Endokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology
|
|
- Szymon Grzelak
- 8 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 Łuczyński W. i inni: Zaburzenia Szewczyk ekspresji L. niektórych i inni Aktywność genów opioidowa w komórkach u dziewcząt T regulatorowych z nadczynnością u dzieci i niedoczynnością z cukrzycą tarczycy typu 1 Vol. 8/2009 Nr 1(26) Endokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology Zaburzenia ekspresji niektórych genów w komórkach T regulatorowych u dzieci z cukrzycą typu 1 Disturbances in Some Gene Expression in T Regulatory Cells in Children with Type 1 diabetes 1 Włodzimierz Łuczyński, 2 Natalia Wawrusiewicz-Kurylonek, 3 Anna Stasiak-Barmuta, 4 Remigiusz Urban, 5 Elżbieta Iłendo, 1 Mirosława Urban, 6 Justyna Kos, 7 Radosław Jaworowski, 2 Adam Krętowski 1 II Klinika Chorób Dzieci, 2 Klinika Endokrynologii, Diabetologii i Chorób Wewnętrznych, 3 Zakład Immunologii Klinicznej, 4 Klinika Perinatologii, 5 Pracownia Cytogenetyki Zakładu Pediatrycznej Diagnostyki Laboratoryjnej Uniwersytetu Medycznego w Białymstoku, 6 NZOZ Stomatologia, 7 I Oddział Chirurgii Ogólnej Szpitala MSWiA w Białymstoku Adres do korespondencji: dr hab. med. Włodzimierz Łuczyński, II Klinika Chorób Dzieci Uniwersytetu Medycznego w Białymstoku, Waszyngtona 17, Białystok; w.luczynski@wp.pl. Słowa kluczowe: cukrzyca, dzieci, immunoterapia, limfocyty T regulatorowe Key words: diabetes, children, immunotherapy, T regulatory cells STRESZCZENIE/ABSTRACT Wstęp. U podłoża cukrzycy typu 1 (T1DM) leży wybiórcza destrukcja komórek β wysp trzustkowych produkujących insulinę. Nieznane są powody wzbudzenia tej reakcji skierowanej przeciwko własnym tkankom. Zachodzi pytanie, czy jedna z subpopulacji limfocytów, tj. komórki T regulatorowe (Tregs), odpowiedzialne za hamowanie nadmiernej odpowiedzi immunologicznej skierowanej przeciwko autoantygenom, bierze udział w patogenezie T1DM? Celem pracy była analiza odsetków limfocytów T regulatorowych krwi obwodowej oraz ekspresji wybranych genów istotnych dla ich funkcji u dzieci z nowo rozpoznaną cukrzycą typu 1 w porównaniu z grupą kontrolną. Materiał i metody. Do badania zakwalifikowano 20 dzieci z cukrzycą typu 1. Oceny komórek T regulatorowych dokonano za pomocą cytometrii przepływowej z użyciem przeciwciał: anty-cd3, anty-cd4, anty-cd25, anty- CD127. Dokonano izolacji komórek T regulatorowych o fenotypie CD4+CD25+CD127dim/- oraz oceny poziomu ekspresji wybranych genów dla czynników transkrypcyjnych, aktywacyjnych i wewnątrzkomórkowych, cytokin oraz ich receptorów na poziomie mrna techniką ilościowego real-time PCR. Wyniki. Zanotowano istotnie statystycznie niższy odsetek limfocytów CD4+CD25high w grupie dzieci z nowo rozpoznaną cukrzycą typu 1 w porównaniu z dziećmi z grupy odniesienia. Natomiast różnice w zakresie subpopulacji komórek CD4+CD127dim/- oraz CD4+CD25highCD127dim/- nie były istotne statystycznie. Obserwowano niższy, w tym w niektórych przypadkach istotny statystycznie, poziom mrna dla genów cząsteczek, receptorów i czynników transkrypcyjnych istotnych w funkcjonowaniu limfocytów T regulatorowych, tj. CTLA-4, IL-10RA, TGF-βR1 i TGF-βR2 oraz STAT-1 i SMAD3. Wniosek. Naszym zdaniem zmniejszoną ekspresję wybranych genów w komórkach T regulatorowych 17
2 Praca oryginalna Endokrynol. Ped., 8/2009;1(26):17-26 należy interpretować jako jeden z wyznaczników upośledzenia funkcji tej subpopulacji komórek w grupie dzieci z cukrzycą typu 1. Uzyskane wyniki mogą zostać użyte do konstruowania przyszłych schematów immunoterapeutycznych. Endokrynol. Ped. 8/2009;1(26): Introduction. The pathogenesis of type 1 diabetes (T1DM) includes the self-destruction of pancreatic beta cells. The causes of this reaction against self-antigens are unclear. The question rises if one of the lymphocytes subpopulations, T regulatory cells (Tregs), responsible for inhibition of hyperreactive immunological response could play a role in the pathogenesis of T1DM? The aim of the present study was the assessment of T regulatory cells percentages and expression of chosen genes important for their function in children with diabetes comparing to healthy subjects. Material and methods. Twenty children with T1DM were enrolled into the study. The T regulatory cells were assessed with flow cytometry with the use of following monoclonal antibodies: anti-cd3, anti-cd4, anti-cd25, anti- CD127. The T regulatory cells (CD4+CD25+CD127low) were separated and checked for the expression of chosen genes with the use of real-time RT PCR technique. Results. We noted lower percentages of CD4+CD25high cells in the group of children with T1DM comparing to the control group. The differences concerning CD4+CD127low and CD4+CD25highCD127low cells were not statistically significant. We also observed lower expression of genes for molecules, receptors and transcription factors important for the function of T regulatory cells i.e.: CTLA-4, IL-10RA, TGF-βR1 and TGF-βR2, STAT-1 and SMAD3. Conclusion. In our opinion the diminished expression of some genes in T regulatory cells in patients with type 1 diabetes can be interpreted as one of the aspects of their dysfunction. These results could be used in the future immunotherapeutic trials. Pediatr. Endocrinol. 8/2009;1(26): Wykaz użytych skrótów: IL interleukina (interleukin), PCR reakcja łańcuchowej polimerazy (polimerase chain reaction), RNA kwas rybonukleinowy (ribonucleic acid), T1DM cukrzyca typu 1 (type 1 diabetes mellitus), TGF transformujący czynnik wzrostu (transforming growth factor), TNF-α czynnik martwicy nowotworów (tumor necrosis factor), Tregs limfocyty T regulatorowe (T regulatory cells) Wstęp Cukrzyca typu 1 (T1DM) jest jedną z najczęstszych chorób przewlekłych u dzieci. U jej podłoża leży wybiórcza destrukcja komórek β wysp trzustkowych produkujących insulinę [1]. Objawy choroby wynikają z niedoboru insuliny i zaburzeń metabolicznych związanych z hiperglikemią. Mechanizm patogenetyczny choroby jest związany z pojawieniem się autoimmunologicznej odpowiedzi o charakterze komórkowym i humoralnym, skierowanej przeciwko elementom wysp trzustkowych. Zniszczenie komórek β zachodzi na drodze apoptozy z udziałem cytokin prozapalnych, takich jak: IL-1β, TNF-α i IFN-γ, prowadzących do aktywacji szlaków czynników transkrypcyjnych NF-κB i STAT-1 [2]. Nieznane są powody wzbudzenia tej reakcji skierowanej przeciwko własnym tkankom, być może jedną ze składowych tej patologii jest defekt immunoregulacji. Wyjaśnienie fenomenu autodestrukcji mogłoby pomóc w leczeniu i zapobieganiu tej jednostce chorobowej [3]. W latach dziewięćdziesiątych ubiegłego wieku intensywnie badano udział subpopulacji limfocytów Th 1 i Th 2 w patogenezie chorób o podłożu immunologicznym. Limfocyty produkujące cytokiny prozapalne, tj. profil Th 1 (IFN-γ, TNF-α), miałyby być odpowiedzialne za pojawienie się chorób z autoagresji, natomiast komórki typu Th 2, produkujące cytokiny przeciwzapalne (IL-4, IL-10, TGF-β), miałyby odgrywać rolę protekcyjną w chorobach autoimmunologicznych, a sprawczą w alergiach i immunosupresji. W efekcie dalszych badań uznano, że zarówno limfocyty Th 1, jak i Th 2 biorą udział w indukcji apoptozy komórek β wysp trzustkowych [4]. Ponieważ cukrzyca typu 1 jest jedną z modelowych chorób autoimmunologicznych, od wielu lat prowadzone są badania nad przyczyną utraty tolerancji w stosunku do własnych tkanek w tej grupie pacjentów. Jedna z subpopulacji limfocytów komórki T regulatorowe (Tregs) jest odpowiedzialna za hamowanie nadmiernej odpowiedzi immunologicznej skierowanej przeciwko własnym antygenom. Brak lub uszkodzenie funkcji limfocytów T regulatorowych prowadzi do rozwoju chorób autoimmunologicznych [5]. Defekt ilościowy i/lub jakościowy Tregs jest brany pod uwagę w nowoczesnym modelu patogenezy cukrzycy typu 1 [6]. Niektórzy badacze próbują nawet wykorzystać tę subpopulację komórek do zahamowania destrukcji wysp trzustkowych i uzyskania ustąpienia objawów choroby [7]. Mimo wielu prac poświęconych badaniom czynności limfocytów T regulatorowych opinie na ten temat są bardzo różnorodne i kontrowersyjne. Tregs prowadzą do supresji poprzez drogi zależne 18
3 Łuczyński W. i inni: Zaburzenia ekspresji niektórych genów w komórkach T regulatorowych u dzieci z cukrzycą typu 1 i niezależne od kontaktu komórka komórka. Poszukiwania istotnego markera Tregs zostały zwieńczone udowodnieniem kluczowej roli czynnika transkrypcyjnego FoxP3 w czynności komórek T regulatorowych za komórki regulatorowe będzie się zatem uważało: CD4 + /CD25 ++ /FoxP3 +. Jednak oznaczanie czynnika FoxP3 wiąże się z długotrwałą procedurą laboratoryjną (permeabilizacja) oraz brakiem możliwości użycia komórek do dalszych badań, np. funkcjonalnych. Ostatnio wykryto silną korelację pomiędzy wewnątrzkomórkową ekspresją czynnika transkrypcyjnego FoxP3 a powierzchniową niską ekspresją antygenu CD127 (IL-7R), można zatem przyjąć, że komórki T regulatorowe to CD4 + /CD25 ++ /CD127 low. Być może jedną z ważnych substancji produkowanych przez Tregs jest odkryta niedawno IL-35, która składa się z genu indukowanego przez wirus Epstein-Barr (EBI3) oraz podjednostki p35 IL-12. Według niektórych autorów jej działanie jest kluczowe dla supresyjnej funkcji limfocytów Tregs [8]. Wyniki ostatnich badań doświadczalnych zdają się również wskazywać na krytyczne znaczenie cząsteczki ICOS w czynności supresyjnej limfocytów T regulatorowych [9]. Funkcja Tregs może być również zaburzona w zakresie odpowiedzi wewnątrzkomórkowej na stymulację IL-10, dotyczy to m.in. ekspresji SOCS3, STAT1 i STAT3 [10]. Podobnie czynniki transkrypcyjne Smad3 i NFAT również są istotne dla funkcjonowania FoxP3 [11]. Badania dużej liczby genów z użyciem metod real-time PCR i mikromacierzy w komórkach T regulatorowych były przeprowadzone tylko w jednym znanym eksperymencie opartym na izolacji komórek CD4 + CD25 + od kilku grup etnicznych mieszkańców Afryki różniących się wrażliwością na zachorowanie na malarię [12]. W tym doświadczeniu wykazano znaczenie genów zarówno charakterystycznych dla funkcji supresyjnej (FoxP3, CTLA- 4), genów związanych z profilem limfocytów Th 1 (IL-18, IFN-γ, TBX21), jak i Th 2 (IL-4, GATA3) w czynności limfocytów T regulatorowych. Hipoteza, że w T1DM dochodzi do zaburzeń ilościowych i jakościowych komórek T regulatorowych, byłaby bardzo atrakcyjna dla przyszłych modeli interwencji immunoterapeutycznej. Zatem celem niniejszej pracy była analiza odsetków limfocytów T regulatorowych oraz ekspresji wybranych genów istotnych dla ich funkcji u dzieci z cukrzycą typu 1. Z naszych wstępnych badań przeprowadzonych u dzieci z T1DM za pomocą cytometrii przepływowej oraz łańcuchowej reakcji polimerazy wynika, iż odsetki limfocytów T regulatorowych są podobne do tych obserwowanych w grupie odniesienia, natomiast w cukrzycy dochodzi do zaburzeń w ekspresji elementów służących do przekazywania wewnątrzkomórkowego sygnału, co może wskazywać na upośledzenie funkcji tych komórek w badanej grupie pacjentów. Pacjenci Do badania zakwalifikowano 20 dzieci z cukrzycą typu 1 (10 chłopców i 10 dziewcząt w średnim wieku 10,5 lat). Rozpoznanie cukrzycy oparto na kryteriach opracowanych przez Polskie Towarzystwo Diabetologiczne (2007). Średnie stężenie hemoglobiny glikowanej wynosiło 10,1%, a średnie zapotrzebowanie na insulinę w momencie pobierania krwi do badania 0,8 j/kg/dobę. Krew obwodową w ilości 5 cm 3 pobierano po uzyskaniu równowagi metabolicznej w dniach od rozpoznania choroby. Grupę odniesienia stanowiło 20 dzieci bez cech infekcji oraz choroby przewlekłej, a w szczególności: chorób nowotworowych, autoimmunologicznych, zapalnych, z negatywnym wywiadem rodzinnym w kierunku cukrzycy typu 1. Na przeprowadzenie doświadczeń uzyskano zgodę Komisji Bioetycznej Uniwersytetu Medycznego w Białymstoku. W każdym przypadku pisemną zgodę na pobranie krwi wyrażali prawni opiekunowie dziecka oraz pacjent (wiek 16 lat). Materiał był pobierany wyłącznie przy okazji innych badań laboratoryjnych. Grupy badana i odniesienia nie różniły się statystycznie wiekiem oraz płcią (p > 0,05). Metody Cytometria przepływowa Oceny komórek T regulatorowych dokonano za pomocą cytometrii przepływowej z użyciem następujących przeciwciał monoklonalnych: anty-cd3 (skonjugowanego z PECy5), anty-cd4 (PECy7), anty-cd25 (FITC), anty-cd127 (PE) oraz izotypowych kontroli. Odczynniki do powyższych oznaczeń zostały zakupione w firmie Beckman Coulter (USA). Oceniano odsetki następujących subpopulacji limfocytów T: CD4 +, CD4 + CD25 high, CD4 + CD127 dim/-, CD4 + CD25 high CD127 dim/-. Badania wykonywano na pięciokolorowym cytometrze Beckman Cytomics FC 500 MPL z użyciem oprogramowania CXP wersja 2.0. W analizie brano pod uwagę miniumum zdarzeń. W celu wyliczenia wartości bezwględnych badanych parametrów 19
4 Praca oryginalna Endokrynol. Ped., 8/2009;1(26):17-26 dodatkowo wykonywano morfologię krwi z rozmazem. Z powodu dużej ilości uzyskanych danych wyniki przedstawiono jako średnie. Separacja komórek T regulatorowych Izolacji komórek T regulatorowych o fenotypie CD4 + CD25 + CD127 dim/- dokonano z użyciem odczynników firmy Miltenyi Biotec zgodnie z instrukcją produdenta. W skrócie: w pierwszej kolejności z krwi obwodowej separowano komórki jednojądrzaste (Histopaque, Sigma), następnie usunięto komórki CD4 - oraz CD127 high poprzez deplecję na kolumnach MACS, zaś w ostatnim etapie pozytywnie wyizolowano komórki CD4 + CD25 + CD127 dim/-. W celu poprawienia czystości separacji ostatni etap reakcji wykonywano za każdym razem dwukrotnie na nowych kolumnach. Łańcuchowa reakcja polimerazy czasu rzeczywistego (real-time PCR) Ocena ekspresji wybranych genów dla czynników transkrypcyjnych, aktywacyjnych i wewnątrz- Tabela I. Nazwy, symbole, numery identyfikacyjne oraz obecność genów ocenianych w komórkach T regulatorowych Table II. Names, symbols, Ids and presence/absence of genes in T regulatory cells Symbol genu /Gene symbol Nazwa genu/gene name Numer identyfikacyjny Assay ID Obecność w badanych próbkach /Presence in examined probes FoxP3 forkhead box P3 NM_ CD25 interleukin 2 receptor, alpha (IL2RA) NM_ GITR TNF receptor superfamily, member 18 NM_ CTLA-4 cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4 NM_ ICOS inducible T-cell co-stimulator NM_ SOCS2 suppressor of cytokine signaling 2 (SOCS2) NM_ SOCS3 suppressor of cytokine signaling 3 NM_ STAT1 signal transducer and activator of transcription 1 NM_ STAT3 signal transducer and activator of transcription 3 NM_ SMAD3 SMAD family member 3 NM_ IL-8RA/CXCR1 interleukin 8 receptor, alpha NM_ IL-10RA interleukin 10 receptor, alpha NM_ IL-17A interleukin 17A (IL17A) NM_ CCL22 chemokine (C-C motif) ligand 22 NM_ T-box 21 IL-21 T-box 21 (TBX21) interleukin 21 NM_ NM_ IL-12A interleukin 12A NM_ IL-12B interleukin 12B NM_ IL-23A interleukin 23 alpha subunit p19 NM_ IL-27 interleukin 27 NM_ IL-35 (EBI3) Epstein-Barr virus induced gene 3 NM_ TGF-BR1 transforming growth factor, beta receptor I NM_ TGF-BR2 transforming growth factor, beta receptor II NM_
5 Łuczyński W. i inni: Zaburzenia ekspresji niektórych genów w komórkach T regulatorowych u dzieci z cukrzycą typu 1 komórkowych, cytokin oraz ich receptorów w separowanych limfocytach T regulatorowych została przeprowadzona na poziomie mrna (transkryptów) techniką ilościowego Real-Time PCR na systemie Chromo4 (BioRad). Listę ocenianych genów przedstawiono w tabeli I. Izolację całkowitego RNA z badanych komórek przeprowadzono przy użyciu gotowego zestawu RNeasy Mini Kit (Qiagen, Niemcy) według protokołu producenta. Stężenie otrzymanych preparatów RNA oceniono spektrofotometrycznie (QuantGen Biopharmacia). Stopień czystości preparatu od białka określono na podstawie stosunku wartości adsorbcji przy długości fal 260/280 nm. Otrzymane preparaty RNA oceniono także elektroforetycznie w 1,5% żelu agarozowym w celu sprawdzenia integralności wyizolowanego RNA. Przed właściwą reakcją Real-Time PCR przeprowadzono reakcję odwrotnej transkrypcji (ang. Reverse Transcription, RT) w celu otrzymania stabilnego kwasu nukleinowego cdna. Reakcję odwrotnej transkrypcji przeprowadzono wykorzystując dostępny komercyjnie zestaw SuperScript TM First-Strand Synthesis System for RT- PCR. Preparaty RNA przed reakcją RT rozcieńczono wodą w ten sposób, aby uzyskać 1,0 µg/µl RNA w roztworze. Reakcję RT-PCR prowadzono przy użyciu termocyklera PTC 200 (MJ Research, USA) zgodnie z procedurą zestawu. Otrzymane roztwory cdna przechowywano w temp. -20 C. W celu oceny ilościowej zawartości określonych transkryptów genów użyto systemu detekcji fluorescencji real-time Chromo4 TM Four-Color Real-Time Fluorescence Detection (BioRad, USA). Mierzona fluorescencja pochodziła z barwnika fluorescencyjnego SYBR Green I, będącego składnikiem QuantiTect TM SYBR Green PCR Master Mix. Do badania zastosowano gotowe startery firmy Qiagen, posiadające jednakową temperaturę przyłączania (annealing). Sekwencje tych primerów zostały objęte tajemnicą handlową formy. W celu normalizacji badań wykorzystano gen referencyjny GAPDH. Skład mieszaniny reakcyjnej: 5 µl cdna, uzyskanego po reakcji RT, 10 µl gotowego QuantiTect TM SYBR Green PCR Master Mix zawierającego polimerazę DNA HotStart-Taq, bufor reakcyjny, mieszaninę dntp, barwnik fluorescencyjny SYBR Green I, 2,5 mm MgCl 2 oraz 2 µl startera odpowiedniego genu. Warunki amplifikacji: wstępna aktywacja polimerazy HotStart-Taq: 95 0 C 15 min. denaturacja nici cdna: 95 0 C 30s, wiązanie starterów: 55 0 C 15s, synteza nici DNA : 72 0 C 30s, czytanie płytki, powtórzenie cyklu, denaturacja synteza nici DNA: 39x, krzywa topnienia odczytywanie temperatury denaturacji produktów co 2 0 C i 2s, zakończenie reakcji. Specyficzność produktów amplifikacji poszczególnych genów oceniano na podstawie wykreślonej przez aparat krzywej dysocjacji i wyznaczonych temperatur mięknięcia tych produktów (Tm). Poziom ekspresji badanego genu określono na podstawie krzywej standardowej sporządzonej z serii rozcieńczeń cdna pochodzącego od zdrowych pacjentów. Wyniki względnej ekspresji otrzymano w postaci wartości C T - treshold cycle cyklu reakcji PCR, w którym nastąpił maksymalny wzrost fluorescencji, wyznaczonym w punkcie przecięcia z linią threshold, której poziom wyznaczany jest za pomocą krzywej wzorcowej [13]. Dla każdej próbki reakcję Real-Time PCR dla każdego gen, wykonano w dwóch powtórzeniach. Analiza statystyczna Uzyskane dane wprowadzano do bazy danych w programie Microsoft Access 2007, następnie po obróbce przenoszono do programu Statistica 8.0 for Windows. Wobec braku cech rozkładu normalnego wyniki analizowano za pomocą testów nieparametrycznych. Porównania ilości mrna dla ocenianych genów w grupach badanej i kontrolnej dokonano za pomocą testu U Manna-Whitneya. Wartość p < 0,05 uznano za istotną statystycznie. Rysunki wykonano za pomocą programu Graph- Pad 5.0. Wyniki Podobne odsetki limfocytów T regulatorowych u dzieci z cukrzycą i zdrowych Liczba krwinek białych oraz odsetek i całkowita liczba limfocytów, a także subpopulacji CD4 + nie różniły się w grupach badanej i kontrolnej (średnie wartości odpowiednio: WBC 6,07 vs 6,08 G/l, odsetek limfocytów 36,1 vs 39,0, liczba limfocytów: 2,3 vs 2,09 G/l, odsetek CD4 + : 38,3% vs 35,9%; p > 0,05). Z tego powodu dalszej analizie poddano odsetki limfocytów uznawanych w piśmiennictwie za komórki T regulatorowe. Zanotowano istotnie statystycznie niższy odsetek limfocytów CD4 + C- D25 high w grupie dzieci z nowo rozpoznaną cukrzycą typu 1 w porównaniu z dziećmi z grupy odniesienia (2,31 vs 4,05%, p = 0,03). Natomiast różnice w zakresie subpopulacji komórek CD4 + CD127 dim/- oraz CD4 + CD25 high CD127 dim/- nie były istotne statystycznie (15,32 vs 19,49%; 0,647 vs 0,693%, p > 0,05). 21
6 Praca oryginalna Endokrynol. Ped., 8/2009;1(26):17-26 Tabela II. Wyniki ilościowej oceny ekspresji mrna w komórkach T regulatorowych za pomocą metody real-time RT PCR dla badanych genów. Różnice istotne statycznie zostały wytłuszczone Table II. The results of mrna expression with the real-time RT PCR method for assessed genes. The diferences statistically significant are bolded Symbol genu Gene symbol Grupa badana dzieci z cukrzycą typu 1 (średnia 2 - Ct ) Examined group (mean 2 - Ct ) Grupa odniesienia (średnia 2 - Ct ) Control group (mean 2 - Ct ) Analiza statystyczna Statistics FoxP3 0,135 0,137 ns CD25 0,01 0,06 ns GITR 0,128 0,115 ns CTLA-4 0,177 0,389 p < 0,05 ICOS 0,0004 0,0005 ns SOCS2 0,002 0,002 ns SOCS3 0,089 0,101 ns STAT1 0,07 0,302 p < 0,05 STAT3 0,01 0,08 ns IL-8RA/CXCR1 0,039 0,089 ns IL-10RA 0,308 0,955 p < 0,05 T-box 21 0,01 0,009 ns IL-12A 0,001 0,006 ns IL-23A 0,142 0,255 ns IL-27 0,001 0,004 ns TGF-BR1 0,01 0,05 p < 0,05 TGF-BR2 0,07 0,262 p < 0,01 SMAD3 0,03 0,08 p < 0,05 Zaburzenia ekspresji genów w komórkach T regulatorowych u dzieci z cukrzycą typu 1 Przykładową krzywą standardową oraz amplifikację wybranego genu pokazano na rycinach 1a i 1b. Wyniki uzyskane z real-time RT PCR zostały przedstawione w tabeli II. Spośród 23 ocenianych trankryptów wykryto obecność 18 w wyseparowanych komórkach CD4 + CD25 + CD127 dim/-. Poziom ekspresji mrna dla czynnika transkrypcyjnego FoxP3 był porównywalny w obu grupach (p > 0,05). Nie zanotowano wyższej ekspresji mrna w izolatach grupy badanej w porównaniu z grupą odniesienia dla żadnego z badanych genów. Obserwowano natomiast niższy, w tym w niektórych przypadkach istotny statystycznie, poziom mrna dla genów cząsteczek, receptorów i czynników transkrypcyjnych istotnych dla funkcjonowania limfocytów T regulatorowych, tj. CTLA-4, IL-10RA, TGF-βR1 i TGF-βR2 oraz STAT-1 i SMAD3 (p < 0,05). Porównanie ilości mrna dla wybranych genów pokazano na rycinie 2. Dyskusja W grupie dzieci z nowo rozpoznaną cukrzycą typu 1 ocenialiśmy odsetek komórek T regulatorowych oraz ekspresję wybranych genów kluczowych dla czynności Tregs. Wykazaliśmy brak istotnych różnic w zakresie odsetka limfocytów Tregs (poza subpopulacją CD4 + CD25 high ) pomiędzy 22
7 Łuczyński W. i inni: Zaburzenia ekspresji niektórych genów w komórkach T regulatorowych u dzieci z cukrzycą typu 1 Ryc. 1a. Krzywa standardowa dla genu GAPDH wyznaczona na podstawie amplifikacji uzyskanej z serii rozcieńczeń cdna pochodzącego od zdrowego pacjenta Fig. 1a. Standard curve for GAPDH gene amplification. The curve is based on values obtained for decreasing serial dilutions of the cdna from the control patient Ryc. 1b. Wykresy amplifikacji badanych prób dla genu CTLA-4 przy użyciu systemu detekcji fluorescencji Real- Time PCR Chromo4. Oś odciętych: ilość cykli reakcji amplifikacji, oś rzędnych: intensywność fluorescencji produktów amplifikacji Fig. 1b. The graph shows the amplification profiles of CTLA- 4 mrna present in clinical samples. X axis number of amplification cycles, Y axis intensity of fluorescence in arbitrary units grupą badaną a grupą odniesienia. Natomiast u dzieci z T1DM obserwowaliśmy istotne zaburzenia w ekspresji genów, m.in. CTLA-4, receptorów dla IL-10 i TGF-β oraz czynników transkrypcyjnych STAT-1 i SMAD3 w porównaniu z dziećmi zdrowymi. Od czasu odkrycia Tregs wykonano wiele badań nad ich znaczeniem w cukrzycy typu 1, jednak ich wyniki są kontrowersyjne. Większość autorów nie obserwowała różnic w zakresie liczby i odsetka limfocytów T regulatorowych pomiędzy pacjentami z T1DM a grupą kontrolną [14, 15]. Wyniki te są zgodne z uzyskanymi w naszym badaniu. Niższy odsetek subpopulacji CD4 + CD25 high wykazany w naszej obserwacji jest zgodny z wcześniejszymi doniesieniami innych badaczy z czasu, gdy nie odkryto jeszcze znaczenia receptora dla IL-7 (CD127) w określaniu fenotypu Tregs [16]. W znanym raporcie odnotowano wyższe odsetki limfocytów T regulatorowych u dzieci z T1DM, autorzy tego doniesienia interpretują uzyskane wyniki jako aktywację odpowiedzi regulatorowej w czasie zachorowania [17]. Podobnie aktywację limfocytów T, tj. wzrost odsetka limfocytów T z koekspresją cząsteczek HLA-DR we wczesnym okresie T1DM u dzieci obserwowała Kowalska i wsp. [18]. Jednak dla wykazania roli limfocytów T regulatorowych w patogenezie cukrzycy typu 1 istotne jest udowodnienie zaburzeń czynności Tregs, w tym efektów supresyjnych. Eksperymenty obrazujące działanie supresyjne komórek CD4 + CD25 + CD127 dim/- prawdopodobnie nie są możliwe do przeprowadzenia z powodu bardzo małej ilości tych komórek dostępnych we krwi obwodowej (w naszym badaniu ok. 0,6-0,7% limfocytów). Dotychczasowe doświadczenia były przeprowadzane z użyciem komórek CD4 + CD25 +, co w sposób istotny ogranicza ich interpretację, a przede wszystkim prowadzi do uzyskania różnorodnych wyników. Badacze próbują pośrednio ocenić funkcję Tregs, np. na podstawie ekspresji wybranych cytokin, cząsteczek lub przekaźników wewnątrzkomórkowych. Czynniki transkrypcyjne oraz cząsteczki: FoxP3, GITR, CTLA-4 oraz CD62L stanowią markery supresyjnej funkcji komórek T regulatorowych, w tym tych używanych do protekcji wysp trzustkowych. W naszym doświadczeniu ekspresja elementów kluczowych dla funkcjonowania Tregs, tj. FoxP3, GITR i ICOS, nie była zmniejszona. Natomiast wyniki dotyczące poziomów mrna dla wybranych genów w komórkach T regulatorowych wykazały zmniejszoną ekspresję CTLA-4 u dzieci 23
8 Praca oryginalna Endokrynol. Ped., 8/2009;1(26):17-26 Ryc. 2. Porównanie poziomów mrna dla wybranych genów ocenianych metodą ilościową real-time RT-PCR w wyseparowanych komórkach T regulatorowych. Ilość mrna dla FoxP3 w grupach badanej i odniesienia nie różnią się. Poziom ekspresji mrna dla CTLA-4, STAT-1 oraz receptora 1 dla TGF-β1 jest niższy u dzieci z cukrzycą w porównaniu do dzieci zdrowych Fig. 2. Comparison of the mrna levels for chosen genes assessed with real-time RT PCR in separated T regulatory cells. The mrna levels for FoxP3 in the examined and control group do not differ. The mrna levels for CTLA-4, STAT-1 and TGF-β1 receptor-1 are lower in children with type 1 diabetes comparing to the healthy children z T1DM w porównaniu z grupą odniesienia. Cząsteczka CTLA-4 stanowi istotny element negatywnej regulacji w procesie aktywacji limfocytów T. Naszym zdaniem zmniejszoną ekspresję jej genu należy interpretować jako jeden z wyznaczników upośledzenia funkcji tej subpopulacji komórek. Odmienne wyniki odnotowali Lindley i wsp. [19]. Autorzy ci stwierdzili wysokie odsetki komórek Tregs z koekspresją wewnątrzkomórkową CTLA-4 u pacjentów z cukrzycą. Pozostałe wyniki badania tych autorów wyraźnie wskazują na defekt supresyjnej roli Tregs w tej grupie pacjentów. W badanej przez nas grupie pacjentów obserwowaliśmy niższą ekspresję mrna receptorów dla TGF-β1 w komórkach Tregs w porównaniu z grupą odniesienia. Rola TGF-β w T1DM jest bezsporna. Jeden z najnowszych schematów leczniczych cukrzycy typu 1 polega na podawaniu przeciwciał przeciwko limfocytom T (anty-cd3). Terapia ta zatrzymuje destrukcję komórek wysp trzustkowych, prowadząc do tolerancji immunologicznej i ustąpienia objawów niedoboru insuliny. W jednym z badań w trakcie podaży anty-cd3 stężenie TGF-β wzrastało, co według autorów świadczy o powrocie stanu immunotolerancji [20]. Jednak w tym doświadczeniu limfocyty Tregs nie były odpowiedzialne za zahamowanie rozwoju cukrzycy. W innym eksperymencie komórki Tregs posiadające na swojej powierzchni elementy wiążące TGF-β wykazywały efekt protekcyjny w stosunku do zachorowania na cukrzycę w porównaniu z brakiem tego efektu komórek bez ekspresji TGF-β [21]. Białka kodowane przez geny STAT (ang. signal transducers and activators of transcription) należą do grupy elementów biorących udział w przekazywaniu informacji z powierzchni komórek do jądra oraz w aktywacji transkrypcji innych genów. Aktywowane są w odpowiedzi na szereg cytokin, czynników wzrostu i hormonów. Dotychczas ustalono, iż pełnią one ważne funkcje regulacyjne w wielu procesach fizjopatologicznych, począwszy od odpowiedzi układu immunologicznego do regulacji 24
9 Łuczyński W. i inni: Zaburzenia ekspresji niektórych genów w komórkach T regulatorowych u dzieci z cukrzycą typu 1 cyklu komórkowego i transformacji nowotworowej komórek [22]. Podnoszona jest ich rola w czynności limfocytów T regulatorowych. Według najnowszych danych ekspresja STAT-1 w obecności IL-27 jest warunkiem aktywacji czynnika transkrypcyjnego FoxP3 [23]. Natomiast STAT-3 wydaje się odgrywać przeciwną rolę [24]. Podobnie czynniki transkrypcyjne SMAD3 oraz NFAT są niezbędne do aktywacji FoxpP3 [11]. SMAD3 ulegał aktywacji w komórkach wysp trzustki transfekowanych TGF-β. Komórki te produkowały duże ilości TGF-β, indukowały pojawienie się komórek T regulatorowych, jednak nie zapobiegały insulitis i zachorowaniu na cukrzycę typu 1 u myszy NOD [25]. Obserwowana przez nas zmniejszona ekspresja STAT-1 oraz SMAD3 w komórkach Tregs dzieci z cukrzycą w porównaniu z dziećmi zdrowymi może być kolejnym dowodem na upośledzenie ich funkcji. Interesujące badania dotyczące innej choroby o podłożu autoimmunologicznym, jaką jest stwardnienie rozsiane (SM), przeprowadzili Martinez-Forero i wsp. [10]. Autorzy tego cyklu doświadczeń wykazali istotne zaburzenia funkcji limfocytów T regulatorowych, w tym dysregulację przekazywania sygnału dla IL-10 w tej jednostce chorobowej. Jest to zgodne z naszymi wynikami, które wskazują na zmniejszoną ekspresję receptora dla tej immunosupresyjnej cytokiny w komórkach Tregs dzieci z cukrzycą. W naszym eksperymencie nie zanotowaliśmy różnic w ekspresji mrna dla cząsteczek SOCS2 i SOCS3 w limfocytach Tregs w grupach badanej i kontrolnej. W przypadku cząsteczki SOCS3 jej nadmierna ekspresja upośledza funkcję limfocytów T regulatorowych, zatem zmniejszenie jej produkcji byłoby pożądanym efektem w cukrzycy typu 1 [26]. Podsumowanie U dzieci chorych na cukrzycę obserwowaliśmy zbliżone do dzieci zdrowych odsetki limfocytów T regulatorowych. Stwierdzone natomiast zaburzenia ekspresji genów dla niektórych elementów wewnątrzkomórkowego przekazywania sygnału w limfocytach T regulatorowych mogą sugerować, iż dalsze badania nad ich rolą okażą się przydatne nie tylko w wyjaśnieniu patogenezy cukrzycy, ale staną się elementem przyszłej immunoterapii. Wskazują na to zachęcające wyniki pierwszych raportów z terapii eksperymentalnych [27]. PIŚMIENNICTWO/REFERENCES [1] Achenbach P., Bonifacio E., Koczwara K. et al.: Natural history of type 1 diabetes. Diabetes, 2005:54 (suppl 2), [2] Cnop M., Welsh N., Jonas J.C. et al.: Mechanisms of pancreatic beta-cell death in type 1 and type 2 diabetes. Diabetes, 2005:54 (suppl 2), [3] Szewczyk L.: Postępy w diabetologii pediatrycznej. Endokrynol. Pediatr., 2004:3 (suppl 2), 5. [4] Azar S.T., Tamim J., Beyhum H.N. et al.: Type 1 (insulin-dependent) diabetes is a Th1- and Th2-mediated autoimmune disease. Clin. Diagn. Lab. Immunol., 1999:6, [5] Sakaguchi S., Sakaguchi N., Asano M. et al.: Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases. J. Immunol., 1995: 155, [6] Brusko T., Atkinson M.: Treg in type 1 diabetes. Cell Biochem. Biophys., 2007:48, [7] Jaeckel E., Mpofu N., Saal N. et al.: Role of regulatory T cells for the treatment of type 1 diabetes mellitus. Horm. Metab. Res., 2008: 40, [8] Collison L.W., Workman C.J., Kuo T.T. et al.: The inhibitory cytokine IL-35 contributes to regulatory T-cell function. Nature, 2007:450, [9] Burmeister Y., Lischke T., Dahler A.C. et al.: ICOS controls the pool size of effector-memory and regulatory T cells. J. Immunol., 2008:180, [10] Martinez-Forero I., Garcia-Munoz R., Martinez-Pasamar S. et al.: IL-10 suppressor activity and ex vivo Tr1 cell function are impaired in multiple sclerosis. Eur. J. Immunol., 2008:38, [11] Tone Y., Furuuchi K., Kojima Y. et al.: Smad3 and NFAT cooperate to induce Foxp3 expression through its enhancer. Nat. Immunol., 2008:9, [12] Torcia M.G., Santarlasci V., Cosmi L. et al.: Functional deficit of T regulatory cells in Fulani, an ethnic group with low susceptibility to Plasmodium falciparum malaria. PNAS, 2008:105, [13] Livak K.J., Schmittgen T.D.: Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2-ddCT method. Methods, 2001:25, [14] Brusko T., Wasserfall C., McGrail K. et al.: No alterations in the frequency of FoxP3+ regulatory T-cells in type 1 diabetes. Diabetes, 2007:56,
