RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 212061 (13) B1 Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (21) Numer zgłoszenia: 371363 (22) Data zgłoszenia: 24.11.2004 (51) Int.Cl. A23K 1/16 (2006.01) A23K 1/18 (2006.01) A23K 1/24 (2006.01) C12N 1/16 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C12R 1/24 (2006.01) C12R 1/245 (2006.01) C12R 1/25 (2006.01) C12R 1/865 (2006.01) (54) Probiotyczny stymulator wzrostu dla zwierząt monogastrycznych, zwłaszcza dla trzody chlewnej i drobiu (73) Uprawniony z patentu: MICHAŁOWSKI PAWEŁ, Michałów Grabina, PL (43) Zgłoszenie ogłoszono: 29.05.2006 BUP 11/06 (45) O udzieleniu patentu ogłoszono: 31.08.2012 WUP 08/12 (72) Twórca(y) wynalazku: ZDZISŁAWA LIBUDZISZ, Łódź, PL ROMUALD ZABIELSKI, Warszawa, PL PAWEŁ MICHAŁOWSKI, Michałów Grabina, PL ILONA MOTYL, Łódź, PL ELŻBIETA KLEWICKA, Łódź, PL KATARZYNA ŚLIŻEWSKA, Łódź, PL JOANNA BIERNASIAK, Łódź, PL (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Stanisław Kwiatkowski PL 212061 B1
2 PL 212 061 B1 Opis wynalazku Przedmiotem wynalazku jest probiotyczny stymulator wzrostu dla zwierząt monogastrycznych, zwłaszcza dla trzody chlewnej i drobiu, znajdujący zastosowanie jako dodatek do pasz, zawierający bakterie z rodzaju Lactobacillus namnażane wobec Saccharomyces cerevisiae oraz ekstrakt z Yucca Schidigera. W ostatnim okresie kilkudziesięciu lat nastąpiło rewolucyjne zwiększenie (intensyfikacja) produkcji zwierzęcej w kierunku pozyskiwania mięsa, mleka, jaj i innych produktów odzwierzęcych. Rosnące w związku z tym przeciążenie organizmów zwierzęcych zmuszało do stosowania coraz to nowszych sposobów ochrony zwierząt przed ujemnymi wpływami i zagrożeniami wprowadzanymi w szczególności wraz z paszami drogą pokarmową. W konsekwencji wprowadzono do żywienia zwierząt wybrane antybiotyki w niskich dawkach podklinicznych jako stymulatory wzrostu w celu podniesienia wydajności produkcji zwierzęcej. Zabieg ten poprawił wprawdzie wyniki produkcyjne, lecz stałe stosowanie w paszach antybiotyków w niskich dawkach spowodowało pojawianie się coraz większej liczby szczepów antybiotykoopornych i w następstwie nieskuteczność tradycyjnych metod leczenia infekcji bakteryjnych u ludzi, często wywoływanych przez bakterie dawniej uznawane za niepatogenne. Z tego powodu rozpoczęto eliminowanie stosowania tych samych substancji jako stymulatorów wzrostu i jako leków stosowanych u ludzi. Konsekwentnie ograniczano liczbę antybiotyków dopuszczonych do stosowania w paszach jako stymulatory wzrostu. Mając na uwadze dobro ludzi Unia Europejska podjęła decyzję o całkowitym wyeliminowaniu antybiotykowych stymulatorów wzrostu począwszy od 1 stycznia 2006 roku. Widząc konieczność zapewnienia zwierzętom ochrony przed skutkami zanieczyszczenia środowiska i wpływem jakości pasz na ich zdrowotność, w konsekwencji nie dopuszczenia do pogorszenia wyników ekonomicznych produkcji zwierzęcej, zgłaszający przeprowadził badania własne nad opracowaniem ekologicznego preparatu, odgrywającego rolę stymulatora wzrostu, opartego na występujących w przewodach pokarmowych zwierząt bakteriach oraz substancjach pochodzenia naturalnego. Dodawany do pasz preparat ma zapewnić stabilizację ph w przewodzie pokarmowym, zwiększenie odporności i oporności organizmów zwierząt w tym ograniczyć rozwój i siewstwo bakterii patogennych i warunkowo patogennych, zwiększyć stopień wykorzystania pasz, poprawić warunki zoohigieniczne w pomieszczeniach gospodarskich poprzez zmniejszenie emisji amoniaku i siarkowodoru. Skład probiotycznego stymulatora wzrostu został dostosowany do potrzeb zwierząt monogastrycznych a jego dawkowanie do faz rozwoju tych zwierząt. Jako podstawę preparatu wybrano żywe szczepy bakterii Lactobacillus pochodzące z kolekcji Instytutu Technologii Fermentacji i Mikrobiologii Politechniki Łódzkiej w Łodzi. Zastosowana technologia namnażania tych bakterii ukierunkowuje je na produkcję enzymów niezbędnych do trawienia stosowanych w Europie podstawowych składników pasz. Flora bakteryjna przewodu pokarmowego zwierząt składa się z kilkuset gatunków bakterii pozostających w równowadze. W tej liczbie znajdują się zarówno szczepy patogenne jak i warunkowo patogenne, których niekontrolowane namnażanie ograniczone jest między innymi przez utrzymywanie właściwego dla danego gatunku zwierząt ph treści pokarmowej. Zaburzenia równowagi mikroflory jelitowej mogą być związane z nagłą zmianą składu i jakości pasz. Podwyższenie ph treści pokarmowej sprzyja rozwojowi bakterii patogennych i warunkowo patogennych skutkiem czego obserwujemy zmniejszenie oporności i odporności zwierząt, upośledzenie wchłaniania, odwodnienia organizmów (biegunki), większą podatność na rożnego rodzaju infekcje. Nie jest znany mechanizm działania antybiotykowych stymulatorów wzrostu. Antybiotyki stosowane dotychczas w paszach jako stymulatory wzrostu ograniczają niewątpliwie rozwój patogennych bakterii zarówno wprowadzanych w paszach jak i bytujących w przewodzie pokarmowych zwierząt, lecz jednocześnie oddziałując ujemnie na niezbędne w procesach trawiennych mikroorganizmy. Poznanie mechanizmów i procesów zachodzących w przewodzie pokarmowym zwierząt zwróciło uwagę na role bakterii i ich znaczenie w produkcji zwierzęcej. Prawidłowe funkcjonowanie przewodu pokarmowego jest kluczowe dla prawidłowego funkcjonowania całego organizmu. Przewód pokarmowy jest drugą po układzie oddechowym powierzchnią kontaktu ciała z otoczeniem. Podstawową cechą tej powierzchni jest bardzo szybka wymiana komórek epithelium; większość komórek jest zastępowana przez komórki potomne w ciągu 3-4 dni u człowieka i jeszcze szybciej w przypadku zwierząt hodowlanych. Wraz z komórkami gospodarza następuje wymiana komórek drobnoustrojów kolonizujących przewód pokarmowy w ogromnej ilości i różnorodności.
PL 212 061 B1 3 Podstawowym składnikiem paszy dla drobiu i trzody chlewnej stanowi materiał roślinny, w różnej formie i składzie. Przyswajanie paszy przez zwierzęta uwarunkowane jest ich zdolnością do wykorzystywania składników pokarmowych w niej występujących. Zdolność ta jest efektem obecności określonych enzymów w niezbędnych ilościach, produkowanych między innymi przez niektóre szczepy bakterii zasiedlające przewód pokarmowy. W procesie namnażania bakterii będących podstawą probiotycznego stymulatora wzrostu można dobierając odpowiednio skład pożywki ukierunkować produkcję enzymów na takie, które będą niezbędne do rozkładu polisacharydów, tłuszczy i białek. W procesach metabolicznych związanych z trawieniem wytwarzane są amoniak i siarkowodór, które są wydalane. Obecność tych gazów w pomieszczeniach gospodarskich powoduje liczne podrażnienie górnych dróg oddechowych, śluzówek nosa i oczu oraz podrażnienia skóry. Wpływa to na osłabienie organizmów zwierząt i większą podatność na różnego rodzaju infekcje. Dobrze opisanym i szeroko stosowanym preparatem ograniczającym