Jak stosować test toksyczności ostrej Microtox, aby wykonać wewnętrzną ocenę obniżenia toksyczności (TRE)



Podobne dokumenty
DZIAŁANIA PUBLICZNYCH OCZYSZCZALNI ŚCIEKÓW ZARZĄDZANIE STRUMIENIAMI WPŁYWAJĄCYMI ZA POMOCĄ TESTÓW MICROTOX

System MICROTOX światowy standard w ocenie toksyczności ścieków przemysłowych

Badania biegłości laboratorium poprzez porównania międzylaboratoryjne

Metody klasyfikacji toksyczności próbek środowiskowych

METODY CHEMOMETRYCZNE W IDENTYFIKACJI ŹRÓDEŁ POCHODZENIA

BADANIA TOKSYCZNOŚCI ZANIECZYSZCZEŃ ORGANIZMÓW WODNYCH (PN -90/C-04610/01;03;05)

Porównywanie populacji

Ocena ryzyka ekologicznego dla miejsca badawczego w Jaworznie

LABORATORIUM BADAŃ ŚRODOWISKOWYCH tel PROTOKÓŁ POBIERANIA PRÓBEK

Gympie Regional Council. 12 stycznia Gympie Regional Council Rainbow Beach STP

Analiza zależności liniowych

Sterowanie jakością badań i analiza statystyczna w laboratorium

Rozkład prędkości statków na torze wodnym Szczecin - Świnoujście

Sterowanie wielkością zamówienia w Excelu - cz. 3

Wykład 3: Prezentacja danych statystycznych

Zastosowania testów TOXKIT i Microtox / DeltaTox

Wprowadzenie do analizy korelacji i regresji

Microtox LX. Rozstrzygające rozwiązanie dla szybkiej oceny toksyczności

Biogazownie w Polsce i UE technologie, opłacalność, realizacje. Anna Kamińska-Bisior

Audit dawki sterylizacyjnej

Analiza regresji - weryfikacja założeń

Analiza Danych Sprawozdanie regresja Marek Lewandowski Inf 59817

Procesowa specyfikacja systemów IT

9.4. Scenariusz narażenia 4 : Zastosowanie jako substancja wspomagająca przetwarzanie (oczyszczanie wody)

Optymalizacja Automatycznych Testów Regresywnych

Europejskie Regionalne Centrum Ekohydrologii PAN, ul. Tylna 3, Łódź 2

Rozkład Gaussa i test χ2

Kontrola i zapewnienie jakości wyników

Process Analytical Technology (PAT),

Rozdział 8. Regresja. Definiowanie modelu

Zmienne zależne i niezależne

Informacje i materiały dotyczące wykładu będą publikowane na stronie internetowej wykładowcy, m.in. prezentacje z wykładów

Sustainability in commercial laundering processes

Wpływ wdrażania dyrektywy IED na ścieki generowane przez przemysł energetyczny

Zobowiązania Rzeczypospolitej Polskiej wynikające z Traktatu Akcesyjnego

Statystyka. Wykład 13. Magdalena Alama-Bućko. 12 czerwca Magdalena Alama-Bućko Statystyka 12 czerwca / 30

PORTFOLIO LIGHTING Analiza i przygotowanie koncepcji prezentacji dotyczącej zaawansowanych metod projektowania oświetlenia

Nowelizacja ustawy Prawo Wodne

Praca z wynikami w ALOORA

Analiza wariancji - ANOVA

Identyfikacja mikroorganizmów systemem firmy Biolog

Zasady GMP/GHP, które należy wdrożyć przed wprowadzeniem HACCP

Analiza wpływu długości trwania strategii na proces optymalizacji parametrów dla strategii inwestycyjnych w handlu event-driven

Numer zlecenia nadany w Laboratorium Badań Środowiskowych. Numer protokołu pobierania nadany w Laboratorium Badań Środowiskowych

OSN 22: Osadzanie cienkowarstwowe techniką odparowania

Wskaźniki a tablice Wskaźniki i tablice są ze sobą w języku C++ ściśle związane. Aby się o tym przekonać wykonajmy cwiczenie.

Wykrywanie, identyfikacja i ilościowe oznaczanie GMO w materiale siewnym wyzwania analityczne i interpretacja wyników.

Streszczenie projektu badawczego

Darmowy fragment

Jak zdefiniować parametry do weryfikacji dla innowacyjnej technologii z uwzględnieniem parametrów dotyczących efektywności energetycznej

Badania efektywności systemu zarządzania jakością

Czas przeznaczony na wykonanie zadania wynosi 180 minut.

BADANIA PODATNOŚCI ŚCIEKÓW Z ZAKŁADU CUKIERNICZEGO NA OCZYSZCZANIE METODĄ OSADU CZYNNEGO

Optymalizacja parametrów w strategiach inwestycyjnych dla event-driven tradingu dla odczytu Australia Employment Change

Spis treści. Przedmowa... XI. Rozdział 1. Pomiar: jednostki miar Rozdział 2. Pomiar: liczby i obliczenia liczbowe... 16

Numer zlecenia nadany w Laboratorium Badań Środowiskowych. Numer protokołu pobierania nadany w Laboratorium Badań Środowiskowych

Przygotowanie danych

CONF-IDENT. Program badania biegłości - potwierdzenie i identyfikacja mikroorganizmów

OCENA FUNKCJONOWANIA PRZEDSIĘBIORSTWA W OBSZARZE BEZPIECZEŃSTWA I HIGIENY PRACY Z WYKORZYSTANIEM WSKAŹNIKÓW WYNIKOWYCH I WIODĄCYCH

Otrzymaliśmy w ten sposób ograniczenie na wartości parametru m.

Walidacja metod wykrywania, identyfikacji i ilościowego oznaczania GMO. Magdalena Żurawska-Zajfert Laboratorium Kontroli GMO IHAR-PIB

CEL ĆWICZENIA: Celem ćwiczenia jest zapoznanie się z zastosowaniem diod i wzmacniacza operacyjnego

DATA MINING W STEROWANIU PROCESEM (QC DATA MINING)

3M ETS Elektroniczny system testujący 2-giej generacji. 3M Sterylizacja. Precyzja. Rewolucja w monitorowaniu. procesów sterylizacji

Publiczna Szkoła Podstawowa nr 14 w Opolu. Edukacyjna Wartość Dodana

Najczęściej popełniane błędy w procesie walidacji metod badawczych

STATYSTYCZNE STEROWANIE PROCESAMI

Metody ekotoksykologiczne w ocenie jakości wód zbiornika

13. Równania różniczkowe - portrety fazowe

Walidacja metod analitycznych Raport z walidacji

TRADYCYJNE NARZĘDZIA ZARZĄDZANIA JAKOŚCIĄ

LISTA KONTROLNA. Część III - Ochrona Środowiska. Magazynowanie i Dystrybucja Paliw oraz Ropy Naftowej. Samokontrola/Kontrola w Zakładzie**...

ZASTOSOWANIE TECHNIK CHEMOMETRYCZNYCH W BADANIACH ŚRODOWISKA. dr inż. Aleksander Astel

Statystyczne sterowanie procesem

ĆWICZENIE Lody na drodze Ent-teach Rozdział 6 Zarządzanie Projektami

Ocena Zdolności Kognitywnych Nowej Generacji!! Pakiet Informacyjny! Listopad, 2017!

Uwarunkowania prawne obejmujące zagadnienia dotyczące wprowadzania ścieków komunalnych do środowiska

SysML Tworzenie diagramu aktywności SysML005

Zasady wykonania walidacji metody analitycznej

Katedra Technik Wytwarzania i Automatyzacji STATYSTYCZNA KONTROLA PROCESU

POLITECHNIKA OPOLSKA

Testowanie hipotez dla dwóch zmiennych zależnych. Moc testu. Minimalna liczność próby; Regresja prosta; Korelacja Pearsona;

Najnowsze rozwiązania stosowane w konstrukcji wirówek odwadniających flotokoncentrat i ich wpływ na osiągane parametry technologiczne

Wykres nr 1. Liczba urządzeń wodociągowych zewidencjonowanych w 2015 r.

Wydział Nauk o Środowisku

POLITECHNIKA OPOLSKA

Rozwiązanie n1=n2=n=8 F=(4,50) 2 /(2,11) 2 =4,55 Fkr (0,05; 7; 7)=3,79

Regresja wieloraka Ogólny problem obliczeniowy: dopasowanie linii prostej do zbioru punktów. Najprostszy przypadek - jedna zmienna zależna i jedna

Dopasowywanie modelu do danych

Regresja linearyzowalna

ZAŁĄCZNIKI. wniosku dotyczącego dyrektywy Parlamentu Europejskiego i Rady. w sprawie wspólnych zasad rynku wewnętrznego energii elektrycznej

Karmienie cieląt - jak kontrolować jakość podawanej siary?

g) wartość oczekiwaną (przeciętną) i wariancję zmiennej losowej K.

