Znaczenie enterotoksyn gronkowca z³ocistego w przewlek³ym zapaleniu zatok z polipami nosa podsumowanie wiedzy*

Transkrypt

1 Zhang N i wsp. Znaczenie Otorynolaryngologia, enterotoksyn gronkowca 2006, 5(3), z³ocistego w przewlek³ym zapaleniu zatok z polipami CHOROBY nosa... NOSA I ZATOK Otorynolaryngologia, 2006, 5(4), Znaczenie enterotoksyn gronkowca z³ocistego w przewlek³ym zapaleniu zatok z polipami nosa podsumowanie wiedzy* An update on the impact of Staphylococcus aureus enterotoxins in chronic sinusitis with nasal polyposis N. ZHANG 1,2/, P. GEVAERT 1/, T. VAN ZELE 1/, C. PEREZ-NOVO 1/, J. PATOU 1/, G. HOLTAPELLS 1/, P. VAN CAUWENBERGE 1/, C. BACHERT 1/ 1/ ENT-Department, University Hospital Ghent, Upper Airway Research Laboratory, De Pintelaan 185, Ghent, Belgium 2/ ENT-Department, Zhongshan City Peoples Hospital, Zhongshan, Guangdong Province , China Polipy nosa u doros³ych charakteryzuj¹ce siê znaczn¹ eozynofili¹, miejscow¹ nadprodukcj¹ immunoglobulin E oraz czêstym wspó³wystêpowaniem z astm¹, uznawane s¹ za zapalenie eozynofilowe o potencjalnym tle alergicznym, nie maj¹ce zwi¹zku z dzia³aniem bakterii. Coraz wiêcej badañ wskazuje jednak, e kolonizacja gronkowcem z³ocistym wystêpuje ze zwiêkszon¹ czêstoœci¹ u chorych z przewlek³ym zapaleniem b³ony œluzowej nosa i zatok; dotyczy to przy tym jedynie zapaleñ ze wspó³istniej¹cymi polipami nosa, nie dotyczy zaœ chorych, u których polipy nosa nie wystêpuj¹. Bakterie te uwalniaj¹ enterotoksyny, które dzia³aj¹ jak superantygeny i indukuj¹ miejscowe wydzielanie poliklonalych IgE oraz powstawanie ciê kiego, prawdopodobnie nie poddaj¹cego siê sterydoterapii, zapalenia eozynofilowego. Ostatnio stwierdzono, e gronkowiec z³ocisty wystêpuje œródnab³onkowo i potencjalnie mo e powodowaæ uwalnianie superantygenów do tkanek z wewn¹trz komórek nab³onka. Za zjawisko to mog¹ byæ odpowiedzialne zaburzenia immunologiczne, zarówno wrodzone, jak i nabyte. W tkankach polipów stwierdza siê struktury zbli one do pêcherzykowych oraz nagromadzenie limfocytów, swoiœcie wi¹ ¹cych enterotoksyny, odpowiedzialnych za wzrost wytwarzania miejscowego IgE. OdpowiedŸ immunologiczna indukowana superantygenami wp³ywa na modulowanie ciê koœci zapalenia eozynofilowego i mo e byæ powi¹zana u tych pacjentów ze wspó³istniej¹c¹ chorob¹ dolnych dróg oddechowych. Interesuj¹cym jest, e swoiste IgE dla enterotoksyn mo na stwierdziæ w tkankach polipów nosa u wiêkszoœci osób nadwra liwych na aspirynê i zwi¹zane jest to ze znacznym wzrostem stê enia eozynofilowego bia³ka kationowego (ECP) oraz interleukiny 5 (IL-5). Mo liwe znaczenie enterotoksyn gronkowcowych w chorobach przebiegaj¹cych z polipami nosa zosta³o potwierdzone w kilku badaniach w Europie, Ameryce Pó³nocnej i Azji, w oparciu o wykazanie obecnoœci przeciwcia³ IgE dla enterotoksyn oraz zapalnych konsekwencji w tkankach polipów nosa. Badania wskazywa³y równie na znaczenie enterotoksyn uwalnianych przez gronkowca z³ocistego w chorobach dolnych dróg oddechowych, takich jak ciê ka astma i zaostrzenia Przewlek³ej Obturacyjnej Choroby P³uc (POChP), co wyraÿnie sugeruje kliniczn¹ potrzebê diagnozowania i leczenia procesów zale nych od tych drobnoustrojów. Podejœcie terapeutyczne jest w chwili obecnej czysto empiryczne i wymaga dalszych ocen, które dostarcz¹ jednoczeœnie klinicznych dowodów na s³usznoœæ przedstawionych koncepcji. S³owa kluczowe: gronkowiec z³ocisty, Staphylococcus aureus, œródnab³onkowy, enterotoksyny, superantygeny, polipy nosa, przewlek³e zapalenie b³ony œluzowej nosa i zatok, POChP, wra liwoœæ na aspirynê, IgE, opornoœæ na steroidy, ECP Nasal polyps in adults, characterized by abundant eosinphils, local overproduction of immunoglobulin E, and often associated with asthma, have been appreciated as an eosinophilic inflammation, potentially of allergic origin, but unrelated to a bacterial impact. Evidence accumulates, however, that Staphylococcus aureus colonizes chronic rhinosinusitis with, but not without polyps, with significantly increased prevalence. The germs release enterotoxins, which act as superantigens and induce a topical multiclonal IgE-formation as well as a severe, possibly steroid-insensitive eosinophilic inflammation. Recently, S. aureus could be demonstrated to reside intraepithelially, and potentially to release superantigens into the tissue from within the epithelial cells. An immune defect, either in the innate or adaptive immunity, might be responsible for this phenomenon. Follicle-like structures and lymphocyte accumulations, specifically binding enterotoxins, can be found within the polyp tissues, giving rise to local IgE formation. The superantigen-induced immune response also leads to a modulation of the severity of the eosinophilic inflammation, and may be linked to lower airway co-morbidity in polyp patients. Interestingly, IgE antibodies to enterotoxins can be found in the majority of aspirin-sensitive polyp tissues, associated with a substantial increase in ECP and IL-5. The possible role of S. aureus enterotoxins in polyp disease in Europe, the US and Asia has meanwhile been supported by several studies, demonstrating the presence of IgE antibodies to enterotoxins and inflammatory consequences in nasal polyp tissue. First studies also point to an involvement of S. aureus derived enterotoxins in lower airway disease, such as severe asthma and exacerbated COPD, clearly suggesting a clinical need for diagnosis and treatment of the germ and its related effects. Therapeutic approaches are so far empirical, and need further study, also serving to proof the clinical relevance of the concept. Key words: Staphylococcus aureus, intracellular, enterotoxins, superantigens, nasal polyps, chronic sinusitis, asthma, COPD, aspirin sensitivity, IgE, steroid insensitivity, ECP * Przedrukowano za pozwoleniem Rhinology 2005; 43: Reprinted with kind permission from Rhinology 2005; 43: T³umaczenie: dr med. Ewa Zamys³owska-Szmytke

