Nr 1 Stan sanitarny wody z ujêæ wodnych ROCZN. w odzi PZH, 2005, 56 NR 1, 97 102 DANUTA BIA ASIEWICZ, JOANNA RÓLASI OCENA STANU SANITARNEGO WODY Z POPULARNYCH WŒRÓD MIESZAÑCÓW ODZI UJÊÆ WODNYCH SANITARY EVALUATION OF WATER TAEN FROM THE POPULAR WATER INTAES USED BY THE INHABITANTS OF ÓD Centralne Laboratorium Ch³odnictwa 92-202 ódÿ, Al. Marsza³ka J. Pi³sudskiego 84 Dyrektor: dr J. Jêdrzejewska Dokonano analizy mikrobiologicznej wody pobranej z ujêæ na terenie miasta odzi (wody Ÿródlane, studnie g³êbinowe) pobieranej do celów konsumpcyjnych przez masowo odwiedzaj¹cych je mieszkañców. Porównano jakoœæ mikrobiologiczn¹ wody bezpoœrednio po pobraniu i po jej przechowywaniu w temperaturze 0-4 C oraz w temperaturze pokojowej. WSTÊP Woda przeznaczona do spo ycia przez ludzi musi odpowiadaæ okreœlonym wymaganiom mikrobiologicznym zawartym w Rozporz¹dzeniu Ministra Zdrowia z dnia 19 listopada 2002 r. [12]. Ze wzglêdu na nienajlepsze cechy organoleptyczne wody wodoci¹gowej (smak, zapach) spowodowane procesami uzdatniania i dezynfekcji czêœæ spo³eczeñstwa korzysta z popularnych ujêæ wód podziemnych (wody Ÿródlane, studnie g³êbinowe). Woda ta zazwyczaj jest pobierana w wiêkszych iloœciach do kanistrów, pojemników z tworzyw sztucznych itp. i wykorzystywana w gospodarstwach domowych do sporz¹dzania napoi i posi³ków przez okres kilku dni. Czêœæ ujêæ wody podlega nadzorowi Stacji Sanitarno- Epidemiologicznych, których badania g³ównie koncentruj¹ siê na wykrywaniu bakterii wskazuj¹cych na ka³owe zanieczyszczenia wody (bakterie z grupy coli, paciorkowce ka³owe). Celem naszej pracy by³a ocena mikrobiologiczna wody z ujêæ na terenie odzi masowo odwiedzanych przez jej mieszkañców, bezpoœrednio po pobraniu i po okresie 48 godzinnego przechowywania tej wody w temperaturze 0-4 C i w temperaturze pokojowej. MATERIA Y I METODY Przedmiotem analizy mikrobiologicznej by³o trzynaœcie próbek wody pobieranych w miesi¹cach wrzesieñ-grudzieñ 2003 r. z ujêæ wodnych (studnie publiczne, punkty poboru wody ze zdrojami ulicznymi) zlokalizowanych na terenie miasta odzi. By³y to g³ównie wody utworów czwartorzêdo-
98 D. Bia³asiewicz, J. rólasik Nr 1 wych. Wodê badano bezpoœrednio po pobraniu, a nastêpnie po 48 godzinach przechowywania w temperaturze 0 C-4 C oraz w temperaturze pokojowej. Badania mikrobiologiczne wody w kierunku wykrywania wiêkszoœci drobnoustrojów przeprowadzano stosuj¹c metodê filtracji membranowej. Próbki wody o objêtoœci 100 ml przes¹czano przez filtry membranowe o œrednicy porów 45 mm, które umieszczano na odpowiedniej po ywce agarowej. Do wykrywania: bakterii z grupy coli stosowano pod³o e VRBL (agar z fioletem krystalicznym, czerwieni¹ obojêtn¹, ó³ci¹ i laktoz¹) [8]. Escherichia coli Coliform Agar (Chromocult) [11], paciorkowców ka³owych agar Slanetz-Bartley a [6], Pseudomonas aeruginosa pod³o e z cetrymidem i kwasem nalidyksowym (ANC) [7], drobnoustrojów z rodziny Enterobacteriaceae po ywkê VRBD (agar z fioletem krystalicznym, czerwieni¹ obojêtn¹, ó³ci¹ i