NOVA Lite ANA KSL Do diagnostyki in vitro Kod produktu: 708380, 708390 508385,10, 508380,30 Złożoność CLIA: Wysoka Przeznaczenie NOVA Lite TM ANA KSL jest pośrednim immunofluorescencyjnym badaniem przesiewowym oraz półilościowego oznaczania przeciwciał przeciw-jądrowych (ANA), przeciw-mitochondrialnych (ASMA), przeciwko mięśniom gładkim oraz komórkom okładzinowym żołądka (GPA) w ludzkiej surowicy. Obecność przeciwciał przeciwjądrowych może być stosowana w połączeniu z objawami klinicznymi i innymi badaniami serologicznymi, aby wspomóc diagnostykę tocznia rumieniowatego układowego (SLE) lub innych chorób tkanki łącznej bądź reumatycznych. Podsumowanie i wyjaśnienie testu Pojęcie przeciwciała przeciwjądrowe (ANA) opisuje różnorodne przeciwciała, które wchodzą w reakcję ze składnikami jąder komórkowych, w tym z DNA, RNA oraz wieloma białkami i rybonukleoproteinami. 1 Te przeciwciała często występują u pacjentów z chorobami tkanki łącznej lub reumatycznymi, szczególnie toczniem rumieniowatym układowym. Praktycznie wszyscy pacjenci SLE są ANA-pozytywni. Ta czułość diagnostyczna doprowadziła do włączenia testowania ANA do Poprawionych kryteriów z 1982 r. klasyfikacji toczenia rumieniowatego układowego przez podkomisję Amerykańskiego Kolegium Reumatologii. 2 Pomimo tego, że badanie ANA jest doskonałym badaniem przesiewowym dla SLE (wynik negatywny praktycznie wyklucza aktywne SLE 3 ), w żadnym wypadku nie jest to badanie swoiste. Pacjenci z innymi chorobami tkanki łącznej, jak reumatoidalne zapalenie stawów, twardzina i zapalenie skórno-mięśniowe mają często wyniki pozytywne i w innych stanach chorobowych oraz u osób zdrowych można obserwować niskie miana ANA. 4 Pozytywne wyniki ANA mogą występować po ciężkich oparzeniach lub infekcjach wirusowych i zgłaszano je u niektórych osób zdrowych, zwłaszcza osób starszych. Ze względu na brak swoistości zaleca się, aby wszystkie próbki pozytywne pod względem ANA miareczkować do punktu końcowego i przeprowadzić bardziej swoiste badania pod kątem autoprzeciwciał skierowanych przeciwko podwójnej nici DNA (dsdna) i ekstrahowalnemu antygenowi jądrowemu (ENA). 1-3 Wysokie poziomy AMA są często wykrywane w związku z pierwotną marskością żółciową. Niskie miana AMA mogą być wykrywane w przypadku innych zaburzeń wątroby, takich jak przewlekłe aktywne zapalenie wątroby oraz kryptogenne zapalenie wątroby. 5,6 ASMA występuje w wysokich mianach w surowicy 70% pacjentów z przewlekłym aktywnym zapaleniem wątroby. Ponadto 50% z tych pacjentów ma pozytywne wyniki ANA, natomiast 25% wykazuje niskie miana AMA. Niskie miana ASMA mogą być obecne w zakażeniach wirusowych, nowotworach i u zdrowych osób. 5,7 GPA występuje w surowicy 90% chorych z niedokrwistością złośliwą. Wraz z innymi danymi laboratoryjnymi, pozytywny wynik GPA pozwala odróżnić autoimmunologiczną niedokrwistość złośliwą od innych niedokrwistości megaloblastycznych. Chociaż GPA są wykrywane u mniej niż 2% zdrowej populacji poniżej 20 roku życia, ich występowanie rośnie u kobiet powyżej 40 roku życia i może występować u do 16% zdrowej populacji powyżej 60 roku życia. 8,9 Referencyjną metodą badania ANA, AMA, ASMA i GPA jest pośrednia immunofluorescencja. Popularnymi substratami są cienkie skrawki narządów gryzoni lub niektóre rodzaje linii komórkowych. Substrat wybrany dla NOVA Lite ANA KSL jest optymalnie związany z nerką mysią, skrawkami żołądka i wątroby. Koniugat to oczyszczone metodą powinowactwa IgG przeciw-ludzkie. 1
Zasada badania W przypadku pośredniej techniki immunofluorescencji próbki są inkubowane z substratem antygenu, a przeciwciała, które nie weszły w reakcję, są wypłukiwane. Substrat jest inkubowany ze swoistym koniugatem znakowanym fluoresceiną, a następnie niezwiązany odczynnik jest wypłukiwany. Próbki zawierające autoprzeciwciała obserwowane pod mikroskopem fluorescencyjnym będą wykazywać jasnozieloną fluorescencyjną barwę w miejscach komórki lub jądra, gdzie nastąpiło związanie autoprzeciwciał. Odczynniki 1. Preparaty substratu ANA KSL (mysie nerki/żołądek/wątroba) na 4 lub 8 dołkach preparatów z osuszaczem Tylko zestawy: 2. Koniugat IgG przeciw-ludzkich (kozi), znakowany fluoresceiną w buforze zawierającym błękit Evansa i 0,09% azydku sodu 3. Wzór jednorodnego ANA, 1 fiolka buforu zawierającego 0,09% azydku sodu i ludzkie przeciwciała w surowicy przeciwko jądru komórkowemu, wstępnie rozcieńczone 4. Negatywna kontrola systemu IFA, 1 fiolka buforu zawierającego 0,09% azydku sodu i ludzkie przeciwciała w surowicy przeciwko ANA KSL, wstępnie rozcieńczone 5. Koncentrat PBS (40x) 6. Środek do osadzania preparatu, azydek sodu 0,09% 7. Szkiełka nakrywkowe Ostrzeżenia 1. Wszystkie materiały pochodzenia ludzkiego używane w przygotowywaniu kontroli dla tego produktu zostały przetestowane i na podstawie metod zatwierdzonych przez FDA stwierdzono że nie zawierają przeciwciał przeciwko HIV, HBsAg i HCV. Jednak żadna metoda testowania nie może całkowicie zagwarantować braku obecności HIV, HBV, HCV lub innych czynników zakaźnych. Dlatego wzór jednorodnego ANA oraz systemy negatywnej kontroli IFA powinny być traktowane w taki sam sposób jak materiał potencjalnie zakaźny. 10 2. Jako konserwant stosowany jest azydek sodu. Azydek sodu jest trucizną i może być toksyczny w przypadku połknięcia lub wchłonięcia przez skórę lub oczy. Azydek sodu może wchodzić w reakcję z ołowianą lub miedzianą instalacją wodociągową, tworząc potencjalnie wybuchowe azydki metali. Jeśli do usuwania odczynników używane są zlewy, należy przepłukiwać je dużą ilością wody, aby nie dopuścić do gromadzenia się azydku. 3. Podczas pracy z dostarczonymi odczynnikami należy stosować odpowiednie środki ochrony osobistej. 4. Rozlane odczynniki należy natychmiast usunąć. Należy przestrzegać wszystkich krajowych i lokalnych przepisów w zakresie utylizacji odpadów. Środki ostrożności 1. Ten produkt jest przeznaczony do zastosowań diagnostycznych in vitro. 2. Zastąpienie składników dostarczonych w tym systemie innymi składnikami może skutkować osiągnięciem niespójnych wyników. 3. Niekompletne lub nieskuteczne wypłukanie dołków IFA może spowodować wysoki poziom tła. 4. Dostosowanie tego badania do stosowania ze zautomatyzowanymi analizatorami próbek oraz innymi urządzeniami do pracy z płynami, w całości lub w części, może skutkować rozbieżnością wyników w stosunku do badań przeprowadzanych ręcznie. Obowiązkiem każdego laboratorium jest potwierdzenie, że wyniki testów uzyskanych na podstawie zautomatyzowanych badań mieszczą się w akceptowalnych limitach. 5. Na wyniki analizy wpływa wiele różnych czynników. Obejmują one temperaturę początkową odczynników, moc lampy używanego mikroskopu, dokładność i powtarzalność techniki pipetowania, dokładność płukania oraz czasy trwania inkubacji podczas badania. Uzyskanie dokładnych i powtarzalnych wyników wymaga staranności i precyzji. 2
6. Z czasem koniugat IgG przeciw-ludzkiej może zmienić kolor z powodu ekspozycji na światło. Jednak zmiana barwy nie ma wpływu na wynik badania. 7. Zalecane jest ścisłe przestrzeganie procedury testowej. Warunki przechowywania 1. Przechowywać wszystkie odczynniki zestawu w temperaturze 2 8 C. Nie zamrażać. Odczynniki są trwałe do daty ważności, pod warunkiem, że są przechowywane i używane zgodnie z instrukcjami. 2. Rozcieńczony bufor fosforanowy zachowuje trwałość przez 4 tygodnie w temperaturze 28 C. Pobieranie próbek Ta procedura powinna być wykonana z próbką surowicy. Dodanie azydku lub innych konserwantów do próbek analitycznych może mieć negatywny wpływ na wyniki. Nie używać próbek zawierających widoczne zanieczyszczenia, skażonych bakteryjnie lub podgrzanych. Należy unikać całkowicie zhemolizowanej lub lipemicznej surowicy albo próbek. Po pobraniu surowica powinna być oddzielona od skrzepu. Dokument CSLI (uprzednio NCCLS) H18-A2 zaleca następujące warunki przechowywania próbek: 1) Przechowywać próbki w temperaturze pokojowej nie dłużej niż 8 godzin. 2) Jeśli badanie nie zostanie zakończone w ciągu 8 godzin, schłodzić próbkę do temperatury 2-8 C. 3) Jeżeli test nie zostanie zakończony w ciągu 48 godzin, lub do wysłania próbki, należy zamrozić do temperatury -20 C lub niższej. Zamrożone próbki po rozmrożeniu i przed badaniem muszą zostać dobrze wymieszane. Badanie Dostarczone materiały (zestawy) 708380 25 8-dołków ANA KSL preparaty substratu 1 15 ml FITC koniugat przeciwkoludzkiej IgG 1 1,0 ml wzór jednorodny ANA 1 1,0 ml negatywna kontrola systemu IFA 2 25 ml koncentrat PBS (40x) 1 10ml środek do osadzania preparatu 1 25 szkiełek nakrywkowych 708390 10 4-dołków ANA KSL preparaty substratu 1 7 ml koniugatu FITC przeciwko-ludzkiej IgG 1 0,5 ml wzór jednorodnego ANA 1 0,5 ml systemu kontroli negatywnej IFA 1 25 ml koncentratu PBS (40x) 1 7 ml środku do osadzania preparatu 1 10 szkiełek nakrywkowych Dostarczone materiały (preparaty) 508385.10 10 x preparaty substratu ANA KSL (4 dołki) 508380.30 30 x preparaty substratu ANA KSL (8 dołków) Wymagane materiały nie dołączone do zestawu Mikropipety o pojemności 15-1000 μl Woda destylowana lub dejonizowana Gruszki laboratoryjne lub pipety Pasteura Komora wilgotna Pojemnik 1 l (do rozcieńczania PBS) Barwiacz Coplina Mikroskop fluorescencyjny z filtrem wzbudzającym 495 nm i filtrem barierowym 515 nm 3
Sposób przygotowania Przed rozpoczęciem 1. Doprowadzić wszystkie odczynniki i próbki do temperatury pokojowej (20 26 C) i dobrze wymieszać. 2. Rozcieńczyć koncentrat PBS: WAŻNE: Rozcieńczyć koncentrat PBS w stosunku 1:40, dodając zawartość butelki koncentratu PBS do 975 ml wody destylowanej lub dejonizowanej i dokładnie wymieszać. Bufor PBS jest używany do rozcieńczania próbek pacjentów oraz jako bufor do płukania. Rozcieńczony bufor może być przechowywany maksymalnie przez 4 tygodnie w temperaturze 2 8 C. 3. Rozcieńczyć próbki pobrane od pacjenta: a. Wstępne badanie przesiewowe: Rozcieńczyć próbki pochodzące od pacjenta w stosunku 1:20 rozcieńczonym buforem PBS (tj. dodać 50μL surowicy do 950μL buforu PBS). b. Miareczkowanie: Z początkowego rozcieńczenia przesiewowego dla wszystkich próbek pozytywnych wykonać serię 2-krotnych rozcieńczeń za pomocą rozcieńczonego buforu PBS (tj. 1:40, 1:80,... 1:5120). Procedura badania 1. Przygotować preparat substratu: Preparaty substratu przed wyjęciem z woreczka muszą osiągnąć temperaturę pokojową. Oznaczyć ołówkiem i umieścić w odpowiedniej komorze wilgotnej. Dodać 1 kroplę (70 90 µl) nierozcieńczonej kontroli pozytywnej i negatywnej, odpowiednio do dołka 1 i 2. Dodać 1 kroplę (70 90 µl) rozcieńczonej próbki pacjenta do pozostałych dołków. 2. Inkubacja preparatu: Inkubować preparat przez 30 + 5 minut w komorze wilgotnej (zwilżony ręcznik papierowy włożony na płasko na spodzie zamkniętej torebki lub szklanego pojemnika zapewni odpowiednie warunki wilgotności). Nie dopuścić do wyschnięcia substratu podczas badania. 3. Wypłukać preparaty: Po inkubacji użyć plastikowej gruszki laboratoryjnej lub pipety, aby delikatnie przepłukać surowicę rozcieńczonym buforem PBS. Ustawić preparat oraz strumień bufora PBS w taki sposób, aby ograniczyć wypłukiwanie próbek między dołkami. Unikać kierowania strumienia bezpośrednio na dołki, aby nie dopuścić do uszkodzenia substratu. Jeśli jest to wymagane, można umieścić preparaty na maks. 5 minut w barwiaczu Coplina z rozcieńczonym buforem PBS. 4. Dodanie koniugatu fluorescencyjnego: Strząsnąć nadmiar buforu PBS. Umieścić preparat z powrotem w komorze wilgotnej i natychmiast przykryć każdy dołek kroplą koniugatu fluorescencyjnego. Inkubować preparaty przez dodatkowe 30 +5 minut. 5. Wypłukać preparaty: Powtórzyć punkt 3. 6. Szkiełko nakrywkowe: Procedura nakładania szkiełek nakrywkowych różni się w zależności od laboratorium. Zalecana jest poniższa procedura: a. Umieścić szkiełko nakrywkowe na ręczniku papierowym. b. Nanieść środek do osadzania preparatu w formie ciągłej linii na dolnej krawędzi szkiełka nakrywkowego. c. Strząsnąć nadmiar buforu PBS i zetknąć dolną krawędź preparatu z krawędzią szkiełka nakrywkowego. Delikatnie opuścić preparat na szkiełko nakrywkowe, w taki sposób, aby środek do osadzania preparatu rozpłynął się do górnej krawędzi preparatu bez formowania pęcherzyków powietrza. Kontrola jakości Wzór jednorodnego ANA oraz system negatywnej kontroli IFA powinny być przeprowadzone na każdym preparacie, aby zapewnić, że wszystkie odczynniki i procedury są wykonane poprawnie. Dodatkowe odpowiednie surowice kontrolne można przygotować dzieląc połączone próbki surowicy ludzkiej i przechowując je w temperaturze < -70 o C. Aby wyniki badania mogły być uznane jako ważne, muszą zostać spełnione wszystkie poniższe kryteria. Jeśli jakiekolwiek kryterium nie będzie spełnione, wyniki badania powinny być traktowane jako nieważne i badanie powinno zostać powtórzone. 1. Wzór jednorodnego ANA musi być > 3+. 2. System kontroli negatywnej IFA musi być negatywny. 4
Interpretacja wyników Reakcja negatywna. Próbka jest traktowana jako negatywna, jeśli swoiste zabarwienie jest równe lub mniejsze niż systemu kontroli negatywnej IFA. Próbki mogą wykazywać różny stopień barwienia tła ze względu na przeciwciała heterofilne lub niski poziom autoprzeciwciał skierowanych przeciwko składnikom cytoplazmatycznym, jak białka kurczliwe. Reakcja pozytywna. Swoiste barwienie składników komórkowych. W zależności od swoistości przeciwciała można obserwować różne wzory barwienia. Ustalić stopień fluorescencji lub intensywności za pomocą tych kryteriów: 4+ Jaskrawo jasnozielona fluorescencja 3+ Jasna jasnozielona fluorescencja 2+ Wyraźnie rozpoznawalna pozytywna fluorescencja 1+ Najniższa swoista fluorescencja tła, która umożliwia dokładne różnicowanie barwienia jądra lub cytoplazmy od fluorescencji tła. Interpretacja wzoru. Różnorodność wzorów barwienia materiałów jądrowych i cytoplazmatycznych może być przedstawiana w zależności od rodzaju i względnej ilości autoprzeciwciał obecnych w próbce. Można obserwować następujące wzory barwienia: Jednorodne: Jednolite barwienie jądra z lub bez widocznego maskowania jąderek. Obecność antygenów jądrowych: dsdna, ssdna, histony Powiązanie z chorobą: Wysokie miana sugerują SLE, niskie miana sugerują SLE lub inne choroby tkanki łącznej. Obwodowe: Jednolite barwienie, głównie wokół zewnętrznej okolicy jądra, ze słabszym barwieniem w kierunku centrum jądra. Obecność antygenów jądrowych: dsdna, ssdna, DNP, histony. Powiązanie z chorobą: Wysokie miana sugerują SLE, niskie miana sugerują SLE lub inne choroby tkanki łącznej. Plamy: Widoczne delikatne lub ziarniste barwienie jąderka, na ogół bez barwienia fluorescencyjnego jąderek. Obecność antygenów jądrowych: Sm, RNP, Scl-70, SS-A, SS-B, i inne antygen / przeciwciało jeszcze systemów jeszcze nie scharakteryzowanych. Powiązanie z chorobą: Wysokie miano wskazujące na SLE (przeciwciało Sm), mieszana choroba tkanki łącznej (przeciwciało RNP), twardzina (przeciwciało SCL-70) lub zespół Sjögrena-zespół suchości (przeciwciało SS-B), niższe miana mogą sugerować inne choroby tkanki łącznej. Jąderkowy: Duże ziarniste nakrapiane plamy w jądrze, zazwyczaj mniej niż 6 na komórkę, z lub bez okazjonalnych drobnych plamek. Obecność antygenów jądrowych: 4-6S RNA i inne nieznane antygeny jądrowe. Powiązanie z chorobą: Wysokie miana występują w twardzinie i zespole Sjogrena. Mitochondrialne (AMA): Dyskretne ziarniste barwienie dystalnych i/lub proksymalnych kanalików nerkowych. Aktywne metabolicznie komórki ścienne żołądka zawierają wysokie stężenia mitochondriów i także mogą barwić się pozytywnie. Obecność antygenu: Różne rodzaje antygenów mitochondrialnych. Powiązanie z chorobą: Wysokie miana wskazują na pierwotną marskość żółciową. Mięśnie gładkie (ASMA): Oddzielne barwienie wewnętrznych warstw mięśniowych naczyń krwionośnych nerki i/lub warstw mięśniowych żołądka jest uważane za swoiste dla ASMA. Obecność antygenu: Aktyna. Powiązanie z chorobą: Wysokie miana świadczą o przewlekłym aktywnym zapaleniu wątroby, autoimmunologicznym zapaleniu wątroby. Komórki ścienne żołądka (GPA): Barwienie cytoplazmy komórek ściennych żołądka. Komórki te znajdują się w błonie śluzowej żołądka. Ponieważ AMA również barwią komórki ścienne, należy sprawdzić kanaliki nerkowe przed zgłoszeniem GPA. Jeżeli próbka ma pozytywny wynik GPA, kanaliki nerkowe będą negatywne. 5
Obecność antygenu: Pompa protonowa (h/k ATP-aza). Powiązanie z chorobą: Przeciwciała te występują w niedokrwistości złośliwej i zanikowym zapaleniu błony śluzowej żołądka. Istotne jest ostrzeżenie użytkownika, aby zachować ostrożność podczas określenia swoistości autoprzeciwciał na podstawie wzorów, z wyjątkiem wzorów jąderkowych i centromerowych, w których każdy antygen jest bardzo dobrze określony i ich wzory są charakterystyczne. Ponieważ wiele autoprzeciwciał lub ich kombinacji może indukować wzór jednorodny lub plamisty, zaleca się przeprowadzenia na wszystkich próbkach plamistych lub jednorodnych kontrolnych badań autoprzeciwciał swoistych (takich jak dsdna i ENA). Ograniczenia badania 1. Wysokie miana ANA sugerują chorobę tkanki łącznej, ale nie powinny być uznawane za diagnostyczne. Wynik badania ANA powinien być analizowany w połączeniu z innymi wynikami serologicznymi oraz ogólnym wywiadem klinicznym pacjenta. 2. Wzory ANA często zmieniają się, gdy próbka jest miareczkowana do punktu końcowego. Zjawisko to jest spowodowane faktem, że podczas badania bardziej rozcieńczonych próbek niższe miana przeciwciał spadają poniżej czułości systemu. 3. Wiele różnych czynników zewnętrznych ma wpływ na wrażliwość testu, np. typ używanego mikroskopu fluorescencyjnego, moc i wiek lampy, stosowane powiększenie, system filtrów oraz badacz. 4. Jeśli zamiast filtra barierowego 515 używany jest filtr środkowo-przepustowy, może wystąpić zwiększone zabarwienie artefaktowe. 5. Do opisywania preparatów należy stosować wyłącznie ołówek. Stosowanie innego przyrządu do pisania może spowodować zabarwienie artefaktowe. 6. Wszystkie barwiacze Coplina stosowane do płukania preparatów nie powinny zawierać żadnych pozostałości barwników. Używanie barwiaczy Coplina zawierających pozostałości barwników może spowodować zabarwienie artefaktowe. 7. Wyniki tego badania powinny być użyte w powiązaniu z wynikami klinicznymi i innymi badaniami serologicznymi. 8. Charakterystyka wyników badania nie została ustanowiona dla podłoża innego niż surowica. Preparaty sprzedawane oddzielnie są sklasyfikowane jako Odczynniki analityczne. Z wyjątkiem uwzględnienia jako składnika zestawu NOVA Lite ANA KSL charakterystyka analityczna nie są ustalone. Spodziewane wartości Stosując badanie NOVA Lite ANA KSL, badano pacjentów z różnymi chorobami tkanki łącznej, pacjentów z autoimmunologicznymi chorobami wątroby, pacjentów z niedokrwistością złośliwą, a także 200 przypadkowych dawców krwi. Wyniki znajdują się poniżej: Liczba pozytywnych* NOVA Lite ANA KSL Grupa pacjentów Numer ANA AMA ASMA GPA SLE 105 101 5 9 1 Toczeń polekowy 24 24 0 0 0 Reumatoidalne zapalenie stawów 40 28 1 1 0 Przewlekłe aktywne zapalenie wątroby 25 10 4 21 0 Pierwotna marskość żółciowa 30 5 27 3 0 Niedokrwistość złośliwa 15 0 0 0 14 Normalne 200 3 2 6 1 *Całkowita liczba pozytywna może przekroczyć liczbę badanych z powodu wielu wzorów w pojedynczym dołku. 6
Piśmiennictwo 1. Tan EM: Autoantibodies to nuclear antigens (ANA): Their immunobiology and medicine. Advances in Immunology 33:167-239, 1982. 2. Tan EM, et. al.: The 1982 Revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis and Rheumatism 25:1271-1277, 1982. 3. Casalo SP, Friou GJ, Myers LL: Significance of antibody to DNA in systemic lupus erythematosus. Arthritis and Rheumatism 7:379-390, 1964. 4. Wiik A: Antinuclear factors in sera from healthy blood donors. Acta. Path. Microbiol. Scand. 84:215-220, 1976. 5. Peter JB, Dawkins RL: Evaluating autoimmune diseases. Diagnostic Medicine: 68-76, September- October, 1979. 6. Doniach D, Roitt IM, Walker JG, Sherlock S: Tissue antibodies in primary biliary cirrhosis, active chronic (lupoid) hepatitis, cryptogenic cirrhosis and other liver diseases and their clinical implications. Clinical Experimental Immunology 1:237-262, 1966. 7. Toh BH: Smooth muscle autoantibodies and autoantigens. Clinical Experimental Immunology 38:621-628, 1979. 8. Cavallaro JJ, Palmen DF, Bigazzi PE: Immunofluorescent detection of Autoimmune Diseases, Immunology Series No. 7. Center for Disease Control, Atlanta GA, 1976. 9. Loveridge N, Bitensky L, Chayen J, Hausamen TU, Fisher JM, Taylor KB, Gardner JD, Bottazzo GF, and Doniach D: Inhibition of parietal cell function by human gammaglobulin containing gastric parietal cell antibodies. Clinical and Experimental Immunology 41:264-270, 1980. 10. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health, Fifth Edition, 2007 7
NOVA Lite jest zastrzeżonym znakiem handlowym firmy INOVA Diagnostics, Inc. Copyright 2011. Wszelkie prawa zastrzeżone Wyprodukowano przez: INOVA Diagnostics, Inc. 9900 Old Grove Road San Diego, CA 92131 Stany Zjednoczone Ameryki Pomoc techniczna (tylko na terenie Stanów Zjednoczonych i Kanady): 877-829-4745 Pomoc techniczna (poza terenem Stanów Zjednoczonych): 00 + 1 858-805-7950 support@inovadx.com Autoryzowani przedstawiciele na terenie Unii Europejskiej: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D-66386 St. Ingbert, Niemcy Tel.: +49-6894-581020 Faks.: +49-6894-581021 www.mt-procons.com 628390POL Marzec 2011 Wersja 0 8