emisję zarówno amoniaku jak i siarkowodoru, wpływającym na poprawienie warunków zoohigienicznych w pomieszczeniach gospodarskich jest ekstrakt z Yucca Schidigera. Wykorzystując dotychczasowe doświadczenia i wiedzę zestawiono probiotykowy stymulator wzrostu przeznaczony dla zwierząt monogastrycznych, szczególnie dla drobiu i trzody chlewnej z uwzględnieniem specyficznych dla danego obszaru (Polska, Europa) warunków produkcji zwierzęcej. Z danych literaturowych i badań terenowych wiadomo, iż uzupełnienie diety w odpowiednie szczepy bakterii, pozwala na utrzymanie homeostazy przewodu pokarmowego powiększając tolerancje organizmu na niekorzystne bodźce zewnętrzne w tym wahania jakości i składu podawanych pasz, ułatwia procesy trawienie i zwiększa przyswajalność trudno przyswajalnych składników pasz, poprawia zdrowotność zwierząt, zmniejsza upadki (padnięcia) a w przypadku konieczności stosowania antybiotyków w celach leczniczych przyspiesza okres rekonwalescencji. Nie podlega dyskusji, że stałe podawanie określonych kultur mikroorganizmów jako dodatków do paszy jest ze wszech miar korzystne i zasadne. Nieoczekiwanie okazało się, że możliwe jest ustalenie składu preparatu probiotycznego, który mógłby być stosowany na szeroką skalę jako dodatek do pasz dla zwierząt, zwłaszcza dla świń i drobiu (przede wszystkim brojlerów i indyków rzeźnych) zastępującego antybiotykowe stymulatory wzrostu. Ten probiotykowy stymulator wzrostu dostosowany jest do podstawowych źródeł białka, węglowodanów i tłuszczy stosowanych w produkcji pasz, warunków produkcji zwierzęcej i ras zwierząt występujących w Polsce i krajach ościennych. Korzystne działanie preparatu według wynalazku weryfikowano zarówno in vitro" w doświadczeniach laboratoryjnych jak i in vivo", w doświadczeniach polowych (na farmach doświadczalnych). Probiotykowy stymulator wzrostu zawierający szczepy bakterii wspomagające układ pokarmowy, według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera co najmniej trzy jednocześnie współdziałające ze sobą szczepy bakterii z rodzaju Lactobacillus w sumarycznej liczbie 10 7 do 10 9 /1 gram preparatu, Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920 (lub inny szczep z tego gatunku o tych samych właściwościach), Lactobacillus brevis ŁOCK 0944 (lub inny szczep z tego gatunku o tych samych właściwościach), Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 (lub inny szczep z tego gatunku o tych samych właściwościach), w ilości łącznej 10 7 do 10 9 /1 g preparatu, oraz drożdże Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 (lub inny szczep z tego gatunku o tych samych właściwościach), w ilości od 10 3 do 10 4 /1 g preparatu, ekstrakt z Yucca Schidigera 25-60 mg/1 g Preparat zgodnie z wynalazkiem ma za zadanie poprawienie odporności i oporności zwierząt, zwiększenie efektywności wykorzystania paszy, poprawę warunków zoohigienicznych w pomieszczeniach gospodarskich. Probiotykowy stymulator wzrostu przystosowany do stosowania jako dodatek do pasz będący przedmiotem niniejszego projektu uwzględnia zarówno różnice gatunkowe jak i różnice związane z fazami rozwoju organizmów zwierząt w obrębie gatunku. Mając na uwadze względy technicznoekonomiczne, w oparciu o dotychczasowe doświadczenia i dane literaturowe, ustalono skład przeznaczony dla zwierząt monogastrycznych, w szczególności trzody chlewnej i drobiu zalecając odmienne dawkowanie w zależności od gatunku i fazy rozwoju zwierzęcia.
