Test immunologiczny. Dział obsługi klienta Stany Zjednoczone: Za granicą: Faks:

Transkrypt

1 D Grudzień 2009 r. QMS AMIKACIN Test immunologiczny Przed użyciem należy uważnie przeczytać ulotkę dołączoną do opakowania systemu mikrosfer do oznaczania ilościowego (Quantitative Microsphere System, QMS). Należy starannie przestrzegać instrukcji zawartych w ulotce dołączonej do opakowania. Niezawodność wyników testu jest niemożliwa do zagwarantowania w przypadku jakichkolwiek odchyleń od instrukcji zawartych w ulotce dołączonej do opakowania. Dział obsługi klienta Stany Zjednoczone: Za granicą: Faks: Objaśnienia użytych symboli Urządzenie medyczne do diagnostyki in vitro Kod serii/numer serii Odczynnik 1 Odczynnik 2 Numer katalogowy Składniki Stężenie Przestroga: sprawdzić w załączonych dokumentach Sprawdzić w instrukcji użycia Ograniczenie temperatury Termin ważności Autoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej Producent Zawartość zestawu Microgenics GmbH Spitalhofstrasse 94 D Passau Tel: +49 (0) Fax: +49 (0) ODCZYNNIKI AMIKACIN Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved.

2 NAZWA 2 QMS Amikacin (AMIK) PRZEZNACZENIE Test QMS Amikacin jest przeznaczony do ilościowego określania stężenia amikacyny w ludzkiej surowicy lub osoczu w automatycznych klinicznych analizatorach biochemicznych. Uzyskane wyniki są stosowane do diagnozowania i leczenia przedawkowania amikacyny oraz monitorowania poziomów amikacyny jako pomoc w zapewnieniu odpowiedniej terapii. STRESZCZENIE I OBJAŚNIENIE TESTU Amikacyna jest półsyntetycznym aminoglikozydem, wykazującym działanie bakteriobójcze wobec szerokiego zakresu patogenów, w tym wielu organizmów opornych na działanie innych aminoglikozydów. 1-4 Amikacyna in vitro wykazuje działanie przeciwko organizmom Gram-ujemnym, gronkowcom wytwarzającym penicylinazę i niewytwarzającym penicylinazy. Moc tego leku jest przede wszystkim wynikiem wysokiego stopnia oporności na enzymy unieczynniające aminoglikozydy. 5 Ustalenie poziomów leku w surowicy i osoczu jest konieczne do uzyskania optymalnej skuteczności terapeutycznej i zminimalizowania toksyczności. 6-7 ZASADY PROCEDURY Test QMS Amikacin jest homogennym testem immunologicznym metodą turbidymetrii z zastosowaniem wzmocnionych cząstek. Test jest oparty na kompetycji leku obecnego w próbce i leku opłaszczonego na mikrocząstce o miejsca wiązania przeciwciał odczynnika przeciwciał amikacyny. Odczynnik z mikrocząstkami opłaszczonymi amikacyną ulega gwałtownej aglutynacji w obecności odczynnika z przeciwciałami przeciw amikacynie i przy nieobecności jakiegokolwiek kompetytywnego leku w próbce. Szybkość zmiany absorbancji jest mierzona metodą fotometryczną. Po dodaniu próbki zawierającej amikacynę reakcja aglutynacji zostaje częściowo zahamowana, spowalniając przebieg zmiany absorbancji. Klasyczną krzywą zahamowania aglutynacji jako funkcji stężenia można uzyskać na podstawie maksymalnej szybkości aglutynacji przy najniższym stężeniu amikacyny i najniższej szybkości aglutynacji przy najwyższym stężeniu amikacyny.

