Izolacja i oczyszczanie DNA jest kluczowym etapem większości. procedur stosowanych w biologii molekularnej, diagnostyce i innych

Transkrypt

1 izolacja DNA

2 Izolacja i oczyszczanie DNA jest kluczowym etapem większości procedur stosowanych w biologii molekularnej, diagnostyce i innych badaniach. Głównym celem tego etapu badań jest uzyskanie wysokiej jakości i czystości materiału biologicznego, niezależnie od źródła jego pochodzenia. Wszystkie zestawy do izolacji DNA firmy charakteryzują się wysoką wydajnością, wyjątkową czystością uzyskanego produktu finalnego i powtarzalnością. Wychodząc naprzeciw Twoich oczekiwań oraz potrzeb stworzymy dla Ciebie spersonalizowany pakiet produktów, w którym ilość i rodzaj artykułu określasz sam.

3 ScienceAgarose Gel DNA Zestaw do izolacji DNA z żelu agarozowego Fragmenty DNA wiążą się z membraną krzemionkową w buforze o wysokim stężeniu soli. Metabolity komórkowe oraz proteiny są usuwane w wyniku serii wymywań i wirowań. Następnie fragmenty DNA są wymywane w buforze o niskim stężeniu soli i wysokim ph. Zestaw nie zawiera trującego fenolu Wysokiej jakości rozwór wiążący, bez jodku sodu i nadchloranów Bufor wiążący jest koloru żółtego, co ułatwia kontrolę ph w czasie topienia żelu Wydajność dla krótkich fragmentów (około 100bp) może osiągnąć 75% AGA AGA 25 ScienceAgarose Gel DNA AGA AGA AGA AGA AGA AGA

4 ScienceBacteria DNA Zestaw do izolacji DNA z bakterii Działanie zestawu polega na działaniu buforu/proteinazy K do natychmiastowej lizy komórek i inaktywacji komórkowych nukleaz. DNA selektywnie adsorbuje się na krzemionkowej membranie w roztworze soli o wysokim stężeniu. Po serii etapów wymywania i wirowania w celu usunięcia metabolitów komórkowych, protein, etc. ostatnim krokiem jest zastosowanie słabego roztworu soli w celu wypłukania oczyszczonego genomowego DNA z krzemionkowej membrany. Membrany krzemionkowe w kolumnie pochodzą od znanego producenta Nie stosuje się szkodliwego fenolu i innych podobnych środków Bardzo prosta i szybka metoda, pojedyncza próbka może być oznaczona w ciągu 30 minut Wielokrotne przemywanie zapewnia wysoką czystość DNA. Typowy stosunek OD260/OD280 wynosi 1,7~1,9 a średnia długość wynosi 30kb-50kb. Oczyszczone DNA może stosowane bezpośrednio do PCR i hybrydyzacji Southern-blot BAC BAC 25 ScienceBacteria DNA BAC BAC BAC BAC BAC BAC

5 ScienceBio Trace DNA Zestaw do izolacji DNA ze śladów biologicznych Działanie zestawu polega na zastosowaniu wyjątkowego buforu/proteinazy K do natychmiastowej lizy komórek i inaktywacji komórkowych nukleaz. Następnie DNA selektywnie adsorbuje na krzemionkowej membranie w roztworze soli o wysokim stężeniu. Kolejnym etapem jest szereg powtórzeń wymywania i wirowania w celu usunięcia metabolitów komórkowych i protein, etc. Ostatnim krokiem jest przepłukanie DNA z membrany krzemionkowej za pomocą słabego roztworu soli. Przenośnik zastosowany w zestawie powoduje wytrącenie mikro ilości DNA. Zestaw można stosować w celu izolacji DNA z małych ilości krwi, tkanek, plazmy, serum, plam krwi, mieszków włosowych oraz innych próbek o niewielkich rozmiarach BIO BIO 25 ScienceBio Trace DNA BIO BIO BIO BIO BIO BIO

6 ScienceBlood DNA Zestaw do izolacji DNA z krwi Działanie zestawu polega na działaniu buforu/proteinazy K do natychmiastowej lizy komórek i inaktywacji komórkowych nukleaz. Następnie DNA selektywnie adsorbuje na krzemionkowej membranie w roztworze soli o wysokim stężeniu. Kolejnym etapem jest szereg powtórzeń wymywania i wirowania w celu usunięcia metabolitów komórkowych i protein, etc. Ostatnim krokiem jest przepłukanie DNA z membrany krzemionkowej za pomocą buforu w postaci słabego roztworu soli. Brak konieczności stosowania szkodliwego fenolu, nie wymaga także oddzielania etanolu Prosta i szybka metoda, pojedyncze oznaczenie może być wykonane w ciągu 20 minut Wielokrotne przemywanie zapewnia wysoką czystość DNA Ilość uzyskiwanego DNA wynosi od 3 do 6 µg z 200 µl krwi BLO BLO 25 ScienceBlood DNA BLO BLO BLO BLO BLO BLO

7 SciencePCR Products DNA Zestaw do izolacji DNA po reakcjach enzymatycznych Fragmenty DNA wiążą się z membraną krzemionkową w buforze o wysokim stężeniu soli. Metabolity komórkowe i proteiny są usuwane w serii wymywań i wirowań. Ostatecznie fragmenty DNA są wymywane w buforze o niskiej sile jonowej i wysokim ph. Zestaw nie zawiera trującego fenolu Wysokiej jakości rozwór wiążący, bez jodku sodu i nadchloranów Bufor wiążący jest koloru żółtego, co ułatwia kontrolę ph w czasie topienia żelu PCR PCR 25 SciencePCR Products DNA PCR PCR PCR PCR PCR PCR

8 SciencePlant DNA Zestaw do izolacji DNA z roślin Sucha lub świeża tkanka roślinna jest umieszczana w buforze zawierającym specjalny detergent, w którym ulega zniszczeniu i końcowo lizie. Proteiny, polisacharydy i pozostałości komórkowe są w następnym kroku wytrącane. Zanieczyszczenia są następnie usunięte za pomocą izopropanolu. DNA wiąże się z membraną krzemionkową, podczas gdy zanieczyszczenia takie jak proteiny i polisacharydy są skutecznie usuwane w dwoch etapach płukania. Oczyszczone DNA jest wymywane w małej objętości buforu o niskiej sile jonowej lub w wodzie. Szybka izolacja- poniżej 60 minut Wysoko oczyszczone DNA charakteryzuje się stosunkiem A260/A280 pomiędzy 1.7 a 1.9 co kwalifikuje materiał do wykorzystania w PCR, hybrydyzacji Southern-blot lub bezpośredniego przetwarzania Stabilne, wysokiej jakości membrany i idealny system buforów zapewnia powtarzalność wyników PLA PLA 25 SciencePlant DNA PLA PLA PLA PLA PLA PLA

9 SciencePlasmid DNA Zestaw do izolacji plazmidowego DNA Działanie zestawu bazuje na zmodyfikowanej procedurze lizy alkalicznym dodecylosiarczanem sodu (SDS), następującej po osadzeniu plazmidowego DNA na membranie krzemionkowej w warunkach wysokiego zasolenia i niskiego ph. Proteiny oraz zanieczyszczenia o niskiej masie atomowej są usuwane buforem PE i WB. Następnie plazmidowe DNA jest wymywane buforem o niskim zasoleniu i wysokim ph. Szybka i wygodna metoda. Nie zawiera szkodliwego fenolu etc., nie wymaga także oddzielania etanolu Wielokrotne przemywanie zapewnia wysoką czystość DNA, które można stosować do wszelkich analiz molekularnych takich jak PCR, hybrydyzacja Southern-blot lub bezpośrednie przetwarzanie Membrany krzemionkowe w kolumnie filtracyjnej pochodzą od znanego wytwórcy Unikalna zawartość jest w stanie efektywnie usuwać nukleazę, nawet w bogatych w nią próbkach PLM PLM 25 SciencePlasmid DNA PLM PLM PLM PLM PLM PLM

10 ScienceSoil DNA Zestaw do izolacji DNA z gleby Unikalny system ekstrakcji i destrukcji ścian komórkowych pozwala na szybki rozpad ścian komórek i jednocześnie inaktywuje wewnątrzkomórkową nukleazę co pozwala na zachowanie integralności genomowego DNA. Kolumna oczyszczająca, po zastosowaniu specjalnych zabiegów może efektywnie usuwać zanieczyszczenia i kwasy humusowe. Zastosowanie zestawu może znacząco podnieść czystość DNA. Jest on także szybki i odpowiedni dla PCR oraz innych reakcji, którym poddawane będzie DNA. Kolumna oczyszczająca, po zastosowaniu specjalnych zabiegów może efektywnie usuwać zanieczyszczenia i kwasy humusowe Wysoka kompatybilność możliwość zastosowania w różnych typach gleby, mułów, osadów Nie zawiera toksycznych roztworów takich jak fenol, nie wymaga także oddzielania etanolu. Prędkość i prostota, pojedyncza analiza może zostać zrealizowana w przeciągu 60 min. Wysoka czystość, wartość OD260/OD280 osiąga wielkość 1,7-1,9 co kwalifikuje materiał do wykorzystania w PCR, hybrydyzacji Southern-blot lub bezpośredniego przetwarzania SOI SOI 25 ScienceSoil DNA SOI SOI SOI SOI SOI SOI

11 ScienceSwab DNA Zestaw do izolacji DNA z wymazu policzkowego Niezawodne i unikalne działanie proteazy K i buforu wiążącego szybko inaktywuje nukleazy komórkowe. DNA selektywnie absorbuje się na membranie krzemionkowej w roztworze o wysokim stężeniu soli. Metabolity i białka są efektywnie wymywane poprzez serie wymywań i wirowań. Końcowa elucja DNA z membrany następuje w buforze i niskim stężeniu soli. Metoda prosta i szybka Jedna izolacja może zostać ukończona w ciągu 30 minut Wydajność dla pojedynczej próbki wynosi µg Wielokrotne wymywania zapewnia wysoką czystość DNA Brak konieczności stosowania trującego fenolu Zestaw odpowiedni do przeprowadzania izolacji na próbkach świeżych i mrożonych SWA SWA 25 ScienceSwab DNA SWA SWA SWA SWA SWA SWA

12 ScienceTissue DNA Zestaw do izolacji DNA z tkanek i komórek Zestaw dotyczy unikalnego układu buforu wiążącego/proteazy K służącego do szybkiej lizy komórek i dezaktywacji nukleazy komórkowej. DNA jest następnie wybiórczo absorbowana na membranie krzemionkowej w roztworze o wysokim stężeniu soli. Po tym następuje seria wymywań i wirowań w celu usunięcia m.in. metabolitów komórkowych i protein. W ostatnim kroku używa się roztworu o niskim stężeniu soli do wymycia z membrany i oczyszczenia genomowego DNA. Nie wymaga stosowania trującego fenolu Procedura jest prosta i szybka, pojedyncza izolacja może być wykonana w 30 min Wysoka czystość, wartość OD260/OD280 osiąga wielkość 1,7-1,9 co kwalifikuje materiał do wykorzystania w PCR, hybrydyzacji Southern-blot lub bezpośredniego przetwarzania TIS TIS 25 ScienceTissue DNA TIS TIS TIS TIS TIS TIS

13 ScienceYeast DNA Zestaw do izolacji DNA z drożdży Zestaw zawiera innowacyjny system ekstrakcji i lizy komórek zapewniający natychmiastowy rozpad komórek i dezaktywowanie komórkowej nukleazy. Wyeliminowano stosowanie szklanych perełek co gwarantuje zachowanie integralności genomowego DNA. Gwarantuje się wysoką czystość DNA, które bez kolejnych stopni oczyszczania może być wykorzystywane do kolejnych badań. Błyskawiczna izolacja DNA, poniżej 30 minut Duża ilość uzyskiwanego DNA µg, izolowanego z 3 ml kultury drożdży w logarytmicznej fazie wzrostu Wysoka czystość, oczyszczone DNA zwykle posiada stosunek A260/A280 pomiędzy 1,7 a 1,9 Wyizolowane DNA dłuższe niż 50 Kb może być bezpośrednio stosowane w kolejnych analizach wliczając PCR, hybrydyzację Southern-blot, trawienie enzymami restrykcyjnymi Kompatybilność, zestaw odpowiedni dla różnych rodzajów drożdży i grzybów YEA YEA 25 ScienceYeast DNA YEA YEA YEA YEA YEA YEA

14 ScienceVirus DNA/RNA isolation Kit Zestaw do izolacji DNA /RNA z wirusów Zestaw ten, podobnie jak w zestawie ScienceTissue DNA, swoją skuteczność zawdzięcza pracy proteinazy K i buforu wiążącego, które powodują lizę i dezaktywację nukleazy komórkowej. Po tym etapie następuje wybiórcza absorpcja DNA na membranie krzemionkowej. Pe serii wymywań i wirowań, pobyciu się wszelkich zanieczyszczeń, genomowe DNA wymywa się z membrany. Nie wymaga stosowania trującego fenolu i wytrącania etanolem Prosta i szybka metoda. Jedna izolacja może być ukończona już w ciągu 20min. Wielokrotne wymywanie zapewnia wysoką czystość DNA VIR VIR 25 ScienceVirus DNA/RNA VIR VIR VIR VIR VIR VIR

15 izolacja RNA

16 Izolacja RNA to specyficzny proces, który wymaga wielkiej precyzji i użycia najwyższej jakości odczynników. Jest jednak powszechnie przeprowadzany w wielu laboratoriach biotechnologicznych lub diagnostycznych. Zestawy do izolacji gwarantują szybką i wydajną izolację RNA wysokiej czystości. Posiadamy w ofercie zróżnicowane zestawy do wybranych zastosowań. Wychodząc naprzeciw Twoich oczekiwań oraz potrzeb możemy stworzyć spersonalizowany pakiet produktów, w którym ilość i rodzaj artykułu określasz sam.

17 ScienceBlood RNA Zestaw do izolacji RNA z krwi Zestaw dotyczy ulepszonej metody jednoetapowej lizy próbki i dezaktywacji rybonukleaz za pomocą tiocyjanianu guanidyny i fenolu, przy czym genomowe DNA, 18 i 28s RNA są usuwane przez pierwszą kolumnę z membraną krzemionkową. Następnie mikrorna (mirna, srna i inne RNA mniejsze niż 200bp) jest absorbowane przez drugą kolumnę z membraną krzemionkową. Wielokrotne wymywanie może zapewnić wysoką czystość otrzymanego mikrorna Różnica między poszczególnymi kolumnami jest nieznaczna, więc powtarzalność testów jest niezawodna Membrany krzemionkowe obecne w kolumnie pochodzą od światowej sławy producenta MikroRNA może być wymywane z membrany krzemionkowej bez użycia etanolu Bufor MRL zawiera pewne specjalne składniki, które mogą skutecznie oczyścić genomowe DNA z zanieczyszczeń BLO BLO 25 ScienceBlood RNA BLO BLO BLO BLO BLO BLO

