BACTEC Peds Plus/F Culture Vials Bulion trawi¹cy sojowo-kazeinowy z ywicami PRZEZNACZENIE Fiolki do hodowli BACTEC Peds Plus/F (wzbogacony sojowo-kazeinowy bulion trawi¹cy z CO 2 ) s³u ¹ do tlenowych posiewów krwi. Podstawowe zastosowanie do aparatów BACTEC serii fluorescencyjnej do tlenowej, iloœciowej hodowli i odzysku mikroorganizmów (g³ównie bakterii i dro d y) z krwi pediatrycznej i innych próbek krwi o objêtoœci zwykle poni ej 3 ml. STRESZCZENIE I OBJAŒNIENIE Próbkê do badania inokuluje siê do jednej lub wiêcej fiolek, które umieszcza siê nastêpnie w aparacie fluorescencyjnym BACTEC w celu inkubacji i okresowego odczytu. Ka da fiolka zawiera sensor, który mo e wykrywaæ wzrost CO 2 wytworzonego przez wzrost drobnoustrojów. Sensor jest monitorowany przez aparat co 10 min pod k¹tem wzrostu fluorescencji, która jest proporcjonalna do iloœci obecnego CO 2. Odczyt dodatni wskazuje na przypuszczaln¹ obecnoœæ w fiolce ywych drobnoustrojów. Wykrywanie jest ograniczone do drobnoustrojów zdolnych do wzrostu na okreœlonym rodzaju pod³o a. Opisywano zastosowanie ywic do obróbki próbek krwi zarówno przed ich inokulacj¹ do po ywki hodowlanej, jak i po inokulacji. Do pod³o y BACTEC dodano ywice, aby zwiêkszyæ uzyskiwan¹ iloœæ drobnoustrojów bez koniecznoœci przeprowadzania dodatkowej obróbki 1-3. ZASADY PROCEDURY Jeœli w badanej próbce, inokulowanej do fiolki BACTEC, obecne s¹ drobnoustroje, przy metabolizowaniu przez te drobnoustroje substratów znajduj¹cych siê w fiolce bêdzie uwalniaæ siê CO 2. Wzrost fluorescencji sensora zawartego w fiolce, spowodowany przez zwiêkszenie iloœci CO 2, jest monitorowany przez aparat fluorescencyjny BACTEC. Analiza tempa i wielkoœci wzrostu CO 2 umo liwia okreœlenie przez aparat fluorescencyjny BACTEC, czy wynik dla danej fiolki jest dodatni, tzn. czy badana próbka zawiera ywe drobnoustroje. ODCZYNNIKI Przed przeprowadzeniem badania fiolki do hodowli Peds Plus/F BACTEC zawieraj¹ nastêpuj¹ce aktywne sk³adniki: Lista sk³adników Woda destylowana...40 ml Bulion sojowo-kazeinowy...2,75% (stê enie wagowe) Wyci¹g dro d owy...0,25% (stê enie wagowe) Wyci¹g z tkanek zwierzêcych...0,10% (stê enie wagowe) Pirogronian sodu...0,10% (stê enie wagowe) Dekstroza...0,06% (stê enie wagowe) Sacharoza...0,08% (stê enie wagowe) Hemina...0,0005% (stê enie wagowe) Menadion...0,00005% (stê enie wagowe) Polianetolosiarczan sodu (SPS)...0,020% (stê enie wagowe) Chlorowodorek pirydoksalu (witamina B 6 )...0,001% (stê enie wagowe) Niejonowa ywica adsorbcyjna...10,0% (stê enie wagowe) ywica kationowymienna...0,6% (stê enie wagowe) Wszystkie pod³o a BACTEC s¹ dostarczane z dodanym CO 2. PP091JAA 2008/01 Polski *patent Stanów Zjednoczonych nr 4 632 902 Ostrze enia i œrodki ostro noœci Do stosowania w diagnostyce in vitro. Produkt zawiera suchy kauczuk naturalny. W próbkach klinicznych mog¹ byæ obecne drobnoustroje chorobotwórcze, w tym wirusy zapalenia w¹troby i wirus HIV. Podczas pracy z materia³ami ska onymi krwi¹ i innymi p³ynami ustrojowym nale y przestrzegaæ Standardowych œrodków ostro noœci 4-7 oraz wytycznych obowi¹zuj¹cych w danej placówce. Przed u yciem ka d¹ fiolkê nale y oceniæ pod k¹tem œladów zniszczenia, zanieczyszczenia lub pogorszenia jakoœci. Fiolek z oznakami zniszczenia lub zanieczyszczenia, takimi jak przeciek, zmêtnienie, zmiana barwy (na ciemniejsz¹), uwypuklenie lub wklêœniêcie przegrody, nie nale y u ywaæ. W fiolce z zanieczyszczeniami mo e dojœæ do zwiêkszenia ciœnienia. Przy u yciu zanieczyszczonej fiolki do bezpoœredniego pobierania mo e dojœæ do zassania zanieczyszczonej po ywki hodowlanej do y³y pacjenta. Zanieczyszczenie fiolki mo e nie byæ ³atwo widoczne. Kiedy u ywa siê procedur bezpoœredniego pobierania materia³u, nale y monitorowaæ dok³adnie ten proces, aby unikn¹æ zassania materia³u do organizmu pacjenta. W rzadkich przypadkach szyjka fiolki mo e byæ pêkniêta i mo e od³amaæ siê podczas zdejmowania pokrywki albo w czasie obs³ugi. Tak e w rzadkich przypadkach fiolka mo e nie byæ zamkniêta wystarczaj¹co szczelnie. W obu przypadkach zawartoœæ fiolki mo e wyciekaæ lub rozlaæ siê. Jeœli fiolka by³a inokulowana, materia³, który wyciek³ lub rozla³ siê, nale y traktowaæ z ostro noœci¹ ze wzglêdu na to, e mo e on zawieraæ patogenne drobnoustroje/czynniki. Przed utylizacj¹ wszystkie inokulowane fiolki nale y wysterylizowaæ w autoklawie. Fiolki z hodowl¹, która da³a wynik dodatni, do podhodowli, barwienia itd.: Przed pobraniem próbki nale y wypuœciæ gaz, który czêsto jest wytwarzany w wyniku metabolizmu bakterii. Próbki nale y w miarê mo liwoœci pobieraæ w komorze laminarnej w odpowiedniej odzie y ochronnej, w³¹czaj¹c w to rêkawiczki i maski. Dodatkowe informacje na temat podhodowli zob. rozdzia³ Procedury. Aby zminimalizowaæ potencjalny wyciek podczas inokulacji próbki do fiolki hodowlanej, nale y u yæ koñcówek z za³o onymi na sta³e ig³ami lub zakoñczeniami Luer-Lok. Instrukcja przechowywania Fiolki BACTEC s¹ dostarczane w postaci gotowej do u ycia i nie wymagaj¹ rozprowadzenia ani rozcieñczenia zawartoœci. Przechowywaæ w temperaturze 2 25 C w suchym miejscu. Chroniæ przed bezpoœrednim dzia³aniem œwiat³a s³onecznego. POBIERANIE PRÓBKI Próbkê nale y pobraæ przy u yciu sterylnych technik, aby zredukowaæ mo liwoœæ zanieczyszczenia. Objêtoœæ pobranej krwi powinna zawieraæ siê pomiêdzy 0,5 a 5,0 ml. Optymalne wyniki otrzymuje siê przy objêtoœci próbki 1,0 3,0 ml. Jeœli objêtoœæ pobranej próbki krwi jest mniejsza ni 0,5 ml, do wykrycia wzrostu niektórych szybko rosn¹cych drobnoustrojów, takich jak niektóre gatunki Haemophilus, mo e byæ potrzebne u ycie w³aœciwego suplementu, opisanego dalej w niniejszej broszurze. Zaleca siê inokulacjê próbki do fiolki BACTEC przy ³ó ku pacjenta. Najczêœciej do pobrania próbki u ywamy strzykawki z koñcówk¹ Luer-Lok. Dogodnie jest u ycie: uchwytu do pobierania krwi igie³ Vacutainer i zestawu Vacutainer lub zestawu do pobierania krwi
Vacutainer Safety-Lok lub innego zestawu motylkowego. Je eli u ywa siê ig³y i zestawu przewodów (bezpoœrednie pobieranie), nale y uwa nie obserwowaæ kierunek przep³ywu krwi w momencie rozpoczynania pobierania próbki krwi. Pró nia w fiolce zwykle przekracza 5 ml, tak e u ytkownik powinien monitorowaæ pobieran¹ objêtoœæ za pomoc¹ oznaczeñ co 5 ml na etykiecie fiolki. Po pobraniu wymaganych 1 3 ml przep³yw nale y zatrzymaæ przez zagiêcie przewodu i usuniêcie zestawu z fiolki BACTEC. Inokulowan¹ fiolkê BACTEC nale y jak najszybciej przetransportowaæ do laboratorium. PROCEDURA Nale y usun¹æ nakrêtkê ze szczytu fiolki BACTEC i sprawdziæ fiolkê pod wzglêdem pêkniêæ, zanieczyszczenia, nadmiernego zmêtnienia i uwypuklenia lub przeciêtych przegród. NIE NALE Y U YWAÆ, je eli zauwa y siê jakiœ defekt. Przed inokulacj¹ przetrzeæ przegrodê alkoholem (jodyna nie jest zalecana). Aseptycznie wstrzykn¹æ lub pobraæ bezpoœrednio maksymalnie 5 ml próbki na fiolkê (zob. rozdzia³ Ograniczenia procedury). Inokulowane fiolki do hodowli tlenowej nale y jak najszybciej umieœciæ we fluorescencyjnym aparacie BACTEC i rozpocz¹æ ich inkubacjê i monitorowanie. Jeœli umieszczenie inokulowanej fiolki w aparacie opóÿni³o siê i widoczny jest wzrost, fiolki nie nale y badaæ we fluorescencyjnym aparacie BACTEC, lecz nale y wykonaæ podhodowlê, barwienie metod¹ Grama i wynik badania fiolki uznaæ za przypuszczalnie dodatni. Fiolki umieszczone w aparacie bêd¹ badane automatycznie co 10 min w czasie rejestrowania przebiegu badania. Fiolki dodatnie bêd¹ oznaczane przez fluorescencyjny aparat BACTEC i identyfikowane jako dodatnie (zobacz instrukcjê obs³ugi w³aœciwego fluorescencyjnego aparatu BACTEC). Sensor wewn¹trz fiolki w ocenie wzrokowej nie bêdzie wykazywa³ ró nic miêdzy fiolkami z wynikiem dodatnim i ujemnym, jednak e fluorescencyjny aparat BACTEC mo e wykazaæ ró nicê we fluorescencji. Jeœli po zakoñczeniu okresu badania fiolka z ujemnym wynikiem oznaczenia w ocenie wzrokowej wydaje siê dodatnia (np. krew o barwie czekoladowej, uwypuklenie przegroda, liza i/lub znaczne przyciemnienie barwy krwi), nale y wykonaæ podhodowlê, barwienie metod¹ Grama i wynik badania fiolki uznaæ za przypuszczalnie dodatni. Fiolki dodatnie powinny byæ poddane podhodowali; nale y wykonaæ wybarwiony metod¹ Gramarozmaz na szkie³ku podstawowym. W znakomitej wiêkszoœci przypadków pozwoli to dostrzec drobnoustroje i umo liwi wydanie lekarzowi wstêpnego wyniku badania. Z p³ynu w fiolkach BACTEC mo na przygotowaæ podhodowle do po ywek selektywnych i wykonaæ wstêpny bezpoœredni test wra liwoœci na œrodki przeciwbakteryjne. Podhodowle: Przed wykonaniem podhodowli ustawiæ fiolkê pionowo i nad przegrod¹ umieœciæ wacik nasycony alkoholem. Aby obni yæ ciœnienie w fiolce, wbiæ steryln¹ ig³ê z odpowiednim filtrem lub wacikiem poprzez wacik i przegrodê. Ig³a powinna byæ usuniêta bezpoœrednio po obini eniu ciœnienia i przed pobraniem próbki z fiolki do podhodowli. Wk³ucie i wycofanie ig³y nale y wykonaæ w linii prostej, unikaj¹c jakichkolwiek ruchów obrotowych. W celu uzyskania maksymalnej wydajnoœci z izolatów z hodowli, fiolki, w których wynik hodowli by³ ujemny, nale y przed utylizacj¹ sprawdziæ za pomoc¹ barwienia i (lub) podhodowli. KONTROLA JAKOŒCI Nale y postêpowaæ zgodnie z obowi¹zuj¹cymi wymogami kontroli jakoœci, wynikaj¹cymi z przepisów miejscowych, krajowych i (lub) federalnych, wymogami akredytacji i rutynowymi procedurami kontroli jakoœci w danym laboratorium. Zaleca siê, aby u ytkownik stosowa³ siê do odpowiednich zaleceñ CLSI (dawniej NCCLS) i przepisów