2015/09/18 A93A01276FPL A11A01933 27.5 ml 8 ml 400 Odczynnik diagnostyczny do oznaczania ilościowego in vitro kreatyniny w surowicy, osoczu i moczu metodą kolorymetryczną. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Wersja aplikacji Surowica, osocze: CREA3 (do użytku poza Stanami Zjednoczonymi) Mocz: CREA_U3 Zastosowanie jest odczynnikiem diagnostycznym do oznaczania ilościowego in vitro kreatyniny w surowicy i osoczu krwi ludzkiej oraz w moczu metodą kinetyczną z pikrynianem alkalicznym (metoda Jaffé'go). Pomiary kreatyniny wykorzystuje się w diagnostyce i leczeniu schorzeń nerek, przy kontroli skuteczności dializ oraz jako podstawę do obliczania innych analitów zawartych w moczu. Aspekty kliniczne Pomiary kreatyniny są używane w diagnostyce i leczeniu schorzeń nerek, przy monitorowaniu dializ oraz jako podstawa do obliczania innych analitów zawartych w moczu. Metoda W 1886 r. Jaffe opracował test kreatyninowy, oparty na reakcji zachodzącej między kreatyniną a pikrynianem sodu (1). W 1904 r. reakcja ta została wykorzystana przez Folina (2) do ilościowego oznaczenia kreatyniny w moczu. Procedury kinetyczne, bazujące na zaobserwowanym sposobie reagowania różnych substancji, w tym kreatyniny, z pikrynianem alkalicznym, proponowali Fabing (3) i Soldin (4). Ta udoskonalona wersja reakcji Jaffe'go to pomiar kinetyczny, niewymagający odbiałczania próbki i sformułowany tak, aby możliwie ograniczyć interferencję w białka surowicze. kreatynina + pikrynian alkaliczny kompleks kreatyninowo-pikrynianowy W środowisku o alkalicznym ph, kreatynina reaguje z pikrynianem, tworząc kompleks Janovsky'ego. Tempo wzrostu absorbancji przy fali 510 nm w wyniku tworzenia się kompleksów kreatyninowo-pikrynianowych jest wprost proporcjonalne do stężenia kreatyniny w próbce. Odczynniki jest produktem gotowym do użycia. Reagent 1: Wodorotlenek sodu Środki powierzchniowo czynne Reagent 2: Kwas pikrynowy 0,25 mol/l 20,5 mmol/l należy używać zgodnie z niniejszą ulotką. Producent nie może zagwarantować właściwego działania produktu, jeśli zostanie on użyty w sposób inny od podanego. Postępowanie z preparatem 1. Wyjmij obie zatyczki kasety. 2. Jeżeli odczynnik zawiera pianę, usuń ją za pomocą plastikowej pipety.
3. Załóż zatyczki ochronne nr ref. GBM0969 na pojemnikach z odczynnikami Reagent 1 i Reagent 2. 4. Umieść kasetę w niechłodzonej i niepodgrzewanej komorze odczynnikowej analizatora 400. Kalibrator Do celów kalibracji należy używać: Multical, nr ref. A11A01652 (do oddzielnego zakupu) 10 x 3 ml (liofilizat) Kontrola Do wewnętrznej kontroli jakości należy używać: N Control, nr ref. A11A01653 (wymaga osobnego zakupu) 10 x 5 ml (liofilizat) P Control, nr ref. A11A01654 (wymaga osobnego zakupu) 10 x 5 ml (liofilizat) Urine Control L/H, nr ref. A11A01674 (wymaga osobnego zakupu) 1 x 10 ml + 1 x 10 ml Oznaczenie kontroli powinno być przeprowadzane raz dziennie i/lub po wykonaniu kalibracji. Częstość przeprowadzania kontroli oraz przedziały ufności powinny być ustalone w oparciu o wytyczne laboratoryjne oraz przepisy obowiązujące w danym kraju. Należy przestrzegać krajowych, regionalnych i lokalnych wytycznych dotyczących materiałów do kontroli jakości. Wynik kontroli musi zawierać się w zdefiniowanych przedziałach ufności. Każde laboratorium powinno wypracować sposób postępowania w przypadku, gdy wyniki wykroczą poza wyznaczone przedziały. Wymagane wyposażenie niewchodzące w skład produktu Zautomatyzowany