534 M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA sensitivity response to virus attack and (iv) regulates the alternative oxidase activity in miotchondria. Activa
|
|
- Wanda Malinowska
- 7 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 POSTÊPY BIOLOGII KOMÓRKI TOM NR 3 ( ) AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH 533 AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH ALANINE AMINOTRANSFERASE IN HIGHER PLANTS Maria El bieta KENDZIOREK, Barbara Maria ZAGDAÑSKA Katedra Biochemii, Wydzia³ Rolnictwa i Biologii, Szko³a G³ówna Gospodarstwa Wiejskiego w Warszawie Streszczenie: Aminotransferaza L-alanina:2-oksoglutaran (EC ) nazywana alaninow¹ (AlaAT) katalizuje reakcjê transaminacji miêdzy L-alanin¹ a 2-oksoglutaranem oraz odwrotn¹, miêdzy L-glutaminianem a pirogronianem. Jest jednym z najwa niejszych enzymów uczestnicz¹cych syntezie i degradacji L- alaniny. U roœlin wykazano obecnoœæ kilku izoenzymów (2 do 6 w zale noœci od roœliny) tego enzymu. Lokalizacja subkomórkowa izoenzymów tej amniotransferazy w cytoplazme, mitochondriach i peroksysomach wydaje siê byæ œciœle powi¹zana z rol¹ metaboliczn¹: (i) u roœlin typu C 4 (Paniculum miliaceum) aminotransferaza alaninowa umo liwia transfer jednostek C 3 (pirogronian) z mezofilu do do pochwy oko³owi¹zkowej, (ii) peroksysomalna aminotransferaza alaninowa wykazuj¹ca aktywnoœæ transaminazy L-glutaminian : glioksalan zaanga owana jest w regulacjê aktywnoœci fotooddychania, (iii) aminotransferaza alaninowa niewykazuj¹ca aktywnoœci transaminazy L-glutaminian : glioksalan bierze udzia³ w odpowiedzi nadwra liwoœci na atak oraz (iv) enzym ten reguluje aktywnoœæ oksydazy alternatywnej w mitochondriach. Zaobserwowano tak e aktywacjê aminotransferazy alaninowej pod wp³ywem niedotlenienia i towarzysz¹c¹ jej akumulacjê L-alaniny. Na tej podstawie wysuniêto przypuszczenie, e enzym ten mo e byæ zaanga owany w reakcje umo liwiaj¹ce roœlinie tolerowanie ró nych niekorzystnych czynników, takich jak okresowe zalewanie pól czy zaleganie okrywy œniegu. Badania nad roœlinami transgenicznymi wykaza³y tak e jej kluczow¹ rolê w metabolizmie azotu. Ponadto peroksysomalna aminotransferaza alaninowa wspo³dzia³aj¹ca z glioksalanem jako akceptorem grupy aminowej jest zaanga owana w regulacjê stê enia seryny, cytruliny i glicyny w liœciach. S³owa kluczowe: aminotransferaza alaninowa, izoenzymy, hypoksja, deficyt azotu, fotooddychanie. Summary: Alanine:2-oxoglutarate aminotransferase (EC ), also called alanine aminotransferase (AlaAT), catalyses transamination reaction between L-alanine and 2-oxoglutarate and the reverse reaction between L-glutamate and pyruvate. It is one of the most important enzymes involved in the synthesis and degradation of L-alanine. There are multiple isoenzymes of this enzyme (2 to 6) present in plants. Subcellular location of these isoenzymes appears to be directly associated with their metabolic role: (i) in C 4 plants (Paniculum miliaceum) alanine aminotransferase participates in the transfer of C 3 units (pyruvate) from mesophyl to bundle sheath cells, (ii) peroxysomal alanine aminotransferase exhibiting L-glutamate : glyoxylate aminotransferase activity is involved in regulation of photorespiration, (iii) alanine aminotransferase lacking L-glutamate : glyoxylate aminotransferase activity participates in hyper-
2 534 M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA sensitivity response to virus attack and (iv) regulates the alternative oxidase activity in miotchondria. Activation of alanine aminotransferase and simultaneous L-alanine acumulation was observed in plants subjected to hypoxia. On this base it was proposed, that this enzyme is involved in the response mechanisms that allow plants to survive under various adverse conditions such as periodic flooding of fields or lingering of snow cover. Research on transgenic plants also indicated its crutial role in nitrogen metabolism. Moreover peroxysomal alanin aminotransferase capable of using glyoxylate as amino group acceptor appeared to be involved in regulation of serine, citruline and glycine contents in leaves. Key words: alanine aminotransferase, isoenzymes, hypoxia, nitrogen deprivation, photorespiration. 1. WSTÊP Aminotransferazy (EC x) s¹ enzymami powszechnie wystêpuj¹cymi u roœlin, zwierz¹t i mikroorganizmów. Reakcje katalizowane przez nie odgrywaj¹ istotn¹ rolê w wielu szlakach metabolicznych, takich jak metabolizm aminokwasów i witamin, asymilacja azotu i wêgla, fotooddychanie, a tak e glukoneogeneza [14]. Enzymy te nale ¹ do klasy transferaz i katalizuj¹ przeniesienie grupy aminowej z aminokwasu, bêd¹cego dawc¹ tej grupy, na 2-oksokwas, s³u ¹cy jako jej biorca. Produktami reakcji s¹ 2-oksokwas (pochodny substratowi aminokwasowemu) i aminokwas (odpowiadaj¹cy substratowi 2-oksokwasowemu). Jak wiele enzymów wykorzystuj¹cych substraty aminokwasowe, aminotransferazy potrzebuj¹ do dzia³ania kofaktora, fosforanu pirydoksalu (PLP), który jest kowalencyjnie zwi¹zany z ich bia³kiem. Wiêkszoœæ reakcji transaminacji jest ³atwo odwracalna. Jednak e niektóre z nich uchodz¹ za nieodwracalne w warunkach fizjologicznych, jak te z udzia³em glioksalanu (substrat 2-oksokwasowy), gdy zachodz¹ ze znacznym spadkiem energii swobodnej, lub nie mog¹ zajœæ w odwrotnym kierunku z powodu niestabilnoœci produktów, czy niskiego powinowactwa enzymu do substratu [25]. Zazwyczaj jeden enzym jest zdolny katalizowaæ reakcje z wieloma parami substratów aminokwas : 2-oksokwas [35]. Z tego powodu jedno bia³ko enzymatyczne by³o czêsto znane pod kilkoma ró nymi nazwami i numerami klasyfikacyjnymi. Przez ostatnie kilkanaœcie lat poczyniono ogromne postêpy w identyfikacji i charakterystyce genów koduj¹cych aminotransferazy. Przeszukanie bazy danych genomu Arabidopsis thaliana ( doprowadzi³o do znalezienia 60 sekwencji pokrewnych im enzymów zale nych od PLP, z czego 16 nie pe³ni³o funkcji aminotransferaz. Zatem pozosta³e 44 bia³ka s¹ potencjalnie zaanga owane w katalizowanie reakcji transaminacji w komórce roœlinnej. Dalsza analiza tych sekwencji pozwoli³a stwierdziæ, e w niektórych przypadkach wystêpuje kilka spokrewnionych form enzymu (np. aminotransferaza asparaginianowa czy alaninowa), zlokalizowanych w ró nych przedzia³ach subkomórkowych, w innych przypadkach wystêpowa³a tylko jego jedna forma (np. aminotransferaza seryna : glioksalan). Z tych 44 potencjalnych aminotransferaz wystêpuj¹cych u rzodkiewnika oko³o 20 zosta³o przebadanych, a tak e odpowiedniki czterech enzymów pochodz¹cych z innych roœlin [14]. Zatem ponad 40% potencjalnych aminotransferaz pozostaje jeszcze niescharakteryzowane.
3 AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH 535 Reakcjê przeniesienia grupy aminowej miêdzy L-glutaminianem a pirogronianem i odwrotn¹, miêdzy L-alanin¹ a 2-oksoglutaranem, katalizuj¹: aminotransferaza L-alanina : 2-oksoglutaran (EC ), nazywana alaninow¹ (AlaAT), oraz czêsto traktowana jako jej izoenzym wykazuj¹cy dodatkow¹ aktywnoœæ z glioksalanem jako akceptorem grupy aminowej aminotransferaza glutaminian : glioksalan (GGAT, EC ). Ze wzglêdu na du e znaczenie w diagnostyce chorób serca i w¹troby, aminotransferaza alaninowa cz³owieka i zwierz¹t. jest jednym z najlepiej przebadanych enzymów. Izoenzymy tej aminotransferazy uczestnicz¹ w metabolizmie aminokwasów w komórkach zwierzêcych. Izoformy cytoplazmatyczne tego enzymu przede wszystkim bior¹ udzia³ w syntezie L-alaniny z pirogronianu, podczas gdy miotchondrialna izoforma, wystêpuj¹ca w tkankach zdolnych prowadziæ glukoneogenezê, bierze udzia³ w przekszta³caniu alaniny do pirogronianu, wykorzystywanego do syntezy glukozy. Ponadto aminotransferaza alaninowa neuronów katalizuje syntezê L-glutaminianu z L-alaniny i 2-oksoglutaranu, co ma szczególne znaczenie przy regeneracji tkanki nerwowej po niedotlenieniu, gdy poziom L-alaniny znacznie wzrasta. Jednoczeœnie enzym ten odgrywa bardzo du ¹ rolê w degradacji L-glutaminianu neurotransmitera obficie wydzielanego w warunkach silnego pobudzenia, co chroni neurony przed uszkodzeniem spowodowanym jego toksycznym dzia³aniem w wysokim stê eniu [15]. Poziom aminotransferazy alaninowej we krwi, a tak e stosunek aktywnoœci aminotransferazy asparaginianowej do alaninowej jest wskaÿnikiem stosowanym w diagnostyce uszkodzeñ w¹troby spowodowanych ó³taczk¹ typu B i C, autoagresj¹, cukrzyc¹, alkoholizmem, lekami, a tak e choroby wieñcowej serca [4] czy uszkodzeñ miêœni szkieletowych [19] W organizmach roœlinnych stwierdzono obecnoœæ kilku (2 do 6) izoenzymów tej aminotransferazy w ró nych przedzia³ach komórkowych. W zielonych tkankach roœlin wystêpowa³y one g³ównie w peroksysomach, mitochondriach i cytoplazmie [13], natomiast nie wykryto ich obecnoœci w chloroplastach. W genomie rzodkiewnika pospolitego zidentyfikowano cztery geny koduj¹ce bia³ka enzymatyczne katalizuj¹ce reakcjê przeniesienia grupy aminowej miêdzy L-alanin¹ a 2-oksoglutaranem [8, 14]. Dwa z nich charakteryzuj¹ siê nisk¹ specyficznoœci¹ substratow¹ i dodatkowo katalizuj¹ reakcjê transaminacji L-glutaminian : glioksalan [13, 38]. Na C-koñcu bia³ka tych izoenzymów wystêpuje peptyd sygnalny (PTS1) kieruj¹cy je do przestrzeni peroksysomalnej, a ich sekwencje aminokwasowe odpowiadaj¹ aminotransferazom zidentyfikowanym jako GGAT1 i GGAT2 (numery akcesyjne NCBI odpowiednio: AAK25905 i AAL34156). Pozosta³e dwa bia³ka enzymatyczne (numery akcesyjne NCBI odpowiednio: AAF82781 i AAF82782) to AlaAT1 i AlaAT2 [8]. Zgodnie z tym, co podaj¹ Liepman i Olsen [14], AlaAT1 zlokalizowana jest w cytoplazmie, a AlaAT2 w mitochondriach. Podzia³ na 2 grupy w ramach izoenzymów aminotransferazy L-alanina : 2-oksoglutaran z rzodkiewnika (Arabidopsis thaliana) ma swoje uzasadnienie nie tylko w specyficznoœci substratowej, poniewa sekwencje aminokwasowe GGAT1 i GGAT2 oraz AlaAT1 i AlaAT2 wykazuj¹ odpowiednio: 93% i 85% podobieñstwa natomiast wskaÿnik identycznoœci sekwencji dla wszystkich czterech wynosi ok. 44%. U lucerny (Medicago truncatula) Ricoult i wsp. [27]
4 536 M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA stwierdzili wystêpowanie dwóch genów koduj¹cych izoenzymy: mitochondrialnej (m-alaat) i cytoplazmatycznej (c-alaat) aminotransferazy alaninowej. Aminotransferaza L-alanina : 2-oksoglutaran pochodz¹ca z ró nych roœlin wykazywa³a najczêœciej budowê dimeryczn¹ i masê cz¹steczkow¹ oko³o 100 kda. Na szczególn¹ uwagê zas³uguj¹ wyniki uzyskane przez Wiœniewskiego i wsp. [38]. Za pomoc¹ s¹czenia molekularnego na kolumnie Zorbax SE-250 wyznaczyli oni masy izoenzymów aminotransferazy L-alanina : 2-oksoglutaran z liœci Arabidopsis thaliana. Wynosi³y one odpowiednio 61,8 kda i 62,9 kda, dla izoenzymów wykazuj¹cych obydwie aktywnoœci (L-alanina : 2-oksoglutaran, AlaAT i L-glutaminian : glioksalan, GGAT) oraz oko³o 54,7 kda i 55,3 kda dla izoform tylko z aktywnoœci¹ L-alanina : 2-oksoglutaran (AlaAT). Zatem wszystkie cztery izoenzymy okaza³y siê aktywne enzymatycznie w formie monomerów. Powszechnie przyjmuje siê, e reakcje katalizowane przez aminotransferazy przebiegaj¹ zgodnie z mechanizmem zwanym ping pong bi bi [11]. Reakcja przebiega w dwóch etapach. W pierwszym etapie substrat aminokwasowy przekszta³cany jest w pochodny do niego 2-oksokwas. Proces ten mo na podzieliæ na trzy kroki: utworzenie zasady Shiffa, tautomeryzacjê i hydrolizê. W pierwszym kroku substrat aminokwasowy tworzy zasadê Shiffa z fosforanem pirydoksalu, czemu towarzyszy przeniesienie grupy a-aminowej na enzym. Nastêpnie alodimina utworzona przez fosforan pirydoksalu i substrat aminokwasowy w wyniku szeregu reakcji tautomeryzacji zostaje przekszta³cona w ketoiminê, która w ostatnim kroku hydrolizuje do fosforanu pirydoksaminy (PMP) i produktu 2-oksokwasowego. Drugi etap tej reakcji stanowi odwrócenie pierwszego. Grupa aminowa zostaje przeniesiona z PMP na substrat 2-oksokwasowy z utworzeniem pochodnego mu aminokwasu i jedno-czesnym przekszta³ceniem PMP na powrót do wewnêtrznej aldoiminy na skutek odwrócenia reakcji tautomeryzacji z pierwszego etapu. W trakcie reakcji transaminacji katalizowanej przez aminotransferazê alaninow¹ L-alanina powoduje od³¹czenie koenzymu od lizyny w centrum aktywnym i uwolnienie go w postaci fosforanu pirydoksaminy, z kolei 2-oksoglutaran stabilizuje wewnêtrzn¹ aldoiminê utworzon¹ przez enzym i PLP [1]. Badania specyficznoœci substratowej AlaAT z ró nych Ÿróde³ pokaza³y, e enzym ten katalizuje reakcje transaminacji w szerokim zakresie kombinacji dawca : biorca grupy aminowej. Niektóre izoformy tej aminotransferazy dodatkowo zdolne by³y katalizowaæ reakcjê transaminacji miêdzy L-glutaminianem a glioksalanem. U wielu izoform roœlinnych AlaAT stwierdzano zdolnoœæ do katalizowania reakcji transaminacji pomiêdzy L-alanin¹ a glioksalanem. Jednak e ani izoforma AlaAT oczyszczona z liœci kukurydzy [21], ani indukowana niedotlenieniem AlaAT z korzeni jêczmienia [6] nie wspó³dzia³a³y z glioksalanem jako akceptorem grupy aminowej. Pewnych informacji na temat fizjologicznej roli izoenzymów AlaAT dostarcza powinowactwo enzymu do substratu, o którym œwiadczy wartoœæ sta³ej K m. Wartoœæ tej sta³ej dla substratu aminokwasowego jest zazwyczaj wy sza, ni dla 2-oksokwasowego zarówno w przypadku aminotransferazy alaninowej, jak i innych transaminaz. Dla wiêkszoœci przebadanych enzymów wartoœæ K m dla L-alaniny w reakcji z 2-oksoglutaranem by³a podobna do tej, jak¹ uzyskiwano dla L-glutaminianu w reakcji z pirogronianem.
5 AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH 537 TABELA 1. Wartoœci sta³ych Michaelisa-Ment e n (K M ) dla AlaAT TABLE 1. Michaelis-Menten constant ( K ) values for AlaAT M Materia³ Rzodkiewnik (AlaAT1) Proso (AlaAT2) Substrat o zmiennym stê eniu L-alanin a 2-oksoglutaran L-alanin a 2-oksoglutaran L-glutaminia n pirogronian Kukurydza L-alanin a 2-oksoglutaran L-glutaminia n pirogronian K m [m M] 1,53 0,18 6,67 0,15 5,00 0,33 1,50 0,50 1,90 0,90 Substrat o sta³ym stê eniu 2-oksoglutaran L-alanin a 2-oksoglutaran L-alanin a pirogronian L-glutaminia n 2-oksoglutaran L-alanin a pirogronian L-glutaminia n Literatura Wiœniewski i wsp. [2006] Son i wsp. [1991] wsp. i Orzechowski [1999] W przypadku aminotransferazy glutaminian:glioksalan wartoœci K m dla dwóch rekombinowanych izoenzymów GGAT1 i GGAT2 rzodkiewnika wobec L-alaniny, 2-oksoglutaranu oraz pirogronianu i L-glutaminianu, a tak e wobec L-glutaminianu i glioksalanu w reakcjach transaminacji miêdzy tymi parami substratów najwiêksze ró nice zanotowano dla L-alaniny i 2-oksoglutaranu [13]. K m(ala) by³a dwukrotnie ni sza dla GGAT2 (3,32 mm) ni dla GGAT1 (1,97 mm), natomiast w przypadku K m(2-oksoglu) sytuacja wygl¹da³a odwrotnie (dla GGAT1 0,21 mm, dla GGAT2 0,14 mm). Ponadto stwierdzono, e wartoœæ K m dla L-alaniny w reakcji z 2-oksoglutaranem jest wy sza od uzyskanej dla L-glutaminianu w reakcji z glioksalanem. Podobne wyniki dla enzymu oczyszczonego z siewek yta uzyskali [23] ci, którzy stwierdzili, e w przypadku wy ej wspomnianych reakcji K m(ala) (4,7 mm) by³a blisko dwukrotnie wy sza ni K m(glu) (2,6 mm). Bardzo istotnymi parametrami wskazuj¹cymi na wydajnoœæ i preferencje katalityczne enzymu jest liczba obrotów (k cat ) i k cat /K m. Wiœniewski z wspó³pracownikami [38] wyznaczyli k cat i k cat /K m w transaminacji pomiêdzy L-alanin¹ a 2-oksoglutaranem dla AlaAT1 uzyskuj¹c bardzo wysok¹ wartoœæ (dla k cat 124,6 s 1, a dla k cat /K m 81449,5 1/Ms). Tak wysoka wydajnoœæ katalityczna w po³¹czeniu z wysokim powinowactwem enzymu do obydwu substratów wskazuje, e cytoplazmatyczna AlaAT z rzodkiewnika odgrywa kluczow¹ rolê w syntezie i degradacji L-alaniny. 2. LOKALIZACJA SUBKOMÓRKOWA IZOENZYMÓW ALaAT A ICH ROLA METABOLICZNA Lokalizacja subkomórkowa izoform AlaAT wydaje siê byæ powi¹zana z ich rol¹ metaboliczn¹. Dlatego sugerowano, e niektóre z nich mog¹ braæ udzia³ w syntezie i degradacji L-alaniny i wzajemnych przemianach aminokwasów [22]. Inne z kolei mia³y pe³niæ bardziej specyficzne funkcje, takie jak uczestniczenie w miêdzykomórkowym przep³ywie wêgla pomiêdzy komórkami mezofilu a pochwy
6 538M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA oko³owi¹zkowej u roœlin typu C4 [31], fotooddychaniu [20], odpowiedzi nadwra - liwoœci na atak wirusa [12], niedobór azotu [32] i adaptacji do warunków niedotlenienia [26, 27, 16]. Kluczow¹ spraw¹ pozostaje ustalenie funkcji pe³nionej przez poszczególne izoenzymy w roœlinie. Noguchi i Fujiwara [20] stwierdzili obecnoœæ aktywnoœci AlaAT zdolnej katalizowaæ transaminacjê pomiêdzy L-glutaminianem a glioksalanem zarówno u roœlin rosn¹cych w ciemnoœci, jak i na œwietle, jednak e obserwowali wzrost poziomu jej aktywnoœci pod wp³ywem œwiat³a. Ponadto stwierdzili, e w trakcie zielenienia aktywnoœæ ta zanika w cytozolu, a pojawia siê w peroksysomach. Wskazywa³o to na udzia³ tego enzymu w fotooddychaniu. Podobnie transkrypty genów koduj¹cych GGAT1 i GGAT2 znaleziono zarówno w siewkach rosn¹cych na œwietle, jak i w ciemnoœci [13]. Parametry kinetyczne rekombinowanych GGAT1 i GGAT2 by³y bardzo podobne, co doprowadzi³o do przypuszczeñ, e najprawdopodobniej odgrywaj¹ one w metabolizmie roœliny tê sam¹ rolê i obecnoœæ a dwu izoform GGAT u rzodkiewnika mo e byæ zbêdna [13]. Aby stwierdziæ, czy GGAT1 rzodkiewnika rzeczywiœcie dzia³a jako peroksysomalna aminotransferaza glutaminian : glioksalan, Igarashi i wsp. [8] wyizolowali liniê transgenicznych komórek tytoniu (BY-2) wytwarzaj¹c¹ fuzyjne zielone bia³ko fluoryzuj¹ce (GFP). W wektor ekspresyjny tego bia³ka wstawili cdna koduj¹ce ten izoenzym (GFP-AOAT1) oraz fragment cdna bez C-koñcowej sekwencji, która odpowiada za kierowanie bia³ek do peroksysomów (GFP-AOAT1DC). W komórkach, które wytwarza³y bia³ko GFP- AOAT1, jego fluorescencjê obserwowano w peroksysomach, natomiast w komórkach syntetyzuj¹cych bia³ko GFP-AOAT1DC wystêpowa³a na terenie cytoplazmy [8]. Drastyczny spadek aktywnoœci L-alanina : 2-oksoglutaran u mutantów linii alaat1-1 rzodkiewnika niewytwarzaj¹cych aminotransferazy alaninowej 1 wskazywa³, e jest ona g³ównym izoenzymem AlaAT w tej roœlinie [16]. Wyniki badañ na roœlinach typu dzikiego i mutantach OxAlaAT o zwiêkszonej ekspresji aminotransferaz alaninowych sugeruj¹ ich udzia³ w odpowiedzi roœlin Arabidopsis na niedotlenienie, bowiem wzrostowi poziomu transkrypcji genów koduj¹cych te izoenzymy w obu typach roœlin poddanych warunkom hypoksji towarzyszy³a gwa³towna produkcja L-alaniny (ibid). Wiadomo te, e transkrypcja genów koduj¹cych AlaAT jest indukowana przez dostarczenie azotu do pod³o a [33, 17], a drastyczne zahamowanie pobierania NO 3 przez roœliny poddane wysokim stê eniom metali ciê kich, takich jak: Cd 2+ czy Ni 2+, powodowa³o spadek aktywnoœci tego enzymu [3]. Wyniki badañ na transgenicznych roœlinach o zwiêkszonej aktywnoœci AlaAT potwierdzi³y znaczenie tego enzymu dla metabolizmu azotu w warunkach jego niedoboru [5, 30]. Roœliny rzepaku (Brassica napus L.) z wprowadzonym fragmentem cdna koduj¹cym AlaAT wyizolowanej z jêczmienia przez Muench i Good [18] poddano niedoborowi azotu [5]. U roœlin tych obserwowano zwiêkszone pobieranie azotanów w stosunku do roœlin kontrolnych. Charakteryzowa³a je te zwiêkszona produkcja L-alaniny, ³atwo transportowanej z korzeni do czêœci nadziemnych, co mog³o poprawiæ wydajnoœæ gospodarki azotem [5].
7 AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH ROLA ALaAT W WARUNKACH NIEDOTLENIENIA Niedobór tlenu, spowodowany zazwyczaj okresowym zalewaniem terenu, prowadzi do stopniowej nekrozy tkanek korzenia i tworzenia skupisk miêkiszu powietrznego (aerenchymy), pocz¹tkowo obejmuj¹cej sto ek wzrostu i postêpuj¹cej do walca osiowego [34]. Hypoksja jest zjawiskiem groÿnym zw³aszcza dla kie³kuj¹cych roœlin, gdy mo e redukowaæ ich liczbê lub zaburzaæ wzrost, a w przypadku roœlin u ytkowanych rolniczo przyczynia siê do spadku plonu i strat ekonomicznych [34]. W warunkach niedoboru tlenu nastêpuje zahamowanie oksydacyjnej fosforylacji przy jednoczesnym wzmo eniu glikolizy i szlaków fermentacyjnych, co prowadzi do akumulacji ró nych produktów tych szlaków, jak etanol, mleczan, bursztynian czy jab³czan. Obserwowano równie znaczny wzrost stê enia dwóch aminokwasów: L-alaniny i kwasu g-aminomas³owego (GABA) [24]. Poniewa L-alanina powstaje z pirogronianu, g³ównego produktu glikolizy, jej wzmo ona produkcja w odpowiedzi na niedotlenienie by³a szczególnie interesuj¹ca jako konkurencyjny szlak w stosunku do fermentacji alkoholowej, czy mlekowej. Synteza alaniny pozwala na zachowanie wêgla, który by³by zu yty w tych procesach do produkcji etanolu lub mleczanu z pirogronianu (ryc. 1). Ponadto jest procesem bardzo istotnym dla regulacji poziomu pirogronianu w komórce, gdy jego podwy szone stê enie prowadzi do aktywacji RYCINA 1. Metabolizm pirogronianu w warunkach niedoboru tlenu: GS syntetaza glutaminowa, GOGAT syntaza glutaminianowa, 2-OG 2-oksoglutaran, AspAT aminotransferaza asparaginianowa, OAA szczawiooctan, OAA-DC dekarboksylaza szczawiooctanowa, MDH dehydrogenaza jab³czanowa FIGURE 1. Pyruvate metabolism in oxygen deficiency conditions: GS glutamine syntetase, GOGAT glutamate syntase, 2-OG 2-oxoglutarate, AspAT aspartate aminotransferase, OAA oxaloacetic acid, OAA-DC oxaloacetate decarboxylase, MDH malate decarboxylase
8 540 M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA alternatywnej oksydazy w mitochondriach przyczyniaj¹c siê do zwiêkszonego zu ycia tlenu [7]. Akumulacja L-alaniny wydaje siê byæ kluczow¹ dla przetrwania hypoksji, gdy nastêpuje niezale nie od dostêpnoœci azotu dla roœlin [28, 29]. St¹d te du ym zainteresowaniem cieszy³y siê badania nad rol¹ aminotransferazy alaninowej w metabolizmie alaniny w warunkach niedotlenienia. Znaczny wzrost aktywnoœci aminotransferazy alaninowej i poziomu transkryptu j¹ koduj¹cego [26, 27, 28, 29] obserwowany u roœlin poddanych niedotlenieniu sugerowa³, i enzym ten odgrywa bardzo istotn¹ rolê we wzmo onej syntezie L-alaniny. Hipotezê tê potwierdza³ fakt wzmo onej syntezy enzymów cyklu syntetazy glutaminowej syntazy glutaminianowej (GS-GOGAT), bêd¹cego Ÿród³em L-glutaminianu bior¹cego udzia³ w produkcji L-alaniny z pirogronianu. Ponadto wyniki badañ z u yciem L-glutaminianu znakowanego 15 N wskazywa³y, e powstawa³a ona w wyniku przenoszenia grupy aminowej z tego aminokwasu na pirogronian [26, 27]. Syntezie L-alaniny z pirogronianu wskutek transaminacji towarzyszy przekszta³canie L-glutaminianu w 2-oksoglutaran, który mo e braæ udzia³ w produkcji bursztynianu w mitochondriach w trakcie cyklu kwasów trójkarboksylowych. Katalizuj¹ca t¹ reakcjê aminotransferaza alaninowa ³¹czy zatem glikolizê z cyklem kwasów trójkarboksylowych podczas niedoboru tlenu [28]. Nowe spojrzenie na rolê aminotransferazy alaninowej w niedoborze tlenu przynios³y badania, które przeprowadzili de Sousa i Sodek [2]. Stwierdzili oni, e znaczny wzrost stê enia L-alaniny nastêpuje wczeœniej ni szczyt wzrostu aktywnoœci AlaAT w korzeniach soi poddanej niedotlenieniu. Natomiast stê enie L-alaniny gwa³townie spada³o po powrocie do normalnych warunków dostêpnoœci tlenu. Obserwacja ta sugeruje, e aminotransferaza alaninowa odgrywa ograniczon¹ rolê w syntezie tego aminokwasu, który mo e powstawaæ na innych szlakach, natomiast odgrywa znacz¹ca rolê w jej degradacji po ust¹pieniu stresu (ibid). Przypuszczenie to potwierdzi³y wyniki badañ na mutantach rzodkiewnika pozbawionych aminotransferazy alaninowej 1 (alaat1-1) i o zwiêkszonej ekspresji aminotransferaz alaninowych (OxAlaAT). Stwierdzili oni, e roœliny linii alaat1-1 szybko akumulowa³y L-alaninê w warunkach niedotlenienia i znacznie d³u ej utrzymywa³y jej wysok¹ zawartoœæ po przeniesieniu do warunków normalnych ni roœliny typu dzikiego [16]. 4. FOTOODDYCHANIE Fotooddychanie jest bardzo kosztownym energetycznie procesem, powoduj¹cym obni enie wydajnoœci fotosyntezy przez spore zu ycie wêgla. Dlatego by³o postrzegane jako niekorzystne dla produktywnoœci roœlin [37]. Jednak e fotooddychanie jest procesem istotnym dla rozproszenia nadmiaru energii, przez co stanowi swego rodzaju mechanizm ochronny roœliny przed fotoutlenieniem pod wp³ywem zbytniej intensywnoœci œwiat³a, a tak e w warunkach suszy, czy wysokiego zasolenia [37]. Szlak ten wykorzystuje 2-fosfoglikolan powsta³y w obecnoœci œwiat³a, jako produkt utleniania rybulozo-1,5-bisfosforanu. Najpierw 2-fosfoglikolan jest hydrolizowany do glikolanu przez chloroplastow¹ fosfatazê fosfoglikolanow¹ i zostaje przetransportowany do peroksy-
9 AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH 541 somów, w których zostaje utleniony do glioksalanu przez oksydazê glikolanow¹. Mo e on dalej zostaæ przekszta³cony w glicynê przez aminotransferazê seryna : glioksalan (SGAT) lub glutaminian : glioksalan, która w tym procesie wykorzystuje glutaminian powsta³y w cyklu GS/GOGAT jako dawcê grupy aminowej. Glicyna bierze udzia³ w syntezie seryny, która w peroksysomach zostaje przekszta³cona przez SGAT do hydroksypirogronianu, który ulega redukcji do glicerynianu, który ufosforylowany jest zu yty do syntezy rybulozo-1,5-bisfosforanu w cyklu Calvina [37]. Aby stwierdziæ, czy GGAT1 rzeczywiœcie bierze udzia³ w fotooddychaniu, wyizolowano liniê mutantów rzodkiewnika niewytwarzaj¹cych tego enzymu nazwan¹ aoat1-1 [8]. W region odpowiedzialny za jego kodowanie wstawili oni T DNA z jednoczesn¹ delecj¹ 14 par zasad. W normalnych warunkach stê enia CO 2 i oœwietlania mutant ten wykazywa³ zmiany typowe dla mutantów o ograniczonej zdolnoœci do prowadzenia fotooddychania: zahamowany wzrost i jasno zielone liœcie. W warunkach wysokiego natê enia œwiat³a roœliny te rozwija³y siê gorzej od roœlin typu dzikiego, natomiast podwy szone stê enie CO 2 w œrodowisku sprzyja³o lepszemu rozwojowi tych roœlin. U mutantów tych mrna dla GGAT1 by³o niewykrywalne. Ponadto aktywnoœci aminotransferazowe: L-alanina : 2-oksoglutaran, L-alanina : glioksalan, L-glutaminian : pirogronian i L-glutaminian : glioksalan by³y ni sze, ni u typu dzikiego. Otrzymane wyniki pozwoli³y wnioskowaæ, e GGAT1 faktycznie funkcjonuje jako peroksysomalna aminotransferaza glutaminian : glioksalan, a niewielka aktywnoœæ L-glutaminian : glioksalan u mutanta aoat1-1 oraz jego zdolnoœæ do prze ycia w normalnych warunkach jest wynikiem obecnoœci GGAT2 [8]. Na to, e GGAT1 jest peroksysomaln¹ aminotransferaz¹ glutaminian : glioksalan wskazuje fakt, e stê enie H 2 O 2 w komórkach mutantów z utracon¹ zdolnoœci¹ do syntezy tego izoenzymu wystawionych na dzia³anie œwiat³a jest zdecydowanie wy sze ni u roœlin typu dzikiego [36]. 5. UDZIA W SYNTEZIE AMINOKWASÓW Badania ostatnich lat dostarczy³y bardzo interesuj¹cych wyników korelacji aktywnoœci GGAT oraz stê enia wybranych aminokwasów w liœciach mutanta rzodkiewnika z utracon¹ zdolnoœci¹ do biosyntezy GGAT1 (ggat1-1), wytwarzaj¹cego zwiêkszon¹ iloœæ tego izoenzymu (GTox) i roœliny typu dzikiego [9]. Stwierdzono, e w Arabidopsis najwiêksza korelacja wystêpuje miêdzy aktywnoœci¹ GGAT a zawartoœci¹ seryny, cytruliny i glicyny. Sugerowa³o to, e aminotransferaza glutaminian : glioksalan mo e braæ bezpoœredni udzia³ w regulacji poziomu tych trzech aminokwasów. Ponadto istotne ró nice w zawartoœci dziewiêciu wybranych aminokwasów miêdzy trzema wymienionymi liniami roœlin wskazywa³y, e badany izoenzym uczestniczy w metabolizmie tych zwi¹zków [9]. Wyniki doœwiadczeñ z u yciem L-alaniny i L-glutaminianu znakowanych 15 N wskazywa³y na udzia³ GGAT z lucerny w syntezie glicyny. W warunkach niedoboru tlenu aktywnoœæ tego enzymu by³a hamowana i jednoczeœnie obserwowano znaczny spadek szybkoœci biosyntezy glicyny [27].
10 542 M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA 6. PODSUMOWANIE Aminotransferaza alaninowa jest enzymem zaanga owanym w reakcje biochemiczne o podstawowym znaczeniu dla roœliny. Katalizuj¹c odwracaln¹ reakcjê transaminacji pomiêdzy L-glutaminianem a pirogronianem i odwrotn¹ miêdzy L-alanin¹ a 2-oksoglutaranem wi¹ e pierwotny metabolizm wêgla z syntez¹ ró nych aminokwasów. Badania ostatnich lat potwierdzaj¹, e szczególn¹ rolê odgrywa ona w tolerancji hypoksji przez roœliny, niezale nie czy obni ona dostêpnoœæ tlenu wywo³ana zosta³a przez zatopienie roœlin, np. przez powodzie, czy przez gwa³towne tajanie œniegu lub zaleganie skorupy œniegu [29]. Tworzenie L-alaniny z pirogronianu jest niezwykle wa ne dla regulacji poziomu pirogronianu w komórce, gdy reguluje aktywnoœæ alternatywnej oksydazy w mitochondriach [7], która obok szlaku fotooddychania odgrywa podstawow¹ rolê w tolerancji przez roœliny innych niekorzystnych czynników œrodowiska, takich jak: mróz, wysoka temperatura czy susza [10]. Przeprowadzone do tej pory badania nad charakterystyk¹ izoenzymów aminotransferazy alaninowej z ró nych roœlin pozwoli³y nie tylko na próbê okreœlenia znaczenia poszczególnych izoenzymów w funkcjonowaniu roœliny w ró nych warunkach œrodowiska, ale otwieraj¹ nowe perspektywy badawcze. Jak dot¹d bowiem brak jest w literaturze danych o roli tego enzymu w odpowiedzi roœlin na tak wa ne dla jej funkcjonowania warunki, jak: stres termiczny (ch³ód, mróz, przegrzanie) czy susza. Wiele tak e pozostaje do wyjaœnienia w kwestii jego udzia³u w odpowiedzi na atak patogenów i szkodników. LITERATURA [1] BERÁNEK M, DRŠATA J, PALIÈKA V. Inhibitory effect of glycation on catalytic activity of alanine aminotransferase. Mol Cell Biochem 2001; 218: [2] de SOUSA CAF, SODEK L. Alanine metabolism and alanine aminotransferase activity in soybean (Glycine max) during hypoxia of the root system and subsequent return to normoxia. Env Exp Bot 2003; 50: 1 8. [3] EL-SHINTINAWY F, EL-ANSARY A. Differential effect of Cd 2+ and Ni 2+ on amino acid metabolism in soybean seedlings. Biol Plant 2000; 43: [4] GIBONEY PT. Mildly elevated liver transaminase levels in the asymptomatic patient. Am Fam Physician 2005; 71(6): [5] GOOD AG, JOHNSON SJ, DePAUW M, CARROL RT, SAVIDOV N, VIDMAR J, LU Z, TAYLOR G, STROEHER V. Engennering nitrogen use efficiency with alanine aminotransferase. Can J Bot 2007; 85: [6] GOOD AG, MUENCH DG. Purification and characterization of an anaerobically induced alanine aminotransferase from barley roots. Plant Physiol 1992; 99: [7] GUPTA KJ, ZABALZA A, van DONGEN JT. Regulation of respiration when the oxygen availability changes. Physiol Plant 2009; 137: [8] IGARASHI D, MIWA T, SEKI M, KOBAYASHI M, KATO T, TABATA S, SHINOZAKI K, OHSUMI C. Identification of photorespiratory glutamate:glyoxylate aminotransferase (GGAT) gene in Arabidopsis. Plant J 2003; 33: [9] IGARASHI D. TSUCHIDA H, MIYAO M, OHSUMI C. Glutamate:glyoxylate aminotransferase modulates amino acid content during photorespiration. Plant Physiol 2006; 142: [10] JUSZCZUK IM, RYCHTER AM. Alternative oxidase in higher plants. Acta Biochim Polon 2003; 4(50):
11 AMINOTRANSFERAZA ALANINOWA W ROŒLINACH WY SZYCH 543 [11] KARSTEN WE, OSHIRO T, IZUMI Y, COOK P. Initial velocity, spectral and ph studies of the serine:glyoxylate aminotransferase from Hypomicrobium metylovorum. Arch Biochem Biophys 2001; 338(2): [12] KIM KJ, PARK CJ, AN JM, HAM BK, LEE BJ, PAEK KH. CaAlaAT1 catalyzes the alanine : 2- oxoglutarate aminotransferase reaction during the resistance response against Tobacco mosaic virus in hot pepper. Planta 2005; 221: [13] LIEPMAN AH, OLSEN LJ. Alanine aminotransferase homologs catalyse the glutamate:glyoxylate aminotransferase reaction in peroxisomes of Arabidopsis. Plant Physiol 2003; 131: [14] LIEPMAN AH, OLSEN LJ. Genomic analysis of aminotransferases in Arabidopsis thaliana. Crit Rev Plant Sci 2004; 23: [15] MATTHEWS CC, ZIELKE HR, PARKS DA, FISHMAN PS. Glutamate-pyruvate transaminase protects against glutamate toxicity in hippocampal slices. Brain Res : [16] MIYASHITA Y, DOLFERUS R, ISMIND KP, GOOD AG. Alanine aminotransferase catalyses the breakdown of alanine after hypoxia in Arabidopsis thaliana. Plant J 2007; 49: [17] MUENCH D, CHRISTOPHER ME, GOOD AG. Cloning and expression of a hypoxic and nitrogen inducible maize alanine aminotransferase gene. Physiol Plant 1998; 103: [18] MUENCH D, GOOD AG. Hypoxically inducible barley alanine aminotransferase : cdna cloning and expression analysis. Plant Mol Biol 1994; 24: [19] NATHWANI RA, PAIS S, REYNOLDS TB, KAPLOWITZ N. Serum alanine aminotransferase in skeletal muscle diseases. Hepatology 2005; 41: [20] NOGUCHI T. FUJIWARA S. Development of glutamate:glyoxylate aminotransferase in the cotyledons of cucumber (Cucumis sativus) seedlings. Biochem J 1982; 201: [21] ORZECHOWSKI S, SOCHA-HANC J, PASZKOWSKI A. Purification and properties of alanine aminotransferase from maize (Zea mays L.) leaves. Acta Physiol Plant 1999; 21: [22] OTTER T, PENTHER JM, MOHR H. Control of the appearance of alanine aminotransferase in the Scots pine (Pinus silvestris L.) seedling. Planta 1992; 188: [23] PASZKOWSKI A, NIEDZIELSKA A. Glutamate:glyoxylate aminotransferase from the seedlings of rye (Secale cereale L.). Acta Biochim Polon 1989; 36: [24] REGGIANI R, NEBULONI M, MATTANA M, BRAMBILLA I. Anaerobic accumulation of amino acids in rice roots: role of the glutamine synthetase/glutamate synthase cycle. Amino Acids 2000; 18(3): [25] REUMANN S. The structural properties of plant peroxisomes and their metabolic significance. Biol Chem 2000; 381: [26] RICOULT C, CLIQUET JB, LIAMMI AM. Stimulation of alanine aminotransferase (AlaAT) gene expression and alanine accumulation in embryo axis of the model legume Medicago truncatula contribute to anoxia stress tolerance. Physiol Plant 2005; 123: [27] RICOULT C, ECHEVERRIA LO, CLIQUET JB, LIAMMI AM. Characterisation of alanine aminotransferase (AlaAT) multigene family and hypoxic response in young seedlings of the model legume Medicago truncatula. J Exp Bot 2006; 57(12): [28] ROCHA M, SODEK L, LICAUSI F, HAMEED MW, DORNELAS MC, van DONGEN JT. Analysis of alanine aminotransferase in various organs of soybean (Glycine max) and in dependence of different nitrogen fertilisers during hypoxic stress. Amino Acids 2010; 39: [29] ROCHA M, LICAUSI F, ARAÚJO WL, NUNES-NESI A, SODEK L, FERNIE A, van DONGEN JT. Glycolysis and the tricarboxylic acid cycle are linked by alanine aminotransferase during hypoxia induced by waterlogging of Lotus japonicus. Plant Physiol 2010; 152: [30] SHRAWAT AK, CARROLL RT, DePAUW M, TAYLOR GJ, GOOD AG. Genetic engineering of improved nitrogen use efficiency in rice by the tissue-specific expression of alanine aminotransferase. Plant Biotech J 2008, 6: [31] SON D, SUGIYAMA T. Molecular cloning of an alanine aminotransferase from NAD-malic enzyme type C 4 plant Paniculum miliaceum. Plant Mol Biol 1992; 20: [32] SON D, JO J, SUGIYAMA T. Purification and characterization of alanine aminotransferase from Paniculum miliaceum leaves. Arch Biochem Biophys 1991; 289: [33] SON D, KOBE A, SUGIYAMA T. Nitrogen dependent regulation of the gene for alanine aminotransferase which is involved in the C 4 pathway of Paniculum miliaceum. Plant Cell Physiol 1992; 33(4):
12 544 M. E. KENDZIOREK, B. M. ZAGDAÑSKA [34] SUBBAIAH C, SACHS M. Molecular and cellular adaptations of maize to flooding stress. Ann Bot 2003; 90: [35] TRUSZKIEWICZ W, PASZKOWSKI A. Serine:glyoxylate aminotransferases from maize and wheat leaves: purification amd properties. Photosynth Res 2004; 87: [36] VERSLUES PE, KIM Y-S, ZHU J-K. Altered ABA, proline and hydrogen peroxide in an Arabidopsis glutamate:glyoxylate aminotransferase mutant. Plant Mol Biol 2007; 64: [37] WINGLER A, LEA PJ, QUICK WP, LEEGOOD RC. Photorespiration: metabolic pathways and their role in stress protection. Phil Trans R Soc Lond B 2000; 355: [38] WIŒNIEWSKI P, SZKLARCZYK J, MACI GA M, PASZKOWSKI A. L-Alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase isoenzymes from Arabidopsis thaliana leaves. Acta Physiol Plant 2006; 28(6): Redaktor prowadz¹cy Janusz Maszewski Otrzymano: r. Przyjêto: r. Barbara Zagdañska Katedra Biochemii, Wydzia³ Rolnictwa i Biologii, SGGW Nowoursynowska 159, Warszawa barbara_zagdanska@sggw.pl
Charakterystyka izoenzymów aminotransferazy asparaginianowej z siewek pszenicy zwyczajnej (Triticum aestivum L.)
Charakterystyka izoenzymów aminotransferazy asparaginianowej z siewek pszenicy zwyczajnej (Triticum aestivum L.) Marcin Maciąga & Andrzej Paszkowski Katedra Biochemii, Wydział Rolnictwa i Biologii, SGGW
Bardziej szczegółowoOznaczenie aktywności aminotransferazy alaninowej.
Oznaczenie aktywności aminotransferazy alaninowej. Zajęcia 3 godzinne w parach, zajęcia 4 godzinne indywidualnie. Cel ćwiczenia Ćwiczenie ma na celu zapoznanie się z metodą oznaczenia aktywności aminotransferazy
Bardziej szczegółowoSpis treści. 1. Wiadomości wstępne Skład chemiczny i funkcje komórki Przedmowa do wydania czternastego... 13
Przedmowa do wydania czternastego... 13 Częściej stosowane skróty... 15 1. Wiadomości wstępne... 19 1.1. Rys historyczny i pojęcia podstawowe... 19 1.2. Znaczenie biochemii w naukach rolniczych... 22 2.
Bardziej szczegółowoMetabolizm białek. Ogólny schemat metabolizmu bialek
Metabolizm białek Ogólny schemat metabolizmu bialek Trawienie białek i absorpcja aminokwasów w przewodzie pokarmowym w żołądku (niskie ph ~2, rola HCl)- hydratacja, homogenizacja, denaturacja białek i
Bardziej szczegółowoAminotransferazy. Dehydrogenaza glutaminianowa. Szczawiooctan. Argininobursztynian. Inne aminokwasy. asparaginian. fumaran. Arginina.
Inne aminokwasy Szczawiooctan Aminotransferazy asparaginian Cytrulina Argininobursztynian Cykl mocznikowy Arginina fumaran Ornityna Aminotransferazy -ketoglutaran karbamoilofosforan Mocznik kwas glutaminowy
Bardziej szczegółowoRAPORT ROCZNY/KOŃCOWY 1)
RAPORT ROCZNY/KOŃCOWY Załącznik nr 18 z realizacji projektu badawczego własnego habilitacyjnego promotorskiego 1. DANE OGÓLNE 1. Nazwa i adres jednostki naukowej*/ Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego
Bardziej szczegółowo3.2 Warunki meteorologiczne
Fundacja ARMAAG Raport 1999 3.2 Warunki meteorologiczne Pomiary podstawowych elementów meteorologicznych prowadzono we wszystkich stacjach lokalnych sieci ARMAAG, równolegle z pomiarami stê eñ substancji
Bardziej szczegółowoBliskie spotkania z biologią METABOLIZM. dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW. Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki
Bliskie spotkania z biologią METABOLIZM dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki Metabolizm całokształt przemian biochemicznych i towarzyszących
Bardziej szczegółowoWŁASNOŚCI SPEKTRALNE NUKLEOTYDÓW PIRYDYNOWYCH (NAD +, NADP + ) OZNACZANIE AKTYWNOŚCI TRANSAMINAZY ALANINOWEJ
WŁASNOŚCI SPEKTRALNE NUKLEOTYDÓW PIRYDYNOWYCH (NAD +, NADP + ) OZNACZANIE AKTYWNOŚCI TRANSAMINAZY ALANINOWEJ WSTĘP Nukleotydy pirydynowe (NAD +, NADP + ) pełnią funkcję koenzymów dehydrogenaz przenosząc
Bardziej szczegółowoTechniczne nauki М.М.Zheplinska, A.S.Bessarab Narodowy uniwersytet spożywczych technologii, Кijow STOSOWANIE PARY WODNEJ SKRAPLANIA KAWITACJI
Techniczne nauki М.М.Zheplinska, A.S.Bessarab Narodowy uniwersytet spożywczych technologii, Кijow STOSOWANIE PARY WODNEJ SKRAPLANIA KAWITACJI SKLAROWANEGO SOKU JABŁKOWEGO Skutecznym sposobem leczenia soku
Bardziej szczegółowoPrezentacja dotycząca sytuacji kobiet w regionie Kalabria (Włochy)
Prezentacja dotycząca sytuacji kobiet w regionie Kalabria (Włochy) Położone w głębi lądu obszary Kalabrii znacznie się wyludniają. Zjawisko to dotyczy całego regionu. Do lat 50. XX wieku przyrost naturalny
Bardziej szczegółowoDZIA 4. POWIETRZE I INNE GAZY
DZIA 4. POWIETRZE I INNE GAZY 1./4 Zapisz nazwy wa niejszych sk³adników powietrza, porz¹dkuj¹c je wed³ug ich malej¹cej zawartoœci w powietrzu:...... 2./4 Wymieñ trzy wa ne zastosowania tlenu: 3./4 Oblicz,
Bardziej szczegółowoBliskie spotkania z biologią. METABOLIZM część II. dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW
Bliskie spotkania z biologią METABOLIZM część II dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki METABOLIZM KATABOLIZM - rozkład związków chemicznych
Bardziej szczegółowoInterakcje między abiotycznymi i biotycznymi czynnikami stresowymi: od teorii do praktyki Elżbieta Kuźniak Joanna Chojak
Katedra Fizjologii i Biochemii Roślin Uniwersytetu Łódzkiego Interakcje między abiotycznymi i biotycznymi czynnikami stresowymi: od teorii do praktyki Elżbieta Kuźniak Joanna Chojak Plan wykładu Przykłady
Bardziej szczegółowoMechanizmy działania i regulacji enzymów
Mechanizmy działania i regulacji enzymów Enzymy: są katalizatorami, które zmieniają szybkość reakcji, same nie ulegając zmianie są wysoce specyficzne ich aktywność może być regulowana m.in. przez modyfikacje
Bardziej szczegółowoBiochemia Oddychanie wewnątrzkomórkowe
Państwowa Wyższa Szkoła Zawodowa w Krośnie Biochemia Oddychanie wewnątrzkomórkowe Dr n. biol. Henryk Różański Laboratorium Biologii Przemysłowej i Eksperymentalnej Oddychanie Glikoliza beztlenowy, wewnątrzkomórkowy
Bardziej szczegółowoSPIS TREŒCI Wstêp Podstawy bioenergetyki Uniwersalne zasady funkcjonowania szlaków metabolicznych Procesy metaboliczne dostarczaj¹ce energiê komórce
5 SPIS TREŒCI Wstêp 9 Podstawy bioenergetyki 11 Termodynamika reakcji biochemicznych 11 Reakcje metaboliczne a przemiany chemiczne 13 Energia aktywacji i katalizatory 15 Rola katalizatorów w przemianach
Bardziej szczegółowoSeminarium 1: 08. 10. 2015
Seminarium 1: 08. 10. 2015 Białka organizmu ok. 15 000 g białka osocza ok. 600 g (4%) Codzienna degradacja ok. 25 g białek osocza w lizosomach, niezależnie od wieku cząsteczki, ale zależnie od poprawności
Bardziej szczegółowoEfektywna strategia sprzedaży
Efektywna strategia sprzedaży F irmy wciąż poszukują metod budowania przewagi rynkowej. Jednym z kluczowych obszarów takiej przewagi jest efektywne zarządzanie siłami sprzedaży. Jak pokazują wyniki badania
Bardziej szczegółowoIntegracja metabolizmu
Integracja metabolizmu 1 Kluczowe związki w metabolizmie Glukozo- 6 -fosforan Pirogronian AcetyloCoA 2 Glukoza po wejściu do komórki ulega fosforylacji Metaboliczne przemiany glukozo- 6-fosforanu G-6-P
Bardziej szczegółowoStanowisko Rzecznika Finansowego i Prezesa Urzędu Ochrony Konkurencji i Konsumentów w sprawie interpretacji art. 49 ustawy o kredycie konsumenckim
Prezes Urzędu Ochrony Konkurencji i Konsumentów Warszawa, 16 maja 2016 r. Stanowisko Rzecznika Finansowego i Prezesa Urzędu Ochrony Konkurencji i Konsumentów w sprawie interpretacji art. 49 ustawy o kredycie
Bardziej szczegółowoAdres strony internetowej, na której Zamawiający udostępnia Specyfikację Istotnych Warunków Zamówienia: www.wup.pl/index.php?
1 z 6 2013-10-03 14:58 Adres strony internetowej, na której Zamawiający udostępnia Specyfikację Istotnych Warunków Zamówienia: www.wup.pl/index.php?id=221 Szczecin: Usługa zorganizowania szkolenia specjalistycznego
Bardziej szczegółowoLABORATORIUM TECHNOLOGII NAPRAW WERYFIKACJA TULEJI CYLINDROWYCH SILNIKA SPALINOWEGO
LABORATORIUM TECHNOLOGII NAPRAW WERYFIKACJA TULEJI CYLINDROWYCH SILNIKA SPALINOWEGO 2 1. Cel ćwiczenia : Dokonać pomiaru zuŝycia tulei cylindrowej (cylindra) W wyniku opanowania treści ćwiczenia student
Bardziej szczegółowoBEZPIECZE STWO PRACY Z LASERAMI
BEZPIECZE STWO PRACY Z LASERAMI Szkodliwe dzia anie promieniowania laserowego dotyczy oczu oraz skóry cz owieka, przy czym najbardziej zagro one s oczy. Ze wzgl du na kierunkowo wi zki zagro enie promieniowaniem
Bardziej szczegółowoKomunikat 16 z dnia 2015-05-07 dotyczący aktualnej sytuacji agrotechnicznej
Komunikat 16 z dnia 2015-05-07 dotyczący aktualnej sytuacji agrotechnicznej www.sad24.com Wszystkie poniższe informacje zostały przygotowane na podstawie obserwacji laboratoryjnych oraz lustracji wybranych
Bardziej szczegółowoPrzemiana materii i energii - Biologia.net.pl
Ogół przemian biochemicznych, które zachodzą w komórce składają się na jej metabolizm. Wyróżnia się dwa antagonistyczne procesy metabolizmu: anabolizm i katabolizm. Szlak metaboliczny w komórce, to szereg
Bardziej szczegółowoLEKCJA 3 STRES POURAZOWY
LEKCJA 3 STRES POURAZOWY Stres pourazowy definicje Stres pourazowy definiuje się jako zespół specyficznych symptomów, które mogą pojawić się po przeżyciu ekstremalnego, traumatycznego zdarzenia. Są to
Bardziej szczegółowoCreated by Neevia Document Converter trial version
TEST VII PRZEMIANA AMINOKWASÓW 1. Aminokwasy egzogenne (niezbędne) dla człowieka to: c) trzy d) cztery (+) (1, 2, 3, 5) e) pięć: 1 Leu 2 Met 3 Trp 4 Cys 5 Phe 6 Asp 2. Aminokwasami niezbędnymi dla człowieka
Bardziej szczegółowoDZIA 3. CZENIE SIÊ ATOMÓW
DZIA 3. CZENIE SIÊ ATOMÓW 1./3 Wyjaœnij, w jaki sposób powstaje: a) wi¹zanie jonowe b) wi¹zanie atomowe 2./3 Na podstawie po³o enia w uk³adzie okresowym pierwiastków: chloru i litu ustal, ile elektronów
Bardziej szczegółowoWersje zarówno przelotowe jak i k¹towe. Zabezpiecza przed przep³ywem czynnika do miejsc o najni szej temperaturze.
Zawory zwrotne, typu NRV i NRVH Wprowadzenie Zawory NRV i NRVH mog¹ byæ stosowane w instalacjach ch³odniczych i klimatyzacyjnych z fluorowcopochodnymi czynnikami ch³odniczymi na ruroci¹gach z zimnym, gor¹cym
Bardziej szczegółowoEgzamin gimnazjalny. Biologia. Także w wersji online TRENING PRZED EGZAMINEM. Sprawdź, czy zdasz!
Egzamin gimnazjalny 3 Biologia TRENING PRZED EGZAMINEM Także w wersji online Sprawdź, czy zdasz! Spis treści Zestaw 1: Związki chemiczne budujące organizmy oraz pozyskiwanie i wykorzystywanie energii 5
Bardziej szczegółowoWITAMINY. www.pandm.prv.pl
WITAMINY - wpływa na syntezę białek, lipidów, hormonów a szczególnie hormonów tarczycy - pomaga w utrzymaniu prawidłowej czynności uk.immunologicznego - pomaga w leczeniu : rozedmy płuc i nadczynności
Bardziej szczegółowoDr inż. Andrzej Tatarek. Siłownie cieplne
Dr inż. Andrzej Tatarek Siłownie cieplne 1 Wykład 3 Sposoby podwyższania sprawności elektrowni 2 Zwiększenie sprawności Metody zwiększenia sprawności elektrowni: 1. podnoszenie temperatury i ciśnienia
Bardziej szczegółowoOGŁOSZENIE. nr tel. (48) 261 815-030 nr fax (48) 261 815-093 adres internetowy: www.2rblog.wp.mil.pl ZAPRASZA ZADANIE NR 1
2 REGIONALNA BAZA LOGISTYCZNA 04-470 Warszawa, ul. Marsa 110 WP-9 Warszawa, 25.03.2016 r. OGŁOSZENIE ZAMAWIAJĄCY: 2 REGIONALNA BAZA LOGISTYCZNA ul. Marsa 110, 04-470 WARSZAWA nr tel. (48) 261 815-030 nr
Bardziej szczegółowoECO RAIN MATA NAWADNIAJ CA
ECO RAIN MATA NAWADNIAJ CA NAWADNIANIE TERENÓW ZIELONYCH Dlaczego warto nawadniaæ z mat¹ nawadniaj¹c¹ ECO Rain? Zagospodarowanie zieleni¹ wiêkszoœci torowisk jest stosunkowo podobne do umiejscowienia zielonego
Bardziej szczegółowoPRAWA ZACHOWANIA. Podstawowe terminy. Cia a tworz ce uk ad mechaniczny oddzia ywuj mi dzy sob i z cia ami nie nale cymi do uk adu za pomoc
PRAWA ZACHOWANIA Podstawowe terminy Cia a tworz ce uk ad mechaniczny oddzia ywuj mi dzy sob i z cia ami nie nale cymi do uk adu za pomoc a) si wewn trznych - si dzia aj cych na dane cia o ze strony innych
Bardziej szczegółowoSPIS TREŒCI WSTÊP 7 ZADANIA 9
SPIS TREŒCI WSTÊP 7 ZADANIA 9 1. WIRUSY, BAKTERIE, ROŒLINY I GRZYBY 9 1.1. WIRUSY 9 1.2. BAKTERIE 13 1.3. PROTISTY ROŒLINNE 23 1.4. ROŒLINY 34 ROŒLINY ZARODNIKOWE 34 TKANKI ROŒLINNE 42 ROŒLINY NASIENNE
Bardziej szczegółowo1 FILTR. Jak usun¹æ 5 zanieczyszczeñ za pomoc¹ jednego z³o a? PROBLEMÓW Z WOD ROZWI ZUJE. NOWATORSKIE uzdatnianie wody 5 w 1
Jak usun¹æ 5 zanieczyszczeñ za pomoc¹ jednego z³o a? 1 FILTR ROZWI ZUJE PROBLEMÓW Z WOD 1 TWARDOŒÆ 2 ELAZO 3 MANGAN 4 AMONIAK 5 ORGANIKA Zanieczyszczenia takie jak: twardoœæ, mangan, elazo, naturalne substancje
Bardziej szczegółowoDOPALACZE. - nowa kategoria substancji psychoaktywnych
DOPALACZE - nowa kategoria substancji psychoaktywnych CZYM SĄ DOPALACZE? Dopalacze stosowana w Polsce, potoczna nazwa różnego rodzaju produktów zawierających substancje psychoaktywne, które nie znajdują
Bardziej szczegółowoB) podział (aldolowy) na 2 triozy. 2) izomeryzacja do fruktozo-6-p (aldoza w ketozę, dla umoŝliwienia kolejnych przemian)
Glikoliza (Przegląd kluczowych struktur i reakcji) A) przygotowanie heksozy do podziału na dwie triozy: 1)fosforylacja glukozy (czyli przekształcenie w formę metabolicznie aktywną) 2) izomeryzacja do fruktozo-6-p
Bardziej szczegółowo4. OCENA JAKOŒCI POWIETRZA W AGLOMERACJI GDAÑSKIEJ
4. OCENA JAKOŒCI POWIETRZA 4.1. Ocena jakoœci powietrza w odniesieniu do norm dyspozycyjnych O jakoœci powietrza na danym obszarze decyduje œredni poziom stê eñ zanieczyszczeñ w okresie doby, sezonu, roku.
Bardziej szczegółowoROZPORZ DZENIE MINISTRA GOSPODARKI z dnia 11 sierpnia 2000 r. w sprawie przeprowadzania kontroli przez przedsiêbiorstwa energetyczne.
ROZPORZ DZENIE MINISTRA GOSPODARKI z dnia 11 sierpnia 2000 r. w sprawie przeprowadzania kontroli przez przedsiêbiorstwa energetyczne. (Dz. U. Nr 75, poz. 866, z dnia 15 wrzeœnia 2000 r.) Na podstawie art.
Bardziej szczegółowoRok studiów III DZIENNIK PRAKTYK ZAWODOWYCH
WYŻSZA SZKOŁA HUMANISTYCZNA im. Króla Stanisława Leszczyńskiego w Lesznie Wydział Nauk Społecznych ul. Królowej Jadwigi 10/ ul. Krótka 5, 64-100 Leszno tel. 065/ 529-47-77 Kierunek: PEDAGOGIKA I STOPIEŃ
Bardziej szczegółowoBIOTECHNOLOGIA I BIOLOGIA EKSPERYMENTALNA ROŚLIN
BIOTECHNOLOGIA I BIOLOGIA EKSPERYMENTALNA ROŚLIN Udział w międzynarodowych projektach badawczych: Rodzaj projektu: międzynarodowy, współfinansowany Nr grantu: 2904/FAO/IAEA/2013/0 Temat: Pakiet narzędzi
Bardziej szczegółowoZagro enia fizyczne. Zagro enia termiczne. wysoka temperatura ogieñ zimno
Zagro enia, przy których jest wymagane stosowanie œrodków ochrony indywidualnej (1) Zagro enia fizyczne Zagro enia fizyczne Zał. Nr 2 do rozporządzenia MPiPS z dnia 26 września 1997 r. w sprawie ogólnych
Bardziej szczegółowoSCENARIUSZ LEKCJI WYCHOWAWCZEJ: AGRESJA I STRES. JAK SOBIE RADZIĆ ZE STRESEM?
SCENARIUSZ LEKCJI WYCHOWAWCZEJ: AGRESJA I STRES. JAK SOBIE RADZIĆ ZE STRESEM? Cele: - rozpoznawanie oznak stresu, - rozwijanie umiejętności radzenia sobie ze stresem, - dostarczenie wiedzy na temat sposobów
Bardziej szczegółowoProgram zajęć z biochemii dla studentów kierunku weterynaria I roku studiów na Wydziale Lekarskim UJ CM w roku akademickim 2013/2014
Program zajęć z biochemii dla studentów kierunku weterynaria I roku studiów na Wydziale Lekarskim UJ CM w roku akademickim 2013/2014 S E M E S T R II Tydzień 1 24.02-28.02 2 03.03-07.03 3 10.03-14.03 Wykłady
Bardziej szczegółowoSatysfakcja pracowników 2006
Satysfakcja pracowników 2006 Raport z badania ilościowego Listopad 2006r. www.iibr.pl 1 Spis treści Cel i sposób realizacji badania...... 3 Podsumowanie wyników... 4 Wyniki badania... 7 1. Ogólny poziom
Bardziej szczegółowoPADY DIAMENTOWE POLOR
PADY DIAMENTOWE POLOR Pad czerwony gradacja 400 Pady diamentowe to doskona³e narzêdzie, które bez u ycia œrodków chemicznych, wyczyœci, usunie rysy i wypoleruje na wysoki po³ysk zniszczone powierzchnie
Bardziej szczegółowoUstawienie wózka w pojeździe komunikacji miejskiej - badania. Prawidłowe ustawienie
Ustawienie wózka w pojeździe komunikacji miejskiej - badania Przodem do kierunku jazdy? Bokiem? Tyłem? Jak ustawić wózek, aby w razie awaryjnego hamowania dziecko było jak najbardziej bezpieczne? Na te
Bardziej szczegółowoSPIS TREŒCI WSTÊP 7 ZASADY DOTYCZ CE ROZWI ZYWANIA ZADAÑ ZADANIA BUDOWA I FUNKCJONOWANIE KOMÓRKI 13
5 SPIS TREŒCI WSTÊP 7 ZASADY DOTYCZ CE ROZWI ZYWANIA ZADAÑ Z ZAKRESU PROWADZENIA OBSERWACJI I METODYKI DOŒWIADCZEÑ 8 ZADANIA 13 1. BUDOWA I FUNKCJONOWANIE KOMÓRKI 13 2. BUDOWA CHEMICZNA ORGANIZMÓW. METABOLIZM
Bardziej szczegółowoWykres 1. Płeć respondentów. Źródło: opracowanie własne. Wykres 2. Wiek respondentów.
Ogółem w szkoleniach wzięły udział 92 osoby, które wypełniły krótką ankietę mającą na celu poznanie ich opinii dotyczących formy szkolenia, osób prowadzących, a także przydatności przekazywanych informacji.
Bardziej szczegółowoGramatyka i słownictwo
WYMAGANIA PROGRAMOWE Z JĘZYKA ANGIELSKIEGO KL. 4 a/b SP4 Gramatyka i słownictwo uczeń potrafi poprawnie operować niedużą ilością struktur prostych (czasownik to be - w formie pełnej i skróconej, zaimki
Bardziej szczegółowoBliskie spotkania z biologią METABOLIZM. dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW. Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki
Bliskie spotkania z biologią METABOLIZM dr hab. Joanna Moraczewska, prof. UKW Instytut Biologii Eksperymetalnej, Zakład Biochemii i Biologii Komórki Metabolizm całokształt przemian biochemicznych i towarzyszących
Bardziej szczegółowoFORMULARZ POZWALAJĄCY NA WYKONYWANIE PRAWA GŁOSU PRZEZ PEŁNOMOCNIKA NA NADZWYCZAJNYM WALNYM ZGROMADZENIU CODEMEDIA S.A
FORMULARZ POZWALAJĄCY NA WYKONYWANIE PRAWA GŁOSU PRZEZ PEŁNOMOCNIKA NA NADZWYCZAJNYM WALNYM ZGROMADZENIU Z SIEDZIBĄ W WARSZAWIE ZWOŁANYM NA DZIEŃ 2 SIERPNIA 2013 ROKU Niniejszy formularz przygotowany został
Bardziej szczegółowoJacek Mrzyg³ód, Tomasz Rostkowski* Rozwi¹zania systemowe zarz¹dzania kapita³em ludzkim (zkl) w bran y energetycznej
Komunikaty 99 Jacek Mrzyg³ód, Tomasz Rostkowski* Rozwi¹zania systemowe zarz¹dzania kapita³em ludzkim (zkl) w bran y energetycznej Artyku³ przedstawi skrócony raport z wyników badania popularnoœci rozwi¹zañ
Bardziej szczegółowoKONKURS NA NAJLEPSZE LOGO
KONKURS NA NAJLEPSZE LOGO Stowarzyszenie Unia Nadwarciańska ogłasza konkurs na logo. Regulamin konkursu: I. POSTANOWIENIA WSTĘPNE 1. Regulamin określa: cele konkursu, warunki uczestnictwa w konkursie,
Bardziej szczegółowoUchwały podjęte przez Nadzwyczajne Walne Zgromadzenie Zakładów Lentex S.A. z dnia 11 lutego 2014 roku
Uchwały podjęte przez Nadzwyczajne Walne Zgromadzenie Zakładów Lentex S.A. z dnia 11 lutego 2014 roku Uchwała Nr 1 z dnia 11 lutego 2014 roku w sprawie wyboru przewodniczącego Nadzwyczajnego Walnego Zgromadzenia.
Bardziej szczegółowoNasz kochany drogi BIK Nasz kochany drogi BIK
https://www.obserwatorfinansowy.pl/tematyka/bankowosc/biuro-informacji-kredytowej-bik-koszty-za r Biznes Pulpit Debata Biuro Informacji Kredytowej jest jedyną w swoim rodzaju instytucją na polskim rynku
Bardziej szczegółowoAdres strony internetowej, na której Zamawiający udostępnia Specyfikację Istotnych Warunków Zamówienia: www.wup.pl
1 z 6 2015-06-09 10:55 Adres strony internetowej, na której Zamawiający udostępnia Specyfikację Istotnych Warunków Zamówienia: www.wup.pl Szczecin: Usługa szkolenia specjalistycznego pn. Obsługa trudnego
Bardziej szczegółowoart. 488 i n. ustawy z dnia 23 kwietnia 1964 r. Kodeks cywilny (Dz. U. Nr 16, poz. 93 ze zm.),
Istota umów wzajemnych Podstawa prawna: Księga trzecia. Zobowiązania. Dział III Wykonanie i skutki niewykonania zobowiązań z umów wzajemnych. art. 488 i n. ustawy z dnia 23 kwietnia 1964 r. Kodeks cywilny
Bardziej szczegółowoKompensacyjna funkcja internatu w procesie socjalizacji dzieci i m³odzie y upoœledzonych umys³owo
Kompensacyjna funkcja internatu w procesie socjalizacji dzieci i m³odzie y upoœledzonych umys³owo Ma³gorzata Czajkowska Kompensacyjna funkcja internatu w procesie socjalizacji dzieci i m³odzie y upoœledzonych
Bardziej szczegółowoLekcja 173, 174. Temat: Silniki indukcyjne i pierścieniowe.
Lekcja 173, 174 Temat: Silniki indukcyjne i pierścieniowe. Silnik elektryczny asynchroniczny jest maszyną elektryczną zmieniającą energię elektryczną w energię mechaniczną, w której wirnik obraca się z
Bardziej szczegółowoUSTAWA. z dnia 26 czerwca 1974 r. Kodeks pracy. 1) (tekst jednolity)
Dz.U.98.21.94 1998.09.01 zm. Dz.U.98.113.717 art. 5 1999.01.01 zm. Dz.U.98.106.668 art. 31 2000.01.01 zm. Dz.U.99.99.1152 art. 1 2000.04.06 zm. Dz.U.00.19.239 art. 2 2001.01.01 zm. Dz.U.00.43.489 art.
Bardziej szczegółowoDziennik Urzêdowy. przestrzennego wsi Damas³awek. 1) lokalizacjê tylko przedsiêwziêæ okreœlonych w niniejszej. nastêpuje:
16875 3406 UCHWA A Nr IX/49/07 RADY GMINY DAMAS AWEK w sprawie miejscowego planu zagospodarowania przestrzennego wsi Damas³awek Na podstawie art. 18 ust. 2 pkt 5 ustawy z dnia 8 marca 1990 r. o samorz¹dzie
Bardziej szczegółowoProfil metaboliczny róŝnych organów ciała
Profil metaboliczny róŝnych organów ciała Uwaga: tkanka tłuszczowa (adipose tissue) NIE wykorzystuje glicerolu do biosyntezy triacylogliceroli Endo-, para-, i autokrynna droga przekazu informacji biologicznej.
Bardziej szczegółowoCiepło systemowe na rynku energii w przyszłości skutki pakietu energetyczno-klimatycznego
Ciepło systemowe na rynku energii w przyszłości skutki pakietu energetyczno-klimatycznego Bogusław Regulski Wiceprezes Zarządu IGCP Sosnowiec 17 listopada 2009 Zawartość prezentacji 1. Implikacje pakietowe
Bardziej szczegółowoKRAJOWY REJESTR SĄDOWY. Stan na dzień 16.06.2016 godz. 13:12:00 Numer KRS: 0000382836
Strona 1 z 6 CENTRALNA INFORMACJA KRAJOWEGO REJESTRU SĄDOWEGO KRAJOWY REJESTR SĄDOWY Stan na dzień 16.06.2016 godz. 13:12:00 Numer KRS: 0000382836 Informacja odpowiadająca odpisowi aktualnemu Z REJESTRU
Bardziej szczegółowoPromocja i identyfikacja wizualna projektów współfinansowanych ze środków Europejskiego Funduszu Społecznego
Promocja i identyfikacja wizualna projektów współfinansowanych ze środków Europejskiego Funduszu Społecznego Białystok, 19 grudzień 2012 r. Seminarium współfinansowane ze środków Unii Europejskiej w ramach
Bardziej szczegółowoUCHWAŁA NR... RADY MIEJSKIEJ W SZCZUCINIE
Projekt z dnia 22 lutego 2016 r. Zatwierdzony przez... UCHWAŁA NR... RADY MIEJSKIEJ W SZCZUCINIE z dnia 18 lutego 2016 r. w sprawie przyjęcia programu opieki nad zwierzętami bezdomnymi oraz zapobiegania
Bardziej szczegółowoRolnik - Przedsiębiorca
Rolnik - Przedsiębiorca Pojawiły się nowe zasady podlegania ubezpieczeniom społecznym i wymiaru składek w Kasie Rolniczego Ubezpieczenia Społecznego (KRUS) dotyczące rolników prowadzących dodatkową działalność
Bardziej szczegółowoDE-WZP.261.11.2015.JJ.3 Warszawa, 2015-06-15
DE-WZP.261.11.2015.JJ.3 Warszawa, 2015-06-15 Wykonawcy ubiegający się o udzielenie zamówienia Dotyczy: postępowania prowadzonego w trybie przetargu nieograniczonego na Usługę druku książek, nr postępowania
Bardziej szczegółowotróżka Źródło: www.fotolia.pl
Ogród na tarasie Wiele bylin przeżywa właśnie pełnię swego rozkwitu, ale nie jest jeszcze za późno, aby dosadzić nowe efektowne rośliny i wzbogacić swój taras niezwykłymi aranżacjami. tróżka Źródło: www.fotolia.pl
Bardziej szczegółowoDANE MAKROEKONOMICZNE (TraderTeam.pl: Rafa Jaworski, Marek Matuszek) Lekcja IV
DANE MAKROEKONOMICZNE (TraderTeam.pl: Rafa Jaworski, Marek Matuszek) Lekcja IV Stopa procentowa Wszelkie prawa zastrze one. Kopiowanie i rozpowszechnianie ca ci lub fragmentu niniejszej publikacji w jakiejkolwiek
Bardziej szczegółowoINSTRUKCJA OBS UGI KARI WY CZNIK P YWAKOWY
INSTRUKCJA OBS UGI KARI WY CZNIK P YWAKOWY Wydanie paÿdziernik 2004 r PRZEDSIÊBIORSTWO AUTOMATYZACJI I POMIARÓW INTROL Sp. z o.o. ul. Koœciuszki 112, 40-519 Katowice tel. 032/ 78 90 000, fax 032/ 78 90
Bardziej szczegółowoOPTYMALNY POZIOM SPOŻYCIA BIAŁKA ZALECANY CZŁOWIEKOWI JANUSZ KELLER STUDIUM PODYPLOMOWE 2011
OPTYMALNY POZIOM SPOŻYCIA BIAŁKA ZALECANY CZŁOWIEKOWI JANUSZ KELLER STUDIUM PODYPLOMOWE 2011 DLACZEGO DOROSŁY CZŁOWIEK (O STAŁEJ MASIE BIAŁKOWEJ CIAŁA) MUSI SPOŻYWAĆ BIAŁKO? NIEUSTAJĄCA WYMIANA BIAŁEK
Bardziej szczegółowoUrząd Miasta Bielsko-Biała - um.bielsko.pl Wygenerowano: 2016-06-30/02:29:36. Wpływ promieni słonecznych na zdrowie człowieka
Wpływ promieni słonecznych na zdrowie człowieka Światło słoneczne jest niezbędne do trwania życia na Ziemi. Dostarcza energii do fotosyntezy roślinom co pomaga w wytwarzaniu tlenu niezbędnego do życia.
Bardziej szczegółowoPROTOKÓŁ. Kontrolę przeprowadzono w dniach : 24, 25, 31.05. 2005 roku oraz 10. 06. 2005 roku,
PROTOKÓŁ z kontroli w Warsztatach Terapii Zajęciowej Polskiego Stowarzyszenia na Rzecz Osób z Upośledzeniem Umysłowym Koło w Słupsku przeprowadzonej przez Głównego Specjalistę Wydziału Audytu i Kontroli
Bardziej szczegółowoOgólne Warunki Ubezpieczenia PTU ASSISTANCE I.
Ogólne Warunki Ubezpieczenia PTU ASSISTANCE I 1. 2. 3. 1. 1 Niniejsze Ogólne Warunki Ubezpieczenia PTU ASSISTANCE I, zwane dalej OWU, stosuje siê w umowach ubezpieczenia PTU ASSISTANCE I zawieranych przez
Bardziej szczegółowoProjekt MES. Wykonali: Lidia Orkowska Mateusz Wróbel Adam Wysocki WBMIZ, MIBM, IMe
Projekt MES Wykonali: Lidia Orkowska Mateusz Wróbel Adam Wysocki WBMIZ, MIBM, IMe 1. Ugięcie wieszaka pod wpływem przyłożonego obciążenia 1.1. Wstęp Analizie poddane zostało ugięcie wieszaka na ubrania
Bardziej szczegółowoProjekt współfinansowany przez Unię Europejską w ramach Europejskiego Funduszu Społecznego
Wyniki badań ankietowych przeprowadzonych przez Departament Pielęgniarek i Położnych wśród absolwentów studiów pomostowych, którzy zakończyli udział w projekcie systemowym pn. Kształcenie zawodowe pielęgniarek
Bardziej szczegółowoProjekty uchwał na Zwyczajne Walne Zgromadzenie Akcjonariuszy zwołane na dzień 10 maja 2016 r.
Projekty uchwał na Zwyczajne Walne Zgromadzenie Akcjonariuszy zwołane na dzień 10 maja 2016 r. Uchwała nr.. Zwyczajnego Walnego Zgromadzenia Akcjonariuszy OEX Spółka Akcyjna z siedzibą w Poznaniu z dnia
Bardziej szczegółowoLIMATHERM SENSOR Sp. z o.o.
INSTRUKCJA OBS UGI TERMOMETR CYFROWY TES-1312 LIMATHERM SENSOR Sp. z o.o. 34-600 Limanowa ul. Tarnowska 1 tel. (18) 337 60 59, 337 60 96, fax (18) 337 64 34 internet: www.limatherm.pl, e-mail: akp@limatherm.pl
Bardziej szczegółowoOGŁOSZENIE o zwołaniu Zwyczajnego Walnego Zgromadzenia Spółki. Wawel S.A. z siedzibą w Krakowie
OGŁOSZENIE o zwołaniu Zwyczajnego Walnego Zgromadzenia Spółki Wawel S.A. z siedzibą w Krakowie Zarząd Wawel Spółki Akcyjnej z siedzibą w Krakowie, przy ul. Władysława Warneńczyka 14, wpisanej do Rejestru
Bardziej szczegółowoAdres strony internetowej, na której Zamawiający udostępnia Specyfikację Istotnych Warunków Zamówienia: www.zsb.iq.pl
Adres strony internetowej, na której Zamawiający udostępnia Specyfikację Istotnych Warunków Zamówienia: www.zsb.iq.pl Braniewo: Pełnienie funkcji Koordynatora Projektu Priorytet: IX Rozwój wykształcenia
Bardziej szczegółowoINSTRUMEWNTY FINANSOWE umożliwiające pomoc rolnikom w usuwaniu skutków niekorzystnych zjawisk atmosferycznych
INSTRUMEWNTY FINANSOWE umożliwiające pomoc rolnikom w usuwaniu skutków niekorzystnych zjawisk atmosferycznych Aleksandra Szelągowska Ministerstwo Rolnictwa i Rozwoju Wsi Rozporządzenie Rady Ministrów z
Bardziej szczegółowoKWALIFIKACJA I WERYFIKACJA LECZENIA DOUSTNEGO STANÓW NADMIARU ŻELAZA W ORGANIZMIE
Opis świadczenia KWALIFIKACJA I WERYFIKACJA LECZENIA DOUSTNEGO STANÓW NADMIARU ŻELAZA W ORGANIZMIE 1. Charakterystyka świadczenia 1.1 nazwa świadczenia Kwalifikacja i weryfikacja leczenia doustnego stanów
Bardziej szczegółowoZagadnienia do egzaminu z biochemii (studia niestacjonarne)
Zagadnienia do egzaminu z biochemii (studia niestacjonarne) Aminokwasy, białka, cukry i ich metabolizm 1. Aminokwasy, wzór ogólny i charakterystyczne grupy. 2. Wiązanie peptydowe. 3. Białka, ich struktura.
Bardziej szczegółowoChoroby peroksysomalne
148 PRACE POGLĄDOWE / REVIEWS Choroby peroksysomalne Peroxisomal disorders Teresa Joanna Stradomska Pediatr Pol 2010; 85 (2): 148 155 2010 by Polskie Towarzystwo Pediatryczne Otrzymano/Received: 29.10.2009
Bardziej szczegółowoModu³ wyci¹gu powietrza
LabAirTec System dygestoriów LabAirTec Renggli pozwala zapewniæ podwy szony poziom bezpieczeñstwa oraz niezale noœæ, jednoczeœnie daj¹c wiêkszy komfort pracy. W wyniku wspó³pracy specjalistów od aerodynamiki
Bardziej szczegółowoTematy prac licencjackich w Zakładzie Fizjologii Zwierząt
Tematy prac licencjackich w Zakładzie Fizjologii Zwierząt Zegar biologiczny Ekspresja genów i białek zegara Rytmy komórkowe Rytmy fizjologiczne Rytmy behawioralne Lokalizacja neuroprzekźników w układzie
Bardziej szczegółowoSteelmate - System wspomagaj¹cy parkowanie z oœmioma czujnikami
Steelmate - System wspomagaj¹cy parkowanie z oœmioma czujnikami Cechy: Kolorowy i intuicyjny wyœwietlacz LCD Czujnik wysokiej jakoœci Inteligentne rozpoznawanie przeszkód Przedni i tylni system wykrywania
Bardziej szczegółowoReakcje zachodzące w komórkach
Reakcje zachodzące w komórkach W każdej sekundzie we wszystkich organizmach żywych zachodzi niezliczona ilość reakcji metabolicznych. Metabolizm (gr. metabole - przemiana) to przemiany materii i energii
Bardziej szczegółowoOd redakcji. Symbolem oznaczono zadania wykraczające poza zakres materiału omówionego w podręczniku Fizyka z plusem cz. 2.
Od redakcji Niniejszy zbiór zadań powstał z myślą o tych wszystkich, dla których rozwiązanie zadania z fizyki nie polega wyłącznie na mechanicznym przekształceniu wzorów i podstawieniu do nich danych.
Bardziej szczegółowoGŁÓWNY URZĄD STATYSTYCZNY Departament Rolnictwa i Gospodarki Żywnościowej
GŁÓWNY URZĄD STATYSTYCZNY Departament Rolnictwa i Gospodarki Żywnościowej Warszawa, 15.05.2009 r. Informacja sygnalna WYNIKI BADAŃ GUS POGŁOWIE TRZODY CHLEWNEJ WEDŁUG STANU W KOŃCU MARCA 2009 ROKU 1 W
Bardziej szczegółowoSystem centralnego ogrzewania
System centralnego ogrzewania Zadaniem systemu ogrzewania jest zapewnienie odpowiedniej temperatury powietrza wewnątrz pomieszczeń w okresie zimy. Ogrzewanie wodne Ciepło dostarczane jest do budynku (instalacji
Bardziej szczegółowoSterownik Silnika Krokowego GS 600
Sterownik Silnika Krokowego GS 600 Spis Treści 1. Informacje podstawowe... 3 2. Pierwsze uruchomienie... 5 2.1. Podłączenie zasilania... 5 2.2. Podłączenie silnika... 6 2.3. Złącza sterujące... 8 2.4.
Bardziej szczegółowoSergiusz Sawin Innovatika
Podsumowanie cyklu infoseminariów regionalnych: Siedlce, 16 lutego 2011 Płock, 18 lutego 2011 Ostrołęka, 21 lutego 2011 Ciechanów, 23 lutego 2011 Radom, 25 lutego 2011 Sergiusz Sawin Innovatika Projekt
Bardziej szczegółowoNajnowsze zmiany w prawie oświatowym. Zmiany w systemie oświaty
Najnowsze zmiany w prawie oświatowym Zmiany w systemie oświaty Najnowsze zmiany w prawie oświatowym Ustawa przedszkolna Ustawa przedszkolna W dniu 13 czerwca 2013 r. Sejm RP uchwalił ustawę o zmianie ustawy
Bardziej szczegółowoZA CZNIK C: FUNKCJE KLAWISZY I SPOSOBY WPROWADZANIA PARAMETRÓW
ZA CZNIKI ZA CZNIK C: FUNKCJE KLAWISZY I SPOSOBY WPROWADZANIA PARAMETRÓW Pola, do których wprowadzamy dane, mog¹ byæ: znakowe, numeryczne, typu daty oraz typu memo (pola tekstowe). Istniej¹ ró nice w wykorzystaniu
Bardziej szczegółowo