Kanały i elektrogeneza. Piotr Łaszczyca KFZiE, WBiOŚ, UŚ 2008



Podobne dokumenty
Cel modelowania neuronów realistycznych biologicznie:

Zarys Neurobiologii Cw 3. Kanały i elektrogeneza. Piotr Łaszczyca KFZiE, WBiOŚ, UŚ 2008

Nagroda Nobla z fizjologii i medycyny w 2004 r.

Informacje uzyskiwane dzięki spektrometrii mas

UKŁAD ROZRUCHU SILNIKÓW SPALINOWYCH

Tematy prac licencjackich w Zakładzie Fizjologii Zwierząt

WITAMINY.

Tkanka łączna. Komórki i bogata macierz. Funkcje spaja róŝne typy innych tkanek zapewnia podporę narządom ochrania wraŝliwe części organizmu

Projekt Studenckiego Koła Naukowego CREO BUDOWA GENERATORA WODORU

Od redakcji. Symbolem oznaczono zadania wykraczające poza zakres materiału omówionego w podręczniku Fizyka z plusem cz. 2.

Wyznaczanie współczynnika sprężystości sprężyn i ich układów

SERI A 93 S E RI A 93 O FLUSH GRID WITHOUT EDGE TAB

Seminarium 1:

Techniczne nauki М.М.Zheplinska, A.S.Bessarab Narodowy uniwersytet spożywczych technologii, Кijow STOSOWANIE PARY WODNEJ SKRAPLANIA KAWITACJI

Stechiometria równań reakcji chemicznych, objętość gazów w warunkach odmiennych od warunków normalnych (0 o C 273K, 273hPa)

OZNACZANIE WAPNIA I MAGNEZU W PRÓBCE WINA METODĄ ATOMOWEJ SPEKTROMETRII ABSORPCYJNEJ Z ATOMIZACJA W PŁOMIENIU

PROCEDURA OCENY RYZYKA ZAWODOWEGO. w Urzędzie Gminy Mściwojów

WZORU UŻYTKOWEGO PL Y1 B60Q 1/26 ( ) F21W 101/00 ( ) Frieske Tomasz, Bydgoszcz, PL BUP 22/09

DOPALACZE. - nowa kategoria substancji psychoaktywnych

WOJEWÓDZKI KONKURS FIZYCZNY

Nowoczesne systemy zabezpieczeń układów nawęglania

Temat: Czy świetlówki energooszczędne są oszczędne i sprzyjają ochronie środowiska? Imię i nazwisko

Ćwiczenie: "Ruch harmoniczny i fale"

TRENING ZDROWOTNY jest to rodzaj aktywności fizycznej podjętej z motywów zdrowotnych, mającej na celu podniesienie poziomu wydolności i sprawności

Hormony płciowe. Macica

Dr inż. Andrzej Tatarek. Siłownie cieplne

PREFABRYKOWANE STUDNIE OPUSZCZANE Z ŻELBETU ŚREDNICACH NOMINALNYCH DN1500, DN2000, DN2500, DN3200 wg EN 1917 i DIN V

Implant ślimakowy wszczepiany jest w ślimak ucha wewnętrznego (przeczytaj artykuł Budowa ucha

Gruntowy wymiennik ciepła PROVENT- GEO

TECHNOLOGICZNOŚĆ WYPRASEK

PL B1. FAKRO PP SPÓŁKA Z OGRANICZONĄ ODPOWIEDZIALNOŚCIĄ, Nowy Sącz, PL BUP 22/ WUP 05/12. WACŁAW MAJOCH, Nowy Sącz, PL

Sieci komputerowe cel

Układ wydalniczy i skóra

Woda to życie. Filtry do wody.

Prezentacja Systemu PDR

PL B1. POLITECHNIKA LUBELSKA, Lublin, PL BUP 14/14

Rodzaje i metody kalkulacji

SUMMIT INTERNATIONAL ANESTHESIOLOGY. 7 marca 2009, Marakesz,, Maroko

Badanie silnika asynchronicznego jednofazowego

Strategia rozwoju kariery zawodowej - Twój scenariusz (program nagrania).

