Piotr Jan Korzeniowski Międzynarodowy Instytut Biologii Molekularnej i Komórkowej w Warszawie

Transkrypt

1 Piotr Jan Korzeniowski Międzynarodowy Instytut Biologii Molekularnej i Komórkowej w Warszawie

2 Przedstawiciel rodziny Cyprynidae zamieszkujący wody płynące i rozlewiskowe Indii, Pakistanu i Nepalu. Engeszer et al., (2007) ZEBRAFISH, vol 4: 20-40

3 Małe rozmiary ciała i łatwość utrzymania w warunkach laboratoryjnych Krótki cykl rozwojowy Transparentność stadiów larwalnych Zsekwencjonowany genom Podobieństwo genomu do genomu człowieka Kwestie legislacyjne

4 Linie formy dzikiej WT (wild type) Ryby z określonymi mutacjami Linie transgeniczne

5 lata otwarcie European Zebrafish Resource Center (EZRC) w Niemczech sklonowanie pierwszej mutacji, otwarcie Zebrafish Interantional Stock Center (ZIRC) w USA sekwencjonowanie genomu Sanger w UK pierwsze kolekcje mutantów No. publikacji

6 Badania z zakresu rozwoju kręgowców Badania onkologiczne Badania neurologiczne i neuropatologiczne Badania biochemiczne Badanie behawioralne Badania farmakodynamiczne Badania toksykologiczne Badania z zakresu kontroli środowiska

7 Wizualizacja osteoblastów

8 gfp/rfp ryba

9 Parametry wody: - ph 6,9-7,5 - przewodnictwo µs - TwO 7-12 stopni - TwW 4-8 stopni - NO 2-0,0-0,1 mg na litr - NH 4 /NH 3 + 0,0 mg na litr - NO mg na litr - temp C Cykl świetlny - dzień 14h,noc 10h Żywienie - karmienie 4-5 razy dziennie (pokarmy suche SDS, Zigler, Gemma), Spirulina platensis, Artemia salina - hodowla własna, pantofelek - do karmienia narybku, hodowany w laboratorium Wymiana wody 10-25% objętości na dobę w zależności od obsady i częstości karmienia

10 Elektroniczna kontrola parametrów wody zgodnie z zadanym programem Wydajny system filtracji mechanicznej i biologicznej oraz automatyczna wymiana wody Całkowite uniezależnienie się od złej jakości wody wodociągowej (system przygotowuje wodę na bazie wody RO z dodanymi roztworami soli) System powiadomień i alarmów zwiększający bezpieczeństwo hodowli

11 Tarła indywidualne (jedna samica, jeden samiec) Tarła zbiorowe (jeżeli to możliwe z przewagą liczebną samców) Pobieranie ikry i nasienia Zabezpieczenie ikry przed zjadaniem przez tarlaki (ruszty i siatki) Inkubacja ikry na szalkach Petriego w roztworze E3 w cieplarkach, w temp. 28,5 C

12 Kwarantanna wszystkich ryb sprowadzanych do hodowli Codzienna wielokrotna obserwacja ryb w hodowli Izolacja osobników wykazujących objawy chorobowe i szybka diagnostyka Okresowe badania w kierunku typowych patogenów dla Danio rerio Sterylizacja ikry pochodzącej od ryb z kwarantanny Badanie mikroskopowe i mikrobiologiczne osadów Kontrola parametrów środowiska i jakości żywienia

13 Obecnie choroby wirusowe nie stanowią dużego zagrożenia dla hodowli laboratoryjnych Danio rerio. Danio pręgowany wykazuje jednak wysoką wrażliwość na zakażenie wirusem martwicowego zapalenia śledziony i nerki Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus.

14 Mykobakterioza- M.marinum, M.chelonae, M.fortuitum, M.haemophilus, M.peregrinum Pseudomonas spp./aeromonas spp. Flavobacterium columnare, Flavobacterium branchiophilum Edwardsiella spp. Proteus spp. Vibrio spp.

15 Saprolegnia spp.-nie stanowi zagrożenia w hodowlach laboratoryjnych D.rerio. Zakażenia tego typu stwierdzano jako powikłanie chorób bakteryjnych i przy bardzo złych warunkach środowiskowych. Branchiomyces spp.-infekcje przebiegające z objawami duszności.

16 Pseudoloma neurophilia (Microsporidia) Pleistophora hyphessobriconis (Microsporidia) Myxidium sp.(myxozoa)/zschokkella Piscinoodinium pillulare (Dinoflagellata) Ichthyophthirius multifiliis Ichthyobodo necatrix (Costia) Capillaria sp.(pseudocapilaria tomentosa) Dactylogyrus spp.(monogenea) Gyrodactylus spp.(monogenea)

17 29 linii D.rerio (WT, mutanty, transgeniki)- łącznie ponad 6000 ryb. Zestawy do hodowli typu stand alone i multi linking z własną stacją uzdatniania wody (w realizacji dwa kolejne pomieszczenia z zestawami hodowlanymi). 5 stanowisk do mikromanipulacji (nastrzykiwanie i transplantacja) Mikroskopy stereoskopowe świetlne i fluorescencyjne 4 inkubatory Apratura do wytwarzania mikroigieł

18 Koordynator Projektu: Prof. Jacek Kuźnicki Zastępca Dyrektora ds. naukowych: Prof. Michał Witt Menadżer Projektu: Dr Urszula Białek Wyrzykowska Czas trwania projektu: