Artisan Gram Yellow Stain Kit. Nr kat. AR306

Transkrypt

1 Artisan Gram Yellow Stain Kit Nr kat. AR306 Przeznaczenie Do stosowania w diagnostyce in vitro. Zestaw do barwienia Gram Yellow Stain Kit jest przeznaczony do stosowania w laboratorium w celu identyfikacji bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych w próbkach tkankowych z wykorzystaniem mikroskopii świetlnej 1 3. Można w tym celu korzystać ze standardowo przygotowanych (zatopionych w parafinie) próbek pociętych na preparaty o grubości 4 mikronów. Preferowanym środkiem utrwalającym jest roztwór obojętnej buforowanej formaliny. Interpretacja kliniczna wystąpienia barwienia lub jego braku musi być uzupełniona o badania morfologiczne z odpowiednimi próbami kontrolnymi i powinna być przeprowadzana przez doświadczonego patologa z uwzględnieniem historii choroby pacjenta i innych badań diagnostycznych. Wszystkie odczynniki z zestawu do barwienia Gram Yellow Stain Kit zostały zoptymalizowane pod kątem stosowania w systemie do barwienia Artisan Link/Link Pro Special Staining System firmy Dako i nie wymagają mieszania ani rozcieńczania. Streszczenie i informacje ogólne Zestaw do barwienia Gram Yellow Stain Kit umożliwia identyfikację dwóch różnych grup mikroorganizmów w preparatach tkankowych. Do grupy trwale zabarwiającej się barwnikiem pierwotnym (fiolet krystaliczny) należą bakterie Gram-dodatnie. Barwnik pierwotny zostanie wypłukany podczas odbarwiania w przypadku bakterii Gram-ujemnych 3. Zabarwianie się bakterii Gram-dodatnich barwnikiem pierwotnym i jego wypłukanie w przypadku bakterii Gram-ujemnych zachodzi w wyniku oddziaływania substancji chemicznych i ze względu na specyfikę budowy ścian komórkowych tych mikroorganizmów 1. Uwaga! Jeśli u bakterii Gram-dodatnich dojdzie do uszkodzenia ich ścian komórkowych lub przerwania ich ciągłości z jakiegokolwiek powodu (starzenie się lub obumarcie mikroorganizmów), bakterie te zabarwią się jak Gram-ujemne. Zasada procedury Bakterie są częściowo widoczne w preparatach wybarwionych hematoksyliną i eozyną z wykorzystaniem mikroskopu świetlnego z obiektywem suchym i imersyjnym. Niemniej jednak lepszą czułość wykrywania i swoistość identyfikacji zapewnia stosowanie opisywanej tu specjalistycznej metody barwienia. W zestawie do barwienia Gram Yellow Stain Kit stosuje się zmodyfikowaną technikę barwienia preparatów metodą Grama (metoda Browna-Hoppsa). Zestaw do barwienia Gram Yellow Stain Kit został zoptymalizowany do stosowania w systemie do barwienia Artisan Link/Link Pro Special Staining System z roztworem oczyszczającym Artisan Clearing Solution lub bez niego. Po wszystkich etapach barwienia wykonywane są etapy płukania. Po barwieniu preparaty wyjmuje się z urządzenia, oczyszcza ksylenem lub odpowiednikiem ksylenu i zatapia w odpowiednim środku do zatapiania. Interpretacja wyników odbywa się z użyciem standardowego mikroskopu świetlnego. Tkanka kontrolna: tkanka zawierająca bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne. Odczynniki dostarczone Zestaw do barwienia Gram Yellow Stain Kit składa się z sześciu gotowych do użytku pakietów z dozownikiem zawierających następujące substancje: Fiolet krystaliczny Roztwór fioletu krystalicznego o stężeniu 1% w wodzie dejonizowanej Płyn Lugola Roztwór jodyny o stężeniu 1% i jodku potasu o stężeniu 2% w wodzie dejonizowanej Roztwór różnicujący Roztwór różnicujący Fuksyna karbolowa Roztwór fuksyny zasadowej o stężeniu 0,9%, fenolu o stężeniu 4,3% i alkoholu o stężeniu 9% w wodzie dejonizowanej Roztwór odbarwiający Roztwór formaldehydu o stężeniu 0,74% w wodzie dejonizowanej i kwasie octowym Tartrazyna Roztwór tartrazyny i kwasu octowego o stężeniu 0,3% w wodzie dejonizowanej P04309PL_03/AR306/ s. 1/5

2 Pakiety odczynników należy wymieszać przed rozpoczęciem napełniania. Firma Dako dostarcza powyższe odczynniki w stężeniach optymalnych do stosowania zgodnie z instrukcją dotyczącą barwienia preparatów tkankowych. Wszelkie odstępstwa od zalecanych procedur postępowania mogą skutkować unieważnieniem uzyskanych wyników. Materiały wymagane, ale niedostarczane 1. Szkiełka mikroskopowe 2. System do barwienia Artisan Link/Link Pro Special Staining System 3. Roztwór płuczący Artisan 50X Wash Solution (nr kat. AR102) 4. Opcjonalny roztwór oczyszczający Artisan Clearing Solution (nr kat. AR309) Środki ostrożności 1. Do stosowania przez przeszkolony personel. 2. Należy ograniczyć do minimum skażenie odczynników bakteriami, ponieważ może wystąpić nasilenie barwienia nieswoistego. 3. Po wykonaniu zleconej liczby badań w pakietach odczynników nadal mogą występować niewielkie ilości roztworów. 4. Czasy inkubacji lub temperatury inne niż podane mogą przyczyniać się do uzyskiwania błędnych wyników. Użytkownik musi poddać walidacji wszelkie zmiany wprowadzone do procedury fabrycznej. 5. Gdy pakiety odczynników nie są stosowane w urządzeniu, należy je przechowywać w pozycji pionowej. 6. Pakiety odczynników należy przechowywać w miejscu nienarażonym na bezpośrednie działanie słońca i źródeł ciepła. 7. Zasadniczo zakazuje się pracy z produktem osobom poniżej 18. roku życia. Użytkownicy muszą być szczegółowo przeszkoleni w zakresie prawidłowych procedur postępowania, niebezpiecznych właściwości produktu i niezbędnych środków ostrożności. Dodatkowe informacje zawiera Karta Charakterystyki Substancji. 8. W celu uniknięcia kontaktu produktu z oczami i skórą należy nosić odpowiednie osobiste wyposażenie ochronne. 9. Niewykorzystany roztwór należy usuwać zgodnie z rozporządzeniami lokalnymi, wojewódzkimi i krajowymi. 10. Na życzenie użytkowników profesjonalnych udostępniana jest Karta Charakterystyki Substancji. 11. W przypadku dostarczenia pakietów odczynników w opakowaniach na substancje niebezpieczne należy sprawdzić je pod kątem obecności rozlanych płynów lub uszkodzeń opakowania. W razie stwierdzenia któregokolwiek nie otwierać opakowań na substancje niebezpieczne. Włożyć pakiety odczynników z powrotem do opakowania zestawu i zgłosić uszkodzenie w dziale obsługi klienta w celu wymiany zestawu na nowy. Ostrzeżenie Fiolet krystaliczny: < 3-procentowe stężenie C.I. fioletu zasadowego 3 H351 Podejrzewa się, że powoduje raka. P308 + P313 W przypadku narażenia lub styczności: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. P305 + P351 + P337 + P313 W przypadku utrzymywania się działania drażniącego na oczy: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Płyn Lugola: Jodek potasu o stężeniu 3%, jod o stężeniu < 3% H315 Powoduje podrażnienie skóry. H361 Podejrzewa się, że działa szkodliwie na płód w łonie matki. H362 Może działać szkodliwie na dzieci karmione piersią. H370 Powoduje uszkodzenie narządów (układ oddechowy). H372 Może powodować uszkodzenie narządów poprzez długotrwałe lub powtarzane narażenie (układ krążenia, ośrodkowy układ nerwowy, nerki, płuca, tarczyca). P260 Nie wdychać par. P263 Unikać kontaktu w czasie ciąży/karmienia piersią. P270 Nie jeść, nie pić ani nie palić podczas używania produktu. P314 W przypadku złego samopoczucia zgłosić się do lekarza po poradę. P307 + P311 W przypadku narażenia: Natychmiast skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub lekarzem. P362 + P364 W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ NA SKÓRĘ: Umyć dużą ilością wody z mydłem. Zanieczyszczoną odzież zdjąć i wyprać przed ponownym użyciem. P332 + P313 W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. P04309PL_03/AR306/ s. 2/5

3 P305 + P351 + P337 + P313 W przypadku utrzymywania się działania drażniącego na oczy: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Roztwór różnicujący: 2-butoksyetanol o stężeniu 100% H227 Łatwopalna ciecz. H301 + H311 + Działa toksycznie po połknięciu, w kontakcie ze skórą lub w następstwie wdychania. H331 H315 Powoduje podrażnienie skóry. H335 Może powodować podrażnienie dróg oddechowych. P210 Przechowywać z dala od otwartego ognia i gorących powierzchni. Nie palić. P271 Stosować wyłącznie na zewnątrz lub w dobrze wentylowanym pomieszczeniu P270 Nie jeść, nie pić ani nie palić podczas używania produktu. P304 + P340 + P311 W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO DRÓG ODDECHOWYCH: Wyprowadzić lub wynieść poszkodowanego na świeże powietrze i zapewnić warunki do odpoczynku w pozycji umożliwiającej swobodne oddychanie. Natychmiast skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub lekarzem. P301 + P310 + W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: Natychmiast skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub lekarzem. Wypłukać usta. P330 P302 + P361 + P364 + P352 + P312 + P362 + P364 P332 + P313 P305 + P351 + P337 + P313 P403 P235 W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ NA SKÓRĘ: Natychmiast usunąć/zdjąć całą zanieczyszczoną odzież i wyprać ją przed ponownym użyciem. umyć dużą ilością wody z mydłem. W przypadku złego samopoczucia skontaktować się z OŚRODKIEM KONTROLI ZATRUĆ lub z lekarzem. Zanieczyszczoną odzież zdjąć i wyprać przed ponownym użyciem. W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. W przypadku utrzymywania się działania drażniącego na oczy: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Przechowywać w dobrze wentylowanym miejscu. Przechowywać w chłodnym miejscu. Fuksyna karbolowa: Etanol o stężeniu 10%, fenol o stężeniu 5%, chlorowodorek 4,4 -(4-iminocycloheksa-2,5-dienylidenemetylen) dianiliny o stężeniu 1%, metanol o stężeniu < 1% H226 Łatwopalna ciecz i pary. H314 Powoduje poważne oparzenia skóry oraz uszkodzenia oczu. H360 Może działać szkodliwie na płodność i na dziecko w łonie matki. H341 Podejrzewa się, że powoduje wady genetyczne. H351 Podejrzewa się, że powoduje raka. H373 Może powodować uszkodzenie narządów poprzez długotrwałe lub powtarzane narażenie (wątroba). P210 Przechowywać z dala od źródeł ciepła, gorących powierzchni, źródeł iskrzenia, otwartego ognia i innych źródeł zapłonu. Nie palić. P241 Używać sprzętu elektrycznego, wentylacyjnego, oświetleniowego oraz przeznaczonego do przenoszenia substancji, który został dopuszczony do pracy w środowisku zagrożonym wybuchem. P242 Używać wyłącznie nieiskrzących narzędzi. P243 Przedsięwziąć środki ostrożności zapobiegające statycznemu rozładowaniu. P233 Przechowywać pojemnik szczelnie zamknięty. P260 Nie wdychać par. P314 W przypadku złego samopoczucia zgłosić się do lekarza po poradę. P308 + P313 P304 + P340 + P310 P301 + P310 + P330 + P331 P303 + P361 + P353 + P363 + P310 W przypadku narażenia lub styczności: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO DRÓG ODDECHOWYCH: Wyprowadzić lub wynieść poszkodowanego na świeże powietrze i zapewnić warunki do odpoczynku w pozycji umożliwiającej swobodne oddychanie. Natychmiast skontaktować się z ośrodkiem zatruć lub lekarzem. W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: Natychmiast skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub lekarzem. Wypłukać usta. NIE wywoływać wymiotów. W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ NA SKÓRĘ (lub na włosy): Natychmiast usunąć/zdjąć całą zanieczyszczoną odzież. Spłukać skórę pod strumieniem wody/prysznicem. Wyprać zanieczyszczoną odzież przed ponownym użyciem. Natychmiast skontaktować się z ośrodkiem zatruć lub lekarzem. P04309PL_03/AR306/ s. 3/5

4 P305 + P P310 P403 P235 Natychmiast skontaktować się z ośrodkiem zatruć lub lekarzem. Przechowywać w dobrze wentylowanym miejscu. Przechowywać w chłodnym miejscu. Roztwór odbarwiający: Kwas octowy o stężeniu 0,1 1%, formaldehyd o stężeniu 0,1 1% H317 Może powodować reakcję alergiczną skóry. H350 Może powodować raka. P281 Stosować wymagane środki ochrony indywidualnej. Stosować rękawice ochronne. P272 Zanieczyszczonej odzieży ochronnej nie wynosić poza miejsce pracy. P308 + P313 W przypadku narażenia lub styczności: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. P363 W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ NA SKÓRĘ: Umyć dużą ilością wody z mydłem. Wyprać zanieczyszczoną odzież przed ponownym użyciem. P333 + P313 W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry lub wysypki: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Ostrzeżenie Tartrazyna o stężeniu 0,3 procenta: 5-hydroksy-1-(4-sulfofenylo)-4-(4-sulfofenyloazo)pirazolo-3-karboksylan trisodu o stężeniu 1% H317 Może powodować reakcję alergiczną skóry. Stosować rękawice ochronne. P272 Zanieczyszczonej odzieży ochronnej nie wynosić poza miejsce pracy. P363 W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ NA SKÓRĘ: Umyć dużą ilością wody z mydłem. Wyprać zanieczyszczoną odzież przed ponownym użyciem. P333 + P313 W przypadku wystąpienia podrażnienia skóry lub wysypki: Zasięgnąć porady/zgłosić się pod opiekę lekarza. Przechowywanie Przechowywać w temperaturze pokojowej. Nie używać odczynników po upływie ich terminu ważności. Jeśli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niż podane powyżej, użytkownik powinien zweryfikować te warunki. Nie ma wyraźnych oznak wskazujących na niestabilność produktu. W związku z tym w ramach weryfikacji należy korzystać z tkanki kontrolnej. W wypadku nieoczekiwanego wyniku barwienia, którego nie można wyjaśnić różnicami w procedurach laboratoryjnych lub nieprawidłowym przechowywaniem, należy skontaktować się z działem pomocy technicznej. Procedura z użyciem urządzenia/procedura barwienia Uwagi wstępne Szczegółowe instrukcje zamieszczono w dokumencie Podstawowy podręcznik Artisan Link. Napełnianie pakietów odczynników Przed rozpoczęciem barwienia pakiety odczynników należy napełnić i sprawdzić pod kątem nieszczelności. Należy sprawdzać szczelność po napełnieniu każdego pakietu odczynników z nowego zestawu i przed pierwszym barwieniem wykonywanym danego dnia. 1. Rozłożyć papierowy ręcznik i zdjąć nad nim z zespołu dozownika pakietu odczynników czerwoną lub czarną nasadkę zabezpieczającą w czasie dostawy (jeśli występuje), delikatnie za nią pociągając. 2. Aby napełnić pakiet odczynników po jego dostarczeniu, trzymać go tak, aby zespół dozownika był skierowany w dół, i delikatnie stukać 2 3 razy w bok pakietu odczynników w celu usunięcia pęcherzyków powietrza, które mogłyby się znajdować w zespole dozownika. 3. Szybkim ruchem wcisnąć do końca, a następnie zwolnić tłok 3 4 razy, do uzyskania ciągłego wypływu. Pilnować przy tym, aby wydostający się z dozownika płyn wsiąkł w papierowy ręcznik, chłonną gazę lub inny materiał o podobnych właściwościach. 4. Podczas napełniania nie wolno uwalniać nadmiernej ilości odczynnika. Mogłoby to doprowadzić do utraty zbyt dużej ilości odczynnika, skutkując zużyciem go przed wykonaniem spodziewanej liczby badań. 5. Przed każdym użyciem pakiety odczynników można napełniać 1 2 razy, aż do uzyskania ciągłego wypływu. 6. Trzymając pakiet odczynników w jednej dłoni, wsuwać prowadnicę montażową znajdującą się z tyłu pakietu w szczeliny na karuzeli z odczynnikami aż do pełnego osadzenia. Procedura Szczegółowe informacje dotyczące zalecanej procedury zawiera część Protocol (Protokół) w oprogramowaniu systemu DakoLink. Po zakończeniu barwienia preparaty będą suche. Należy je wówczas zanurzyć w ksylenie lub w odpowiedniku ksylenu, a następnie trwale zatopić. P04309PL_03/AR306/ s. 4/5

5 Interpretacja wybarwienia Bakterie Gram-dostatnie:... kolor ciemnoniebieski Bakterie Gram-ujemne:... kolor jasnoróżowy lub fuksja Tło:...kolor żółty Rozwiązywanie problemów Należy zapoznać się z dokumentem Podstawowy podręcznik Artisan Link lub skontaktować z działem pomocy technicznej. Piśmiennictwo 1. Carson F, Hladik, C: Histotechnology A Self Instructional Text, 3 rd edition, American Society for Clinical Pathology Press, Bancroft, JD, Gamble, M: Theory and Practice of Histological Techniques, 5 th edition, Churchill Livingstone, Prophet EB, Mills B, Arrington JB, Sobin LH. AFIP: Laboratory Methods in Histotechnology, 1st edition, American Registry of Pathology, Washington, DC, 1992 Wydanie 01/17 P04309PL_03/AR306/ s. 5/5