Zestaw do testu bocznego przepływu Synovasure PJI

Transkrypt

1 Zestaw do testu bocznego przepływu Synovasure PJI Test na obecność alfa-defensyn do identyfikacji zakażeń okołoprotezowych stawów Dystrybutor Aby uzyskać dodatkowe informacje o produkcie, odwiedź witrynę Przed użyciem produktu użytkownicy powinni dokładnie zapoznać się z niniejszą ulotką. Podczas przeprowadzania testu należy postępować ściśle według zaleceń. Niezastosowanie się do zaleceń może spowodować błędne wyniki testu. OGRANICZENIA Test ten nie został zatwierdzony do stosowania u pacjentów, którym nie wszczepiono kompletnej endoprotezy stawu. NAZWA I PRZEZNACZENIE Test bocznego przepływu Synovasure PJI to oznaczenie immunologiczne służące jako środek pomocniczy do wykrywania zakażeń okołoprotezowych stawów w mazi stawowej u pacjentów odczuwających ból i/lub pacjentów z zapaleniem we wszczepionej endoprotezie stawu. Test bocznego przepływu Synovasure PJI służy do oznaczania ludzkich alfa-defensyn 1-3 w mazi stawowej u osób, które przeszły operację wszczepienia kompletnej endoprotezy stawu. Alfa-defensyny to peptydy o aktywności przeciwbakteryjnej uwalniane przez aktywowane neutrofile w odpowiedzi na zakażenie. Wyniki testu bocznego przepływu Synovasure PJI są przeznaczone do stosowania w połączeniu z innymi wynikami klinicznymi i diagnostycznymi w celu ułatwienia rozpoznania zakażenia u pacjenta. Test bocznego przepływu Synovasure PJI ma na celu ustalenie, czy w mazi stawowej doszło do zakażenia. Nie służy do identyfikacji konkretnego typu zakażenia lub ustalenia źródła bądź nasilenia infekcji. Ma na celu podanie lekarzowi pozytywnego lub negatywnego wyniku na obecność alfa-defensyn 1-3 w mazi stawowej będących wynikiem zakażenia. ZASADA TESTU Test bocznego przepływu Synovasure PJI to oznaczenie immunologiczne do wykrywania obecności alfa-defensyn w mazi stawowej u pacjentów z możliwym zakażeniem okołoprotezowym stawów. W skład testu wchodzi kaseta jednorazowego użytku, fiolka z odmierzoną wstępnie ilością buforu rozcieńczającego, jednorazowa probówka Microsafe oraz pojemnik na próbkę. Każda kaseta zawiera pasek odczynnikowy ze wszystkimi koniecznymi do przeprowadzenia testu składnikami. Rozcieńczenie wykonuje się przez zebranie mazi stawowej w jednorazowej probówce Microsafe i dodanie próbki do wstępnie odmierzonego buforu rozcieńczającego. Następnie trzy (3) krople rozcieńczonej próbki są dodawane do kasety testowej w celu rozpoczęcia testu. Materiał komórkowy jest usuwany na pierwszej wkładce. Roztwór następnie migruje do wkładki buforującej i miesza się z koniugatem złota, który został znakowany przeciwciałami anty-defensyn. Mieszanina badana następnie migruje przez linię testu i linię kontrolną. Linia wyniku testu ( a D ) zostanie utworzona, jeśli poziom alfa-defensyn w próbce będzie większy niż stężenie odcięcia. Utworzenie linii kontrolnej ( C ) stanowi potwierdzenie, że roztwór właściwie przepłynął przez zestaw testowy. Wyniki można odczytać w ciągu dziesięciu (10) minut. OSTRZEŻENIA Test przeznaczony do diagnostyki in vitro Przed użyciem produktu należy dokładnie zapoznać się z niniejszą ulotką. Niezastosowanie się do podanych instrukcji może prowadzić do błędnych wyników. Zestaw ten został opracowany do stosowania wyłącznie