18 SciencePlant microrna Zestaw do izolacji micro RNA z roślin Zestaw służy do jednoetapowej lizy próbek i dezaktywacji rybonukleaz przy użyciu ulepszonego tiocyjanianu guanidyny i fenolu. Genomowe DNA i 18s, 28s RNA zostają usunięte przy użyciu pierwszej kolumny z membraną krzemionkową. Następnie mikro jest absorbowane przez drugą kolumnę. Po serii naprzemiennego wymywania i wytrząsania, które stosuje się w celu usunięcia metabolitów komórki, białek i in., ostatecznie microrna zostaje wymywane z membrany krzemionkowej przy użyciu nisko zasolonej, wolnej od RNaz wody. Wielokrotne wymywanie może zapewnić wysoką czystość otrzymanego microrna Różnica między poszczególnymi kolumnami jest nieznaczna, więc powtarzalność testów jest niezawodna Membrany krzemionkowe obecne w kolumnie pochodzą od światowej sławy producenta PLA PLA 25 SciencePlant microrna PLA PLA PLA PLA PLA PLA

19 SciencePlant RNA I Zestaw do izolacji RNA z roślin I Ten unikalny produkt, inny od metody wykorzystującej izocyjanian guanidyny i fenolu, stosowany do ekstrakcji RNA z próbek roślin, ma zdolność skutecznego oddzielania RNA z polisacharydów. Za pomocą tego zestawu przetestowano około 100 gatunków próbek roślinnych i potwierdzono poprawę stosunku odzysku RNA. Stabilność, wydajność RNA porównywalna z wydajnością wysokiej jakości membrany absorbującej Wysoka czystość, w szczególności membran absorpcyjnych i wymywania w celu usunięcia protein i innych zanieczyszczeń PLA.I PLA.I PLA.I 50 SciencePlant RNA I PLA.I PLA.I PLA.I PLA.I PLA.I

20 ScienceTotal RNA Zestaw do izolacji całkowitego RNA Technologia ta łączy właściwość selektywnego wiązania membrany krzemionkowej z szybkością technologii MicroSpin. Wyspecjalizowany system Buforu bogatego w sole umożliwia otrzymanie nawet 100µg RNA dłuższego niż 200 zasad związanego z membraną. Próbki biologiczne są najpierw poddane lizie i homogenizowane w obecności wysoko denaturującego buforu zawierającego tiocyjanian guanidyny, który natychmiastowo dezaktywuje RNazy. Próbka jest nanoszona na kolumnę ze membraną krzemionkową, która wiąże całe RNA. Wysokiej czystości RNA jest następnie eluowany w µl wody. Stabilność, wydajność RNA porównywalna z wydajnością wysokiej jakości membrany absorbującej Wysoka czystość, w szczególności membran absorpcyjnych i wymywania w celu usunięcia protein i innych zanieczyszczeń TOT TOT 25 ScienceTotal RNA TOT TOT TOT TOT TOT TOT

21 odczynniki do PCR polimerazy

22 W obecnych czasach polimerazy stały się niezbędnym elementem prac badawczych i badań diagnostycznych w wielu laboratoriach lub ośrodkach badawczych. Szeroko stosowane są w reakcjach PCR czy podczas ekwencjonowania. posiada w swojej ofercie szeroką gamę polimeraz, zróżnicowanych ze względu na cel stosowania. Polimerazy te dają komfort uzyskania powtarzalnych i rzetelnych wyników. Wychodząc naprzeciw Twoich oczekiwań oraz potrzeb stworzymy dla Ciebie spersonalizowany pakiet produktów, w którym ilość i rodzaj artykułu określasz sam.

23 Polimeraza Science Taq Polimeraza Taq jest polimerazą DNA zależną od DNA. Jest enzymem wyizolowanym z bakterii Thermus aquaticus YT-1, składającym się z pojedynczego polipeptydu o masie cząsteczkowej około 94 kda. Jest stabilna termicznie, dzięki czemu jest obecnie używana do większości standardowych reakcji PCR. Właściwością wykorzystywaną przy klonowaniu jest fakt, że po reakcji polimeraza ta zostawia na końcu 3 kilka nukleotydów adeninowych. Polimeraza taq jest zdolna do dokonania replikacji 1000 par zasad w 30s w temperaturze 72 C. Do swojej aktywności wymaga matrycy i odpowiedniego startera, którym jest krótki, dwuniciowy fragment, powstający zwykle przez przyłączenie się do matrycy krótkiego komplementarnego fragmentu DNA. Polimeraza ta jest zoptymalizowana w kierunku wysokiej specyficzności, co gwarantuje minimalizację powstawania produktów ubocznych. Nazwa Nr katalogowy Ilość jednostek TAQ 100 Polimeraza Science Taq TAQ TAQ TAQ 3000 Polimeraza SciencePfu Polimeraza Pfu izolowana jest ze szczepu bakterii E.coli, który zawiera specjalny gen Pyrococcud fureosis.w wyniku swojej 3-5 aktywności egzonukleazy jest w stanie korygować błędy występujące podczas powielania DNA. Polimeraza Pfu posiada najniższy poziom błędu spośród wszystkich znanych polimeraz DNA. Może być zatem stosowana w PCR wymagających wysokiej wierności czy w ukierunkowanych metagenezach. Polimerazę Pfu należy przechowywać w temperaturze -20 C w 50mM Tris-HCl, 0,1mM EDTA, 1mM DTT, 0,1% Tween20, 0,1% NP40 i 50% glicerolu. Nazwa Nr katalogowy Ilość jednostek PFU 100 Polimeraza Science Pfu PFU PFU PFU

24 Polimeraza Science Plus Polimeraza ta to mieszanina enzymów, zawierająca polimerazę Taq i Pfu. Dzięki polimerazie Pfu uzyskujemy 4-krotnie większą wierność w porównaniu z polimerazą TagMożna uzyskać fragmenty 2-5kb. Nazwa Nr katalogowy Ilość jednostek PLU 100 Polimeraza Science Plus PLU PLU PLU 3000 Polimeraza ScienceHot Start Polimeraza Hot Start to rekombinowana polimeraza Taq, która została zmodyfikowana chemicznie przez dodanie termo labilnych grup blokujących na resztach aminokwasowych. Enzym ten jest nieaktywny w temperaturze pokojowej, by uniknąć rozbudowy przyłączonych niespecyficznych starterów lub starterów dimerów. Skutkuje to wyższą specyficznością amplifikacji DNA. Funkcjonalną aktywność enzymu odzyskuje się podczas krótkiego ogrzewania do temperatury 95 C. Aktywowany enzym posiada tę samą funkcjonalność jak polimeraza Taq. Przechowywanie do jednego roku w temperaturze -20 C. Nazwa Nr katalogowy Ilość jednostek HOT 100 Polimeraza ScienceHot Start HOT HOT HOT

25 Polimeraza ScienceLA-Taq Polimeraza LA-Taq jest polimerazą, która ma za zadnie rozszerzyć zastosowanie PRC. W szczególności przewiduje się, że ułatwi ona analizę genomu prowadzoną różnymi technikami. Zawiera w swoim składzie aktywne składniki, które powodują zmniejszenie poziom błędu w porównaniu z tradycyjną polimerazą Taq. Zaletą stosowania polimerazy LA-Taq jest wysoka wydajność produktów PCR. Otrzymywane są fragmenty większe niż 5kB. Możliwe jest otrzymanie fragmentów o wielkości nawet 27kB na bazie ludzkich chromosomów lub 40kB na bazie λ DNA. Polimerazę należy przechowywać do roku w temperaturze -20 C. Nazwa Nr katalogowy Ilość jednostek LAT 100 Polimeraza ScienceLA-Taq LAT LAT LAT

26