P odowa aktywina A w porodzie powik anym obecnoêcià smó ki w p ynie owodniowym

P odowa aktywina A w porodzie powik anym obecnoêcià smó ki w p ynie owodniowym Fetal avtivin A in labor complicated by meconium-stained amniotic fluid Redêko S awomir 1, PrzepieÊç Jerzy 1, elazowska Beata 2, ak Janusz 2, Wysocka Jolanta 2, Urban Jan 1 1 Klinika Perinatologii Akademii Medycznej w Bia ymstoku 2 Zak ad Laboratoryjnej Diagnostyki Pediatrycznej Akademii Medycznej w Bia ymstoku Streszczenie W cià y podstawowym êród em krà àcej aktywiny sà: o ysko oraz b ony p odowe. Wzrost st enia aktywiny w surowicy krwi matki obserwowano w przypadkach cià powik anych stanem przedrzucawkowym, cukrzycà bàdê wewnàtrzmacicznym zahamowaniem wzrostu p odu. ObecnoÊç smó ki nara a noworodka na zwi kszone ryzyko powik aƒ oddechowych, np. zespo u aspiracji smó ki czy uszkodzenia OUN. Cel pracy: Celem pracy by a ocena st enia aktywiny A w przypadku obecnoêci smó ki w p ynie owodniowym. Materia i metody: Badanà grup stanowi o 65 noworodków, urodzonych z cià y pojedynczej, donoszonej. W ka dym przypadku przeprowadzono oznaczenia parametrów hematologicznych krwi p powinowej oraz aktywiny A (ELISA - Oxford Bio-Innovation Activin A Assay Kit). Wyniki: W 27 porodach obserwowano obecnoêç smó ki w p ynie owodniowym. Nie stwierdzono istotnych ró nic w st eniach p odowej aktywiny A w grupie z czystym oraz zielonym p ynem owodniowym (0,6±0,42 i 0,47±0,32ng/ml). Zaobserwowano wy szà liczb leukocytów, jàdrzastych erytrocytów oraz wy szy odsetek retikulocytów w przypadku pasa u smó ki do p ynu owodniowego. Ârednie st enie aktywiny A p odów urodzonych drogà pochwowà wynosi o 0,58±0,38ng/ml, drogà ci cia cesarskiego w trakcie porodu 0,44±0,32ng/ml, zaê drogà elektywnego ci cia cesarskiego 0,62±0,47ng/ml. Ró nice nie by y istotne statystycznie. Nie obserwowano równie istotnych zale noêci pomi dzy st eniami aktywiny A a parametrami równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej, a tak e elementami morfotycznymi krwi p powinowej. Wnioski: P odowa aktywina A ma ograniczone znaczenie w diagnostyce ewentualnego niedotlenienia p odu w przypadku pasa u smó ki do p ynu owodniowego. Parametry równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej nie majà istotnego zwiàzku ze st eniem p odowej aktywiny A. St enie p odowej aktywiny nie zmienia si w zale noêci od drogi porodu. ObecnoÊç smó ki w p ynie owodniowym wià e si z istotnymi zmianami w obrazie obwodowej krwi p powinowej. S owa kluczowe: niedotlenienie p odu diagnostyka / niedotlenienie p odu krew / / aktywnina A krew / Adres do korespondencji: S awomir Redêko Klinika Perinatologii AM w Bia ymstoku 15-276 Bia ystok, ul. M.C.Sk odowskiej 24 a e-mail: redzkosl@amb.edu.pl Otrzymano: 27.01.2007 Zaakceptowano do druku: 30.05.2007 621

Ginekol Pol. 2007, 78, 621-625 Redêko S awomir et al. Abstract Objective: During pregnancy the placenta and the fetal membranes are the main sources of activin A. An increased level of activin A has been found in the serum of women with preeclampsia, diabetes mellitus and intrauterine growth restriction. Meconium is the predictor for adverse perinatal outcome, such as meconium aspiration syndrome or brain damage. The aim of our study was to evaluate the levels of fetal activin A in labors complicated by meconium-stained amniotic fluid. Material and methods: Cord blood samples were collected from 65 full-term neonates from single pregnancies. In each case, the hematological parameters of cord blood and activin A (ELISA Oxford Bio-Innovation Activin A Assay Kit) were assessed. Results: There were no significant differences in the concentration of activin A in cord blood between the group with and the group without meconium-stained amniotic fluid. The mean count of nucleated erythrocytes and white blood cells as well as the percentage of reticulocytes was significantly higher in the meconium group. There were no significant differences between concentration of fetal activin A in a vaginal delivery (0,58±0,38ng/ml) and cesarean section after labor (0,44 ±0,32ng/ml) or elective cesarean section (0,62±0,47ng/ml) groups. There were also no correlatio between the levels of activin A and the parameters of fetal acid base status or cord blood hematological values. Conclusio: Fetal activin A has a limited significance for diagnosing fetal hypoxia in labors complicated by meconium-stained amniotic fluid. There were no correlatio between the parameters of fetal acid base status and fetal activin A. The levels of fetal activin A do not depend on the mode of the delivery. Meconium-stained amniotic fluid resulted in significant changes of the hematological variables in cord blood. Key words: activi blood / fetal hypoxia metabolism / infant premature blood / / obstetric labor complicatio blood / biological markers blood / Wst p Aktywiny, proteinowe dimery, nale à do du ej grupy czynników wzrostu i odpowiadajà m.in. za wzrost i ró nicowanie komórek, wczesny rozwój zarodkowy, jak równie za erytropoez [1]. Po raz pierwszy zosta y wyizolowane w latach 80-tych XX wieku z p ynu p cherzykowego [2]. W cià y podstawowym êród em krà àcej aktywiny sà: o- ysko i b ony p odowe [3]. W miar zaawaowania cià y, wraz z rozwojem o yska, wzrasta st enie aktywiny A, zaê wczeêniejszy nadmierny wzrost uwa any by za bardzo charakterystyczny endokrynologiczny marker wystàpienia stanu przedrzucawkowego [4], jednak e kolejne doniesienia nie potwierdzi y ju takiej zale noêci [5, 6]. Pasa smó ki do p ynu owodniowego jest obserwowany w 7% do 22% cià, g ównie donoszonych, a zw aszcza po terminie porodu [7]. Klasyczne traktuje oddanie smó ki jako typowy objaw niedotlenienia p odu, chocia przyczyny oddania smó ki przez p ód nie sà do koƒca poznane. Wykazano, i pasa smó ki do p ynu owodniowego jest niezale nym czynnikiem ryzyka nieprawid owego wyniku oko oporodowego dotyczàcego, zarówno matki jak i noworodka. ObecnoÊç smó ki nara a noworodka na zwi kszone ryzyko powik aƒ oddechowych, przede wszystkim zespo u aspiracji smó ki oraz uszkodzenia oêrodkowego uk adu nerwowego [8, 9]. Zaobserwowano wzajemne relacje mi dzy st eniami aktywiny A a ph krwi w t tnicy p powinowej oraz liczbà jàdrzastych erytrocytów [10], jednak nowsze doniesienia nie wskazujà na takie zale noêci [11]. Bioràc pod uwag to, i zarówno obecnoêç smó ki w p ynie owodniowym jak równie podwy szone st enie aktywiny A mogà byç niezale nymi wyk adnikami ewentualnego wewnàtrzmacicznego niedotlenienia p odu celem pracy by a