2 146 Otorynolaryngologia, 2006, 5(4), Wprowadzenie Polipy nosa charakteryzuje znaczna eozynofilia, aktywacja komórek T, nadmierne wytwarzanie immunoglobulin IgE oraz fakt, e pierwotnie zaliczano je do chorób alergicznych [1-5]. Ponad 70% polipów w krajach Europy zachodniej wykazuje eozynofiliê tkankow¹ oraz wzrost stê enia interleukiny 5 (IL-5) oraz eotaksyn, powoduj¹cych chemotaksjê eozynofilów, ich migracjê, aktywacjê oraz przed³u ony czas prze ycia [2,3]. Ostatnie doniesienia wskazuj¹ jednak e, e enterotoksyny gronkowca z³ocistego, dzia³aj¹c jako superantygeny, aktywuj¹ istotnie reakcjê zapaln¹ w du ej podgrupie osób z polipami nosa, co znacznie modyfikuje przebieg choroby [3]. Oko³o 25% populacji jest sta³ymi nosicielami gronkowca z³ocistego w nosie, zaœ oko³o 20% wszystkich infekcji gronkowcowych u ludzi jest wewn¹trzpochodnych [6]. Pomimo, e patogennoœæ gronkowca z³ocistego jest œciœle powi¹zana z wytwarzaniem koagulaz, drobnoustroje te zawieraj¹ równie szereg antygenów oraz wytwarzaj¹ ró norodne toksyny o w³aœciwoœciach superantygenów [7,8]. Klasyczne enterotoksyny gronkowca z³ocistego Staphylococcal enterotoxin - SE) obejmuj¹ enterotoksyny od A do E oraz TSST-1 (toksyna zespo³u wstrz¹sowego 1, toxic shock syndrome toxin -1), jednak e ostatnio opisano inne enterotoksyny pochodz¹ce z locus egc genu [9], które prawdopodobnie s¹ bez znaczenia, jako e s¹ czêsto wytwarzane przez gronkowce z³ociste znajduj¹ce siê w nosie i s¹ czêœciowo niezale ne od wytwarzania klasycznych enterotoksyn (T. van Zele, praca nieopublikowana). Enterotoksyny gronkowców, jak równie niektóre cz¹steczki pochodz¹ce od gronkowca ropotwórczego [10] i niektórych wirusów [11,12] s¹ w stanie aktywowaæ komórki T niezale nie od drogi antygenowo-swoistej poprzez kompleks receptorów dla komórek T (TCR) - klasy MCH II, tj. przy³¹czanie do zmiennych ³añcucha beta TCR. Tak wiêc odpowiedÿ komórek T na superantygeny jest zale na od wystêpowania swoistych ³añcuchów beta; ich obecnoœæ mo e prowadziæ do aktywacji, wystêpuj¹cych w nadmiernej iloœci w tkance komórek T (normalnie znacznie mniej ni 1% komórek T jest aktywowanych przez swoiste antygeny). Inny, ostatnio opisany mo liwy sposób modyfikacji odpowiedzi na superantygeny jest oparty na stwierdzeniu, e polimorfizm HLA-DQ mo e zmieniaæ przy³¹czanie superantygenów do kompleksu MHC klasy II [13]. Tak wiêc wynik odpowiedzi populacji komórek T w danej tkance zale y od wielu czynników, takich jak wytwarzanie czy nara enie na enterotoksyny gronkowca z³ocistego, ci¹g³oœæ barier nab³onkowych, a tak e specyfika budowy receptorów komórkowych dla limfocytów T oraz kompleksów MCH klasy II na komórkach immunologicznych. Raz aktywowane komórki T wytwarzaj¹ interleukiny IL-4, IL-5, IL-13, eotaksyny oraz wiele innych, co prowadzi do ciê kiego zapalenia eozynofilowego oraz miejscowego wytwarzania IgE. W poprzednim przegl¹dzie literatury opisywano równie inne, bezpoœrednie dzia³ania superantygenów na komórki B, komórki nab³onka, eozynofile, itp. [14]. Wszystkie te dzia³ania sumuj¹ siê w ogromny potencja³ prozapalny gronkowców oraz innych superantygenów. Wykrycie przeciwcia³ IgE skierowanych przeciwko enterotoksynom gronkowca z³ocistego A i B (SEA i SEB) w homogenacie tkanek polipa nosowego [3] po raz pierwszy udowodni³o, e superantygeny te mog¹ odgrywaæ rolê w patogenezie polipów nosa. Badaj¹c homogenaty tkankowe mo na by³o okreœliæ zale noœci miêdzy ca³kowitym i swoistym IgE dla ró norodnych alergenów w próbkach z polipów oraz kontrolnych a markerami zapalenia eozynofilowego. Stê enia IgE ca³kowitego, IL- 5, eotaksyny, eozynofilowego bia³ka kationowego (ECP), cys-leukotrienów (LT) oraz rozpuszczalnego receptora IgE o niskim powinowactwie (CD23) by³y istotnie wy- sze w tkankach polipa ni w próbkach kontrolnych. IgE ca³kowite by³o istotnie skorelowane z IL-5, ECP, LTD4/ D4/E4, scd23 oraz liczb¹ eozynofilów. Istotna podgrupa osób z polipami wykazywa³a poliklonalne formacje IgE, w³¹czaj¹c IgE dla enterotoksyn gronkowca z³ocistego, ponadto wysoki poziom IgE ca³kowitego oraz wysok¹ czêstoœæ wystêpowania astmy. Badania te sugerowa³y, e bakteryjne superantygeny mog¹ indukowaæ wytwarzanie IgE w polipach nosa oraz wp³ywaæ na stopieñ zapalenia eozynofilowego [3,15]. W obecnej pracy, autorzy podsumowuj¹ dotychczasow¹ wiedzê zarówno na podstawie badañ w³asnych, jak i innych grup badawczych, co mo e byæ podstaw¹ do opracowania wskazañ klinicznych dla postêpowania i leczenia chorych z polipami nosa. Kolonizacja gronkowcem z³ocistym oraz odpowiedÿ immunologiczna na enterotoksyny wzrasta w polipach nosa Gronkowiec z³ocisty czêsto umiejscawia siê w nozdrzach osób zdrowych; mo na go stwierdziæ w ostrym i przewlek³ym zapaleniu nosa i zatok [16]. Jednak e nigdy nie potwierdzono, e drobnoustrój ten odgrywa istotn¹ rolê w przewlek³ym zapaleniu zatok przebiegaj¹cym bez istotnych zaostrzeñ choroby, zaœ badania w polipach nosa nie by³y dot¹d prowadzone. Ostatnio stwierdzono wiêkszy poziom kolonizacji gronkowcem z³ocistym w polipach nosa, jednak e nie w przewlek³ym zapaleniu b³ony œluzowej nosa i zatok bez polipów [17], co mo e wskazywaæ, e zapalenie zatok i polipy mog¹ stanowiæ dwie odrêbne jednostki chorobowe z odmiennymi patomechanizmami (ryc. 1). Kolonizacjê gronkowcem wykryto u 63,6% osób z polipami, w podgrupach osób z astm¹ i nadwra liwoœci¹ na aspirynê czêstoœæ ta wynosi³a odpowiednio a 66,7% i 87,5%, co stanowi³o wartoœæ istotnie wy sz¹ ni w grupie kontrolnej oraz u osób z przewlek³ym zapaleniem zatok i nosa (odpo-

