Imię i nazwisko Data ĆW. 1 Temat: Odpowiedź nieswoista humoralna 1. Metoda immunodyfuzji radialnej Opisz zasadę metody Wybierz i odczytaj wynik dla wybranego pacjenta korzystając z tabeli z wartościami referencyjnymi mm = g/l Rodzaj oznaczenia (wybierz) - C3 / C4 /C1q Zinterpretuj uzyskany wynik: 2. Test 100 % hemolizy Opisz i zilustruj zasadę metody: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 nr probówki Opis: Podaj zastosowanie - 3. Wykonaj rozmaz krwi na odłuszczonym szkiełku podstawowym wg wskazówek asystenta i pozostaw do wyschnięcia. Barwienie preparatu metodą May-Grunwalda-Giemsy i ocena mikroskopowa zostanie wykonana na ćw. 2. Podpis asystenta
Imię i nazwisko. Data 1. Rozmaz krwi - barwienie metodą Maya-Grünwalda-Giemsy Nanieść na preparat gotowy do użycia barwnik Maya Grünwalda 5 min. Spłukać wodą Nanieść na preparat przygotowany barwnik Giemsy 15 min Spłukać wodą Preparat osuszyć, oglądać pod immersją powiększenie 100x. Zilustruj poszczególne rodzaje komórek zidentyfikowanych w preparacie: Neutrofil Eozynofil Bazofil Limfocyt Monocyt 2. Metoda agarozowa Opisz zasadę metody: 3. Metoda Boydena - Opisz zasadę metody: 4. Test fagocytarny wg Wrighta Opisz zasadę metody: Zilustruj dodatnią reakcję: Uzupełnij normy: Odsetek komórek fagocytujących -.. Indeks fagocytarny. Oblicz indeks fagocytarny na przykładzie 5 komórek fagocytujących - Zastosowanie testu 5. Test NBT - wzbudzony i spontaniczny: Opisz zasadę metody: Zilustruj dodatnią reakcję: NBTs NBTw Uzupełnij normy: NBTw -.. Zastosowanie testu NBTs -... Podpis asystenta
Ćwiczenie 3 Metoda izolacji limfocytów w gradiencie gęstości Do dużej 10 ml probówki dodaj ok. 3 ml Gradisolu L (ok. 1/3 probówki) Następie nanieś za pomocą pipety krew pełną pacjenta pobraną na EDTA do probówki z Gradisolem nachylonej pod kątem 45 C Probówkę odwiruj - 15 min przy 1700 rpm Ściągnij za pomocą pipety uzyskany kożuszek limfocytów i przenieś do czystej probówki Zilustruj uzyskany wynik w probówce po zwirowaniu: Test rozetkowy Test rozetkowy E Test rozetkowy EA Test rozetkowy EAC Oceń preparat i zilustruj dodatni wynik testu rozetkowego: Zastosowanie- Test immunfluorescencji bezpośreniej Zasada testu Zastosowanie Limfocyty T - %
Limfocyty Th -..% Limfocyty Tc -..% Limfocyty B -..% Stosunek Th/Tc -.. Cytometria przepływa Zastosowanie: Test transformacji blastycznej: Oceń preparat i zilustruj dodatni wynik testu transformacji blastycznej Zastosowanie: Test MIF Zastosowanie: Ćwiczenie 4 Test lizy Do małej 5 ml probówki dodaj za pomocą pipety 2 krople krwi pełnej baraniej, 4 krople amboceptora (przeciwciała królicze) i 8 kropli dopełniacza Probówkę ogrzej 1-2 min. w dłoni Zastosowanie
Temat: HLA 1. Opisz: Test limfocytotoksyczny Ogólna zasada testu: Rodzaje: Test PRA Test cross-match Test limfocytotoksyczny Zasada: Zasada: Zasada: Zastosowanie: Zastosowanie: Zastosowanie:
2. Zilustruj dodatnią i ujemną reakcję uzyskaną w teście limfocytotoksycznym Reakcja ujemna Reakcja dodatnia Płytka Terasaki 3. Zinterpretuj wynik badania HLA uzyskany metodą molekularną SSP-PCR dla wybranego locucs A, B lub DR 4. Rozwiąż zadania (w załączniku do ćw.8): Zadanie 1 Odpowiedź: Zadanie 2 Odpowiedź: Zadanie 3 Odpowiedź: Zadanie 4 Odpowiedź: Zadanie 5 Odpowiedź:
Zadanie 1 Niespokrewniony dawca nerki ma następujące HLA: HLA - A 1,3; B4,12; DR 1,8 Grupa krwi: A Rh (+) Badanie w kierunku : HIV (-), HCV (-), HBV (-), CMV(-) Dobierz najodpowiedniejszego biorcę: - pierwszy biorca ma następujące HLA HLA A1,3: B4,8; DR 1,12 Grupa krwi: O Rh (+) Badanie w kierunku : HIV (-), HCV (-), HBV (-), CMV(-) - drugi BIORCA HLA A 1,2; B4,8: DR 7,12 Grupa krwi: A Rh (+) Badanie w kierunku : HIV (-), HCV (+), HBV (-), CMV(-) - trzeci biorca HLA A3,32; B 4,8; DR1,8 Grupa krwi: A Rh (+) Badanie w kierunku : HIV (-), HCV (-), HBV (-), CMV(-) Zadanie 2 Rodzice mają następujące HLA: - matka HLA A1,3; B4,8;Cw 4,-; DR 1,12 - ojciec - HLA A2,11; B7,12;Cw 1,5; DR 1,7 Jakie HLA mogą mieć ich dzieci : Zadanie 3 Niespokrewniony dawca nerki ma następujące HLA: HLA - A 1,3; B4,12; DR 1,8 Grupa krwi: A Rh (+) Badanie w kierunku : HIV (-), HCV (-), HBV (-), CMV(-) a biorca HLA A 2,3; B7,8; DR 1,5 Grupa krwi: A Rh (+) Badanie w kierunku : HIV (-), HCV (-), HBV (-), CMV(-) PRA 75%, pacjent bez dostępu naczyniowego Czy w takim przypadku wskazane jest wykonanie przeszczepu uzasadnij swoją odpowiedź Zadanie 4 U pacjenta w trakcie oznaczania HLA stwierdzono antygen B27. O czym może świadczyć występowanie tego antygen Zadanie 5 Pacjent zgłoszony do drugiego przeszczepu nerki ma ma następujące HLA A 2,3: B-7,8 ; DR1,5 Pierwszy dawca nerki miał następujące HLA - A2,11: B7,12; DR 1,4 Dobierz najodpowiedniejszego drugiego dawcę: - pierwszy dawca HLA A2,32; B 7,15; DR 1,8 - drugi dawca HLA A3,11; B 7,8; DR 4,5
Temat : Immunologiczne testy diagnostyczne Aglutynacja 1. Test aglutynacji szkiełkowej - wykonaj test zgodnie z zaleceniami asystenta Kontrola ujemna (NaCl) Badany szczep Wynik: dodatni/ujemny dodatni/ujemny 2. Test aglutynacji lateksowej 3. Test Widala oceń test zgodnie z zaleceniami asystenta Zilustruj dodatni wynik: Aglutynacji rzęskowej (H) Aglutynacji grudkowej (O) 4. Test hemoaglutynacji - wykonaj i zilustruj zgodnie z zaleceniami asystenta
Hemoaglutynacja z krwią ludzką Hemoaglutynacja z krwią baranią Wynik: dodatni/ujemny dodatni/ujemny 5. Test hamowania hemoaglutynacji Precypitacja 6. Test precypitacji probówkowej - wykonaj i zilustruj zgodnie z zaleceniami asystenta Wynik: dodatni/ujemny 7. Test podwójnej immunodyfuzji w żelu
Zilustruj wynik: 8. Test immunoelektroforezy Zilustruj wynik: 9. Test immunoelektroforezy rakietowej Zilustruj wynik: 10. Test VDRL 11. Odczyn wiązania dopełniacza (OWD) Hemoliza 12. Test ASO