4 PL 212 061 B1 Zalecane dawkowanie probiotykowego stymulatora wzrostu według wynalazku, korzystnie kształtuje się następująco: Świnie: prosięta do masy 20 kg 1 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy tuczniki pierwszy okres tuczu 1,0 kg/1000 kg paszy drugi okres tuczu 0,5 do 1,0 kg/1000 kg paszy Lochy na 3 tygodnie przed oproszeniem 2,0 kg/1000 kg paszy w czasie laktacji 2,0 kg/1000 kg paszy Drób: Kurczęta brojlera 2,0 kg/1000 kg paszy Brojlery 1,0 kg/1000 kg paszy Kurczęta indyków rzeźnych 2,0 kg/1000 kg paszy Indyki rzeźne 1,0 kg/1000 kg paszy Pozostały drób 1-2 kg/1000 kg paszy Probiotykowy stymulator wzrostu według wynalazku spełnia następujące wymagania: składem dostosowany jest do wymagań zwierząt monogastrycznych i uwzględnia fazy rozwoju organizmów zwierząt utrzymuje odpowiednie ph treści przewodu pokarmowego; zwiększa oporność i odporność zwierząt zwiększa biodostępność i stopień wykorzystania paszy; poprawia warunki zoohigieniczne w pomieszczeniach gospodarskich wpływając na dobrostan zwierząt. jest dostosowany do użycia w procesach produkcji pasz. Bakterie, które stanowiące najważniejszą część składową preparatu mają następujące cechy: duża przeżywalność w niskim ph (sok żołądkowy) i w obecności czynników antybakteryjnych soku trzustkowego i żółci; efektywnie stabilizują ph treści przewodu pokarmowego wykazują istotny antagonizm w stosunku do mikroflory patogennej; dobrze kolonizują przewód pokarmowy zwiększają strawność paszy poprzez produkcję enzymów glikolitycznych i proteolitycznych; aktywują system odpornościowy zwierzęcia np. przez aktywację makrofagów; przeżywają w procesie obróbki temperaturowej pasz; można łączyć z dopuszczonymi do stosowania kokcydiostatykami. Podstawą preparatu są bakterie z rodzaju Lactobacillus: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub inne szczepy tych gatunków o tych samych właściwościach, namnażane wobec Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innych szczepów o tych samych właściwościach, korzystnie w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie namnażania całość poddawana jest procesowi liofilizacji. Liofilizat oznacza się na zawartość bakterii Lactobacillus. W osobnym fermentorze prowadzi się proces fermentacji Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach, korzystnie w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie drożdże poddaje się procesowi delikatnego suszenia do zawartości wody poniżej 1% i w tak otrzymanym suszu określa się gęstość żywych komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae. Liofilizat, susz żywych komórek drożdży, ekstrakt z Yucca Schidigera oraz drożdże paszowe jako nośnik miesza się w odpowiednim mieszalniku w zadanych proporcjach. Skuteczność wybranych receptur probiotyków testowano na fermach produkcyjnych na dużej liczbie zwierząt w odniesieniu do grupy kontrolnej, jaką stanowią zwierzęta żywione standardowo na warunki danej fermy oraz w Instytucie Fizjologii i Żywienia Zwierząt PAN w Jabłonnie. Odniesienie, grupa kontrolna dostawała paszę standardową z stosowanymi w Polsce antybiotykowymi stymulatorami wzrostu, grupa doświadczalna paszę wyprodukowaną w oparciu o premiks od tego samego producenta, jednakże z dodatkiem badanego probiotycznego stymulatora wzrostu w miejsce antybiotykowego stymulatora wzrostu. U zwierząt badano: zużycie paszy, przyrosty i zdro-
PL 212 061 B1 5 wotność, co stanowi podstawę do przeprowadzenia analizy ekonomicznej produkcji żywca oraz prowadzono analizę mikrobiologiczną odchodów. Dzięki podawaniu probiotycznego stymulatora wzrostu według wynalazku uzyskuje się ustabilizowanie mikroflory bakteryjnej przewodu pokarmowego poprzez zapewnienie stałego dostarczania określonych szczepów bakterii oraz umożliwienia optymalnego rozwoju funkcji trawiennej i układu odpornościowego przewodu-pokarmowego. Preparat spowodował widoczną presję na drobnoustroje patogenne i warunkowo patogenne, utrudnił ich adherencję i zmniejszył tym samym produkcję toksyn. Przeprowadzone badania upoważniają do konkluzji, że probiotyczny stymulator wzrostu według wynalazku może zastąpić stosowane dotychczas antybiotykowe stymulatory wzrostu. Żywienie zwierząt bez użycia antybiotykowych stymulatorów wzrostu pozwala na uzyskania mięsa najwyższej jakości. Zaletą probiotycznego stymulatora wzrostu według wynalazku jest oparcie go na wysoko aktywnych, polskich szczepach bakteryjnych oraz połączenie zalet typowego probiotyku z poprawiającym warunki zoohigieniczne ekstraktem z Yucca Schidigera. Stworzenie oryginalnego polskiego probiotycznego stymulatora wzrostu dla zwierząt gospodarskich, nie mającego wad produktów obecnie importowanych, i nadającego się do