dekstroz¹) [3], gronkowców koagulazododatnich pod³o e Baird-Parker a [5]. Obecnoœæ przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny wykrywano na pod³o u siarczynowo- elazawym [4], pleœni i dro d y natomiast na agarze z ekstraktem dro d owym i chloramfenikolem [10]. Ogóln¹ liczbê drobnoustrojów okreœlono wykonuj¹c posiew 1ml badanej próbki wody na pod³o e z agarem od ywczym, które inkubowano w temperaturach 22 C i 37 C [9]. WYNII Oceniaj¹c ogóln¹ liczbê bakterii w wodach bezpoœrednio po ich pobraniu z ujêcia, stwierdzono tylko w trzech próbkach na trzynaœcie badanych, obecnoœæ bakterii rosn¹cych w temperaturze 37 C (tab. I). Natomiast w wodach tych inkubowanych po posianiu w temperaturze 22 C, liczba bakterii w 1 ml w dwóch próbkach przekroczy³a wartoœæ normy okreœlon¹ w Rozporz¹dzeniu Ministra Zdrowia z dnia 19 listopada 2002 r. [12], w szeœciu próbkach liczba bakterii nie przekracza³a wartoœci normatywnych, w pozosta³ych próbach bakterie by³y nieobecne. W adnej z próbce wody o objêtoœci 100 ml pobranej bezpoœrednio z ujêcia, nie stwierdzono obecnoœci bakterii z rodziny Enterobacteriaceae, w tym bakterii z grupy coli i Escherichia coli, gronkowców koagulazododatnich, Pseudomonas aeruginosa, przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny. Z jednej próbki wody (100 ml) wyhodowano 1 koloniê paciorkowców ka³owych. W dziesiêciu próbkach wody wykryto obecnoœæ pleœni w iloœci od 1 j.t.k./100ml do 70 j.t.k./100 ml; w piêciu próbkach obecnoœæ dro d y od 3 j.t.k./100 ml do 32 j.t.k./100 ml. Po 48 h przechowywania wody pobranej z ujêcia w temperaturze 0-4 C wykonano ponownie jej ocenê mikrobiologiczn¹. W piêciu próbkach wody stwierdzono obecnoœæ bakterii rosn¹cych w temperaturze 37 C w iloœci od 1 j.t.k./ml do 4 j.t.k./ml. Tylko w jednej próbce nie stwierdzono bakterii rosn¹cych w temperaturze 22 C, w pozosta³ych próbkach ich iloœæ wynosi³a od 2 j.t.k./ml do wartoœci wiêcej ni 300 j.t.k./ml (liczba kolonii niepoliczalna na p³ytce). W wodzie przechowywanej w temperaturze 0-4 C nie wykrywano w 100 ml bakterii z rodziny Enterobacteriaceae, gronkowców koagulazododatnich, przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny, paciorkowców ka³owych. W jednej próbce wody stwierdzono bakterie Pseudomonas aeruginosa w iloœci 10 j.t.k./100 ml. Liczba pleœni w 100 ml wody w zale noœci od próbki waha³a siê w granicach od 0 (jedna próbka) do wiêcej ni 100 (liczba kolonii niepoliczalna na filtrze). Dro d e wystêpowa³y w piêciu próbkach od 1 j.t.k./100 ml do 88 j.t.k./100 ml. Oceniaj¹c wodê po 48 h przetrzymywania w temperaturze pokojowej, stwierdzono tylko cztery próbki wolne od bakterii rosn¹cych w w 37 C; w pozosta³ych próbkach ich iloœæ wynosi³a od 2 j.t.k./ml do wiêcej ni 300 j.t.k./ml. We wszystkich próbkach wód pobranych z ujêæ wyhodowano bakterie rosn¹ce w temperaturze 22 C od 100 j.t.k./ml do wiêcej ni