ocena st enia aktywiny A, zachowania si parametrów hematologicznych krwi p powinowej oraz parametrów równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej w przypadku braku bàdê obecnoêci smó ki w p ynie owodniowym. Materia i metody Badanà grup stanowi o 65 noworodków, urodzonych z cià y pojedynczej, donoszonej. Szczegó owe dane przedstawiono w tabeli I. Tabela I. Charakterystyka badanej grupy. Zmienna (n=65) Wiek matki (lata) Wiek cià owy (tygodnie) Masa urodzeniowa (g) Ârednia 28,4 40,3 3413,5 SD 6,1 1,3 661 Minimum 17 38 1600 Maksimum 42 42 5300 W ka dym przypadku w trakcie porodu pobierano krew p powinowà i wykonywano badania morfologii obwodowej krwi p powinowej z wykorzystaniem analizatora hematologicznego (Culter-MAXM) oraz metodà mikroskopowà. Rozmazy krwi pe nej p powinowej (ka dej próbki po 2 preparaty) by y barwione metodà May a, Grunwalda, Giemsy (MGG), nast pnie by y oceniane w mikroskopie Êwietlnym, liczàc po 200 komórek w dwóch preparatach, w sumie do 400 komórek z jednej próbki krwi. Dokonano nast pujàcych oznaczeƒ: liczby krwinek bia- ych WBC, liczby krwinek czerwonych RBC, st enia hemoglobiny HGB, hematokrytu HCT, Êredniej obj toêci krwinki czerwonej MCV, Êredniej masy hemoglobiny w krwince czerwonej MCH, Êredniego st enia hemoglobiny w krwince czerwonej MCHC, rozpi toêci rozk adu obj toêci krwinki czerwonej (miara zró nicowania wielkoêci erytrocytów) RDW, liczby p ytek krwi PLT, Êredniej obj toêci p ytki krwi MPV, p ytkokrytu PCT, rozpi toêci rozk adu obj toêci p ytki krwi (miara zró nicowania wielkoêci p ytek krwi) PDW oraz liczby jàdrzastych erytrocytów (NRBC). 622 Nr 8 /2007

P odowa aktywina A w porodzie powik anym obecnoêcià smó ki... Liczba erytroblastów podawana by a w stosunku do 100 leukocytów, w ka dym przypadku stwierdzenia jàdrzastych erytrocytów liczba leukocytów by a korygowana wed ug odpowiedniego wzoru. Oznaczano bezwzgl dnà liczb retikulocytów (RETC), odsetek retikulocytów (% RETC), frakcj m odych retikulocytów (HFR high fluorescence reticulocyte), frakcj Êrednio dojrza ych retikulocytów (MFR medium reticulocyte fraction), frakcj dojrza ych retikulocytów (LFR low reticulocyte fraction), frakcj niedojrza ych retikulocytów (IRF immature reticulocyte fraction) stosunek frakcji HFR wraz z MFR do frakcji wszystkich retikulocytów. Bezwzgl dnà liczb retikulocytów obliczano ze wzoru odsetek retikulocytów (%) x iloêç erytrocytów (w mln/ml) x 10. Oznaczenia retikulocytów i ich frakcji wykonywano z wykorzystaniem metodyki barwienia oran em tiazolowym. Uzyskane po odwirowaniu (2000 x g przez 10min w temp. 20-25 C) próbki surowicy krwi p powinowej przechowywane by- y w temp. -70 C, do chwili wykonania oznaczeƒ. Aktywina A by a oznaczana metodà ELISA (Oxford Bio-Innovation Activin A Assay Kit). Do analizy statystycznej wykorzystano elementy statystyki opisowej, analiz wariancji oraz test Mann a-whitney a, za poziom istotnoêci uznano p. Na wykonanie pracy uzyskano zgod Komisji Bioetycznej Akademii Medycznej w Bia ymstoku. Wyniki ObecnoÊç smó ki w p ynie owodniowym obserwowano w 27 porodach. Nie stwierdzono istotnych ró nic w st eniu p odowej aktywiny A w grupie z czystym oraz zielonym p ynem owodniowym (odpowiednio 0,6±0,42 i 0,47±0,32ng/ml). SpoÊród wszystkich analizowanych parametrów hematologicznych krwi p powinowej stwierdziliêmy jedynie wy szà liczb leukocytów, jàdrzastych erytrocytów oraz wy szy odsetek retikulocytów w przypadku pasa u smó ki do p ynu owodniowego. Dane przedstawia tabela II. Drogà pochwowà odby o si 37 (56,9%) porodów, zaê drogà ci cia cesarskiego 28 (43,1%). Zabiegi elektywne wykonano w 17 (26,2%) przypadkach. Ârednie st enie aktywiny A p odów urodzonych drogà pochwowà wynosi o 0,58±0,38ng/ml, drogà ci cia cesarskiego w trakcie porodu 0,44±0,32ng/ml, zaê drogà elektywnego ci cia cesarskiego 0,62±0,47ng/ml. Mimo ni szych wartoêci aktywiny A w surowicy krwi p odów urodzonych drogà ci cia cesarskiego w trakcie porodu obserwowane ró nice nie by y istotne statystycznie. Nie stwierdzono równie istotnych zale noêci pomi dzy st eniami aktywiny Aaparametrami równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej, liczbà jàdrzastych erytrocytów, a tak e pozosta ymi elementami morfotycznymi krwi p powinowej (p>0,05). Dyskusja ObecnoÊç smó ki jest uznawana za potencjalny wyk adnik niedotlenienia p odu. W naszych badaniach nie obserwowali- Êmy jednak istotnych ró nic w st eniach aktywiny A w przypadku czystego bàdê zielonego p ynu owodniowego. W eksperymentalnych modelach zwierz cych przewlek e niedotlenienie spowodowane zamkni ciem jednej z t tnic p powinowych Tabela II. St enie p odowej aktywiny A oraz wartoêci parametrów hematologicznych krwi p powinowej w przypadku braku lub obecnoêci smó ki w p ynie owodniowym. Zmienne Aktywina A (ng/ml) WBC (10 9 /l) NRBC (/100 WBC) % RETC HGB (g/dl) HT (%) MCV (fl) MCH (pg) MCHC (g/dl) RDW (%) PLT (10 9 /l) PCT (%) MPV (fl) PDW (fl) Liczba retikulocytów (10 9 /l) HFR (%) MFR (%) LFR (%) IFR (%) Czysty p yn owodniowy (n=38) M±SD 0,6±0,42 12,9±3,7 7,01±6,2 6,1±1,1 16,0±1,5 46,9±5,2 109,6±4,3 37,2±1,9 34,0±1,2 16,9±1,8 261±59 0,19±0,03 7,3±0,7 16,3±0,6 251±54 11,95,1 20,6±5,4 67,5±8,9 32,5±8,9 Zielony p yn owodniowy (n=27) M±SD 0,47±0,32 15,6±5,2 11,1±7,1 7,1±7,7 15,6±1,8 46,9±5,5 111,5±4,4 37,2±1,8 33,5±1,1 17,2±1,9 275±58 0,20±0,03 7,2±0,5 16,1±0,3 239±55 11,4±6,0 21,6±6,3 67±10,3 33±10,3 prowadzi o do zahamowania wzrastania p odu oraz powodowa o jednoczeênie wzrost st enia p odowej i matczynej aktywiny A [12]. Z kolei Jenkin i wsp. wykazali, i wzrost aktywiny A oraz prostaglandyny E2 spowodowany hipoksemià mo- e byç mechanizmem regulujàcym p odowo- o yskowy przep yw krwi w odpowiedzi na niedotlenienie wewnàtrzmaciczne [13]. U noworodków urodzonych przedwczeênie z cechami hipoksji obserwowano istotnie wy sze st enia aktywiny A [10]. Trudno jednoznacznie oceniç skal ewentualnego niedotlenienia p odu w naszej badanej grupie, poniewa Êródporodowà kwasic p odu (ph<7,16 oznaczane w t tnicy p powinowej) stwierdziliêmy jedynie w 3 porodach, wszystkie w grupie z zielonym zabarwieniem p ynu owodniowego. Byç mo e ten brak ró nicy w st eniu aktywiny wynika z doêç niskiego odsetka (4,6%) p odów urodzonych z kwasicà w grupie porodów powik anych obecnoêcià smó ki. Taki rezultat badania mo e równie oznaczaç, i zjawiska które sà zwiàzane z pasa em smó ki do p ynu owodniowego nie powodujà istotnego wzrostu st - enia aktywiny w surowicy krwi p odu. Przedstawione wy ej wyniki badaƒ innych autorów zak adajà raczej trwa e, przewlek e niedotlenienie p odu spowodowane bardzo ró norodnymi czynnikami, zaê obecnoêç smó ki w p ynie owodniowym mo e byç wynikiem ostrego, krótkotrwa ego, ale przejêciowego niedotlenienia wewnàtrzmacicznego, które mo e nie dawaç zak adanego wzrostu wyzwalania aktywiny A [12, 14]. Ponadto nale y zauwa yç, i badania obj y grup noworodków donoszonych, u których w zasadzie jedynym powik aniem by a obecnoêç smó ki w p ynie owodniowym. P 623

Ginekol Pol. 2007, 78, 621-625 Redêko S awomir et al. Florio i wsp. obserwujàc cià e powik ane stanem przedrzucawkowym stwierdzili Êcis à zale noêç pomi dzy parametrami równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej a st eniami aktywiny A [15]. Podobnà zale noêç obserwowano w grupach cià fizjologicznych, z cukrzycà i porodem przedwczesnym. Autorzy sugerujà, i produkcja p odowej aktywiny A mo e byç w fizjologicznych warunkach po- Êrednio regulowana poprzez wzrost oporu w t tnicy p powinowej w wyniku oddzia ywania naczyniowoczynnych peptydów. Utrzymuje to napi cie naczyniowe i powoduje wyzwalanie aktywiny A z ró nych, przypuszczalnych êróde m.in. z o- yska, w odpowiedzi na stymulacj endoteliny-1 [16]. W naszych badaniach nie zaobserwowaliêmy istotnej zale noêci pomi dzy st eniami p odowej aktywiny A a parametrami gazometrii i równowagi kwasowo-zasadowej krwi p powinowej. Wydaje si to byç zgodne z fizjologicznym mechanizmem uwalniania tej aktywiny, jednak e stoi to w sprzeczno- Êci z obserwacjami wymienionych wy ej autorów [15, 16]. Nasze obserwacje zbli one sà jednak do badaƒ przedstawionych przez Tong i wsp., gdzie równie nie stwierdzono zale noêci pomi dzy ph t tnicy p powinowej a st eniami aktywiny A, jak równie nie obserwowano istotnego wzrostu st - enia tej aktywiny u p odów, u których dosz o do powa nego niedotlenienia Êródporodowego. Autorzy ci wskazujà, e p odowa aktywina A nie jest czu ym markerem zarówno p odowego utlenowania, jak te ryzyka encefalopatii zwiàzanej z niedotlenieniem p odu [11]. Wyniki naszych badaƒ, jak równie cytowanych wy ej autorów, mogà wskazywaç, e to prawdopodobnie przewlek e niedotlenienie wiàza o si z podwy szonymi st eniami aktywiny A, przez co obserwowane zale noêci pomi dzy p odowà aktywinà A a parametrami równowagi kwasowo-zasadowej sà tak bardzo rozbie ne [11, 15, 16]. Nasze badania dotyczàce cià donoszonych, bez powik aƒ (takich jak cukrzyca czy stan przedrzucawkowy) wskazujà e p odowa aktwina A nie jest czu ym wyk adnikiem ewentualnego niedotlenienia p odu w przypadku pasa u smó ki do p ynu owodniowego, co prawdopodobnie przek ada o si na brak jakichkolwiek zale noêci pomi dzy parametrami równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej a st eniami p odowej aktywiny A. Dost pne dane dotyczàce uwalniania aktywiny A w trakcie porodu sà niejednoznaczne. Wykazano w surowicy krwi matki wy sze st enia tej aktywiny w przypadku porodu drogami natury, w porównaniu do porodu zakoƒczonego drogà elektywnego ci cia cesarskiego, jednoczeênie nie obserwujàc takich zale noêci we krwi p odowej. Autorzy ci sugerujà, i w przypadku aktywnego porodu o ysko uwalnia aktywin A, abrak ró nic w surowicy krwi p odu mo e byç zwiàzany z zupe nie innymi mechanizmami uwalniania oraz metabolizmu aktywin we krwi p odu [17]. W kolejnych badaniach stwierdzono, e st enie matczynej, ale nie p odowej aktywiny A, jest znamiennie wy sze u kobiet, które urodzi y drogà ci cia cesarskiego wykonanego wtrakcie rozpocz tego porodu, w porównaniu do kobiet które urodzi y drogami natury lub u których wykonano elektywne ci cie cesarskie. Autorzy stwierdzajà jednak, e przyczyny takich zale noêci sà bardzo trudne do uzasadnienia [18]. Kolejne obserwacje wykaza y znacznie ni sze st enia p odowej aktywiny A w przypadkach nag ego ci cia cesarskiego, wykonanego z powodu powik aƒ pierwszego okresu porodu, w porównaniu do porodu drogami natury [11]. Nasze wyniki wskazujà, e obserwowane ró nice st eƒ aktywiny A w zale noêci od drogi porodu nie sà istotne statystycznie. Wyniki cytowanych wczeêniej prac, jak równie naszych badaƒ, sà ca kowicie rozbie ne [11, 17, 18]. Wydaje si, e nale y przychyliç si do stwierdzenia, i droga porodu nie ma wp ywu na zachowanie si p odowej aktywiny A. Mechanizmy uwalniania aktywiny A w trakcie porodu nadal nie sà do koƒca poznane, a ewentualne okreêlenie zale noêci pomi dzy drogà porodu a st eniami p odowej aktywiny wymagaç b dzie kolejnych badaƒ. Uk ad krwiotwórczy p odu jest strukturà wra liwà na takie procesy patologiczne jak niedotlenienie, czy infekcje, reagujàc zmianà parametrów hematologicznych poprzez np. wzrost wartoêci hematokrytu, liczby leukocytów czy jàdrzastych erytrocytów [19-22]. SpoÊród wielu analizowanych parametrów stwierdziliêmy jedynie wi kszà liczb leukocytów, jàdrzastych erytrocytów oraz wy szy odsetek retikulocytów w przypadku pasa u smó ki do p ynu owodniowego. Wyniki te sà zbli one do przedstawianych przez nas wczeêniej badaƒ i mogà sugerowaç zarówno pod o e zwiàzane z niedotlenieniem jak równie z infekcjà wewnàtrzmacicznà [19-22]. Wydaje si nam, e lepszym wyk adnikiem hipoksji p odu jest podwy szona liczba jàdrzastych erytrocytów czy krwinek bia ych ni st enie p odowej aktywiny A. Podsumowujàc, p odowa aktywina A mo e si byç u ytecznym markerem przewlek ego niedotlenienia p odu [5, 6, 14], jednak e wyniki naszych badaƒ wskazujà, e w przypadku porodu powik anego obecnoêcià smó ki w p ynie owodniowym, st enie p odowej aktywiny A ma ograniczone znaczenie w ocenie niedotlenienia p odu. Wnioski 1. P odowa aktywina A ma ograniczone znaczenie w diagnostyce niedotlenienia p odu w przypadku pasa u smó ki do p ynu owodniowego. 2. Parametry równowagi kwasowo-zasadowej i gazometrii krwi p powinowej nie majà istotnego zwiàzku ze st eniem p odowej aktywiny A. 3. St enie p odowej aktywiny nie zmienia si w zale noêci od drogi porodu. 4. ObecnoÊç smó ki w p ynie owodniowym wià e si z istotnymi zmianami w obrazie obwodowej krwi p powinowej. PiÊmiennictwo 1. Ling N, Ying S, Ueno N, [et al.]. Pituitary FSH is released by a heterodimer of the - b subunits from the two forms of inhibin. Nature. 1986, 321, 779-782. 2. Vale W, Rivier J, Vaughan J, [et al.]. Purification and characterization of an FSH releasing protein from porcine ovarian follicular fluid. Nature. 1986, 321, 776-779. 3. Petraglia F, Florio P, Nappi C, [et al.]. Peptide signaling in human placenta and membranes: autocrine, paracrine, and endocrine mechanisms. Endocr Rev. 1996, 17, 156-186. 4. Muttukrishna S, Knight P, Groome N, [et al.]. Activin A and inhibin A as possible endocrine markers for pre-eclampsia. Lancet. 1997, 349, 1285-1288. 5. Blackburn C, Keelan J, Taylor R, [et al.]. Maternal serum activin A is not elevated before preeclampsia in women who are at high risk. Am J Obstet Gynecol. 2003, 188, 807-811. 624 Nr 8 /2007

P odowa aktywina A w porodzie powik anym obecnoêcià smó ki... 6. Grobman W, Wang E. Serum levels of activin A and inhibin A and the subsequent development of preeclampsia. Obstet Gynecol. 2000, 96, 390-394. 7. Katz V, Bowes W. Meconium aspiration syndrome: Reflectio on a murky subject. Am J Obstet Gynecol. 1992, 166, 171-183. 8. Mazor M, Hershkovitz R, Bashiri A, [et al.]. Meconium stained amniotic fluid in preterm delivery is an independent risk factor for perinatal complicatio. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1998, 81, 9-13. 9. Maymon E, Chaim W, Furman B, [et al.]. Meconium stained amniotic fluid in very low risk pregnancies at term gestation. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1998, 80, 169-173. 10. Florio P, Perrone S, Luisi S, [et al.]. Activin A Plasma Levels at Birth: An Index of Fetal Hypoxia in Preterm Newborn. Pediatr Res. 2003, 54:696-700. 11. Tong S, Egan V, Wallace E. Fetal activin A: associatio with labour, umbilical artery ph and neonatal outcome. BJOG. 2004, 111, 326-330. 12. Supramaniam V, Jenkin G, Loose J, [et al.]. Chronic fetal hypoxia increases activin A concentratio in the late-pregnant sheep. BJOG. 2006, 113, 102-109. 13. Jenkin G, Ward J, Hooper S, [et al.]. Feto-placental hypoxemia regulates the release of fetal activin A and prostaglandin E(2). Endocrinology. 2001, 142, 963-966. 14. Wallace E, Schneider-Kolsky M, Edwards A, [et al.]. Maternal serum activin A levels in association with intrauterine fetal growth restriction. BJOG. 2003, 110, 306-310. 15. Florio P, Reis F, Severi F, [et al.]. Umbilical cord serum activin A levels are increased in pre-eclampsia with impaired blood flow in the uteroplacental and fetal circulation. Placenta. 2006, 27, 432-437. 16. Reis F, Luisi S, Florio P, [et al.]. Corticotropin-releasing factor, urocortin and endothelin- 1 stimulate activin A release from cultured human placental cells. Placenta. 2002, 23, 522-525. 17. Florio P, Benedetto C, Luisi S, [et al.]. Activin A, inhibin A, inhibin B and parturition: Changes of maternal and cord serum levels according to the mode of delivery. Br J Obstet Gynaecol. 1999, 106, 1061-1065. 18. Schneider-Kolsky M, Tong S, Wallace E. Maternal and foetal activin A levels: Associatio with normal and abnormal labour. Placenta. 2002, 23, 570-574. 19. Redêko S, PrzepieÊç J, ak J, [i wsp.]. Parametry hematologiczne krwi p powinowej w cià y powik anej obecnoêcià smó ki w p ynie owodniowym. Ginekol Pol. 2000, 71, 931-935. 20. Green D, Hendon B, Mimouni F. Nucleated erythrocytes and intraventricular hemorrhage in preterm neonates. Pediatrics. 1995, 96, 475-478. 21. Hanlon-Lundberg K, Kirby R. Nucleated red blood cells as a marker of acidemia in term neonates. Am J Obstet Gynecol. 1999, 181, 196-201. 22. Hanlon-Lundberg K, Kirby R. Umbilical vein white blood cell count as a marker of acidemia in term neonates. J Matern-Fetal Med. 2000, 9, 327-329. 625