OFERTA MIKROBIOLOGICZNA

WETERYNARIA 1

OFERTA MIKROBIOLOGICZNA MLEKO NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ CHROMagar Orientation 1410 płytka 90 mm Izolacja oraz różnicowanie szerokiego spektrum mikroorganizmów Columbia Agar z 5% krwi baraniej 1190 płytka 90 mm Hodowla mikroorganizmów o wysokich wymaganiach odżywczych. Edwards Agar Modified z 5% krwi baraniej 1220 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja Streptococcus agalactiae oraz innych Streptococcus spp. CHROMagar Strep B 1007 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i identyfikacja Streptococcus agalactiae. Mannitol Salt Agar (Chapman) 1050 płytka 90 mm Izolacja mikroorganizmów z rodzaju Staphylococcus. CHROMagar Staphylococous aureus 1404 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i identyfikacja Staphylococcus aureus. MacConkey Agar z fioletem krystalicznym 1020 płytka 90 mm Izolacja i różnicowanie G ( ) pałeczek jelitowych. CHROMagar ECC 1401 płytka 90 mm Izolacja i ilościowe oznaczanie Escherichia coli i bakterii z grupy coli w żywności, próbkach wody oraz materiałach klinicznych. MOCZ NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ CHROMagar Orientation 1410 płytka 90 mm Izolacja oraz różnicowanie szerokiego spektrum mikroorganizmów Mannitol Salt Agar (Chapman) 1050 płytka 90 mm Izolacja mikroorganizmów z rodzaju Staphylococcus. CHROMagar Staphylococous aureus 1404 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i identyfikacja Staphylococcus aureus. Sabouraud Dextrose Agar z chloramfenikolem 1231 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja dermatofitów i innych grzybów patogennych przy zahamowanym wzroście bakterii. 2

CHROMagar Candida 1400 płytka 90 mm Izolacja i różnicowanie Candida spp. MacConkey Agar z fioletem krystalicznym 1020 płytka 90 mm Izolacja i różnicowanie G ( ) pałeczek jelitowych. Enterococcosel Agar (Bile Esculine Azide Agar) 1070 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i różnicowanie paciorkowców z grupy D. SKÓRA, BŁONY ŚLUZOWE NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ CHROMagar Orientation 1410 płytka 90 mm Izolacja oraz różnicowanie szerokiego spektrum mikroorganizmów Mannitol Salt Agar (Chapman) 1050 płytka 90 mm Izolacja mikroorganizmów z rodzaju Staphylococcus. CHROMagar Staphylococous aureus 1404 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i identyfikacja Staphylococcus aureus. MYCAGAR (Fungisel Agar / Sabouraud Dextrose Agar z chloramfenikolem) Izolacja grzybów drożdżopodobnych, pleśni i dermatofitów. 7050 fiolka 10 szt Pseudomonas CN Agar 1022 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja Pseudomonas aeruginosa(z dodatkiem cetrymidu i kwasu nalidyksowego). KANAŁ SŁUCHOWY ZEWNĘTRZNY NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ CHROMagar Orientation 1410 płytka 90 mm Izolacja oraz różnicowanie szerokiego spektrum mikroorganizmów Mannitol Salt Agar (Chapman) 1050 płytka 90 mm Izolacja mikroorganizmów z rodzaju Staphylococcus. CHROMagar Staphylococous aureus 1404 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i identyfikacja Staphylococcus aureus. Columbia CNA Agar z 5% krwi baraniej 1191 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja ziarniaków G (+) (z dodatkiem kolistyny i kwasu nalidyksowego). Enterococcosel Agar (Bile Esculine Azide Agar) 1070 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja i różnicowanie paciorkowców z grupy D. CHROMagar Malassezia 1407 płytka 90 mm Izolacja oraz różnicowanie Malassezia sp. 3

Pseudomonas CN Agar 1022 płytka 90 mm Wybiórcza izolacja Pseudomonas aeruginosa(z dodatkiem cetrymidu i kwasu nalidyksowego). POTWIERDZANIE NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ Microgen STAPH M43 100 testów lateks Identyfikacja Staphylococcus aureus z hodowli wyjściowej. Wykrywa koagulazę związaną i białko A. M433 500 testów lateks Oksydaza - test MID 61 g 50 szt paski Test paskowy do szybkiego wykrywania enzymu oksydazy cytochromowej u bakterii np. Pseudomonas aeruginosa Odczynnik do wykrywania katalazy 3155 butelka 30 ml Wykrywanie aktywności katalazy u gronkowców OZNACZANIE LEKOOPORNOŚCI NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ Roztwór 0,9% NaCl 6149 probówka 5, 9 ml Roztwór do przygotowywania zawiesin wyjściowych, płyn do rozcieńczeń. Mueller Hinton II Agar 1170 płytka 90 mm Badanie wrażliwości mikroorganizmów na antybiotyki i sulfonamidy metodą krążkowo dyfuzyjną. Mueller Hinton II Agar z 5% krwi baraniej 1172 płytka 90 mm Badanie wrażliwości na antybiotyki i sulfonamidy mikroorganizmów o wysokich wymaganiach odżywczych. MASTDISCS (krążki antybiotykowe) Amoxycillin/Clavulanic 20/10 (Augmentin 30) 10116 5x50szt krążki Amikacin 30 10124 5x50szt krążki Amoksycylina 2 10134 5x50szt krążki Ampicylina 10 10122 5x50szt krążki Bacytracyna 10 10312 5x50szt krążki Cefaleksyna 30 13132 5x50szt krążki Cefoperazon 75 13074 5x50szt krążki Cefuroksym 30 13052 5x50szt krążki Chloramfenikol 30 13016 5x50szt krążki Cotrimoxazole 23.75/1.25 13122 5x50szt krążki Doksycylina 30 11412 5x50szt krążki Enrofloksacyna 5 10510 5x50szt krążki Erytromycyna 15 10515 5x50szt krążki 4

Gentamycyna 10 10712 5x50szt krążki Klindamycyna 2 13022 5x50szt krążki Marbofloksacyna 5 (na specjalne zamówienie m.in. 100 kartridży) 11355 5x50szt krążki Neomycyna 30 11429 5x50szt krążki Polimyksyna B 300 11632 5x50szt krążki Tetracyklina 30 12011 5x50szt krążki Tetracyklina 10 12030 5x50szt krążki Tobramycyna 10 12020 5x50szt krążki DROBNY SPRZĘT LABORATORYJNY NAZWA PRODUKTU NR KAT. OP RODZAJ eza sterylna jednorazowa 1 µl 1-E01 20 szt. 1 µl eza sterylna jednorazowa 10 µl 1-E010 20 szt. 10 µl sterylny patyczek z polistyrenu wykończony bawełną 1-A00 500szt sterylna wymazówka z polipropylenu w probówce 1-A01 100szt Wymazówki z polistyrenu z podłożem transportowym Amies 1-A02 50szt Informacje ogólne: Podłoża na płytkach Petriego: Minimalne zamówienie podłoży na płytkach Petriego to 10szt. Termin ważności dla pożywek z dodatkiem krwi baraniej, końskiej wynosi 45dni dla pozostałych 90dni od daty produkcji. Szybkie testy: Data ważności minimum 6 miesięcy od daty dostawy. Krążki antybiotykowe Data ważności minimum 6 miesięcy od daty dostawy. Przechowywanie: gotowe płytki z podłożem należy przechowywać w temp. 6 12 C do upływu terminu ważności.. Podłoże należy chronić przed dostępem światła 5

OPIS PRODUKTÓW CHROMAGAR ORIENTATION Przeznaczenie: podłoże chromogenne do izolacji i różnicowania mikroorganizmów. Materiał do badań: posiew badanego materiału bezpośrednio na agar. Inkubacja temp. 37 C przez 18 24 godz. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost bakterii, ocenić barwę i gęstość kolonii na agarze. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm: Staphylococcus aureus ATCC 25923 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Escherichia coli ATCC 25922 Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Proteus vulgaris ATCC 8427 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 wygląd kolonii: białe do żółtych, drobne, okrągłe, całobrzegie, wypukłe drobne, turkusowe, okrągłe, całobrzegie różowe, średnie, okrągłe, całobrzegie duże,metaliczno- niebieskie o nieregularnych brzegach zielononiebieskie z brązową strefą wokół kolonii, nieregularne, średnie srebrzyste, płaskie, nieregularne niebieskie, metaliczne, wypukłe, nieregularne COLUMBIA AGAR Z 5% KRWI BARANIEJ Przeznaczenie: podłoże do użytku ogólnego, izolacja bakterii o wysokich wymaganiach odżywczych. Właściwości: ze względu na zawartość wysokowartościowych hydrolizatów białkowych podłoże stosuje się do izolacji drobnoustrojów o dużych wymaganiach odżywczych. Dodatek 5% krwi baraniej podnosi walory odżywcze podłoża i pozwala na określenie typu hemolizy. Bez dodatku krwi, Columbia Agar Base jest podłożem do użytku ogólnego. Materiał do badań: wszystkie materiały kliniczne, w których spodziewana jest obecność mikroorganizmów o wysokich wymaganiach odżywczych. Sposób wykonania: płytki doprowadzić do temperatury pokojowej. Posiać badany materiał bezpośrednio na agar metodą redukcyjną. Wkłuć się kilka razy w podłoże w celu posiewu streptokoków beta hemolizujących pod powierzchnię agaru. Wkłucie podpowierzchniowe pozwoli na wykrycie reakcji hemolizy spowodowanej aktywnością streptolizyn wrażliwych i niewrażliwych na tlen. Podłoża inkubować w warunkach o podwyższonej zawartości CO2 (5 10%) w 35 ± 2 C przez 18 24 do 48 godz. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost kolonii bakteryjnych i stref hemolizy. Hemoliza typu alfa powoduje zazielenienie podłoża wokół kolonii. Beta hemoliza powoduje bezbarwne przejaśnienie wokół kolonii. Gamma hemoliza nie powoduje żadnych zmian w wyglądzie pożywki. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych. 6

Mikroorganizm: wzrost: wygląd kolonii: hemoliza: Escherichia coli ATCC 25922 dobry wzrost duże, płaskie, szare, gładkie, błyszczące Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Streptococcus pyogenes ATCC 19615 dobry wzrost duże, płaskie, o nieregularnych brzegach, szare z srebrnym połyskiem dobry wzrost okrągłe, białe, całobrzegie, gładkie, wypukłe typu β dobry wzrost drobne, białe do szarych z widoczną strefa hemolizy typu β Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 dobry wzrost bardzo drobne, płaskie, całobrzegie typu α EDWARDS AGAR MODIFIED Z 5% KRWI BARANIEJ Przeznaczenie: podłoże wybiórcze do szybkiej izolacji Streptococcus agalactiae oraz innych Streptococcus sp. Właściwości: fiolet krystaliczny, jak również siarczan talu są używane, jako związki o właściwościach selekcyjnych dla streptokoków. Eskulina jest związkiem różnicującym Streptococcus agalactiae (niebieskie kolonie) od eskulinododatnich streptokoków grupy D (czarne kolonie). Materiał do badań: próbki mleka, wymiona krów. Sposób wykonania: posiać materiał na powierzchnię płytki z odwirowanych próbek z mleka. Inkubować w 35 ± 2ºC przez 24 48 godzin. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost kolonii bakteryjnych. Streptococcus agalactiae tworzy niebieskie kolonie, które powinny być podstawą do dalszych testów identyfikacyjnych. Eskulino dodatnie streptokoki grupy D tworzą czarne kolonie. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Wzrost Reakcja Streptococcus agalactiae ATCC 13813 (+) kolonie niebieskie Enterococcus faecalis ATCC 29212 (+) kolonie czarne Escherichia coli ATCC 25922 ( ) --------- Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 ( ) --------- CHROMAGAR StrepB Przeznaczenie: do izolacji i szybkiej identyfikacji Streptococcus agalactiae. Właściwości: Podłoże wybiórcze, chromogenne służące do hodowli i izolacji oraz wstępnej identyfikacji Streptococcus agalactiae. Materiał do badań: materiały z pochwy lub odbytu, pobrane jałową wymazówką. Sposób wykonania: posiać materiał bezpośrednio na płytkę ogrzaną do temperatury pokojowej. Podłoże powinno być inkubowane w temperaturze 35 ± 2 C w atmosferze tlenowej przez 18 24godzin. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost i kolor kolonii bakteryjnych. Streptococcus agalactiae wytwarza różowy pigment i rośnie na podłożu w postaci różowych kolonii. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować za pomocą następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Posiew (jtk) Barwa Wzrost Streptococcus agalactiae ATCC 12386 10-100 różowa do fioletowej obfity Enterococcus faecalis ATCC 29212 >1000 niebieska słaby Staphylococcus aureus ATCC 25923 >1000 niebieska słaby Candida albicans ATCC 10031 >1000 ----- brak wzrostu Escherichia coli ATCC 25922 >1000 ----- brak wzrostu 7

MANNITOL SALT AGAR Przeznaczenie: podłoże do izolacji i różnicowania gronkowców. Stosować tylko do diagnostyki in vitro. Właściwości: ze względu na zawartość chlorku sodu w stężeniu 7,5 % podłoże hamuje wzrost innych bakterii, głównie paciorkowców. Gronkowce, które posiadają zdolność do fermentacji mannitolu rosną w postaci żółtych kolonii na skutek zakwaszenia podłoża. Materiał do badań: wszystkie materiały kliniczne, w których spodziewana jest obecność gronkowców. Sposób wykonania: doprowadzić płytki do temp. pokojowej. Posiać materiał na podłoże w celu wstępnej izolacji lub posiać wyizolowany mikroorganizm na podłoże w celu zróżnicowania. Inkubację prowadzić w temp. 36 ± 2 C przez 24 48 godz. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost bakterii. Następuje wzrost gronkowców, podczas gdy wzrost innych bakterii jest w większości zahamowany. Gronkowce koagulozo-dodatnie rosną obficie, tworząc żółte kolonie z żółtymi strefami wokół kolonii. Koagulozo-ujemne tworzą małe kolonie o kolorze różowym do czerwonego bez zmiany koloru strefy wokół tych kolonii. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem szczepu wzorcowego: Mikroorganizm: wygląd kolonii: selektywność: Staphylococcus aureus ATCC 25923 żółte, z żółtą strefą wokół kolonii dobry wzrost Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 różowe bez zmiany koloru strefy dobry wzrost Enterococcus faecalis ATCC 29212 zahamowanie wzrostu Proteus mirabilis ATCC 12453 zahamowanie wzrostu CHROMAGAR STAPH AUREUS Przeznaczenie: izolacja i szybka identyfikacja Staphylococcus aureus. Właściwości: podłoże wybiórcze, chromogenne służące do hodowli i izolacji szczepów Staphylococcus aureus. Materiał do badań: posiew wszelkich materiałów biologicznych Sposób wykonania: posiać materiał bezpośrednio na płytkę ogrzaną do temperatury pokojowej. Podłoże powinno być inkubowane w temperaturze 37 C przez 18 24 godzin. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost i kolor kolonii bakteryjnych. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować za pomocą następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Barwa S. aureus ATCC 25923 różowe kolonie S. aureus ATCC 43300 różowe kolonie Pozostałe niebieskie kolonie MACCONKEY AGAR Z FIOLETEM KRYSTALICZNYM Przeznaczenie: do izolacji i wstępnej identyfikacji pałeczek z rodziny Enterobacteriaceae. Stosować tylko do diagnostyki in vitro. Właściwości: podłoże jest podłożem wybiórczym dla pałeczek z rodziny Enterobecteriaceae. Zawiera czynniki hamujące wzrost bakterii G(+) (sole żółciowe i czerwień obojętna). Mieszanina soli żółciowych i fioletu krystalicznego są selektywnymi czynnikami hamującymi wzrost G(+) gronkowców i umożliwiają wzrost Gram( ) bakterii. Chlorek sodu utrzymuje osmotyczność środowisko. Obecność w podłożu fioletu krystalicznego sprawia, że nie wyrastają na nim paciorkowce kałowe i niektóre gronkowce. Materiał do badań: posiew próbek klinicznych w których spodziewana jest obecność patogennych pałeczek z rodziny Enterobacteriaceae. Sposób wykonania: doprowadzić płytki do temp. pokojowej. Posiać materiał. Prowadzić inkubację w temperaturze 35 ± 2 C, wynik odczytać po 24-48 h. 8

Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost bakterii. Kryterium różnicującym bakterie rosnące na tym podłożu jest fermentacja laktozy. Pałeczki laktozo dodatnie rosną w postaci kolonii różowych lub czerwonych, pałeczki laktozo-ujemne tworzą kolonie bezbarwne. Identyfikację drobnoustroju należy potwierdzić testami biochemicznymi. 8. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm: wygląd kolonii: reakcja (laktoza): selektywność: Escherichia coli ATCC 25922 różowe do różowo - dodatnia dobry wzrost czerwonych Pseudomonas aeruginosa ATCC 10145 nieregularne, bezbarwne ujemna dobry wzrost do różowych Proteus mirabilis ATCC 12453 bezbarwne ujemna dobry wzrost Salmonella typhimurium ATCC 14028 bezbarwne ujemna dobry wzrost Enterococcus faecalis ATCC 29212 zahamowanie wzrostu CHROMAGAR ECC Przeznaczenie: szybkie wykrywanie i oznaczanie ilości Escherichia coli i bakterii z grupy coli w pożywieniu, próbkach wody oraz materiałach klinicznych. Materiał do badań: posiew próbek wody, żywności, materiałów klinicznych, w których badana ma być obecność Escherichia coli i innych bakterii z grupy coli. Sposób wykonania: Posiew powierzchniowy: rozlać podłoże na płytki Petriego, przechowywać w ciemności przed użyciem. Posiać materiał bezpośrednio na podłoże sposobem redukcyjnym lub położyć filtr. Przeprowadzić inkubację w temp. 37 C przez 24 godz*. *Jeżeli celem badania jest wykazanie obecności bakterii grupy coli typu fekalnego (termo tolerancyjnych), bardziej odpowiednia temp. inkubacji wynosi 44 C. Natomiast jeżeli celem badania jest określenie ogólnej liczby bakterii z grupy coli zalecana jest temp. 30 C. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost i ilość kolonii bakteryjnych. Kolonie E. coli są niebieskie. Podłoże pozwala także na wykrywanie indolu za pomocą czynnika Kovacs a w celu potwierdzenia obecności E. coli. Bakterie grupy coli typu fekalnego (przy inkubacji w temp. 44 C) tworzą czerwone kolonie. Pozostałe bakterie G( ) tworzą bezbarwne kolonie. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Wzrost Reakcja Escherichia coli ATCC 25922 (+) kolonie niebieskie Bakterie z grupy coli (+) kolonie czerwone Proteus sp. (+) kolonie bezbarwne SABOURAUD DEXTROSE AGAR Z CHLORAMFENIKOLEM Przeznaczenie: podłoże do wybiórczej izolacji grzybów. Właściwości: ze względu na zawartość chloramfenikolu podłoże hamuje wzrost flory bakteryjnej towarzyszącej zakażeniom grzybiczym. Materiał do badań: posiew materiałów klinicznych, w których badana ma być obecność drożdży i pleśni. Sposób wykonania: doprowadzić płytki do temperatury pokojowej, posiać materiał bezpośrednio na podłoże lub sporządzić odpowiednie rozcieńczenia, posiany materiał rozprowadzić głaszczką. Prowadzić inkubację w temp. 25 30 C przez 48 168 godzin. Odczyt i interpretacja wyników: kolonie drożdży są koloru białego do kremowego. Kolonie pleśni są nitkowate i o różnorodnych kolorach. Należy policzyć ilość kolonii i znając stopień rozcieńczenia, (jeżeli próby podlegały rozcieńczeniu) obliczyć ilość kolonii na gram lub mililitr badanego materiału. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem szczepu wzorcowego: 9

Mikroorganizm Wzrost Wygląd kolonii Aspergillus niger ATCC 16404 (+) czarna grzybnia Candida albicans ATCC 10231 (+) kremowe, całobrzegie, wypukłe Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 (+) biała grzybnia Escherichia coli ATCC 25922 ( ) ------ CHROMAGAR CANDIDA Przeznaczenie: do izolacji drożdżaków i szybkiej identyfikacji Candida sp. Właściwości: Podłoże wybiórcze, chromogenne służące do hodowli i izolacji drożdżaków, identyfikacji gatunku Candida albicans oraz wstępnej identyfikacji innych gatunków drożdżaków. Materiał do badań: posiew wszelkich materiałów biologicznych (wymazy z jamy ustnej, pochwy, odbytu; odchody, mocz, ropa), w których spodziewana jest obecność drożdżaków lub grzybów strzępkowych. Sposób wykonania: posiać materiał bezpośrednio na płytkę ogrzaną do temperatury pokojowej. Podłoże powinno być inkubowane w ciemności w temperaturze 35 ± 2 C przez 24 48 godzin. Optymalne wybarwienie kolonii następuje po 48 godzinach. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost i kolor kolonii bakteryjnych. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować za pomocą następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm: wygląd kolonii: powierzchnia/brzeg selektywność: Candida albicans ATCC 10231 zielona / turkusowa błyszcząca/gładki dobry wzrost Candida tropicalis ATCC 201380 metaliczna, niebieska gładka, błyszcząca /gładki dobry wzrost Candida krusei ATCC 14243 jasnoróżowa, kosmata szorstka, puszysta /nieregularny dobry wzrost Candida glabrata ATCC 64677 różowa/jasnoczerwona gładka, błyszcząca /gładki dobry wzrost Candida kefyr ATCC 2512 różowa/purpurowa gładka/całobrzega dobry wzrost Candida parapsilosis ATCC 22019 biała,jasnoróżowa gładka/gładki dobry wzrost Candida lusitaniae ATCC 34449 różowa/szaroróżowa gładka/całobrzega dobry wzrost Enterococcus faecalis ATCC 29212 zahamowanie wzrostu Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 zahamowanie wzrostu ENTEROCOCCOSEL AGAR Przeznaczenie: wybiórcza izolacja i różnicowanie paciorkowców grupy D. Właściwości: organizmy posiadające zdolność hydrolizy eskuliny powodują zaciemnienie podłoża wokół kolonii. Zachodzi to na skutek reakcji produktów rozkładu eskuliny z cytrynianem żelaza. Żółć powoduje zahamowanie wzrostu bakterii G(+) innych niż enterokoki. Azydek sodu hamuje wzrost bakterii G( ). Cytrynian sodu jest czynnikiem konserwującym podłoże. Materiał do badań: posiew materiałów biologicznych, w których spodziewana jest obecność paciorkowców grupy D. Sposób wykonania: doprowadzić płytki do temp. pokojowej. Posiać materiał. Prowadzić inkubację w temperaturze 35 ± 2 C, wynik odczytać po 18 24 godz. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost kolonii bakteryjnych. Mikroorganizmy hydrolizujące eskulinę powodują powstanie czerniejących stref wokół kolonii. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Wzrost Reakcja Enterococcus faecalis ATCC 29212 (+) kolonie drobne, zaczernienie wokół kolonii Candida albicans ATCC 10231 ( ) --------- Escherichia coli ATCC 25922 ( ) --------- Streptococcus pyogenes ATCC 19615 ( ) częściowo kolonie drobne, bezbarwne 10

MYCAGAR Przeznaczenie: podłoże transportowo-wzrostowe dla grzybów drożdżopodobnych, pleśni i dermatofitów. Właściwości: płytka pokryta dwoma podłożami: Podłoże nr 1 - Sabouraud Dextrose Agar z chloramfenikolem (zabarwienie kremowe) do wzrostu wszystkich rodzajów grzybów drożdzopodobnych i pleśniowych Podłoże nr 2 - Fungisel z aktidionem i czerwienią fenolową (zabarwienie żółto-pomarańczowe) do wzrostu i wstępnej izolacji dermatofitów. Materiał do badań: diagnostyka mykologiczna. Bezpośredni posiew materiału z miejsc chorobowo zmienonych. Materiał kliniczny stanowią: włosy, paznokcie, łuski skóry, wymazy z ucha środkowego, dróg oddechowych, rodnych i przewodu pokarmowego. Sposób wykonania: 1. Pobrać materiał do pacjenta. 2. Odkręcić nakrętkę nie wyjmując podłoży z pojemnika. 3. Chwytając za nakrętkę wyjąć podłoże, pobrany materiał nanieść punktowo i rozprowadzić równomiernie zaczynając od podłoża nr 1. 4. Po dokonaniu posiewu płytkę wsunąć do pojemnika i dokręcić nakrętkę. 5. Materiał pobrany opisać: nazwisko, rodzaj materiału, data, godzina. Dla dermatomykoz hodowlę prowadzić w temp. pokojowej, oceniając wizualnie co 2 3 dni. Hodowle ujemne przechowywać i obserwować przez okres 3 4 tygodni. Odczyt i interpretacja wyników: po stronie podłoża Fungisel w przypadku obecności dermatofitów obserwować po 48 72h zmianę zabarwienia z żółtego na czerwone, powstałą wskutek alkalizacji podłoża. Po stronie agaru Sabouraud dermatofity wzrastają zachowując w pełni wszystkie cechy charakterystyczne dla kolonii poszczególnych gatunków. Kontrola jakości: Sabouraud Dextrose Agar z chloramfenikolem: Mikroorganizm Wzrost Aspergillus nigier ATCC 16404 (+) Candida albicans ATCC 10231 (+) Microsporum canis ATCC 36299 (+) Penicillium roquefortii ATCC 10110 (+) Trichophzton mentagrophytes ATCC 9533 (+) Fungisel Agar: Mikroorganizm Wzrost Aspergillus nigier ATCC 16404 ( ) całkowite lub częściowe Candida albicans ATCC 10231 (+) Escherichia coli ATCC 25922 ( ) Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 (+) COLUMBIA CNA AGAR Z 5% KRWI BARANIEJ Przeznaczenie: podłoże do selektywnej izolacji Gram (+) ziarniaków. Właściwości: Columbia CNA z 5% krwią barania jest podłożem selektywnym dla ziarniaków G(+). Dodatek kwasu nalidyksowego i kolistyny hamuje wzrost Enterobacteriaceae i Pseudomonas sp., a umożliwia wzrost drożdży, bakterii z rodziny Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus. Niektóre G( ) mikroorganizmy jak Gardnerella vaginalis i niektóre Bacteriodes sp. dobrze rosną na Columbia CNA Agar z 5% krwią baranią. Materiał do badań: posiew, bezpośrednio na agar, wszelkich materiałów klinicznych. Sposób wykonania: płytki doprowadzić do temperatury pokojowej. Posiać badany materiał bezpośrednio na agar metodą redukcyjną. Wkłuć się kilka razy w podłoże w celu posiewu streptokoków beta hemolizujących pod powierzchnię agaru. Wkłucie podpowierzchniowe pozwoli na wykrycie reakcji hemolizy spowodowanej aktywnością streptolizyn wrażliwych i niewrażliwych na tlen. Podłoża inkubować w warunkach o podwyższonej zawartości CO2 (5 10%) w 35 ± 2 C przez 18 24 do 48 godz. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost kolonii bakteryjnych i stref hemolizy. Hemoliza typu alfa powoduje zazielenienie podłoża wokół kolonii. Beta hemoliza powoduje bezbarwne przejaśnienie wokół kolonii. Gamma hemoliza nie powoduje żadnych zmian w wyglądzie pożywki. 11

Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm: wygląd kolonii: hemoliza: selektywność: Staphylococcus aureus ATCC 25923 duże, białe do szarych lub dobry wzrost kremowe do żółtych Streptococcus pyogenes ATCC 19615 małe, białe do szarych, typu β dobry wzrost Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 drobne, szare,płaskie typu α dobry wzrost Pseudomonas aeurginosa ATCC 27853 zahamowanie wzrostu Escherichia coli ATCC 25922 zahamowanie wzrostu PSEUDOMONAS AGAR CN Przeznaczenie: podłoże selektywne do wybiórczej izolacji Pseudomanas aeruginosa na podstawie tworzenia piocyjaniny i/lub piorubiny. Właściwości: cetrymid jest czynnikiem selektywnym, powoduje ucieczkę fosforanów i azotu z komórek bakteryjnych gatunków innych niż Pseudomanas aeruginosa. Kwas nalidyksowy hamuje wzrost m.in. Proteus spp. Chlorek magnezu i siarczan potasu wzmagają produkcję fluoresceiny i piocyjaniny. Związanie się obu tych barwników powoduje charakterystyczne jasnozielone zabarwienie kolonii pałeczek ropy błękitnej. Materiał do badań: posiew materiałów biologicznych, w których badana jest obecność Pseudomonas aeruginosa. Sposób wykonania: filtr membranowy po przesączeniu odpowiedniej próbki wody ułożyć na agarze CN. Prowadzić inkubacje w temp. 36±2 C przez 44±4h. Sprawdzić filtr po 22±2h i po 44±4h. Odczyt i interpretacja wyników: po okresie inkubacji obserwować wzrost kolonii bakteryjnych i ich zabarwienie. Pseudomanas aeruginosa wytwarza niebieskie, niebiesko-zielone lub żółto-zielone kolonie. Kontrola jakości: podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm Wzrost Reakcja Pseudominas aeruginosa ATCC 10145 (+) zielono-żółte do niebiesko-zielonych kolonii Pseudominas aeruginosa ATCC 27853 (+) zielono-żółte do niebieskich kolonii Escherichia coli ATCC 25922 ( ) --------- Proteus vulgaris ATCC 8427 ( ) --------- Staphylococcus aureus ATCC 25923 ( ) --------- MUELLER HINTON II AGAR Przeznaczenie: oznaczanie lekowrażliwości metodą krążkowo dyfuzyjną. Właściwości: pożywka spełnia zalecenia CLSI i jest produkowana dla niskiej zawartości tyminy i tymidyny (kontrola przez uzyskanie właściwych rozmiarów stref z trimetoprimem dla Enterococcus faecalis ATCC 29212) oraz odpowiedniego poziomu kationów magnezu i wapnia (kontrola przez uzyskanie właściwych rozmiarów stref z antybiotykami aminoglikozydowymi dla Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853). Materiał do badań: materiały biologiczne, standaryzowana zawiesina wg skali McFarlanda. Sposób wykonania: po inkubacji (35 ± 2 C, 18 24h) zmierzyć strefy zahamowania wzrostu wokół krążków z antybiotykami. Odczyt i interpretacja wyników: określić wrażliwość badanego szczepu na podstawie otrzymanych stref zahamowania wzrostu jako wrażliwy, średniowrażliwy i oporny. Kontrola jakości: zgodnie z zaleceniami CLSI, podłoże należy kontrolować z użyciem następujących szczepów wzorcowych: Mikroorganizm: morfologia kolonii: wzrost: Escherichia coli ATCC 25922 duże, jasnosłomkowe dobry wzrost Staphylococcus aureus ATCC 25923 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 średnie do dużych, okrągłe, kremowe, całobrzegie, wypukłe dobry wzrost duże, płaskie, z nieregularnym brzegiem, błyszczące dobry wzrost Enterococcus faecalis ATCC 29212 drobne, okrągłe, całobrzegie dobry wzrost 12

MUELLER HINTON II AGAR Z 5 % KRWI BARANIEJ Przeznaczenie: oznaczanie lekowrażliwości metodą krążkowo dyfuzyjną dla bakterii o większych wymaganiach odżywczych, głównie d paciorkowców. Właściwości: dodatek krwi baraniej zwiększa właściwości odżywcze podłoża. Pożywka spełnia zalecenia CLSI i jest produkowana dla niskiej zawartości tyminy i tymidyny, co pozwala na dokładny pomiar strefy zahamowania wzrostu. Materiał do badań: standaryzowana zawiesina wg skali McFarlanda z czystej hodowli pasażowanej z podłoża stałego. Sposób wykonania: posiać zawiesinę badanego szczepu, po inkubacji (24h, 35 ± 2 C) zmierzyć strefy zahamowania wzrostu wokół krążków z antybiotykami. Odczyt i interpretacja wyników: określić wrażliwość badanego szczepu na podstawie otrzymanych stref zahamowania wzrostu jako wrażliwy, średniowrażliwy i oporny. Kontrola jakości: zgodnie z zaleceniami CLSI, podłoże należy kontrolować z użyciem szczepu wzorcowego: Mikroorganizm: wzrost: wygląd kolonii: hemoliza: Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 Streptococcus pyogenes ATCC 19615 dobry wzrost dobry wzrost bardzo drobne, płaskie, całobrzegie drobne, białe do szarych z widoczną strefą hemolizy typu α KRĄŻKI DO BADANIA WRAŻLIWOŚCI NA ANTYBIOTYKI MASTDISCS Szeroki zakres indywidualnych krążków do badania wrażliwości na antybiotyki w szklanych fiolkach i plastykowych rurkach. POSTAĆ 6 mm średnicy krążki bibułowe z nadrukiem odpowiedniego kodu z liter i/lub liczb i nasyconych dokładnie oznaczonymi ilościami antybiotyków lub bez zawartości antybiotyku. PRZECHOWYWANIE I TERMIN WAŻNOŚCI Przechowywać w temp. 2 8 C w dostarczonych pojemnikach do upływu daty ważności wykazanej na etykietce na opakowaniu. Pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej przed otwarciem. Odłożyć do lodówki natychmiast po użyciu. ŚRODKI OSTROŻNOŚCI Tylko do użycia do diagnostyki in vitro. Zwrócić uwagę na potwierdzone środki ostrożności dla substancji niebezpiecznych biologicznie i techniki aseptyczne. Do u życia tylko przez odpowiednio przeszkolony i wykwalifikowany personel laboratoryjny. Sterylizować wszystkie niebezpieczne biologicznie odpady przed wyrzuceniem. Odwołaj się do ulotki z danymi na temat bezpieczeństwa produktu. DODATKOWE MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE DOSTARCZONE Standardowe wyposażenie mikrobiologiczne i narzędzia, takie jak ezy, podłoża, wymazówki, patyczki do aplikatura, palniki i inkubatory itp., a także odczynniki serologiczne i biochemiczne i dodatki takie jak krew. Odpowiednie kryteria interpretacyjne ze standardowych metod referencyjnych. MAST DiscMaster dyspenser (MDD6 lub MDD8). WYKONANIE TESTU 1. MASTDISCS powinno się używać zgodnie z odpowiednimi standardowymi metodami badania wrażliwości na antybiotyki. Dostępne są różne alternatywne metody i MASTDISCS są z nimi kompatybilne. 2. Przygotować zawiesinę czystej, hodowli w 0,9% R-r NaCl nr kat. 6149 równoważną standardowi gęstości 0,5 hodowli badanego drobnoustroju, McFarlanda. 3. Rozprowadzić zawiesinę równomiernie na powierzchni płytki (np. Mueller Hinton Agar nr kat. 1170 lub Mueller Hinton II Agar z 5% krwi baraniej nr kat. 1172) przy pomocy jałowej wymazówki. 4. Wyjąc pojemnik z MASTDISCS z lodówki i pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej przed otwarciem. 5. Używając jałową igiełkę lub pęsetę, przenieść każdy wymagany krążek na powierzchnię odpowiedniej płytki z podłożem do badania lekooporności, np. Mueller-Hinton Agar, osuszonego i posianego badanym szczepem zgodnie z wybraną metodą. 13

Jeżeli używa się MASTDISCS w rurkach, załadować każdą wymaganą rurkę do dyspensera MAST DiscMaster (MDD6 lub MDD8). 1. Umieścić załadowany dyspenser nad płytką Petriego i rozłożyć krążki (zob. szczegółową instrukcję DiscMaster). 2. Inkubować płytki w warunkach tlenowych w 35 37 C przez 18 24 godz. (lub w alternatywnych warunkach inkubacji zgodnie z używaną metodą). 3. Zmierzyć (do najbliższego pełnego mm) i zapisać średnice stref zahamowania wzrostu, obserwowane wokół nasączonych antybiotykami krążków. INTERPRETACJA WYNIKÓW Zinterpretować zmierzone strefy zahamowania wzrostu zgodnie z zaleceniami do opublikowanych tabel z krytycznymi punktami średnicy stref opublikowanymi przez odpowiednie autorytety i sklasyfikować badany szczep jako wrażliwy (s), średnio wrażliwy (św) lub oporny (r). KONTROLA JAKOŚCI Sprawdzić, czy nie ma oznak uszkodzenia. Kontrola jakości musi być przeprowadzona co najmniej dla jednego drobnoustroju, który będzie posiadał odpowiedni wzór oporności. Nie używać produktu, jeżeli reakcje z organizmami kontrolnymi są nieprawidłowe. Lista poniżej podaje szczepy kontrolne, które końcowy użytkownik może łatwo otrzymać. Szczep wzorcowy Escherichia coli Prawidłowy wzór oporności* ATCC 25922 Pseudomonas aeruginosa Prawidłowy wzór oporności* ATCC 27853 Staphylococcus aureus Prawidłowy wzór oporności* ATCC 25923 *Zobacz w odpowiedniej tabeli kontroli jakości M43 MICROGEN STAPH M433 MICROGEN STAPH PRZEZNACZENIE TESTU MICROGEN Staph jest szybkim testem lateksowym do potwierdzenia identyfikacji prawdopodobnych kolonii Staphylococcus aureus z podłoży wzrostowych do wstępnej izolacji, działającym na zasadzie aglutynacji szkiełkowej. ZASADA TESTU Cząsteczki lateksowe są pokryte fibrynogenem (do którego wiąże się koagulaza) i IgG (które wiążą się z białkiem A). Po zmieszaniu z zawiesiną S. aureus cząsteczki lateksowe błyskawicznie reagują tworząc zauważalne agregaty. Żadna zauważalna aglutynacja nie zachodzi w nieobecności posiadających koagulazę/białko A gronkowców. ZAWARTOŚĆ OPAKOWANIA Odczynnik M43a odczynnik lateksowy na gronkowce: M43 M433 5 ml 5 x 5 ml Cząsteczki lateksowe pokryte ludzkim fibrynogenem i IgG konserwowane 0,099% roztworem azydku sodowego (niebieska nakrętka). Kontrola (+) M43b kontrola dodatnia: M43 M433 1 ml 2 x 1 ml Inaktywowany preparat S. aureus konserwowany 0,099% roztworem azydku sodowego (czarna nakrętka). Instrukcja użycia Jednorazowe kartoniki aglutynacyjne Jednorazowe pałeczki do mieszania DODATKOWE MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIE WCHODZĄCE W SKŁAD ZESTAWU ezy bakteriologiczne ŚRODKI OSTROŻNOŚCI Środki bezpieczeństwa: 1. Odczynniki dostarczone w tym zestawie przeznaczone są tylko do diagnostyki in vitro. 2. Azydek sodowy, który służy do konserwowania odczynników w zestawie, może reagować z ołowianą lub miedzianą instalacją kanalizacyjną, tworząc potencjalnie wybuchowe azydki metali. Utylizować zalewając dużą objętością wody, aby zapobiec osadzaniu się azydków. 14

3. IgG i fibrynogen użyte do uczulenia cząsteczek lateksu otrzymano z ludzkiej plazmy, która po przebadaniu okazała się ujemna na obecność przeciwciał przeciw HIV-1, HIV-2 i HbsAg. Pomimo tego powinno się odczynnik traktować jak materiał potencjalnie zakaźny. 4. Należy podjąć odpowiednie środki ostrożności podczas pracy i utylizacji potencjalnych patogenów. Dekontaminację materiału zakaźnego powinno się przeprowadzać przy pomocy podchlorynu sodowego w końcowym stężeniu 3% przez 30 min. Ścieki płynne zawierające kwasy należy neutralizować przed wylaniem. 5. Kontrola dodatnia została inaktywowana w czasie procesu wytwarzania. Jednak powinna być traktowana jak materiał potencjalnie zakaźny. Środki proceduralne: 1. MICROGEN Staph powinien być używany zgodnie z dołączoną instrukcją. 2. Pozwolić wszystkim odczynnikom na osiągnięcie temperatury pokojowej przed użyciem. 3. Nie rozcieńczać żadnego odczynnika z zestawu. 4. Nie mieszać odczynników z różnych partii i zestawów. 5. Nie zamrażać żadnych odczynników. 6. Uważać, żeby zakraplacz z odczynnikiem lateksowym nie dotknął kontroli dodatniej lub próbek bakteryjnych. 7. Zachować ostrożność podczas zapisywania wyników aglutynacji. Reakcje, które są zbyt silne lub włókniste mogą nie być prawdziwą aglutynacją. 8. Przed użyciem upewnić się, że karta jest czysta i sucha. PRZECHOWYWANIE I TERMIN WAŻNOŚCI MICROGEN Staph powinien być przechowywany w temp. 2-8 C, kiedy nie jest używany. Zestawu nie należy używać po upływie daty ważności wydrukowanej na naklejce na kartonie. MATERIAŁ DO BADANIA Wybrać 1-2 izolowane kolonie rosnące przez 18-24 godz. w temp. 35-37 C na podłożu do izolacji wstępnej, takim jak agar z 5% krwi. Morfologia badanych drobnoustrojów powinna przypominać morfologię S. aureus. Powinno się badać pojedyncze czyste kolonie, aby zminimalizować możliwość błędnych wyników. Jeżeli to konieczne, rozizolować szczep na nowej płytce agarowej. Bakterie z kolonii o atypowej morfologii sprawdzić pod względem barwienia metodą Grama, aby zwiększyć prawdopodobieństwo, że wybrano do badania gronkowce. SPOSÓB WYKONANIA Kontrola jakości: 1. Kontrola dodatnia: dodać jedną kroplę kontroli dodatniej (M43b) do kółka na karcie testowej. Wymieszać lateks MICROGEN Staph przez delikatne odwracanie buteleczki i dodać 1 kroplę do tego samego kółka na karcie reakcyjnej; zamieszać pałeczką. Nie pozwolić, żeby zakraplacz dotknął do kontroli dodatniej. Delikatnie obracać kartę. Po 2 minutach powinna uwidocznić się aglutynacja, wskazująca na wynik dodatni. Jeżeli nie widać aglutynacji, powinno się użyć nowy zestaw. 2. Kontrola ujemna: wymieszać lateks MICROGEN Staph przez delikatne odwracanie buteleczki i dodać 1 kroplę do kółka na karcie reakcyjnej. Pobrać jedną świeżą (18-24 godz.) kolonię znanego gronkowca koagulazo-ujemnego, np. Staphylococcus epidermidis i zawiesić ją w kropli odczynnika lateksowego na karcie. Delikatnie obracać kartę przez 2 minuty. Nie powinna zajść żadna aglutynacja. Procedura badawcza: 1. Wymieszać lateks MICROGEN Staph przez delikatne odwracanie buteleczki i dodać 1 kroplę do kółka na czystej, suchej karcie reakcyjnej. 2. Pobrać jałową ezą jedną kolonię badanego szczepu i zawiesić w kropli odczynnika lateksowego na karcie. Rozprowadzić na powierzchni kółka pałeczką do mieszania. 3. Delikatnie obracać kartę przez 2 minuty i obserwować, czy pojawia się aglutynacja. 4. Po odczycie wrzucić zużyte karty i pałeczki do roztworu odpowiedniego środka dezynfekcyjnego. INTERPRETACJA WYNIKÓW Aglutynacja po 2 minutach jest wynikiem dodatnim i wskazuje na obecność S. aureus. Brak aglutynacji wskazuje na nieobecność S. aureus i innych szczepów gronkowców koagulazo-dodatnich, posiadających białko A. OGRANICZENIA TESTU 1. Wyniki należy interpretować w połączeniu ze wszystkimi dostępnymi informacjami laboratoryjnymi i klinicznymi. 2. Badać tylko czyste, pojedyncze kolonie, ponieważ mieszane kolonie mogą dawać błędne wyniki. 3. Hodowle starsze od 30-godzinnych mogą dawać autoaglutynację. 4. Podłoża o wysokiej zawartości soli, takie jak Mannitol Salt Agar, hamują wytwarzanie białka A, co może prowadzić do fałszywie ujemnych wyników. 5. Szorstkie szczepy gronkowców mogą dawać fałszywie dodatnie reakcje. Szczepy te spotyka się rzadko i można je odróżnić od gładkich szczepów po morfologii kolonii. Obecność szczepu szorstkiego można potwierdzić przez zawieszenie kolonii w soli fizjologicznej i sprawdzenie, czy zawiesina jest gładka, czy nie. 6. Włóknista reakcja na karcie może nie być prawdziwą reakcją dodatnią. Wymagane są dalsze testy biochemiczne. 15

7. Pewne drożdżaki mogą dawać fałszywie dodatnie wyniki. 8. Wszystkie koagulazo-dodatnie gronkowce reagują z MICROGEN Staph i dlatego S. aureus nie można w ten sposób odróżnić od S. intermedius i S. hyicus. Jednak te dwa ostatnie gatunki rzadko izoluje się z materiałów od ludzi. Częściej izoluje się je od zwierząt lub są saprofitami. 9. MICROGEN Staph jest przeznaczony do identyfikacji wstępnej S. aureus. Identyfikację kolonii dających wyniki dodatnie powinno się potwierdzić testami biochemicznymi. CHARAKTERYSTYKA PORÓWNAWCZA Porównano MICROGEN Staph z dobrze znanym dostępnym w handlu lateksowym testem aglutynacyjnym dla S. aureus. Badano przy pomocy obu testów 121 szczepów S. aureus i innych ściśle spokrewnionych szczepów gronkowcowych oraz 56 potencjalnie reagujących krzyżowo bakterii. Czułość: 63/63 = 100% Swoistość: 114/114 = 100% Zgodność: 177/177 = 100% MICROGEN Staph (+) ( ) Ogółem Komercyjny test (+) 63* 0 63 lateksowy ( ) 0 114 114 Ogółem 63 114 177 *Spośród 63 szczepów z tej grupy, 9 reagowało krzyżowo z obu testami. Były to szczepy C. diversus (1), A. baumanii (2), P. stuartii (1), B.cereus (2), K. oxytoca (1), paciorkowce (2). Jednak wszystkie wyżej wymienione szczepy albo nie rosły, albo miały bardzo nietypową morfologię, kiedy hodowano je na podłożach wybiórczych dla gronkowców. W przypadku B. cereus aglutynacja była nietypowa (włóknista). PASKI DO WYKRYWANIA OKSYDAZY MICROGEN MID-61 g Test paskowy do szybkiego wykrywania enzymu oksydazy cytochromowej u bakterii. ZAWARTOŚĆ 50 pasków Oxidase Detection Strips ZASTOSOWANIE Paski na oksydazę są stosowane w celu identyfikacji szczepów bakteryjnych na podstawie wykrywania obecności enzymu oksydazy cytochromowej u bakterii izolowanych na podłożach stałych. Paski są przeznaczone jedynie do użytku profesjonalnego. ZASADA DZIAŁANIA TESTU Pewne grupy bakterii zawierają cytochrom c i enzym oksydazę cytochromową jako część ich łańcucha oddechowego. Test na oksydazę składa się z pasków papierowych impregnowanych N,N,N,N -tetrametylo-1,4- fenylenodwuaminą. Oksydaza cytochromowa utlenia cytochrom c, który z kolei utlenia odczynnik dający ciemnoniebieski/fioletowy produkt. SKŁAD Paski bibułowe nasączone N,N,N,N -tetrametylo-1,4-fenylenodwuaminą w odpowiednim stężeniu. PRZECHOWYWANIE I TERMIN WAŻNOŚCI Przechowywać w temp. 2-8 C w dostarczonych pojemnikach do daty ważności podanej na etykiecie na opakowaniu. Pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej przed otwarciem. ŚRODKI OSTROŻNOŚCI Tylko do diagnostyki in vitro. Stosować zatwierdzone środki ostrożności w stosunku do materiału szkodliwego biologicznie oraz techniki aseptyczne. Test może używać jedynie odpowiednio przeszkolony i wykwalifikowany personel laboratoryjny. Sterylizować wszystkie odpady szkodliwe biologicznie przed wyrzuceniem, zgodnie z formularzem Product Safety Data. 1. Paski powinny być użyte zgodnie z niniejszą instrukcją obsługi. 2. Nie używać po upływie terminu ważności znajdującego się na etykiecie produktu. 3. Paski nie powinny być narażone na działanie wilgoci w trakcie przechowywania. 4. Opakowanie powinno być zawsze szczelnie zamknięte. 5. Nie stosować ez z chromonikieliny do przenoszenia koloni z podłoża chromonikielina zawiera żelazo, które może katalizować reakcję utleniania. WYKONANIE TESTU I INTERPRETACJA WYNIKÓW 1. Delikatnie dotknąć testowaną kolonię za pomocą paska, uważając aby nie dotknąć bądź przenieść podłoża. 16

2. Alternatywnie można przenieść testowaną kolonię na pasek za pomocą szklanej bagietki bądź plastikowej jednorazowej ezy. Rozprowadzić kolonię na powierzchni paska. 3. Obserwować pasek do 15 sekund. 4. Pojawienie się koloru niebieskiego/fioletowego wskazuje na wynik dodatni. 5. Po użyciu, zanurzyć pasek w środku dezynfekcyjnym. KONTROLA JAKOŚCI Sprawdzić, czy nie ma oznak uszkodzenia opakowania. Kontrolę jakości należy przeprowadzić z co najmniej jednym szczepem wykazującym reakcję dodatnią i co najmniej jednym szczepem wykazującym reakcję ujemną, które należy nanieść na odpowiednie powierzchnie paska. Nie używać testu, jeżeli reakcje dla szczepów kontrolnych będą nieprawidłowe. W poniższej tabelce umieszczono szczepy kontrolne, które użytkownik może łatwo zdobyć. Szczep wzorcowy Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 Staphylococcus aureus ATCC 9144 Escherichia coli ATCC 25922 Wynik Dodatni Dodatni Ujemny Ujemny OGRANICZENIA TESTU Zaleca się wykonanie testów biochemicznych i/lub serologicznych z czystej hodowli w celu potwierdzenia identyfikacji. Drobnoustoje, które wytwarzają kwas fermentując węglowodany, np. rosnące na agarze MacConkeya, powinno się przesiać przed badaniem na inne podłoże. Kolonie pobrane z podłoża zawierającego azotany mogą dawać niewiarygodne wyniki. Podłoża zawierające wysokie stężenie krwi mogą dawać fałszywie dodatnie wyniki. TEST DO WYKRYWANIA KATALAZY nr kat 3155 wykrywanie aktywności katalazy u bakterii. Enzym ten rozkłada nadtlenek wodoru na wodę i tlen. ZAWARTOŚĆ 30 ml (nr kat. 3155). SKŁAD Odczynnik katalazowy zawiera roztwór nadtlenku wodoru o stężeniu ok. 3%. PRZECHOWYWANIE I TERMIN WAŻNOŚCI Przechowywać w temp. 6-25 C w dostarczonych pojemnikach do daty ważności podanej na etykiecie na opakowaniu. Pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej przed otwarciem. Chronić przed światłem. DODATKOWE MATERIAŁY WYMAGANE, ALE NIEDOSTARCZONE Standardowe mikrobiologiczne wyposażenie i sprzęt, takie jak ezy, podłoża do hodowli, wymazy, patyczki, palniki i inkubatory itp., a także odczynniki serologiczne i biochemiczne oraz dodatki takie, jak krew. SPOSÓB WYKONANIA 6. Uzyskaną czystą hodowlę umieścić na szkiełku podstawowym. 7. Dodać 1-2 krople odczynnik do wykrywania katalazy do rozmazu. 8. Sprawdzić natychmiast, czy szybko pojawią się pęcherzyki gazu. Metoda w probówce lub na płytce z agarem 1. Dodac kilka kropli odczynnika do wykrywania katalazy na powierzchnię 18-24 godzinnej hodowli na podłożu stałym nie zawierającym krwi. 2. Obserwować pojawienie się pęcherzyków gazu. Metoda z wykorzystaniem podłoża płynnego. 1. Kilka kropel odczynnika do wykrywania katalazy wlać do 18-24 godzinnej hodowli na podłożu płynnym. 2. Obserwować pojawienie się pęcherzyków gazu. INTERPRETACJA WYNIKÓW Dodatni pojawienie się niemal natychmiast pęcherzyków gazu. Ujemny brak pęcherzyków gazu. 17