3 ODCZYNNIKI Zestaw odczynników Test QMS Amikacin, , jest dostarczany w postaci płynnego, gotowego do użycia zestawu dwóch odczynników, który zawiera: Odczynnik 1 Odczynnik 2 2 x 19 ml 2 x 7 ml Składniki reaktywne Składnik Stężenie Monoklonalne przeciwciało przeciw amikacynie (mysie) <1,0% Azydek sodu <0,1% Mikrocząstki opłaszczone amikacyną <0,5% Azydek sodu <0,1% 3

4 PRZECHOWYWANIE I PRZENOSZENIE ODCZYNNIKÓW i gotowe do użycia. Przed użyciem kilkakrotnie odwrócić do góry dnem unikając tworzenia pęcherzyków. Usunąć pęcherzyki powietrza, jeśli są obecne w zbiorniku z odczynnikiem, za pomocą nowej, nieużywanej szpatułki. Alternatywnie pozostawić odczynnik na jakiś czas w odpowiedniej temperaturze przechowywania i odczekać do zniknięcia pęcherzyków. Celem zminimalizowania ubytku objętości nie należy usuwać pęcherzyków powietrza pipetą do przenoszenia. Gdy zbiornik z odczynnikiem lub zbiornik z odczynnikiem się opróżni, wymienić oba zbiorniki i zweryfikować kalibrację z użyciem co najmniej dwóch poziomów kontroli, według ustalonych wymagań kontroli jakości dla danego laboratorium. Jeśli wyniki dla kontroli wykraczają poza akceptowalne zakresy, może być konieczna ponowna kalibracja PRZESTROGA: Pęcherzyki odczynnika mogą utrudniać odpowiednie wykrywanie poziomu odczynnika w zbiorniku, powodując niedostateczne zasysanie odczynnika, co może negatywnie wpływać na wyniki. Nieotwarte odczynniki są stabilne do upływu terminu ważności pod warunkiem przechowywania w temperaturze od 2 C do 8 C. Nie wolno zamrażać odczynników ani narażać na temperatury powyżej 32 C. OSTRZEŻENIA I ŚRODKI OSTROŻNOŚCI Środki ostrożności dotyczące użytkowników Do stosowania w diagnostyce in vitro. Nie wolno mieszać materiałów pochodzących z zestawów o różnych numerach serii. Zawiera niesterylne mysie przeciwciała monoklonalne. 4

5 PRZESTROGA: Produkt ten zawiera składniki pochodzenia ludzkiego i/lub potencjalnie zakaźne. Składniki uzyskane z krwi ludzkiej zostały przetestowane na obecność przeciwciał przeciw HIV 1/2 i wirusowemu zapaleniu wątroby typu C oraz na obecność antygenu HBs z wynikiem ujemnym. Żadna znana metoda oznaczania nie może zagwarantować całkowitej pewności, że produkty uzyskane ze źródeł pochodzenia ludzkiego lub inaktywowane mikroorganizmy nie przeniosą zakażenia. Dlatego zaleca się uznawanie wszystkich materiałów pochodzenia ludzkiego za potencjalnie zakaźne i przestrzeganie odpowiednich zasad bezpieczeństwa biologicznego w kontakcie z nimi. POBIERANIE I PRZENOSZENIE PRÓBEK Próbki do testu QMS Amikacin można pobierać do następujących probówek: Surowica Szkło Bez dodatków Probówka z separatorem do surowicy (żel) Aktywator krzepnięcia Plastik Probówka z separatorem do surowicy (żel) Inne probówki do pobierania próbek nie zostały zatwierdzone do użycia z testem QMS Amikacin. Stosować się do instrukcji postępowania producenta probówek do surowicy lub osocza. 5

6 Szkło Plastik Osocze EDTA (K 3) EDTA (K 2) Heparyna litowa Heparyna sodowa Probówka separacyjna do osocza z heparyną litową (żel) Inne probówki do pobierania próbek nie zostały zatwierdzone do użycia z testem QMS Amikacin. Stosować się do instrukcji postępowania producenta probówek do surowicy lub osocza. Niedokładne odwirowanie próbki może spowodować błędny wynik. Należy dopilnować, aby próbki były wolne od fibryny, erytrocytów i innych cząstek. Oddzielić osocze lub surowicę od komórek, skrzepliny lub żelu jak najszybciej po pobraniu. Niektóre probówki z separatorem żelowym mogą nie być odpowiednie do testów monitorujących stężenia leków; należy sprawdzić informacje dostarczone przez producenta probówki. 8 Próbki oddzielone od komórek, skrzepliny lub żelu można przechowywać najwyżej przez jeden tydzień w temperaturze od 2 C do 8 C. Jeśli badanie zostanie odroczone o ponad tydzień, próbki należy przechowywać w stanie zamrożonym (<-10 C). Próbki zamrożone przez okres do dwóch tygodni nie wykazały żadnych różnic zachowania w porównaniu z próbkami świeżymi. Należy dbać, by ograniczać liczbę cykli zamrażania i rozmrażania. 6