Nr 1 Stan sanitarny wody z ujêæ wodnych w odzi 99 Tabela I. Zanieczyszczenia bakteriologiczne wody pobranej bezpoœrednio z ujêcia (A) i po przechowywaniu 48 h w temperaturze 0 C-4 C (B) oraz w temperaturze pokojowej (C) Microbiological contamination in water taken directly from water intake (A) and after 48 h storage in 0 C-4 C (B) and at the room temperature (C) 2JyOQDOLF]EDEDNWHULLZZRG]LHMWNPO 1U XM FLD *á ERNR ü XM FLD 1U SUyENL $ % &,,,,,,,9 9 9, 9,, 9,,, 300 j.t.k./ml. Próbki wód po inkubacji 48 h w temperaturze pokojowej nie zawiera³y w 100 ml bakterii z rodziny Enterobacteriaceae, gronkowców koagulazododatnich, Pseudomonas aeruginosa, przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny, paciorkowców ka³owych. Liczba pleœni w 100 ml wody inkubowanej w tych warunkach wynosi³a od 0 (dwie próbki) do wiêcej ni 100 j.t.k.; dro d e izolowano z piêciu próbek od 1 j.t.k./100 ml do 67 j.t.k./100 ml. DYSUSJA ontrola mikrobiologiczna wód ze Ÿróde³, studni g³êbinowych bêd¹cych miejscem czerpania wody przez okolicznych mieszkañców jest konieczna, poniewa wody te nie s¹ poddawane adnym zabiegom maj¹cym na celu eliminowanie drobnoustrojów. WskaŸnikami jakoœci bakteriologicznej wody przeznaczonej do spo ycia zgodnie z Rozporz¹dzeniem Ministra Zdrowia [12] s¹: ogólna liczba bakterii w 1 ml po inkubacji w temperaturach 37 C (24 h) i 22 C (72h), Escherichia coli lub bakterie grupy coli typu ka³owego (termoto-
100 D. Bia³asiewicz, J. rólasik Nr 1 lerancyjne), bakterie grupy coli, enterokoki (paciorkowce ka³owe) i w wodzie pochodz¹cej z ujêæ powierzchniowych Clostridia redukuj¹ce siarczyny (Clostridium perfringens). Wody przypowierzchniowe jak i te wystêpuj¹ce na wiêkszych g³êbokoœciach zawieraj¹ pewne iloœci bakterii autochtonicznych nale ¹cych do oligotrofów, zdolnych do wykorzystywania nawet œladowych iloœci po ywienia. Oligotrofy wodne dziel¹ siê rzadko; wiek generacji waha siê u nich od kilkudziesiêciu do dwustu godzin [2].Wed³ug Satory [14] w wodach mineralnych pobieranych bezpoœrednio z warstw wodonoœnych populacja drobnoustrojów kszta³tuje siê na poziomie ok. 20 j.t.k./ml. W ocenianych wodach, badanych bezpoœrednio po pobraniu, liczba bakterii kszta³towa³a siê na poziomie od 0 j.t.k./ml do wiêcej ni 300 j.t.k./ml; by³y to g³ównie bakterie rosn¹ce w temperaturze 22 C. W tej temperaturze rosn¹ przede wszystkim heterotroficzne bakterie niechorobotwórcze. Z trzynastu badanych próbek wody do bezpoœredniego spo ycia kwalifikowa³o siê jedenaœcie próbek. Przekroczenie dopuszczalnego poziomu ogólnej liczby bakterii rosn¹cych w temperaturze 22 C w jednej z próbek oraz obecnoœæ enterokoków w innej dyskwalifikowa³o do spo ycia Tabela II. Zanieczyszczenia grzybami wody pobranej bezpoœrednio z ujêcia (A) i po przechowywaniu 48 h w temperaturze 0 C-4 C (B) oraz w temperaturze pokojowej (C) Fungi contaminants in water taken directly from water intake (A) and after 48 h storage in temperatures 0 C-4 C (B) and room temperature (C) 1U *á ERNR ü XM FLD XM FLD 1U SUyENL /LF]EDSOH QLLGUR G \ZZRG]LHMWNPO $ % & SOH QLH GUR G H SOH QLH GUR G H SOH QLH GUR G H,,,,,,,9 9 9, 9,, 9,,, * warunki inkubacji 25 C, 5 dni
