Ocena wpływu ekspresji komórkowej wybranych mikrorna na wrażliwość na analogi nukleozydów purynowych u chorych

Podobne dokumenty
IL-4, IL-10, IL-17) oraz czynników transkrypcyjnych (T-bet, GATA3, E4BP4, RORγt, FoxP3) wyodrębniono subpopulacje: inkt1 (T-bet + IFN-γ + ), inkt2

Maria Szczotka ROZPRAWA HABILITACYJNA

Ocena spontanicznej apoptozy komórek nowotworowych w odniesieniu do czynników prognostycznych przewlekłej białaczki limfocytowej

starszych na półkuli zachodniej. Typową cechą choroby jest heterogenny przebieg

Ingrid Wenzel. Rozprawa doktorska. Promotor: dr hab. med. Dorota Dworakowska

mechanizmach latencji i onkogenezy BLV. Wykazano, że zakażenie BLV powoduje wzrost aktywności telomerazy i skracanie sekwencji telomerowych we

Ocena wpływu ludzkiego antygenu leukocytarnego HLA B5701 na progresję zakażenia HIV 1 i odpowiedź na leczenie antyretrowirusowe.

Lek. Ewelina Anna Dziedzic. Wpływ niedoboru witaminy D3 na stopień zaawansowania miażdżycy tętnic wieńcowych.


Charakterystyka kliniczna chorych na raka jelita grubego

Białaczka limfatyczna

Ocena immunologiczna i genetyczna białaczkowych komórek macierzystych

Porównanie skuteczności i bezpieczeństwa schematów immunoterapii BeG w raku pęcherza moczowego

Uniwersytet Przyrodniczy we Wrocławiu. Wydział Medycyny Weterynaryjnej. Katedra Biochemii, Farmakologii i Toksykologii.

Profil alergenowy i charakterystyka kliniczna dorosłych. pacjentów uczulonych na grzyby pleśniowe

Rozprawa na stopień naukowy doktora nauk medycznych w zakresie medycyny

Ocena potrzeb pacjentów z zaburzeniami psychicznymi

lek. Wojciech Mańkowski Kierownik Katedry: prof. zw. dr hab. n. med. Edward Wylęgała

STRESZCZENIE Słowa kluczowe: Wstęp Cel pracy

Analysis of infectious complications inf children with acute lymphoblastic leukemia treated in Voivodship Children's Hospital in Olsztyn

Folia Medica Lodziensia

EDYTA KATARZYNA GŁAŻEWSKA METALOPROTEINAZY ORAZ ICH TKANKOWE INHIBITORY W OSOCZU OSÓB CHORYCH NA ŁUSZCZYCĘ LECZONYCH METODĄ FOTOTERAPII UVB.

lek. Jacek Krzanowski

Analiza skuteczności i bezpieczeństwa leczenia systemowego najczęściej występujących nowotworów

Ocena wpływu nasilenia objawów zespołu nadpobudliwości psychoruchowej na masę ciała i BMI u dzieci i młodzieży

Promotor: prof. dr hab. Katarzyna Bogunia-Kubik Promotor pomocniczy: dr inż. Agnieszka Chrobak

Personalizacja leczenia w hematoonkologii dziecięcej

Ocena skuteczności preparatów miejscowo znieczulających skórę w redukcji bólu w trakcie pobierania krwi u dzieci badanie z randomizacją

Dotychczas brak jednoznacznych danych dotyczących ekspresji EGFL7, HIF-1α i Ob-R w ostrych białaczkach szpikowych.

Tychy, plan miasta: Skala 1: (Polish Edition)

Katedra i Zakład Biochemii Kierownik Katedry: prof. dr hab. n. med. Ewa Birkner

Przewlekła białaczka limfocytowa

Pro-tumoral immune cell alterations in wild type and Shbdeficient mice in response to 4T1 breast carcinomas

Patients price acceptance SELECTED FINDINGS

Akademia Morska w Szczecinie. Wydział Mechaniczny

HemoRec in Poland. Summary of bleeding episodes of haemophilia patients with inhibitor recorded in the years 2008 and /2010

Skale i wskaźniki jakości leczenia w OIT

Radiologiczna ocena progresji zmian próchnicowych po zastosowaniu infiltracji. żywicą o niskiej lepkości (Icon). Badania in vivo.