3 Zhang N i wsp. Znaczenie enterotoksyn gronkowca z³ocistego w przewlek³ym zapaleniu zatok z polipami nosa wiednio 33,3% i 27,3%). Co wiêcej, wyniki powtarzanych wymazów z przewodu nosowego œrodkowego u 8 osób z polipami sugerowa³y d³ugotrwa³¹ kolonizacjê t¹ bakteri¹. Stosuj¹c, w teœcie skryningowym, kombinacjê ró nych enterotoksyn gronkowca z³ocistego, przeciwcia³a IgE przeciwko SE stwierdzono u 27,8% osób z polipami nosa, w podgrupach chorych z astm¹ i nadwra liwoœci¹ na aspirynê odsetki te osi¹ga³y odpowiednio 53,8% i 80%, podczas gdy w grupie kontrolnej 15%, zaœ w grupie z przewlek³ym zapaleniem zatok i nosa - 6%. Stê enie eozynofilowego bia³ka kationowego (ECP) odzwierciedlaj¹ce zapalenie eozynofilowe, by³o istotnie podwy - szone w grupie chorych z polipami i przeciwcia³ami IgE przeciw enterotoksynom w porównaniu do próbek bez IgE, co mo e sugerowaæ silne dzia³anie zapalne superantygenów. U osób z polipami nosa oraz wspó³istniej¹c¹ astm¹ lub nadwra liwoœci¹ na aspirynê, poziom kolonizacji oraz odpowiedÿ IgE w homogenatach tkanek nosowych by³y zwiêkszone równolegle ze wzrostem ECP i IgE ca³kowitym. Dane te wskazuj¹ na œcis³¹ zale noœæ miêdzy kolonizacj¹ gronkowcem z³ocistym a odpowiedzi¹ immunologiczn¹ tkanek na enterotoksyny w polipach nosa, co mo e nawet znajdowaæ prze³o enie na wspó³istniej¹ce choroby dolnych dróg oddechowych. pacjenci (%) S.aureus SAE-IgE+ kontrola CRS NP NP+astma NP+ASS (n=9) (n=22) (n=53) (n=18) (n=8) Ryc. 1. Kolonizacja gronkowcem z³ocistym i przeciwcia³a IgE dla enterotoksyn mix w b³onach œluzowych Podobne poziomy kolonizacji przez gronkowca z³ocistego (71%) oraz poziomy przeciwcia³ IgE (50%) przeciw superantygenom opisywano w innym badaniu nad polipami, z podobnie niskimi poziomami w grupach kontrolnych (odpowiednio 25% i 0%), co potwierdza pierwsze wyniki otrzymane przez autorów tej pracy [18]. Poziom kolonizacji zawsze przekracza³ poziom odpowiedzi immunologicznej IgE na enterotoksyny gronkowca z³ocistego, co wskazuje, e zasiedlenie niekoniecznie musi prowadziæ do wytwarzania lub kontaktu superantygenów z uk³adem immunologicznym. Dane dotycz¹ce œródnab³onkowego wzrostu gronkowca z³ocistego A do chwili obecnej gronkowiec z³ocisty by³ uwa- any za nieinwazyjny patogen zewn¹trzkomórkowy [19]. Jednak e ostatnie prace wykaza³y zdolnoœæ tego drobnoustroju do wnikania do eukariotycznych komórek niefagocytarnych i, byæ mo e, do przebywania w nich przez d³u szy czas. Warianty gronkowca z³ocistego rosn¹ce w ma³ych koloniach (Small Colony Variants - SCV) s¹ powszechnie pojawiaj¹cymi siê, wolno rosn¹cymi subpopulacjami, które ostatnio przypisano przewlek³ym nawracaj¹cym infekcjom opornym na antybiotyki, takim jak mukowiscydoza [20,21]. Wykazano, e gronkowiec z³ocisty wnika do hodowli komórkowych fagocytów i linii komórkowych [22,23], jak równie do ludzkich komórek nab³onka oddechowego [24 26]. Analiza zainfekowanych hodowli komórkowych w mikroskopii elektronowej wykaza³a, e gronkowiec z³ocisty wystêpowa³ w wodniczkach nab³onka oddechowego [24,27]. Uwa a siê, e interakcje miêdzy gronkowcem a komórkami nab³onka polegaj¹ na ³¹czeniu siê bia³ek drobnoustrojów (bia³ek przy³¹czaj¹cych fibronektynê FnBPs) do fibronektyn, integryn ß1 oraz bia³ka szoku termicznego 60 (Hsp60) [25,28,29]. Zdolnoœæ do przenikniêcia i prze ycia w komórce gospodarza mo e wyjaœniaæ niewra liwoœæ polipów na leczenie antybiotykami, co jest cech¹ charakterystyczn¹ tej choroby, podobnie jak i przewlek³y jej charakter oraz nawroty mog¹ce wystêpowaæ miesi¹ce, a nawet lata po ewidentnie skutecznym leczeniu tej choroby. Antybiotyki stosowane powszechnie w infekcjach gronkowcowych wydaj¹ siê stwarzaæ niszê dla rozwoju inwazyjnych form œródnab³onkowych gronkowca z³ocistego [30]. Ostatnio autorzy pracy zastosowali metody immunohistochemiczne dla wykazania obecnoœci gronkowca z³ocistego oraz wytwarzania enterotoksyn B w próbkach pochodz¹cych z polipów. Œródnab³onkowe zabarwienie, charakterystyczne dla gronkowca z³ocistego stwierdzono w istotnej liczbie próbek polipów, ze wspó³istniej¹cymi polami zajêtymi i wolnymi w obrêbie tej samej próbki ( J. Patou, praca nieopublikowana). Mo liwe by³o wykazanie lokalizacji enterotoksyny B w tych samych miejscach, co gronkowców œródnab³onkowych, sugeruj¹ce mo liwoœæ uwalniania tej enterotoksyny do tkanek. Dalsze badania powinny dotyczyæ zagadnieñ prze ycia drobnoustrojów i wytwarzania enterotoksyn przez œródnab³onkowego gronkowca z³ocistego. Apoptotyczne komórki nab³onka wraz z ich zawartoœci¹ oraz gronkowiec z³ocisty, który przenika przez b³onê podstawn¹ powinny byæ fagocytowane przez makrofagi, których liczba, jak wykazano, wzrasta szczególnie istotnie w polipach nosa w stosunku do kontroli [31]. Makrofagi te w tkankach polipa nosa scharakteryzowano jako CD 68+, mannozowy receptor dla makrofagów MMR+, CD 163+ i makrofagi fagocytuj¹ce RFD7+, dla których charakte-