7 PROCEDURA Materiały dostarczone Odczynniki QMS Amikacin, Materiały wymagane, lecz niedostarczone Kalibratory QMS Amikacin, CAL A-F: 1 1,0 ml każdy Kontrole Amikacin Procedura testu Szczegółowe instrukcje dotyczące wykonywania i kalibracji testu można znaleźć w podręczniku obsługi danego aparatu. Procedury rozcieńczania próbek Należy użyć odczynnika QMS Amikacin CAL A (0,0 µg/ml) do ręcznego rozcieńczenia próbek wykraczających poza liniowość testu. 7

8 Protokół rozcieńczania ręcznego Rozcieńczanie ręczne można wykonywać dla próbek pobranych od pacjenta z odczytami stężenia amikacyny powyżej 50,0 µg/ml, wykonując rozcieńczenie próbki za pomocą QMS Amikacin CAL A (0,0 µg/ml) przed pipetowaniem próbki do naczynia na próbkę. Rozcieńczenie musi być wykonane w taki sposób, aby wyniki testu dla rozcieńczonej próbki były większe od czułości testu wynoszącej 1,5 µg/ml. Aby uzyskać końcowe stężenie próbki należy pomnożyć odczytane stężenie przez współczynnik rozcieńczenia ręcznego. Końcowe stężenie próbki = Odczyt stężenia Współczynnik ręcznego rozcieńczenia Współczynnik ręcznego rozcieńczenia = (Objętość próbki + objętość CAL A) Objętość próbki KALIBRACJA Test QMS Amikacin musi zostać skalibrowany za pomocą pełnej (6-punktowej) procedury kalibracji. Aby wykonać pełną kalibrację należy oznaczyć w duplikatach kalibratory A, B, C, D, E i F testu QMS Amikacin. Kalibracja jest wymagana dla każdego nowego numeru serii. Należy zweryfikować krzywą kalibracji za pomocą co najmniej dwóch poziomów kontroli, zgodnie z wymaganiami kontroli jakości przyjętymi w danym laboratorium. Jeśli wyniki kontroli nie mieszczą się w akceptowalnych zakresach, może być konieczne wykonanie ponownej kalibracji. Uwaga: Amikacin CAL A jest ślepą próbką kalibracyjną dla tego testu. 8

9 KONTROLA JAKOŚCI WYNIKI W razie potrzeby należy sprawdzić dodatkowe wymagania kontroli jakości i potencjalne działania zaradcze w standardowych procedurach operacyjnych i/lub planie zapewnienia jakości danego laboratorium. Należy przestrzegać wszelkich wymagań kontroli jakości określonych przepisami lokalnymi i państwowymi lub wymaganiami akredytacji. Zalecane wymagania dotyczące kontroli dla testu QMS Amikacin: Należy oznaczać co 24 godziny przynajmniej dwa poziomy kontroli obejmujące zakres decyzji medycznej. Jeśli jest wymagane częstsze monitorowanie kontroli, należy stosować się do procedur kontroli jakości dotyczących danego laboratorium. Jeśli wyniki kontroli jakości nie mieszczą się w akceptowalnym zakresie określonym przez dane laboratorium, wartości uzyskane dla próbek pobranych od pacjentów mogą być wątpliwe i należy podjąć działania zaradcze. Jednostką odczytu wyników testu QMS Amikacin może być µg/ml lub µmol/l. Aby przeliczyć wyniki z µg/ml amikacyny na µmol/l amikacyny, należy pomnożyć µg/ml przez 1,71. Podobnie jak w przypadku wszystkich oznaczeń analitów, uzyskaną wartość dla amikacyny należy rozważać w zestawieniu z danymi klinicznymi oraz innymi procedurami diagnostycznymi. Kody błędów wyników Niektóre wyniki mogą zawierać kody błędów wyników. Opisy kodów błędów wyników można znaleźć w podręczniku obsługi danego aparatu. 9