z mazią stawową. Zastosowanie niniejszego zestawu testowego z preparatem innego rodzaju może prowadzić do błędnych wyników testu. Zastosowanie zmodyfikowanej mazi stawowej np. mazi przemytej roztworem soli fizjologicznej lub płynu pobranego natychmiast po wstrzyknięciu będzie miało wpływ na wykonanie testu. Test ten należy stosować wyłącznie u pacjentów z całkowitą protezą stawu. Test ten nie jest przeznaczony do stosowania w celu ustalenia ram czasowych reimplantacji w przypadku procedur dwuetapowych. Test ten należy wykonywać w temperaturze pokojowej (15 30 C); nie należy przeprowadzać badania w temperaturze innej niż podana. Zalecana temperatura przechowywania zestawu testowego to 2 30 C. Nie należy zamieniać zestawów testowych lub składników zestawów testowych innymi zestawami bądź składnikami zestawów o różnych numerach serii. Strona 1 z 5

2 ŚRODKI OSTROŻNOŚCI Środki bezpieczeństwa Z próbkami i materiałami należy obchodzić się tak jak z materiałami zdolnymi do przenoszenia czynników zakaźnych. W trakcie manipulowania próbkami i podczas testów należy używać jednorazowych rękawiczek. Po przeprowadzeniu każdego testu należy zmienić rękawiczki i umyć dokładnie ręce. Wszystkie próbki i materiały wykorzystywane do przeprowadzenia testu należy zutylizować zgodnie z zasadami usuwania odpadów zawierających czynniki zakaźne. Utylizacja wszystkich próbek i materiałów powinna być zgodna ze wszystkimi lokalnymi i krajowymi przepisami dotyczącymi utylizacji odpadów. Środki ostrożności podczas użytkowania zestawu testowego Wszystkie składniki zestawu testowego można wykorzystać tylko jeden raz, po czym należy je odpowiednio zutylizować. Nie wolno używać ponownie żadnego ze składników testu. Przed rozpoczęciem testu zawsze należy sprawdzić datę ważności. Nie należy używać zestawów testowych po upływie daty ważności podanej na opakowaniu. Należy sprawdzić składniki zestawu testowego pod kątem uszkodzeń. Jeśli którykolwiek ze składników został uszkodzony, należy wyrzucić zestaw i wybrać nowy zestaw testowy do badania. ODCZYNNIKI I MATERIAŁY DOSTARCZANE Zestaw do testu bocznego przepływu Synovasure PJI (5 pakietów) NR KAT Przechowywanie: od 2 do 30 C. Nie używać testu po upływie daty ważności podanej na etykiecie. Produkt jednorazowego użytku. Nie używać ponownie. Zestaw testowy (NR KAT. P50023) w ilości 5 sztuk (zawiera powleczoną membranę z linią testową anty-alfa-defensyn i linią kontrolną przeciwciała anty-mysiego, powlekaną cząstkami złota wkładkę anty-alfa-defensyn, wkładkę buforującą oraz wkładkę do usuwania materiału komórkowego; całość umieszczono w ochronnej obudowie z tworzywa sztucznego zamkniętej w torebce z osuszaczem) Zestaw do przygotowania próbki (NR KAT. P50024) w ilości 5 sztuk (zamknięta torebka zawierająca wstępnie napełniony bufor fosforanowy, kroplomierz (NR KAT. P50025), jednorazową probówkę Microsafe (probówka zapasowa), pojemnik na próbkę Instrukcja użytkowania MATERIAŁY NIEDOSTARCZANE Z ZESTAWEM Minutnik MATERIAŁY DODATKOWE Zestaw kontroli do testu bocznego przepływu Synovasure (2 pakiety) NR KAT Dostępny jako wyposażenie zestawu do testu bocznego przepływu Synovasure PROCEDURA WYKONANIA TESTU BOCZNEGO PRZEPŁYWU SYNOVASURE PJI 1. Rozcieńczenie: Otworzyć zestaw do przygotowania próbki. Usunąć fioletowy korek z kroplomierza i go odstawić. Skorzystać z próbówki Microsafe, aby uzyskać maź stawową do rozcieńczenia. Trzymając probówkę Microsafe poziomo dotknąć końcówką probówki Microsafe próbki mazi stawowej. Przepływ kapilarny automatycznie podciągnie próbkę do linii poziomu wypełnienia i ją zatrzyma. UWAGA: Nie należy zakrywać wylotu lub ściskać probówki podczas pobierania próbki. Przed przejściem do kolejnych czynności należy odczekać do momentu, w którym próbka dotrze do linii poziomu wypełnienia. Jeśli nie można uzyskać mazi stawowej z pojemnika zawierającego płyn, wówczas należy przenieść małą ilość płynu do dostarczonego pojemnika na próbkę. Zebranie próbek mazi stawowej o wysokiej lepkości może potrwać dłużej. Po zebraniu mazi stawowej należy umieścić płyn w napełnionym kroplomierzu. Przepłukać probówkę Microsafe w napełnionym kroplomierzu, ściskając zbiorniczek na końcu probówki Microsafe pięć (5) razy, aby usunąć lepką maź stawową. Nałożyć ponownie korek i wymieszać zawartość przez delikatne odwracanie. 2. Wyjąć zestaw testowy z torebki foliowej tuż przed użyciem. Z testu można korzystać tylko wtedy, gdy torebka foliowa jest nienaruszona. Strona 2 z 5

3 3. Umieścić zestaw testowy na płaskiej powierzchni. Usunąć przeźroczysty korek z kroplomierza i odmierzyć trzy (3) wolno spadające krople rozcieńczonej próbki mazi stawowej do studzienki na próbki zestawu testowego. Aby uzyskać najlepsze wyniki, przytrzymać kroplomierz w pozycji pionowej podczas dozowania próbki płynu do zestawu testowego. Zestaw testowy musi leżeć płasko podczas przetwarzania. 4. Odczekać w spokoju dziesięć (10) minut i interpretować wyniki badań zgodnie z opisem w części Interpretacja wyników testu. Nie odczytywać wyniku po dwudziestu (20) minutach. Na jasnym tle okienka testowego pojawia się czerwono-różowa linia kontrolna. Linia kontrolna [C] to najwyżej położona linia w kanale testu. PROCEDURA WYKONANIA KONTROLI TESTU BOCZNEGO PRZEPŁYWU SYNOVASURE 1. Przygotować kontrole zgodnie z instrukcją użytkowania dostarczoną wraz z zestawem kontroli do testu bocznego przepływu Synovasure. 2. Przeanalizować kontrole jak próbki kliniczne zgodnie z powyższą instrukcją dostarczoną wraz z zestawem do testu bocznego przepływu Synovasure PJI. WEWNĘTRZNA KONTROLA JAKOŚCI: Proceduralna linia kontrolna ( C ) jest wbudowana w każdy zestaw testowy wskazując, że płyn właściwie płynie przez pasek testu. INTERPRETACJA WYNIKÓW Uwaga: Alfa-defensyny są reprezentowane przez linię a-d na kasecie. Intensywność zabarwienia linii kontrolnych i linii testowych (wyników testu) zestawu testowego może być różna. Każda linia czerwono-różowa, bez względu na intensywność lub rozmiar, to linia. Nie należy interpretować testu po dwudziestu (20) minutach. : Przed odczytaniem wyniku linii testowej należy sprawdzić, czy linia kontrolna zestawu testowego, oznaczona jako C, została utworzona. Jeżeli linia kontrolna nie zostanie utworzona w zestawie testowym, wówczas test jest nieważny, a wyników testu nie można używać. Test należy powtórzyć używając nowego zestawu testowego. Ujemny: Wynik UJEMNY w odniesieniu do alfa-defensyn to obecność czerwono-różowej linii kontrolnej w zestawie testowym i brak wyniku linii testowej a-d po dziesięciu (10) minutach. Dodatni (Nieujemny): Wynik DODATNI w odniesieniu do alfa-defensyn to obecność czerwono-różowej linii kontrolnej w zestawie testowym oraz wyniku linii testowej a-d. Przykłady wyników Test nieważny - Ujemny + Dodatni Strona 3 z 5

4 CHARAKTERYSTYKA WYDAJNOŚCI TESTU NA OBECNOŚĆ ALFA-DEFENSYN Kliniczną wydajność biomarkera alfa-defensyn do diagnozy zakażeń okołoprotezowych stawów określono wykorzystując test ELISA do wykrywania alfa-defensyn w badaniu 158 pacjentów stosując następujące kryteria włączenia: (1) Całkowita alloplastyka stawu biodrowego lub kolanowego/endoprotezy tymczasowe (spacery); diagnoza: alloplastyka rewizyjna stawu kolanowego. (2) Wystarczające informacje kliniczne do stosowania kryteriów MSIS (ang. Musculoskeletal Infection Society) odnośnie diagnozowania zakażenia okołoprotezowego stawów. (3) Wystarczająca ilość mazi stawowej dla metod badawczych. Pacjenci przyjmujący antybiotyki przed aspiracjami, pacjenci z rozpoznaniem systemowego stanu zapalnego oraz pacjenci z zakażeniem w miejscach oddalonych od stawów zostali uwzględnieni w niniejszym badaniu. Alfa-defensyny prawidłowo rozpoznały 152 przypadki alloplastyk na 158 z ogólną specyficznością na poziomie 95,8% (95% przedział ufności: 90,5 98,6%) i czułością 97.4% (95% przedział ufności: %). Ponadto, alfa-defensyny prawidłowo zidentyfikowały infekcje z ujemnym wynikiem hodowli, co stanowiło w przybliżeniu 36% pacjentów z zakażeniem okołoprotezowym stawów w tym badaniu. CHARAKTERYSTYKA WYDAJNOŚCI METODYKI BOCZNEGO PRZEPŁYWU Wydajność metodyki bocznego przepływu oceniano w stosunku do testu laboratoryjnego. W przypadku wyników dodatnich uzyskano zgodność rzędu 100% (59/59), a w przypadku wyników ujemnych 95,6% (175/183). Precyzja W celu wyznaczenia precyzji oznaczenia badano pule wyników (4 pule; niskie ujemne, wysokie ujemne, niskie dodatnie i wysokie dodatnie) dwukrotnie 2 razy/dobę przez 5 dni. Procent (%) wyników poprawnych wyniósł odpowiednio 100, 97,5, 95 i 100. Substancje przeszkadzające Wpływ stężenia hemoglobiny, trójglicerydów i bilirubiny (sprzężonej i niesprzężonej) badano w próbkach niezawierających i zawierających alfa-defensyny 1-3 zgodnie z procedurami opisanymi w protokole CLSI EP7-A2. 3 Dla każdej substancji, najwyższe stężenie, które nie ma wpływu na kliniczną interpretację wyników wynosi odpowiednio: dla hemoglobiny 0,5 g/dl; trójglicerydów 600 mg/dl; bilirubiny sprzężonej 5 mg/dl i bilirubiny niesprzężonej 15 mg/dl. Aby uzyskać dodatkowe informacje o produkcie, odwiedź witrynę Strona 4 z 5

5 PIŚMIENNICTWO 1. Deirmengian C, Kardos K, Kilmartin P, Cameron A, Schiller K, Parvizi J. Diagnosing Periprosthetic Joint Infection: Has the Era of the Biomarker Arrived? Clin Orthop Relat Res Mar 4. [Epub ahead of print] 2. Parvizi, J., Zmistowski, B., Della Valle, C., Bauer, T. W., Malizos, K. N., Alavi, A., Bedair, H., et al. (2013). Diagnosis of Periprosthetic Joint Infection. The Journal of arthroplasty p CLSI. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline Second Edition. CLSI document EP7-A2 (ISBN ). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania USA, OBJAŚNIENIE SYMBOLI CD Diagnostics, Inc. 650 Naamans Road Suite 100 Claymont, DE USA Obelis S.A. Bd Général Wahis Brussels, Belgia Strona 5 z 5