4 148 Otorynolaryngologia, 2006, 5(4), rystyczny jest dojrza³y fenotyp makrofagów. Zastanawiaj¹ce, e w makrofagach b³ony w³aœciwej polipa stwierdzono istotny niedobór zabarwienia dla gronkowca z³ocistego w tkankach w porównaniu z kontrol¹. Te nowe dane sugeruj¹ zmniejszon¹ zdolnoœæ tych makrofagów do fagocytozy gronkowca z³ocistego, co jednak wymaga dalszych badañ czynnoœciowych. Interesuj¹cym jest, e brak obrony przeciwko gronkowcowi z³ocistemu wydaje siê zwiêkszaæ miejscow¹ odpowiedÿ immunologiczn¹ przeciw enterotoksynom gronkowca, co przejawia siê wzrostem swoistego IgE przeciw enterotoksynom, IgE ca³kowitego, ECP oraz IL-5 w tej grupie pacjentów w stosunku do grupy kontrolnej. Uwa a siê, e w skórze mo e wystêpowaæ inny wrodzony niedobór immunologiczny, jak na przyk³ad niedobór defensyn [32]; nie zosta³o to jednak potwierdzone w aktualnych badaniach nad polipami nosa [33]. Ostatnio opisano niedobór przeciwcia³ IgG2 przeciw enterotoksynie C1, którego kliniczne znaczenie nie jest jeszcze jasne [34] i powinno byæ zbadane w polipach. Jednak e, je eli to doniesienie zostanie potwierdzone, mo e wskazywaæ ono nie tylko na niedobory wrodzonej, lecz równie nabytej regulacji immunologicznej, co mo e predysponowaæ do rozwoju choroby zale nej od superantygenów gronkowcowych. Organizacja wtórnej tkanki limfatycznej i dane dotycz¹ce miejscowego tworzenia IgE przeciw enterotoksynom S. aureus W badaniach immunohistochemicznych tkanek polipa analizowanych pod k¹tem obecnoœci limfocytów B i T oraz IgE, w 25% próbek stwierdzono strukturê pêcherzykow¹, zaœ we wszystkich próbkach stwierdzono rozlane nagromadzenie tkanki limfoidalnej [18]. Pêcherzykowo-podobne struktury zbudowane s¹ z limfocytów T i B oraz barwi¹ siê dodatnio na obecnoœæ IgE oraz receptorów o niskim powinowactwie dla IgE, podczas gdy receptory o wysokim powinowactwie znaleziono jedynie poza tymi strukturami. Komórki osocza wykazuj¹ce ekspresjê CD38 wystêpuj¹ w znacznej iloœci w miejscach nagromadzenia tkanki limfoidalnej; wykazuj¹ one równie pozytywn¹ reakcjê na obecnoœæ IgE, CD3, FcεRI, lecz nie na CD23. St¹d gromadzenie siê limfocytów mo e byæ zwi¹zane z powstawaniem struktur pêcherzykowo-podobnych oraz z dojrzewaniem limfocytów B w kierunku komórek plazmatycznych wytwarzaj¹cych IgE. Co ciekawe, autorzy tej pracy wykazali przy³¹czanie siê zwi¹zanej z biotyn¹ enterotoksyny A do struktur pêcherzykowych i tkanki limfoidalnej polipów. Specyficznoœæ przy³¹czania enterotoksyn potwierdzono w barwieniu, w którym zastosowano nadmiar niezwi¹zanej z biotyn¹ enterotoksyny A w stosunku do enterotoksyny zwi¹zanej z biotyn¹; ca³kowicie zablokowa³o to sygna³. Co wiêcej, nie stwierdzono struktur pêcherzykowych ani przy³¹czania enterotoksyn w tkankach kontrolnych. Dane te wskazuj¹ na powstawanie wtórnej tkanki limfoidalnej z aktywacj¹ poliklonalnych komórek B w polipach nosa, spowodowan¹ przewlek³¹ kolonizacj¹ drobnoustrojami i stymulowanych przez enterotoksyny, co prawdopodobnie jest przyczyn¹ przestawienia na produkcjê IgE. Istnieje coraz wiêcej danych, e enterotoksyny mog¹ bezpoœrednio zaburzaæ sk³ad i aktywacjê limfocytów B. Czynnoœciowe badania limfocytów B wykaza³y, e bia- ³ka gronkowca z³ocistego indukuj¹ proliferacjê tych komórek [35]. Badania nad TSST-1 wskazuj¹, e superantygeny gronkowcowe mog¹ odgrywaæ wa n¹ rolê w modulacji alergii, jako e mog¹ one zwiêkszaæ zmianê izotypu i syntezê IgE zarówno in vitro [36], jak i in vivo na modelu myszy SCID [37]. Mimo, i indukcja aktywacji TSST-1 komórek B in vitro nie zachodzi wprost i zale y od wzrostu ekspresji ligandy CD40 na komórkach T, ostatnie badania dostarczy³y dowodów na efekt bezpoœredni, przez indukcjê ekspresji TSST-1 na komórkach B 7.2 [38], cz¹steczce, która nasila odpowiedÿ Th2 i bierze udzia³ w regulacji IgE. W b³onach œluzowych pacjentów chorych na astmê i sezonowy alergiczny nie yt nosa stwierdzono istotny odsetek mrna dla ³añcucha εige w komórkach B stosuj¹c hybrydyzacjê in situ [39-42], co potwierdza hipotezê o prawdziwie miejscowym wytwarzaniu IgE w b³onach œluzowych dróg oddechowych. Badanie pilota owe nad ekspresj¹ sygna- ³u przy ³¹cznej stymulacji takich ligand, jak CD40/ CD40 i CD28/B7 w limfocytach polipów nosa potwierdza te za³o enia (T. van Zele, dane nieopublikowane), podobnie jak aktualnie prowadzone badania nad miejscowym w³¹czaniem IgE [43]. Jak przedstawiano wy ej hodowla bakterii z przewodu œrodkowego nosa wykazywa³a zwiêkszon¹ kolonizacjê gronkowcem u pacjentów z polipami w stosunku do grupy kontrolnej [17], co by³o zwi¹zane ze znacz¹cym wzrostem stê enia IgE, albumin i liczby eozynofilów w tkankach polipa. Stê enie IgE ca³kowitego oraz IgE swoistego dla enterotoksyn we wszystkich klasach by³o wy sze w tkankach w porównaniu do osocza, jakkolwiek IgE swoiste dla enterotoksyn równie by³y wykrywane w surowicy osób z polipami [15], szczególnie przy wspó³istniej¹cej astmie. Stosunek IgE/albuminy w tkankach polipa by³ zró nicowany, ponownie wskazuj¹c, e tkankowe IgE jest wynikiem raczej miejscowego wytwarzania IgE ni z nap³ywu drog¹ naczyniow¹. Co wiêcej, przeciwcia³a IgE w tkankach polipa wykazuj¹ jedynie czêœciow¹ zale noœæ od przeciwcia³ IgE w surowicy oraz testów skórnych typu prick. W du ej podgrupie pacjentów stwierdzono typowe cechy ekspresji IgE w tkankach polipa: ekspresjê poliklonalnych IgE skierowanych przeciw powszechnym alergenom wziewnym oraz wysoki poziom IgE ca³kowitego. Wyniki te przypominaj¹ uzyskiwane w atopowym zapaleniu skóry, w którym kolonizacja zmienionej zapalnie skóry przez gronkowiec z³ocisty jest œciœle powi¹zana z wysokim poziomem IgE w surowicy oraz z ciê koœci¹ choroby [44].

5 Zhang N i wsp. Znaczenie enterotoksyn gronkowca z³ocistego w przewlek³ym zapaleniu zatok z polipami nosa Zwi¹zek enterotoksyn gronkowcowych z nadwra liwoœci¹ na aspirynê Od czasu pierwszych badañ pacjentów z miejscowym wytwarzaniem IgE przeciwko enterotoksynom gronkowca z³ocistego wykazano, e najwy sze stê enia IgE wystêpuj¹ u osób z nadwra liwoœci¹ na aspirynê. Dlatego te autorzy pracy pog³êbili obserwacjê tej grupy chorych, charakteryzuj¹cych siê niealergicznym, ale ciê kim zapaleniem, cierpi¹cych jednoczeœnie na astmê. 40 pacjentów z polipami nosa z Polski zosta³o zakwalifikowanych jako nadwra liwi na aspirynê (n=13, ASNP) lub jako toleruj¹cy aspirynê (n=27, ATNP) w oparciu o oskrzelowy test prowokacji aspiryn¹ [45]. Homogenaty przygotowane z tkanek polipów nosa oraz z ma- ³ owiny nosowej dolnej osób zdrowych przeanalizowane zosta³y pod k¹tem stê enia IL-5, ECP, IgE ca³kowitego i swoistego dla mieszanych enterotoksyn (A, C, TSST-1); ten test skryningowy opracowany zosta³ we wspó³pracy z SGO Johanssonem [46]. W supernatantach próbek pacjentów z polipami nosa w porównaniu do grupy kontrolnej obserwowano istotny wzrost stê enia IL-5, ca³kowitego IgE oraz IgE swoistych dla enterotoksyn, przy czym poziomy IgE swoistych korelowa³y z poziomami IL-5 i ECP. W dalszej czêœci badania pacjentów podzielono na dwie grupy w zale noœci od wra liwoœci na aspirynê. Stê enia IgE ca³kowitego oraz IgE swoistych dla mieszanych enterotoksyn (A, C, TSST-1) by³y istotnie wy sze w grupie osób nadwra liwych na aspirynê w stosunku do chorych toleruj¹cych aspirynê, jak równie grupy kontrolnej. Równie iloœci IL-5 oraz ECP by³y nadmierne u osób nadwra liwych i ró ni³y siê istotnie w stosunku do grupy osób toleruj¹cych aspirynê i grupy kontrolnej. Wyniki te potwierdzi³y, e odpowiedÿ immunologiczna na enterotoksyny by³a zwi¹zana z nadmiern¹ regulacj¹ zapalenia eozynofilowego i sugerowa³y mo liwy zwi¹zek miêdzy enterotoksynami a nadwra liwoœci¹ na aspirynê, który mo e byæ bezpoœredni (enterotoksyny indukuj¹ superantygeny) b¹dÿ poœredni (przez ciê koœæ zapalenia). Aby to wyjaœniæ, pacjenci nadwra liwi i toleruj¹cy aspirynê podzieleni zostali na dwie podgrupy - z i bez obecnych enterotoksyn. Z trzynastu pacjentów nadwra liwych na aspirynê u 7 z nich wykryto enterotoksyny, w porównaniu do 7 osób z 27 dobrze toleruj¹cych aspirynê i adnej z 12 osób w grupie kontrolnej. Stê enia markerów zapalenia (IL-5 i ECP) w grupie chorych nadwra liwych na aspirynê nie ró ni³y siê miêdzy osobami z i bez enterotoksyn, lecz ró nice tak e wystêpowa³y w stosunku do grupy kontrolnej. Dane te sugeruj¹ raczej poœredni zwi¹zek miêdzy nadwra liwoœci¹ na aspirynê a wystêpowaniem enterotoksyn. Dalsze badania, porównuj¹ce wytwarzanie eikozanoidów oraz markerów eozynofilowych u chorych z przewlek³ym zapaleniem b³ony œluzowej nosa i zatok z i bez polipów nosa, u pacjentów z polipami i nadwra liwoœci¹ na aspirynê oraz w b³onie œluzowej nosa u osób zdrowych, wykaza³y, e stê enia LTC 4 S, 5-LO mrna i LTC 4 /D 4 /E 4 wzrasta³y wraz z zaawansowaniem choroby (ró nice miêdzy grupami) [47]. Inne metabolity, jak COX-2 i prostaglandyna E 2 (PGE 2 ) istotnie mala³y wraz z ciê koœci¹ choroby. IL-5 oraz ECP by³y podwy szone w obu grupach chorych z polipami nosa w porównaniu do grupy kontrolnej i grupy z izolowanym przewlek³ym zapaleniem b³ony œluzowej nosa i zatok, ponadto by³y skorelowane dodatnio ze stê eniami LTC 4 /D 4 /E 4, zaœ ujemnie ze stê eniami PGE 2. Dane te potwierdzaj¹, e w przewlek³ym zapaleniu b³ony œluzowej nosa i zatok wystêpuj¹ zmiany w metabolizmie tkankowym eikozanoidów, nawet przy braku klinicznych objawów nadwra liwoœci na aspirynê i wydaj¹ siê byæ powi¹zane z ciê koœci¹ zapalenia eozynofilowego i enterotoksynami, które s¹ g³ównym modyfikatorem miejscowego i ogólnego zapalenia w polipach nosa. Nasze obserwacje zosta³y ostatnio potwierdzone przez Suh i wsp. [48], którzy badali przeciwcia³a IgE przeciw enterotoksynom i markery eozynofilów u chorych z astm¹ i z polipami nosa nadwra liwych i toleruj¹cych aspirynê. Autorzy ci równie stwierdzili wzrost stê enia ECP, ale nie poziomu IL-5 w tych grupach chorych i istotnie podwy szone poziomy IgE przeciwko enterotoksynom gronkowcowym u pacjentów z nadwra liwoœci¹ na aspirynê. Enterotoksyny gronkowcowe jako ³¹cznik z chorobami dolnych dróg oddechowych A do chwili obecnej istnia³y jedynie poœrednie dowody wskazuj¹ce, e enterotoksyny gronkowcowe mog¹ mieæ wp³yw na choroby dolnych dróg oddechowych, niezale nych od polipów nosa, szczególnie w odniesieniu do s³abo kontrolowanej astmy. W badaniach sk³adu TCR-V beta w komórkach pop³uczyn pêcherzykowo-oskrzelowych (BAL) oraz komórkach mononuklearnych krwi obwodowej osób ze s³abo kontrolowan¹ astm¹ (FEV1<75%), osób z astm¹ dobrze kontrolowan¹ oraz grupy kontrolnej, D. Leung i wsp. stwierdzili istotnie wiêksz¹ ekspresjê komórek T Vß8(+) w pop³uczynach BAL u s³abo kontrolowanych chorych z astm¹ w stosunku do innych grup. Wzrost liczby komórek T Vß8(+) stwierdzono w subpopulacjach CD4(+) i CD8(+), co sugeruje aktywacjê przez enterotoksyny gronkowcowe [49]. Badania na myszach, maj¹ce na celu ocenê typu reakcji immunologicznej wywo³anej przez ekspozycjê na superantygeny dzia³aj¹ce na b³ony œluzowe dróg oddechowych wykaza³y, e niskie dawki enterotoksyny B mog¹ powodowaæ odpowiedÿ zapaln¹ charakteryzuj¹c¹ siê nap³ywem do b³on œluzowych limfocytów, eozynofilów i neutrofilów. OdpowiedŸ ta zwi¹zana by³a z rozwojem zwiêkszonej reaktywnoœci dróg oddechowych u myszy nara onych na enterotoksyny B, co obserwowano u myszy Balb/c z wysokim poziomem IgE, jak