CLIA, dotycz¹cych sposobów kontroli jakoœci. Nie u ywaæ fiolek do hodowli po up³ywie ich daty wa noœci. Nie u ywaæ fiolek do hodowli, je eli wykazuj¹ pêkniêcia lub defekty; fiolki utylizowaæ w odpowiedni sposób. Z ka dym kartonem pod³o y dostarczane s¹ certyfikaty kontroli jakoœci. W certyfikatach kontroli jakoœci podane s¹ nazwy drobnoustrojów u ywanych do badañ, w tym hodowle ATCC wyszczególnione w normie CLSI Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Culture Media (gwarancja jakoœci dla przygotowanych do handlu po ywek hodowlanych). 8 Czas niezbêdny do wykrycia w godzinach 72 h dla ka dego z drobnoustrojów wyszczególnionych w certyfikacie kontroli jakoœci tej po ywki: Drobnoustroje Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Escherichia coli ATCC 25922 Streptococcus pneumoniae* ATCC 6305 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Candida albicans ATCC 18804 Neisseria meningitidis ATCC 13090 Alcaligenes faecalis ATCC 8750 Haemophilus influenzae ATCC 19418 Staphylococcus aureus ATCC 25923 *szczep CLSI Po informacje dotycz¹ce kontroli jakoœci serii fluorescencyjnych aparatów BACTEC nale y siêgn¹æ do instrukcji w³aœciwego aparatu BACTEC. OGRANICZENIA PROCEDURY Zanieczyszczenie Nale y przedsiêwzi¹æ œrodki ostro noœci, aby zapobiec zanieczyszczeniu podczas pobierania i inokulacji do fiolki BACTEC. Zanieczyszczona próbka da odczyt dodatni, co jednak nie oznacza wyniku istotnego klinicznie. Takie ustalenie musi byæ wykonane przez u ytkownika na podstawie takich czynników, jak: typ wykrytych drobnoustrojów, wystêpowanie tego samego drobnoustroju w wielu hodowlach, historia choroby pacjenta itd. Wykrywanie drobnoustrojów wra liwych na SPS oraz szybko rosn¹cych z próbek krwi Poniewa krew mo e neutralizowaæ toksycznoœæ SPS wobec drobnoustrojów wra liwych na SPS (np. niektóre gatunki Neisseria), pobranie optymalnej wielkoœci próbki krwi (1 3 ml) znacznie zwiêksza szanse na wykrycie tych drobnoustrojów. Czêœæ szybko rosn¹cych drobnoustrojów, takich jak niektóre gatunki Haemophilus, do wzrostu wymaga czynników takich jak NAD lub czynnik V, które s¹ dostarczane wraz z próbk¹ krwi. Je eli próbka krwi ma bardzo ma³¹ objêtoœæ (0,5 ml lub mniej), w celu wykrycia tych drobnoustrojów mo e byæ konieczne zastosowanie odpowiedniego dodatku. Jako dodatek wzbogacaj¹cy mo na zastosowaæ dodatek BACTEC FOS (Fastidious Organism Supplement). Drobnoustroje niewykazuj¹ce ywotnoœci Wymaz z pod³o a hodowlanego, zabarwiony metod¹ Grama, mo e zawieraæ niewielk¹ liczbê drobnoustrojów niewykazuj¹cych ywotnoœci, pochodz¹cych ze sk³adników pod³o a, odczynników barwi¹cych, olejku immersyjnego, szkie³ek szklanych i próbek u ywanych do inokulacji. Ponadto próbka pobrana od pacjenta mo e zawieraæ drobnoustroje, które nie bêd¹ ros³y w pod³o u lub w po ywkach u ywanych do podhodowli. Takie próbki powinny byæ posiewane w specjalnych pod³o ach. 9 Aktywnoœæ przeciwko drobnoustrojom Neutralizacja aktywnoœci œrodków przeciwko drobnoustrojom przez ywice ró ni siê zale nie od iloœci i czasu pobrania próbki. Badania wykaza³y, e obecnoœæ ywic w pod³o u nie neutralizuje dostatecznie preparatów zawieraj¹cych imipenem