RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 1638415 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 18.06.2004 04740059.3 (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: 15.12.2010 Europejski Biuletyn Patentowy 2010/50 EP 1638415 B1 (13) (51) T3 Int.Cl. A23L 1/29 (2006.01) A23L 1/30 (2006.01) A23L 1/305 (2006.01) A61K 35/74 (2006.01) (54) Tytuł wynalazku: Preparat dla niemowląt lub preparat pochodny (30) Pierwszeństwo: 23.06.2003 EP 03014055 (43) Zgłoszenie ogłoszono: 29.03.2006 w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2006/13 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: 31.05.2011 Wiadomości Urzędu Patentowego 2011/05 (73) Uprawniony z patentu: Nestec S.A., Vevey, CH (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP 1638415 T3 MARIE-CHRISTINE SECRETIN, Blonay, CH (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Agnieszka Jakobsche PRZEDSIĘBIORSTWO RZECZNIKÓW PATENTOWYCH PATPOL SP. Z O.O. SKR. POCZT. 168 00-950 Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).
EP 1 638 415 B1 Opis Dziedzina wynalazku [0001] Niniejszy wynalazek dotyczy odżywczej kompozycji przeznaczonej dla niemowląt i/albo małych dzieci, jak również sposobów polepszania komfortu przewodu pokarmowego, rozwijania zdrowej mikroflory jelit oraz przyczyniania się do fizycznego rozwoju niemowląt i/albo małych dzieci, przez częściowe, albo całkowite karmienie takich niemowląt lub dzieci wyżej wspomnianą odżywczą kompozycją. Tło wynalazku [0002] Kompozycja ludzkiego mleka służy jako cenny odnośnik dla polepszania preparatów dla niemowląt. Jednak, ludzkie mleko zawiera żyjące komórki, hormony, aktywne enzymy, immunoglobuliny i komponenty o unikalnej cząsteczkowej budowie które nie mogą być odtworzone w preparacie dla niemowląt. Przeciwnie niż ludzkie mleko, preparat dla niemowląt musi pozostawać trwały przy przechowywaniu w okresie aż do trzydziestu sześciu (36) miesięcy. Te fundamentalne różnice między ludzkim mlekiem a preparatem dla niemowląt często sterują różnicami w składzie wymaganymi dla uzyskania podobnego klinicznego wyniku. [0003] Badania komponentów ludzkiego mleka stymulowały wiele badań nad tym jakie składniki mogą być dodane dla polepszenia preparatu dla niemowląt. Większa wiedza o składzie ludzkiego mleka daje możliwość zaprojektowania preparatów dla niemowląt bliższych składowi ludzkiego mleka. Jednak, coraz bardziej jest widoczne, że preparat dla niemowląt nigdy nie może dokładnie odtwarzać ludzkiego mleka. Wiele składników ludzkiego mleka jest bioaktywnych, a ze względu na synergię między tymi składnikami, nie ma powodu aby uważać, że ten sam związek miałby taką samą bioaktywność w preparacie dla niemowląt. Prawdopodobieństwo takiej możliwości jest jeszcze bardziej obniżone gdy uwzględni się wpływ cielnej obróbki dla sterylizowania oraz długi okres przechowywania preparatu. [0004] Skład ludzkiego mleka różni się znacząco od mleka innych gatunków i wiele uwagi poświęcono jego różnym komponentom. Opisano wiele badań dotyczących zawartości nukleotydów w ludzkim mleku. Także w wielu publikacjach omówiono różne lipidy, mieszanki olejów lub tłuszczów, do stosowania w sztucznym żywieniu ludzkich niemowląt. [0005] W publikacji patentowej EP - 1 048 226 opisano preparat dla niemowląt zawierający źródło lipidów, źródło węglowodanów oraz źródło białek. Źródło białka obejmuje wolne aminokwasy argininę, tyrozynę oraz histydynę i frakcję zhydrolizowanej słodkiej serwatki z której usunięto kazeino-gliko-makropeptyd. W publikacji patentowej US - 5,916,621 ujawniono żywność dla małych dzieci /baby food/ w której dominuje białko serwatki, o zmniejszonej zawartości treoniny, którą można wytworzyć przez stosowanie podczas wytwarzania żywności dla małych dzieci proszku serwatki albo koncentratu serwatki, wolnych od glikomakropeptydu, albo o zmniejszonej zawartości glikomakropeptydu. Publikacja US 2003/077255 dotyczy stosowania kombinacji bakterii kwasu mlekowego i monomerycznej alfa-laktoalbuminy do leczenia wrzodów żołądka. Publikacja EP - 904784 dotyczy odżywczej kompozycji zawierającej minimum trzy różne probiotyczne szczepy w celu zapewnienia ochrony przed infekcjami wzdłuż całej drogi żołądkowo-jelitowej, przez co zapobiega się konieczności identyfikowania typu mikroorganizmu odpowiedzialnego za infekcję. Publikacja US 2003/017192 dotyczy wytwarzania stabilnych przy przechowywaniu ciekłych produktów zawierających probiotyki. [0006] Występuje zapotrzebowanie na nowe preparaty, dostarczające niemowlętom, albo małym dzieciom, odżywczych wartości o unikalnej kombinacji chroniących składników odżywczych, zwłaszcza zapewniają- 1
cych rozwój i metabolizm podobne do występujących u niemowląt karmionych piersią, a przez to skutkujących podobnymi zdrowotnymi charakterystykami w późniejszym dzieciństwie i wieku dorosłym. Krótki opis wynalazku [0007] Niniejszy wynalazek dotyczy preparatów przeznaczonych zarówno dla niemowląt jak i dla małych dzieci. Preparat według niniejszego wynalazku zawiera źródło białek, źródło lipidów, źródło węglowodanów i probiotyk, przy czym co najmniej 40% białek stanowią modyfikowane białka słodkiej serwatki nie zawierające CGMP albo o zmniejszonej zawartości CGMP, a zawartość białka w preparacie wynosi nie więcej niż 2 g/100kcal. [0008] Ponadto, niniejszy wynalazek dostarcza sposobu rozwijania zdrowej mikroflory jelit u niemowląt, lub małych dzieci, składającego się z całkowitego lub częściowego karmienia niemowlęcia lub małego dziecka, takim preparatem. Szczegółowy opis wynalazku [0009] W niniejszym opisie, poniżej przedstawiono definicje jakie muszą być brane pod uwagę przy czytaniu i interpretowaniu opisu, przykładów i zastrzeżeń. [0010] Niemowlę: zgodnie z dyrektywą Komisji UE 91/321/EEC z dnia 14 maja 1991 w sprawie preparatów dla niemowląt i preparatów pochodnych, artykuł 1.2(a), określenie "niemowlęta" / infant / oznacza dzieci w wieku poniżej 12 miesięcy. Ta definicja jest zastosowana w niniejszym opisie. [0011] Małe dzieci: zgodnie z dyrektywą Komisji UE 91/321/EEC z dnia 14 maja 1991 w sprawie preparatów dla niemowląt i preparatów pochodnych, artykuł 1.2(b), określenie "małe dzieci " / young children / [0012] oznacza dzieci w wieku między jeden rok a trzy lata. Ta definicja jest zastosowana w niniejszym wynalazku. [0013] Preparaty dla niemowląt: zgodnie z dyrektywą Komisji UE 91/321/EEC z dnia 14 maja 1991 w sprawie preparatów dla niemowląt i preparatów pochodnych, artykuł 1.2(c), określenie "preparat dla niemowląt" / infant formulae / oznacza środki spożywcze specjalnie przeznaczone do żywienia niemowląt w ciągu czterech do sześciu pierwszych miesięcy życia i same w sobie wystarczające do spełniania potrzeb pokarmowych tej kategorii osób. Ta definicja jest zastosowana w niniejszym opisie. Należy rozumieć, że niemowlęta mogą być karmione wyłącznie preparatami dla niemowląt albo preparat dla niemowląt może być stosowany przez opiekunkę jako uzupełnienie ludzkiego mleka. Jest to synonim dla szeroko stosowanego określenia "preparat początkowy/starterowy". [0014] Preparaty pochodne: zgodnie z dyrektywą Komisji UE 91/321/EEC z dnia 14 maja 1991 w sprawie preparatów dla niemowląt i preparatów pochodnych, artykuł 1.2(d), określenie "preparaty pochodne" / followon formulae / oznacza środki spożywcze specjalnie przeznaczone do żywienia niemowląt w wieku powyżej czterech miesięcy i stanowiące podstawowy składnik płynny w stopniowo coraz bardziej zróżnicowanym odżywianiu tej kategorii osób. Ta definicja jest zastosowana w niniejszym opisie. [0015] Probiotyk: zgodnie z publikacją Probiotics in Man and Animals, J. Appl Bacteriol. 66: 365-378, probiotyk jest definiowany jako suplement żywności z żywymi mikroorganizmami, który korzystnie wpływa na zwierzęcego gospodarza poprzez poprawianie jego zrównoważenia mikroorganizmów jelitowych. [0016] Zgodnie z pierwszym aspektem wynalazku, dostarcza on odżywczego preparatu dla niemowląt (włączając kompozycję starterową) albo dla małych dzieci. Jak już wspomniano, celem wynalazku jest dostarczenie unikalnej kombinacji chroniących składników odżywczych zapewniających rozwój i metabolizm podobne do występujących u niemowląt karmionych piersią, w celu umożliwienia uzyskiwania podobnych zdrowotnych charakterystyk w późniejszym dzieciństwie i dorosłym życiu. 2
[0017] Preparaty według niniejszego wynalazku dają mniejsze obciążenie dla niedojrzałych organów i faworyzują naturalny rozwój Bifidobacteria i innej korzystnej mikroflory w jelicie grubym, taki jaki występuje u niemowląt karmionych piersią. [0018] Podawane w diecie białko dostarcza niezbędnych aminokwasów potrzebnych do syntezy białka i rozwoju, a jakość białka jest tak samo ważna jak ilość białka. Do niedawna uważano, że w celu dostatecznego dostarczenia niezbędnych aminokwasów, preparaty oparte na krowim mleku muszą mieć zawartość białka znacznie większą niż w odnośnikowym ludzkim mleku. Zawartość białka w preparatach wykorzystujących zwykłą adaptowaną serwatkę wynosi od 2.1 do 2.6 g na 100 kcal, podczas gdy jego zawartość w ludzkim mleku wynosi od 1.4 do 1.8 g na 100 kcal. Nadmiar podawanego białka może wywoływać stres metaboliczny w organach niemowlęcia, które nie są w pełni rozwinięte. Zgodnie z pediatrycznymi zaleceniami dotyczącymi obniżenia zawartości białka w preparatach dla niemowląt, opisano kliniczne próby na niemowlętach karmionych preparatami zawierającymi białka w ilości między 1.6 a 2.0 g / 100 kcal. Jednak, te próby obniżenia zawartości białka w preparacie z użyciem tradycyjnych źródeł białka z krowiego mleka albo mieszanie obecnie dostępnych frakcji kazeinowej i serwatkowej -, chociaż wykazanie zasady było wyobrażalne, nie pozwoliły na odtworzenie wszystkich wskaźników metabolizmu białka ludzkiego mleka ani na zapewnienie dostatecznego rozwoju niemowlęcia. Na przykład, wyniki pokazały ogólny wzór aminokwasów w osoczu różny od tego jaki jest dla niemowląt karmionych piersią, obniżone poziomy tryptofanu w osoczu, podwyższone poziomy treoniny w osoczu, opóźnienie wzrostu i wyższe spożycie energii sugerują zwiększenie osadzania tłuszczu, co może być przyczyną otyłości w późniejszym życiu. [0019] Jednak, jeśli wzór aminokwasów preparatu dla niemowląt na bazie krowiego mleka może być doprowadzony do bliższego takiemu jaki jest w ludzkim mleku, to zawartość białka w takim preparacie może być zmniejszona, tak aby przypominała taką jaka jest w odnośniku. Zgodnie z jednym z aspektów niniejszego wynalazku została opracowana białkowa mieszanka unikalnej kompozycji aminokwasów pozwalająca na dostosowanie ilości białka do poziomu bliższego jego średniej zawartości w ludzkim mleku. [0020] Białkowa frakcja krowiego mleka jest mieszaniną kilku białek, które wszystkie mają inny profil aminokwasów. Kazeino-gliko-makropeptyd (CGMP) jest białkiem które występuje w tej frakcji. Pochodzi z kappa-kazeiny która została rozszczepiona przez proteolityczne rozszczepienie na 2/3 para-kappa-kazeinę, nierozpuszczalną frakcję która pozostaje we frakcji kazeinowej, oraz 1/3 CGMP, rozpuszczalną frakcję która występuje w serwatkowej frakcji. Proces pierwotnego frakcjonowania białka serwatki został opisany i objaśniony w publikacji patentowej EP - 880902; ten sposób pozwala na usuwanie praktycznie całego CGMP (frakcja bogata w treoninę i uboga w tryptofan) z serwatki bydlęcej, a przez to na zwiększanie ilości alfalaktoalbuminy (frakcja bardzo bogata w tryptofan). Przez połączenie tej frakcji zmodyfikowanej słodkiej serwatki (MSW) z odtłuszczonym mlekiem, i dodawaniem pewnej ilości wolnej L-histydyny i L-argininy (w celu uzyskania minimalnych ilości tych aminokwasów zgodnie z dyrektywą UE), źródło białka w preparacie według niniejszego wynalazku ma profil aminokwasów znacznie bliższy profilowi ludzkiego mleka, w szczególności charakteryzujący się porównywalnymi poziomami tryptofanu i treoniny, pozwalając na dostosowanie jego zawartości białka do występującej w ludzkim mleku. [0021] Odżywcza wartość takiej białkowej mieszanki była mierzona na szczurach. Wyniki (patrz tabela 1) pokazują, że taki preparat ma współczynnik wydajności wzrostowej białka (Protein Efficiency Ratio - PER), strawność azotu, wartość biologiczną (Biological Value - BV) oraz wykorzystanie białka netto (Net Protein Utilisation - NPU) porównywalne z preparatami wykorzystującymi standardową adaptowaną serwatkę. Tabela 1 3
Parametry odżywcze Kazeina Standardowy preparat wykorzystujący adaptowaną serwatkę Nowy preparat PER 1.36 2.49 2.70 Względny PER (kazeina = 100%) 100.0 182.8 198.3 Strawność (%) 96.7 92.8 91.4 BV 0.88 0.96 0.96 NPU (%) 85.4 88.8 87.5 [0022] Ponadto, szczury karmione preparatem zawierającym MSW wykazały znacznie mniejsze poziomy treoniny w osoczu i zwiększone poziomy tryptofanu w osoczu, w porównaniu ze szczurami karmionymi preparatami wykorzystującymi standardową adaptowaną serwatkę. [0023] Zawartość białka preparatów według niniejszego wynalazku jest nie większa niż 2 g/100 kcal, bardziej korzystnie mniejsza niż 1.85, a najbardziej korzystnie między 1.8 a 1.85 g/100 kcal. Ten poziom jest zgodny z ostatnimi danymi z oceny zapotrzebowania na białko we wczesnym okresie życia, które pokazują, że zalecenia dotyczące optymalnego spożywania białka są niższe niż były podawane w przeszłości. [0024] Dla zapewnienia optymalnej syntezy białka, a przez to optymalnego rozwoju, niezbędne oraz półniezbędne (to jest niezbędne tylko podczas okresu niemowlęctwa) aminokwasy muszą być dostarczane w takich samych ilościach jak w ludzkim mleku. Preparaty według niniejszego wynalazku korzystnie są albo wzbogacone w serwatkę (stosunek kazeina / serwatka ustalony na około 40/60) albo, bardziej korzystnie, z przewagą serwatki (stosunek kazeina / serwatka korzystnie ustalony na 30/70, albo nawet bardziej korzystnie, taki jak 20/80). Korzystny profil aminokwasów dla preparatów według niniejszego wynalazku jest porównywalny z takim jaki jest w ludzkim mleku (patrz tabela 2). Tabela 2 Aminokwas (g / 16 g N) Średnia Ludzkie mleko Najniższa Najwyższa wartość wartość Preparat według wynalazku (wartości reprezentatywne) Izoleucyna * 6.4 5.7 6.8 5.8 Leucyna * 11.5 11.0 11.9 11.9 Lizyna * 7.9 7.4 8.4 10.0 Metionina * 1.7 1.3 2.1 2.5 Cystyna ** 2.3 1.7 2.9 2.4 Fenyloalanina * 4.6 4.2 5.1 4.6 Tyrozyna ** 4.7 3.3 6.3 4.0 Treonina * 5.6 5.3 6.6 5.4 Tryptofan * 2.3 1.8 2.6 2.1 4
Aminokwas (g / 16 g N) Średnia Ludzkie mleko Najniższa Najwyższa wartość wartość Preparat według wynalazku (wartości reprezentatywne) Walina * 6.8 5.9 8.0 5.9 Arginina ** 4.2 3.5 4.9 4.5 Histydyna ** 2.8 2.4 3.8 2.5 Alanina 4.8 4.5 5.3 5.1. Kwas asparaginowy 10.4 10.1 10.8 11.1 Kwas glutaminowy 19.6 17.6 22.7 19.7 Glicyna 3.2 2.8 3.6 2.7 Prolina 10.2 8.9 11.2 7.8 Seryna 5.6 5.0 5.9 5.3 Wszystkie wartości skorygowane do 40% NH 3 * niezbędne aminokwasy ** pół-niezbędne aminokwasy [0025] Białka mogą być albo nienaruszone, albo częściowo zhydrolizowane sposobem jak opisany w publikacji patentu europejskiego nr 322589. [0026] Korzystnie, jedynym źródłem węglowodanów w kompozycji według niniejszego wynalazku jest laktoza. Węglowodany stanowią ważne źródło energii w diecie nowonarodzonego niemowlęcia. Laktoza jest naturalnym węglowodanem w ludzkim mleku. Większość niemowląt w dobrym stanie zdrowia może odpowiednio trawić laktozę. Ponadto, laktoza jest związana z kwasowością stolca i rozwojem Bifidobacteria i Lactobacilli przeważających w mikroflorze jelita grubego, podobnie do niemowląt karmionych piersią. Jest to uważane za ważne w tłumieniu rozwoju niepożądanych bakterii w jelicie grubym. Ponadto wykazano, że laktoza zwiększa absorpcję i zatrzymywanie wapnia, i prawdopodobnie innych minerałów. W ostatnim badaniu wykazano, że absorpcja wapnia jest 10% większa z preparatu zawierającego laktozę w porównaniu do takiego samego preparatu w którym laktozę zastąpiono przez glukozowe polimery. [0027] Jak wcześniej wspomniano, preparaty według niniejszego wynalazku zawierają co najmniej jeden probiotyk, w celu zapewnienia wszystkim niemowlętom, niezależnie od sposobu urodzenia albo higieny środowiska, korzyści w postaci ochrony flory jelitowej. [0028] Korzystne probiotyki są takie, które jako całość są bezpieczne, są to hodowle L(+)tworzące kwas mlekowy i mające czas życia dopuszczalny dla produktów takich jak preparaty dla niemowląt i preparaty pochodne, które wymagają tego aby pozostawały trwałe i skuteczne przez okres aż do 36 miesięcy. [0029] Przykładami korzystnych probiotyków są: Bifidobacterium lactis, sprzedawany przez firmę Christian Hansen; Streptococcus thermophilus dostarczany pod znakiem towarowym TH4 przez Chr. Hansen, Dania; Lactobacillus paracasei rhamnosus GG (ATCC 53103) dostarczany przez Valio Oy, Finlandia; Bifidobacterium longum BB536 dostarczany przez Morinaga Milk Industry Co. Ltd, Japonia. 5
[0030] Probiotyki według przedstawionego aspektu niniejszego wynalazku korzystnie występują w ilościach od 10 6 do 10 9 cfu/ gram (jednostek tworzących kolonię/gram) w suchym produkcie, korzystnie 10 6 do 10 8 cfu/g, a nawet bardziej korzystnie 2*10 7 cfu/gram w suchym produkcie. [0031] Kompozycja według niniejszego wynalazku zawiera co najmniej jeden probiotyczny szczep, ale także mogą być stosowane kombinacje różnych szczepów, w szczególności w preparatach pochodnych. Jeśli taka kombinacja ma być zastosowana, to korzystnie zawiera co najmniej jedną Bifidobacteria oraz co najmniej jeden Lactobacillus. Szczególnie korzystną kombinacją jest Bifidobacterium longum BB536 oraz Lactobacillus paracasei rhamnosus GG. [0032] Preparaty według niniejszego wynalazku także zawierają źródło lipidów. Tłuszcz dostarcza około połowy energii pochodzącej z diety i stanowi główny magazyn energii w ciałach niemowląt i małych dzieci. Obecnie występuje wzrastające zainteresowanie jakością dostarczanych w diecie lipidów w okresie niemowlęctwa, jako głównym czynnikiem wzrostu, wizualnego i neurologicznego rozwoju oraz długotrwałego zdrowia. Zatem, wybór dostarczanych w diecie lipidów we wczesnym okresie życia jest uważany za bardzo ważny. [0033] Ze względu na żołądki bardzo małej wielkości i ich ograniczoną tolerancję na hipertoniczną żywność, niemowlęta wymagają skoncentrowanego źródła energii. Spośród 3 składników odżywczych dostarczających energię, tłuszcz dostarcza 9 kcal na gram, to jest więcej niż dwa razy tyle energii co występuje w węglowodanach lub białkach. Większość ekspertów zaleca w preparatach dla niemowląt oraz w preparatach pochodnych, że tłuszcz powinien dostarczać od 30% do 55% całej energii. Korzystnie, tłuszcze stosowane w preparatach według niniejszego wynalazku są głównie tłuszczami roślinnymi. Jednak, serwatka i odtłuszczone mleko naturalnie zawierają ślady tłuszczu mleka, zatem prawdopodobne jest, że bardzo mały procent tłuszczu mleka występuje. [0034] Skład kwasów tłuszczowych w diecie determinuje skład kwasów tłuszczowych wszystkich tkanek, w tym tkanek magazynujących. Dlatego mieszanka tłuszczowa stosowana w preparatach według wynalazku korzystnie ma ogólny skład kwasów tłuszczowych tak bliski jak to możliwe składowi ludzkiego mleka, w celu zapewnienia podobnej plastyczności membrany i mobilizacji energii w przypadku zwiększonego zapotrzebowania. Zatem, korzystna mieszanka tłuszczowa dostarcza niezbędnych kwasów tłuszczowych (kwasów linolenowego oraz α-linolenowego), jak również odpowiednich ilości kwasu oleinowego, kwasu palmitynowego, kwasu laurynowego oraz kwasu mirystynowego. [0035] Ludzkie mleko zawiera kwas dokozaheksaenowy (DHA) i kwas arachidonowy (ARA) dzięki czemu karmienie piersią dostarcza niemowlętom wstępnie uformowanych kwasów LC-PUFA. Zawartość DHA w ludzkim mleku zmienia się w znacznym stopniu w populacji i mocno zależy od diety matki. W skali światowej, zawartość DHA w mleku matek stosujących zachodnie diety wynosi od 0.1 do 0.4%, z wartością średnią 0.25%, podczas gdy u matek stosujących nie-zachodnie diety, zawartość DHA w mleku jest większa, i wynosi od 0.1 do 1.4%, z wartością średnią 0.6%. Jednakże ilości 0.2 do 0.3% są ogólnie akceptowane jako reprezentatywne. Na zawartość ARA w ludzkim mleku mniejszy wpływ ma dieta niż dla DHA. W skali światowej, zawartość ARA w ludzkim mleku matek stosujących zachodnie diety wynosi od 0.2 do 0.7%, z wartością średnią 0.45%, podczas gdy u matek stosujących nie-zachodnie diety, zawartość ARA wynosi od 0.4 do 1.2%, z wartością średnią 0.6%. Na oba poziomy DHA i ARA ma wpływ czas trwania laktacji i mają tendencję do obniżania się od siary to mleka przejściowego i mleka dojrzałego. [0036] Zgodnie z tym, źródło lipidów w niniejszym wynalazku korzystnie także zawiera co najmniej jeden wstępnie uformowany kwas LC-PUFA, taki jak DHA. Źródłem DHA może być naturalny olej rybny, który tak- 6
że dostarcza kwasu eikozapentaenowego (EPA) w stosunku DHA/EPA > 4. Razem z DHA, źródło lipidów może także zawierać ARA, na przykład pochodzące z grzybów, takich jak Mortierella alpina. [0037] Preparaty według niniejszego wynalazku korzystnie mają zmniejszony poziom elektrolitów w porównaniu do standardowych preparatów dla niemowląt, i preparatów pochodnych. Na przykład, stosunek Na/K (mmole) może być około 0.4, stosunek (Na+K)/Cl (mmole) może być około 1.8, Na+K+Cl może być około 34 a (Na+K)-Cl może być około 10. [0038] Preparaty według niniejszego wynalazku korzystnie mają niską zawartość fosforu. Korzystnie, zawartość wapnia zmienia się między 35 a 45 mg/100 ml, zawartość fosforu zmienia się między 15 a 25 mg/ml, a stosunek Ca/P wynosi między 1.4 a 3. [0039] Najbardziej korzystne ilości są podane w poniższej tabeli 3. Tabela 3 Wynalazek (mg/100ml) Mleko krowie (mg/100ml) Średnia wartość dla mleka z piersi (mg/100ml) Wapń 41 120 30 Fosfor 21 90 15 Stosunek Ca / P 2 1.3 [0040] Preparaty według niniejszego wynalazku mogą także dostarczać pół-niezbędnych składników odżywczych, które mogą być niezbędne w szczególnych warunkach (na przykład tauryny, nukleotydów, karnityny, selenu). [0041] Tauryna jest wolnym aminokwasem, który nie jest używany do budowania cząsteczek białka. Wykazano, że jest zaangażowana w wiele fizjologicznych funkcji, na przykład jako czynnik troficzny w rozwoju centralnego układu nerwowego, utrzymując strukturalną integralność błony, regulując homeostazę wapnia, jako osmolit, neuromodulator oraz neurotransmiter. Także ulega sprzężeniu z kwasami żółciowymi z wytworzeniem soli kwasów żółciowych (niezbędnych dla tworzenia micelli i absorpcji tłuszczu). [0042] Nukleotydy to niebiałkowe azotowe związki, które zawierają trzy charakterystyczne komponenty: azotową zasadę, cukier (rybozę albo deoksy-rybozę), i jedną, lub więcej, grup fosforanowych. Całkowita zawartość nukleotydów w ludzkim mleku stanowi 2 do 5% niebiałkowego azotu. Krowie mleko zawiera mniejsze stężenie nukleotydów niż ludzkie mleko, a jego nukleotydowy profil różni się znacząco od tego jaki jest w ludzkim mleku. Dodanie nukleotydów w niniejszym preparacie dla niemowląt jest zgodne z fizjologicznym wzorem poziomów nukleotydów w ludzkim mleku, z przewagą łatwiej metabolizowanych pirymidyn w stosunku do mniej pożądanych puryn: dodanie nukleotydów do preparatu dla niemowląt jest bezpieczne. Poziomy dodawania mieszczą się w zakresie zgodnym z Komitetem Naukowym do spraw Żywności Unii Europejskiej oraz dyrektywą Unii Europejskiej. [0043] Karnityna jest szczególnym azotowym związkiem, który należy do grupy czynników żywnościowych znanych jako składniki odżywcze podobne do witamin. Pełni kluczową rolę w dostarczaniu energii do tkanek podczas życia płodowego i w okresie noworodkowym, przez ułatwianie transportu kwasów tłuszczowych o długim łańcuchu do mitochondriów, gdzie następuje beta-utlenianie. Kwasy tłuszczowe mają nie przechodzić w wolnej postaci przez ściankę mitochondrialną; przenoszenie do mitochondriów jest sterowane przez co najmniej trzy enzymatyczne układy, mianowicie transferazy I i II karnityna - palmitoil oraz translokazę karni- 7
tyny, w którym uczestniczy karnityna. Zatem, karnityna jest wymagana dla prawidłowego lipidowego utleniania, a deficyt karnityny albo niskie przyswajanie karnityny, może prowadzić do zaburzonego wykorzystania tłuszczu i zmienionego metabolizmu lipidów. Karnityna także pełni rolę w innych metabolicznych procesach, takich jaki ketogeneza, lipoliza, oraz utrzymywaniu termogenezy i metabolizmu azotu. Ponadto, wykazano, że karnityna polepsza wykorzystanie triglicerydów o średniej długości łańcucha u niemowląt. Noworodki mają względnie małe zapasy karnityny i bardzo małą aktywność enzymu katalizującego ostatni etap syntezy karnityny. Zatem noworodki są szczególnie narażone na ryzyko wystąpienia niedoboru karnityny przy braku odpowiedniego dostarczania egzogennej karnityny. Karnitynę korzystnie dodaje się do preparatów dla niemowląt, w celu uzyskania poziomu bliskiego do występującego w ludzkim mleku. [0044] Preparaty według niniejszego wynalazku mogą być w postaci proszku, albo w postaci gotowej do picia cieczy. W przypadku preparatu proszkowego, poniższa tabela karmienia (tabela 4) może być stosowana jako przewodnik. Jednak, ilości mogą być zmienione zgodnie z zaleceniem medycznym. Wprowadzanie preparatu dla niemowląt powinno być prowadzone pod nadzorem medycznym. Standardowe odtwarzanie preparatów według niniejszego wynalazku to 12.9%, to jest 12.9 g proszku na 90 ml wody, co daje kaloryczność 67 kcal/100ml. Tabela 4 Ilość na karmienie Liczba karmień na dzień Wiek niemowlęcia Wcześniej gotowana woda (ml) Liczba miarek Preparat Inne 1-szy i 2-gi tydzień 90 3 6-3-ci i 4-ty tydzień 120 4 5-2-gi miesiąc 150 5 5-3-ci i 4-ty miesiąc 180 6 5-5-ty i 6-ty miesiąc 210 7 5 - Od 7-go miesiąca i dalej 210 7 4-3 1-2 [0045] W przypadku cieczy gotowej do picia, należy zwrócić specjalną uwagę dla zapewnienia aby probiotyk przypadkowo nie wchodził w kontakt z cieczą. Korzystnie, probiotyk przechowuje się w postaci proszku oddzielnie od cieczy, i wprowadza się go i homogenizuje w cieczy bezpośrednio przed konsumpcją, na przykład do dwóch godzin przed konsumpcją. [0046] Wykazano, że preparaty według niniejszego wynalazku dostarczają korzyści odżywczych, w tym lepszego wykorzystania białka, wzoru aminokwasów w osoczu bliskiego do niemowląt karmionych piersią, oraz odpowiedniego tempa rozwoju. Polepszony profil aminokwasów preparatów według niniejszego wynalazku skutkuje lepszym wykorzystaniem białka, co wykazano przez wyższy procent zatrzymywania azotu stwierdzony u niemowląt karmionych preparatem według niniejszego wynalazku w porównaniu do niemowląt karmionych zwyczajnym preparatem adaptowanej serwatki (patrz tabela 5). W wyniku tego, całkowita ilość całego azotu zostaje niezmieniona. Tabela 5: równowaga azotu Standardowy preparat adaptowanej serwatki Preparat według wynalazku Absorpcja 89.5% 89.3% 8
Standardowy preparat adaptowanej serwatki Preparat według wynalazku Zatrzymywanie 32.2% 39.6% [0047] Wykazano, że aminokwasy w osoczu niemowląt karmionych preparatem według niniejszego wynalazku są bliższe występującym u niemowląt karmionych piersią w porównaniu do niemowląt karmionych standardowym preparatem adaptowanej serwatki. Ponadto, zawartość białka w preparatach według niniejszego wynalazku spełnia potrzeby niemowląt urodzonych w terminie podczas pierwszych miesięcy życia bez nadmiernego przyswajania energii albo zwiększonego wskaźnika masy ciała. Ponadto, przybór wagi i wzrostu niemowląt karmionych preparatami według niniejszego wynalazku są porównywalne z niemowlętami karmionymi piersią. [0048] Preparaty według niniejszego wynalazku mniej obciążają niedojrzale organy. Aminokwasy konsumowane w nadmiarze i nie wykorzystywane do syntezy białka akumulują się w krwi (hyperaminoacidemias) i są metabolizowane w wątrobie do mocznika, który musi być wydalony przez nerki, przez co zwiększa się obciążenie nerek. Taki niepotrzebny metaboliczny stres jest dobrze zilustrowany u niemowląt karmionych standardowymi preparatami adaptowanej serwatki przez poziomy aminokwasów w osoczu i poziomy mocznika w osoczu wyższe niż obserwowane u niemowląt karmionych piersią. Mniejsza zawartość białka w preparatach według niniejszego wynalazku zapobiega metabolicznemu stresowi w niedojrzałych organach niemowlęcia wywołanych nadmiarem białka podawanego w diecie. Ten korzystny efekt został wykazany: niemowlęta karmione preparatem według niniejszego wynalazku mają stężenia mocznikowego azotu w osoczu podobne do występujących u niemowląt karmionych piersią i znacznie mniejsze niż występujące u niemowląt karmionych standardowymi preparatami adaptowanej serwatki. Mocznikowy azot w osoczu jest bardzo czułym wskaźnikiem odpowiedniego spożycia białka ponieważ wyższe poziomy niż u niemowląt karmionych piersią wskazują na nadmiar niewykorzystanych aminokwasów, podczas gdy mniejsze poziomy wskazują na niewystarczające dostarczanie białka. Ponadto, modyfikowana słodka serwatka i probiotyk(-i) w preparatach według niniejszego wynalazku mogą mieć synergistyczne działanie w przyczynianiu się do fizycznego rozwoju, w szczególności gdy także występuje LC-PUFA. [0049] Zgodnie z innym aspektem niniejszego wynalazku, dostarcza on sposobu rozwijania zdrowej mikroflory jelit u niemowląt albo małych dzieci, składającego się z całkowitego albo częściowego, karmienia danego niemowlęcia albo dziecka preparatem według niniejszego wynalazku. [0050] Skład mikroflory jelit i wielkość populacji szczepów uznaje się za regulowane przez współzawodniczenie między składnikami odżywczymi a dostępnością tlenu. Uważa się, że te czynniki w mleku z piersi mogą być bifidogeniczne, co wyjaśnia łatwość z jaką korzystna mikroflora ustala się u niemowląt karmionych piersią. Bifidobacteria podczas wzrostu wykorzystuje laktozę jako substrat do wytwarzania kwasów mlekowego i octowego, które obniżają jelitowe ph do 4-5. Niska zdolność buforowania mleka z piersi mogłaby pozwalać na utrzymywanie takiego niskiego ph, co hamuje rozwój beztlenowych gnilnych bakterii i umożliwia proliferację Bifidobacteria i lactobacilli, które tolerują kwas. Bez chęci wiązania się teorią, twórca wynalazku uważa, że występuje synergia między źródłem białka w preparatach według niniejszego wynalazku i probiotykiem tak, że u niemowląt karmionych preparatem według niniejszego wynalazku szybko ustala się i utrzymuje mikroflora podobna do występującej u niemowląt karmionych piersią. [0051] Zmniejszona zawartość fosforanów w preparacie według niniejszego wynalazku, zgodnie z pierwszym przedmiotem niniejszego wynalazku, optymalizuje tworzenie kości i razem z laktozą i małą zawartością białka, tworzy optymalne warunki dla jelitowej flory z przewagą Bifidobacteria. 9
Przykłady [0052] Poniższe przykłady są ilustracyjne dla pewnych produktów i sposobów wytwarzania pewnych produktów mieszczących się w zakresie niniejszego wynalazku. W żadnym przypadku nie powinny być uważane za jakiekolwiek ograniczenie wynalazku. W odniesieniu do wynalazku mogą być wprowadzane zmiany i modyfikacje. To znaczy, że w tych przykładach specjalista zauważy wiele odmian dotyczących w szerokim zakresie preparatu, składników, obróbki oraz mieszanin, dla racjonalnego dostosowania naturalnie występujących poziomów związków według wynalazku dla różnych zastosowań. Przykład 1 [0053] Poniższy przykład korzystnego preparatu według wynalazku jest tylko ilustracyjny. Składnik odżywczy na 100kcal na litr Energia (kcal) 100 670 Białka (g) (kazeina/serwatka: 30/70) 1.83 12.3 Całkowity tłuszcz (g) 5.3 35.7 w czym Kwas linolenowy (g) 0.77 5.2 Kwas α-linolenowy (mg) 95 640 DHA (mg) 12 77 ARA 12 77 Laktoza (g) 11.2 74.7 Minerały (g) 0.37 2.5 Na (mg) 23 150 K (mg) 89 590 Cl (mg) 64 430 Ca (mg) 62 410 P (mg) 31 210 Mg (mg) 7 50 Mn (µg) 8 50 Se (µg) 2 13 Witamina A (µg RE) 105 700 Witamina D (µg) 1.5 10 Witamina E (mg TE) 0.8 5.4 Witamina K1 (µg) 8 54 Witamina C (mg) 10 67 10
Składnik odżywczy na 100kcal na litr Witamina B1 (mg) 0.07 0.47 Witamina B2 (mg) 0.15 1.0 Niacyna (mg) 1 6.7 Witamina B6 (mg) 0.075 0.50 Kwas foliowy (µg) 9 60 Kwas pantotenowy (mg) 0.45 3 Witamina B12 (µg) 0.3 2 Biotyna (µg) 2.2 15 Cholina (mg) 10 67 Fe (mg) 1.2 8 I (µg) 15 100 Cu (mg) 0.06 0.4 Zn (mg) 0.75 5 Bifidobacterium longum BB 536: 1x10 7 cfu/gram w suchym produkcie Lactobacillus paracasei rhamnosus GG: 2x10 7 cfu/gram w suchym produkcie Przykład 2 [0054] Ponad 100 niemowląt, których matki zdecydowały nie karmić piersią po 14-tym dniu życia, zostało włączonych do statystycznego, kontrolowanego, podwójnie ślepego, wieloośrodkowego klinicznego testu na dwóch grupach. Pierwszą grupę karmiono preparatem według Przykładu 1 a drugą grupę karmiono podobnym preparatem, ale bez probiotyków. Poniższe pomiary, które są parametrami uznanymi dla oceny fizycznego rozwoju niemowląt, prowadzono przez 112 dni (16 tygodni):- średni przyrost wagi w g/dzień, długość w pozycji leżącej, obwód głowy. Pomiary prowadzono przy rekrutacji a potem w 5 tygodniu, 8 tygodniu, 12 tygodniu oraz 16 tygodniu (w każdym przypadku +/- 1 tydzień) jak przedstawiono poniżej: waga (w zaokrągleniu do 10 gramów): niemowlęta ważono bez ubrania na wadze z elektroniczną skalą. Te same wagi stosowano dla wszystkich niemowląt na wszystkich wizytach. Elektroniczne wagi kalibrowano zgodnie z zaleceniami wytwórcy, na początku badania i później co 3 miesiące, aż do końca badania. [0055] Długość w pozycji leżącej (w zaokrągleniu do 1 mm): niemowlęta mierzono stosują standardowy stół do pomiaru długości. Co najmniej dwoje ludzi pomagało utrzymać prawidłowe wyprostowanie ciała i długość całego ciała ze zgiętymi nogami. [0056] Obwód głowy (w zaokrągleniu do 1 mm): otrzymany przy użyciu standardowej nie-rozciągliwej, pokrytej plastikiem taśmy do mierzenia. Pomiary prowadzono w przybliżeniu 2.5 cm powyżej brwi, bezpośrednio na największym obwodzie czaszki. 11
[0057] Ponadto, prowadzono regularne obserwacje pokarmowej tolerancji poprzez obserwowanie właściwości stolca, przypadków wymiotów i niewydolności, częstotliwość i czas trwania kolek, jak podano poniżej: 3 dni po rekrutacji; 3 dni przed, i po antropometrycznych pomiarach w 5 tygodniu, 8 tygodniu oraz 12 tygodniu; 3 dni przed końcowymi antropometrycznymi pomiarami w 16 tygodniu. [0058] Ponadto, notowano częstotliwość epizodów zachorowalności (kilka razy zauważone przez profesjonalnych przedstawicieli opieki zdrowotnej plus epizody złego stanu zdrowia, w szczególności choroby przewodu pokarmowego). Te obserwacje były robione przez opiekunów niemowląt w dostarczonym w tym celu dzienniku. [0059] Stwierdzono, że niemowlęta karmione preparatem według niniejszego wynalazku wykazują satysfakcjonujący fizyczny rozwój połączony z polepszonym komfortem przewodu pokarmowego (co wykazano w szczegółowo powyżej omówionej tolerancji pokarmowej) w porównaniu z grupą kontrolną. Zastrzeżenia patentowe: 1. Preparat dla niemowląt lub preparat pochodny, zawierający źródło białek, źródło lipidów, źródło węglowodanów i probiotyk, przy czym co najmniej 40% białek stanowią modyfikowane białka słodkiej serwatki nie zawierające CGMP lub o zmniejszonej zawartości CGMP, a zawartość białka w preparacie wynosi nie więcej niż 2 g/100kcal. 2. Preparat według zastrzeżenia 1, w którym co najmniej 60% białek stanowią modyfikowane białka słodkiej serwatki nie zawierające CGMP lub o zmniejszonej zawartości CGMP. 3. Preparat według zastrzeżenia 1 albo 2, w którym probiotykiem jest Bifidobacteria albo Lactobacillus. 4. Preparat według zastrzeżenia 3, w którym Bifidobacteria stanowi Bifidobacterium longum BB 536. 5. Preparat według zastrzeżenia 3, w którym Lactobacillus stanowi Lactobacillus paracasei rhamnosus GG. 6. Preparat według zastrzeżenia 1 albo 2, który zawiera zarówno Bifidobacterium jak i Lactobacillus. 7. Preparat według zastrzeżenia 6, w którym Bifidobacteria stanowi Bifidobacterium longum BB 536 a Lactobacillus stanowi Lactobacillus paracasei rhamnosus GG. 8. Preparat według dowolnego z poprzednich zastrzeżeń, w którym białka są nienaruszone. 9. Preparat według dowolnego z zastrzeżeń 1 do 7, w którym białka są częściowo zhydrolizowane. 10. Preparat według dowolnego z poprzednich zastrzeżeń, w którym białka występują w maksymalnej ilości 1.85, a korzystnie w ilości między 1.8 a 1.85 g/100 kcal. 11. Preparat według dowolnego z poprzednich zastrzeżeń, w którym białka serwatki o zmniejszonej zawartości CGMP stanowią co najmniej 60% wszystkich białek, korzystnie co najmniej 70% wszystkich białek. 12. Preparat według dowolnego z poprzednich zastrzeżeń, który ponadto zawiera co najmniej jeden LC-PUFA. 13. Preparat według zastrzeżenia 12, w którym LC-PUFA zawiera DHA, związane lub nie, z ARA. 14. Preparat według dowolnego z zastrzeżeń 1 do 3, który ponadto zawiera małą ilość elektrolitów. 15. Zastosowanie źródła białek, źródła lipidów, źródła węglowodanów i co najmniej jednego probiotyku, przy czym co najmniej 40% białek to białka serwatki nie zawierające CGMP lub o zmniejszonej 12
zawartości CGMP, a zawartość białka w preparacie wynosi nie więcej niż 2 g/100 kcal, do wytwarzania preparatu do rozwijania zdrowej mikroflory jelit u niemowląt lub małych dzieci. 13
ODNOŚNIKI CYTOWANE W OPISIE Ta lista odnośników cytowanych przez zgłaszającego ma na celu wyłącznie pomoc dla czytającego i nie stanowi części dokumentu patentu europejskiego. Nawet jeżeli dołożono największej troski do jego ujęcia, nie można wykluczyć błędów i przeoczeń i OEB odrzuca wszelką odpowiedzialność pod tym względem. Dokumenty patentowe cytowane w opisie EP 1048226 A [0005] US 5916621 A [0005] US 2003077255 A [0005] EP 904784 A [0005] US 2003017192 A [0005] EP 880902 A [0020] EP 322589 A [0025] Literatura niepatentowa cytowana w opisie Probiotics in Man and Animals. J. Appl Bacteriol., vol. 66, 365-378 [0015] 14