10 Praca oryginalna Endokrynol. Ped., 8/2009;1(26):17-26 [15] Liu W., Putnam A.L., Xu-Yu Z. et al.: CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ T reg cells. J. Exp. Med., 2006:203, [16] Kukreja A., Cost G., Marker J. et al.: Multiple immuno-regulatory defects in type-1 diabetes. J. Clin. Invest., 2002:109, [17] Oling V., Marttila J., Knip M. et al.: Circulating CD4+CD25high regulatory T cells and natural killer T cells in children with newly diagnosed type 1 diabetes or with diabetes-associated autoantibodies. Ann. N. Y. Acad. Sci., 2007:1107, [18] Kowalska H., Kądziela K., Wąsik M. et al.: Ocena wybranych subpopulacji limfocytów B i T u dzieci we wczesnym okresie cukrzycy insulinozależnej. Endokrynol. Diabetol. Przemiany Materiii Wieku Rozwoj., 2001:7, [19] Lindley S., Dayan C.M., Bishop A. et al.: Defective suppressor function in CD4(+)CD25(+) T-cells from patients with type 1 diabetes. Diabetes, 2005:54, [20] Chen G., Han G., Wang J. et al.: Essential roles of TGF-beta in anti-cd3 antibody therapy: reversal of diabetes in non-obese diabetic mice independent of Foxp3+CD4+ regulatory T cells. J. Leukoc. Biol., 2008:83, [21] Gregg R.K., Jain R., Schoenleber S.J. et al.: A sudden decline in active membrane-bound TGF-beta impairs both T regulatory cell function and protection against autoimmune diabetes. J. Immunol., 2004:173, [22] Baśkiewicz-Masiuk M., Machaliński B.: Rola białek STAT5 w schorzeniach układu krwiotwórczego. Post. Biol. Komórki, 2003:30, [23] Ouaked N., Mantel P.Y., Bassin C. et al.: Regulation of the foxp3 gene by the Th1 cytokines: the role of IL-27-induced STAT1. J. Immunol., 2009:182, [24] Huber M., Steinwald V., Guralnik A. et al.: IL-27 inhibits the development of regulatory T cells via STAT3. Int. Immunol., 2008:20, [25] Park L., Lee E., Lee S. et al.: TGFbeta plasmid construction and delivery for the prevention of type 1 diabetes. Ann. N. Y. Acad. Sci., 2008:1150, [26] Pillemer B.B., Xu H., Oriss T.B. et al.: Deficient SOCS3 expression in CD4+CD25+FoxP3+ regulatory T cells and SOCS3-mediated suppression of Treg function. Eur. J. Immunol., 2007:37, [27] Jaeckel E., von Boehmer H., Manns M.P.: Antigen-specific FoxP3-transduced T-cells can control established type 1 diabetes. Diabetes, 2005:54,
IL-4, IL-10, IL-17) oraz czynników transkrypcyjnych (T-bet, GATA3, E4BP4, RORγt, FoxP3) wyodrębniono subpopulacje: inkt1 (T-bet + IFN-γ + ), inkt2
Streszczenie Mimo dotychczasowych postępów współczesnej terapii, przewlekła białaczka limfocytowa (PBL) nadal pozostaje chorobą nieuleczalną. Kluczem do znalezienia skutecznych rozwiązań terapeutycznych
Bardziej szczegółowoPromotor: prof. dr hab. Katarzyna Bogunia-Kubik Promotor pomocniczy: dr inż. Agnieszka Chrobak
INSTYTUT IMMUNOLOGII I TERAPII DOŚWIADCZALNEJ IM. LUDWIKA HIRSZFELDA WE WROCŁAWIU POLSKA AKADEMIA NAUK mgr Milena Iwaszko Rola polimorfizmu receptorów z rodziny CD94/NKG2 oraz cząsteczki HLA-E w patogenezie
Bardziej szczegółowostarszych na półkuli zachodniej. Typową cechą choroby jest heterogenny przebieg
STRESZCZENIE Przewlekła białaczka limfocytowa (PBL) jest najczęstszą białaczką ludzi starszych na półkuli zachodniej. Typową cechą choroby jest heterogenny przebieg kliniczny, zróżnicowane rokowanie. Etiologia
Bardziej szczegółowoLimfocyty T regulatorowe w immunopatologii i immunoterapii chorób alergicznych
Limfocyty T regulatorowe w immunopatologii i immunoterapii chorób alergicznych Dr hab. n. med. Aleksandra Szczawińska- Popłonyk Klinika Pneumonologii, Alergologii Dziecięcej i Immunologii Klinicznej UM
Bardziej szczegółowoTolerancja transplantacyjna. Grażyna Korczak-Kowalska Zakład Immunologii Klinicznej Instytut Transplantologii, Warszawski Uniwersytet Medyczny
Tolerancja transplantacyjna Grażyna Korczak-Kowalska Zakład Immunologii Klinicznej Instytut Transplantologii, Warszawski Uniwersytet Medyczny Darrell J., et al., Transfusion. 2001, 41 : 419-430. Darrell
Bardziej szczegółowoOznaczenie polimorfizmu genetycznego cytochromu CYP2D6: wykrywanie liczby kopii genu
Ćwiczenie 4 Oznaczenie polimorfizmu genetycznego cytochromu CYP2D6: wykrywanie liczby kopii genu Wstęp CYP2D6 kodowany przez gen występujący w co najmniej w 78 allelicznych formach związanych ze zmniejszoną
Bardziej szczegółowoOcena skuteczności preparatów miejscowo znieczulających skórę w redukcji bólu w trakcie pobierania krwi u dzieci badanie z randomizacją
234 Ocena skuteczności preparatów miejscowo znieczulających skórę w redukcji bólu w trakcie pobierania krwi u dzieci badanie z randomizacją The effectiveness of local anesthetics in the reduction of needle
Bardziej szczegółowoUkład pracy. Wstęp i cel pracy. Wyniki. 1. Ekspresja i supresja Peroksyredoksyny III w stabilnie transfekowanej. linii komórkowej RINm5F
The influence of an altered Prx III-expression to RINm5F cells Marta Michalska Praca magisterska wykonana W Zakładzie Medycyny Molekularnej Katedry Biochemii Klinicznej Akademii Medycznej w Gdańsku Przy
Bardziej szczegółowoGdański Uniwersytet Medyczny Wydział Lekarski. Udział mikrorna w procesie starzenia się ludzkich limfocytów T. Joanna Frąckowiak
Gdański Uniwersytet Medyczny Wydział Lekarski Udział mikrorna w procesie starzenia się ludzkich limfocytów T Joanna Frąckowiak Rozprawa doktorska Praca wykonana w Katedrze i Zakładzie Fizjopatologii Gdańskiego
Bardziej szczegółowoCzęść praktyczna: Metody pozyskiwania komórek do badań laboratoryjnych cz. I
Ćwiczenie 1 Część teoretyczna: Budowa i funkcje układu odpornościowego 1. Układ odpornościowy - główne funkcje, typy odpowiedzi immunologicznej, etapy odpowiedzi odpornościowej. 2. Komórki układu immunologicznego.
Bardziej szczegółowoPRZEGLĄD AKTUALNYCH NAJWAŻNIEJSZYCH WYDARZEŃ W REUMATOLOGII
PRZEGLĄD AKTUALNYCH NAJWAŻNIEJSZYCH WYDARZEŃ W REUMATOLOGII Prof. dr hab. n med. Małgorzata Wisłowska Klinika Chorób Wewnętrznych i Reumatologii Centralnego Szpitala Klinicznego MSWiA Cytokiny Hematopoetyczne
Bardziej szczegółowoDane mikromacierzowe. Mateusz Markowicz Marta Stańska
Dane mikromacierzowe Mateusz Markowicz Marta Stańska Mikromacierz Mikromacierz DNA (ang. DNA microarray) to szklana lub plastikowa płytka (o maksymalnych wymiarach 2,5 cm x 7,5 cm) z naniesionymi w regularnych
Bardziej szczegółowoEndokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology
Vol. 10/2011 Nr 4(37) Endokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology Ocena komórek CD4 + CD161 + we krwi obwodowej dzieci z cukrzycą typu 1 oraz dzieci z otyłością centralną The Assessment of CD4
Bardziej szczegółowoOcena immunologiczna i genetyczna białaczkowych komórek macierzystych
Karolina Klara Radomska Ocena immunologiczna i genetyczna białaczkowych komórek macierzystych Streszczenie Wstęp Ostre białaczki szpikowe (Acute Myeloid Leukemia, AML) to grupa nowotworów mieloidalnych,
Bardziej szczegółowoPL 208956 B1. Sposób wykrywania i różnicowania chorób należących do grupy hemoglobinopatii, zwłaszcza talasemii
RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 208956 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 381219 (22) Data zgłoszenia: 05.12.2006 (51) Int.Cl. C12Q 1/68 (2006.01)
Bardziej szczegółowoImmunologia komórkowa
Immunologia komórkowa ocena immunofenotypu komórek Mariusz Kaczmarek Immunofenotyp Definicja I Charakterystyczny zbiór antygenów stanowiących elementy różnych struktur komórki, związany z jej różnicowaniem,
Bardziej szczegółowoPakiet 3 Zestawy do izolacji, detekcji i amplifikacji badań grypy i Borrelia met. real time PCR część 67
Pakiet 3 Zestawy do izolacji, detekcji i amplifikacji badań grypy i Borrelia met. real time część 7 L.p. Przedmiot zamówienia Wymagania jakościowe Producent i nr katalogowy dla produktu równowaŝnego Ilość
Bardziej szczegółowoOcena. rozprawy doktorskiej mgr Moniki Grygorowicz pt. Wpływ lenalidomidu na interakcje
Prof. dr hab. n. med. Jacek Roliński KATEDRA I ZAKŁAD IMMUNOLOGII KLINICZNEJ UNIWERSYTET MEDYCZNY W LUBLINIE ul. Chodźki 4a Tel. (0-81) 448 64 20 20-093 Lublin fax (0-81) 448 64 21 e-mail: jacek.rolinski@gmail.com
Bardziej szczegółowoMgr inż. Aneta Binkowska
Mgr inż. Aneta Binkowska Znaczenie wybranych wskaźników immunologicznych w ocenie ryzyka ciężkich powikłań septycznych u chorych po rozległych urazach. Streszczenie Wprowadzenie Według Światowej Organizacji
Bardziej szczegółowoOznaczenie polimorfizmu genetycznego cytochromu CYP2D6: wykrywanie liczby kopii genu
Ćwiczenie 4 Oznaczenie polimorfizmu genetycznego cytochromu CYP2D6: wykrywanie liczby kopii genu Wstęp CYP2D6 kodowany przez gen występujący w co najmniej w 78 allelicznych formach związanych ze zmniejszoną
Bardziej szczegółowoPL 217144 B1. Sposób amplifikacji DNA w łańcuchowej reakcji polimerazy za pomocą starterów specyficznych dla genu receptora 2-adrenergicznego
PL 217144 B1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 217144 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 391926 (22) Data zgłoszenia: 23.07.2010 (51) Int.Cl.
Bardziej szczegółowoOcena ekspresji genów proangiogennych w komórkach nowotworowych OVP-10 oraz transfektantach OVP-10/SHH i OVP-10/VEGF
Agnieszka Gładysz Ocena ekspresji genów proangiogennych w komórkach nowotworowych OVP-10 oraz transfektantach OVP-10/SHH i OVP-10/VEGF Katedra i Zakład Biochemii i Chemii Klinicznej Akademia Medyczna Prof.
Bardziej szczegółowoAmpli-LAMP Babesia canis
Novazym Products Zestaw do identyfikacji materiału genetycznego pierwotniaka Babesia canis canis techniką Loop-mediated Isothermal AMPlification (LAMP) Numery katalogowe produktu: AML-Bc-200 AML-Bc-400
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Anaplasma phagocytophilum w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych
Nr kat. PK24N Wersja zestawu: 1.2016 Zestaw do wykrywania phagocytophilum w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych dwie oddzielne reakcje PCR 2x50 reakcji PCR (50 µl), włączając w to kontrole Detekcja
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Chlamydia trachomatis w moczu lub w kulturach komórkowych
Nr kat. PK15 Wersja zestawu: 1.2016 Zestaw do wykrywania w moczu lub w kulturach komórkowych na 50 reakcji PCR (50µl), włączając w to kontrole Detekcja oparta jest na amplifikacji fragmentu genu crp (cysteine
Bardziej szczegółowoFolia Medica Lodziensia
Folia Medica Lodziensia tom 38 suplement 1 2011 Folia Medica Lodziensia, 2011, 38/S1:5-124 ZNACZENIE WYBRANYCH POPULACJI KOMÓREK IMMUNOLOGICZNYCH W LECZENIU ZAOSTRZEŃ STWARDNIENIA ROZSIANEGO Z ZASTOSOWANIEM
Bardziej szczegółowoEndokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology
Vol. 8/2009 Nr 4(29) Endokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology Ocena krążących komórek dendrytycznych i limfocytów T regulatorowych u dzieci ze świeżo rozpoznaną cukrzycą typu 1 Evaluation of
Bardziej szczegółowoSTRESZCZENIE. Wstęp. Cele pracy
STRESZCZENIE Wstęp Hormon wzrostu (GH) jest jednym z najważniejszych hormonów anabolicznych promujących proces wzrastania człowieka. GH działa lipolitycznie, wpływa na metabolizm węglowodanów, białek i
Bardziej szczegółowoUSG Power Doppler jest użytecznym narzędziem pozwalającym na uwidocznienie wzmożonego przepływu naczyniowego w synovium będącego skutkiem zapalenia.
STRESZCZENIE Serologiczne markery angiogenezy u dzieci chorych na młodzieńcze idiopatyczne zapalenie stawów - korelacja z obrazem klinicznym i ultrasonograficznym MIZS to najczęstsza przewlekła artropatia
Bardziej szczegółowoDynamika zachowania się limfocytów Th17 a markery kliniczne cukrzycy. The dynamics of Th17 cells and clinical markers of type 1 diabetes
Praca oryginalna Endokrynol. Ped. 2015.14.1.50.37-42. Original Paper Pediatr. Endocrinol. 2015.14.1.50.37-42. Dynamika zachowania się limfocytów Th17 a markery kliniczne cukrzycy typu 1 The dynamics of
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Babesia spp. i Theileria spp. w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych
Nr kat. PK25N Wersja zestawu: 1.2012 Zestaw do wykrywania spp. i Theileria spp. w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych dwie oddzielne reakcje PCR 2x50 reakcji PCR (50 µl), włączając w to kontrole Zestaw
Bardziej szczegółowoCzęść I Zakup zestawów diagnostycznych do GMO.
Załącznik 4a Część I Zakup zestawów diagnostycznych do GMO. NAZWA WIELKOŚC OPAKNIA RAZEM WARTOŚĆ 1 2 3 4 5 6 7 8=4*7 9 10 11 1. Zestaw do izolacji DNA - zestaw służący do izolacji DNA z surowego materiału
Bardziej szczegółowoCzęść I Zakup zestawów diagnostycznych do GMO.
Załącznik 4a Część I Zakup zestawów diagnostycznych do GMO. NAZWA WIELKOŚC OPAKOWANIA JEDNOSTK OWA VAT % RAZEM WARTOŚĆ 1 2 3 4 5 6 7 8=4*7 9 10 11 1. Zestaw do izolacji DNA - zestaw służący do izolacji
Bardziej szczegółowoBiologia medyczna, materiały dla studentów
Zasada reakcji PCR Reakcja PCR (replikacja in vitro) obejmuje denaturację DNA, przyłączanie starterów (annealing) i syntezę nowych nici DNA (elongacja). 1. Denaturacja: rozplecenie nici DNA, temp. 94 o
Bardziej szczegółowoPro-tumoral immune cell alterations in wild type and Shbdeficient mice in response to 4T1 breast carcinomas
www.oncotarget.com Oncotarget, Supplementary Materials Pro-tumoral immune cell alterations in wild type and Shbdeficient mice in response to 4T1 breast carcinomas SUPPLEMENTARY MATERIALS Supplementary
Bardziej szczegółowoPCR bez izolacji testujemy Direct PCR Kits od ThermoFisher Scientific
PCR bez izolacji testujemy Direct PCR Kits od ThermoFisher Scientific Specjalnie dla Was przetestowaliśmy w naszym laboratorium odczynniki firmy Thermo Scientific umożliwiające przeprowadzanie reakcji
Bardziej szczegółowoMetody badania ekspresji genów
Metody badania ekspresji genów dr Katarzyna Knapczyk-Stwora Warunki wstępne: Proszę zapoznać się z tematem Metody badania ekspresji genów zamieszczonym w skrypcie pod reakcją A. Lityńskiej i M. Lewandowskiego
Bardziej szczegółowoTaqNovaHS. Polimeraza DNA RP902A, RP905A, RP910A, RP925A RP902, RP905, RP910, RP925
TaqNovaHS RP902A, RP905A, RP910A, RP925A RP902, RP905, RP910, RP925 RP902A, RP905A, RP910A, RP925A RP902, RP905, RP910, RP925 TaqNovaHS Polimeraza TaqNovaHS jest mieszaniną termostabilnej polimerazy DNA
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa IZOLACJA DNA Z HODOWLI KOMÓRKOWEJ.
Bardziej szczegółowodr hab. prof. AWF Agnieszka Zembroń-Łacny DOPING GENOWY 3 CIEMNA STRONA TERAPII GENOWEJ
dr hab. prof. AWF Agnieszka Zembroń-Łacny DOPING GENOWY 3 CIEMNA STRONA TERAPII GENOWEJ KOMÓRKI SATELITARNE (ang. stem cells) potencjał regeneracyjny mięśni HIPERTROFIA MIĘŚNI University College London,
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 3. Amplifikacja genu ccr5 Homo sapiens wykrywanie delecji Δ32pz warunkującej oporność na wirusa HIV
Ćwiczenie 3. Amplifikacja genu ccr5 Homo sapiens wykrywanie delecji Δ32pz warunkującej oporność na wirusa HIV Cel ćwiczenia Określenie podatności na zakażenie wirusem HIV poprzez detekcję homo lub heterozygotyczności
Bardziej szczegółowoSTRESZCZENIE Wprowadzenie
STRESZCZENIE Wprowadzenie Cukrzyca to grupa chorób metabolicznych o różnorodnej etiologii, charakteryzujących się przewlekłą hiperglikemią, wynikającą z nieprawidłowego wydzielania i/lub działania insuliny.
Bardziej szczegółowoRT31-020, RT , MgCl 2. , random heksamerów X 6
RT31-020, RT31-100 RT31-020, RT31-100 Zestaw TRANSCRIPTME RNA zawiera wszystkie niezbędne składniki do przeprowadzenia syntezy pierwszej nici cdna na matrycy mrna lub całkowitego RNA. Uzyskany jednoniciowy
Bardziej szczegółowoMateriał i metody. Wyniki
Abstract in Polish Wprowadzenie Selen jest pierwiastkiem śladowym niezbędnym do prawidłowego funkcjonowania organizmu. Selen jest wbudowywany do białek w postaci selenocysteiny tworząc selenobiałka (selenoproteiny).