i cylastatynê. Wykrywanie Streptococcus pneumoniae W pod³o ach tlenowych S. pneumoniae bêdzie zazwyczaj wykrywalny wzrokowo i przez aparat, jednak e w niektórych przypadkach ani w barwieniu metod¹ Grama, ani w rutynowej podhodowli nie bêdzie mo liwe wykrycie drobnoustroju. Je eli inokulowano tak e pod³o e beztlenowe, mo liwe jest zwykle wykrycie drobnoustroju w rutynowej podhodowli na obecnoœæ bakterii tlenowych z fiolki zawieraj¹cej pod³o e dla bakterii beztlenowych, poniewa 2
wiadomo, e jest to drobnoustrój dobrze namna aj¹cy siê w warunkach beztlenowych. 10 Rozwa ania ogólne Optymalny odzysk izolatów osi¹ga siê poprzez dodawanie od 1 do 3 ml krwi. U ycie mniejszych lub wiêkszych objêtoœci mo e niekorzystnie wp³ywaæ na odzysk i (lub) czas wykrywania. Krew mo e zawieraæ czynniki hamuj¹ce wzrost bakterii albo inne inhibitory, które mog¹ spowalniaæ wzrost drobnoustrojów albo go uniemo liwiæ. Wyniki fa³szywie ujemne mog¹ byæ spowodowane obecnoœci¹ pewnych drobnoustrojów, niewytwarzaj¹cych odpowiedniej iloœci CO 2, niezbêdnej do wykrycia przez system albo te istotnym wzrostem przed umieszczeniem butelki w systemie. Wyniki fa³szywie dodatnie mog¹ zdarzaæ siê w przypadku znacznego podwy szenia liczby krwinek bia³ych. OCZEKIWANE WYNIKI Badania posianych hodowli by³y wykonywane z inokulum na poziomie 10 50 CFU na fiolkê do hodowli kombinacji szczepu bakterii ATCC ze szczepem dzikim. Poni ej przedstawiamy listê drobnoustrojów, które zosta³y wykryte jako dodatnie w pod³o u Peds Plus/F BACTEC w ci¹gu 5 dni. Acinetobacter baumanii Acinetobacter lwoffii Alcaligenes faecalis Candida albicans Candida (Torulopsis) glabrata Corynebacterium J-K Cryptococcus neoformans Enterobacter cloacae Escherichia coli Haemophilus influenzae Haemophilus parainfluenzae Klebsiella pneumoniae Neisseria gonorrhoeae Neisseria meningitidis Proteus mirabilis Providencia stuartii Pseudomonas aeruginosa Salmonella typhimurium Badania wewnêtrzne dowiod³y, e ywice stosowane w po ywce BACTEC z ywic¹ skutecznie neutralizuj¹ œrodki przeciwko drobnoustrojom. W tych badaniach do po ywki z ywic¹, bezpoœrednio przed inokulacj¹ podatnymi szczepami, dodawano œrodki przeciwko drobnoustrojom w odpowiednim stê eniu. Równolegle wykonywano testy z po ywkami niezawieraj¹cymi ywic (kontrola). Stwierdzono, e ywice neutralizowa³y œrodki przeciwko drobnoustrojom reprezentatywne dla nastêpuj¹cych kategorii: penicyliny, cefalosporyny (I, II i III generacji), makrolidy, aminoglikozydy, fluorochinolony, linkomycyny, tetracyklina i chloramfenikol. CHARAKTERYSTYKA WYDAJNOŒCIOWA W zewnêtrznym dwuoœrodkowym badaniu klinicznym, porównuj¹cym wydajnoœæ po ywki hodowlanej BACTEC Peds Plus/F BACTEC i po ywki hodowlanej NR Peds Plus/F BACTEC w sumie oceniono 3 249 par próbek. W sumie wykryto 430 drobnoustrojów. Spoœród nich 342 (80%) oceniono jako klinicznie istotne, a 88 (20%) jako klinicznie nieistotne. Spoœród izolatów istotnych klinicznie 219 (64%) uzyskano z obu po ywek, 63 (18%) tylko w pod³o u Peds Plus/F BACTEC, a 60 (18%) tylko w pod³o u NR Peds Plus/F BACTEC. Izolaty uzyskane w ka dego z typów pod³o y ukazano w tabeli 1. W czasie badania w pod³o u Peds