6 150 Otorynolaryngologia, 2006, 5(4), i u myszy C57B1/6 z nisk¹ i umiarkowan¹ odpowiedzi¹ IgE. Wyniki te sugerowa³y, e miejscowa odpowiedÿ immunologiczna w nastêpstwie podania superantygenów na b³onê œluzow¹ wyzwala unikaln¹ odpowiedÿ zapaln¹ dróg oddechowych u myszy, przypominaj¹c¹ pod licznymi wzglêdami astmê wewn¹trzpochodn¹ [50]. Podobny model eksperymentalny stosowany jest aktualnie w dalszych badaniach nad interakcjami miêdzy dzia³aniem enterotoksyn gronkowcowych na górne i dolne drogi oddechowe. Równie w badaniach u ludzi wzrasta liczba dowodów na bezpoœredni wp³yw enterotoksyn na choroby dolnych dróg oddechowych. W oparciu o nasze wczeœniejsze wyniki zastosowaliœmy czu³e i wysoce swoiste narzêdzie skryningowe, jakim jest mix gronkowcowej enterotoksyny A dla wykrycia swoistych IgE dla enterotoksyny A we krwi chorych na ³agodn¹ i ciê k¹ astmê, sklasyfikowan¹ ze wzglêdu na stan czynnoœciowy p³uc pacjentów oraz koniecznoœæ leczenia farmakologicznego, w stosunku do grupy kontrolnej. Stwierdzono, e IgE swoiste dla enterotoksyny wystêpowa³y istotnie czêœciej u astmatyków z ciê k¹ astm¹ (62%) w stosunku do kontroli (13%, p=0,01) i by³y one skorelowane ze stê eniem IgE w surowicy, ciê koœci¹ zapalenia eozynofilowego (ECP w surowicy) i odpowiedzi¹ na kortykosteroidy [46]. Trzydziestu jeden z 55 pacjentów z astm¹ wykazywa³o podwy szone stê enie ca³kowitego IgE w surowicy (>100 ku/l), zaœ 21 z nich mia³o swoiste przeciwcia³a IgE dla enterotoksyny A mix. Id¹c dalej, 10 osób mia³o podwy szone IgE ca³kowite, lecz nie IgE swoiste. Z 12 osób, u których IgE ca³kowite przekracza³o 500 ku/l, 9 mia³o dodatnie przeciwcia³a swoiste przeciw enterotoksynom gronkowcowym E, pozosta³e nie mia³y przeciwcia³. Dane te sugeruj¹, e u czêœci osób rolê odgrywaæ mog³y inne przeciwcia³a, oprócz testowanych, np. gronkowcowe. Dlatego zaproponowano, aby szczególn¹ rolê, jak¹ odgrywaj¹ enterotoksyny w patofizjologii chorób górnych i dolnych dróg oddechowych, w po³¹czeniu z nasileniem zapalenia eozynofilowego, syntezy IgE ca³kowitego, lecz równie nasilenia klinicznego choroby, potwierdziæ w badaniach na wiêkszej populacji, jak równie z uwzglêdnieniem wyników leczenia przeciwgronkowcowego. Autorzy tej pracy badali równie ekspresjê ca³kowitego IgE oraz IgE swoistych dla enterotoksyn u pacjentów z przewlek³¹ obturacyjn¹ chorob¹ p³uc (POChP), u palaczy bez POChP oraz w zdrowej grupie kontrolnej [51]. Swoiste przeciwcia³a IgE stwierdzono u 1/10 osób z grupy kontrolnej i u 1/16 palaczy, jednak e równie u 7/18 pacjentów ze stabiln¹ chorob¹ (38,9%) oraz u 21/54 osób z zaostrzeniem POChP (38,9%). Stê enia IgE u osób ze stabiln¹ lub zaostrzon¹ POChP by³y istotnie wy sze ni u palaczy czy w grupie kontrolnej. Co wiêcej, swoiste IgE obni a³o siê istotnie u pacjentów z hospitalizowanych z powodu zaostrzeñ choroby, czemu towarzyszy³a istotna poprawa FEV1. Dane te sugeruj¹, e superantygeny mog¹ odgrywaæ podobn¹ rolê w zaostrzeniach POChP, jak w ciê kiej astmie. Kliniczne zastosowanie i perspektywy Podsumowuj¹c, istniej¹ dane wskazuj¹ce, e superantygeny wytwarzane g³ównie przez gronkowca z³ocistego, lecz prawdopodobnie równie przez inne organizmy, jak paciorkowce, grzyby, wirusy [52] mog¹ mieæ du y wp³yw na choroby górnych i dolnych dróg oddechowych, takie jak polipy nosa czy astma. Wydaje siê, e superantygeny, je eli nie powoduj¹, to przynajmniej modyfikuj¹ przebieg ciê kich chorób dróg oddechowych [14,53]. Co wiêcej, enterotoksyny gronkowcowe mog¹ wp³ywaæ na mo liwoœci leczenia, jak wykazano jak w badaniach dokumentuj¹cych ich wp³yw na zmiany wra - liwoœci na kortykosteroidy i ekspresjê receptora glikokortykosteroidowego beta [54]. Deksametazon powoduje 99% zahamowanie proliferacji PBMC indukowanej fitohemaglutynin¹ (PTH), lecz jedynie 19% zahamowanie proliferacji indukowanej enterotoksyn¹ B, 26% - toksyn¹ TSST-1 i 29% enterotoksyn¹ E, co wskazuje, e superantygeny mog¹ indukowaæ niewra liwoœæ na steroidy. W tym samym czasie stymulacja normalnego PBMC przez enterotoksynê B powodowa³a istotny wzrost ekspresji receptorów glikokortykosteroidowych beta w porównaniu do PTH i niepobudzanych komórek, co mo e mieæ znaczenie w indukowaniu opornoœci na glikokortykosteroidy. Dla celów diagnostycznych gronkowiec z³ocisty mo e byæ wykrywany w przewodzie nosowym œrodkowym w wymazach z nosa, lecz jego obecnoœæ nie œwiadczy o wytwarzaniu enterotoksyn i rozwoju zwi¹zanej z nimi odpowiedzi immunologicznej. Ewentualne wytwarzanie enterotoksyn przez te szczepy mo e byæ wykazane hodowlach bakteryjnych za pomoc¹ PCR lub oceny bia- ³ek, jednak e badania kliniczne dla wykazania znaczenia tych testów u indywidualnego pacjenta nie by³y prowadzone. Zdolnoœæ do wytwarzania enterotoksyn przez dany drobnoustrój mo e równie byæ ró na w zale noœci od warunków wewn¹trz nosa czy liczby kolonii. Przeciwnie, obecnoœæ swoistych przeciwcia³ IgE dla enterotoksyn wskazuje na przebyt¹ lub aktualn¹ stymulacjê miejscow¹ uk³adu immunologicznego przez odpowiednie enterotoksyny i mo e byæ badana w homogenatach tkankowych. Poliklonalna odpowiedÿ IgE, wysoki poziom IgE ca³kowitego i podwy szony poziom mediatorów eozynofilowych (ECP) mo e wskazywaæ na aktywnoœæ superantygenów. Co wiêcej, gronkowiec mo e byæ obecnie barwiony œródnab³onkowo w ocenie immunohistochemicznej, jednak e barwienie pozytywne znowu niekoniecznie musi wskazywaæ na swoist¹ odpowiedÿ immunologiczn¹. Potencjalne dzia³anie terapeutyczne postêpowania polegaj¹cego na eradykacji gronkowca z³ocistego w poli-

