" Rezultaty badan przeprowadzonych na analizatorach hematologicznych firmy Beckman Coulter serii LH / DXH800, pozwalajace na wykrycie nieprawidlowych komórek obecnych w infekcjach bakteryjnych, posocznicach, zakażeniach wirusowych i malarii.
Wstęp do Technologii i Sprzętu Beckman COULTER
Vacuum Technologia Coultera Aperture Current Pathway Internal Electrode External Electrode Suspension of Cells Detail of Aperture External Housing (Aperture Bath) Aperture Aperture Housing
VCS Technology V Volume C-Conductivity S -Scatter
V C S
VCS Technology Monos Neuts Eos Lymphs Basos
LH780
DxH800
Infekcje bakteryjne Posocznica Infekcje wirusowe Malaria
Infekcje bakteryjne
System Immunologiczny Odpornośc Komórkowa System System Odporność Humoralna
Zakażenia bakteryjne Neutrophil Eosinophil Monocyte Platelet Basophil Lymphocyte
Zmiany w morfologii Neutrofili w wyniku infekcji bakteryjnej Dohle Bodies Toxic Granulation 15 Cytoplasmic Vacuolization Presence of band forms
W jaki sposób rozróżniamy komórki? Wielkość Kształt jądra komórkowego Ziarnistości Stosunek wielkości jądra do cytoplazmy Różnice w aktywności enzymatycznej
LH CPD(Cell Population Data) 24 dodatkowe parametry 17
DxH CPD 56 dodatkowych parametrów
Tak samo jak mamy parametr Mean RBC Volume dla RBC (MCV), również mamy Mean NE Volume dla Neutrofili Tak samo jak mamy RDW RBC dla RBC, również mamy NE Szerokość Dystrybucji dla Neutrofili (NE V SD) LEFT SHIFT
Przykład : Umiarkowane przesunięcie w lewo CASE WITH MODERATE LEFT SHIFT 20 NORMAL CASE
Umiarkowane przesunięcie w lewo NORMAL CASE Wartości CPD pacjenta zdrowego - NORMA 21
Zmiany w populacji WBC w trakcie rozwoju choroby Przykład pierwszy od lewej wskazuje wartości prawidłowe.przykład ostatni po prawej - rozrost Imm NE. R Simon et al. Blood Vol 94 NO 10 supl 1 part 2 Nov 15 1999 page 45b.
WBC(RPD) Research Population Data Case Study Left Shift Normal Promielocyty Mielocyty Metamielocyty Pałki
RPD w ostrej infekcji bakteryjnej Am J Clin Pathol 2005;124: 69 pacjentów z ostrą infekcją bakteryjną, 35 norma Parametry ØNe Mean Volume, ØNe Mean Conductivity, ØNe Mean Scatter Ne Mean Vol Ne Mean Scatter Sepsis 156 ± 13.5 140 ± 10.1 Normal 143 ± 4.8 146 ± 7.3 Cut-off Ne Mean Vol >150 Swoistość 91% and czułość 70%
RPD w ostrej infekcji bakteryjnej Ambrosch A et al. ISLH 2006, Abstr 193 Ne Mean Vol MPV Sepsis 159 ± 16.4 9.0 ± 1.1 Non-systemic infection 148 ± 9.7 8.4 ± 1.0 p=0.002 P=0.019 Cut-off Ne Mean Vol >152.5 swoistość 70% i czułość 64.3% Cut-off MPV >9.07 swoistość 70% i czułość 54% MNV i MPV - dodatkowe parametry odróżniające sepse od ogólnoustrojowej reakcji zapalnej 65 pacjentów z ostrą infekcją bakteryjną Parametry ØNe Mean Vol ØMo Mean Vol ØMPV ØCRP ØWBC ØPLT ØIL6
* DxH 800
Podsumowanie Istotne parametry IVD : IC/CC parametry: Dodatkowe parametry RUO : WBC count/µl NEU count/µl C-reactive protein IL-6 Procalcitonine MNV SD Vol Ne Zysk : Możliwość konfiguracji metod decyzyjnych w celu potwierdzenia diagnozy
Infekcja Wirusowa
Neutrophil Eosinophil Monocyt Płytki Basophil Limfocyt
Różnorodność morfologii limfocytów Normal: Infekcja wirusowa: Lymphoma (CLL): Lymphoma (others): Acute Lymphatic Leukemia (ALL):
Wartości Normalne T Cells B Cells NK Cells PB 65-80 % 8-20% 5-14 % BM < 40 % < 40 % < 15 % T / B ratio of 5-10 / 1
Przykład klasyczny Zmiany Lym w CLL
CLL
Skategramy VCS B-CLL Normal Infekcja wirusowa
Drzewo diagnostyczne > SD Vol Ly/Ly Cut-off 3,47 < < Normals Mean Vol Ly/Mean C Ly Cut-off 0,78 > Suspect Viral infections < Suspect B-Cll Mean Vol Ly Cut-off 79,6 > Suspect OLPD Sensitivity 0.708 0.789 0.708 Specificity 0.629 1.000 0.629 TP 36 40 43 FN 15 12 21 PPV 0.603 0.833 0.705 NPV 0.863 0.922 0.851
Podsumowanie : Istotne parametry IVD : Dodatkowe parametry RUO : WBC count/µl LY count/µl MLV SD VOL LY Zysk : Możliwość konfiguracji metod decyzyjnych w celu potwierdzenia diagnozy wczesne wykrycie populacji małych LY
Malaria
Podejrzenie Malarii
Metody wykrycia malarii Metodą podstawową jest wykonanie rozmazu krwi obwodowej i diagnostyka mikroskopowa. Procedura jest trudna i czasochłonna, często dająca fałszywie negatywne wyniki.
Zarodziec malarii w RBC Rozmaz krwi obwodowej
Malaria 1. W odpowiedzi na infekcję spowodowaną Malarią następuje wzrost populacji dużych,pobudzonych Monocytów oraz Limfocytów 2. Niski poziom płytek krwi 3. Bardzo niski poziom lub brak Eozynofili 4. Dodatkowy pik w histogramie WBC poniżej 35 Femtolitre
Monocyty Lymphocyt Pobudzone Lymphocyte
Wygląd skategramów w Malarii w porównaniu z normą. 1 3 3 2 4 4 NORMAL 5 5 Malaria 1. Normal Monocyte 3. Large vacuoled Monocytes MALARIA 2. Normal Lymphocyte 4. Reactive Lymphocyte 5. Infected Malaria RBC
38.9% Plasmodium falciparum Platelets 102 A PEAK AT 35 FL
NORMAL MALARIA MALARIA MALARIA MALARIA
MALARIA FLAG Informacja Podejrzenie Malarii pojawia się w analizatorach Coulter dzięki technologii VCS wykrywającej Malarię w trakcie rutynowej CBC/Diff. Dzięki temu możemy w szybkim czasie zdiagnozować chorobę, nawet w przypadku gdy jest ona nieoczekiwana
alaria factor = SD Vol Ly x SD Vol Mo / 100 Cut-off 3,7 Sensitivity 98% Specificity 94%
Dodatkowe Kryteria Malaria Factor > 3.7 SD volume Monocytów > 23.2 Mean Volume of Monocytów > 180 Plt < 150 % EO < 0.15% WBC histogram Sensitivity 99.3% Specificity 96.3% AUC 0.991
DxH 800 Ramon Simon, MD
Malaria - Podsumowanie W pełni zautomatyzowana, szybka metoda oznaczania współczynnika Malarii w rutynowej CBC Tani, szybki test, wczesna diagnoza. Rodzaj Plasmodium nie wpływa na współczynnik Malarii Bardziej czuły i swoisty niż inne testy diagnostyczne wykrywające malarię.
Infekcja Bakteryjna Mean Ne Vol SD Vol Ne Infekcja Wirusowa Mean Ly Vol SD Vol Ly Malaria SD Vol Ly SD Vol Mo Plt < 150 % EO < 0.15% WBC histogram