10 OGRANICZENIA PROCEDURY Przeciwciała heterofilne interferujące z oznaczeniem występują z niewielką częstością w ogólnej populacji. Przeciwciała te mogą powodować autoaglutynację mikrocząstek odczynnika, prowadząc do niewykrytych, błędnie zaniżonych wyników. Dla celów diagnostycznych należy zawsze oceniać wyniki testu w połączeniu z historią choroby danego pacjenta, badaniami klinicznymi oraz innymi znanymi faktami. Zobacz punkty POBIERANIE I PRZENOSZENIE PRÓBEK oraz SPECYFICZNE PARAMETRY DZIAŁANIA w niniejszej ulotce. OCZEKIWANE WARTOŚCI Chociaż optymalne wartości mogą być różne, szczytowe wartości stężenia amikacyny w surowicy w zakresie od 20 do 25 µg/ml do wartości w zakresie od 5 do 10 µg/ml są ogólnie akceptowane dla uzyskania skuteczności terapeutycznej. 9 Toksyczność jest kojarzona z wartościami szczytowymi większymi niż 35 µg/ml i wartościami najniższymi powyżej 10 µg/ml. 6 Najpoważniejszym działaniem toksycznym jest trwałe uszkodzenie części przedsionkowej VIII nerwu czaszkowego, które według doniesień występuje najczęściej u pacjentów z niewydolnością nerek. Ponieważ amikacyna jako taka jest stabilna, nie jest metabolizowana i jest wydalana głównie przez przesączenie kłębuszkowe, występowanie zaburzeń funkcji nerek drastycznie zmienia jej właściwości farmakokinetyczne. Jeśli nie dokona się radykalnego dostosowania dawki, może dojść do nadmiernej akumulacji, skutkującej ototoksycznością i dalszym uszkodzeniem nerek Chociaż poziom amikacyny w surowicy może być toksyczny, jednak zzbyt niskie dawki mogą powodować nieskuteczność leczenia w przypadku wielu szczepów bakterii Gram-ujemnych. Organizmy oporne na amikacynę często wykazują zwiększoną oporność na wszystkie inne dostępne aminoglikozydy. Ta obserwacja sygnalizuje, że niekontrolowane stosowanie niskich dawek amikacyny może spowodować wyhodowanie organizmów opornych na leki, z możliwością utraty skuteczności leku w leczeniu choroby zakaźnej. 5,14,15 10

11 SPECYFICZNE PARAMETRY DZIAŁANIA Poniżej przedstawiono reprezentatywne wyniki dotyczące działania, uzyskane na dostępnym na rynku automatycznym klinicznym analizatorze biochemicznym wykorzystującym ilościową analizę tubidymetryczną. Najmniejsze wykrywalne stężenie (LDD)/czułość analityczna LDD, czyli czułość analityczna testu QMS Amikacin jest definiowana jako najmniejsze mierzalne stężenie, które można odróżnić od zera z 95% ufnością. Ustalono, że LDD wynosi 0,8 µg/ml. Zakres testu Zakres testu wynosi od 1,5 do 50,0 µg/ml. Liniowość Każdy z poziomów kalibratora amikacyny QMS rozcieńczono równą objętością kalibratora kolejnego wyższego poziomu, uzyskując próbki o stężeniach 1,5; 6,5; 15,0; 27,5 i 42,5 µg/ml. Próbki te oznaczono w duplikatach za pomocą testu QMS Amikacin. Określono średnią z replikatów dla każdej próbki i obliczono odsetek odzysku. Wyniki przedstawiono poniżej. Stężenie teoretyczne (µg/ml) Średnie odzyskane stężenie (µg/ml) Odsetek odzysku 1,5 1,67 111,3 6,5 6,48 99,7 15,0 14,67 97,8 27,5 26,32 95,7 42,5 41,44 97,5 Średni odsetek odzysku: 100,4 11 Porównanie metod Badania korelacji wykonano według Protokołu NCCLS EP9-A. 16 Wyniki uzyskane za pomocą testu QMS Amikacin porównano z wynikami uzyskanymi z dostępnego na rynku testu wykorzystującego metodę immunologicznej polaryzacji fluorescencyjnej. Próbki pobrane od