Architektura komputerów

TEORETYCZNE PODSTAWY PROCESU ROZMRAŻANIA JAKOŚĆ I TRWAŁOŚĆ PRODUKTÓW ROZMROŻONYCH

PRÓG RENTOWNOŚCI i PRÓG

GPD Gumowe wkłady uszczelniaja ce

Grupa bezpieczeństwa kotła KSG / KSG mini

Badanie bezszczotkowego silnika prądu stałego z magnesami trwałymi (BLDCM)

(13) B1 PL B1. (21) Numer zgłoszenia F24H 1/36. Vetter Richard, Peine-Dungelbeck, DE. Richard Vetter, Peine-Dungelbeck, DE

ANALOGOWE UKŁADY SCALONE

2.Prawo zachowania masy

Podstawa magnetyczna do eksperymentów

Praca badawcza. Zasady metodologiczne ankietowego badania mobilności komunikacyjnej ludności

WZORU UŻYTKOWEGO EGZEMPLARZ ARCHIWALNY. d2)opis OCHRONNY. (19) PL (n) Centralny Instytut Ochrony Pracy, Warszawa, PL

INSTRUKCJA MONTAśU. Tunelu rozsączającego (PP) 300 litrów

LEKCJA 3 STRES POURAZOWY

PRAWA ZACHOWANIA. Podstawowe terminy. Cia a tworz ce uk ad mechaniczny oddzia ywuj mi dzy sob i z cia ami nie nale cymi do uk adu za pomoc

KONKURS CHEMICZNY DLA UCZNIÓW GIMNAZJÓW

Współczesne nowoczesne budownictwo pozwala na wyrażenie indywidualnego stylu domu..

(12) OPIS PATENTOWY (19) PL

HiTiN Sp. z o. o. Przekaźnik kontroli temperatury RTT 4/2 DTR Katowice, ul. Szopienicka 62 C tel/fax.: + 48 (32)

Laboratorium z Konwersji Energii. Ogniwo fotowoltaiczne

Udoskonalona wentylacja komory suszenia

Raport Badania Termowizyjnego

Wykorzystanie energii słonecznej

XII KONKURS PRZEDMIOTOWY Z BIOLOGII. DLA UCZNIÓW GIMNAZJUM ETAP SZKOLNY (klucz odpowiedzi i schemat oceniania)

Jak korzystać z Group Tracks w programie Cubase na przykładzie EWQLSO Platinum (Pro)

Klasyfikacja i oznakowanie substancji chemicznych i ich mieszanin. Dominika Sowa

SPECYFIKACJA TECHNICZNA WYKONANIA I ODBIORU ROBÓT BUDOWLANYCH ROBOTY W ZAKRESIE STOLARKI BUDOWLANEJ

Nawiewniki wyporowe do wentylacji kuchni

Lekcja 173, 174. Temat: Silniki indukcyjne i pierścieniowe.

Kifoplastyka i wertebroplastyka

Z47 BADANIA WŁAŚCIWOŚCI ELEKTROFIZJOLOGICZNYCH BŁON KOMÓRKOWYCH

Scenariusz lekcji fizyki

Idea i Projekt Sieci Najciekawszych Wsi

Promocja i identyfikacja wizualna projektów współfinansowanych ze środków Europejskiego Funduszu Społecznego

PL B BUP 19/04. Sosna Edward,Bielsko-Biała,PL WUP 03/10 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11)

System centralnego ogrzewania

Wymiana uszczelniaczy w regulatorze napięcia sprężyny amortyzatora tylnego w motocyklu SUZUKI GSX 1400 K4

Innowacyjna gospodarka elektroenergetyczna gminy Gierałtowice

GRUPA KAPITAŁOWA POLIMEX-MOSTOSTAL SKRÓCONE SKONSOLIDOWANE SPRAWOZDANIE FINANSOWE ZA OKRES 12 MIESIĘCY ZAKOŃCZONY DNIA 31 GRUDNIA 2006 ROKU

Projekt MES. Wykonali: Lidia Orkowska Mateusz Wróbel Adam Wysocki WBMIZ, MIBM, IMe

SCENARIUSZ LEKCJI WYCHOWAWCZEJ: AGRESJA I STRES. JAK SOBIE RADZIĆ ZE STRESEM?

Zbiorniki hydroforowe

+ + Struktura cia³a sta³ego. Kryszta³y jonowe. Kryszta³y atomowe. struktura krystaliczna. struktura amorficzna

Efektywna strategia sprzedaży

ELEKTROTRZYMACZE KARTA KATALOGOWA

Techniki korekcyjne wykorzystywane w metodzie kinesiotapingu

ET AAS 1 - pierwiastkowa, GW ppb. ICP OES n - pierwiastkowa, GW ppm n - pierwiastkowa, GW <ppb

1. Poziome znaki drogowe

Bank PeKaO S.A. Oddział w Bielsku Białej Nr konta: O F E R T A USŁUG BADAWCZYCH

Rudniki, dnia r. Zamawiający: PPHU Drewnostyl Zenon Błaszak Rudniki Opalenica NIP ZAPYTANIE OFERTOWE

AERIS CA 350 VV EASE Zalety Informacje ogólne

NOWOŚCI Z ZAKRESU SYSTEMU SWR

Ocena ilościowa reakcji antygen - przeciwciało. Mariusz Kaczmarek

EGZEMPLARZ ARCRMLW 9 OPIS OCHRONNY PL Data zgłoszenia: WZORU UŻYTKOWEGO 13) Y1. (2\J Numer zgłoszenia:

CIĘCIE LASEREM CIĘCIE CNC POŁĄCZENIA MATERIAŁÓW LITERY PRZESTRZENNE. technologia. sposób montażu. materiały

Spis treści 1 Komórki i wirusy Budowa komórki Budowa k

XIII KONKURS MATEMATYCZNY

Automatyka. Etymologicznie automatyka pochodzi od grec.