Ocena zależności stężeń interleukin 17, 22 i 23 a wybranymi parametrami klinicznymi i immunologicznymi w surowicy chorych na łuszczycę plackowatą

Wczesny i zaawansowany rak piersi

Atypowa morfologia limfocytów: niekorzystny rokowniczo czynnik związany z ekspresją antygenu CD38 na komórkach przewlekłej białaczki limfocytowej

Katarzyna Durda STRESZCZENIE STĘŻENIE KWASU FOLIOWEGO ORAZ ZMIANY W OBRĘBIE GENÓW REGULUJĄCYCH JEGO METABOLIZM JAKO CZYNNIK RYZYKA RAKA W POLSCE

Helena Boguta, klasa 8W, rok szkolny 2018/2019

ROZPRAWA NA STOPIEŃ DOKTORA NAUK MEDYCZNYCH (obroniona z wyróżnieniem )

Cracow University of Economics Poland. Overview. Sources of Real GDP per Capita Growth: Polish Regional-Macroeconomic Dimensions

Lek. Dominika Kulej. Przebieg kliniczny a wyjściowy status białek oporności wielolekowej w leczeniu ostrej białaczki limfoblastycznej u dzieci

KONFERENCJA Terapie innowacyjne. Minimalizm i precyzja w medycynie Termin r.

LECZENIE CHORYCH NA OSTRĄ BIAŁACZKĘ LIMFOBLASTYCZNĄ (ICD-10 C91.0)

prof. Joanna Chorostowska-Wynimko Zakład Genetyki i Immunologii Klinicznej Instytut Gruźlicy i Chorób Płuc w Warszawie

MaPlan Sp. z O.O. Click here if your download doesn"t start automatically

ERASMUS + : Trail of extinct and active volcanoes, earthquakes through Europe. SURVEY TO STUDENTS.

S T R E S Z C Z E N I E

Rak trzustki cele terapeutyczne. Sekwencja leczenia.

Szpiczak plazmocytowy: najważniejsze doniesienia z ASH Krzysztof Jamroziak

European Crime Prevention Award (ECPA) Annex I - new version 2014

WOJSKOWY INSTYTUT MEDYCZNY. Agnieszka WALCZYK

Dr hab.n.med. Małgorzata Krawczyk-Kuliś Katowice, Recenzja. rozprawy doktorskiej Lekarza Pawła Jarosza

Has the heat wave frequency or intensity changed in Poland since 1950?

Gdański Uniwersytet Medyczny Wydział Nauk o Zdrowiu z Oddziałem Pielęgniarstwa i Instytutem Medycyny Morskiej i Tropikalnej. Beata Wieczorek-Wójcik

Domy inaczej pomyślane A different type of housing CEZARY SANKOWSKI

Rozpoznawanie twarzy metodą PCA Michał Bereta 1. Testowanie statystycznej istotności różnic między jakością klasyfikatorów

Mgr Paweł Musiał. Promotor Prof. dr hab. n. med. Hanna Misiołek Promotor pomocniczy Dr n. med. Marek Tombarkiewicz

Network Services for Spatial Data in European Geo-Portals and their Compliance with ISO and OGC Standards

Krytyczne czynniki sukcesu w zarządzaniu projektami

Obrazowanie kręgosłupa w badaniu TK i MR w różnych grupach wiekowych

Dominika Janik-Hornik (Uniwersytet Ekonomiczny w Katowicach) Kornelia Kamińska (ESN Akademia Górniczo-Hutnicza) Dorota Rytwińska (FRSE)

Zakopane, plan miasta: Skala ok. 1: = City map (Polish Edition)

Agencja Oceny Technologii Medycznych

GDAŃSKI UNIWERSYTET MEDYCZNY

Rola i zakres limfadenektomii w raku pęcherza moczowego

Wojewodztwo Koszalinskie: Obiekty i walory krajoznawcze (Inwentaryzacja krajoznawcza Polski) (Polish Edition)

Diagnostyka, strategia leczenia i rokowanie odległe chorych z rozpoznaniem kardiomiopatii przerostowej

Rak trzustki - chemioterapia i inne metody leczenia nieoperacyjnego. Piotr Wysocki Klinika Onkologiczna Centrum Onkologii Instytut Warszawa

Baptist Church Records

CENTRALNA PRZYCHODNIA REHABILITACYJNO- LECZNICZA POLSKIEGO ZWIĄZKU NIEWIDOMYCH w WARSZAWIE KRZYSZTOF STARZYK

Rozprawa doktorska OCENA WYSTĘPOWANIA BIAŁKA CAŁKOWITEGO P53 I JEGO. Promotor: prof. dr hab. n. med. Tomasz Kręcick

Wojewodztwo Koszalinskie: Obiekty i walory krajoznawcze (Inwentaryzacja krajoznawcza Polski) (Polish Edition)

Skuteczność schematu bendamustyna i rytuksymab w leczeniu nawrotowej postaci przewlekłej białaczki limfocytowej

Losy pacjentów po wypisie z OIT Piotr Knapik

Badania osobniczej promieniowrażliwości pacjentów poddawanych radioterapii. Andrzej Wójcik

reakcji polimerazy w czasie rzeczywistym (real-time qpcr), po uprzednim przeprowadzeniu odwrotnej transkrypcji. Reakcja qpcr została przeprowadzona w

Leki immunomodulujące-przełom w leczeniu nowotworów hematologicznych

PRZEWLEKŁĄ BIAŁACZKĘ SZPIKOWĄ I OSTRĄ BIAŁACZKĘ SZPIKOWĄ

Udział czynników demograficznych w kształtowaniu wyników leczenia raka jajnika na podstawie materiału Gdyńskiego Centrum Onkologii

Cracow University of Economics Poland

, Warszawa

Rak piersi. Doniesienia roku Renata Duchnowska Klinika Onkologii Wojskowy Instytut Medyczny w Warszawie

ANNALES UNIVERSITATIS MARIAE CURIE-SKŁODOWSKA LUBLIN - POLONIA VOL.LX, SUPPL. XVI, 7 SECTIO D 2005

Warsztaty Ocena wiarygodności badania z randomizacją

SWPS Uniwersytet Humanistycznospołeczny. Wydział Zamiejscowy we Wrocławiu. Karolina Horodyska

Urszula Coupland. Zaburzenia neurologiczne u dzieci wertykalnie zakażonych HIV. Rozprawa na stopień doktora nauk medycznych

Najbardziej obiecujące terapie lekami biopodobnymi - Rak piersi

Weronika Mysliwiec, klasa 8W, rok szkolny 2018/2019

Wczesna odpowiedź molekularna jako kryterium optymalnej odpowiedzi na leczenie przewlekłej białaczki szpikowej inhibitorami kinaz tyrozynowych

Polskie doświadczenia kliniczne z bendamustyną

POSTĘPY W LECZENIU PBL

Standard leczenia, jakiego oczekują pacjenci z przewlekłą białaczką limfocytową. Aleksandra Rudnicka rzecznik PKPO

Immunologia komórkowa

Agencja Oceny Technologii Medycznych

Transkrypt:

UNIWERSYTET MEDYCZNY W LUBLINIE I Wydział Lekarski z Oddziałem Stomatologicznym Agnieszka Szymczyk Ocena wpływu ekspresji komórkowej wybranych mikrorna na wrażliwość na analogi nukleozydów purynowych u chorych na przewlekłą białaczkę limfocytową Rozprawa na stopień doktora nauk medycznych - streszczenie Promotor: dr hab. n. med. Monika Podhorecka Promotor pomocniczy: dr n. med. Sylwia Chocholska Katedra i Klinika Hematoonkologii i Transplantacji Szpiku Lublin 2017 Przewlekła białaczka limfocytowa (PBL) jest najczęściej rozpoznawanym nowotworem układu krwiotwórczego u osób dorosłych, w przebiegu którego dochodzi do akumulacji monoklonalnych limfocytów B we krwi, szpiku kostnym, węzłach chłonnych i śledzionie. Jej cechą charakterystyczną jest duża zmienność przebiegu klinicznego. U części pacjentów choroba od samego początku cechuje się dużą agresywnością i pomimo intensywnego leczenia prowadzi do zgonu w ciągu kilku lat od chwili ustalenia rozpoznania, u pozostałych natomiast przebiega łagodnie, a chorzy przez wiele lat nie wymagają rozpoczęcia leczenia. Z uwagi na tak dużą heterogenność choroby istotne jest poszukiwanie czynników prognostycznych i predykcyjnych, które pozwoliłyby na optymalizację strategii terapeutycznych. Badania ostatnich lat przyniosły informacje na tematu wpływu ekspresji mikrorna na procesy leukemogenezy u chorych na PBL. Liczne doniesienia potwierdzają ich udział w regulacji różnicowania i apoptozy komórek białaczkowych, także w odniesieniu do odpowiedzi na chemioterapię opartą o analogi zasad purynowych (PNA). Pomimo intensywnych badań nad określeniem profili ekspresji mikrorna w populacji chorych na PBL, nie udało się dotychczas określić jednego wzorca,

który można by było wykorzystać w codziennej praktyce klinicznej dotąd ustalić jednego obowiązującego wzorca, dlatego istnieje potrzeba prowadzenia badań w tym kierunku, zwłaszcza w odniesieniu mir-199a/b, mir-21 i mir-221, których wartość prognostyczna i predykcyjna nie jest dostatecznie poznana. Przedmiotem podjętych badań było określenie wpływu ekspresji komórkowej mir-21, mir-34a, mir- 181a, mir199a/b i mir-221 na wrażliwość na chemioterapię opartą o PNA w warunkach in vitro i in vivo. W celu realizacji tego zamierzenia dokonano oceny ilościowej poziomu ekspresji badanych mikrorna w oparciu o technikę łańcuchowej reakcji polimerazy w czasie rzeczywistym (qrq-pcr). Procesy apoptozy indukowane fludarabiną i kladrybiną w warunkach 24-godzinnych hodowli komórkowych oceniano natomiast poprzez określenie przyrostku odsetka komórek apoptotycznych o fenotypie CD5+/CD19+/Cas3+ z wykorzystaniem cytometru przepływowego. Do badania włączono 42 chorych z rozpoznaniem PBL ustalonym w Klinice Hematoonkologii i Transplantacji Szpiku w Lublinie, w tym 9 pacjentów, u których w terapii pierwszoliniowej zastosowano schemat leczniczy oparty o fludarabinę. Uzyskane wyniki analizowano w odniesieniu do uznanych czynników prognostycznych i pierwszorzędowych punktów końcowych. Na podstawie przeprowadzonych badań można wnioskować, że w populacji chorych na PBL obserwuje się ekspresję mir-21, mir-34a, mir-181a i mir-221, natomiast nie stwierdza się ekspresji mir-199a/b. Wykazano także zależność pomiędzy poziomem mir-21 a wartością leukocytozy i limfocytozy, mir-221 i mir-181a a stężeniem β-2mikroglobuliny, mir-181a a ekspresją antygenu powierzchniowego CD38. Odsetek apoptotycznych komórek CD5+/CD19+ wykazujących ekspresję aktywnej kaspazy 3 w 24- godzinnych hodowlach z fludarabiną w grupie chorych charakteryzujących się niską ekspresją mir- 34a był istotnie statystycznie niższy niż wśród wykazującej wysoki poziom tej cząsteczki. Różnice te stwierdzono również wśród chorych CD38(-) oraz zakwalifikowanych do grupy standardowego ryzyka cytogenetycznego (brak aberracji cytogenetycznych, trisomia chromosomu 12, delecja 13q). Przyrost odsetka apoptotycznych limfocytów białaczkowych wykazujących aktywność kaspazy 3 w warunkach hodowli komórkowych z kladrybiną w grupie chorych cechujących się brakiem niekorzystnych aberracji cytogenetycznych (delecja 11q i/lub delecja 17p) i jednocześnie niską ekspresją mir-34a był istotnie niższy niż w populacji charakteryzującej się wysokim poziomem tego mikrorna. Wyniki kolejnego etapu badań własnych wykazały, iż poziom ekspresji mir-21, mir-34a, mir-181a, mir-221 różnił się pomiędzy grupą chorych, którzy uzyskali odpowiedź na terapię opartą o fludarabinę oraz opornych na tego typu leczenie, jednak nie wykazano różnic istotnie statystycznych. Z uwagi na małą liczebność grupy chorych leczonych PNA oceny pozostałych punktów końcowych dokonano w całej grupie badanej. Wykazano związek pomiędzy poziomem ekspresji mir-21, mir-34a, mir-181a a czasem do progresji choroby

