BD BBL CHROMagar Staph aureus

Transkrypt

1 INSTRUKCJA UŻYTKOWANIA GOTOWYCH DO UŻYCIA PŁYTEK HODOWLANYCH Z PODŁOŻEM PA Wer.: Sep 2011 BD BBL CHROMagar Staph aureus PRZEZNACZENIE BBL CHROMagar Staph aureus jest podłożem wybiórczym do izolacji, analizy ilościowej oraz identyfikacji Staphylococcus aureus z próbek klinicznych oraz żywności. Nie ma konieczności wykonywania badania potwierdzającego obecność szczepów typowych w próbkach klinicznych. BBL CHROMagar Staph aureus (gotowe podłoże w formie płytek) zostało zatwierdzone przez instytut AOAC Research Institute w ramach programu Performance Tested Methods SM do analizy jaj w skorupkach, łososia wędzonego oraz gotowanej wołowiny metodami AOAC i ISO 1,2. Wymagane są badania potwierdzające obecność liliowo zabarwionych kolonii uzyskanych z matryc wyżej wymienionej żywności. ZASADY I OBJAŚNIENIE PROCEDURY Metoda mikrobiologiczna. S. aureus jest patogenem, na którego temat dostępne jest obszerne piśmiennictwo. Odpowiada za wiele zakażeń, od powierzchownych do ogólnoukładowych 3,4. Ze względu na częstość występowania tego drobnoustroju i jego znaczenie kliniczne, jego wykrywanie ma bardzo duże znaczenie. Skażenie żywności gronkowcem S. aureus jest jednym z najczęściej występujących powodów chorób pochodzenia pokarmowego na całym świecie. Wykrycie oraz analiza ilościowa tego zakażenia pomaga w uzyskaniu informacji dotyczących potencjalnego zagrożenia pokarmowego, a także jest wskaźnikiem nieodpowiedniej higieny 5. Zaleca się również stosowanie tej bakterii jako wskaźnika oceny jakości wody 6. BBL CHROMagar Staph aureus przeznaczony jest do izolacji, analizy ilościowej oraz identyfikacji S. aureus na podstawie tworzenia liliowo zabarwionych kolonii. Wprowadzenie do podłoża substratów chromogennych umożliwia zróżnicowanie S. aureus od innych drobnoustrojów. Zaletą BBL CHROMagar Staph aureus w stosunku do innych tradycyjnych podłoży, np.: Baird- Parker Agar, jest zdolność identyfikacji S. aureus w ciągu 24 h, a nie 48 h. Podłoże BBL CHROMagar Staph aureus zostało pierwotnie opracowane przez A. Rambacha z mieszczącej się w Paryżu firmy CHROMagar. Firma BD, na mocy umowy licencyjnej, zoptymalizowała tę formułę, korzystając z własnych zastrzeżonych rozwiązań używanych do wytwarzania gotowego podłoża na płytkach BBL CHROMagar Staph aureus. Składnikami odżywczymi są specjalnie wyselekcjonowane peptony Difco TM. Dodatnie leków wybiórczych hamuje wzrost bakterii Gram-ujemnych, drożdży oraz niektórych gram-dodatnich ziarenkowców. Mieszanka chromogenów składa się ze sztucznych substratów (chromogenów), które w wyniku rozkładu przez określone enzymy tworzą nierozpuszczalne, barwne związki. Ułatwia to wykrywanie i różnicowanie szczepów S. aureus od innych drobnoustrojów. S. aureus wykorzystuje jeden z substratów chromogennych, tworząc kolonie zabarwione na liliowo. *PRZEDSTAWIONE PRZEZ PRODUCENTA PRÓBKI TEGO ZESTAWU TESTOWEGO ZOSTAŁY NIEZALEŻNIE PRZEBADANE PRZEZ INSTYTUT AOAC I W WYNIKU TYCH BADAŃ STWIERDZONO, ŻE DZIAŁAJĄ ONE ZGODNIE ZE SPECYFIKACJĄ PODANĄ PRZEZ PRODUCENTA W ULOTCE OPISOWEJ ZESTAWU TESTOWEGO. PRODUCENT ZAŚWIADCZA, ŻE TEN ZESTAW JEST POD KAŻDYM WZGLĘDEM ZGODNY ZE SPECYFIKACJĄ BADANĄ PRZEZ INSTYTUT AOAC OPISANĄ W ŚWIADECTWIE NUMER Z BADANIA METODĄ Performance Tested Methods sm. PA Strona 1 z 7

2 Wzrost kolonii S. aureus o barwie liliowej w ciągu 24 h na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus uważa się jest za wynik pozytywny. Bakterie inne niż S. aureus mogą wykorzystywać inne substraty chromogenne, tworząc kolonie zabarwione na kolor niebieski, niebieskozielony, lub też mogą nie wykorzystywać żadnych substratów chromogennych wytworzone kolonie mają wtedy kolor naturalny. ODCZYNNIKI BBL CHROMagar Staph aureus Przybliżony skład* w przeliczeniu na 1 litr wody oczyszczonej Chromopepton 40,0 g Chlorek sodu 25,0 g Mieszanka chromogenów 0,5 g Środki hamujące wzrost 0,07 g Agar 14,0 g ph: 6.8 +/- 0.2 *Skorygowany i/lub uzupełniony zgodnie z wymaganiami kryteriów działania. ŚRODKI OSTROŻNOŚCI. Wyłącznie do zastosowań profesjonalnych. W razie zaobserwowania nadmiernego zawilgocenia należy wysuszyć dolną powierzchnię płytki na powietrzu, aby nie dopuścić do powstawania warstwy wody między górną a dolną częścią płytki w trakcie inkubacji. Chronić przed światłem podczas suszenia. Patrz WARUNKI I OKRES PRZECHOWYWANIA. Nie należy używać płytek, jeżeli są na nich widoczne oznaki skażenia mikrobiologicznego, odbarwienia, wyschnięcia, pęknięcia lub inne zjawiska wskazujące na pogorszenie jakości. W próbkach pochodzenia klinicznego mogą być obecne drobnoustroje chorobotwórcze, w tym wirusy zapalenia wątroby i wirus ludzkiego niedoboru odporności (HIV). Podczas pracy z materiałami skażonymi krwią i innymi płynami ustrojowym należy przestrzegać Standardowych środków ostrożności 7-10 oraz wytycznych obowiązujących w danej placówce. Podczas wykonywania wszystkich procedur należy przestrzegać aseptycznej techniki pracy i obowiązujących środków ostrożności dotyczących zagrożenia mikrobiologicznego. Używane płytki z preparatami, pojemniki na próbki oraz inne materiały skażone należy przed wyrzuceniem poddać sterylizacji w autoklawie. Procedury aseptycznej techniki pracy z produktem, zagrożenia biologiczne oraz usuwanie zużytego produktu opisano w dokumencie OGÓLNE INSTRUKCJE DOTYCZĄCE STOSOWANIA. PRZECHOWYWANIE I DOPUSZCZALNY OKRES PRZECHOWYWANIA Po otrzymaniu, płytki należy przechowywać w ciemnym miejscu w temperaturze od 2 do 8 C, w ich oryginalnym opakowaniu izolującym do chwili użycia. Unikać zamrażania i przegrzewania. Posiewu na płytki można dokonywać aż do daty ważności (patrz etykieta na opakowaniu) i inkubować w zalecanych czasach inkubacji. Płytek z otwartych stosów zawierających po 10 płytek można używać przez okres jednego tygodnia, przechowując w czystym miejscu w temperaturze od 2 do 8 C. KONTROLA JAKOŚCI PRZEZ UŻYTKOWNIKA Sprawdzić zachowanie hodowli, wykonując na reprezentatywnych próbkach podłoża posiew czystych kultur stabilnych szczepów kontrolnych, dających znane, prawidłowe reakcje (szczegółowe informacje zawiera dokument OGÓLNE INSTRUKCJE DOTYCZĄCE STOSOWANIA). Zaleca się korzystanie ze szczepów testowych wymienionych w poniższej Tabeli. Inkubować w atmosferze tlenowej, przez okres h, w temperaturze 35 2 C, w zacienionym miejscu. PA Strona 2 z 7

3 Szczepy bakteryjne Staphylococcus aureus ATCC Staphylococcus saprophyticus ATCC Proteus mirabilis ATCC Bez posiewu Wzrost Wzrost; kolonie liliowe Wzrost; kolonie zielone lub niebieskozielone Zahamowanie (częściowe lub całkowite) Bezbarwne lub jasnobursztynowe, przejrzyste lub delikatnie mętne. Należy postępować zgodnie z obowiązującymi wymogami kontroli jakości, wynikającymi z przepisów miejscowych, krajowych i (lub) federalnych, wymogami akredytacji i rutynowymi procedurami kontroli jakości w danym laboratorium. Zaleca się, aby użytkownicy