stosowania w krajach Unii Europejskiej i Europie Wschodniej, wobec decyzji o wycofaniu z żywienia antybiotykowych stymulatorów wzrostu w krajach UE jest sprawą ważną dla przemysłu paszowego, a w konsekwencji dla przemysłu spożywczego i możliwości eksportu produktów (mięso, jaja, mleko i ich przetwory) na rynek unijny i pozostałe rynki Europy. Poniżej przedstawiono przykłady wykonania wynalazku. P r z y k ł a d I. Ogólna technologia przygotowania probiotycznego stymulatora wzrostu. Podstawą preparatu są bakterie z rodzaju Lactobacillus: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub inne szczepy tych gatunków o tych samych właściwościach, namnażane wobec Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach, korzystnie w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie namnażania całość poddawana jest procesowi liofilizacji. Liofilizat oznacza się na zawartość bakterii Lactobacillus oraz Saccharomyces cerevisiae. W osobnym fermentorze prowadzony jest proces fermentacji Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie zawartość fermentora poddaje się procesowi delikatnego suszenia do zawartości wody poniżej 1% i w tak otrzymanym suszu określa się gęstość żywych komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae. Nadwyżkę liofilizatu LAB, naważkę suszu Saccharomyces cerevisiae (według bilansu), ekstrakt z Yucca Schidigera oraz drożdże paszowe jako nośnik miesza się w odpowiednim mieszalniku w zadanych proporcjach. Uzyskano preparat probiotyczny o następującym składzie: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub mieszaninę innych szczepów tych gatunków o tych samych właściwościach w ilości łącznej >10 7 CFU/1 g preparatu, Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub inny szczep tego gatunku o tych samych właściwościach w ilości od >10 3 komórek/1 g preparatu, Ekstrakt z Yucca Schidigera 50 mg/1 g P r z y k ł a d II. Ogólna technologia przygotowania probiotycznego stymulatora wzrostu. Podstawą preparatu są bakterie z rodzaju Lactobacillus: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub inne szczepy tych gatunków o tych samych właściwościach, namnażane wobec Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach, korzystnie w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie namnażania całość poddawana jest procesowi liofilizacji. Liofilizat oznacza się na zawartość bakterii Lactobacillus oraz Saccharomyces cerevisiae.
6 PL 212 061 B1 W osobnym fermentorze prowadzony jest proces fermentacji Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach w klasycznej pożywce. Po zakończonym procesie zawartość fermentora poddaje się procesowi delikatnego suszenia do zawartości wody poniżej 1% i w tak otrzymanym suszu określa się gęstość żywych komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae. Nadwyżkę liofilizatu LAB, naważkę suszu Saccharomyces cerevisiae (według bilansu), ekstrakt z Yucca Schidigera oraz drożdże paszowe jako nośnik miesza się w odpowiednim mieszalniku w zadanych proporcjach. Uzyskano preparat probiotyczny o następującym składzie: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub mieszaninę innych szczepów tych gatunków o tych samych właściwościach w ilości łącznej >10 7 CFU/1 g preparatu, Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub inny szczep tego gatunku o tych samych właściwościach w ilości od >10 3 komórek /1 g preparatu, Ekstrakt z Yucca Schidigera 50 mg/1 g P r z y k ł a d III. Ogólna technologia przygotowania probiotycznego stymulatora wzrostu Podstawą preparatu są bakterie z rodzaju Lactobacillus: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub inne szczepy tych gatunków o tych samych właściwościach, namnażane wobec Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach, korzystnie w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie namnażania całość poddawana jest procesowi liofilizacji. Liofilizat oznacza się na zawartość bakterii Lactobacillus oraz Saccharomyces cerevisiae. W osobnym fermentorze prowadzony jest proces fermentacji Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie zawartość fermentora poddaje się procesowi filtracji oddzielając drożdże od pożywki. Drożdże suszy się delikatnie w celu zachowania ich żywotności do zawartości wody poniżej 1%. Przesącz poddaje się osobno procesowi suszenia i otrzymany osad dodaje się do suszu drożdży. W tak otrzymanym preparacie określa się gęstość żywych komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae. Nadwyżkę liofilizatu LAB, naważkę suszu Saccharomyces cerevisiae (według bilansu), ekstrakt z Yucca Schidigera oraz drożdże paszowe jako nośnik miesza się w odpowiednim mieszalniku w zadanych proporcjach. Uzyskano preparat