12 pacjentów obejmowały surowicę i osocze. Stężenia amikacyny wynosiły od 2,38 µg/ml do 37,58 µg/ml. Poniżej przedstawiono wyniki analizy regresji Passing- Bablok dla badania. Nachylenie 1,00 Punkt przecięcia z osią y 0,25 Współczynnik korelacji (R 2 ) 0,992 Liczba próbek 56 Precyzja Precyzję określono zgodnie z opisem w protokole NCCLS EP5-A. 17 Do badania wykorzystano dostępną komercyjnie trójpoziomową kontrolę na bazie ludzkiej surowicy zawierającą amikacynę. Każdy z poziomów kontroli oznaczano w duplikatach, dwa razy dziennie przez 20 dni. Każdą następną analizę w danym dniu wykonywano po upływie co najmniej dwóch godzin. Obliczono średnie, a także SD (odchylenie standardowe) i procentowy CV (współczynnik zmienności) w obrębie testu, między dniami i łącznie. Reprezentatywne wyniki przedstawiono poniżej. Próbka N Średnia (µg/ml) W obrębie testu Między dniami Łącznie SD (standardowe odchylenie) CV (%) SD (standardowe odchylenie) CV (%) SD (standardowe odchylenie) ,09 0,22 5,37 0,19 4,77 0,41 9, ,00 0,21 1,79 0,08 0,70 0,74 6, ,37 0,47 1,93 0,40 1,65 1,54 6,32 CV (%) Kryterium akceptacji: <10% łącznego CV (współczynnik zmienności) 12

13 Substancje interferujące z oznaczeniem Związki wymienione poniżej, oznaczane w teście QMS Amikacin, w stężeniach wskazanych poniżej, dały w wyniku wartość błędu w wykrywaniu amikacyny poniżej 10%. Badania interferencji prowadzono według protokołu NCCLS EP7-P. 18 Wyniki przedstawiono poniżej. Substancja interferująca Stężenie substancji interferującej N Amikacyna (µg/ml) Odsetek odzysku Białko całkowite 12 g/dl 3 24,03 96,0 Bilirubina 15 mg/dl 2 21,65 96,4 Hemoglobina 10 g/l 2 17,32 93,4 HAMA typu 1* HAMA typu 2* normalny poziom w organizmie ludzkim normalny poziom w organizmie ludzkim 2 20,41 100,5 2 16,98 98,0 Trójglicerydy 1691 mg/dl 3 24,03 96,3 *HAMA = ludzkie przeciwciała przeciwko przeciwciałom mysim Specyficzność Reaktywność krzyżowa leków Reaktywność krzyżową zbadano dla leków zwykle podawanych łącznie z amikacyną. Przetestowano następujące związki. Związek Stężenie związku (µg/ml) Stężenie amikacyny (µg/ml) Procent reaktywności krzyżowej* 5-fluorocytozyna 30 19,82-0,39 Amfoterycyna ,92 1,33 Ampicylina 50 19,50 ND Cefaleksyna ,16 ND *ND = nie wykryto 13

14 Związek Stężenie związku (µg/ml) Stężenie amikacyny (µg/ml) Procent reaktywności krzyżowej* Cefalosporyna C ,16 ND Cefalotin ,79 ND Chloramfenikol ,98 0,55 Erytromycyna ,71 ND Furosemid ,60 1,00 Gentamycyna ,32 ND Kanamycyna A ,23 ND Kanamycyna B ,48 ND Karbenicylina ,25 ND Klindamycyna ,44 ND Kwas etakrynowy ,77 ND Kwas fusydowy ,63 ND Linkomycyna ,09 ND Metotreksat ,64 ND Metycylina ,42 0,41 Metyloprednizolon ,87 0,64 Neomycyna ,44 ND Netylmycyna ,03 ND Oksytetracyklina ,24 ND Penicylina V ,98 1,38 *ND = nie wykryto 14