7 Zhang N i wsp. Znaczenie enterotoksyn gronkowca z³ocistego w przewlek³ym zapaleniu zatok z polipami nosa pach nosa czy astmie nie by³o jeszcze oceniane, choæ aktualnie prowadzone s¹ obszerne badania DBPCR. Wnioski terapeutyczne mo na wyci¹gn¹æ na podstawie atopowego zapalenia skóry, choroby, w której wystêpuje jednoczesne dzia³anie modyfikuj¹ce superantygenów Staphylococcus aureus na zapalenie i ciê koœæ przebiegu choroby. Skóra nawet 100% osób z atopowym zapaleniem skóry jest zasiedlona przez kolonie gronkowca z³ocistego, z których 65% wytwarza enterotoksyny o w³aœciwoœciach superantygenów. Dziesiêciu pacjentów leczono antybiotykiem doustnie, miejscowo stosowan¹ mia³o maœæ z chlorheksydyn¹, do nozdrzy przednich podawano maœæ z mupirocyn¹ (np. Bactroban) oraz co dzieñ stosowano k¹piel z nadmanganianem potasu [55]. Dodatkowo ich partnerzy leczeni byli miejscowo. Ciê - koœæ atopowego zapalenia skóry obni y³a siê u 9 z 10 pacjentów, którzy otrzymywali leczenie antybiotykiem i efekt ten by³ bardziej zaznaczony u osób z bardziej nasilon¹ chorob¹ (w skali punktowej) na pocz¹tku leczenia. Tak wiêc, leczenie antybakteryjne prowadzi³o do istotnej, choæ czasowej poprawy atopowego zapalenia skóry osób zaka onych gronkowcem z³ocistym. Podobnego efektu mo na oczekiwaæ w polipach nosa, jednak- e wymaga to potwierdzenia w dalszych badaniach. W przysz³oœci mog¹ zostaæ rozwiniête inne formy leczenia pozwalaj¹ce na trwa³¹ poprawê, takie jak d³ugotrwa³e leczenie antybiotykiem aktywnym wewn¹trzkomórkowo w po³¹czeniu z kortykosteroidami w celu os³abienia odpowiedzi immunologicznej i wzmo enia wra - liwoœci na steroidy, terapia antybiotykami po³¹czona z lekami aktywnymi wewn¹trzkomórkowo lub zastosowanie szczepieñ przeciwko drobnoustrojom. Piœmiennictwo 1. Rark HS, Jung KS, Shute J, Robert K, Holgate ST, Djukanovic R (1997) Allergen-induced release of GM-CSF and IL-8 in vitro by nasal polyp tissue from atopic subjects prolongs eosinophil survival. Eur Respir J 7: Simon HU, Yousefi S, Schranz C, Schapowal A, Bachert C, Blaser K (1997) Direct demonstration of delayed eosinophil apoptosis as a mechanism causing tissue eosinophilia. J Immunol 158: Bachert C, Gevaert P Holtappels G, Johansson SG, Van Cauwenberge P (2001) Total and specific IgE in nasal polyps is related to local eosinophilic inflammation. J Allergy Clin Immunol 107: Conley DB, Tripathi A, Ditto AM, Reid K, Grammer LC, Kern RC (2004) Chronic sinusitis with nasal polyps: staphylococcal exotoxin immunoglobulin E and cellular inflammation. Am J Rhinol 18: Caplin I, Haynes TJ, Spahn J (1971) Are nasal polyps an allergic phenomenon? Ann Allergy 29: Farthing Mill, Jeffries DJ, Anderson J (1994) Infectious Diseases, Tropical Medicine and Sexually Transmitted Diseases. In: KUMAR, P, CLARK, M, eds. Clinical Medicine, 3rd edn. London: Baillie rc Tindall, Balaban N, Rasooly A (2000) Staphylococcal enterotoxins. Int J Food Microbiol 61: Yarwood JM, Mccormick JK, Schlievert PM (2001) Identification of a novel two-component regulatory system that acts in global regulation of virulence factors of Staphylococcus aureus. J Bacteriol 183: Jarraud S, Peyrat MA, Lim A, et al. (2001) EGC, a highly prevalent operon of enterotoxin gene, forms a putative nursery of superantigens in Staphylococcus aureus. J Immunol 166: De Mani MC, Fernandez MM, Sundberg El, et al. (2004) Cloning, expression and interaction of human T-cell receptors with the bacterial superantigen SSA. Eur J Biochem 271: Sutkowski N, Chen G, Calderon 0, Huber BT (2004) Epstein- Baa virus latent membrane protein LMP-2A is sufficient for transactivation of the human endogenous retrovirus HERV-K18 superantigen. J Viral 78: Pobezinskaya Y, Chervonsky AV, Golovkina TV (2004) Initial stages of mammary tumor virus infection are superantigen undependent. J Immunol 172: Llewelyn M, Sriskandan S. Peakman M, et al. (2004) HLA class LI polymorphisms determine responses to bacterial superantigens. J Immunol 172: Bachert C, van Zele T, Gevaert F, De Schrijver L, van Cauwenberge P (2003) Superantigens and nasal polyps. Curr Allergy Asthma Rep 3: Tripathi A, Conley Dli, Grantmer LC, et al. (2004) Imntunoglobulun F to staphylococcal and streptococcal toxins in patients with chronic sinusitis/nasal polyposis. Laryngoscope 114: Gittelman F, Jacobs I, Lebowitz A, Tiemo P (1991) Staphylococcus aureus nasal carriage in patients with rhinosinusitis. Laryngoscope 101: van Zele T, Gevaert F, Watelet JB, et al. (2004) Staphylococcus aureus colonization and IgE antibody formation to enterotoxins is increased in nasal polyposis. J Allergy Clin Immunol 114: Gevaert P, Holtappels G, Johansson SO, Cuvelier C, Cauwenberge P, Bachert C (2005) Organization of secondary lymphoid tissue and local IgE formation to Staphylococcus aureus enterotoxuns in nasal polyp tissue. Allergy 60: Alexander RH, Hudson MC (2001) Factors influencing the internalization of Staphylococcus aureus and impacts on the course of infections in humans. Appl Microbiol Biotechnol 56: von Eiff C, Proctor RA. Peters G (2000) Small colony variants of Staphylococci: a link to persistent infections. Ben Munch Tierarztl Wochenschr 113: von Eiff C, Becker K, Metze D, et al. (2001) Intracellular persistence of Staphylococcus aureus small-colony variants within keratinocytes: a cause for antibiotic treatment failure in a patient with darien s disease. Clin Infect Dis 32: Jevon M, Guo C, Ma B, et al. (1999) Mechanisms of internalization of Staphylococcus aureus by cultured human osteoblasts. Infect Immun 67: Ellington JK, Reilly SS, Ramp WK, Smeltzer MS, Kellam JF, Hudson MC (1999) Mechanisms of Staphylococcus aureus invasion of cultured osteoblasts. Microb Pathog 26:

8 152 Otorynolaryngologia, 2006, 5(4), Kahl BC, Goulian M, van Wamel W, et al. (2000) Staphylococcus aureus RN6390 replicates and induces apoptosis in a pulmonary epithelial cell line. Infect Immun 68: Jett BD, Gilmore MS (2002) Internalization of Staphylococcus aureus by human corneal epithelial cells: role of bacterial fibronectin-binding protein and host cell factors. Infect Immun 70: Kintarak S, Whawell SA, Speight PM. Packer S, Nair SF (2004) Internalization of Staphylococcus aureus by human keratinocytes. Infect Immun 72: da Silva MC. Zahm JM, Gras D, et al. (2004) Dynamic interaction betwccn airway epithelial cells and Staphylococcus aureus. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 287: L Dziewanowska K, Carson AR, Patti JM, Deobald CF, Bayles KW, Bohach GA (2000) Staphylococcal fibronectin binding protein interacts with heat shock protein 60 and integrins: role in internalization by epithelial cells. Infect Immun 68: Fowler T, Wann ER, Joh D, Johansson S, Foster Ti, Hook M (2000) Cellular invasion by Staphylococcus aureus involves a flbronectin bridge between the bacterial fibronectin-binding MSCRAMMs and host cell beta1 integrins. Eur J Cell Biol 79: Krut O, Sommer H, Kronke M (2004) Antibiotic-induced persistence of cytotoxic Staphylococcus aureus in non-phagocytic cells. J Antimicrob Chemother 53: Claeys S, Van Hoecke H, Holtappels G, et al. (2005) Nasal polyps in patients with and without cystic fibrosis: a differentiation by innate markers and inflammatory mediators. Clin Exp Allergy 35: Ong PY, Ohtake T, Brandt C, et al. (2002) Endogenous antimicrobial peptides and skin infections in atopic dermatitis. N Engl J Med. 347: Claeys S, De Belder T, Holtappels G, et al. (2004) Macrophage mannose receptor in chronic sinus disease. Allergy 59: Mrabet-Dahbi S, Breuer K, Klotz M, et al. (2005) Deficiency in immunoglobulin G2 antibodies against staphylococcal enterotoxin C1 defines a subgroup of patients with atopic dermatitis. Clin Exp Allergy 35: Inganas M, Johansson SG, Bennich HH (1980) Interaction of human polyclonal IgE and IgG from different species with protein A from Staphylococcus aureus: demonstration of protein-a-reactive sites located in the Fab2 fragment of human IgG. Scand J Immunol 12: Jabara HH, Geha RS (1996) The superantigen toxic shock syndrome toxin-1 induces CD4O ligand expression and modulates IgE isotype switching. Int Immunol 8: Tumang JR, Zhou JL, Gietl D, Crow MK, Elkon KB, Friedman SM (1996) T helper cell-dependent, microbial superantigen mediated B cell activation in vivo. Autoimmunity 24: Hofer MF, Harbeck RJ, Schlievert PM, Leung DY (1999) Staphylococcal toxins augment specific IgE responses by atopic patients exposed to allergen. J Invest Dermatol 112: Ying S, Humbert M, Meng Q, et al. (2001) Local expression of epsilon germline gene transcripts and RNA for the epsilon heavy chain of IgE in the bronchial mucosa in atopic and nonatopic asthma. J Allergy Clin Immunol 107: Kleinjan A, Vinke JG, Severijnen LW, Fokkens WJ (2000) Local production and detection of (specific) IgE in nasal B-cells and plasma cells of allergic rhinitis patients. Eur Respir 115: Durham SR, Gould HJ, Thienes CP, et al. (1997) Expression of epsilon germ-line gene transcripts and mrna for the epsilon heavy chain of IgE in nasal B cells and the effects of topical corticosteroid. Eur J Immunol 27: Smurthwaite L, Walker SN, Wilson DR, et al. (2001) Persistent IgE synthesis in the nasal mucosa of hay fever patients. Eur J Immunol 31: Coker HA, Durham SR, Gould HI (2003) Local somatic hypermutation and class switch recombination in the nasal mucosa of allergic rhinitis patients. J Immunol 171: Zollner TM, Wichelhaus TA, Hartung A, et at. (2000) Colonization with superantigen-producung Staphylococcus aureus is associated with increased severity of atopic dermatitis. Clin Exp Allergy 30: Perez-Novo CA, Kowalski ML, Kuna F, et al. (2004) Aspirin sensitivity and IgE antibodies to Staphylococcus aureus enterotoxins in nasal polyposis: studies on the relationship. Int Arch Allergy Immunol 133: Bachert C, Geysers P, Howarth F, Holtappels G, van Cauwenberge P, Johansson SG (2003) IgE to Staphylococcus aureus enterotoxins in serum is related to severity of asthma. J Allergy Clin Immunol 111: Perez-Novo C, Watelet JB, Claeys C, van Cauwenberge P, Bachert C (2005) Prostaglandin, leukotriene, and lipoxin balance in chronic rhinosinusitis with and without nasal polyposis. JACI, in press. 48. Sub YI, Yoon Si, Sampson AP, et al. (2004) Specific immunoglobulin E for staphyiococcal enterotoxuns irs nasal polyps from patients with aspirin-intolerant asthma. Clin Exp Allergy 34: Hauk P1, Wenzel SE, Trumble AE, Szefler SI, Leuiig DY (1999) Increased T-cell receptor vbeta8+ T cells in bronchoalveolar lavage fluid of subjects with poorly controlled asthma: a potential role for microbial superantigens. J Allergy Clin Immunol 104: Herz U, Ruckert P. Wollenhaupt K, et al. (1999) Airway exposure to bacterial superantigen (SEB) induces lymphocyte-dependent airway inflammation associated with increased airway responsiveness - a model for non-allergic asthma. Eur J Immunol 29: Rohde Cr, Gevaert F, Holtappels G, et al. (2004) Increased IgE-antibodies to Staphylococcus aureus enterotoxins in patients with COPD. Respir Med 98: Schubert MS (2001) A superantigen hypothesis for the pathogenesis of chronic hypertrophic rhinosinusitis, allergic fungal sinusitis, and related disorders. Ann Allergy Asthma Immunol 87: Bachert C, Gevaert F, van Cauwenberge P (2002) Staphylococcus aureus ersterotoxins: a key in airway disease? Allergy 57: Hauk PJ, Hamid QA, Chrousos GP, Lcung DY (2000) Induction of corticosteroid insensitivity in human PBMCs by microbial super-antigens. J Allergy Clin Immunol 105: Breuer K, Häussler S, Kapp A, Werfel T (2002) Staphylococcus aureus: colonizing features and influence of an antibacterial treatment in adults with atopic dermatitis. Br J Dermatol 147: