ZAKŁAD CYTOLOGII Instytut Zoologii Maria Anna Ciemerych-Litwinienko Budynek C, II piętro 216C www.biol.uw.edu.pl/cytologia tkanki i narządy prekursorowe macierzyste tkankowo specyficzne macierzyste ektoderma endoderma mezoderma listki zarodkowe multipotentne pierwotne płciowe węzeł zarodkowy trofektoderma tkanki pozazarodkowe konieczne do samoodnawiania się tkanek macierzyste macierzyste 1. zachowują zdolność do samoodnowy 2. pozostają niezróżnicowane 3. mogą z nich powstać wyspecjalizowane satelitowe mięśni szkieletowych jak przebiega różnicowanie komórek satelitowych? in vivo w uszkodzonym mięśniu? in vitro po ich izolacji? jaką rolę w różnicowaniu komórek satelitowych odgrywają czynniki zewnętrzne np. białka macierzy pozakomórkowej? fot. Terry Partridge/from Myores website fot. Terry Partridge/from Myores website 1
macierzyste macierzyste choroby takie jak np. dystrofie mięśniowe prowadzą do wyczerpania puli komórek satelitowych czym je zastąpić? ludzkiej krwi pępowinowej izolowane z tkanki łącznej ludzkiej pępowiny mysie zarodkowe macierzyste () mysie indukowane pluripotentne (ips) mysie płynu owodniowego izolowane z tkanki tłuszczowej inne... fot. Terry Partridge/from Myores website macierzyste regeneracja mięśnia szkieletowego nawet jeżeli satelitowe są obecne regeneracja nie zawsze przebiega prawidłowo często mięsień ulega zwłóknieniu (nadmierna synteza białek charakterystycznych dla tkanki łącznej) mysie eksprymujące YFP Andreas Nagy Mount Sinai Hospital Toronto Canada mysie eksprymujące histon H2B GFP Kat Hadjantonakis Sloan-Kettering Institute New York, USA barwienie trichromem Massona Karolina Archacka 2
dr Karolina Archacka MSC AFS Pax7 KO dr Iwona Grabowska MSC ips dr Edyta Brzóska -Wójtowicz MSC SDF-1 białka adhezji i fuzji dr Małgorzata Zimowska -Wypych MSC MMP mgr Kamil Kowalski, HSC SDF-1 prof. Maria Anna Ciemerych -Litwinienko cykl komórkowy rozwój zarodkowy mgr Anita Helińska ips mgr Barbara Świerczek Wnt mgr Bartosz Mierzejewski MSC, nisza, mikrorna mgr inż. Paulina Kasprzycka TGFbeta1 MMP mgr Joanna Bem mikrorna Pax7 KO Magistranci i Licencjaci Zakładu Cytologii 2014/2015 mgr Władysława Stremińska histologia doświadczania z wykorzystaniem zwierząt Katarzyna Ilach hodowle komórkowe prof. Jerzy Moraczewski regeneracja mięśni różnicowanie komórek satelitowych 3
Magistranci i Licencjaci Zakładu Cytologii 2015/2016 Zakład Cytologii 2017/2018 przykładowe tematy prac dr Iwona Grabowska Udział komórek macierzystych (, ips, MSC, ADSC) w regeneracji mięśni szkieletowych. Miogeniczny potencjał komórek macierzystych rola czynnika Pax7 w różnicowaniu komórek pluripotencjalnych. Różnicowanie komórek w hodowlach przestrzennych naprawa dużych uszkodzeń mięśni szkieletowych. Analiza cyklu komórkowego fibroblastów pozbawionych funkcjonalnej kopii pax7 markery molekularne Joanna Nowacka Analiza potencjału miogenicznego komórek ips in vitro wpływ 5-azacytydyny Jagoda Rokicka Charakterystyka i określenie potencjału miogenicznego linii komórek ips kontrolnych oraz pozbawionych funkcjonalnego genu Pax7. Łukasz Truszkowski 4
dr Edyta Brzóska Miogeneza i fuzja badania w systemach in vitro Rola czynnika SDF-1 w różnicowaniu mioblastów oraz zasiedlaniu mięśni przez macierzyste Lokalizacja podjednostki alfa3 integryny podczas regeneracji mięśnia Soleus Areta Czerwińska Wpływ podawania egzogennego SDF-1 na różnicowanie się in vitro komórek satelitowych Agnieszka Markowska Różnicowanie się mioblastów rola białek adhezyjnych Iwona Czaplicka Wpływ SDF-1 na migrację komórek macierzystych in vitro Kamil Kowalski dr Małgorzata Zimowska Rola macierzy zewnątrzkomórkowej w regeneracji mięśni szkieletowych in vivo i różnicowaniu mioblastów in vitro Określenie aktywności MMP-9 w czasie różnicowania mioblastów linii C2C12 Eliza Nowak Określenie lokalizacji Wnt i Frizzled podczas regeneracji mięśni szkieletowych myszy Agnieszka Czajka Określenie wpływu inhibitora TIMP na proces różnicowania mioblastów in vitro. Określenie lokalizacji i aktywność MMP-9 i MMP-2. Barbara