kliniczni stosowali się do odpowiednich zaleceń amerykańskiego Instytutu Standardów Klinicznych i Laboratoryjnych (ang. Clinical and Laboratory Standards Institute, dawniej NCCLS) i dotyczących sposobów kontroli jakości. PROCEDURA Dostarczane materiały BBL CHROMagar Staph aureus, dostarczane na 90 mm płytkach Stacker Materiały wymagane, ale niedostarczane: Pomocnicze pożywki hodowlane, odczynniki, szczepy do kontroli jakości i pozostałe wyposażenie laboratoryjne zgodnie z wymaganiami. Typy próbek Szczegółowe informacje na temat pobierania próbek lub standardy postępowania z próbką/probówką można znaleźć w stosownej literaturze. Podłoże to służy do izolacji Staphylococcus aureus ze wszystkich rodzajów materiału klinicznego. Zobacz także CHARAKTERYSTYKA WYNIKÓW I OGRANICZENIA DOTYCZĄCE PROCEDURY. W badaniach żywności należy stosować odpowiednie standardowe metody przygotowywania próbek i postępowania z nimi, właściwe dla typu próbki i położenia geograficznego. Procedura badania Stosować techniki aseptyczne. Powierzchnia podłoża agarowego powinna być gładka i wilgotna, lecz bez nadmiernej wilgoci. W przypadku próbek klinicznych po dostarczeniu próbki do laboratorium należy jak najszybciej wykonać posiew, rozprowadzając próbkę na płytce z podłożem BBL CHROMagar Staph aureus. Jeżeli próbka jest hodowana bezpośrednio z wymazówki, należy delikatnie przetoczyć wymazówkę po niewielkiej powierzchni na krawędzi płytki, a następnie rozprowadzić materiał ezą z tego obszaru. Płytki należy inkubować w atmosferze tlenowej, w temperaturze 35 ± 2 C przez h, w położeniu odwróconym (stroną z agarem do góry). W przypadku próbek żywności należy stosować odpowiednie metody standardowe opisane w piśmiennictwie. Inokulować homogenizowane próbki pokarmu na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus metodą rozprowadzania na płytce. Płytki należy inkubować w atmosferze tlenowej, w temperaturze 35 ± -37 C przez h, w położeniu odwróconym (stroną z agarem do góry). Wyniki Po właściwej inkubacji płytki odczytać, porównując z białym tłem. S. aureus tworzy na pożywce BBL CHROMagar Staph aureus kolonie o zabarwieniu od liliowego do pomarańczoworóżowego. Większość drobnoustrojów Gram-dodatnich, jeżeli nie ulegnie zahamowaniu, wytworzy kolonie niebieskie, niebieskozielone, lub koloru naturalnego (bezbarwne, białe lub kremowe). Drobnoustroje Gram-ujemne i drożdżaki ulegają częściowemu lub całkowitemu zahamowaniu. CHARAKTERYSTYKA WYNIKÓW I OGRANICZENIA DOTYCZĄCE PROCEDURY Wyniki badań skuteczności 12 Badanie próbek klinicznych: 1. W badaniu terenowym, przeprowadzonym w dużym szpitalu miejskim w USA oceniano 201 próbek wymazów z gardła i plwociny od chorych z mukowiscydozą i 459 próbek wymazów z nosa od innych pacjentów szpitala na pożywce BBL CHROMagar Staph aureus. BBL CHROMagar Staph aureus porównywano z agarem z krwią lub z agarem z mannitolem i solami, z potwierdzeniem izolatów za pomocą testu szkiełkowego z PA Strona 3 z 7

4 koagulazą. S. aureus odzyskano ze 190 połączonych próbek. Na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus wykryto 9 dodatkowych hodowli S. aureus, których nie wykryto ma pożywkach konwencjonalnych. Po 24-godzinnej inkubacji w pożywce BBL CHROMagar Staph aureus zaobserwowano również cztery potencjalnie fałszywie ujemne hodowle: 2 hodowle maczugowców i 2 gronkowców koagulazoujemnych. Całkowita czułość BBL CHROMagar Staph aureus wyniosła zatem 99,5%, a swoistość 99,2% W badaniu europejskim sto sześćdziesiąt pięć (165) próbek pochodzących z rutynowych badań laboratoryjnych, składających się ze 100 próbek z S. aureus potwierdzonym za pomocą standardowych metod (=potwierdzone próbki pozytywne) oraz 65 potwierdzonych negatywnych próbek zostało nałożonych na podłoża BBL CHROMagar Staph aureus, Mannitol Salt Agar oraz Columbia Agar z dodatkiem 5% krwi owczej. W Tabeli 1 przedstawiono typy próbek. Płytki inkubowano przez 20 do 24 godzin w temperaturze od 35 do 37 C i odczytano wyniki dla kolonii z podejrzeniem obecności S. aureus. Dla wszystkich podejrzanych kolonii na wszystkich trzech podłożach przeprowadzono testy wytwarzania koagulazy. Ponadto określono wielkość wzrostu S. aureus (ocena półilościowa). Tabela 1: Typy próbek Typy próbek Potwierdzone pozytywne próbki z S. aureus Ropnie 14 6 Płyn puchlinowy 1 0 Kość 1 0 Kaletka 1 0 Cewnik 4 0 Dren 1 0 Przetoka 0 1 Materiał operacyjny Różne waciki Ropowica 1 0 Wydzielina tchawicza 1 0 Rany Ogółem Potwierdzone negatywne próbki z S. aureus Wyniki: Wśród 165 próbek wzrost S. aureus został stwierdzony w przypadku 100 próbek na każdym podłożu, co zostało potwierdzone testem wytwarzania koagulazy w przypadku wszystkich podłoży. Na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus zaobserwowano wzrost S. aureus w 100 próbkach; na podłożu Mannitol Salt Agar w 91 próbkach stwierdzono wzrost S. aureus, a w przypadku podłoża Columbia Agar i testu na wytwarzanie koagulazy 98 próbek było pozytywnych w kierunku S. aureus. Wystąpił jeden wynik fałszywie pozytywny na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus, stwierdzono, że jest to Streptococcus agalactiae. Przy ponownym zaszczepieniu podłoża BBL CHROMagar Staph aureus kolonie mają kolor fioletowy, a nie różowy do liliowego. Wśród wszystkich potwierdzonych próbek ujemnych zaobserwowano tylko 5 hodowli posiadających kolonie podobne do S. aureus pod względem koloru (=fioletowy lub liliowy). Jednakże można je było łatwo odróżnić od koloni S. aureus (=różowy do liliowego), dając wyniki badań osobie, która nie zna dobrze kolorów kolonii różnych gatunków rosnących na podłożu (przed rozpoczęciem badania przedstawiono jej jedynie zestawienie kolorów oraz organizmów rosnących na podłożu). Czułości podłoży BBL CHROMagar Staph aureus (w oparciu o kolor kolonii od różowego do fioletoworóżowego), Mannitol Salt Agar (w oparciu o kolonie otoczone żółtym kolorem podłoża) oraz Columbia Agar (wzrost typowych kolonii S. aureus razem z testem wytwarzania koagulazy) wyniosły odpowiednio 100%, 91% oraz 98%. Swoistość podłoża BBL CHROMagar Staph aureus wyniosła 98,5%. PA Strona 4 z 7

5 W przypadku zastosowania podłoża BBL CHROMagar Staph aureus intensywność wzrostu była znacząco częściej wyższa, niż w przypadku podłoża MSA (p= 0,05); zob. Tabela 2. Podłoże BBL CHROMagar Staph aureus może być stosowane dla wielu różnych próbek. Tabela 2: Intensywność wzrostu izolatów S. aureus na podłożu CSA* w porównaniu z MSA* Intensywność wzrostu CSA = Col CSA> Col Col>CSA CSA=MSA CSA>MSA MSA>CSA Liczba próbek ** 8 * CSA, BBL CHROMagar Staph aureus; MSA, Mannitol Salt Agar; Col, Columbia Agar z dodatkiem 5% krwi owczej ** różnica istotna statystycznie (p= 0,05) Badanie żywności BBL CHROMagar Staph aureus zostało zatwierdzone przez AOAC-Research Institute w ramach programu Performance Tested Methods. Podłoże oceniano zewnętrzną metoda referencyjną dla laboratorium, a