Bardziej szczegółowoWskaźniki włóknienia nerek
Wskaźniki włóknienia nerek u dzieci z przewlekłą chorobą nerek leczonych zachowawczo Kinga Musiał, Danuta Zwolińska Katedra i Klinika Nefrologii Pediatrycznej Uniwersytetu Medycznego im. Piastów Śląskich
Bardziej szczegółowoCHOROBY REUMATYCZNE A OBNIŻENIE GĘSTOŚCI MINERALNEJ KOŚCI
CHOROBY REUMATYCZNE A OBNIŻENIE GĘSTOŚCI MINERALNEJ KOŚCI Katarzyna Pawlak-Buś Katedra i Klinika Reumatologii i Rehabilitacji Uniwersytetu Medycznego w Poznaniu ECHA ASBMR 2018 WIELOCZYNNIKOWY CHARAKTER
Bardziej szczegółowoTolerancja immunologiczna
Tolerancja immunologiczna autotolerancja, tolerancja na alloantygeny i alergeny dr Katarzyna Bocian Zakład Immunologii kbocian@biol.uw.edu.pl Funkcje układu odpornościowego obrona bakterie alergie wirusy
Bardziej szczegółowoInżynieria genetyczna- 6 ECTS
Inżynieria genetyczna- 6 ECTS Część I Badanie ekspresji genów Kolokwium (14pkt) Część II Podstawy klonowania i różnicowania transformantów Klonowanie ekspresyjne Od genu do białka Kolokwium (26pkt) EGZAMIN
Bardziej szczegółowoPODSTAWY IMMUNOLOGII Komórki i cząsteczki biorące udział w odporności nabytej (cz.i): wprowadzenie (komórki, receptory, rozwój odporności nabytej)
PODSTAWY IMMUNOLOGII Komórki i cząsteczki biorące udział w odporności nabytej (cz.i): wprowadzenie (komórki, receptory, rozwój odporności nabytej) Nadzieja Drela ndrela@biol.uw.edu.pl Konspekt do wykładu
Bardziej szczegółowoDiagnostyka zakażeń EBV
Diagnostyka zakażeń EBV Jakie wyróżniamy główne konsekwencje kliniczne zakażenia EBV: 1) Mononukleoza zakaźna 2) Chłoniak Burkitta 3) Potransplantacyjny zespół limfoproliferacyjny Jakie są charakterystyczne
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa tel. 22 572 0735, 606448502
Bardziej szczegółowoStreszczenie pracy doktorskiej mgr Maciej Grzywnowicz
Temat pracy Charakterystyka ekspresji receptora programowanej śmierci 1 oraz jego ligandu w przewlekłej białaczce limfocytowej Cel pracy Jedną z cech procesu nowotworzenia jest wykształcenie przez komórki
Bardziej szczegółowoEndokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology
Vol. 10/2011 Nr 4(37) Endokrynologia Pediatryczna Pediatric Endocrinology Rola limfocytów Th17 w cukrzycy typu 1 The Role of Th17 Cells in Type 1 Diabetes Robert Piekarski, Leszek Szewczyk Klinika Endokrynologii
Bardziej szczegółowoFetuina i osteopontyna u pacjentów z zespołem metabolicznym
Fetuina i osteopontyna u pacjentów z zespołem metabolicznym Dr n med. Katarzyna Musialik Katedra Chorób Wewnętrznych, Zaburzeń Metabolicznych i Nadciśnienia Tętniczego Uniwersytet Medyczny w Poznaniu *W
Bardziej szczegółowoRola przeciwciał neutralizujących w terapiach SM (ciągle dyskutowana) Konrad Rejdak
Rola przeciwciał neutralizujących w terapiach SM (ciągle dyskutowana) Konrad Rejdak Katedra i Klinika Neurologii Uniwersytet Medyczny w Lublinie Immunogeniczność preparatów biologicznych Rossman, 2004
Bardziej szczegółowoOcena zależności stężeń interleukin 17, 22 i 23 a wybranymi parametrami klinicznymi i immunologicznymi w surowicy chorych na łuszczycę plackowatą
Agnieszka Nawrocka Ocena zależności stężeń interleukin 17, 22 i 23 a wybranymi parametrami klinicznymi i immunologicznymi w surowicy chorych na łuszczycę plackowatą Łuszczyca jest przewlekłą, zapalną chorobą
Bardziej szczegółowoTaqNova-RED. Polimeraza DNA RP20R, RP100R
TaqNova-RED Polimeraza DNA RP20R, RP100R RP20R, RP100R TaqNova-RED Polimeraza DNA Rekombinowana termostabilna polimeraza DNA Taq zawierająca czerwony barwnik, izolowana z Thermus aquaticus, o przybliżonej
Bardziej szczegółowoBiologia molekularna
Biologia molekularna 1. Metryczka Nazwa Wydziału Program kształcenia Wydział Farmaceutyczny z Oddziałem Medycyny Laboratoryjnej Analityka Medyczna, studia jednolite magisterskie, studia stacjonarne i niestacjonarne
Bardziej szczegółowoSTRESZCZENIE Słowa kluczowe: Wstęp Cel pracy
STRESZCZENIE Słowa kluczowe: Noworodek urodzony przedwcześnie, granulocyt obojętnochłonny, molekuły adhezji komórkowej CD11a, CD11b, CD11c, CD18, CD54, CD62L, wczesne zakażenie, posocznica. Wstęp W ostatnich
Bardziej szczegółowoGRADIENT TEMPERATUR TOUCH DOWN PCR. Standardowy PCR RAPD- PCR. RealTime- PCR. Nested- PCR. Digital- PCR.
Standardowy PCR RAPD- PCR Nested- PCR Multipleks- PCR Allelospecyficzny PCR Touchdown- PCR RealTime- PCR Digital- PCR In situ (slide)- PCR Metylacyjno specyficzny- PCR Assembly- PCR Inverse- PCR GRADIENT
Bardziej szczegółowoProwadzący: dr Lidia Boss znacznik fluorescencyjny (np. SYBR Green II)
Uniwersytet Gdański, Wydział Biologii Biologia i Biologia Medyczna II rok Katedra Biologii Molekularnej Przedmiot: Biologia Molekularna z Biotechnologią ============================================================================
Bardziej szczegółowoCzy jest możliwe skuteczne leczenie cukrzycy w grupie chorych otyłych ze znaczną insulinoopornością?
Jerzy Maksymilian Loba Klinika Chorób Wewnętrznych i Diabetologii Uniwersytet Medyczny w Łodzi Czy jest możliwe skuteczne leczenie cukrzycy w grupie chorych otyłych ze znaczną insulinoopornością? Definicja
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 3 Oznaczenie polimorfizmu genetycznego cytochromu CYP2D6 metodą PCR w czasie rzeczywistym (rtpcr) przy użyciu sond typu TaqMan
Ćwiczenie 3 Oznaczenie polimorfizmu genetycznego cytochromu CYP2D6 metodą PCR w czasie rzeczywistym (rtpcr) przy użyciu sond typu TaqMan Klasyczna metoda PCR jest metodą jakościową, nie ilościową co np.
Bardziej szczegółowomechanizmach latencji i onkogenezy BLV. Wykazano, że zakażenie BLV powoduje wzrost aktywności telomerazy i skracanie sekwencji telomerowych we
STRESZCZENIE Celem pracy była ocena sekrecji cytokin oraz aktywności telomerazy i długości telomerów w populacjach komórek dendrytycznych (DCs) generowanych z krwi i tkanek limfatycznych zwierząt zakażonych
Bardziej szczegółowoOpis przedmiotu zamówienia wraz z wymaganiami technicznymi i zestawieniem parametrów
Załącznik nr 1 do SIWZ Nazwa i adres Wykonawcy Opis przedmiotu zamówienia wraz z wymaganiami technicznymi i zestawieniem parametrów Przedmiot zamówienia; automatyczny system do diagnostyki molekularnej:
Bardziej szczegółowoWprowadzenie do cytometrii przepływowej: metody znakowania komórek
Fakultet: Cytometria zastosowanie w badaniach biologicznych Wprowadzenie do cytometrii przepływowej: metody znakowania komórek Nadzieja Drela Zakład Immunologii WB UW ndrela@biol.uw.edu.pl Przygotowanie
Bardziej szczegółowoS YLABUS MODUŁU (PRZEDMIOTU) I nformacje ogólne. Biologia medyczna. Nie dotyczy
Załącznik Nr 3 do Uchwały enatu PUM 14/2012 YLABU MODUŁU (PRZEDMIOTU) Kod modułu Rodzaj modułu Wydział PUM Kierunek studiów pecjalność Poziom studiów Forma studiów Rok studiów Nazwa modułu I nformacje
Bardziej szczegółowoParametr Wymagany parametr Oferowany parametr 1. 2. 3. a) z wbudowaną pompą membranową PTEE, b) kondensorem par, System
Załącznik nr 1A do SIWZ. PARAMETRY TECHNICZNE PRZEDMIOTU ZAMÓWIENIA Zadanie nr 1. TERMOSTAT CYRKULACYJNY Termostat cyrkulacyjny Z grzaniem i chłodzeniem Zakres temperatury roboczej 25 o C do + 200 o C
Bardziej szczegółowoApplied Biosystems 7500 Fast Real Time PCR System, czyli Mercedes wśród termocyklerów do analizy PCR w czasie rzeczywistym
Applied Biosystems 7500 Fast Real Time PCR System, czyli Mercedes wśród termocyklerów do analizy PCR w czasie rzeczywistym Rynek aparatury laboratoryjnej pęka w szwach od ilości różnych aparatów przeznaczonych
Bardziej szczegółowoUNIWERSYTET MEDYCZNY W LUBLINIE KATEDRA I KLINIKA REUMATOLOGII I UKŁADOWYCH CHORÓB TKANKI ŁĄCZNEJ PRACA DOKTORSKA.