Świerczek Określenie wpływu zahamowania działania TGFbeta1 na aktywność MMP-9 i MMP-2 w czasie różnicowania mioblastów in vitro. Piotr Jung dr Karolina Archacka Zarodkowe macierzyste oraz pochodzenia płodowego w rozwoju i regeneracji i mięśni szkieletowych. Czynniki kontrolujące różnicowanie komórek. Określenie wzoru ekspresji Wnt w zarodkowych komórkach macierzystych Damian Dudka Ocena zdolności do fuzji mysich zarodkowych komórek macierzystych różnicujących w kulach zarodkowych Tomasz Czajkowski mgr Joanna Bem Rola mikrorna w miogenicznym różnicowaniu komórek opieka nad pracą licencjacką i magisterską Doroty Zawady dotyczącą różnicowania komórek indukowanego nadkespresją mimikowych mikrorna opieka nad pracą licencjacką Aleksandry Kupiec dotyczącą charakterystyki mezenchymalnych komórek macierzystych izolowanych z tkanki tłuszczowej Określenie ekspresji M-kadheryny i VCAM-1 w zarodkowych komórkach macierzystych różnicujących w kulach zarodkowych Łukasz Tolak 5
mgr inż. Paulina Kasprzycka Rola TGFbeta w różnicowaniu mioblastów i regeneracji mięśni szkieletowych mgr Barbara Świerczek Rola szlaku Wnt w różnicowaniu zarodkowych komórek macierzystych opieka nad pracą licencjacką Igora Stepańca dotyczącą ekspresji wybranych genów w mioblastach traktowanych halofuginonen opieka nad pracami licencjacką i magisterską Tomasza Czajkowskiego dotyczącymi różnicowania komórek opieka nad pracami magisterskimi Kingi Kuchcińskiej i Karoliny Kaczmarskiej dotyczącymi analizy stanu zapalnego w regenerujących mięśniach traktowanych IL-6 lub IL-10 mgr Kamil Kowalski Rola szlaku SDF-1 w różnicowaniu komórek macierzystych mgr Anita Helińska Rola białka Pax7 w regulacji miogenicznego różnicowania komórek in vivo opieka nad pracą magisterską Pauliny Cichosz dotyczącą reorganizacji cytoszkieletu aktynowego pod wpływem SDF-1 opieka nad pracą licencjacką Igora Meszki dotyczącą różnicowania komórek ips pod wpływem 5-azaC opieka nad pracą magisterską Joanny Nowackiej dotyczącą Pax7 w regulacji cyklu komórkowego komórek 6
LUDZIE prof. Maria Anna Ciemerych-Litwinienko Możliwości rozwojowe zarodkowych komórek macierzystych (), indukowanych komórek pluripotentnych (ips), regulacja cyklu komórkowego badania in vitro satelitowe badania in vivo regeneracja mięśni szczurów i myszy Rola mikrorna w zachowaniu pluripotencji komórek macierzystych, powstawaniu tkanek i nowotworzeniu Piotr Rowicki Czynniki wzrostu i cytokiny w różnicowaniu mioblastów i regeneracji mięśni szkieletowych Anna Andrzejewska linie komórkowe np. C2C12 zarodkowe macierzyste hodowle in vitro hodowle in vitro 3D różnicowanie komórek kule zarodkowe utworzone z ekto-, endo i mezodermy zarodkowe macierzyste () Fot. A. Czerwińska Fot. M. Przewoźniak różnicujące mioblasty skrawki optyczne lokalizacja aktyny i jąder komókowych (C2C12) Fot. I. Grabowska 7
badania histologiczne regenerujących mięśni immunolokalizacja wybranych epitopów na skrawkach histologicznych Fot. I. Grabowska Fot. I. Grabowska laminina, jądra komórkowe, ludzkie jądra komórkowe immunodetekcja badanych białek immunoprecypitacja Western blotting cytometria przepływowa M-kadheryny i β-kateniny MyoD i GFP ADAM12 V CAM 1 CD9 M kadheryna Fot. E. Wróbel Fot. E. Wróbel Fot. I. Grabowska E. Brzóska Fot. M. Przewoźniak 8
Badania poziomu mrna - RT-PCR Fot. E. Brzóska dzień 0 3 5 7 9 11 0 3 5 7 9 11 Pax7 GAPDH oraz Real Time PCR zymografia badania aktywności metaloproteinaz (MMP) in situ zymografia badania aktywności metaloproteinaz (MMP) w żelu Nadekspresja badanych białek (transfekcja) 48h 72h 144h C2C12 transfekowane plazmidem kodującym integrynę α3 0 1 3 5 7 14 MMP-9 MMP-2 Fot. M. Zimowska Fot. E. Brzóska Fot. M. Zimowska lokalizacja aktyny i aktywnej formy MMP2 i MMP9 (C2C12) LICENCJATY LICENCJATY chętnych proszę o kontakt: mniej więcej 5 miejsc oceny z : Biologii Komórki, Biologii Rozwoju, Zoologii i Biochemii ćwiczenia i egzamin CIEMERYCH@BIOL.UW.EDU.PL przy nadmiarze kandydatów ranking wg średniej z ocen oraz brane są pod uwagę doświadczenia w pracy laboratoryjnej 9