HUMORALNA ODPOWIEDŹ NA REKOMBINOWANE BIAŁKA YEUB, AIL, YADA I INV PAŁECZEK YERSINIA ENTEROCOLITICA W PRZEBIEGU JERSINIOZY U LUDZI
|
|
- Gabriela Biernacka
- 6 lat temu
- Przeglądów:
Transkrypt
1 MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2009, 61: Waldemar Rastawicki HUMORALNA ODPOWIEDŹ NA REKOMBINOWANE BIAŁKA YEUB, AIL, YADA I INV PAŁECZEK YERSINIA ENTEROCOLITICA W PRZEBIEGU JERSINIOZY U LUDZI Zakład Bakteriologii NIZP-PZH w Warszawie Kierownik: prof. dr hab. M. Jagielski Metodami rekombinacji genetycznej uzyskano preparaty białek YeuB, Ail, YadA i Inv, których użyto jako antygen w odczynie ELISA i western-blotting do badania humoralnej odpowiedzi w przebiegu jersiniozy. Stwierdzono, że przeciwciała klasy IgA, IgG i IgM dla wszystkich użytych antygenów występowały istotnie częściej u osób z jersiniozą niż u krwiodawców. Odczyn ELISA, w którym jako antygeny zastosowano uzyskane rekombinowane białka, odznaczał się wysoką swoistością i niską czułością w stosunku do odczynu ELISA z antygenem białek wydzielniczych Yop. Czynniki zjadliwości pałeczek Y. enterocolitica kodowane są przez geny umiejscowione zarówno na chromosomie jak i na plazmidzie tych drobnoustrojów. Do jednych z najważniejszych genów zlokalizowanych na chromosomie, odpowiedzialnych za zjadliwość pałeczek Yersinia należą geny inv, ail, yst, myf, yeub, odpowiedzialne odpowiednio za produkcję białka inwazyny (Inv), Ail, enterotoksyny, białka Myf i YeuB (Yersinia-ureasae B). Plazmid zjadliwości pyv o wielkości kb koduje z kolei szereg białek wydzielniczych Yop, biorących udział w chorobotwórczości pałeczek Yersinia, wytwarzanych i uwalnianych do podłoża w warunkach hodowli drobnoustrojów w temperaturze 37 o C oraz w pożywce pozbawionej jonów wapnia (5, 9). Innym, nie mniej istotnym czynnikiem zjadliwości zarazka kodowanym przez plazmid pyv, jest białko błony zewnętrznej YadA o masie 44,1-47,1 kda (2). Jak wynika z przeglądu piśmiennictwa istnieje znaczna liczba publikacji dotycząca humoralnej odpowiedzi człowieka na lipopolisacharydy, całe komórki pałeczek Yersinia bądź oczyszczone białka Yop (6, 7, 11, 14, 15). Istnieją natomiast tylko sporadyczne doniesienia mówiące o humoralnej odpowiedzi osób z jersiniozą na inne białka pałeczek Yersinia biorące aktywny udział w patogenezie jersiniozy (1, 4). Celem pracy była ocena humoralnej odpowiedzi na białka YeuB, Ail, YadA i Inv w przebiegu jersiniozy u ludzi w zależności od wieku osób chorych, okresu choroby i zespołu objawów klinicznych.
2 22 W. Rastawicki Nr 1 MATERIAŁ I METODY Badane grupy ludzi. Osoby chore, podejrzane w badaniu klinicznym o jersiniozę. Do badań przeznaczono próbki surowicy uzyskane od 193 osób chorych, podejrzanych o jersiniozę. Osoby klinicznie zdrowe. Zbadano próbki surowicy uzyskane od 85 klinicznie zdrowych, dorosłych osób w wieku powyżej 20 lat (krwiodawców). Próbki surowicy immunizowanych królików. Badaniu poddano próbki surowicy królików immunizowanych następującymi szczepami bakteryjnymi: Y. enterocolitica O3 (wariant pyv+ i wariant pyv-), Y. enterocolitica O9, Y. enterocolitica O8, Y. enterocolitica O5,27, Y. enterocolitica O5, Y. enterocolitica O6, Y. enterocolitica O7,8, Y. pseudotuberculosis I. Odczyn immunoenzymatyczny ELISA. Odczyn ELISA z antygenem białek wydzielniczych Yop przeprowadzano według procedury podanej uprzednio (14). Identyczną procedurę z niezbędnymi modyfikacjami zastosowano również w przypadku wykonywania odczynu ELISA, w którym jako antygen zastosowano rekombinowane białka YadA, YeuB, Ail i Inv. Preparatyka białek YadA, YeuB, Ail i Inv metodą rekombinacji genetycznej. Fragmenty genów kodujących poszczególne białka pałeczek Yersinia enterocolitica O3 amplifikowano techniką PCR przy użyciu starterów przedstawionych w tabeli I. Produkt PCR rozdzielono w 1% agarozie LMP (BioRad) w celu sprawdzenia wielkości amplifikowanego DNA i jego oczyszczenia. Następnie odzyskano DNA z żelu agarozowego przy użyciu zestawu Gel-out firmy A&A Biotechnology i określono stężenie DNA przy użyciu spektrofotometru DU70 firmy Beckman. Klonowanie produktów PCR do wektora pet30ek/lic i transformację kompetentnych komórek E. coli BL21 (DE3) przeprowadzono zgodnie z zaleceniami producenta (firma Novagen). Transformowany plazmidem pet30ek/lic szczep E. coli BL21 (DE3) namnażano w pożywce LB z dodatkiem 30 mg/l kanamycyny w temp. 37 o C do gęstości OD=0,5 przy 600 nm. Następnie dodawano IPTG (isopropyl-d-thiogalactopyranoside) do końcowego stężenia 1 mm i dalej inkubowano do gęstości OD=1,0 przy długości fali światła 600 nm. Zawiesinę bakteryjną wirowano przez 20 minut przy x g. Uzyskany osad, w przypadku preparatyki białek YeuB, zawieszano w lodowatym buforze 1xHis-Bind, rozbijano ultradźwiękami w dezyntegratorze przez 6 minut a następnie wirowano przy x g przez 20 minut. Uzyskany supernatant nakładano na kolumny firmy Novagen służące do izolacji i oczyszczania białek z domeną polihistydynową przy wykorzystaniu metod chromatografii bio-powinowactwa. Białka YadA, Inwazynę i Ail uzyskiwano w warunkach denaturujących. W tym celu, osad bakteryjny zawieszano w niewielkiej objętości lodowatego buforu 1 x His-Bind, homogenizowano w dezyntegratorze przez 1 minutę i wirowano przez 15 minut przy obrotach x g. Czynność tą powtarzano 3-krotnie. Następnie uzyskany osad zawieszano w lodowatym buforze 1 x His-Bind o ph 7,9 zawierającym 6 M mocznika i inkubowano w łaźni lodowej, przy wytrząsaniu, przez 1 godzinę. Po zwirowaniu nierozpuszczonych białek, klarowny supernatant nakładano na kolumienki i oczyszczano podobnie jak poprzednie białka, z tym, że do wszystkich buforów dodawano mocznika w stężeniu zalecanym przez producenta zestawu Novagen. Do izolacji każdego białka używano osobnych kolumienek. Przed użyciem do opłaszczania płytek polistyrenowych preparat białek rozcieńczano buforem węglanowym o ph 9,6 do zawartości białka około 10 mg/ml.