(12) OPIS OCHRONNY WZORU PRZEMYSŁOWEGO

Transkrypt:

Kanały i elektrogeneza Piotr Łaszczyca KFZiE, WBiOŚ, UŚ 2008

BŁONA Wg Singera i Nicholsona (1972) płynna mozaika i podwójna tafla lipidów

BIAŁKA I ICH FUNKCJE W BŁONACH Pompy błonowe np.: pompa sodowo-potasowa = Na, K-ATP-aza 100-2 000 molekuł pompy na 1 µm 2 błony, tzn. Ŝe ok. 10 6 pomp Na, K na 1 mały neuron, 200 jonów Na + na zewnątrz i 130 jonów K + do wnętrza na sekundę takŝe: pompy Ca 2+, Mg 2+, Cl -, H + Wymiennik jonowe i inne, np.: Ca, Na antyporter..., transporter glukozy napędzany dokomórkowym strumieniem sodu i inne... Kanały błonowe w tym: sodowe, potasowe, wapniowe, 1-10 5 molekuł kanałowych na 1 µm 2 błony... i inne (patrz dalej) Receptory błonowe mediatorów i hormonów (specyficzne wobec liganda) receptory - kanały receptory - enzymy (układ drugiego przekaźnika) receptory przeciwciała Antygeny powierzchniowe komórek i białka kotwiczące

PODWÓJNA TAFLA LIPIDÓW Lipidy błonowe głownie fosfolipidy i cholesterol trójestry zbudowane z: 1. z wielowodorotlenowego alkoholu (glicerolu) lub aminoalkoholu (sfingaminy) 2. dwóch wyŝszych kwasów tłuszczowych 3. kwasu fosforowego lub siarkowego 4. inozytolu, etanolaminy, seryny, choliny 5. galaktozy lub glukozy P i i c---c---c i i i o o o fizycznie moŝna w nich wyróŝnić: a/ hydrofilową, polarną główkę (rdzeń alkoholu z kwasem fosforowym i innymi związkami) b/ hydrofobowe, niepolarne ogony (łańcuchy kwasów tłuszczowych) Co lipidy robią w błonie 1. same układają się w elastyczną dwuwarstwę 2. tworzą miejsce do kotwiczenia białek 3. nie pozwalają na dyfuzję substancji polarnych 4. są źródłem substratów dla fosfolipaz

BIAŁKA BŁONOWE Alberts et al. 2006

Pompa czyli Na +, K + - ATP-aza Alberts et al. 2006

KANAŁ W BŁONIE Alberts et al. 2006

WŁASNOŚCI BŁONY 1. Selektywnie przepuszczalna - dla subst. polarnych nie i wody (o ile nie ma białek transportowych) - dla substancji niepolarnych ( lipidów ) (ale subst. apolarne nie mogą same dotrzeć przez wodę zewnątrzkomorkową do błony) 2. Aktywnie transportująca - bo w błonie pompy, wymienniki, nośniki, kanały 3. Zmieniająca przepuszczalność po bodźcu - bo receptory-kanały mogą się otwierać pod działaniem bodźca

CO WYNIKA Z WŁASNOSCI BŁONY 1. Rozmieszczenie jonów wewnątrz i na zewnątrz komórki Dane dla aksonu neuronu ssaka Stezenia jonów wyrazone w milimolach na litr z wyjatkiem stezenia bialek Na + K + Ca ++ Cl - Prot - Zewnatrz 150 6 2 125 1% Wewnatrz 10 150 10-8 9 30% Stosunek Z / W 15:1 1:25 10 8 :1 15:1 1:30 2. Zmiany przepuszczalności dla jonów po zadziałaniu bodźca Dane dla aksonu neuronu ssaka Stan komórki W spoczynku Po pobudzeniu Przepuszczalnosc (P x lub P y ) wzgledna blony dla jonów Sodu - Na + 0,04 20 Potasu - K + 1 1 Chloru - Cl - 0,45 0,45

CO WYNIKA Z WŁASNOSCI BŁONY 3. Zdolność do wytwarzania potencjału elektrycznego i jego zmiany I II III IV V A-KCh IR-KCh, CaCh K(Ca)Ch, CaCh 4. MoŜliwość wyliczenia potencjałów na podstawie teorii (HHK)

CO WYNIKA Z WŁASNOSCI BŁONY 5. Po prostu pobudliwość i wszystko o czym się studenci uczą na neurobiologii