Nr 1 Stan sanitarny wody z ujêæ wodnych w odzi 101 dwie próbki wody. Sprawdzaj¹c jakoœæ wody po 48 h przechowywania jej w temperaturze 0 C-4 C oraz w temperaturze pokojowej zaobserwowano wzrost zanieczyszczeñ bakteriologicznych zw³aszcza bakterii rosn¹cych w temperaturze 22 C tym wy szy im by³a wy sza temperatura przechowywania wody. Poziom bakterii rosn¹cych w temperaturze 22 C przekroczy³ 100 j.t.k./ml w trzech próbkach wody przechowywanej w temperaturze 0 C -4 C i w jedenastu próbkach wody przechowywanej w temperaturze pokojowej. Znaczny wzrost liczebnoœci bakterii rosn¹cych w 22 C mo e œwiadczyæ o obecnoœci w wodzie ³atwo przyswajalnych zwi¹zków organicznych [1]. Natomiast obserwowany równoczeœnie w siedmiu próbkach wody przechowanej w temperaturze pokojowej wzrost bakterii rosn¹cych w temperaturze 37 C mo e z kolei wskazywaæ na obecnoœæ w niej bakterii chorobotwórczych [15]. W rozporz¹dzeniach krajowych brak jest wymagañ mikrobiologicznych dla wody przechowywanej w warunkach domowych w pojemnikach lub butelkach. Takie wymagania zosta³y opracowane dla butelkowanych wód mineralnych [13].Zgodnie z krajowymi i europejskimi wymogami ogólna liczba drobnoustrojów po 12 h od rozlewu do opakowañ nie mo e przekroczyæ 100 j.t.k./ml (inkubacja przez 72 h, w temperaturze 20-22 C) lub 20 j.t.k./ml (inkubacja 24 h w 37 ). W badanych wodach stwierdzono obecnoœæ grzybów, czêœciej pleœni ni dro d y. W trzech próbkach liczebnoœæ pleœni przekracza³a 100 j.t.k./ml. W trakcie przechowywania wody nie zaobserwowano wzrostu liczebnoœci populacji grzybów. Przyczyn¹ zahamowania wzrostu grzybów w trakcie przechowywania wody, zarówno w temperaturach 0 C-4 C jak i w temperaturze pokojowej, mog³y byæ mierne warunki troficzne lub te oddzia³ywania antagonistyczne ze strony rozwijaj¹cej siê flory bakteryjnej. Oceniaj¹c jakoœæ mikrobiologiczn¹ wód z popularnych wœród spo³eczeñstwa ujêæ wodnych w odzi nale y podkreœliæ dobr¹ jakoœæ wiêkszoœci wód bezpoœrednio po ich pobraniu. Natomiast przechowywanie wody w warunkach domowych (lodówka, pomieszczenia o temperaturze pokojowej) prowadzi do znacznego namno enia siê bakterii w tym potencjalnie chorobotwórczych. WNIOSI 1. Wiêkszoœæ wód bezpoœrednio po ich pobraniu z ujêæ spe³nia wymagania mikrobiologiczne zawarte w obowi¹zuj¹cych przepisach krajowych 2. W badanych wodach stwierdzono du ¹ liczbê zarodników pleœni. 3. Przechowywanie wody w warunkach domowych powoduje namno enie siê drobnoustrojów do poziomu mog¹cego stanowiæ zagro enie dla konsumenta. D. Bia³asiewicz, J. rólasik SANITARY EVALUATION OF WATER TAEN FROM THE POPULAR WATER INTAES USED BY THE INHABITANTS OF ÓD Summary The aim of the work was the microbiological evaluation of water taken from the popular water intakes used by the inhabitants in ódÿ. The examination of water was performance directly after sampling, after 48 hours of the storage at temperature 0-4 C and also after the storage at the room
102 D. Bia³asiewicz, J. rólasik Nr 1 temperature. The microbiological examinations of water in the aspect of detection of majority of microbes were conducted using membrane filtration method. Among 13 evaluated samples 11 were qualified to direct consumption. After 48 hour storage at 0-4 C temperatures and at the room temperature an increase of bacterial contamination was observed especially bacteria growing at temperature 22 C and the higher. The presence of fungi was detected in the evaluated water. In 3 samples the mould count was exceeded 1,5 x 10 2 cfu/ml. During the storage of water the increase of fungi population was not observed PIŒMIENNICTWO 1. rogulska B.: Wymagania bakteriologiczne i kontrola jakoœci wody do picia i na potrzeby gospodarcze. Przem. Ferm. Owoc.Warz.1999, 8, 44-47. 2. unicki-goldfinger W. J. H.: ycie bakterii. Wydawnictwo Naukowe PWN. 2001. 3. PN-A-04023. Mikrobiologia ywnoœci. Wykrywanie i identyfikacja drobnoustrojów z rodziny Enterobacteriaceae. 2001. 4. PN-EN 26461-2. Jakoœæ wody. Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny (clostridia). Czêœæ 2: Metoda filtracji membranowej. 2001. 5. PN-EN ISO 6888-1. Mikrobiologia ywnoœci i pasz. Horyzontalna metoda oznaczania liczby gronkowców koagulazododatnich (Staphylococcus aureus i innych gatunków). Czeœæ 1: Metoda z zastosowaniem po ywki agarowej Braid-Parkera, 2001. 6. PN-EN ISO 7899-2. Jakoœæ wody. Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe enterokoków ka³owych. Czêœæ 2. Metoda filtracji membranowej. 2002. 7. PN-EN 12780. Jakoœæ wody. Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe Pseudomonas aeruginosa metod¹ filtracji membranowej. 2002. 8. PN-ISO 4832. Mikrobiologia. Ogólne zasady oznaczania liczby bakterii z grupy coli. Metoda p³ytkowa.1998. 9. PN-ISO 6222. Jakoœæ wody. Oznaczanie ywych organizmów. Okreœlanie ogólnej liczby kolonii na agarze od ywczym metod¹ posiewu powierzchniowego lub wg³êbnego. 1999. 10. PN-ISO 7954. Mikrobiologia. Ogólne zasady oznaczania dro d y i pleœni. Metoda p³ytkowa w 25 C. 1999. 11. PN-ISO 9308-1. Jakoœæ wody. Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe bakterii grupy coli, bakterii grupy coli termotolerancyjnych i domniemanych Escherichia coli. Metoda filtrów membranowych. 1999. 12. Rozporz¹dzenie Ministra Zdrowia z dn. 19 listopada 2002 r. w sprawie wymagañ dotycz¹cych wody przeznaczonej do spo ycia przez ludzi. Dz. U. Nr 202 z dnia 15.12.2002 r. 13. Rozporz¹dzenie Ministra Zdrowia z dn. 08 lipca 1997 r. w sprawie szczegó³owych warunków sanitarnych przy produkcji i w obrocie naturalnych wód mineralnych, mineralnych wód mieszanych, naturalnych wód Ÿródlanych oraz wód sto³owych przeznaczonej do spo ycia przez ludzi. Dz. U. Nr 85 z dnia 28. 07.1997 r. 14. Satora P., Tuszyñski T.: Problemy mikrobiologiczne w wodach mineralnych naturalnych i smakowych. Laboratorium. 2003,6,34-39. 15. Tyski S., rogulska B.: Mikrobiologiczne kryteria jakoœci wody przeznaczonej do ró nych celów obowi¹zuj¹ce zalecenia i przepisy oraz projekty nowelizacji. Mikrobiologia Medycyna. 1999, 4, 9-16. Otrzymano: 2004.03.27