także wewnętrznie w firmie BD w celu stwierdzenia obecności i analizy ilościowej S. aureus w gotowanej wołowinie, łososiu wędzonym oraz jajach w skorupkach. Stwierdzenie obecności oraz analizę jakościową S. aureus na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus porównywano z wynikami uzyskanymi na płytkach referencyjnych AOAC i ISO, Baird-Parker Agar, stosując zalecane rozcieńczenia dla małego, pośredniego oraz wysokiego stężenia inokulum S. aureus. Po 24 wykonywano inkubację, analizę ilościową podłoża BBL CHROMagar Staph aureus, a po 48 h podłoża Baird-Parker Agar. Na podstawie analizy statystycznej nie stwierdzono znamiennie istotnej różnicy pomiędzy metodami referencyjnymi oraz metodą BBL CHROMagar Staph aureus dla każdego rodzaju pokarmu oraz poziomu skażenia, z wyjątkiem próbki niskiego stężenia w łososiu wędzonym. Niskie stężenie w łososiu wędzonym określane na podstawie metody ISO cechowało się istotną statystycznie różnicą w badaniu wewnętrznym; tj. po 24 h metoda BBL CHROMagar Staph aureus wykrywała więcej kolonii (log 10 = 2,04) niż referencyjna metoda po 48 h (log 10 = 1,64). Precyzyjne estymatory powtarzalności metody BBL CHROMagar Staph aureus były zadowalające. Współczynnik korelacji zawierał się pomiędzy 92,6% a 99,4%, co wskazywało na dobrą korelację dla wszystkich poziomów skażenia we wszystkich badanych pokarmach. Dane przedstawiono sumarycznie w Tabeli 1 i 2. Stosując metodę BBL CHROMagar Staph aureus, nie uzyskano kolonii fałszywie dodatnich na matrycach pokarmowych. Wszystkie liliowe kolonie, bez wyjątku, potwierdzono jako kolonie S. aureus. Ponadto oceniono 30 szczepów S. aureus, łącznie ze szczepami wytwarzającymi enterotoksyny oraz 37 szczepów innych niż S. aureus, uzyskując czułość i swoistość na poziomie 100% metodą BBL CHROMagar Staph aureus 11. Tabela 1. Podsumowanie testów zewnętrznych AOAC i ISO gotowanej wołowiny oraz jaj w skorupkach 1-3 AOAC Stężenie inokulum Test-t dla prób zależnych lub jednokierunkowa ANOVA a Powtarzalność (odchylenie standardowe) b Niskie NI 0,398 Gotowana Pośrednie NI 0,04 wołowina Wysokie NI 0,062 Niskie NI 0,302 Jaja w Pośrednie NI 0,089 skorupkach Wysokie NI 0,143 Kwadrat współczynnika korelacji liniowej 96,0% 95,5% PA Strona 5 z 7

6 ISO Stężenie inokulum Test-t dla prób zależnych lub jednokierunkowa ANOVA a Powtarzalność (odchylenie standardowe) b Niskie NI 0,315 Gotowana Pośrednie NI 0,045 wołowina Wysokie NI 0,117 Niskie NI 0,341 Jaja w Pośrednie NI 0,223 skorupkach Wysokie NI 0,135 Przypisy - zob. Tabela 2 Kwadrat współczynnika korelacji liniowej c 94,6% 92,6% Tabela 2. Podsumowanie testów zewnętrznych AOAC i ISO i wewnętrznych wędzonego łososia Stężenie inokulu m Test-t dla prób zależnych lub jednokierunkowa ANOVA a Powtarzalność (odchylenie standardowe) b Kwadrat współczynnika korelacji liniowej c Niskie NI NI 0,132 0,271 Łosoś wędzony - AOAC Łosoś wędzony - ISO Pośredni NI NI 0,055 0,095 e Wysokie NI NI 0,064 0,161 Niskie NI I d 0,158 0,227 Pośredni e NI NI 0,135 0,165 Wysokie NI NI 0,116 0,033 PA Strona 6 z 7 99,4% 93,2% 98,7% 97,4% a Do oceny wydajności BBL CHROMagar Staph aureus względem podłoża referencyjnego wykorzystywano test-t dla prób zależnych lub jednokierunkową analizę ANOVA, porównując średnie log 10 liczebności kolonii. b Analiza powtarzalności wyników na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus wykazała, że wyniki metody są powtarzalne w poszczególnych testach tego samego