MIKROFLORA JELITOWA A OTYŁOŚĆ,

Podobne dokumenty
SANPROBI Super Formula

Probiotyki, prebiotyki i synbiotyki w żywieniu zwierząt

PAKIET KONSULTACJI GENETYCZNYCH GENODIET ZDROWIE ZAPISANE W GENACH

GENODIET ZDROWIE ZAPISANE W GENACH

Spis treści. śelazo Wapń i witamina D Cynk... 47

Żywienie dziecka. Żywienie dziecka. Budowa nowych tkanek (rozrost) Odnowa zużytych tkanek. Wytwarzanie energii. Utrzymywanie temperatury ciała

8.2. Wartość odżywcza produktów spożywczych Czynniki kształtujące wartość odżywczą produktów spożywczych...185

MIKROFLORA JELITOWA I NIETOLERANCJE POKARMOWE _

Czy Polakom grozi niealkoholowe stłuszczenie wątroby? NAFL (non-alkoholic fatty liver ) Czy można ten fakt lekceważyć?

JAKIE DROBNOUSTROJE ZASIEDLAJĄ UKŁAD POKARMOWY CZŁOWIEKA?

Żywienie dziecka. dr n.med. Jolanta Meller

a problemy z masą ciała

NOPALIN NATURALNE ROZWIĄZANIE PROBLEMÓW METABOLICZNYCH.

STRESZCZENIE PRACY DOKTORSKIEJ

Probiotyki, prebiotyki i żywność probiotyczna

Tematyka zajęć z podstaw żywienia człowieka klasa: 1 TK -1, 1TK - 2

Pakiet konsultacji genetycznych zawierający spersonalizowane zalecenia żywieniowe dla pacjenta

Lp. Dział 1. Zakres i znaczenie nauki o żywieniu człowieka 2. Charakterystyka, źródła i znaczenie dla organizmu człowieka Umiejętności i wiadomości na

Związek pomiędzy mikroflorą jelitową a otyłością

Nazwa modułu: Żywienie w zaburzeniach mikroflory jelitowej, probiotykoterapia cykl: r.a:2017/2018

NADCIŚNIENIE ZESPÓŁ METABOLICZNY

Zaburzenie równowagi energetycznej

Rola mikroflory jelitowej w patogenezie i leczeniu otyłości oraz zespołu metabolicznego

SPIS TREŚCI. 1. Znaczenie nauki o żywieniu. 2. Gospodarka energetyczna organizmu człowieka. 3. Podstawowe składniki pokarmowe i ich rola

Interwencje żywieniowe u dzieci otyłych aktualne spojrzenie

Prezentacja Pracowni Ekologii Drobnoustrojów w Katedry Mikrobiologii UJCM

JENNA MAY FINALLY REVEALS HER

Składniki pokarmowe i ich rola w żywieniu

Znaczenie probiotyków i prebiotyków w profilaktyce i leczeniu. Które wybierać? Czy stosować już u niemowląt i dlaczego?

Spis treści. Część I Definicja, epidemiologia i koszty otyłości. Część II Etiologia i patogeneza otyłości

Znaczenie Faecalibacterium prausnitzii oraz Akkermansia muciniphila w chorobach zapalnych jelit

TERAPEUTYCZNE ASPEKTY ŻYWIENIA PACJENTÓW W SZPITALACH czy obecne stawki na żywienie są wystarczające

PRZEDMIOTY PODSTAWOWE

African Mango - recenzja, opis produktu

Fizjologia żywienia człowieka

Dieta może być stosowana również przez osoby chorujące na nadciśnienie tętnicze, zmagające się z hiperlipidemią, nadwagą oraz otyłością.

Składniki pokarmowe i ich rola w żywieniu

Liofilizowany ocet jabłkowy 80% (±5%), mikronizowany błonnik jabłkowy 20% (±5%), celulozowa otoczka kapsułki.

Odżywianie osób starszych (konspekt)

CHOLESTONE NATURALNA OCHRONA PRZED MIAŻDŻYCĄ.

BROSZURA ZDROWIA PACJENTA

10 ZASAD ZDROWEGO ŻYWIENIA

ZDROWE JELITA NOWE SPOSOBY PROFILAKTYKI. Poradnik dla pacjenta o diagnozowaniu i leczeniu chorób jelit

Kinga Janik-Koncewicz

Czy mogą być niebezpieczne?

Choroby dietozależne wzrastające zagrożenie dla zdrowia i życia. Lek. med. Justyna Okupniak

Ośrodek Usług Pedagogicznych i Socjalnych Związek Nauczycielstwa Polskiego- Filia Gdańsk. Robert Niedźwiedź. Gdańsk 2012/2013 rok

Mikroflora przewodu pokarmowego i jej rola w patogenezie cukrzycy typu 2 Microflora of the gastrointestinal tract and its role in diabetes type 2

Pakiet konsultacji genetycznych zawierający spersonalizowane zalecenia żywieniowe dla pacjenta

Preparaty wspomagające dietę. wysokobiałkową

Europejski Tydzień Walki z Rakiem

PROGRAM STUDIÓW PODYPLOMOWYCH ŻYWIENIE KLINICZNE

GENODIET ZDROWIE ZAPISANE W GENACH

Załącznik nr 1 do zarządzenia Nr 53/2006 Prezesa Narodowego Funduszu Zdrowia. Program profilaktyki chorób układu krążenia

ZALECENIA ŻYWIENIOWE DLA DZIECI I MŁODZIEŻY. Gimnazjum nr 1 w Piastowie Lidia Kaczor, 2011r


Powszechne mity dotyczące diety. Zofia Kwiatkowska

Efekty kształcenia dla kierunku studiów Dietetyka studia pierwszego stopnia profil praktyczny

Rola mikroflory jelitowej w patogenezie otyłości i cukrzycy The role of gut microbiota in the pathogenesis of obesity and diabetes

10. Scenariusz lekcji dla gimnazjów i szkół ponadgimnazjalnych

PORADNICTWO DIETETYCZNE Wykład 2

Cel diety? Redukcja masy ciała? Utrzymanie masy ciała? Przyrost masy ciała? Zwiększenie wydolności organizmu? Choroba? Ciąża?

Spis treści. Wstęp... 7

Wyższa Szkoła Hotelarstwa i Gastronomii w Poznaniu SYLABUS

Wydział Nauk o Żywieniu Człowieka i Konsumpcji SGGW w Warszawie. Zagadnienia na egzamin dyplomowy studia I stopnia

JAKOŚĆ ŻYCIA A WSPARCIE SPOŁECZNE KOBIET Z HIPERGLIKEMIĄ W OKRESIE CIĄŻY

SLIMXL. Trójfazowy system odchudzania: oczyszcza organizm i redukuje wahania nastroju

Czynniki genetyczne sprzyjające rozwojowi otyłości

Anna Kerth. Eko. Kobieta pełna pasji. life. Witaminy. Jerzy Zięba: Żyj zdrowo i naturalnie Ukazujemy się od 2008 roku. Naturalne odchudzanie

inwalidztwo rodzaj pracy

DBAJMY O PRAWIDŁOWY ROZWÓJ NASZYCH DZIECI

Otyłość PORADNIK DLA PACJENTÓW PROGRAMU WSPARCIA DLA OSÓB Z OTYŁOŚCIĄ. Narodowy Program Zdrowia na lata

MIKROBIOTA A OTYŁOŚĆ

ZAGADNIENIA NA EGZAMIN DYPLOMOWY STUDIA MAGISTERSKIE

Organizacje pozarządowe w diabetologii: realne problemy pacjentów. problem z postrzeganiem cukrzycy typu 2 POLSKIE STOWARZYSZENIE DIABETYKÓW

Wytyczne Światowej Organizacji Gastroenterologicznej dotyczące otyłości, 2011 World Gastroenterology Organization Global Guidelines: Obesity 2011

Mikrobiota i jej związek z cukrzycą typu 2 i otyłością

Urząd Miasta Bielsko-Biała - um.bielsko.pl Wygenerowano: /14:10: listopada - Światowym Dniem Walki z Cukrzycą

POSTĘPOWANIE W CUKRZYCY I OPIEKA NAD DZIECKIEM W PLACÓWKACH OŚWIATOWYCH

Spodziewany efekt kliniczny wpływu wit. K na kość

Aktywność sportowa po zawale serca

PROGRAM NAUCZANIA PRZEDMIOTU OBOWIĄZKOWEGO NA WYDZIALE LEKARSKIM I ROK AKADEMICKI 2017/2018 PRZEWODNIK DYDAKTYCZNY dla STUDENTÓW I ROKU STUDIÓW

WIEDZA. K_W01 Zna definicje, cele i metody żywienia klinicznego oraz sposoby oceny odżywienia w oparciu o metody kliniczne.

Bakterie do zadań specjalnych - Faecalibacterium prausnitzii i Akkermansia muciniphila. Katarzyna Drews - Raczewska

Dieta ketogenna ARKADIUSZ KOGUT

Konferencja. asdfghjklzxcvbnmqwertyuiopas dfghjklzxcvbnmqwertyuiopasdf. ghjklzxcvbnmqwertyuiopasdfgh jklzxcvbnmqwertyuiopasdfghjkl

Flora bakteryjna jelit i jej potencjalny związek z otyłością

Akademia Wychowania Fizycznego i Sportu WYDZIAŁ WYCHOWANIA FIZYCZNEGO w Gdańsku ĆWICZENIE V BILANS ENERGETYCZNY

II.1. Tabela odniesień kierunkowych efektów kształcenia do efektów obszarowych:

Multilac Baby synbiotyk krople 5 ml

Otyłość i choroby nerek. groźny problem XXI wieku

Niedożywienie i otyłość a choroby nerek

Suszona plazma krwi wspomoże zdrowotność prosiąt

Suplementy. Wilkasy Krzysztof Gawin

Zadbaj o swoje zdrowie już dziś

EDUKACJA PACJENTA I JEGO RODZINY MAJĄCA NA CELU PODNIESIENIE ŚWIADOMOŚCI NA TEMAT CUKRZYCY, DOSTARCZENIE JAK NAJWIĘKSZEJ WIEDZY NA JEJ TEMAT.

Fetuina i osteopontyna u pacjentów z zespołem metabolicznym

Streszczenie wykładu: WPŁYW FLORY BAKTERYJNEJ JELITA NA ROZWÓJ ODPOWIEDZI IMMUNOLOGICZNEJ

Estabiom baby krople 5 ml

Transkrypt:

6 MIKROFLORA JELITOWA A OTYŁOŚĆ, czyli bakterie na straży kilogramów Nadwaga i otyłość stanowią coraz poważniejszy problem społeczny, szczególnie w krajach o wysokim stopniu uprzemysłowienia. Skala problemu jest na tyle poważna, iż w krajach wysoko rozwiniętych mówi się coraz częściej o epidemii otyłości. Według Światowej Organizacji Zdrowia (WHO) w 2005 r. na świecie było 400 mln osób otyłych, a 1,6 mld mia ło nadwagę. Prognozy na 2015 r. przewidywały, że liczba osób otyłych powyżej 15. roku życia wzrośnie do ok. 700 mln, czyli niemal dwukrotnie w stosunku do danych z 2005 r. [1]

mgr inż. Dominika Jankowska Centrum Medyczne VitaImmun w Poznaniu dr n. biol. Patrycja Szachta Centrum Medyczne VitaImmun w Poznaniu J est to istotny problem zdrowia publicznego, gdyż nadmierna masa ciała może stanowić przyczynę nawet 80% chorób cywilizacyjnych, takich jak chociażby insulinooporność, cukrzyca typu 2, stłuszczeniowe zapalenie wątroby, nadciśnienie czy choroby sercowo-naczyniowe [2, 3]. Problemy z nadmierną masą ciała mogą mieć podłoże wieloczynnikowe, tym niemniej ich powodem jest najczęściej nieadekwatna do wydatku energetycznego ilość energii pobranej z pożywieniem. Częstokroć w rozwój choroby jednocześnie zaangażowane są czynniki genetyczne, środowiskowe i psychologiczne. Zaznaczyć należy, iż wśród pacjentów otyłych obserwuje się grupy bardziej i mniej podatne na przyrost masy ciała i następczy rozwój zaburzeń metabolicznych pomimo stosowania tej samej diety [4]. Obserwacje te wskazują jednoznacznie na fakt, iż w procesie rozwoju nadwagi i otyłości biorą udział również inne mechanizmy niż sam tylko bilans energetyczny. Badania ostatnich lat pokazują, że jednym z istotniejszych elementów w patogenezie otyłości może być przewód pokarmowy, a dokładniej zachodzące w nim procesy oraz mikroorganizmy zasiedlające jelita [5]. 7 Przypomnieć należy, że tkanka tłuszczowa odgrywa rolę aktywnego narządu endokrynnego, głównego obszaru metabolizmu hormonów płciowych i glukokortykosteroidów. Tkanka tłuszczowa trzewna wpływa natomiast na powstawanie insulinooporności, nietolerancji glukozy, cukrzycy typu 2 czy nadciśnienia tętniczego i chorób serca [6, 7]. Czynniki środowiskowe sprzyjające rozwojowi otyłości mogą brać udział w jej rozwoju zarówno przed urodzeniem, jak i po porodzie. Dieta kobiety ciężarnej, uwarunkowania okołoporodowe, sposób karmienia i aktywność w pierwszych latach życia dziecka mogą silnie wpływać na rozwój nadwagi i otyłości w kolejnych latach jego życia. Za bardzo znaczący czynnik zewnętrzny zwiększający ryzyko rozwoju nadwagi i otyłości uznaje się również stres mogący skutkować spożywaniem nadmiernej ilości żywności, często bogatej w tłuszcz REKLAMA www.food-forum.pl

8 i cukry proste. Co istotne, wymienione czynniki nie tylko są bezpośrednim czynnikiem ryzyka rozwoju nadwagi i otyłości, lecz odgrywają również istotną rolę w warunkowaniu stanu mikroflory jelitowej. Tymczasem potencjalna rola bakterii jelitowych w regulacji intensywności przyswajania energii z pożywienia jest aktualnie przedmiotem szeregu badań [8]. Analizy oceniające wpływ mikrobioty jelitowej na rozwój nadwagi i otyłości rozpoczęły się de facto od eksperymentu polegającego na przetransferowaniu ludzkiej mikrobioty jelitowej (transfer kału) do jelita myszy, których przewód pokarmowy był pierwotnie całkowicie jałowy (tzw. myszy germ free). Skolonizowane zwierzęta przyjęły przekazaną mikroflorę i co ciekawe dalej przekazywały potomstwu przejęte wraz z nią cechy, dodatkowo zwiększając ich różnorodność. Również modyfikacja diety zwierząt w kolejnych etapach badania, polegająca na zwiększeniu podaży tłuszczu, spowodowała zróżnicowanie ich mikroflory jelit w ciągu zaledwie jednego dnia. Dodatkowa analiza stolców zwierząt otyłych potwierdziła fakt, iż flora jelitowa takich osobników może dodatkowo ułatwić pozyskiwanie nadprogramowych kalorii z trawionego pożywienia [14]. Na tej podstawie przeszczep mikrobioty od myszy z nadmierną masą ciała spowodował istotny przyrost masy ciała u zwierząt germ free. Tymczasem osobniki germ free, którym przekazano florę pochodzącą od myszy o prawidłowej masie ciała nie tylko utrzymały swą pierwotną masę, ale niekiedy wręcz chudły [9, 10]. Kolejne pionierskie badania pokazały, iż zwierzęta o prawidłowej masie ciała w porównaniu do osobników otyłych charakteryzowały się zupełnie innymi proporcjami bakterii jelitowych. Zarówno w badaniach prowadzonych na zwierzętach, jak i w wyselekcjonowanych grupach pacjentów wykazano, iż w przypadku otyłości zaburzony jest stosunek bakterii z rodzaju Bacteroides do rodzaju Firmicutes, na korzyść drugiego rodzaju. Tymczasem procesowi redukcji masy ciała towarzyszy wzrost liczebności Bacteroides spp. w ekosystemie jelitowym, który jest wprost proporcjonalny do liczby utraconych kilogramów [11, 12]. Otrzymane wyniki utwierdziły badaczy w przekonaniu, że mikroflora jelitowa u osobników otyłych może sprzyjać pozyskiwaniu dodatko wych kalorii z przyjmowanego pożywienia, co w konsekwencji wskazuje na czynny udział mikrobioty jelitowej w rozwoju otyłości i nadwagi [13, 14]. W świetle tych doniesień warto dodać, iż bakterie jelitowe mogą dodatkowo wspomagać leczenie otyłości. Przytoczyć należy badanie, w którym analizowano wpływ szczepu Lactobacillus rhamnosus PL60 podawanego przez osiem tygodni myszom z nadmierną masą ciała, będącym na diecie wysokotłuszczowej. U myszy karmionych probiotykiem wykazano istotne zmniejszenie masy ciała, co miało bezpośredni związek z produkowanym przez szczep probiotyczny kwasem linolenowym, przyczyniającym się do redukcji tkanki tłuszczowej w organizmie zwierząt [15]. Należy podkreślić, iż wyniki badań prowadzonych na modelach zwierzęcych z powodu różnic genetycznych, składu diety, otaczającego środowiska nie mogą zostać bezpośrednio ekstrapolowane w celu wyjaśnienia problemu nadwagi i otyłości u ludzi. Z kolei przeprowadzenie podobnych badań na ludziach jest ograniczone chociażby z przyczyn etycznych. Jednakże poza wymienionymi powyżej możliwymi różnicami, warto dodać, iż to właśnie mikrobiota bierze udział w rozkładzie wielkocząsteczkowych składników diety, wchłanianiu mikro- i makroelementów, fermentacji substancji niepodlegających trawieniu, wchłanianiu elektrolitów oraz wzroście i różnicowaniu nabłonka przewodu pokarmowego, co gwarantuje prawidłowe zużycie energii w mięśniach, przemianę glukozy w wątrobie oraz formowanie tkanki tłuszczowej. Ponadto enzymy trawienne produkowane są nie tylko przez organizm, lecz również przez bakterie jelitowe. Dostarczają one znacznej ilości enzymów zaangażowanych zarówno Badania ostatnich lat pokazują, w rozkład węglowodanów, cholesterolu, jak i produkcję witamin z grup B i K oraz aminokwasów (lizyny i treoniny). Warto nadmienić, iż mikroflora bierze także udział w meta bolizmie kwasów żółciowych [8]. Wszystkie wymienione cechy przyczyniają się do prawidłowego zachodzenia przemian metabolicznych w ludzkim organizmie, zatem uzasadnione jest, aby skład mikrobioty jelitowej był jak najbardziej różnorodny i pozbawiony bakterii potencjalnie chorobotwórczych mogących przyczynić się do zaburzenia opisanej równowagi. Należy zatem zwrócić szczególną uwagę na odbudowę mikroflory jelitowej za pomocą probiotyków i odpowiednią podaż prebiotyków w diecie. Jest to istotny czynnik chroniący przed kolonizacją jelita przez bakterie patogenne, co prowadzi w konsekwencji do dysbiozy jelitowej. Jakościowe i ilościowe zaburzenie stosunków bakteryjnych w jelicie może być z kolei przyczyną rosnącej tendencji do otyłości, dlatego

10 odbudowa mikrobioty i wprowadzenie w stan jak najbardziej zrównoważony stanowi istotny element zapobiegania problemowi otyłości. Badania przeprowadzone na modelach zwierzęcych potwierdziły skuteczność stosowania pre- i probiotyków w zapobieganiu nadmiernemu przyrostowi masy ciała. Co najistotniejsze, u ludzi zaobserwowano bardzo podobne zależności. Stosowanie prebiotyku inuliny przez 12 tygodni spowodowało u ludzi ubytek masy ciała o 1,0 ± 0,4 kg, podczas gdy w grupie stosującej placebo doszło w tym czasie do jej przyrostu o 0,4 ± 0,3 kg [16]. Nie można jednocześnie zapomnieć, iż zaburzona mikrobiota jelitowa czy jej odmienność w stosunku do innych osobników to tylko jeden z możliwych wielu czynników determinujących otyłość. Innymi słowy u osób niestosujących racjonalnej, zrównoważonej diety i niepraktykujących odpowiednio aktywnego trybu życia odbudowa mikroflory bakteryjnej jelit w oczekiwaniu na ubytek masy ciała nie przyniesie najprawdopodobniej spodziewanego efektu. Jedynie całościowe, holistyczne podejście do problemu nadwagi i otyłości może przynieść oczekiwany efekt i sukces. Odbudowa mikroflory jelitowej za pomocą odpowiednio dobranych probiotyków i prebiotyków jest więc niezwykle istotnym elementem profilaktyki i leczenia nadwagi i otyłości, musi iść jednak w parze z odpowiednim poziomem aktywności fizycznej i postępowaniem dietetycznym. Tego typu postępowanie u znacznej grupy pacjentów prowadzi do szybkiej, efektywnej, a co najważniejsze trwałej utraty nadmiernej masy ciała. Do dodatkowych korzyści płynących ze stosowania probiotykoterapii u osób z problemem otyłości zaliczyć należy także redukcję dolegliwości trawiennych, poprawę nastroju czy zwiększenie energii. Z uwagi na powszechną dostępność, stosunkowo niewysokie koszty terapii oraz brak działań niepożądanych w trakcie stosowania probiotyki i prebiotyki powinny stanowić integralny element prowadzenia pacjentów z nadwagą i otyłością. Dieta kobiety ciężarnej, uwarunkowania okołoporodowe, sposób karmienia i aktywność w pierwszych latach życia dziecka Bibliografia: 1. Chan R.S., Woo J., Prevention of overweight and obesity: how effective is a current public health approach. Int. J. Environ. Res. Public Health, 2010; 7: 765 783. 2. Reinhardt C., Reigstad C.S., Bäckhed F. Intestinal microbiota during infancy and its implications for obesity. J. Pediatr. Gastro enterol. Nutr., 2009; 48: 249 256. 3. Greiner T., Bäckhed F. Effects of the gut microbiota on obesi ty and glucose homeostasis. Trends Endocrinol. Metab., 2011; 22: 117 123. 4. Levin B.E., Keesey R.E. Defense of differing body weight set points in diet-induced obese and resistant rats. Am. J. Physiol., 1998; 274: R412 R419. 5. Cani P.D., Hoste S., Guiot Y., Delzenne N.M. Dietary non-digestible carbohydtates promote L-cell differentiation in the proximal colon of rats. Br. J. Nutr., 2007; 98: 32 37. 6. Kershaw E., Flier J. Adipose tissue as an endocrine organ. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004; 89: 2548 2556. 7. Dagenais G., Yi Q., Mann J. i wsp. Prognostic impact of body weight and abdominal obesity in women and men with cardiovascular disease. Am. Heart J. 2005; 149: 54 60. 8. Marlicz W., Ostrowska L., Łoniewski I. Flora bakteryjna jelit i jej potencjalny związek z otyłością. Endokrynologia, Otyłość i Zaburzenia Przemiany Materii 2013, tom 9, nr 1, 20 28. 9. Backhed F., Ding H., Wang T., Hooper L.V., Koh G.Y, Nagy A., Semenkovich C.F, Gordon J.I. The gut microbiota as an environmental factor that regulates fat storage. PNAS, 2004, 101, 15718 15723. 10. Turnbaugh P.J., Ridaura V.K., Faith J.J., Rey F.E., Knight R., Gor don J.I. The effect of diet on the human gut microbiome: a meta genomic analysis in humanized gnotobiotic mice. Sci. Transl. Med., 2009; 1: 6. 11. Ley R., Bäckhed F., Turnbaugh P. i wsp. Obesity alters gut microbial ecology. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2005; 102: 11070 11075. 12. Żak-Gołąb A., Olszanecka-Glinianowicz M., Kocełak P., Chudek J. Rola flory jelitowej w patogenzie otyłości. Postepy Hig Med Dosw (online), 2014; 68. 13. Schwiertz A., Taras D., Schafer K., Beijer S., Bos N.A., Donus C., Hardt P.D. Microbiota and SCFA in lean and overweight healthy subjects. Obesity, 2010; 18: 190 195. 14. Stachowicz N., Kiersztan A., Rola mikrobioty jelitowej w patogenezie otyłości i cukrzycy. Postepy Hig Med Dosw (online), 2013; 67: 288 303. 15. Lee H.Y., Park J.H., Seok S.H. Baek M.W., Kim D.J., Lee K.E., Paek K.S., Lee Y., Park J.H. Human originated bacteria, Lactobacillus rhamnosus PL60 produce conjugated linoleic acid and show anti-obesity effects in diet-induced obese mice. Biochim. Biophys. Acta, 2006, 1761, 736 744. 16. Parnell J.A., Reimer R.A. Weight loss during oligofructose supplementation is associated with decreased ghrelin and increased peptide YY in overweight and obese adults. Am. J. Clin. Nutr., 2009; 89: 1751 1759.