(TTP), mir-221 a czasem wolnym od choroby po zakończeniu terapii przeciwnowotworowej (PFS) oraz mir-181a i mir-221 a całkowitym czasem przeżycia (OS), nie stwierdzono natomiast wpływu ekspresji badanych mikrorna na ryzyko zgonu. Podsumowując, wyniki prezentowanych badań własnych wskazują na potencjalną wartość prognostyczną i predykcyjną mir-21, mir-34a, mir-181a i mir-221 w PBL. Rezultaty te mogą wskazywać na potencjalną możliwość wykorzystania tego typu markerów do oceny odpowiedzi na chemioterapię opartą o PNA oraz przebiegu klinicznego choroby. Wydaje się, że ocena ekspresji mir-34a ma szczególne znaczenie w grupie chorych bez niekorzystnych aberracji cytogenetycznych i cechujących się niską ekspresją antygenu powierzchniowego CD38, w przypadku których ta cząsteczka może stanowić ważny czynnik warunkujący odpowiedź na chemioterapię opartą o fludarabinę i kladrybinę. VIII. Abstract Chronic lymphocytic leukaemia (CLL) is one of the most frequently diagnosed leukemia in adults. In the course of this disease, monoclonal B lymphocytes are accumulated in the blood, bone marrow, lymph nodes and spleen. CLL is highly variable in the clinical course. In some patients, the disease is very aggressive, and, despite intensive treatment, leads to patients deaths within a few years. Other patients have a benign form of the disease and for many years do not require therapy. Due to the high heterogeneity of CLL, it is important to look for prognostic and predictive factors which will help to improve therapy results. The recent studies have provided information on the impact of microrna expression on leukaemogenesis in CLL patients. The regulatory effect of microrna on the differentiation and apoptosis of leukaemic cells, also with regard to the response to chemotherapy based on purine nucleoside analogs (PNA) was confirmed. Despite extensive research, scientists are still unsuccessful in terms of finding

a single pattern of microrna expression which could be used in everyday clinical practice. Thus, there is a great need to conduct effective research, especially with regard to mir-199a/b, mir-21 and mir-221, whose prognostic and predictive importance has not yet been sufficiently recognised. The aim of this study was to assess the effects of mir-21, mir-34a, mir-181a, mir199a/b and mir- 221 cell expression on the sensitivity to PNA-based chemotherapy in in vitro and in vivo tests. MicroRNA expression level was quantitatively analysed with use of the qrq-pcr technique. In turn, apoptosis induced by fludarabine and cladribine in 24-hour cell culture was evaluated by determining the increase in the percentage of apoptotic cells with CD5+/CD19+/Cas3+ phenotype, using a flow cytometer. Forty two patients diagnosed at the Department of Hematooncology and Bone Marrow Transplantation in Lublin were enrolled into the study, including 9 patients who were treated with fludarabine-based regimens. The obtained results were analysed with regard to the recognised prognostic factors and the primary efficacy endpoints. On the basis of the completed research, it can be concluded that the expression of mir-21, mir-34a, mir-181a and mir-221 is observed in the population of CLL patients, but the expression of mir- 199a/b cannot be found there. The correlations between mir-21 levels and leukocytosis and lymphocytosis values, between both mir-221 and mir-181a and β2 microglobulin concentration, between mir-181a and the expression of CD38 surface antigen were detected. The percentage of CD5+/CD19+/Cas3+ apoptotic cells in 24-hour cultures with fludarabine was significantly lower in the group of patients, with decreased mir-34a expression than in the group showing high levels of this particle. Such differences in the percentage of apoptotic cells in regards to mir-34a expression were also observed among CD38-negative versus CD38-positive patients, and those of the group with standard cytogenetic risk (no cytogenetic aberrations, trisomy 12, or 13q deletions) versus high cytogenetic risk (11q deletion and/or 17p deletion). The increase in the percentage of apoptotic lymphocytes in cell cultures with cladribine, in the group of standard cytogenetic risk and low mir-34a expression, was significantly lower than in the group of patients with high levels of this microrna. The study showed that the levels of mir-21, mir-34a, mir-181a and mir-221 expression differed between the patients who responded to fludarabine-based therapy and those resistant to this type of treatment, however these differences were not statistically significant. Due to the small number of patients in the group treated with PNA, the evaluation of the remaining endpoints was conducted on the entire study group. Correlations between mir-21, mir-34a and mir-181a expression, and the time to progression (TTP), between mir-221 and the progression-free survival time (counted from the end of the anti-cancer treatment)

(PFS), and between mir-181a and mir-221, and overall survival time (OS), were found, however the impact of microrna on the risk of death was not detected. In summary, the results of the study point to the possible prognostic and predictive value of mir-21, mir-34a, mir-181a and mir-221 in CLL. These results prove that there is a possibility to use these types of markers for the evaluation of response to PNA-based chemotherapy and the clinical course of the disease. It seems that mir-34a expression is of particular importance in the group of patients who do not have any unfavourable cytogenetic aberrations and are characterised by the low expression of CD38 surface antigen, in the case of whom this particle can constitute an important factor determining the response to chemotherapy based on PNA.