kliniczny analizator biochemiczny: 400 Kalibrator: Multical, nr ref. A11A01652 Kontrole: N Control, nr ref. A11A01653, oraz P Control, nr ref. A11A01654 Urine Control L/H, nr ref. A11A01674 Standardowy sprzęt laboratoryjny. Świeża, przejrzysta surowica. Osocze heparynizowane lub osocze z EDTA. Świeży odwirowany mocz. Firma HORIBA Medical nie prowadziła testów dla antykoagulantów innych niż wymienione na liście i w związku z tym nie zaleca ich używania dla potrzeb tego oznaczenia. Mocz z 24 godzin należy pobierać bez żadnych dodatków. Stabilność: Surowica, osocze (5): W temperaturze 20-25 C: 7 dni W temperaturze 4-8 C: 7 dni W temperaturze -20 C: 3 mies. Mocz (6): W temperaturze 20-25 C: 2 dni W temperaturze 4-8 C: 6 dni W temperaturze -20 C: 6 mies. Zakres norm Każde laboratorium powinno wypracować swoje własne zakresy odniesienia. Wartości podane w niniejszej ulotce mają wyłącznie charakter orientacyjny. Surowica/osocze (7): Mężczyźni Kobiety 8-13 mg/l 6-12 mg/l 0,8-1,3 0,6-1,2 71-115 53-106 Mocz (z 24 godzin) (8): Mężczyźni Kobiety 14-26 mg/kg/dzień 11-20 mg/kg/dzień 124-230 µmol/kg/dzień 97-117 µmol/kg/dzień Przechowywanie i stabilność Odczynniki, w nieotwieranych kasetach, zachowują stabilność do daty ważności podanej na etykiecie, o ile są przechowywane w temperaturze 18-26 C.
Stabilność po otwarciu: patrz rozdział Wydajność przy użyciu w analizatorze 400. Postępowanie z odpadami Należy postępować zgodnie z lokalnie obowiązującymi przepisami. Ogólne środki ostrożności a Niniejszy odczynnik jest przeznaczony wyłącznie do profesjonalnej diagnostyki in vitro. Wyłącznie do stosowania z przepisu lekarza. Ten odczynnik został sklasyfikowany jako szkodliwy w rozumieniu rozporządzenia (WE) nr 1272/2008. Odczynnik 1 (R1): Ostrzeżenie H290: Może powodować korozję metali. H315: Działa drażniąco na skórę. H319: Działa drażniąco na oczy. P234: Przechowywać wyłącznie w oryginalnym pojemniku. P264: Umyć dokładnie ręce po użyciu. P280: Stosować rękawice ochronne/odzież ochronną/ ochronę oczu/ochronę twarzy. P302 + P352: W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ: Umyć dużą ilością wody z mydłem. P305 + P351 + P338: W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO OCZU: Ostrożniepłukać wodą przez kilka minut. Wyjąć soczewki kontaktowe, jeżeli są i można jełatwo usunąć. Nadal płukać. P321: Zastosować określone leczenie (patrz [***] na etykiecie). P332 + P313: W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry: Zwrócić się o pomoclekarską. P337 + P313: W przypadku utrzymywania się działania drażniącego na oczy: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. P362 + P364: Zanieczyszczoną odzież zdjąć i wyprać przed ponownym użyciem. P390: Usunąć wyciek, aby zapobiec szkodom materialnym. P406: Przechowywać w pojemniku odpornym na korozję o odpornej powłoce wewnętrznej. Przy pracy należy stosować standardowe laboratoryjne środki ostrożności. Kasety odczynnikowe są kasetami jednorazowego użytku, należy je utylizować zgodnie z lokalnymi przepisami. Należy uważnie zapoznać się z kartą charakterystyki (MSDS) dołączoną do odczynnika. Nie używać produktu, jeżeli można zaobserwować zmianę jego cech biologicznych, chemicznych lub fizycznych, co wskazuje na jego nieprzydatność do użytku. Użytkownik ma obowiązek sprawdzić, czy niniejszy dokument dotyczy używanego w danym przypadku odczynnika. Wydajność przy użyciu w analizatorze 400 Dane przedstawione poniżej pochodzą z oznaczeń