CO WYNIKA Z WŁASNOSCI BŁONY Wapń - działanie regulacyjne w komórce wymiennik Na + /Ca 2+ Wiązanie z błoną siateczka Na + + pompa K + Ca 2+ pompa Ca 2+ depozyt Ca 2+ Napływ przez kanał mitochondria Przeciek Ca 2+ przez błonę

CO WYNIKA Z WŁASNOSCI BŁONY Discrimination Transduction Amplification Hormon GTP fosfodiesteraza ATP Recepcja SprzęŜenie Przetworzenie i wzmocnienie camp Wzmocnienie fosfataza Enzym lub czynnik transkrypcyjny ATP ~P Efekt regulacji Kanał

METODY BADANIA POBUDLIWOŚCI BŁONY DOŚWIADCZALNE METODY BADANIA BŁONY, KANAŁÓW I RECEPTOROW Techniki current clamp i voltage clamp z farmakologiczną izolacją prądów Technika patch clamp (Neher i Sackman Nobel 1992) Cell attached Whole cell Outside-out Inside-out Techniki izotopowe badanie przepuszczalności znakowanych jonów wiązanie znakowanych specyficznych przeciwciał lub toksyn (ligandów) z receptorami i kanałami Techniki izolacji, sekwencjonowania i syntezy in vitro białek błonowych z rekonstytucją w sztuczne błony

KANAŁ U DOKTORA Wzmacniacz róŝnicowy Mikroelektroda draŝniąca Mikroelektroda rejestrująca Układ pomiarowy CC / VC Komora z płynem fizjologicznym Elektroda odniesienia

KANAŁ U DOKTORA

KANAŁ U DOKTORA

KANAŁ U DOKTORA PATCH CLAMP NA CZTERY SPOSOBY (Neher i Sackman 1992 Nobel) Cell attached Whole cell Outside-out Inside-out Po co? Aby zobaczyć co robią pojedyncze cząsteczki białka w błonie

Kanał u doktora CURRENT CLAMP - Co robią jony Zham et al. 1999. Low Ca threshold spikes

Kanał u doktora CURRENT CLAMP - Zwykła iglica Wynik zapisu techniką Current Clamp E [mv] 20 0-20 III IV t [ms] -40-60 -80 I II bodziec V VI

Kanał u doktora VOLTAGE CLAMP - Jak to robią jony O, właśnie tak jak tu na przykładowym prostym aksonie Co widać na obrazku? Czarna linia: Ile prądu trzeba przepuścić przez komórkę aby utrzymać w niej depolaryzację Niebieska linia: Ile prądu potrzeba na stałą depolaryzację jesli zatka się TEA kanały dla potasu Czerwona linia: Ile prądu potrzeba na stałą depolaryzację jesli usunie się z zewnątrz komórki sód lub zatka się kanały sodowe tetrodotoksyną

Kanał u doktora VOLTAGE CLAMP - Jak to robią jony Voltage clamp dla zwykłego aksonu V M I M Tak na siłę zmieniono potencjał V M Tak zmieniało się g K I K I Na Tak zmieniało się g Na

KANAŁ FILTR I BRAMKA Alberts et al. 2006

TYPY KANAŁÓW Alberts et al. 2006

KANAŁ W BŁONIE KANAŁ SODOWY I KANAŁ-RECEPTOR CHLORKOWY

RÓZNICOWANIE KANAŁÓW BŁONOWYCH Kryteria wyróŝniania i klasyfikacji typów kanałów błonowych: 1. Istnienie mechanizmu bramnego 2. Czynnik aktywujący mechanizm bramny kanału: - kanały potencjałozaleŝne, - kanały aktywowane (bramkowane) chemicznie czyli receptory, - kanały sensoryczne (sensory) w komórkach receptorowych 3. Kinetyka mechanizmu bramnego (Jak szybko kanał się otwiera i zamyka po bodźcu) 4. Selektywność jonowa (Jakie jony mogą dyfundować przez kanał) 5. Przewodność jednostkowa kanału (Ile jonów moŝe maksymalnie przepływać przez kanał) 6. Podatność na modulację przez metabolizm komórkowy (pamięć!!) 7. WraŜliwość na specyficzne toksyny 8. Specyficzność gatunkowa i narządowa 9. Struktura białka kanałowego i homologia genów (dziś decydująca podstawa klasyfikacji!) w tym ilość domen transbłonowych (TM) od 2 do 6 i ilość podjednostek od 2 do 6

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH zmod. za Peter Agre, Roderick MacKinnon ( Nobel 2003), oraz e-handbook Sigma Co. KONEKSON (CONNEXON) nibykanał duŝy nieselektywny (do 800-1000 dalt., np. glukoza, c-amp, drobne peptydy) kanał błonowy o duŝym porze 1,5 nm, zbudowany z 6 ułoŝonych w rozetę jednostek koneksyny (u bezkręgowców ineksyna), zazwyczaj sprzęŝony z drugim, identycznym kanałem w błonie sąsiedniej komórki moŝe poprzez skrętne zmiany konformacji otwierać się lub zamykać. Regulacja otwarcia zachodzi m.in. z udziałem jonów wapnia i kalmoduliny, takŝe poprzez system c-amp. zespól blisko połoŝnych koneksonów tworzy złącze ścisłe (złącze szczelinowe = neksus, odległość błon- 3-5 nm) miedzy komórkami, umoŝliwiające niespolaryzowane przenikanie jonów i małych cząsteczek (moŝliwe jednak własności prostownicze). m.in. we wstawkach serca, miedzy komórkami mięśni gładkich i w synapsach elektrycznych (efapsach) Koneksyna (tityna) białko budulcowe koneksonu występuje w odmianach o roŝnej masie cząsteczkowej (26 30-34 37-40 - 43 kda). Genetyczne defekty mogą prowadzić do chorób, np. głuchoty, zaburzeń rytmu serca, zaburzeń rozwoju płodowego.

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KONEKSON Wikipedia

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY SODOWE (NaCh) pierwsze poznane i wyizolowane z błony, a następnie syntetyzowane i rekonstytuowane w błonie umoŝliwiają napływ sodu do komórki, występuje w kilku podtypach o róŝnej kinetyce, depolaryzacja Nadrodzina kanałów sodowych zaleŝnych od potencjału = Voltage Dependent Sodium Channels (VDSC) 4 podjednostki (domeny) homologiczne, lecz róŝne, kaŝda po 6 segmentów transbłonowych (S1-S6) kaŝdy segment transbłonowy o strukturze helikalnej i długości 20 aa, co trzeci aa helisy segmentu transbłonowego to Liz lub Arg decydujące dla działania sensora napięciowego między segmentem S5 i S6 pętla H5 złoŝona z dwóch łańcuchów SS1 i SS2 tworzy ścianę kanału na odcinku pętli zewnętrzne SS2 miejsce wiązania TTX domeny połączone wewnątrzkomórkowymi/wewnątrzbłonowymi pętlami (kaŝda inna) pętla I-II fosforyzowana, pętla III-IV odpowiada za inaktywację

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY SODOWE (NaCh) Budowa w mózgu: heterotrimer: alfa (260 kd), beta1 (36 kd), beta2 (33 kd) w sercu: monomer alfa w mięśniach szkieletowych: dimer: alfa + beta1 podjednostka alfa - tworzy por podjednostka beta-1 = tenascin - wiąŝe kanał z macierzą zewnątrzkomórkowa (glikokalyksem) podjednostka beta-2 - częściowo homologiczna z białkami adhezji komórkowej [cell adhesion molecule = contactin (CAM)] Typowa aktywność: aktywacja - 10 µs, czas otwarcia - 0,5-1 ms, inaktywacja refrakcja jednorazowy ładunek ok. 6000 Na+

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY SODOWE (NaCh) ZróŜnicowanie kanałów sodowych potencjałozaleŝnych NaV1.1 NaV1.2 NaV1.2a NaV1.3 NaV1.4 NaV1.5 NaV1.6 NaV1.7 NaV1.8 NaV1.9 OUN OUN (noworodk.) OUN (dojrzałe) OUN (zarodkowe) Miesnie szkielet. Serce OUN Sympat. UN i zwoje korz. grzbiet. Zwoje korzonka grzbiet. rdz. kr. Zwoje korzonka grzbiet. rdz. kr. α, β1-β4 α, β1-β4 α, β1-β4 α, β1-β4 α, β1 α, β1 β4 α, β α, β α, β α, β Wrazliwy na konotoksyne Bardzo wrazliwy na TTX Slabo wrazliwy na TTX Slabo wrazliwy na TTX Epilepsja Epilepsja Epilepsja Ból przewl. Przejsciowy paraliz Arytmia Ból Ból przewl. Ból przewl Ból przewl

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY WAPNIOWE (CaCh) umoŝliwia dokomórkowy napływ wapnia, podtypy funkcjonalne jak dla kanału sodowego Bramkowane chemicznie (ligandem) kanały wapniowe (NMDA-R/Ch, N-ACh-R) PotencjałozaleŜne kanały wapniowe (VDCC) VDCC - LVA (low voltage activated) VDCC - HVA (high voltage activated) Budowa Heteromultimery Podjednostka Alfa1 główna - z porem i mechanizmem bramnym Podjednostka Beta wewnątrzkomórkowy marker/regulator transportu potranslacyjnego i lokalizacji w błonie (intracellular membrane trafficking subunit - postraslational transporter regulators) Podjednostka Alfa2 pozakomórkowy element glikozylowany (zaczep w sieci glikoaliksu?) (extracellular glycosylated subunit) Podjednostka Gamma glikoproteina regulująca funkcje kanału mutacja stargazer u myszy Podjednostka Delta podjednostka transbłonowa (region kotwiczący), moduluje własności bramne kanału