3 Nr 1 Humoralna odpowiedź na rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA i Inv pałeczek Y. enterocolitica Odczyn western-immunoblotting. Posłużono się tym samym preparatem białek co w odczynie ELISA (białka rekombinowane Ail, YadA, YeuB, Inv). Elektroforezę w 12,5% żelu poliakrylamidowym (płytki o wymiarach 160x190x1,5 mm) prowadzono przy natężeniu prądu 60 ma przez 3,5 godziny. Po zakończeniu elektroforezy żele barwiono barwnikiem Coomassie brilliant blue R250. W celu określenia masy cząsteczkowej elektroforetycznie rozdzielonych białek w każdej serii doświadczenia rozdziałowi poddawano standard masowy firmy Bio-Rad Prestained SDS-Page standard, Low-Range (Nr kat ) bądź też SDS-PAGE Broad Range (Nr kat ). Przeniesienie ektroforetyczne rozdzielonych białek wydzielniczych Yop na membranę Immobilon PVD (Millipore) wykonywano przy natężeniu 300 ma przez 3 godziny. Po zablokowaniu receptorowej powierzchni membrany 5% roztworem odtłuszczonego krowiego mleka, arkusze inkubowano z ludzkimi, bądź króliczymi surowicami rozcieńczonymi w PBS w stosunku 1:100. Po dokładnym przemyciu paski inkubowano w roztworze odpowiedniego koniugatu (kozie przeciwciała znakowane peroksydazą chrzanową) a następnie w roztworze benzydyny w buforze cytrynianowym z dodatkiem perhydrolu. Reakcję barwną przerywano przez przeniesienie pasków do wody destylowanej. W celu wykazania swoistości badanych białek przeniesione elektroforetycznie na membranę rozdzielone białka Ail, YadA, YeuB, Inv poddano reakcji również z mysimi, monoklonalnymi przeciwciałami IgG 1 (Novagen) dla sekwencji His-Tag kodowanej przez ekspresyjny wektor użyty do klonowania. Przeciwciała te rozpoznają 5 występujących po sobie reszt histydynowych, bez względu na skład sąsiadujących aminokwasów, wiążąc się specyficznie z N-terminalną sekwencją His-Tag. Statystyczne opracowanie wyników. Statystyczną analizę uzyskanych wyników przeprowadzono przy użyciu programu komputerowego Statgraphics wer. 4.1 oraz Instat (Instant Biostatistic). tm WYNIKI Charakterystyka rekombinowanych białek YeuB, Ail, YadA i Inv. Elektroforetyczny rozdział wszystkich rekombinowanych białek, jednocześnie z dwoma różnymi wzorcami masowymi firmy BioRad, w 12,5% żelu poliakrylamidowym umożliwił określenie masy cząsteczkowej badanych białek. I tak, przybliżona masa cząsteczkowa białka YeuB wynosiła 32,5 kda, białka Ail 24,5-25,0 kda, białka YadA 50 kda i białka inwazyny (Inv) około 48,0 kda (Rycina 1). W następnym etapie charakterystyki uzyskanych rekombinowanych białek wykazano, że wszystkie białka posiadały sekwencję His-Tag, a masa cząsteczkowa białek wyliczona na podstawie obrazu uzyskanego w odczynie western-immunoblotting odpowiadała dokładnie masie prążków uzyskanych w elektroforezie w żelu poliakrylamidowym. W celu zbadania antygenowej swoistości uzyskanych białek poddano je reakcji w odczynie western-immunoblotting z 2 próbkami surowicy osób chorych z bakteriologicznie i serologicznie potwierdzoną jersiniozą wywołaną przez pałeczki Y. enterocolitica z grupy O3 i O8, oraz z 2 próbkami surowicy osób klinicznie zdrowych, nie zawierających przeciwciał dla somatycznych antygenów i białek wydzielniczych Yop, a także z 2 odpornościowymi surowicami króliczymi jedną o wysokim poziomie przeciwciał dla Y. enterocolitica O3 23
4 24 W. Rastawicki Nr kda 92,0 kda 52,3 kda 35,3 kda 28,7 kda 21,3 kda Rycina 1. Elektroforetyczny obraz rekombinowanych białek rozdzielonych w 12,5% żelu poliakrylamidowym barwionym Commasie blue. 1 marker masowy (low range prestained, Bio-Rad), 2 marker masowy (Broad range, Bio-Rad), 3 białko YeuB, 4 białko Ail, 5 białko YadA, 6 białko Inv. i drugą, dla Y. pseudotuberculosis I oraz z 2 surowicami królików nie immunizowanych. Wyniki uzyskane w odczynie western-immunoblotting wykazały, że wszystkie badane białka reagowały zarówno z surowicami osób chorych, z wysokim poziomem przeciwciał dla antygenów pałeczek Y. enterocolitica O3 i O8 jak też z króliczymi surowicami odpornościowymi. Nie wykazano takich reakcji z dwiema próbkami uzyskanymi od osób klinicznie zdrowych ani z surowicami królików nie immunizowanych. Masa cząsteczkowa białek, które reagowały z surowicami, odpowiadała masie białek rozdzielonych w żelu poliakrylamidowym (Rycina 2). Tabela I Oligonukleotydy startery genów kodujących białka Ail, Inwazynę, YadA oraz YeuB pałeczek Yersinia. Gen Białko Starter Sekwencja nukletydów startera Wielkość 5` 3` fragmentu ail Ail aillf gacgacgacaagattattggttatgcacaaagccatg aillr gaggagaagcccggtttagaatcgataccctgcacc 478 bp inva Inwazyna invl1f gacgacgacaagatagaagcgttagagaaccccgctg invl1r gaggagaagcccggtataggtattgaccgccgcttc 1177 bp yada YadA YadALf gacgacgacaagatcccaaatgctgatcctgctttgg YadALr gaggagaagcccggtgtacatgacatccgaggaacc 1251 bp yeub YeuB yeublf gacgacgacaagatgagcacaaagacaaatagcacc yeublr gaggagaagcccggtcgatttgaagccacgttcagc 516 bp
5 Nr 1 Humoralna odpowiedź na rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA i Inv pałeczek Y. enterocolitica kda 92 kda 52,3 kda 35,3 kda 28,7 kda 21,3 kda M Rycina 2. Wynik reakcji w odczynie western-immunoblotting rekombinowanych białek pałeczek Yersinia z próbką surowicy uzyskaną od osoby chorej na jersiniozę. M marker masowy, 1 białko YeuB, 2 białko Ail, 3 białko YadA, 4 białko Inv Tabela II Występowanie przeciwciał dla rekombinowanych białek YeuB, Ail, Yad A, Inv oraz wydzielniczych białek Yop w próbkach surowicy królików immunizowanych zawiesiną pałeczek Y. enterocolitica i Y. pseudotuberculosis I. Nr Zawiesina Miano przeciwciał w klasie IgA+G+M dla białek: drobnoustrojów użyta do immunizacji królików YeuB Ail Yad Inv Yop 1 Y. ent. O3 pyv Y. ent. O3 pyv Y. ent. O3 pyv Y. ent. O3 pyv Y. ent. O5, Y. ent. O5, Y. ent.o Y. ent.o Y. ent.o Y. ent.o Y.pst. I Y.pst. I Y. ent. O Y. ent. O Y. ent.o7, Y. ent.o7, * Pałeczki Y. enterocolitica O3 użyte były w dwóch wariantach: z plazmidem zjadliwości pyv+ i bez plazmidu pyv-. Pozostałe szczepy zjadliwe tylko w wariancie z plazmidem pyv+.
6 26 W. Rastawicki Nr 1 Dalszą analizę swoistości uzyskanych rekombinowanych białek, jak również preparatu wydzielniczych białek Yop, przeprowadzono przy użyciu odczynu ELISA badając poziom swoistych przeciwciał w próbkach surowicy królików nie immunizowanych i immunizowanych pałeczkami Y. enterocolitica z grup serologicznych O3, O5,27, O8, O9, O5, O6, O7,8 oraz pałeczkami Y. pseudotuberculosis I. Pałeczki Y. enterocolitica O3 użyte były do immunizacji królików w dwóch wariantach: z plazmidem zjadliwości (pyv+) i bez plazmidu (pyv-). Pozostałe szczepy zjadliwe tylko w wariancie z plazmidem pyv. Przeprowadzone badania nie wykazały obecności przeciwciał dla rekombinowanych białek jak również dla białek wydzielniczych Yop pałeczek Yersinia u królików nie immunizowanych. W próbkach surowicy uzyskanych od królików immunizowanych pałeczkami Y. enterocolitica uważanymi za zjadliwe dla człowieka, posiadającymi plazmid zjadliwości pyv (Y. enterocolitica O3, O8, O9, O5,27 oraz Y. pseudotuberculosis I), stwierdzono występowanie przeciwciał dla wszystkich białek kodowanych chromosomalnie (białka YeuB, Ail, Inv) jak i plazmidowo (białka Yad i Yop) (Tabela II). W przypadku królików immunizowanych pałeczkami Y. enterocolitica O3 pozbawionymi plazmidu zjadliwości (wariant pvv-) stwierdzono występowanie przeciwciał wyłącznie dla białek kodowanych przez chromosom pałeczek Yersinia. W surowicy królików immunizowanych pałeczkami Y. enterocolitica należącymi do grup serologicznych O5, O6 i O7,8, uważanymi za niepatogenne dla człowieka, nie wykryto przeciwciał dla białek Yop, natomiast przeciwciała dla rekombinowanych białek YeuB, Ail, Yad i Inv występowały w niskich mianach. Występowanie i poziom przeciwciał w odczynie ELISA dla rekombinowanych białek YeuB, Ail, YadA i Inv u osób z podejrzeniem jersiniozy i krwiodawców. W grupie 193 osób chorych, podejrzanych w badaniu klinicznym o jersiniozę stwierdzono statystycznie istotnie częstsze występowanie przeciwciał dla rekombinowanych białek YeuB, Ail, YadA i Inv niż w grupie 85 klinicznie zdrowych osób (Tabela III). Generalnie, u osób z bólami brzucha i rumieniem guzowatym przeciwciała klasy IgA, IgG i IgM dla rekombinowanych białek wykrywano częściej niż u osób z zapaleniem stawów. Najczęściej u osób z bólami brzucha i zapaleniem stawów wykrywano przeciwciała dla białka Inv (odpowiednio 58,7% i 50,0%) a u osób z rumieniem guzowatym przeciwciała dla białka YadA (58,3%) oraz białek Ail i Inv (50,0%). Przeprowadzone badania pozwoliły stwierdzić, że częstość występowania przeciwciał w mianie diagnostycznie znamiennym dla białek YeuB, Ail, YadA i Inv rosła wraz z wiekiem badanych osób, osiągając najwyższe wartości u osób z grupy wiekowej lat. U osób z tej grupy wiekowej przeciwciała dla wszystkich rekombinowanych białek osiągały również najwyższe poziomy miana. Ocenę czułości i swoistości odczynu ELISA, w którym jako antygen zastosowano rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA i Inv w odniesieniu do wyników odczynu ELISA z antygenem białek wydzielniczych Yop przedstawiono w tabeli IV. Generalnie, odczyn ELISA z rekombinowanymi białkami charakteryzował się niską czułością i wysoką swoistością w porównaniu do wyników uzyskanych w odczynie ELISA z antygenem białek wydzielniczych Yop. Jak wynika z analizy poszczególnych przypadków chorobowych odpowiedź humoralna w przebiegu jersiniozy może mieć różny obraz. Obserwuje się przypadki klasyczne, gdy w pierwszej badanej próbce surowicy uzyskanej zazwyczaj w ciągu pierwszego bądź dru-