Plus/F BACTEC uzyskano cztery fiolki z wynikiem fa³szywie dodatnim; nie by³o przypadków uzyskania wyniku fa³szywie ujemnego. Œredni czas do wykrycia drobnoustroju dla pod³o a Peds Plus/F BACTEC wynosi³ 25 h, natomiast dla pod³o a NR Peds Plus BACTEC 33 h. Tabela 1: Izolaty uzyskiwane w badaniu klinicznym (wed³ug typu pod³o a) Drobnoustroje Wykrywane tylko w pod³o u Wykrywane tylko w pod³o u Wykrywane w obu Peds Plus/F NR Peds Plus pod³o ach Gram ujemne 9 6 50 Gram dodatnie 51 43 146 Dro d aki 3 11 23 Lista drobnoustrojów wykrywanych w badaniach klinicznych przy zastosowaniu pod³o a Peds Plus/F BACTEC: Serratia marcescens Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Stenotrophomonas (Xanthomonas) maltophilia Streptococcus pneumoniae Streptococcus, grupa A Streptococcus, grupa D Actinobacillus lignieresi Burkholderia (Pseudomonas) cepacia Candida albicans Candida tropicalis Citrobacter freundii Enterobacter aerogenes Enterobacter cloacae Enterococcus spp. Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Neisseria meningitidis Pseudomonas fluorescens Salmonella spp. Serratia liquefaciens Staphylococcus aureus Staphylococcus spp. koagulazoujemny. Streptococcus grupa B Streptococcus constellatus Streptococcus pneumoniae Streptococcus salivarius Streptococcus intermedius DOSTÊPNOŒÆ Nr kat. Opis 442194 BACTEC Peds Plus/F Culture Vials (fiolki do hodowli), kaseta zawieraj¹ca 50 fiolek PIŒMIENNICTWO: 1. Wallis, C. et al. Rapid isolation of bacteria from septicemic patients by use of an antimicrobial removal device. J. Clin. Microbiol. 1980, 11:462-464. 2. Applebaum, P.C. et al. Enhanced detection of bacteremia with a new BACTEC resin blood culture medium. J. Clin Microbiol. 1983, 17:48-51. 3. Jungkind, D.L. et al. Evidence for a second mechanism of action of resin in BACTEC NR16A aerobic blood culture medium. Abstracts of the Annual Meeting of Amer. Soc. for Microbiol. 1989. 4. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2005. Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed. CLSI, Wayne, Pa. 5. Garner, J.S. 1996. Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17:53-80. 6. U.S. Department of Health and Human Services. 1999. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 7. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p. 0021-0045. 8. Clinical and Laboratory Standards Institute. 2004. Approved Standard M22-A3. Quality control for commercially prepared microbiological culture media, 3rd ed., CLSI, Wayne, Pa. 9. Murray, P.R., E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.L. Landry and M.A. Pfaller. 2007. Manual of clinical microbiology, 9th ed., American Society for Microbiology, Washington, D.C. 10. Howden, R.J. J. Clin. Path. 1976, 29:50-53. 3
4
Becton, Dickinson and Company 7 Loveton Circle Sparks, Maryland 21152 U.S.A. 800-638-8663 BENEX Limited Bay K 1a/d, Shannon Industrial Estate Shannon County Clare, Ireland Tel: 353-61-47-29-20 Fax: 353-61-47-25-46 ATCC is a registered trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo, BACTEC, Peds Plus, Vacutainer, Safety-Lok, FOS and Luer-Lok are trademarks of Becton, Dickinson and Company. 2008 BD.