UNIWERSYTET MEDYCZNY W LUBLINIE KATEDRA I KLINIKA REUMATOLOGII I UKŁADOWYCH CHORÓB TKANKI ŁĄCZNEJ PRACA DOKTORSKA Małgorzata Biskup Czynniki ryzyka sercowo-naczyniowego u chorych na reumatoidalne zapalenie
Bardziej szczegółowoKlonowanie molekularne Kurs doskonalący. Zakład Geriatrii i Gerontologii CMKP
Klonowanie molekularne Kurs doskonalący Zakład Geriatrii i Gerontologii CMKP Etapy klonowania molekularnego 1. Wybór wektora i organizmu gospodarza Po co klonuję (do namnożenia DNA [czy ma być metylowane
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 2. Identyfikacja płci z wykorzystaniem genu amelogeniny (AMGXY)
Ćwiczenie 2. Identyfikacja płci z wykorzystaniem genu amelogeniny (AMGXY) Cel ćwiczenia Amplifikacja fragmentu genu amelogeniny, znajdującego się na chromosomach X i Y, jako celu molekularnego przydatnego
Bardziej szczegółowoSylabus Biologia molekularna
Sylabus Biologia molekularna 1. Metryczka Nazwa Wydziału Wydział Farmaceutyczny z Oddziałem Medycyny Laboratoryjnej Program kształcenia Farmacja, jednolite studia magisterskie, forma studiów: stacjonarne
Bardziej szczegółowoCHOROBY AUTOIMMUNIZACYJNE
CHOROBY AUTOIMMUNIZACYJNE Autoimmunizacja Odpowiedź immunologiczna skierowana przeciwko własnym antygenom Choroba autoimmunizacyjna Zaburzenie funkcji fizjologicznych organizmu jako konsekwencja autoimmunizacji
Bardziej szczegółowoWalidacja metod wykrywania, identyfikacji i ilościowego oznaczania GMO. Magdalena Żurawska-Zajfert Laboratorium Kontroli GMO IHAR-PIB
Walidacja metod wykrywania, identyfikacji i ilościowego oznaczania GMO Magdalena Żurawska-Zajfert Laboratorium Kontroli GMO IHAR-PIB Walidacja Walidacja jest potwierdzeniem przez zbadanie i przedstawienie
Bardziej szczegółowoPrezentuje: Magdalena Jasińska
Prezentuje: Magdalena Jasińska W którym momencie w rozwoju embrionalnym myszy rozpoczyna się endogenna transkrypcja? Hipoteza I: Endogenna transkrypcja rozpoczyna się w embrionach będących w stadium 2-komórkowym
Bardziej szczegółowoSkale i wskaźniki jakości leczenia w OIT
Skale i wskaźniki jakości leczenia w OIT Katarzyna Rutkowska Szpital Kliniczny Nr 1 w Zabrzu Wyniki leczenia (clinical outcome) śmiertelność (survival) sprawność funkcjonowania (functional outcome) jakość
Bardziej szczegółowoAmpli-LAMP Goose Parvovirus
Novazym Products Zestaw do identyfikacji materiału genetycznego parwowirusa GPV u gęsi techniką Loop-mediated Isothermal AMPlification (LAMP) Numery katalogowe produktu: AML-GPV-200 AML-GPV-400 Wydanie
Bardziej szczegółowoVIII. STRESZCZENIE W JĘZYKU POLSKIM
VIII. STRESZCZENIE W JĘZYKU POLSKIM WSTĘP: Choroba Gravesa jest przewlekłą, narządowo swoistą postacią autoimmunologicznej choroby tarczycy (AITD), o nie do końca znanej etiologii, przebiegającą z okresami
Bardziej szczegółowoKOŁO NAUKOWE IMMUNOLOGII. Mikrochimeryzm badania w hodowlach leukocytów in vitro
KOŁO NAUKOWE IMMUNOLOGII Mikrochimeryzm badania w hodowlach leukocytów in vitro Koło Naukowe Immunolgii kolo_immunologii@biol.uw.edu.pl kolo_immunologii.kn@uw.edu.pl CEL I PRZEDMIOT PROJEKTU Celem doświadczenia
Bardziej szczegółowoSTRESZCZENIE PRACY DOKTORSKIEJ
mgr Bartłomiej Rospond POSZUKIWANIE NEUROBIOLOGICZNEGO MECHANIZMU UZALEŻNIENIA OD POKARMU - WPŁYW CUKRÓW I TŁUSZCZÓW NA EKSPRESJĘ RECEPTORÓW DOPAMINOWYCH D 2 W GRZBIETOWYM PRĄŻKOWIU U SZCZURÓW STRESZCZENIE
Bardziej szczegółowoGlimmer umożliwia znalezienie regionów kodujących
Narzędzia ułatwiające identyfikację właściwych genów GLIMMER TaxPlot Narzędzia ułatwiające amplifikację tych genów techniki PCR Primer3, Primer3plus PrimerBLAST Reverse Complement Narzędzia ułatwiające
Bardziej szczegółowoMIKROMACIERZE. dr inż. Aleksandra Świercz dr Agnieszka Żmieńko
MIKROMACIERZE dr inż. Aleksandra Świercz dr Agnieszka Żmieńko Informacje ogólne Wykłady będą częściowo dostępne w formie elektronicznej http://cs.put.poznan.pl/aswiercz aswiercz@cs.put.poznan.pl Godziny
Bardziej szczegółowow kale oraz innych laboratoryjnych markerów stanu zapalnego (białka C-reaktywnego,
1. Streszczenie Wstęp: Od połowy XX-go wieku obserwuje się wzrost zachorowalności na nieswoiste choroby zapalne jelit (NChZJ), w tym chorobę Leśniowskiego-Crohna (ChLC), zarówno wśród dorosłych, jak i
Bardziej szczegółowoTerapeutyczne Programy Zdrowotne 2008 Leczenie stwardnienia rozsianego
załącznik nr 16 do zarządzenia Nr 36/2008/DGL Prezesa NFZ z dnia 19 czerwca 2008 r. Nazwa programu: LECZENIE STWARDNIENIA ROZSIANEGO ICD-10 G.35 - stwardnienie rozsiane Dziedzina medycyny: neurologia I.
Bardziej szczegółowoKatarzyna Durda STRESZCZENIE STĘŻENIE KWASU FOLIOWEGO ORAZ ZMIANY W OBRĘBIE GENÓW REGULUJĄCYCH JEGO METABOLIZM JAKO CZYNNIK RYZYKA RAKA W POLSCE
Pomorski Uniwersytet Medyczny Katarzyna Durda STRESZCZENIE STĘŻENIE KWASU FOLIOWEGO ORAZ ZMIANY W OBRĘBIE GENÓW REGULUJĄCYCH JEGO METABOLIZM JAKO CZYNNIK RYZYKA RAKA W POLSCE Promotor: dr hab. prof. nadzw.
Bardziej szczegółowoSylabus Biologia molekularna
Sylabus Biologia molekularna 1. Metryczka Nazwa Wydziału Program kształcenia Wydział Farmaceutyczny z Oddziałem Medycyny Laboratoryjnej Analityka Medyczna, studia jednolite magisterskie, studia stacjonarne
Bardziej szczegółowoLeczenie immunosupresyjne po przeszczepieniu narządu unaczynionego
Leczenie immunosupresyjne po przeszczepieniu narządu unaczynionego Cel leczenia Brak odrzucania czynnego przeszczepionego narządu Klasyfikacja odrzucania przeszczepionego narządu Leki immunosupresyjne
Bardziej szczegółowoIlość TAK TAK TAK TAK TAK TAK
Postępowanie WB.2420.6.2013.NG ZAŁĄCZNIK NR 5 L.p. Nazwa asortymentu parametry techniczne Ilość Nazwa wyrobu, nazwa producenta, określenie marki, modelu, znaku towarowego Cena jednostkowa netto (zł) Wartość
Bardziej szczegółowoWyklady IIIL 2016/ :00-16:30 środa Wprowadzenie do immunologii Prof. dr hab. med. ML Kowalski
III rok Wydział Lekarski Immunologia ogólna z podstawami immunologii klinicznej i alergologii rok akademicki 2016/17 PROGRAM WYKŁADÓW Nr data godzina dzień tygodnia Wyklady IIIL 2016/2017 tytuł Wykladowca
Bardziej szczegółowoLaboratorium Wirusologiczne
Laboratorium Wirusologiczne Krzysztof Pyrd Pracownia wirusologiczna: Powstanie i wyposażenie całkowicie nowego laboratorium w ramach Zakładu Mikrobiologii WBBiB Profil: laboratorium molekularno-komórkowe
Bardziej szczegółowoLimfocyty regulatorowe w tolerancji immunologicznej
diagnostyka laboratoryjna Journal of Laboratory Diagnostics 2012 Volume 48 Number 1 71-76 Praca poglądowa Review Article Limfocyty regulatorowe w tolerancji immunologicznej Regulatory lymphocytes in immune
Bardziej szczegółowoNowoczesne systemy ekspresji genów
Nowoczesne systemy ekspresji genów Ekspresja genów w organizmach żywych GEN - pojęcia podstawowe promotor sekwencja kodująca RNA terminator gen Gen - odcinek DNA zawierający zakodowaną informację wystarczającą
Bardziej szczegółowoIngrid Wenzel. Rozprawa doktorska. Promotor: dr hab. med. Dorota Dworakowska
Ingrid Wenzel KLINICZNE ZNACZENIE EKSPRESJI RECEPTORA ESTROGENOWEGO, PROGESTERONOWEGO I ANDROGENOWEGO U CHORYCH PODDANYCH LECZNICZEMU ZABIEGOWI OPERACYJNEMU Z POWODU NIEDROBNOKOMÓRKOWEGO RAKA PŁUC (NDKRP)
Bardziej szczegółowoPro apoptotyczne właściwości ekstraktów z kory Cochlospermum angolense Welw.
Pro apoptotyczne właściwości ekstraktów z kory Cochlospermum angolense Welw. Paulina Wdowiak 1, Tomasz Baj 2, Magdalena Wasiak 1, Piotr Pożarowski 1, Jacek Roliński 1, Kazimierz Głowniak 2 1 Katedra i
Bardziej szczegółowoPublic gene expression data repositoris
Public gene expression data repositoris GEO [Jan 2011]: 520 k samples 21 k experiments Homo, mus, rattus Bos, sus Arabidopsis, oryza, Salmonella, Mycobacterium et al. 17.01.11 14 17.01.11 15 17.01.11 16
Bardziej szczegółowoProf nadzw. dr hab. n. med. Krystian Jażdżewski Kierownik Pracowni Medycyny Genomowej Warszawskiego Uniwersytetu Medycznego
Prof nadzw. dr hab. n. med. Krystian Jażdżewski Kierownik Pracowni Medycyny Genomowej Warszawskiego Uniwersytetu Medycznego Warszawa, dnia 02 czerwca 2014 Ocena całokształtu dorobku naukowego i rozprawy
Bardziej szczegółowoLp. tydzień wykłady seminaria ćwiczenia
Lp. tydzień wykłady seminaria ćwiczenia 21.02. Wprowadzeniedozag adnieńzwiązanychzi mmunologią, krótka historiaimmunologii, rozwójukładuimmun ologicznego. 19.02. 20.02. Wprowadzenie do zagadnień z immunologii.
Bardziej szczegółowoMaria Szczotka ROZPRAWA HABILITACYJNA
Maria Szczotka ZASTOSOWANIE CYTOMETRII PRZEPŁYWOWEJ DO OCENY EKSPRESJI BIAŁKA gp51 WIRUSA ENZOOTYCZNEJ BIAŁACZKI BYDŁA (BLV) W LIMFOCYTACH ZAKAŻONYCH ZWIERZĄT ROZPRAWA HABILITACYJNA RECENZENCI: prof. dr
Bardziej szczegółowo