakcja naukowa: Stefan Malepszy SPIS TREŚCI
Księgarnia PWN: Biotechnologia roślin, redakcja naukowa: Stefan Malepszy SPIS TREŚCI 1 Wprowadzenie 15 2 Metoda kultury in vitro 19 2.1. Kultura komórek i tkanek............................... 19 2.1.1.
Bardziej szczegółowo(21)Numer zgłoszenia: 308742. (87)Data i numer publikacji zgłoszenia. międzynarodowego: 11.05.1994, WO94/10325, PCT Gazette nr 11/94
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 178040 (21)Numer zgłoszenia: 308742 (22) Data zgłoszenia: 05.11.1993 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (86) D ata i numer zgłoszenia międzynarodowego:
Bardziej szczegółowoNowe techniki w biotechnologii rolniczej i związane z nimi wyzwania:
Nowe techniki w biotechnologii rolniczej i związane z nimi wyzwania: Prezentacja opinii Grupy Wysokiego Szczebla Mechanizmu Doradztwa Naukowego Komisji Europejskiej DOWODY NAUKOWE prof. Janusz M. Bujnicki
Bardziej szczegółowoNajważniejsze z nich to: enzymy restrykcyjne wektory DNA inne enzymy np. ligazy, fosfatazy, polimerazy, nukleazy
Aby manipulować genami niezbędne są odpowiednie narzędzia molekularne, które pozwalają uzyskać tzw. zrekombinowane DNA (umożliwiają rekombinację materiału genetycznego in vitro czyli w próbówce) Najważniejsze
Bardziej szczegółowoAnalizy wielkoskalowe w badaniach chromatyny
Analizy wielkoskalowe w badaniach chromatyny Analizy wielkoskalowe wykorzystujące mikromacierze DNA Genotypowanie: zróżnicowane wewnątrz genów RNA Komórka eukariotyczna Ekspresja genów: Które geny? Poziom
Bardziej szczegółowoAnalizy DNA in silico - czyli czego można szukać i co można znaleźć w sekwencjach nukleotydowych???
Analizy DNA in silico - czyli czego można szukać i co można znaleźć w sekwencjach nukleotydowych??? Alfabet kwasów nukleinowych jest stosunkowo ubogi!!! Dla sekwencji DNA (RNA) stosuje się zasadniczo*
Bardziej szczegółowoCZY ROLNICTWO EKOLOGICZNE POWIATU SIEDLECKIEGO PODEJMIE UPRAWĘ ROŚLIN GENETYCZNIE MODYFIKOWANYCH?
J e r z y C h e ł s t o w s k i A kadem ia Podlaska w Siedlcach CZY ROLNICTWO EKOLOGICZNE POWIATU SIEDLECKIEGO PODEJMIE UPRAWĘ ROŚLIN GENETYCZNIE MODYFIKOWANYCH? Region Podlasia znany jest z produkcji
Bardziej szczegółowo(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 1942198 (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 16.07.200 07123761.4 (13) (1) T3 Int.Cl. C12Q 1/68 (2006.01)
Bardziej szczegółowoPOZIOMY WYMAGAŃ EDUKACYJNYCH Z BIOLOGII KLASA V
POZIOMY WYMAGAŃ EDUKACYJNYCH Z BIOLOGII KLASA V Program PULS ŻYCIA autor: Anna Zdziennicka Podręcznik do biologii opracowany przez: Joanna Stawarz i Marian Sęktas NA ŚRÓDROCZNĄ OCENĘ KLASYFIKACYJNĄ ocena
Bardziej szczegółowodostateczny oraz: wyjaśnia, z czego wynika komplementarność zasad przedstawia graficznie regułę
WYMAGANIA EDUKACYJNE Z BIOLOGII ZAKRES PODSTAWOWY KLASA I Dział Zakres wymagań na poszczególne oceny szkolne programowy dopuszczający dostateczny dobry bardzo dobry celujący Od genu do cechy określa rolę
Bardziej szczegółowoThe Role of Maf1 Protein in trna Processing and Stabilization / Rola białka Maf1 w dojrzewaniu i kontroli stabilności trna
Streszczenie rozprawy doktorskiej pt. The Role of Maf1 Protein in trna Processing and Stabilization / Rola białka Maf1 w dojrzewaniu i kontroli stabilności trna mgr Tomasz Turowski, promotor prof. dr hab.