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY POTASOWE (KCh) umoŝliwiają wypływ potasu z komórki, co przeciwdziała depolaryzacji, Liczne podtypy (ponad 80!) Pod względem funkcjonalnym moŝna wyróŝnić m.in.: KCh - zwykły: wolny i szybki i jego podpodtypy, odpowiada za repolaryzację i potencjał spoczynkowy, ACh - umoŝliwiający samoczynne depolaryzacje wskutek powolnego zamykania się po repolaryzacji - takŝe spacing serca i neuronów rozrusznikowych (pacemakers) IRCh - zamykając się na szczycie depolaryzacji mięśnia roboczego serca przedłuŝa ją (plateau), K(Ca)Ch = Slo-KCh + SK-KCh - otwierany/aktywowany oraz modulowany przez nadmiar jonów wapnia we wnętrzu komórki, sprawca wyładowań (depolaryzacji) salwami oraz habituacji, K(ATP)Ch - kanał potasowy hamowany przez ATP jest na zasadzie kompetycyjnej aktywowany przez fosforany fosfatydyloinozytolu (PIP 2 oraz PIP) wiąŝące się do podjednostki wewnątrzbłonowej jednostki białka kanałowego, hamowanie przewodnictwa K(ATP)Ch związane jest z aktywacją rozkładającej PIP fosfolipazy C, która uczynniana jest z kolei przez np. receptory purynoergiczne (np. P2Y2) TWIK-Ch - kanał potasowy z dwoma otworami (two pore) jakieś dziwadło!

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY POTASOWE (KCh) Budowa KCh Voltage Dependent Potasium Channels (VDPC) 4 podjednostki (domeny) homologiczne, lecz róŝne, kaŝda po 6 segmentów transbłonowych (S1-S6) segment S4 uczestniczy w inaktywacji między segmentem S5 i S6 pętla H5 złoŝona z dwóch łańcuchów SS1 i SS2 tworzy ścianę kanału - w ścianie miejsce wiązania TEA z segmentu S1 domeny alfa lub beta zwisa do wewnątrz komórki peptydowy łańcuch z kulą będący bramką inaktywacji (nie wszystkie KCh go mają) Nadrodzina kanałów potasowych zaleŝnych od potencjału lub aktywowanych przez wapń (KV-Ch i KCa-Ch) Nadrodzina kanałów potasowych o własnościach prostownika dośrodkowego (Kir), w tym: Kanał potasowy wraŝliwy na ATP (ATP-sensitive Potassium Channel) Kanały potasowe o własnościach prostownika dośrodkowego

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY CHLORKOWE (ClCh) napływ chloru, hiperpolaryzacja i hamowanie, u słodkowodnych jednokomórkowców wypływ Cl = depolaryzacja. Jedynie blokery małospecyficzne: - DIDS (4,4 -diispthiocyanatostilbene-2,2 -disulfonic acid) nieaktywny tylko wobec CFTR Blokery Ca-zaleŜnych ClCh i CFTR - NPPB (5-nitro-2-(3-phenylpropylamino); kwas benzoesowy Dysfuncja ClCh w: myotonia congenita, chorobie Denta, glioma (nadekspresja), mukowiscydozie Liczne typy: 1. Bramkowany chemicznie (przez ligand) kanał-receptor chlorkowy (Gly-R, GABA A -R) 20 podtypów o duŝym przewodnictwie hamowanie pobudzenia cel środków uspokajających 2. Regulowany przez c-amp Regulator Przewodnictwa Transbłonowego typowy dla mukowiscydozy [camp-regulated Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance (CFCR) Regulator] = ClC6 o niskim przewodnictwie

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY CHLORKOWE (ClCh) 3. Kanały chlorkowe zaleŝne od potencjału o niskim przewodnictwie Rodzina ClC w tym: VCC (Voltage-gated Chloride Channels) ssaków ClC-1 mięsni szkieletowych (brak myotonii) ClC-2 neurony ośrodkowe, uczestniczą w odpowiedzi GABA A, utrzymują gradient Cl ClC-3 we włóknach m. serca, wraŝliwe na objętość dzięki fosforylacji zaleŝnej od PKA/PKC ClC-4 powszechny ClC-5 głównie w nerce, takŝe w mózgowiu i wątrobie ClC-Ka, i ClC-Kb w nerce ClC-6 = CFCR, ClC-7 powszechny 4. Kanały chlorkowe zaleŝne od wapnia [Calcium-activated Chloride Channels] o niskim przewodnictwie Rodzina CaCC: 4 typy; mięśnie gładkie, nabłonki, o niskim przewodnictwie

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY WODNE = AKWAPORYNY (AQPs) Odkryte w 1992 (Peter Agre Nobel 2003), wszechobecne podstawowe, homologia z Major Intrinsic Proteins i z innymi białkami transbłonowymi Co najmniej 11 typów AQPs u ssaków AQP-0 - soczewka oka (katarakta) AQP-1 - nerka, erytrocyty, AQP-2 - wraŝliwa na wazosopresynę (ADH), mechanizm camp zaleŝny V2-R AQP-3, AQP-4 - podstawnoboczna część kom. nerki, jelito grube, tchawica AQP-4 - glej AQP-5 - nabłonki wydzielnicze AQP-6 - wewnątrzkomórkowe pęcherzyki wydzielnicze AQP-7 - jądra i jelito cienkie AQP-8 - jądra AQP-9 - leukocyty i wątroba

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY AKTYWOWANE PRZEZ MEDIATOR NERWOWY acetylocholinowy nikotynowy i muskarynowy: N i M- AChR: alfa- i beta-adrenergiczny: α, β, -ADR;... dopaminowy: D1, D2, D3, D4 ; serotoniowy: H1, H2, H3, H4 ; glutaminowy: non-nmda (Q/K), NMDA; AMPA; kainianowy ; NMDA - N-metylo-D-asparaginian - analog glutaminianu AMPA - alfa-amino-3-hydroksy-5-metylo-4-izoksazolopropionian - j.w. opiatowy: µ, κ,...... i inne - KaŜdy z ponad 50 poznanych mediatorów ma kilka róŝnych typów receptorów, jeden z nich moŝe być kanałem dla jakiegoś jonu, a inne są związane z produkcją drugiego przekaźnika. Receptor błonowy zbudowany jest z wielu białek, tworzących ogniwa łańcucha czynności. Jednym z początkowych ogniw są białka G, końcowym - enzym produkujący drugi przekaźnik, np.: cyklaza adenylanowa lub fosfolipaza A2, produkt ich reakcji aktywuje z kolei kinazy białkowe, które - przez fosforylację - modulują aktywność kanałów, receptorów, enzymów i białek jądrowych. Dwa sposoby reakcji receptora - jonoforowy i metaboliczny

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH Kanał i receptor w jednym Np. receptor acetylocholinowy typu nikotynowego czyli N-AChR Alberts et al. 2006

GŁÓWNE TYPY KANAŁÓW BŁONOWYCH KANAŁY SENSORYCZNE KOMÓREK RECEPTOROWYCH wraŝliwe na np. deformację błony komórki (dotyk), światło lub inne przekształcają energię bodźca w impuls nerwowy współdziałają z układem drugiego przekaźnika. Alberts et al. 2006

POTENCJAŁ NA RÓśNE SPOSOBY SPOSOBY ELEKTRYCZNEJ ODPOWIEDZI KOMÓRKI NA BODZIEC wynikające ze zróŝnicowanego wyposaŝenia błony w kanały i receptory Aktywność spontaniczna (III, V) lub odpowiedź wywołana bodźcem (I, II, IV, V) Depolaryzacja lub hiperpolaryzacja (I) Odpowiedź stopniowana (I) lub typu wszystko albo nic - iglicowa (II) Reakcja pojedyncza (II) lub salwami (V) I II III IV V A-KCh IR-KCh, CaCh K(Ca)Ch, CaCh

WŁÓKNO WŁÓKNU NIERÓWNE Klasyfikacja i własności aksonów w zaleŝnośći od budowy i funkcji za to teŝ Nobel dla Erlangera i Gassera (1944) Neurylemma -1µm; Mielina - 3 µm, Międzywęźle - 50-1000 µm, Osłonka/Akson - 0,6-1,0 Typ E-G Erlanger - Gasser Typ L-H Lloyd - Hunt Srednica [µm] Szybkosc [m/s] Mielina Wrazliwosc na hipoksje Wraziwosc na znieczulenie Funkcja czuciowa Funkcja ruchowa Specyfika Aα I a, b 12-20 70-120 + +++ - + + motoneuron alfa, wrzecionka Aβ II 5-12 30-70 + +++ - + somatosensoryczne Aγ - 3-6 15-30 + +++ - + motoneuron gamma Aδ III 2-3 12-30 + ++ + + cieplo, zimno, ból B - 1-3 3-15 + ++ ++ + przedzwoj. autonom. Cs - 0,3-1,3 0,7-2,3 - + +++ + zazwojowe sympat. Cdr IV 0,4-1,2 0,5-2,0 - - +++ + ± korzonek grzbiet

KŁOPOTY Z MIELINĄ Typy aksonów (włókien nerwowych) w zaleŝności od budowy osłonek Przewodzenie pobudzenia w komórce zaleŝności od budowy aksonu bez osłonki nagie bezmielinowe przewodzą wolno, w sposób ciągly, z dekrementem - stratami - zanikaniem osłonięte komórką glejową lub jej wytworami - mieliną bezrdzenne rdzenne osrodkowe mielinowe rdzenne obwodowe przewodzą szybko, w sposób skokowy, bez strat

ROZPRZESTRZENIANIE POTENCJAŁU A BUDOWA WŁOKNA Przewodzenie skokowe bez dekrementu + + + + + + + +++ + + + + + + + Przewodzenie ciągłe z dekrementem + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

PAMIĘĆ SEKWENCJA ZDARZEŃ Pamięć to (wg Donalda Hebba) zmiana siły oddziaływania na siebie układu neuronów, która powstała w wyniku ich wcześniejszej aktywności, szczególnie wynikająca ze współistnienia róŝnych aktywności, która prowadzi do zmian struktury układu. Pamięć (wg Endela Tulvinga oraz Neala Cohena, Larryego R.Squire, Daniela L. Schactera) dzieli się na: refleksoryczną - pamięć czynności, odruchowo-proceduralną, warunkowo-odruchową, wyuczalną metodą prób i błędów w wielu powtórzeniach sprawozdawczą - pamięć deklaratywną, epizodów, świadomą, pamięć asocjacji powstającą w jednej próbie emocjonalną - pamięć kontekstu uczuciowego nagrody lub kary w konkretnej sytuacji, szybko kształtowaną Behawioralne aspekty uczenia: bodziec bezwarunkowy - istotny, nieobojętny, kara lub nagroda, zmienia stan organizmu bodziec warunkowy - sam w sobie obojętny, nie wpływa na stan, ale moŝe zapowiadać pojawienie się bodźca bezwarunkowego sensytyzacja - forma uczenia zwiększająca czasowo pobudliwość na wszystkie bodźce, zachodzi w sekwencji: jednorazowy bodziec bezwarunkowy - reakcja - bodziec warunkowy - reakcja habituacja - forma uczenia zmniejszająca czasowo pobudliwość na powtarzające się obojętne bodźce, zachodzi w sekwencji: powtarzający się bodziec obojętny -... - brak reakcji Warunkowanie - warunkowanie klasyczne i instrumentalne zachodzi w sekwencji: bodziec obojętny - bodziec istotny - reakcja -... - bodziec obojętny -reakcja

PAMIĘĆ SEKWENCJA ZDARZEŃ Sensytyzacja BB R Wz BW R Habituacja n [BW R? (Wz)] BW Ø Warunkowanie n [BW BB R Wz] BW R Pamięć trwała BW 1 + BW 2 ( R )

Pamięć bodźce Co to jest pamięć Wg Donalda Hebba to modyfikacja oddziaływania synaps Co to jest bodziec bezwarunkowy (BB, US)? To nie jest mięso dla psa Pawłowa! To bodziec nieobojetny, naruszajacy homeostazę (kara fizyczna lub fizyczna nagroda) Co to jest bodziec warunkowy (BW, CS)? To nie jest dzwonek dla psa Pawłowa! To kaŝdy bodziec obojętny, nie naruszający homeostazy.

Jak uczą się ślimaki Miejsce akcji - łuk odruchu wciągania skrzeli u Aplysii a ściślej synapsa akso-aksonalna BW BB Syfon Głowa Neuron czuciowy I 5-HT Interneuron Glu 5-HT Glu Glu Mięsień retraktor skrzeli Glu Motoneuron Neuron czuciowy II

Co się dzieje 1 - Zwykła reakcja Zwykły bodziec bezwarunkowy zamach na skrzela bodziec - reakcja Glu BB Syfon Glu Glu Glu Głowa Neuron czuciowy II

Co się dzieje 2 - Habituacja Bodziec warunkowy faluje sobie woda n depolaryzacja I Ca [Ca 2+ ] in K(Ca)Ch g K słaby powtarzający się bodziec reakcja wygasa Glu n BW Syfon Głowa Glu

Co się dzieje 3 - Sensytyzacja Zwykły bodziec bezwarunkowy po głowie 5-HT c-amp Kinaza KCh~P g K uczulenie synapsy Syfon 5-HT BB Głowa 5-HT

Co się dzieje 4 Sensytyzacja cd. Słaby bodziec silna reakcja Glu BW Syfon Glu Glu Glu Głowa Neuron czuciowy II

Co się dzieje 4 - Warunkowanie Sumowanie bodźców bezwarunkowego i warunkowego najpierw: n BW habituacja + [Ca 2+ ] in + kalmodulina potem: BB AC-(kalmodulina Ca 2+ ) c-amp Kinaza KCh~P g K wreszcie: BW n+1 iiiii!!!! Glu n BW Syfon Glu BB Głowa