probiotyczny o następującym składzie: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub mieszaninę innych szczepów tych gatunków o tych samych właściwościach w ilości łącznej >10 7 CFU/1 g preparatu, Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub inny szczep tego gatunku o tych samych właściwościach w ilości od >10 3 komórek /1 g preparatu, Ekstrakt z Yucca Schidigera 50 mg/1 g P r z y k ł a d IV. Ogólna technologia przygotowania probiotycznego stymulatora wzrostu. Podstawą preparatu są bakterie z rodzaju Lactobacillus: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub inne szczepy tych gatunków o tych samych właściwościach, namnażane wobec Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach, korzystnie w pożywce z dodatkiem pszenicy, jęczmienia i soi w proporcjach występujących w standardowych recepturach pasz. Po zakończonym procesie namnażania całość poddawana jest procesowi liofilizacji. Liofilizat oznacza się na zawartość bakterii Lactobacillus oraz Saccharomyces cerevisiae. W osobnym fermentorze prowadzony jest proces fermentacji Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu o tych samych właściwościach w standardowej pożywce. Po zakoń-
PL 212 061 B1 7 czonym procesie zawartość fermentora poddaje się procesowi filtracji oddzielając drożdże od pożywki. Drożdże suszy się delikatnie w celu zachowania ich żywotności do zawartości wody poniżej 1%. Przesącz poddaje się osobno procesowi suszenia i otrzymany osad dodaje się do suszu drożdży. W tak otrzymanym preparacie określa się gęstość żywych komórek drożdży Saccharomyces cerevisiae. Nadwyżkę liofilizatu LAB, naważkę suszu Saccharomyces cerevisiae (według bilansu), ekstrakt z Yucca Schidigera oraz drożdże paszowe jako nośnik miesza się w odpowiednim mieszalniku w zadanych proporcjach. Uzyskano preparat probiotyczny o następującym składzie: Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub mieszaninę innych szczepów tych gatunków o tych samych właściwościach w ilości łącznej >10 7 CFU/1 g preparatu, Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub inny szczep tego gatunku o tych samych właściwościach w ilości od >10 3 komórek /1 g preparatu, Ekstrakt z Yucca Schidigera 50 mg/1 g Zastrzeżenia patentowe 1. Probiotyczny stymulator wzrostu dla zwierząt monogastrycznych, zwłaszcza dla trzody chlewnej i drobiu, zawierający kultury bakterii wspomagające układ pokarmowy, znamienny tym, że stanowi preparat zawierający co najmniej trzy jednocześnie współdziałające ze sobą bakterie Lactobacillus casei/paracasei ŁOCK 0920, Lactobacillus brevis ŁOCK 0944, Lactobacillus plantarum ŁOCK 0945 lub mieszaninę innych szczepów tych gatunków o tych samych właściwościach, w sumarycznej liczbie 10 7 do 10 9 CFU/1 g preparatu, żywe komórki Saccharomyces cerevisiae ŁOCK 0140 lub innego szczepu tego gatunku o tych samych właściwościach w ilości >10 3 /1 g Ekstrakt z Yucca Schidigera 25-60 mg/1 g preparatu do 1 g 2. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla prosiąt do masy 20 kg podawany jest w ilości 1 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 3. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla tuczników w pierwszym okresie tuczu podawany jest w ilości 1 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 4. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla tuczników w drugim okresie tuczu podawany jest w ilości 0,5 do 1 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 5. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla Lochy na 3 tygodnie przed oproszeniem podawany jest w ilości 2 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 6. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla Lochy w czasie laktacji podawany jest w ilości 2 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 7. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla kurcząt brojlera podawany jest w ilości 2 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 8. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla brojlera podawany jest w ilości 1 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 9. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla kurcząt indyków rzeźnych podawany jest w ilości 2 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 10. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 1, znamienny tym, że dla indyków rzeźnych podawany jest w ilości 1 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy. 11. Probiotyczny stymulator wzrostu według zastrz. 7, albo 8, albo 9, albo 10, znamienny tym, że dla pozostałego drobiu podawany jest w ilości od 1 do 2 kg preparatu/1000 kg pełnoporcjowej paszy.
8 PL 212 061 B1 Departament Wydawnictw UP RP Cena 2,46 zł (w tym 23% VAT)