Bardziej szczegółowoPrzeglądanie bibliotek
Przeglądanie bibliotek Czyli jak złapać (i sklonować) ciekawy gen? Klonowanie genów w oparciu o identyczność lub podobieństwo ich sekwencji do znanego już DNA Sonda homologiczna (komplementarna w 100%)
Bardziej szczegółowoNajważniejsze z nich to: enzymy restrykcyjne wektory DNA inne enzymy np. ligazy, fosfatazy, polimerazy, nukleazy
Aby manipulować genami niezbędne są odpowiednie narzędzia molekularne, które pozwalają uzyskać tzw. zrekombinowane DNA (umożliwiają rekombinację materiału genetycznego in vitro czyli w próbówce) Najważniejsze
Bardziej szczegółowoWęglowodany (Cukry) Część 3. Związki wielofunkcyjne
Węglowodany (Cukry) Część 3 Związki wielofunkcyjne Glikozydy Monosacharydy Ryboza, Deoksyryboza: - wzory - funkcje biologiczne, pochodne Disacharydy Sacharoza, Celobioza, Maltoza,Laktoza - wzór - właściwości
Bardziej szczegółowoTECHNIKI ANALIZY RNA TECHNIKI ANALIZY RNA TECHNIKI ANALIZY RNA
DNA 28SRNA 18/16S RNA 5SRNA mrna Ilościowa analiza mrna aktywność genów w zależności od wybranych czynników: o rodzaju tkanki o rodzaju czynnika zewnętrznego o rodzaju upośledzenia szlaku metabolicznego
Bardziej szczegółowoPatentowanie wynalazków biotechnologicznych
Patentowanie wynalazków biotechnologicznych Izabela Milczarek Przedsiębiorstwo Rzeczników Patentowych Patpol Sp. z o.o. Czym jest biotechnologia? Wiek XX był wiekiem niezwykle dynamicznego rozwoju wielu
Bardziej szczegółowo(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 172667 (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 04.03.200 07182.9 (13) T3 (1) Int. Cl. C12N1/82 A01H/00 (2006.01)
Bardziej szczegółowoTematyka zajęć z biologii
Tematyka zajęć z biologii klasy: I Lp. Temat zajęć Zakres treści 1 Zapoznanie z przedmiotowym systemem oceniania, wymaganiami edukacyjnymi i podstawą programową Podstawowe zagadnienia materiału nauczania
Bardziej szczegółowoHybrydyzacja kwasów nukleinowych
Hybrydyzacja kwasów nukleinowych Jaka jest lokalizacja genu na chromosomie? Jakie jest jego sąsiedztwo? Hybrydyzacja - powstawanie stabilnych struktur dwuniciowych z cząsteczek jednoniciowych o komplementarnych
Bardziej szczegółowoWymagania edukacyjne Biologia na czasie zakres podstawowy
Wymagania edukacyjne Biologia na czasie zakres podstawowy Dział programu Temat Poziom wymagań konieczny (K) podstawowy (P) rozszerzający (R) dopełniający (D) I. Od genu do cechy Budowa i funkcje kwasów
Bardziej szczegółowoOd kapusty do mamuta wyzwania biotechnologii. Renata Szymańska
Od kapusty do mamuta wyzwania biotechnologii Renata Szymańska Biotechnologia Biotechnologia świadczy dobra i usługi z wykorzystaniem metod biologicznych (definicja wg OECD) Towarzyszy człowiekowi od dawna
Bardziej szczegółowo(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 1968711 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 05.01.2007 07712641.5
Bardziej szczegółowoMetody badania ekspresji genów
Metody badania ekspresji genów dr Katarzyna Knapczyk-Stwora Warunki wstępne: Proszę zapoznać się z tematem Metody badania ekspresji genów zamieszczonym w skrypcie pod reakcją A. Lityńskiej i M. Lewandowskiego
Bardziej szczegółowoCo to jest transkryptom? A. Świercz ANALIZA DANYCH WYSOKOPRZEPUSTOWYCH 2
ALEKSANDRA ŚWIERCZ Co to jest transkryptom? A. Świercz ANALIZA DANYCH WYSOKOPRZEPUSTOWYCH 2 Ekspresja genów http://genome.wellcome.ac.uk/doc_wtd020757.html A. Świercz ANALIZA DANYCH WYSOKOPRZEPUSTOWYCH
Bardziej szczegółowo[2ZPK/KII] Inżynieria genetyczna w kosmetologii
[2ZPK/KII] Inżynieria genetyczna w kosmetologii 1. Ogólne informacje o module Nazwa modułu Kod modułu Nazwa jednostki prowadzącej modułu Nazwa kierunku studiów Forma studiów Profil kształcenia Semestr
Bardziej szczegółowowykład dla studentów II roku biotechnologii Andrzej Wierzbicki
Genetyka ogólna wykład dla studentów II roku biotechnologii Andrzej Wierzbicki Uniwersytet Warszawski Wydział Biologii andw@ibb.waw.pl http://arete.ibb.waw.pl/private/genetyka/ Ekspresja genów jest regulowana
Bardziej szczegółowoNośnikiem informacji genetycznej są bardzo długie cząsteczki DNA, w których jest ona zakodowana w liniowej sekwencji nukleotydów A, T, G i C
MATERIAŁ GENETYCZNY KOMÓRKI BIOSYNTEZA BIAŁEK MATERIAŁ GENETYCZNY KOMÓRKI Informacja genetyczna - instrukcje kierujące wszystkimi funkcjami komórki lub organizmu zapisane jako określone, swoiste sekwencje
Bardziej szczegółowoBadanie funkcji genu
Badanie funkcji genu Funkcję genu można zbadać różnymi sposobami Przypadkowa analizy funkcji genu MUTACJA FENOTYP GEN Strategia ukierunkowanej analizy funkcji genu GEN 1. wprowadzenie mutacji w genie 2.
Bardziej szczegółowo(12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego:
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 21 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 22.07.09 098000.7 (97) O
Bardziej szczegółowoDr hab. Anna Bębenek Warszawa,
Dr hab. Anna Bębenek Warszawa, 14.01. 2018 Instytut Biochemii i Biofizyki PAN Ul. Pawińskiego 5a 02-106 Warszawa Recenzja pracy doktorskiej Pana mgr Michała Płachty Pod Tytułem Regulacja funkcjonowania
Bardziej szczegółowo