7 Nr 1 Humoralna odpowiedź na rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA i Inv pałeczek Y. enterocolitica 27 Tabela III Występowanie przeciwciał dla rekombinowanych białek YeuB, Ail, YadA, Inv oraz białek wydzielniczych Yop u 193 osób chorych, podejrzanych o jersiniozę, u których wykryto przeciwciała dla somatycznych antygenów pałeczek Y. enterocolitica i/lub białek wydzielniczych Yop oraz u 85 osób zdrowych (krwiodawców). Badana grupa osób (liczba) Osoby z objawami bólów brzucha L = 121 Osoby z zapaleniem stawów L = 60 Osoby z rumieniem guzowatym L = 12 Krwiodawcy L = 85 Antygen Liczba i odsetek osób, u których wykryto przeciwciała w mianie diagnostycznie znamiennym w klasie: IgA IgG IgM IgA lub IgG lub IgM L (%) Chi 2 p L (%) Chi 2 p L (%) Chi 2 p L (%) Chi 2 p YeuB 21 (17,4) 8,0 0, (24,0) 10,6 <0, (32,2) 23,6 <0, (50,4) 40,8 <0,001 Ail 28 (23,1) 9,8 <0, (23,1) 9,8 <0, (34,7) 24,2 <0, (50,4) 35,8 <0,001 YadA 27 (22,3) 7,5 0, (21,5) 6,9 0, (23,1) 13,5 <0, (42,1) 22,5 <0,001 Inv 25 (20,7) 9,2 0, (34,7) 19,8 <0, (40,5) 29,1 <0, (58,7) 49,1 <0,001 YeuB 9 (15,0) 4,6 0,03 10 (16,7) 3,3 0,06 7 (11,7) 2,4 > 0,05 12 (20,0) 4,2 0,03 Ail 10 (16,7) 3,3 0,06 10 (16,7) 3,3 0,06 8 (13,3) 2,4 > 0,05 22 (36,7) 14,3 <0,001 YadA 13 (21,7) 5,4 0,02 14 (23,3) 6,5 0,01 6 (10,0) 1,5 >0,05 20 (33,3) 9,9 0,001 Inv 17 (28,3) 14,0 <0, (23,3) 6,5 0,01 11 (18,3) 4,3 0,03 30 (50,0) 27,8 <0,001 YeuB 2 (16,7) - >0,05 4 (33,3) - 0,01 4 (33,3) - 0,004 5 (41,7) - 0,003 Ail 4 (33,3) - 0,01 5 (41,7) - 0,002 2 (16,7) - >0,05 6 (50,0) - 0,001 YadA 5 (41,7) - 0,003 5 (41,7) - 0,003 2 (16,7) - >0,05 7 (58,3) - <0,001 Inv 4 (33,3) - 0,007 4 (33,3) - 0,01 3 (25,0) - 0,05 6 (50,0) - 0,001 YeuB 3 (3,5) (5,9) (3,5) (7,1) - - Ail 5 (5,9) (5,9) (4,7) (9,4) - - YadA 6 (7,1) (7,1) (3,5) (10,6) - - Inv 4 (4,78) (6,0) (5,9) (8,4) - -
8 28 W. Rastawicki Nr 1 Tabela IV Czułość i swoistość odczynu ELISA, w którym jako antygen zastosowano rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA, Inv w porównaniu do odczynu ELISA, w którym jako antygen zastosowano wydzielnicze białka Yop. Odczyn ELISA Czułość (%) Swoistość (%) z antygenem IgA IgG IgM IgA IgG IgM YeuB 22,1 24,7 28,3 95,6 96,7 94,6 Ail 26,1 24,7 29,3 97,1 95,4 95,5 YadA 32,7 28,2 22,9 95,5 95,6 95,6 Inv 26,6 35,2 38,3 95,8 92,3 93,6 giego tygodnia od wystąpienia objawów klinicznych nie wykrywa się przeciwciał dla białek YeuB, Ail, YadA i Inv, a następnie ich poziom gwałtownie narasta, lub gdy bezpośrednio po wystąpieniu objawów klinicznych, w pierwszej badanej próbce surowicy chorego stwierdza się znaczny ich poziom, a następnie obserwuje się stopniowy spadek miana przeciwciał. Taka dynamika przeciwciał najczęściej obserwowana była w przypadku powikłań jersiniozy, takich jak reaktywne zapalenie stawów i rumień guzowaty oraz w tych przypadkach z objawami ze strony układu pokarmowego, w których doszło już do powiększenia węzłów chłonnych krezki, objawiających się klinicznie intensywnym bólem w prawym dole biodrowym. DYSKUSJA Głównym celem podjętych badań było uzyskanie metodami inżynierii genetycznej wybranych białek pałeczek Y. enterocolitica biorących aktywny udział w patogenezie jersiniozy oraz ocena humoralnej odpowiedzi człowieka na te antygeny w przebiegu zakażenia. Jednym z białek, które uzyskano metodą rekombinacji genetycznej w przeprowadzonych badaniach było białko YeuB. We wcześniejszych badaniach Mertz i wsp. (12) opisali u szczepów Y. enterocolitica O3 białko o masie 19 kda, które po dostawowym wprowadzeniu szczurom indukowało u nich stan zapalny stawów. Autorzy ci wykryli również odczynem ELISA obecność przeciwciał w mianie diagnostycznie znamiennym (x + 3SD) dla tego białka u 43% osób chorych z udokumentowanym zakażeniem wywołanym przez pałeczki Y. enterocolitica O3. Co ciekawe nie stwierdzono obecności tych przeciwciał o osób zakażonych pałeczkami Y. enterocolitica należącymi do innych niż O3 grup serologicznych. W następnych latach, Skurnik i wsp. (16) sklonowali to białko i zidentyfikowali go jako małą β-podjednostkę ureazy pałeczek Y. enterocolitica (białko YeuB). Według tych autorów, białko to po uwolnieniu się z cytoplazmy komórek bakteryjnych może funkcjonować jako artrogenny lub immunogenny czynnik oraz wiązać się do cząsteczki HLA-B27 obecnej na limfocytach T. Jednakże późniejsze badania przeprowadzone przez Gripenberg-Lerche i wsp. (8) na mutantach pałeczek Y. enterocolitica O3 i O8 pozbawionych białka YeuB udowodniły, że białko to nie jest konieczne do indukcji zapalenia stawów u szczurów. Odpowiedź humoralną na białko o masie cząsteczkowej 19 kda pałeczek Y. enterocolitica (YeuB) osób z reaktywnym zapaleniem stawów badali również Appel i wsp. (1). Przeciwciała klasy IgG dla białka YeuB wykrywali u 93% osób z reaktywnym zapaleniem stawów i 55% osób z niesklasyfikowanym seronegatywnym zapaleniem stawów. Przeciwciała klasy IgA dla białka YeuB wykrywali odczynem western-immunoblotting odpowied-
9 Nr 1 Humoralna odpowiedź na rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA i Inv pałeczek Y. enterocolitica nio u 56% i 36% osób. U osób z zapaleniem stawów, wywołanym przez inne niż pałeczki Yersinia czynniki etiologiczne, jak również u osób zdrowych przeciwciała dla białka YeuB wykrywano w podobnym odsetku: przeciwciała klasy IgG u 26% a przeciwciała klasy IgA u 8% badanych osób. Przeprowadzone równolegle badania odczynem ELISA wykazały obecność przeciwciał klasy IgG dla wydzielniczych białek Yop u 62% osób z reaktywnym zapaleniem stawów i 46% z niesklasyfikowanym seronegatywnym zapaleniem stawów a przeciwciał klasy IgA odpowiednio u 46% i 35% osób. W badaniach tych u 32% osób z grupy kontrolnej wykrywano przeciwciała klasy IgG natomiast u 13% przeciwciała klasy IgA. U prawie wszystkich osób, u których występowały przeciwciała dla białka YeuB występowały także przeciwciała dla wydzielniczych białek Yop. W badaniach własnych wykorzystano sekwencję nukleotydów genu yeub kodującego białko YeuB, zamieszczoną przez Skurnik i wsp. (16) w Gen-Bank (Z18865). Przeprowadzone badania odczynem western-immunoblotting i ELISA wykazały obecność przeciwciał dla białka YeuB w próbkach surowicy wybranych osób z jersiniozą wywołaną zarówno przez pałeczki Y. enterocolitica O3, O8, O9 jak i Y. pseudotuberculosis I. Przeciwciała te znacznie częściej i w wyższych mianach wykrywano jednak u chorych osób z objawami bólów brzucha (43,3%) i rumienia guzowatego (41,7%) niż u osób z jersiniozą powikłaną zapaleniem stawów (16,7%). Taki obraz humoralnej odpowiedzi sugeruje, że białko YeuB nie jest charakterystyczne wyłącznie dla pałeczek Y. enterocolitica O3, a wykrycie w badanych próbkach surowicy obecności przeciwciał dla tego białka nie jest skorelowane z wystąpieniem u tych osób objawów zapalenia stawów. Innym niezmiernie interesującym białkiem, które uzyskano metodą rekombinacji genetycznej, jest białko inwazyna (Inv) kodowane przez chromosomalny gen inv. Przeprowadzone przez Young i wsp. (18) sekwencjonowanie genu inv u pałeczek Y. enterocolitica i Y. pseudotuberculosis wykazało 73% podobieństwo w budowie nukleotydowej tego genu u obydwu drobnoustrojów oraz 77% podobieństwo sekwencji aminokwasowej kodowanych białek. Inwazyna u pałeczek Y. pseudotuberculosis posiada masę 103 kda a u pałeczek Y. enterocolitica masę 92 kda (10, 18,). Białko to znajduję się w błonie zewnętrznej ściany komórkowej a jego produkcja zachodzi w temperaturze poniżej 30 o C (10, 13). Fortineau i wsp. (4) uzyskali białko inwazynę o masie 120 kda klonując gen inv pałeczek Y. pseudotuberculosis do szczepu E. coli J:L369. W swoich badaniach sprawdzali humoralną odpowiedź na inwazynę u 15 osób chorych na jersiniozę oraz u myszy zakażonych doustnie zjadliwymi szczepami pałeczek Y. pseudotuberculosis. Swoistość uzyskanego białka sprawdzali następnie w odczynie western-immunoblotting z monoklonalnymi przeciwciałami uzyskanymi poprzez immunizację myszy szczepem E. coli wykazujących nadprodukcję natywnej inwazyny. Surowice kontrolne, uzyskane od zdrowych, nowonarodzonych myszy nie wykazywały reakcji z klonowanym białkiem. W żadnej surowicy uzyskanej zarówno od osób chorych, zakażonych pałeczkami Y. enterocolitica i Y. pseudotuberculosis jak i immunizowanych myszy nie wykryli przeciwciał dla inwazyny. Według tych autorów, brak przeciwciał dla tego białka wynika z faktu, że ekspresja inwazyny zachodzi wyłącznie w temperaturze poniżej 30 o C. Tak więc, pałeczki Yersinia dzięki obecności inwazyny wyprodukowanej jeszcze przed wniknięciem drobnoustrojów do organizmu człowieka przenikają przez nabłonek jelitowy i dostają się do tkanki limfatycznej gdzie w temperaturze 37 o C nie zachodzi już synteza tego białka i jego prezentacja układowi immunologicznemu (4). 29