USTAWA z dnia 30 października 2003 r. o zmianie ustawy o kosmetykach

PARAMETRY FIZYKOCHEMICZNE BADANYCH PALIW Z ODPADÓW

PROGRAM BADAŃ BIEGŁOŚCI W ZAKRESIE POBIERANIA PRÓBEK ENVIROMENTAL SC-8-15 NA ROK 2015

Serwis rozdzielnic niskich napięć MService Klucz do optymalnej wydajności instalacji

Akademia Młodego Ekonomisty. Zarządzanie ryzykiem

Lean SIX SIGMA black belt

Filtralite Pure. Filtralite Pure UZDATNIANIE WODY. Przyszłość filtracji dostępna już dziś

Transkrypt:

Jak stosować test toksyczności ostrej Microtox, aby wykonać wewnętrzną ocenę obniżenia toksyczności (TRE) Streszczenie Ta instrukcja przedstawia w zarysie praktyczną metodę przeprowadzenia niedrogiego, nieobowiązkowego badania TRE w oczyszczalniach ścieków. Badania dostarczają informacji, które mogą być zastosowane do utrzymania poziomów toksyczności poniżej ustawowych limitów, dzięki czemu unika się drogich i kłopotliwych obowiązkowych badań TRE. Ponieważ każda oczyszczalnia ścieków różni się od pozostałych, w pierwszej kolejności należy zmierzyć toksyczność strumieni wpływających i wypływających w danej placówce, w czasie od 30 do 60 dni. Gdy te informacje zostaną przedstawione w formie wykresu, widać na nich normalne wyjściowe linie toksyczności w kluczowych punktach, dzięki czemu można określić znaczenie istniejących różnic toksyczności. Test podstawowy Microtox (Microtox Basic Test) jest stosowany do pomiaru toksyczności w strumieniach wpływających i w strumieniach w trakcie procesów oczyszczania, w których poziomy toksyczności są wystarczająco wysokie do obliczeń wartości EC50. Test porównawczy Microtox (Microtox Comparison Test), zwany też testem hamowania, jest stosowany do strumieni wypływających, w których poziomy toksyczności są zbyt niskie do obliczenia wartości EC50. Za pomocą normalnych linii wyjściowych i ustalonych wariacji toksyczności można powiązać zmienność występującą w strumieniach wpływających i wypływających, wskazać dokładnie źródła toksyczności i opracować praktyczne sposoby postępowania z nimi. Po scharakteryzowaniu i optymalizacji systemu oczyszczania należy regularnie wykonywać zaplanowane testy porównawcze Microtox, aby zwiększyć pewność, że końcowy strumień wypływający przejdzie test zgodności z przepisami.

Przedmowa Microtox jest standardową metodą (D-5560, 1995) Amerykańskiego Stowarzyszenia Badań i Materiałów (ASTM) oznaczania toksyczności ścieków wodnych przed i po oczyszczaniu biologicznym. Jest to instrukcja stosowania testu Microtox w celu przeprowadzenia wewnętrznej oceny obniżenia toksyczności (TRE). Zakłady oczyszczania ścieków od 1979 roku stosują wyniki testu toksyczności ostrej Microtox do: zapewniania zgodności z limitami toksyczności NPDES, pomiaru toksyczności w strumieniach wpływających ścieków, określania efektywności oczyszczania w przemysłowych i miejskich oczyszczalniach ścieków, monitorowania procesów oczyszczania począwszy od surowych ścieków wpływających, a skończywszy na końcowych strumieniach wypływających. Dysponując wystarczającymi danymi historycznymi z pomiarów zgodności, można także opracować korelację między testem Microtox i testami zgodności NPDES. Niepowodzenie w uzyskaniu lub utrzymaniu zgodności z limitami toksyczności NPDES może uruchomić badania TRE nakazane przez USEPA w celu zidentyfikowania źródła problemów z toksycznością i dostarczenia podstawy dla zalecanego rozwiązania. Działanie korygujące może ograniczyć się jedynie do ulepszenia procedur utrzymania lub być bardziej skomplikowane i kosztowne i obejmować fizyczną modyfikację zakładu oczyszczania ścieków. W złożonych stacjach z licznymi strumieniami wpływającymi jakość i ilość wpływających ścieków może zmieniać się w nieprzewidywalny sposób. W konsekwencji oficjalne badanie TRE może obejmować obszerne badanie w celu zidentyfikowania środków toksycznych i/lub oszczędne postępowanie lub możliwe naprawy. Koszt braku zgodności może być wysoki. W instrukcja opisano, które protokoły Microtox są odpowiednie, aby: oznaczyć toksyczność pojedynczych wpływających strumieni ścieków i ich potencjalny wpływ na biomasę w zakładzie (Jak każdy pojedynczy strumień wpływa na zakład?) oznaczyć efektywność postępowania na każdym etapie systemu oczyszczania wody. (W jaki sposób połączone strumienie wpływają każdego dnia na każdy etap procesu oczyszczania ścieków w zakładzie?) oznaczyć jakość finalnego strumienia wypływającego. Dzięki temu dostarczane są dane informujące o wynikach testów biomonitoringu NPDES. (Jak dobrze zakład oczyścił połączone ścieki?) Ten program zakłada, że inicjatywa przeprowadzenia kontroli toksyczności może, i powinna, pochodzić z upoważnionej jednostki. Wewnętrzne badanie TRE jest ekonomicznie opłacalne. Opiera się na zrozumieniu dynamiki, z jaką zmienna toksyczność wpływa na działanie oczyszczalni ścieków, nawet wtedy, gdy nie jest przewidziane obowiązkowe badanie TRE. Przegląd testów Microtox Różne protokoły Microtox są odpowiednie dla próbek o różnym zakresie toksyczności. High Low Solid Phase Test* Solid/sediment Basic Test* Pure compounds Springs WWTP influents Wysoki Niski Test fazy stałej* Gleba/osad Test podstawowy* Czyste składniki Źródła Ścieki wpływające do oczyszczalni 90% Basic Test* 90% Test podstawowy* Process Wastewater IPP Discharges Toxity Baseline Studies Inhibition Test* TRE testing Storm Water Runoff WWTP Effluent Screening Toxity Source Testing Comparison test* Final WWTP Effluent Final TRE Testing Final Storm Water Runoff Drinking water Oczyszczanie ścieków Odpady do wstępnej przeróbki przemysłowej (IPP) Badania wyjściowej linii toksyczności Test hamowania* Badanie TRE Nadmiarowe wody powierzchniowe Badanie strumieni wypływających z oczyszczalni ścieków Testowanie źródeł toksyczności Test porównawczy* Końcowy strumień wypływający z oczyszczalni ścieków Końcowe badanie TRE Końcowy wypływ wody powierzchniowej Woda pitna Wysoki niski * Microtox Acute Toxicity *Test toksyczności ostrej Microtox Etap I wewnętrznego badania TRE Opracowanie profilu jakości ścieków codziennie wpływających do zakładu i z niego wypływających poprzez codzienne wykonanie kluczowych pomiarów i wykreślenie ich wyników. Dzięki temu powstanie wyjściowa linia normalnych poziomów toksyczności w zakładzie, a czasem nawet ujawnią się niespodziewane cykle toksyczności, które mogą silnie wpływać na wyniki testów zgodności. Aby opracować profil 1. Test podstawowy Microtox Należy przeprowadzić test podstawowy Microtox, obliczyć EC50 na podstawie codziennych pomiarów dla każdego strumienia wpływającego.

2. Test podstawowy Microtox Należy przeprowadzić test podstawowy Microtox, obliczyć EC50 na podstawie codziennych pomiarów dla wszystkich połączonych strumieni wpływających. Pomoże to ustalić typowe, obserwowane codziennie poziomy toksyczności w zakładzie. UWAGA: Do wstępnego testowania i wpływających ścieków o wysokiej toksyczności należy stosować Rozszerzony test podstawowy ASTM (9 rozcieńczeń) (ASTM Extender (9 dilutions) Basic Test). Dla wpływających ścieków, dla których wykazano niższą toksyczność, należy stosować Test podstawowy 81,9%. 3. Test hamowania Test hamowania Microtox należy przeprowadzić każdego dnia dla całego połączonego strumienia wpływającego. Jeśli zostaną zaobserwowane działania toksyczne większe niż 5% (hamowanie lub stymulacja) oraz jeśli test zgodności biologicznej jest testem toksyczności przewlekłej, należy rozpocząć badanie w celu ustalenia prawdopodobnych przyczyn. Ten II etap badań omówiono poniżej. Monitorowanie rutynowe, po ustaleniu linii wyjściowych, można przeprowadzić w najlepszy sposób przy pomocy testu porównawczego Microtox, który dostarcza bardziej precyzyjne dane niż test hamowania. Test porównawczy Mimo dodatkowego etapu w procedurze ten test dostarcza wyniki w tym samym okienku czasowym wynoszącym 30 minut. Przykłady dziennych profili Należy zauważyć, że pokazane tu przykłady mają charakter jakościowy, a nie ilościowy. Zmiana jest czynnikiem kluczowym. Jak wyglądają typowe profile toksyczności wpływających ścieków: Następujące trzy wykresy pokazują typowe przykłady toksyczności ścieków wpływających do oczyszczalni, gdy codzienne wyniki testu podstawowego EC50 zebrane w ciągu miesiąca zostaną przedstawione na wykresie. W zakładzie użytkownika może występować wiele indywidualnych strumieni, które będą wstępnie badane każdego dnia. Po oznaczeniu ich toksyczności względnej można je uszeregować zależnie od przepływu i określić całkowity wpływ każdego strumienia na oczyszczalnię, począwszy od najlepszego do najgorszego. Oczywiście profil dla zakładu użytkownika nie będzie dokładnie taki sam, jak ten opisany tutaj, ponieważ toksyczność strumieni wpływających jest zawsze swoista dla danego miejsca. (Użytkownik testu Microtox może także zbadać każdy etap procesu oczyszczania w swoim zakładzie w celu określenia rzeczywistego spadku toksyczności na każdym etapie i tym samym efektywności zakładu w usuwaniu toksycznych związków.) Należy także zauważyć, że sezonowe zmiany linii wyjściowej prawdopodobnie będą się pojawiać na wykresach długoterminowych. PRZYKŁAD 1 Jest to miesięczny profil toksyczności pojedynczego strumienia wpływającego. Test podstawowy Microtox jest odpowiedni do zastosowania dla tego względnie toksycznego strumienia nieoczyszczonych ścieków i wartość EC50 można łatwo obliczyć. Dni

PRZYKŁAD 2 Jest to miesięczny profil wszystkich połączonych strumieni wpływających do oczyszczalni. Ponownie, test podstawowy Microtox jest odpowiedni, ponieważ można łatwo obliczyć wartość EC50 na podstawie wyników pomiarów względnie toksycznych próbek. Dni PRZYKŁAD 3 Jest to miesięczny profil toksyczności dla pośredniego etapu oczyszczania z wykorzystaniem danych z testu podstawowego Microtox. Dni Czym charakteryzują się typowe profile toksyczności ścieków wypływających: Następujące wykresy pokazują trzy różne, lecz typowe, przykłady wykresów powstałych z danych uzyskanych w teście hamowania Microtox, PRZYKŁAD 4 Profil strumienia wypływającego o niskiej toksyczności (wykreślany w ciągu jednego miesiąca przy pomocy testu hamowania Microtox ).

Increasing toxity wzrastająca toksyczność, non toxic brak toksyczności, Low Toxity (simulation) niska toksyczność (symulacja), Percent Effect wpływ procentowy Comparison Test or Inhibition Test for Effluent test porównawczy lub test hamowania dla strumienia wypływającego Ze względu na to, że toksyczność strumienia wypływającego jest zbyt niska do obliczenia EC50, stosowany jest test hamowania. Dane pokazane są na dole wykresu dziennej toksyczności. Wartości wskazują różnicę procentową pomiędzy bioreaktywnością próbki (hamowanie lub stymulacja na niskim poziomie, która często jest wyrazem niskiego poziomu toksyczności), a bioreaktywnością nietoksycznej kontroli. Różnice mniejsze niż 5% są uważane za nieistotne, wskazując prawdopodobną, acz niepewną zgodność. Jeśli zakład nie przeszedłby pomyślnie testu toksyczności przewlekłej na rozwielitkach (Ceriodaphna) wykonanego w trakcie opisanego tu profilu, mogłoby to wskazywać na to, że w zakładzie występowała przejściowa toksyczność przewlekła. Nie obserwowano ostrej toksyczności. Jest to typowe zjawisko dla miejskich oczyszczalni ścieków bez znaczących udziałowców przemysłowych lub z przemysłem, który nie wytwarza istotnych toksycznych odpadów. Zakłady zrzucające odpady o takim profilu są w grupie niewielkiego ryzyka wykonania badań TRE. PRZYKŁAD 5 Profil strumieni wypływających z nieregularną toksycznością (wykreślony w ciągu jednego miesiąca przy pomocy Testu hamowania Microtox ) Jest on typowy dla oczyszczalni miejskich z pewnymi znaczącymi przemysłowymi udziałowcami lub udziałowcami, którzy generują zanieczyszczenia trudne do przetworzenia, lub dla oczyszczalni, która otrzymuje zanieczyszczenia w półfabrykatach. Zakłady zrzucające odpady o takim profilu są kandydatami do badań TRE z powodu nieregularnych wzrostów toksyczności w strumieniach wypływających. Increasing toxicity wzrastająca toksyczność, non toxic brak toksyczności, Low Toxity (simulation) niska toksyczność (symulacja), Percent Effect wpływ procentowy Comparison Test or Inhibition Test for Effluent test porównawczy lub test hamowania dla strumienia wypływającego PRZYKŁAD 6 Profil strumienia wypływającego o wysokiej toksyczności (wykreślony w ciągu jednego miesiąca na podstawie testu hamowania Microtox ) Ten profil jest charakterystyczny dla przestarzałej, wyeksploatowanej i trudnej do obsługi oczyszczalni ścieków. Zakład ten jest już prawdopodobnie podmiotem badań TRE z powodu ciągłej ostrej toksyczności.

Increasing toxicity wzrastająca toksyczność, non toxic brak toksyczności, Low Toxity (simulation) niska toksyczność (symulacja), Percent Effect wpływ procentowy Comparison Test or Inhibition Test for Effluent test porównawczy lub test hamowania dla strumienia wypływającego Przegląd profili toksyczności strumieni wypływających Zakłady o profilach podobnych do tego w przykładzie 6 potrzebują oczywiście wewnętrznego określenia toksyczności w celu kontroli procesu i ochrony biomasy. Profile toksyczności strumieni wypływających w przykładzie 4 i 5 przedstawiają problemy będące największym wyzwaniem w zakresie identyfikacji i obniżenia toksyczności w strumieniach wypływających. Stężenia związków toksycznych w strumieniu wypływającym w przykładzie 4 są czasem tak niskie, że ich wykrycie i identyfikacja są trudne. Za profile tego typu mogą być odpowiedzialne pestycydy. Przykład 5 nie jest tak trudny, ponieważ można łatwo zaobserwować nieregularnie występującą ostrą toksyczność, wystarczającą do tego, aby test toksyczności przewlekłej na rozwielitkach się nie powiódł. Gdy zakład nie przejdzie pomyślnie testu na rozwielitkach (Ceriodaphnia), często bezpodstawnie przypuszcza się, że występuje tam toksyczność przewlekła. Toksyczność przewlekła może mieć częściowy udział w niepowodzeniu, ale znacznie bardziej prawdopodobne w tym przykładzie jest to, że niepowodzenie zostało spowodowane przez ostrą toksyczność. Przegląd procedur testów zgodności Badania TRE ukazują sposób, w jaki zakład, w którym występuje nieregularna ostra toksyczność, jak w przykładzie 5, może łatwo wybrać nieodpowiedni czas rozpoczęcia testu zgodności, nie zdać go i znaleźć się poza zakresem zgodności. 24-godzinna połączona próbka jest eksponowana na organizmy testowe przez dwa dni. Następnie jest pobierana inna połączona próbka i takie same organizmy są wystawione na jej działanie przez dwa dni. Wtedy jest pobierana ostateczna połączona próbka i organizmy są na nią eksponowane przez pozostały czas testu. Każdego dnia od 80 do 95% bieżąco testowanej próbki zostaje odlane i dodawana jest nowa próbka. Organizmy są eksponowane na trzy oddzielne połączone próbki przez okres jednego tygodnia. Ten przykład odnosi się do protokołu najczęściej stosowanego przy testowaniu strumieni wypływających zgodnie z NDPES, w którym stosuje się wiele próbek i ich wymian. Poniżej przedstawiono histogram sekwencji badania próbek połączonych. Zdarzenie Start sample collection Rozpoczęcie pobierania próbek Ship sample to testing lab Przesłanie próbek do laboratorium testującego Begin testing 1st sample Rozpoczęcie badania 1. próbki Begin testing 2nd sample Rozpoczęcie badania 2. próbki Dzień Begin testing 3rd sample Rozpoczęcie badania 3. próbki END TEST ZAKOŃCZENIE TESTU Wykonanie korelacji międzygatunkowej nie jest konieczne przed zastosowaniem testu Microtox. Można rozpocząć wewnętrzny program obniżania toksyczności, po prostu opracowując dzienne profile toksyczności strumieni wpływających do i wypływających z oczyszczalni. Większość użytkowników Microtox nigdy nie próbuje określić korelacji międzygatunkowej. W przypadku kontroli procesu w oczyszczalni ścieków uzasadniony związek odpowiedzi pomiędzy Microtox a biomasą jest bardziej istotny niż czas i wysiłek poświęcony opracowaniu korelacji numerycznej

między gatunkami. Nawet jeśli na podstawie testu Microtox byłoby możliwe określenie, jakie będą ostateczne wyniki testu zgodności, po rozpoczęciu testu należy go kontynuować. W wielu pozycjach literatury udokumentowano korelację międzygatunkową w teście Microtox. Dla zainteresowanych w załączniku przedstawiono niektóre pożyteczne pozycje literatury i metody porównawcze. Etap II wewnętrznego badania TRE Jeśli testy hamowania dla strumieni wypływających pokazują mierzalną toksyczność i jeśli zestaw testów zgodności obejmuje badanie toksyczności przewlekłej, należy przeprowadzić badanie II stopnia. Użytkownik będzie chciał w sposób zdroworozsądkowy zbadać możliwe źródła zanieczyszczeń toksynami. Czy w zakładzie czyszczono jakieś urządzenia? Czy miało miejsce malowanie? Czy stwierdzono niezgłoszony wyciek, który mógł przedostać się do systemu ścieków? Czy w oczyszczalni ścieków zmieniono jakiś proces? Czy maszyna do odchlorowywania jest zepsuta? Czy deszcz mógł mieć wpływ? Jakie były wyniki innych badań jakości wody i swoistych testów chemicznych? Czy podwyższona toksyczność ma związek z nietypową aktywnością w zakładach przed oczyszczalnią, np. zakład oddający ścieki do oczyszczalni przechodzące przez oczyszczalnię bez obniżenia toksyczności? Etap III wewnętrznego badania TRE Mając dostępne badanie, które odpowiada na takie pytania, sprecyzowane problemy i opracowane rozwiązania, należy wdrożyć rutynowy program monitorowania, aby wychwycić przyszłe problemy, dopóki są one niewielkie. Rutynowy program monitorowania będzie się różnić w zależności od zakładu, przemysłu i miasta. Należy go zaprojektować tak, aby monitorować pod kątem sytuacji, które można przewidzieć na podstawie wcześniej opracowanych w zakładzie profili strumieni wpływających i wypływających. Typowym zjawiskiem jest obserwowanie toksyczności w jednej z próbek, ale nie w pozostałych. Istnieje także wiele innych etapów, takich jak magazynowanie, wysyłka i wymiana, i teoretycznie ich egzekwowanie jest regulowane przez ścisłe instrukcje. W praktyce natomiast nie zawsze można przestrzegać tych instrukcji, co wprowadza pewną zmienność wyników. EXAMPLE 5 with Ceriodaphnia test histogram overlaid PRZYKŁAD 5 z nałożonymi histogramami testu na rozwielitkach: pass wynik pozytywny, Toxicity pass through przekroczenie toksyczności, Fail niepowodzenie, Stimulation stymulacja, Plant Upset awaria w zakładzie; Increasing toxicity wzrastająca toksyczność, non toxic brak toksyczności, Low Toxity (simulation) niska toksyczność (symulacja), Percent Effect wpływ procentowy Comparison Test or Inhibition Test for Effluent test porównawczy lub test hamowania dla strumienia wypływającego