15 Związek Stężenie związku (µg/ml) Stężenie amikacyny (µg/ml) Procent reaktywności krzyżowej* Prednizolon 12 20,10 2,36 Ryfampicyna ,84 ND Spektinomycyna ,46 ND Streptomycyna ,31 ND Sulfadiazyna ,72 ND Sulfametoksazol ,00 ND Tetracyklina ,06 ND Tobramycyna ,67 0,32 Trimetoprim ,56 ND Wankomycyna ,46 ND *ND = nie wykryto 15

16 BIBLIOGRAFIA 1. Price KE, Chisholm DR, Misiek M, Leitner F, Tsai YH. Microbiological evaluation of BB-K 8, a new semisynthetic aminoglycoside. J Antibiot 1972;25: Bodey GP, Steward D. In vitro studies of BB-K8, a new aminoglycoside antibiotic. Antimicrob Agents Chemother 1973;4: Young LS, Hewitt WL. Activity of five aminoglycoside antibiotics in vitro against gram-negative bacilli and staphylococcus aureus. Antimicrob Agents Chemother 1973;4: Yourassowsky E, Schoutens E, Vanderlinden MP. Comparison of the in vitro activities of BB-K8 and three other aminoglycosides against 215 strains of pseudomonas and enterobacteriaceae with variable sensitivity to kanamycin and gentamicin. Chemotherapy 1975;21: Price KE, Pursiano TA, DeFuria MD, Wright GE. Activity of BB-K8 (amikacin) against clinical isolates resistant to one or more aminoglycoside antibiotics. Antimicrob Agents Chemother 1974;5: Jacobs DS, Kasten BL Jr, Demott WR, Wolfson WL, eds. Laboratory test handbook, 2nd ed. Stowe, OH: Mosby, 1990: Zaske DE, Russo ME, Strate RG. Amikacin/kanamycin: therapeutic use and serum concentration monitoring. In: Taylor WJ and Finn AL, eds. Individualizing drug therapy: practical applications of drug monitoring, Vol. 1. New York: Gross, Townsend, Frank, Inc, 1981: Dasgupta A, Dean R, Saldana S, et al. Absorption of therapeutic drugs by barrier gels in serum separator blood collection tubes. Volume- and time-dependent reduction in total and free drug concentrations. Am J Clin Pathol 1994;101(4): Moyer TP, Pippenger CE. Therapeutic Drug Monitoring. In: Burtis CA, Ashwood ER, eds. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. Philadelphia: WB Saunders, 1994: Levy J, Klastersky J. Correlation of serum creatinine concentration and amikacin halflife. J Clin Pharmacol 1975;Oct: Cabana BE, Taggart JG. Comparative pharmacokinetics of BB-K8 and kanamycin in dogs and humans. Antimicrob Agents Chemother 1973;3: Clarke JT, Libke RD, Regamey C, Kirby WMM. Comparative pharmacokinetics of amikacin and kanamycin. Clin Pharmacol Ther 1974;15:

17 13. Marik PE, Havlik I, Monteagudo FSE, Lipman J. The pharmacokinetics of amikacin in critically ill adult and paediatric patients: comparison of once-versus- twice-daily dosing regimens. J Antimicrob Chemother 1991:27, Suppl C: Overturf G, Zawacki BE, Wilkins J. Emergence of resistance to amikacin during treatment of burn wounds: the role of antimicrobial susceptibility testing. Surgery 1976;79: Beniviste R, Davies J. Mechanisms of antibiotic resistance in bacteria. Annu Rev Biochem 1973;42: NCCLS Approved Guideline EP9-A. Method comparison and bias estimation using patient samples. Wayne, PA: National Committee for Clinical Laboratory Standards, December NCCLS Approved Guideline EP5-A. Evaluation of precision performances of clinical chemistry devices. Wayne, PA: National Committee for Clinical Laboratory Standards, February NCCLS Approved Guideline EP7-P. Interference testing in clinical chemistry. Wayne, PA: National Committee for Clinical Laboratory Standards, August

18 SPECYFICZNE PARAMETRY DZIAŁANIA Wszystkie znaki towarowe są własnością Thermo Fisher Scientific Inc. i przedsiębiorstw zależnych. 18 Microgenics Corporation Fremont Blvd. Fremont, CA USA