10 30 W. Rastawicki Nr 1 W badaniach własnych przeprowadzonych odczynem western-immunoblotting jak i odczynem ELISA przy użyciu jako antygenu rekombinowanego białka Inv uzyskano odmienne wyniki niż w pracy Fortineau i wsp. (4). Przeciwciała te wykryto zarówno w surowicy królików immunizowanych pałeczkami Y. enterocolitica i Y. pseudotuberculosis I jak również w surowicy osób z jersiniozą, z wysokim poziomem przeciwciał dla somatycznych antygenów pałeczek Y. enterocolitica i Y. pseudotuberculosis I oraz białek wydzielniczych Yop. Częstość występowania przeciwciał dla rekombinowanego białka Inv u osób jersiniozą z objawami bólów brzucha, zapalenia stawów i rumienia guzowatego była dość wysoka i wahała się od 41,7% do 50,4%. Porównując wyniki badań własnych i Fortineau i wsp. (4) nasuwa się przypuszczenie, że obserwowane różnice w obydwu doświadczeniach mogły wynikać z liczby badanych próbek surowicy. W dostępnym piśmiennictwie brak jest doniesień na temat humoralnej odpowiedzi człowieka na białka Ail i YadA. Uzyskane wyniki badań dowodzą jednak, że w przebiegu jersiniozy wytwarzane są przeciwciała dla tych białek. Co ciekawe, poziom przeciwciał dla wszystkich rekombinwanych białek nie był ściśle skorelowany z poziomem przeciwciał dla białek wydzielniczych Yop. I tak, u niektórych chorych, z wysokim poziomem przeciwciał dla białek Yop, nie stwierdzano podwyższonego poziomu przeciwciał dla rekombinowanych białek YeuB, Ail, Inv i Yad. Z drugiej strony, przeciwciała dla tych białek występowały jedynie sporadycznie u klinicznie zdrowych osób. Podsumowując wyniki badań należy stwierdzić, że wysoka swoistość rekombinowanych białek YeuB, Ail, Inv i Yad wskazuje na ich przydatność w odwoławczych badaniach humoralnej odpowiedzi na antygeny pałeczek Yersinia. Niestety, ze względu na niską czułość odczynu ELISA wykonywanego przy ich zastosowaniu, nie można polecić ich do rutynowej serodiagnostyki jersiniozy. W. Rastawicki HUMORAL RESPONSE TO RECOMBINANT YEUB, AIL, YADA AND INV PROTEINS OF YERSINIA ENTEROCOLITICA IN PATIENTS WITH YERSINIOSIS SUMMARY Recombinant YeuB, Ail, YadA and Inv proteins of Y. enterocolitica were expressing in E. coli BL21 (DE3) using the pet-30 Ek/LIC expression vector. Purification was accomplished by immobilized metal (Ni2+) affinity column chromatography (His-trap). The study population consisted of 193 patients with Y. enterocolitica infection and 85 blood donors. The results of the study revealed that antibodies to all recombinant proteins in diagnostically significant titers were diagnosed only in about half of the tested patients with yersiniosis confirmed by routine ELISA with Yop proteins as antigen. However, statistical analysis of the results showed that the frequency of detecting antibodies among the patients with yersiniosis was significantly higher in relation to blood donors (P<0.05). All the patients showed a roughly parallel development of the IgA, IgG and IgM-class antibodies during the acute phase of the infection. A maximum level of all three classes of immunoglobulins was registered during the second or third week after the beginning of clinical symptoms. More frequently the elevated antibody levels were detected among patients with gastrointestinal symptoms than with reactive arthritis.
11 Nr 1 Humoralna odpowiedź na rekombinowane białka YeuB, Ail, YadA i Inv pałeczek Y. enterocolitica PIŚMIENNICTWO Appel H, Mertz A, Distler A i inni. The 19 kda protein of Yersinia enterocolitica O3 is recognized on the cellular and humoral level by patients with Yersinia induced reactive arthritis. J Rheumatol 1999; 26: Bölin I, Norlander L, Wolf-Watz H. Temperature-inducible outer membrane protein of Yersinia pseudotuberculosis and Yersinia enterocolitica is associated with the virulence plasmid. Infect Immun 1982; 37: Bottone EJ. Yersinia enterocolitica: overview and epidemiologic correlates. Microbes Infect 1999; 1: Fortineau N, Luc Beretti J, Berche P, Simonet M. Lack of antibody response to invasin in humans with Yersiniosis. Clin Diagnc Lab Immunol 1994, 1: Gemski P, Lazere JR, Casey T. Plasmid associated with pathogenicity and calcium dependency of Yersinia enterocolitica. Infect Immun 1980; 27: Granfors K, Viljanen MK, Toivanen A. Measurement of immunoglobulin M, immunoglobulin G and immunoglobulin A antibodies against Yersinia enterocolitica by enzyme-linked immunosorbent assay: comparison of lipopolysaccharide and whole bacterium as antigen. J Clin Microbiol 1981; 14: Granfors K, Lahesmaa-Rantala R, Ståhlberg TH, Toivanen A. Comparison of bacteria with and without plasmid-encoded proteins as antigens for measurement of immunoglobulin M, G, and A antibodies to Yersinia enterocolitica by enzyme-linked immunosorbent assay. J Clin Microbiol 1989; 27: Gripenberg-Lerche C, Zhang L, Ahtonen P, Toivanen P, Skurnik M. Construction of urease-negative mutants of Yersinia enterocolitica serotypes O:3 and O:8: Role of urease in virulence and arthritogenicity. Infect Immun 2000, 68: Heesemann J, Gross U, Schmidt N, Laufs R. Immunochemical analysis of plasmid-encoded proteins released by enteropathogenic Yersinia sp. Grown in calcium-deficient media. Infect Immun 1986; 54: Isberg RR, Voorhis L, Falkow S. Identification of invasin: a protein that allows enteric bacteria to penetrate cultured mammalian cells. Cell 1987; 50: Mäki-Ikola O, Heesemann J, Lahesmaa R i inni. Combined use of released proteins and lipopolysaccharide in enzyme-linked immunosorbent assay for serologic screening of Yersinia infections. J Infec Dis 1991; 163: Mertz AKH, Batsford SR, Curschellas E i inni. Cationic Yersinia antigen-induced chronic allergic arthritis in rats- a model for reactive arthritis in human. J Clin Invest 1991; 88: Pepe JC, Miller L. The Yersinia enterocolitica inv gene product is an outer membrane protein that shares epitopes with Yersinia pseudotuberculosis invasin. J Bacteriol 1990, 172: Rastawicki W, Gierczyński R, Jagielski M. Wykorzystanie wydzielniczych białek Yop pałeczek Yersinia w serologicznej diagnostyce jersiniozy. I. Antygen do odczynu immunoenzymatycznego. Med Dośw Mikrobiol 2003; 55: Rastawicki W, Kałużewski S, Jagielski M, Gierczyński R. Porównanie przydatności testu ELISA opracowanego we własnym zakresie i komercyjnego testu ELISA firmy Mikrogen do serologicznej diagnostyki zakażeń wywoływanych przez pałeczki z rodzaju Yersinia. Med Dośw Mikrobiol 2001; 53: Skurnik M, Batsford S, Mertz A i inni. The putative arthritogenic cationic 19-kilodalton antigen of Yersinia enterocolitica is a urease B-subunit. Infect Immun 1993, 61: Wiśniewski J, Bielecki J. Mechanizmy wirulencji bakterii z rodzaju Yersinia. Post Mikrobiol 1996, 35,
12 32 W. Rastawicki Nr Young VB, Miller VL, Falkow S, Schoolnik GK. Sequence, localization and function of the invasin protein of Yersinia enterocolitica. Mol Microbiol 1990, 4: Otrzymano: 22 I 2009 r. Adres Autora: Warszawa, ul. Chocimska 24, Zakład Bakteriologii NIZP-PZH wrastawicki@pzh.gov.pl
Waldemar Rastawicki, Karolina Śmietańska, Anna Chróst, Tomasz Wołkowicz, Natalia Rokosz-Chudziak
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2016, 68: 23-31 Ocena przydatności uzyskanych we własnym zakresie rekombinowanych białek Yop pałeczek Yersinia enterocolitica jako wysoce swoistych antygenów w odczynach ELISA i
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2017, 69: Waldemar Rastawicki, Anna Chróst, Kornelia Gielarowiec
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2017, 69: 27-4 Ocena przydatności opracowanego we własnym zakresie lateksowego testu aglutynacyjnego do poszukiwania przeciwciał dla antygenów pałeczek Yersinia enterocolitica i
Bardziej szczegółowoOCENA ODCZYNEM WESTERN- IMMUNOBLOTTING ANTYGENOWYCH WŁAŚCIWOŚCI BIAŁEK CAMPYLOBACTER JEJUNI I CAMPYLOBACTER COLI
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2008, 60: 121-129 Natalia Rokosz, WaldemarRastawicki,Marek Jagielski OCENA ODCZYNEM WESTERN- IMMUNOBLOTTING ANTYGENOWYCH WŁAŚCIWOŚCI BIAŁEK CAMPYLOBACTER JEJUNI I CAMPYLOBACTER COLI
Bardziej szczegółowoWystępowanie przeciwciał dla pałeczek Francisella tularensis w poszczególnych podklasach IgG u osób z tularemią
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2014, 66: 11-15 Występowanie przeciwciał dla pałeczek Francisella tularensis w poszczególnych podklasach IgG u osób z tularemią Serum immunoglobulin IgG subclass distribution of
Bardziej szczegółowoUse of recombinant P1 protein of Mycoplasma pneumoniae for the serodiagnosis of mycoplasmosis
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2012, 64: 229-237 Zastosowanie metody inżynierii genetycznej do uzyskania białka P1 Mycoplasma pneumoniae oraz ocena jego przydatności w serodiagnostyce mykoplazmozy u ludzi Use
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2017, 69: Waldemar Rastawicki, Kornelia Gielarowiec, Anna Chróst
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2017, 69: 127-141 Występowanie przeciwciał dla rekombinowanych białek i lipopolisacharydów werotoksycznych pałeczek Escherichia coli (VTEC) w poszczególnych podklasach IgG u dzieci
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2008, 60: Waldemar Rastawicki. Zakład Bakteriologii NIZP-PZH w Warszawie Kierownik: prof. dr hab. M.
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2008, 60: 27-37 Waldemar Rastawicki HUMORALNA ODPOWIEDŹ NA WYBRANE ANTYGENY PAŁECZEK YERSINIA ENTEROCOLITICA I YERSINIA PSEUDOTUBERCULOSIS W PRZEBIEGU JERSINIOZY U LUDZI. IV. OCENA
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2015, 67: Waldemar Rastawicki, Stanisław Kałużewski
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2015, 67: 165-171 Zastosowanie odczynu immunoenzymatycznego ELISA do poszukiwania przeciwciał dla lipopolisacharydowych antygenów somatycznych O oraz otoczkowego antygenu Vi pałeczek
Bardziej szczegółowoWykorzystanie wybranych, rekombinowanych białek w serodiagnostyce zakażeń wywoływanych przez werotoksyczne pałeczki Escherichia coli (VTEC) u ludzi
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2016, 68: 183-190 Wykorzystanie wybranych, rekombinowanych białek w serodiagnostyce zakażeń wywoływanych przez werotoksyczne pałeczki Escherichia coli (VTEC) u ludzi Use of selected
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2011, 63: Natalia Rokosz, Waldemar Rastawicki, Marek Jagielski
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2011, 63: 299-304 Natalia Rokosz, Waldemar Rastawicki, Marek Jagielski Wykorzystanie odczynu ELISA do poszukiwania przeciwciał dla lipopolisacharydów werotoksycznych pałeczek okrężnicy
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2013, 65: Natalia Rokosz-Chudziak, Waldemar Rastawicki, Katarzyna Zacharczuk, Rafał Gierczyński
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2013, 65: 245-254 Elektroforetyczna i immunologiczna analiza natywnych białek wydzielniczych wytwarzanych in vitro w warunkach indukcji Ysa (Yersinia secretion apparatus) przez izolaty
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2014, 66: Waldemar Rastawicki, Natalia Rokosz-Chudziak
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2014, 66: 161-175 Ocena przydatności odczynu immunoenzymatycznego ELISA do poszukiwania przeciwciał dla lipopolisacharydów enterokrwotocznych pałeczek Escherichia coli (EHEC) u osób
Bardziej szczegółowoOCENA PRZYDATNOŚCI WYBRANYCH ANTYGENÓW MYCOPLASMA PNEUMONIAE DO SERODIAGNOSTYKI MYKOPLAZMOZY
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2009, 61: 175 182 Waldemar Rastawicki, Natalia Rokosz, Marek Jagielski OCENA PRZYDATNOŚCI WYBRANYCH ANTYGENÓW MYCOPLASMA PNEUMONIAE DO SERODIAGNOSTYKI MYKOPLAZMOZY Zakład Bakteriologii
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2013, 65: Waldemar Rastawicki, Karolina Śmietańska, Natalia Rokosz-Chudziak, Marek Jagielski
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2013, 65: 269-274 Występowanie przeciwciał dla toksyny krztuścowej i włókienkowej hemaglutyniny Bordetella pertussis w poszczególnych podklasach IgG w przebiegu krztuśca Serum immunoglobulin
Bardziej szczegółowoWaldemar Rastawicki, Stanisław Kałużewski, Natalia Rokosz
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2010, 62: 21-28 Waldemar Rastawicki, Stanisław Kałużewski, Natalia Rokosz OCENA PRZYDATNOŚCI IMMUNOENZYMATYCZNEGO ODCZYNU ELISA DO WYKRYWANIA PRZECIWCIAŁ DLA LIPOPOLISACHARYDU PAŁECZEK
Bardziej szczegółowoOcena wiarygodności poziomu przeciwciał przyjmowanego za diagnostycznie znamienny w serodiagnostyce krztuśca wykonywanej odczynem ELISA
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2011, 63: 73-80 Waldemar Rastawicki, Iwona Paradowska-Stankiewicz, Paweł Stefanoff, Aleksandra A. Zasada Ocena wiarygodności poziomu przeciwciał przyjmowanego za diagnostycznie znamienny
Bardziej szczegółowoWykrywanie przeciwciał dla pałeczek Campylobacter jejuni u dzieci z zespołem Guillain-Barré przy zastosowaniu różnych preparatów antygenowych
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2011, 63: 255-261 Natalia Rokosz 1, Waldemar Rastawicki 1, Marek Jagielski 1, Zofia Hetkowska- Abramczyk 2 Wykrywanie przeciwciał dla pałeczek Campylobacter jejuni u dzieci z zespołem
Bardziej szczegółowoMetody badania ekspresji genów
Metody badania ekspresji genów dr Katarzyna Knapczyk-Stwora Warunki wstępne: Proszę zapoznać się z tematem Metody badania ekspresji genów zamieszczonym w skrypcie pod reakcją A. Lityńskiej i M. Lewandowskiego
Bardziej szczegółowostarszych na półkuli zachodniej. Typową cechą choroby jest heterogenny przebieg
STRESZCZENIE Przewlekła białaczka limfocytowa (PBL) jest najczęstszą białaczką ludzi starszych na półkuli zachodniej. Typową cechą choroby jest heterogenny przebieg kliniczny, zróżnicowane rokowanie. Etiologia
Bardziej szczegółowoTechniki immunoenzymatycznego oznaczania poziomu hormonów (EIA)
Techniki immunoenzymatycznego oznaczania poziomu hormonów (EIA) Wstęp: Test ELISA (ang. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), czyli test immunoenzymatyczny (ang. Enzyme Immunoassay - EIA) jest obecnie szeroko
Bardziej szczegółowoOcena jakościowa reakcji antygen - przeciwciało. Mariusz Kaczmarek
Ocena jakościowa reakcji antygen - przeciwciało Mariusz Kaczmarek Antygeny Immunogenność - zdolność do wzbudzenia przeciwko sobie odpowiedzi odpornościowej swoistej; Antygenowość - zdolność do reagowania
Bardziej szczegółowoKlonowanie molekularne Kurs doskonalący. Zakład Geriatrii i Gerontologii CMKP
Klonowanie molekularne Kurs doskonalący Zakład Geriatrii i Gerontologii CMKP Etapy klonowania molekularnego 1. Wybór wektora i organizmu gospodarza Po co klonuję (do namnożenia DNA [czy ma być metylowane
Bardziej szczegółowoSeroprevalence of antibodies against verocytotoxin-producing Escherichia coli (VTEC) in individuals from selected groups of the Polish population
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2017, 69: 231-237 Ocena częstości występowania przeciwciał dla werotoksycznych pałeczek Escherichia coli (VTEC) u osób z wybranych grup populacji polskiej Seroprevalence of antibodies
Bardziej szczegółowoZestawy do izolacji DNA i RNA
Syngen kolumienki.pl Gotowe zestawy do izolacji i oczyszczania kwasów nukleinowych Zestawy do izolacji DNA i RNA Katalog produktów 2012-13 kolumienki.pl Syngen Biotech Sp. z o.o., 54-116 Wrocław, ul. Ostródzka
Bardziej szczegółowoProblems in the serological diagnosis of atypical pneumonia caused by Legionella pneumophila and Mycoplasma pneumoniae
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2015, 67: 181-188 Problemy w serologicznej diagnostyce atypowych zapaleń płuc na przykładzie wyników badań w kierunku zakażeń wywoływanych przez Legionella pneumophila oraz Mycoplasma
Bardziej szczegółowoZakład Bakteriologii Narodowego Instytutu Zdrowia Publicznego Państwowego Zakładu Higieny
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2014, 66: 195-207 Częstość występowania przeciwciał dla rekombinowanego białka P39 pałeczek C. jejuni u wybranych osób z zaburzeniami żołądkowo-jelitowymi oraz z reaktywnym zapaleniem
Bardziej szczegółowoSerologiczna diagnostyka bakteryjnych zakażeń człowieka błędy popełniane w wyborze i wykonaniu badań laboratoryjnych oraz w interpretacji ich wyników
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2017, 69: 289-299 Serologiczna diagnostyka bakteryjnych zakażeń człowieka błędy popełniane w wyborze i wykonaniu badań laboratoryjnych oraz w interpretacji ich wyników Serological
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Chlamydia trachomatis w moczu lub w kulturach komórkowych
Nr kat. PK15 Wersja zestawu: 1.2016 Zestaw do wykrywania w moczu lub w kulturach komórkowych na 50 reakcji PCR (50µl), włączając w to kontrole Detekcja oparta jest na amplifikacji fragmentu genu crp (cysteine
Bardziej szczegółowoJacek Noworyta, Maria Brasse-Rumin, Maja Budziszewska, Jakub Ząbek
Artykuł oryginalny/original paper Reumatologia 2011; 49, 1: 32 39 Występowanie, swoistość i krzyżowa reaktywność przeciwciał antybakteryjnych (Yersinia spp., Salmonella Enteritidis, Chlamydia trachomatis,
Bardziej szczegółowoSposób otrzymywania białek o właściwościach immunoregulatorowych. Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania fragmentów witellogeniny.
1 Sposób otrzymywania białek o właściwościach immunoregulatorowych Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania fragmentów witellogeniny. Wynalazek może znaleźć zastosowanie w przemyśle spożywczym i
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa tel. 22 572 0735, 606448502
Bardziej szczegółowoLabowe know-how : ELISA
Labowe know-how : ELISA Test immunoenzymatyczny ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) jest jedną z najpowszechniejszych metod stosowanych w badaniach diagnostycznych i naukowych. Jej zadaniem jest
Bardziej szczegółowoZakład Bakteriologii Narodowego Instytutu Zdrowia Publicznego Państwowego Zakładu Higieny w Warszawie
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2012, 64: 79-85 Wpływ wielokrotnego, cyklicznego zamrażania i rozmrażania próbki surowicy na poziom przeciwciał klasy IgA, IgG i IgM dla wybranych antygenów bakteryjnych Effect of
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 3. Amplifikacja genu ccr5 Homo sapiens wykrywanie delecji Δ32pz warunkującej oporność na wirusa HIV
Ćwiczenie 3. Amplifikacja genu ccr5 Homo sapiens wykrywanie delecji Δ32pz warunkującej oporność na wirusa HIV Cel ćwiczenia Określenie podatności na zakażenie wirusem HIV poprzez detekcję homo lub heterozygotyczności
Bardziej szczegółowoE.coli Transformer Kit
E.coli Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli. Metoda chemiczna. wersja 1117 6 x 40 transformacji Nr kat. 4020-240 Zestaw zawiera komplet odczynników
Bardziej szczegółowoNowoczesne systemy ekspresji genów
Nowoczesne systemy ekspresji genów Ekspresja genów w organizmach żywych GEN - pojęcia podstawowe promotor sekwencja kodująca RNA terminator gen Gen - odcinek DNA zawierający zakodowaną informację wystarczającą
Bardziej szczegółowoDiagnostyka wirusologiczna w praktyce klinicznej
Diagnostyka wirusologiczna w praktyce klinicznej Ponad 60% zakażeń w praktyce klinicznej jest wywołana przez wirusy. Rodzaj i jakość materiału diagnostycznego (transport!) oraz interpretacja wyników badań
Bardziej szczegółowoJacek Noworyta, Maja Machcińska, Maria Brasse-Rumin, Jakub Ząbek, Jolanta Gago
Artykuł oryginalny/original paper Reumatologia 12; 5, 3: 2 21 Diagnostyczne znaczenie potwierdzania obecności swoistych przeciwciał przeciwko Yersinia spp. oraz Chlamydia trachomatis i Chlamydophila pneumoniae
Bardziej szczegółowoZakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA
Zakład Biologii Molekularnej Materiały do ćwiczeń z przedmiotu: BIOLOGIA MOLEKULARNA Zakład Biologii Molekularnej Wydział Farmaceutyczny, WUM ul. Banacha 1, 02-097 Warszawa IZOLACJA DNA Z HODOWLI KOMÓRKOWEJ.
Bardziej szczegółowoMaking the impossible possible: the metamorphosis of Polish Biology Olympiad
Making the impossible possible: the metamorphosis of Polish Biology Olympiad Takao Ishikawa Faculty of Biology, University of Warsaw, Poland Performance of Polish students at IBO Gold Silver Bronze Merit
Bardziej szczegółowoSZCZEGÓŁOWY OPIS PRZEDMIOTU ZAMÓWIENIA Część I
Część I 1. API 20 E zastosowanie: identyfikacja Salmonella, Yersinia; opakowanie zawiera 25 pasków 2. Suspension Medium (5ml) zastosowanie: identyfikacja Salmonella; produkt płynny; składowe do zestawu
Bardziej szczegółowoWirus zapalenia wątroby typu B
Wirus zapalenia wątroby typu B Kliniczne następstwa zakażenia odsetek procentowy wyzdrowienie przewlekłe zakażenie Noworodki: 10% 90% Dzieci 1 5 lat: 70% 30% Dzieci starsze oraz 90% 5% - 10% Dorośli Choroby
Bardziej szczegółowoProteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich lub prawie wszystkich białek komórkowych
Proteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich lub prawie wszystkich białek komórkowych Zalety w porównaniu z analizą trankryptomu: analiza transkryptomu komórki identyfikacja mrna nie musi jeszcze oznaczać
Bardziej szczegółowoPolimeraza Taq (1U/ l) 1-2 U 1 polimeraza Taq jako ostatni składniki mieszaniny końcowa objętość
Ćwiczenie 6 Technika PCR Celem ćwiczenia jest zastosowanie techniki PCR do amplifikacji fragmentu DNA z bakterii R. leguminosarum bv. trifolii TA1 (RtTA1). Studenci przygotowują reakcję PCR wykorzystując
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Babesia spp. i Theileria spp. w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych
Nr kat. PK25N Wersja zestawu: 1.2012 Zestaw do wykrywania spp. i Theileria spp. w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych dwie oddzielne reakcje PCR 2x50 reakcji PCR (50 µl), włączając w to kontrole Zestaw
Bardziej szczegółowoZASTOSOWANIE TESTU IMMUNOENZYMATYCZNEGO ELISA W SERODIAGNOSTYCE PRZEWLEKŁEJ BRUCELOZY
PRZEGL EPIDEMIOL 200;55:299-0 Dorota Lisik, Beata Sobieszczańska 2 ZASTOSOWANIE TESTU IMMUNOENZYMATYCZNEGO ELISA W SERODIAGNOSTYCE PRZEWLEKŁEJ BRUCELOZY Wojewódzki Szpital Specjalistyczny Chorób Infekcyjnych
Bardziej szczegółowoAE/ZP-27-03/16 Załącznik Nr 6
AE/ZP--0/ Załącznik Nr Wymagania dla przedmiotu zamówienia oferowanego w Pakietach Nr - Lp Parametry wymagane Wymagania dla przedmiotu zamówienia oferowanego w Pakiecie Nr poz..... Surowica antyglobulinowa
Bardziej szczegółowoHybrydyzacja kwasów nukleinowych
Hybrydyzacja kwasów nukleinowych Jaka jest lokalizacja genu na chromosomie? Jakie jest jego sąsiedztwo? Hybrydyzacja - powstawanie stabilnych struktur dwuniciowych z cząsteczek jednoniciowych o komplementarnych
Bardziej szczegółowoDiagnostyka zakażeń EBV
Diagnostyka zakażeń EBV Jakie wyróżniamy główne konsekwencje kliniczne zakażenia EBV: 1) Mononukleoza zakaźna 2) Chłoniak Burkitta 3) Potransplantacyjny zespół limfoproliferacyjny Jakie są charakterystyczne
Bardziej szczegółowoPrzeciwciała poliklonalne przeciwko białkom Helicobacter pylori oraz sposób ich wytwarzania. (74) Pełnomocnik:
RZECZPOSPOLITA POLSKA Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 201982 (21) Numer zgłoszenia: 361069 (22) Data zgłoszenia: 03.07.2003 (13) B1 (51) Int.Cl. A61K 39/40 (2006.01)
Bardziej szczegółowoWpływ warunków przechowywania na wyniki oznaczeń poziomu przeciwciał w próbkach ludzkiej surowicy
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2011, 63: 189-193 Wiesław Truszkiewicz Wpływ warunków przechowywania na wyniki oznaczeń poziomu przeciwciał w próbkach ludzkiej surowicy Wojewódzka Stacja Sanitarno-Epidemiologiczna
Bardziej szczegółowoDrożdżowe systemy ekspresyjne
Drożdże Drożdżowe systemy ekspresyjne Zalety: możliwość uzyskania dużej biomasy modyfikacje postranslacyjne eksprymowanych białek transport eksprymowanych białek do pożywki Duża biomasa W przypadku hodowli
Bardziej szczegółowoInvestigation of molecular virulence factors of Yersinia enterocolitica 1B/O8 human clinical isolates collected in Poland in 2009
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2013, 65: 233-243 Analiza profilu genetycznych markerów chorobotwórczości pałeczek Yersinia enterocolitica bioserotypu 1B/O8 wyizolowanych z materiału klinicznego w Polsce w 2009
Bardziej szczegółowoInstrukcje do ćwiczeń oraz zakres materiału realizowanego na wykładach z przedmiotu Inżynieria bioprocesowa na kierunku biotechnologia
1 Zakład Mikrobiologii UJK Instrukcje do ćwiczeń oraz zakres materiału realizowanego na wykładach z przedmiotu Inżynieria bioprocesowa na kierunku biotechnologia 2 Zakład Mikrobiologii UJK Zakres materiału
Bardziej szczegółowoKLONOWANIE DNA REKOMBINACJA DNA WEKTORY
KLONOWANIE DNA Klonowanie DNA jest techniką powielania fragmentów DNA DNA można powielać w komórkach (replikacja in vivo) W probówce (PCR) Do przeniesienia fragmentu DNA do komórek gospodarza potrzebny
Bardziej szczegółowoZestaw do wykrywania Anaplasma phagocytophilum w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych
Nr kat. PK24N Wersja zestawu: 1.2016 Zestaw do wykrywania phagocytophilum w kleszczach, krwi i hodowlach komórkowych dwie oddzielne reakcje PCR 2x50 reakcji PCR (50 µl), włączając w to kontrole Detekcja
Bardziej szczegółowoTaqNova-RED. Polimeraza DNA RP20R, RP100R
TaqNova-RED Polimeraza DNA RP20R, RP100R RP20R, RP100R TaqNova-RED Polimeraza DNA Rekombinowana termostabilna polimeraza DNA Taq zawierająca czerwony barwnik, izolowana z Thermus aquaticus, o przybliżonej
Bardziej szczegółowoInżynieria Genetyczna ćw. 3
Materiały do ćwiczeń z przedmiotu Genetyka z inżynierią genetyczną D - blok Inżynieria Genetyczna ćw. 3 Instytut Genetyki i Biotechnologii, Wydział Biologii, Uniwersytet Warszawski, rok akad. 2018/2019
Bardziej szczegółowoComparison of usefulness of commercial ELISA Virion/Serion, homemade ELISA and tube agglutination test in serodiagnosis of tularemia
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2013, 65: 255 261 Porównanie przydatności komercyjnego zestawu ELISA firmy Virion/Serion, zestawu ELISA opracowanego we własnym zakresie oraz odczynu aglutynacji probówkowej w serodiagnostyce
Bardziej szczegółowoWojewódzka Stacja Sanitarno-Epidemiologiczna w Poznaniu
Wojewódzka Stacja Sanitarno-Epidemiologiczna w Poznaniu PROGRAM WHO ELIMINACJI ODRY/RÓŻYCZKI Program eliminacji odry i różyczki został uchwalony przez Światowe Zgromadzenie Zdrowia 28 maja 2003 roku. Realizacja
Bardziej szczegółowoSeroprevalence of antibodies against lipopolysaccharides of Bordetella parapertussis in patients with prolonged caught in Poland
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2012, 64: 277-283 Częstość występowania przeciwciał dla lipopolisacharydów pałeczek Bordetella parapertussis u osób z przewlekłym kaszlem w Polsce Seroprevalence of antibodies against
Bardziej szczegółowoIdentyfikacja pałeczek Yersinia enterocolitica z wykorzystaniem spektroskopii mas typu MALDI-TOF
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2012, 64: 123-128 Identyfikacja pałeczek Yersinia enterocolitica z wykorzystaniem spektroskopii mas typu MALDI-TOF Rapid identification of Yersinia enterocolitica by matrix-assisted
Bardziej szczegółowoĆwiczenie 2. Identyfikacja płci z wykorzystaniem genu amelogeniny (AMGXY)
Ćwiczenie 2. Identyfikacja płci z wykorzystaniem genu amelogeniny (AMGXY) Cel ćwiczenia Amplifikacja fragmentu genu amelogeniny, znajdującego się na chromosomach X i Y, jako celu molekularnego przydatnego
Bardziej szczegółowoSpecyfika badania EliSpot
Specyfika badania EliSpot Materiały informacyjne Autor: dr hab. n. med. Tomasz Wielkoszyński, profesor nadzw. WSPS - Test EliSpot 2 w diagnostyce boreliozy - Testy EliSpot w diagnostyce innych zakażeń
Bardziej szczegółowoWybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna
Wybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna Proteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich (lub prawie wszystkich) białek komórkowych Zalety analizy proteomu np. w porównaniu z analizą trankryptomu:
Bardziej szczegółowoPCR bez izolacji testujemy Direct PCR Kits od ThermoFisher Scientific
PCR bez izolacji testujemy Direct PCR Kits od ThermoFisher Scientific Specjalnie dla Was przetestowaliśmy w naszym laboratorium odczynniki firmy Thermo Scientific umożliwiające przeprowadzanie reakcji
Bardziej szczegółowoPrevalence of Yersinia spp., Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae and Borrelia burgdorferi antibodies in healthy blood donors sera
Original paper/artykuł oryginalny Reu ma to lo gia 13; 51, 6: 422 428 DOI:.5114/reum.13.3966 Prevalence of Yersinia spp., Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae and Borrelia burgdorferi antibodies
Bardziej szczegółowoZasady oceniania rozwiązań zadań 48 Olimpiada Biologiczna Etap centralny
Zasady oceniania rozwiązań zadań 48 Olimpiada Biologiczna Etap centralny Zadanie 1 1 pkt. za prawidłowe podanie typów dla obydwu zwierząt oznaczonych literami A oraz B. A. ramienionogi, B. mięczaki A.
Bardziej szczegółowow kale oraz innych laboratoryjnych markerów stanu zapalnego (białka C-reaktywnego,
1. Streszczenie Wstęp: Od połowy XX-go wieku obserwuje się wzrost zachorowalności na nieswoiste choroby zapalne jelit (NChZJ), w tym chorobę Leśniowskiego-Crohna (ChLC), zarówno wśród dorosłych, jak i
Bardziej szczegółowoPytania Egzamin magisterski
Pytania Egzamin magisterski Międzyuczelniany Wydział Biotechnologii UG i GUMed 1. Krótko omów jakie informacje powinny być zawarte w typowych rozdziałach publikacji naukowej: Wstęp, Materiały i Metody,
Bardziej szczegółowoAdam Dawidowski Klasa III b. mgr Beata Ulczyńska
Adam Dawidowski Klasa III b (autor) mgr Beata Ulczyńska (opiekun) BADANIE WPŁYWU GENU orf654 Z OPERONU mboii NA ZJAWISKO PRZESUNIĘCIA RAMKI ODCZYTU TRANSLACJI -1 W ZMUTOWANYM GENIE mboiim2δ I Akademickie
Bardziej szczegółowoCzęść praktyczna: Metody pozyskiwania komórek do badań laboratoryjnych cz. I
Ćwiczenie 1 Część teoretyczna: Budowa i funkcje układu odpornościowego 1. Układ odpornościowy - główne funkcje, typy odpowiedzi immunologicznej, etapy odpowiedzi odpornościowej. 2. Komórki układu immunologicznego.
Bardziej szczegółowoPromotor: prof. dr hab. Katarzyna Bogunia-Kubik Promotor pomocniczy: dr inż. Agnieszka Chrobak
INSTYTUT IMMUNOLOGII I TERAPII DOŚWIADCZALNEJ IM. LUDWIKA HIRSZFELDA WE WROCŁAWIU POLSKA AKADEMIA NAUK mgr Milena Iwaszko Rola polimorfizmu receptorów z rodziny CD94/NKG2 oraz cząsteczki HLA-E w patogenezie
Bardziej szczegółowoSYLABUS. Wydział Biologiczno-Rolniczy. Katedra Biochemii i Biologii Komórki
SYLABUS 1.1. PODSTAWOWE INFORMACJE O PRZEDMIOCIE/MODULE Nazwa przedmiotu/ modułu Biologia molekularna z elementami inżynierii genetycznej Kod przedmiotu/ modułu* Wydział (nazwa jednostki prowadzącej kierunek)
Bardziej szczegółowoZestaw SIT Szybki Identyfikacyjny Test Szczepów Salmonella Enteritidis i Typhimurium
Zestaw SIT Szybki Identyfikacyjny Test Szczepów Salmonella Enteritidis i Typhimurium W związku z wprowadzeniem w 2011 roku przez Komisję UE zmian w rozporządzeniach nr 2160/3003 i 2073/2005 w odniesieniu
Bardziej szczegółowoArtykuł oryginalny/original paper
Artykuł oryginalny/original paper Reumatologia 28; 46, 4: 198 29 Ocena wartości serodiagnostyki bakteriologicznej u chorych na niesklasyfikowane zapalenie stawów. Część II. Analiza badań surowic na obecność
Bardziej szczegółowoMarek Jagielski, Waldemar Rastawicki, Stanisław Kałużewski, Rafał Gierczyński JERSINIOZA - NIEDOCENIANA CHOROBA ZAKAŹNA
PRZEGL EPIDEMIOL 2002;56:57-64 Marek Jagielski, Waldemar Rastawicki, Stanisław Kałużewski, Rafał Gierczyński JERSINIOZA - NIEDOCENIANA CHOROBA ZAKAŹNA Zakład Bakteriologii Państwowego Zakładu Higieny w
Bardziej szczegółowoMetody analizy genomu
Metody analizy genomu 1. Mapowanie restrykcyjne. 2. Sondy do rozpoznawania DNA 3. FISH 4. Odczytanie sekwencji DNA 5. Interpretacja sekwencji DNA genomu 6. Transkryptom 7. Proteom 1. Mapy restrykcyjne
Bardziej szczegółowoWybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna
Wybrane techniki badania białek -proteomika funkcjonalna Proteomika: umożliwia badanie zestawu wszystkich (lub prawie wszystkich) białek komórkowych Zalety analizy proteomu w porównaniu z analizą trankryptomu:
Bardziej szczegółowoFORMULARZ CENOWY CZĘŚĆ I. Jedn. miary
FORMULARZ CENOWY CZĘŚĆ I 1. API 20 E zastosowanie: identyfikacja Salmonella, Yersinia; opakowanie zawiera 25 pasków; 2. Suspension Medium (5ml) zastosowanie: identyfikacja Salmonella; produkt płynny; składowe
Bardziej szczegółowoMaciej Korpysz. Zakład Diagnostyki Biochemicznej UM Lublin Dział Diagnostyki Laboratoryjnej Samodzielny Publiczny Szpital Kliniczny Nr 1 w Lublinie
Nowe możliwości oceny białka monoklonalnego za pomocą oznaczeń par ciężki-lekki łańcuch immunoglobulin (test Hevylite) u chorych z dyskrazjami plazmocytowymi. Maciej Korpysz Zakład Diagnostyki Biochemicznej
Bardziej szczegółowoMED. DOŚW. MIKROBIOL., 2014, 66: 89-98
MED. DOŚW. MIKROBIOL., 2014, 66: 89-98 Opracowanie szybkiego testu PCR-RFLP do identyfikacji pałeczek Yersinia enterocolitica bioserotypu 1B/O8 z epidemicznego szczepu tych drobnoustrojów izolowanych w
Bardziej szczegółowoLaboratorium Pomorskiego Parku Naukowo-Technologicznego Gdynia.
Laboratorium Pomorskiego Parku Naukowo-Technologicznego Gdynia www.ppnt.pl/laboratorium Laboratorium jest częścią modułu biotechnologicznego Pomorskiego Parku Naukowo Technologicznego Gdynia. poprzez:
Bardziej szczegółowoSpis treści. Wstęp. Obiekt. Pracownia Biologii Molekularnej. Część II. Ekspresja i oczyszczanie białek
Pracownia Biologii Molekularnej Część II Ekspresja i oczyszczanie białek Spis treści 1 Wstęp 2 Obiekt 3 Namnażanie białka w komórkach bakterii Escherichia Coli 3.1 Pożywki do hodowli 3.2 Rozwój hodowli
Bardziej szczegółowoAmpli-LAMP Salmonella species
Novazym Products Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań, tel. +48 0 61 610 39 10, fax +48 0 61 610 39 11, email info@novazym.com Zestaw do identyfikacji materiału genetycznego bakterii z rodzaju
Bardziej szczegółowoAmpliTest Babesia spp. (PCR)
AmpliTest Babesia spp. (PCR) Zestaw do wykrywania sekwencji DNA specyficznych dla pierwotniaków z rodzaju Babesia techniką PCR Nr kat.: BAC21-100 Wielkość zestawu: 100 oznaczeń Objętość pojedynczej reakcji:
Bardziej szczegółowo- oznaczenia naukowo-badawcze. - jedna z podstawowych technik. - oznaczenia laboratoryjnodiagnostyczne. Elektroforeza. badawczych.
Elektroforeza - jedna z podstawowych technik badawczych - oznaczenia naukowo-badawcze - oznaczenia laboratoryjnodiagnostyczne Annals of the New York Academy of Sciences 928:54-64 (2001) 2001 New York
Bardziej szczegółowoHybrydyzacja kwasów nukleinowych
Hybrydyzacja kwasów nukleinowych Jaka jest lokalizacja tego genu na chromosomie? Jakie jest jego sąsiedztwo? Hybrydyzacja - powstawanie stabilnych struktur dwuniciowych z cząsteczek jednoniciowych o komplementarnych
Bardziej szczegółowoPODSTAWY IMMUNOLOGII Komórki i cząsteczki biorące udział w odporności nabytej (cz.i): wprowadzenie (komórki, receptory, rozwój odporności nabytej)
PODSTAWY IMMUNOLOGII Komórki i cząsteczki biorące udział w odporności nabytej (cz.i): wprowadzenie (komórki, receptory, rozwój odporności nabytej) Nadzieja Drela ndrela@biol.uw.edu.pl Konspekt do wykładu
Bardziej szczegółowoSamodzielny Publiczny Zespół... Zakładów Opieki Zdrowotnej w Kozienicach... ul. Al. Wł. Sikorskiego 10
Załącznik nr 2 do SIWZ Wykonawca:... Samodzielny Publiczny Zespół... Zakładów Opieki Zdrowotnej w Kozienicach... ul. Al. Wł. Sikorskiego 10 tel.:/fax:... 26-900 Kozienice tel.:/fax: (48) 382 88 00/ (48)
Bardziej szczegółowoWYNALAZKI BIOTECHNOLOGICZNE W POLSCE. Ewa Waszkowska ekspert UPRP
WYNALAZKI BIOTECHNOLOGICZNE W POLSCE Ewa Waszkowska ekspert UPRP Źródła informacji w biotechnologii projekt SLING Warszawa, 9-10.12.2010 PLAN WYSTĄPIENIA Umocowania prawne Wynalazki biotechnologiczne Statystyka
Bardziej szczegółowoDiagnostyka HIV 1. Na czym polegają testy HIV? a) testy przesiewowe
Diagnostyka HIV 1. Na czym polegają testy HIV? a. testy przesiewowe b. test Western blot 2. Kto powinien zrobić sobie test na HIV? 3. Kiedy wykonywać testy HIV? 4. Dzieci kobiet zakażonych HIV 5. Gdzie
Bardziej szczegółowoZP/220/106/17 Parametry wymagane dla zadania nr 1 załącznik nr 4 do formularza oferty PO MODYFIKACJI
Zadanie nr 1 odczynniki do badań serologicznych UWAGA: wszystkie metodyki badań opracowane przez producentów powinny być zgodne z obowiązującymi przepisami. Lp. Nazwa PARAMETRY WYMAGANE TAK / NIE Reagujący
Bardziej szczegółowoSTĘŻENIE CHEMOKINY CXCL13 W PŁYNIE MÓZGOWO-RDZENIOWYM CHORYCH Z NEUROBORELIOZĄ OBSERWACJE WŁASNE
PRZEGL EPIDEMIOL 2015; 69: 851-855 Problemy zakażeń Lucjan Kępa, Barbara Oczko-Grzesik, Barbara Sobala-Szczygieł, Anna Boroń- Kaczmarska STĘŻENIE CHEMOKINY CXCL13 W PŁYNIE MÓZGOWO-RDZENIOWYM CHORYCH Z
Bardziej szczegółowoMożliwości interpretacji to przedstawienie wyniku badania.
Zasady pobierania prób i interpretacji wyników badań laboratoryjnych Serologia. Interpretacja wyników badań W badaniach serologicznych laboratoria posługują się przede wszystkim komercyjnymi testami ELISA.
Bardziej szczegółowoOcena rozprawy doktorskiej Pani lek. wet. Iwony Kozyry p.t. Molekularna charakterystyka zoonotycznych szczepów rotawirusa świń
Prof. dr hab. Zbigniew Grądzki Katedra Epizootiologii i Klinika Chorób Zakaźnych Wydział Medycyny Weterynaryjnej Uniwersytet Przyrodniczy w Lublinie Ocena rozprawy doktorskiej Pani lek. wet. Iwony Kozyry
Bardziej szczegółowoSaccharomyces Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Saccharomyces cerevisiae. Metoda chemiczna.
Saccharomyces Transformer Kit zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Saccharomyces cerevisiae. Metoda chemiczna. wersja 0916 6 x 20 transformacji Nr kat. 4010-120 Zestaw zawiera
Bardziej szczegółowoFORMULARZ ASORTYMENTOWO CENOWY. PAKIET I Paski do badań moczu z użyciem aparatu LABUREADER. VAT kolumnie D A B C D E F G H. Szt.
UWAGA WYMOGI DLA WSZYSTKICH PAKIETÓW - DO OFERTY NALEŻY DOŁĄCZYĆ: 1. instrukcje w języku polskim, druk czytelny 2. karty charakterystyki dla odczynników zawierających substancje niebezpieczne PAKIET I
Bardziej szczegółowoPL B1. POLITECHNIKA WROCŁAWSKA, Wrocław, PL BUP 01/14
PL 223641 B1 RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 223641 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 404428 (51) Int.Cl. G01N 33/577 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej
Bardziej szczegółowoE.coli Transformer Zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli
E.coli Transformer Zestaw do przygotowywania i transformacji komórek kompetentnych Escherichia coli Wersja 0211 6x40 transformacji Nr kat. 4020-240 Zestaw zawiera komplet odczynników do przygotowania sześciu
Bardziej szczegółowo