Effluent Toxity Characteristics charakterystyka toksyczności strumienia wypływającego: site specific Tests testy swoiste dla zakładu, ph ph, TDS TDS, COD COD, Total nitrates azotany całkowite, Ammonia amoniak, Salinity zasolenie, Microtox, Results of Chronic test wynik testu toksyczności przewlekłej, O wewnątrz dozwolonych limitów - poza dozwolonymi limitami Końcowy wynik może zależeć od dnia, w którym test się rozpoczął. Test na początku miesiąca mógłby mieć wynik pomyślny, a test późniejszy mógłby się nie powieść. Aby wyniki testu zgodności miały sens, szczególnie, gdy się ma do czynienia z nieregularnie występującą toksycznością, ważne jest aby wiedzieć, jak wygląda ogólna sytuacja. Należy rozważać wyniki w kontekście typowej pracy oczyszczalni ścieków i należy uwzględnić szereg różnych testów, takich jak ph, TSS, całkowity azot, amoniak itp., których wyniki są użyteczne. Gdy wyniki tych testów zostaną wprowadzone do tabeli i przedstawione w postaci macierzy zawierającej wyniki testów zgodności, jak ta obok, doświadczony użytkownik może zobaczyć wzory korelujące z wynikami badania zgodności. Podsumowanie krok po kroku przeprowadzenia planu wewnętrznego, codziennego badania profilu toksyczności TRE Etap I 1. Należy rozpocząć badanie strumieni wpływających i wypływających przynajmniej raz dziennie. a) Wykonać codzienny test podstawowy Microtox na zbiorczej próbce ze strumienia wpływającego. Zastosować te dane do wykonania codziennego profilu strumienia wpływającego. b) Jeśli czas pozwala, należy badać każdy indywidualny strumień wpływający przy pomocy testu podstawowego. c) Wykonać codzienny test hamowania na strumieniu wypływającym. Nanieść dane na wykres, aby utworzyć profil dla strumienia wypływającego. Podwyższona toksyczność w strumieniu wypływającym będzie zazwyczaj poprzedzona zwiększoną toksycznością w strumieniu wpływającym. Jeśli tak nie będzie, proces oczyszczania może wymagać nadzoru. 2. Po wykonaniu wystarczającej liczby (30-60 dni) codziennych testów hamowania na strumieniu wypływającym i testów podstawowych na strumieniu wpływającym wyniki należy przedstawić graficznie i przejrzeć w poszukiwaniu wzorów i zjawisk, które mogą powodować zmiany toksyczności. Wtedy będzie najprawdopodobniej widoczne, który strumień wprowadza najwięcej toksyczności do zakładu i czy w strumieniu wypływającym stwierdza się toksyczność. Można skorzystać z pomocy SDI celem interpretacji tych wstępnych danych. 3. Po badaniu strumienia wypływającego i przedstawieniu graficznym hamowania w przedziale 30-60 dni należy przejrzeć wyniki. Same wyniki hamowania mogą wystarczyć do określenia, częstości i poziomu toksyczności obecnej w strumieniu wypływającym. Piki na wykresie toksyczności w strumieniu wypływającym powinny bezpośrednio odpowiadać efektom wykrytym w testach zgodności z zastosowaniem innych gatunków. Duży poziom toksyczności wykazany przez test Microtox może korelować ze śmiertelnością innych gatunków. Niska toksyczność wykazana przez test Microtox może korelować z problemami związanymi z reprodukcją lub wzrostem u innych gatunków. Jeżeli przedmiotem testowania strumienia wypływającego jest określenie korelacji międzygatunkowej (nie w każdym przypadku), będzie niezbędne przeprowadzenie pełnego oznaczenia biologicznego Microtox, zgodnie z jednym z protokołów przeznaczonych do codziennego testowania próbek o niskiej toksyczności. Etap II 4. Należy kontynuować testowanie i badanie w przypadku obserwowania zwiększonej toksyczności. Dopóki nie zostaną określone źródła problemów i opracowane rozwiązania, należy kontynuować przeprowadzanie testów podstawowych Microtox na zbiorczych próbkach ze strumieni wpływających i próbkach z indywidualnych strumieni, które mogą się przyczynić do wysokiego poziomu toksyczności.

Etap III 5. Należy rozpocząć program konserwacji i wczesnego ostrzegania obejmujący regularnie zaplanowane testy porównawcze i/lub testy toksyczności przewlekłej Microtox, aby monitorować końcowy strumień wypływający w sytuacji, gdy toksyczność jest już pod kontrolą. Załącznik Bibliografia dotycząca korelacji międzygatunkowych Microtox i metod stosowanych przy porównywaniu danych z testów międzygatunkowych Bibliografia Poniższe fragmenty znajdują się w publikacjach wymienionych w bibliografii Microtox. Są obecne w wytycznych do protokołu TRE opublikowanego przez USEPA. Umieszczają one test Microtox w perspektywie jako organizm zastępczy i tym samym test przesiewowy dla pewnych gatunków jest obecnie zalecany przez USEPA zgodnie z pozwoleniami NPDES. Protokół oceny obniżenia toksyczności (TRE) dla miejskich zakładów oczyszczania ścieków. Dokument EPA EPA/600/2-88/062, str.12-2. W zależności od stosowanego gatunku może być bardziej opłacalne hodowanie niż kupno organizmów do testów. W pewnych przypadkach może być niezbędne zastosowanie szybkiego testu przesiewowego, takiego jak bakteryjny test bioluminescencyjny np. Microtox. Powszechnie stosowana metodologia przeprowadzania przemysłowych ocen redukcji obniżenia toksyczności, EPA, dok. EPA/600/2-88/070, str. A-10. Mimo iż punkt końcowy (20 minut) testu Microtox nie był dokładnym predyktorem punktu końcowego testu biologicznego na rybach (96 godzin), uznano, że Microtox był odpowiedni do stosowania w ramach opłacalnych badań przesiewowych toksyczności strumieni wypływających z następujących powodów: we wszystkich testowanych przypadkach, gdy rozpoznawano toksyczność w teście biologicznym na rybach, w teście Microtox także stwierdzano toksyczność. Test Microtox zawsze wskazywał toksyczność przynajmniej w takim samym zakresie jak badanie biologiczne na rybach, a nawet częściej, eliminując możliwość fałszywie negatywnych wyników. Bibliografia Microtox zawiera inne pozycje dotyczące międzygatunkowych badań porównawczych. Dane wskazują, że im bardziej złożona próbka, tym wyższa korelacja pomiędzy powszechnie używanymi gatunkami testowymi. Ponadto można także stwierdzić, że istnieje coś fundamentalnego w odniesieniu do toksyczności. Z wyjątkiem pewnej spodziewanej zmienności w efekcie dawki, żaden z gatunków testowych obecnych w łańcuchu pokarmowym nie tolerował związków toksycznych zbyt dobrze. Organizm stosowany w teście Microtox, bakteria świecąca Vibrio fischeri (P.phosphoreum) został wybrany spośród około 70 innych organizmów bioluminescencyjnych przez SDI, ponieważ wykazywał najwyższą czułość na szeroki zakres związków toksycznych. Następujące porównania podkreślają te obserwacje: Organism Compared with Microtox Organizmy porównywane z Microtox,

Results of Study wyniki badań, Author, date and Microbics References No. autor, data i nr referencji mikrobiologicznych Fathead Minnow EC50 Wartość EC50 dla Pimephales promelas (złota rybka), r współczynnik korelacji, Selenastrum glony Selenastrum, % agrement % zgodności, Rainbow trout pstrąg tęczowy, Oyster Embryo zarodek ostrygi, Amphipod skorupiak, Daphnia magna rozwielitka Daphnia magna, Good agreement.- dobra zgodność dla 162 próbek ścieków, Guppies gupiki, Brown trout pstrąg brązowy, Respective R = indywidualny Sheephead minnow karpieniec zmienny, Bluegill okoń błękitnoskrzeli, Shrimp krewetka Strategic Diagnostics Inc. 111 Pencader Drive Newark, DE 19702 USA Telefon: 302-456-6789 Faks: 302-456-6782 Bezpłatne połączenie w USA: 800-544-8881 Microtox jest znakiem handlowym firmy Strategic Diagnostics Inc. Wszelkie prawa zastrzeżone 2006 Strategic Diagnostics Inc. Wydrukowano w USA Zrewidowane 8/06