przeprowadzonych przy użyciu analizatora 400. Surowica, osocze (do użytku poza Stanami Zjednoczonymi) Liczba oznaczeń: 120 ozn. Stabilność robocza odczynników: Po otwarciu kaseta z odczynnikiem umieszczona w utrzymywanej w temperaturze pokojowej komorze analizatora 400 zachowuje stabilność przez 19 dni. Objętość próbki: 10 µl/oznaczenie Granica oznaczalności: Granicę oznaczalności określono zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP17-A (9) i wynosi ona 12,2 (0,14 ). Trafność i precyzja: Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia) 4 szt. próbek o niskim, średnim oraz wysokim stężeniu oraz 2 kontrole są poddawane 20 oznaczeniom, zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (10). 94,52 1,07 1,58 333,01 3,76 0,83 1 49,37 0,56 2,59 a Modyfikacja: modyfikacja klasyfikacji.
2 142,00 1,60 1,46 3 597,28 6,75 0,72 4 1314,55 14,85 0,59 Powtarzalność (precyzja całkowita) 4 szt. próbek o niskim, średnim i wysokim stężeniu oraz 2 kontrole są przez 20 dni poddawane podwójnym oznaczeniom (2 serie dziennie), zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP5-A2 (11). 90,84 1,03 2,88 333,02 3,76 1,84 1 48,81 0,55 5,03 2 125,08 1,41 2,21 3 575,30 6,50 2,07 4 1299,53 14,68 1,99 Zakres pomiaru: Oznaczenie potwierdziło zakres pomiaru od 12,2 do 1600 (0,14 do 18,08 ), z automatycznym rozcieńczeniem następczym do 4800 (54,24 ). Liniowość odczynnika ustalono do wartości 1600 (18,08 ), stosując zalecenia CLSI (NCCLS), procedura EP6-A (12). Korelacja: 168 pobrane od pacjenta próbki (surowicy) koreluje się z komercyjnie dostępnym odczynnikiem, służącym jako wzorzec, zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP9-A2 (13). Wartości zawierały się w zakresie od 45,39 do 1542,18 (0,51 do 17,43 ). Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej (14) jest następujące: Y = 1,02 X - 6,73 () Y = 1,02 X - 0,08 () przy współczynniku korelacji r 2 = 0,999. Czynniki zakłócające: Hemoglobina: Nie obserwuje się znaczącego wpływu do 261 (450 ). Triglicerydy: Nie obserwuje się znaczącego wpływu do stężenia Intralipid (świadczącego o lipemii) 7,0 mmol/l (612,5 ). Bilirubina Nie obserwuje się znaczącego całkowita: wpływu do 57 (3,3 ). Bilirubina Nie obserwuje się znaczącego bezpośrednia: wpływu do 50 (2,9 ). Glukoza: Nie obserwuje się znaczącego wpływu do 18,4 (332 ). Kwas Nie obserwuje się znaczącego askorbinowy: wpływu do 340 (5,98 ). Białko całkowite: Nie obserwuje się znaczącego wpływu do 34,2 do 149 g/l. Young podaje także inne ograniczenia, a w szczególności listę leków oraz zmiennych przedanalitycznych, które według obecnego stanu wiedzy wpływają na wyniki tej metody (15, 16). Stabilność kalibracji: Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji jest kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach kontrolnych. Stabilność kalibracji wynosi 3 dni. Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w przypadku zmiany jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki kontroli jakości wykroczą poza założony zakres. Wersja aplikacji: (do użytku poza Stanami Zjednoczonymi) Mocz Liczba oznaczeń: 120 ozn. Stabilność robocza odczynników: Po otwarciu kaseta z odczynnikiem umieszczona w utrzymywanej w temperaturze pokojowej komorze analizatora 400 zachowuje stabilność przez 19 dni. Objętość próbki: 15 µl/oznaczenie Granica oznaczalności: Granicę oznaczalności określono zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP17-A (9) i wynosi ona 261 (2,9 ).