materiału i metody. c Do oceny precyzji metod ilościowych w zakresie różnych liczebności kolonii S. aureus wykorzystano współczynnik korelacji liniowej podniesiony do kwadratu. d Na podłożu BBL CHROMagar Staph aureus wykazywano większą liczbę kolonii, niż metodą referencyjną ISO. Ograniczenia procedury Niektóre szczepy gronkowca, poza S. aureus, takie jak: S. cohnii, S. intermedius i S. schleiferi, oraz maczugowce i drożdżaki mogą po 24 godzinach tworzyć kolonie o zabarwieniu liliowym 11. Różnicowania S. aureus od innych drobnoustrojów można dokonać, analizując produkcję koagulazy, innych substancji biochemicznych lub wykonując barwienie metodą Grama. Oporne bakterie Gram-ujemne, typowo ujawniające się jako małe, niebieskie kolonie, mogą również się przebijać. Nie zaleca się inkubacji ponad 24 h (materiał kliniczny) oraz 28 (pokarmy) z uwagi na wzrost wyników fałszywie dodatnich. Po przekroczeniu czasu inkubacji, aby zgłosić S. aureus należy potwierdzić obecność liliowych kolonii. Inkubacja przez czas krótszy niż zalecane 20 h spowoduje zmniejszenie odsetka uzyskanych prawidłowych wyników. Z uwagi na obecność naturalnego złotego barwnika w szczepach S. aureus kolonie mogą przybierać barwę pomarańczowo-liliową. PIŚMIENNICTWO 1. AOAC Official Method Staphylococcus aureus in foods. Surface plating method for isolation and enumeration International Organization for Standards (ISO). Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive Staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) - Part 1: Technique using Baird Parker agar medium, 1st ed., ISO : Jablonski, L.M. and G.A. Bohach Staphylococcus aureus. In M. Doyle, L. Beuchat and T. Montville (eds.), Food microbiology fundamentals and frontiers. ASM, Washington, DC. 4. Bannerman, T.L Staphylococcus, Micrococcus, and other catalase-positive cocci that grow aerobically. In P.R. Murray, E.J. Baron, J.H. Jorgensen, M.A. Pfaller, and R.H. Yolken (eds.), Manual of clinical microbiology, 8th edition. ASM, Washington DC.

7 5. Bennett, R.W. and G.A. Lancette Staphylococcus aureus. In FDA, Bacteriological analytical manual, 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, MD. 6. Toranzos, G.A., G.A. McFeters and J.J. Borrego Detection of microorganisms in environmental freshwaters and drinking waters. In C. Hurst, R. Crawford, G. Knudsen, M. McInerney and L. Stetzenbach (eds.), Manual of environmental microbiology, 2nd ed. ASM Press, Washington, DC. 7. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS). Approved Guideline M29. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections.search for latest version at 8. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, DC. 10. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Dane w archiwum BD Diagnostic Systems. PAKOWANIE / DOSTĘPNOŚĆ REF Gotowe podłoża na płytkach hodowlanych, po 20 sztuk REF Gotowe podłoża na płytkach hodowlanych, po 120 sztuk DODATKOWE INFORMACJE W celu uzyskania dodatkowych informacji należy skontaktować się z lokalnym przedstawicielem firmy BD. Becton Dickinson GmbH Tullastrasse 8 12 D Heidelberg/Germany Phone: Fax: Reception_Germany@europe.bd.com AOAC is a trademark and Performance Tested is a service mark of AOAC International. CHROMagar is a trademark of Dr. A. Rambach. Difco is a trademark of Difco Laboratories, subsidiary of Becton, Dickinson and Company. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company BD PA Strona 7 z 7