Trafność i precyzja: Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia) 3 szt. próbek o niskim, średnim i wysoki stężeniu oraz 2 kontroli poddaje się 20 oznaczeniom, zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (10). 5305 60,0 0,53 11829 133,7 0,61 1 993 11,2 1,28 2 8585 97,0 0,56 3 21899 247,5 0,52 Powtarzalność (precyzja całkowita) 3 szt. próbek o niskim, średnim i wysokim stężeniu oraz 2 kontrole poddaje się przez 20 dni podwójnym oznaczeniom (2 serie dziennie), zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP5-A2 (11). 5307 60,0 1,32 11784 133,2 1,50 1 925 10,5 2,30 2 8681 98,1 2,21 3 20380 230,3 1,59 Zakres pomiaru: Oznaczenie potwierdziło zakres pomiaru od od 261 do 25000 (od 2,9 do 282,5 ), a z automatycznym rozcieńczeniem następczym do 75000 (847,5 ). Liniowość odczynnika ustalono do wartości 25000 (282,5 ), stosując zalecenia CLSI (NCCLS), procedura EP6-A (12). Korelacja: 109 pobrane od pacjentów próbki (mocz) koreluje się z komercyjnie dostępnym odczynnikiem, służącym jako wzorzec, zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura EP9-A2 (13). Wartości zawierały się w zakresie od 284,86 do 23919,5 (3,22 do 270,29 ). Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej (14) jest następujące: Y = 1,04 X - 38,87 () Y = 1,04 X - 0,44 () przy współczynniku korelacji r 2 = 0,9987. Czynniki zakłócające: Hemoglobina: Nie obserwuje się znaczącego wpływu do 210 (362 ). Triglicerydy: Nie obserwuje się znaczącego wpływu do stężenia Intralipid (świadczącego o lipemii) 612,5. Bilirubina Nie obserwuje się znaczącego bezpośrednia: wpływu do 500 (29,3 ). Kwas Nie obserwuje się znaczącego askorbinowy: wpływu do 340 (5,99 ). Young podaje także inne ograniczenia, a w szczególności listę leków oraz zmiennych przedanalitycznych, które według obecnego stanu wiedzy wpływają na wyniki tej metody (15, 16). Stabilność kalibracji: Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji jest kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach kontrolnych. Stabilność kalibracji wynosi 3 dni. Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w przypadku zmiany jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki kontroli jakości wykroczą poza założony zakres. Wersja aplikacji: Współczynnik konwersji: x 0,0113 = Bibliografia 1. Jaffe M. Hoppe Selyer's. Z. Physiol. Chem. (1886) 10: 391-400. 2. Folin O. Beitrag zur Chemie des Kreatinins und Kreatins im Harne. Z. Physiol. Chem. (1904) 41: 223-242. 3. Fabing DL, Ertingshausen G. Automated Reaction Rate Method for the Determination of Serum Creatinine with the Centrifichem. Clin. Chem. (1971) 17: 391. 4. Soldin S, Henderson L, Hill G. The Effect of Bilirubin and Ketones on Reaction Rate Methods for the Measurement of Creatinine. Clin. BioChem. (1978): 82-86.
5. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigations. WHO publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2 (2002): 28. 6. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigations. WHO publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2 (2002): 46. 7. Tietz NW. Clinical guide to laboratory tests, 3 rd Ed, (WB. Saunders eds. Philadelphia USA), (1995): 186. 8. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE. Reference Information for the Clinical Laboratory, TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. 4 th Ed; Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, (Elsevier Saunders eds. St Louis, USA), (2006): 2264. 9. Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34). 10. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 11. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25). 12. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 13. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19). 14. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. 15. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 16. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132.