Woda Badania mikrobiologiczne

Transkrypt

1 Woda Badania mikrobiologiczne

2 Szanowni Pañstwo! Niniejsza broszura zawiera informacje dotycz¹ce mo liwoœci mikrobiologicznego badania wody pitnej, œcieków oraz naturalnych wód mineralnych, Ÿródlanych i wód sto³owych, zgodnie z obowi¹zuj¹cymi normami i rozporz¹dzeniami. Szczególnie pragniemy zwróciæ Pañstwa uwagê na nasz¹ ofertê dotycz¹c¹ pod³o y do wykrywania Clostridium perfingens ze œrodowiska wodnego, zgodnie z metodyk¹ opracowan¹ w Pañstwowym Zak³adzie Higieny, w Warszawie. Mamy nadziejê, e to wydawnictwo bêdzie dla Pañstwa pomocne w codziennej pracy*. Maria Wróbel Mened er Produktu ds. Mikrobiologii *Informacje dodatkowe: tel.: (48 32) , fax: (48 32) mikrobiologia@poch.com.pl Oferta produktowa Opracowanie: Maria Wróbel Czerwiec Informacje zamieszczone w broszurze, s¹ wa ne w czasie przekazywania jej do druku. W okresie jej wa noœci mog¹ one jednak ulec zmianie.

3 Ogólna liczba bakterii PN-EN ISO 6222 Oznaczenie iloœciowe mikroorganizmów zdolnych do wzrostu. Okreœlenie ogólnej liczby kolonii metod¹ posiewu na agarze od ywczym. Norma okreœla metodê oznaczania iloœciowego yj¹cych w wodzie mikroorganizmów poprzez liczenie kolonii, które wyros³y na agarze od ywczym, po inkubacji w warunkach tlenowych, w temperaturze 36 C i 22 C. Pobieranie próbek zgodnie z norm¹ EN i EN ISO Rozcieñczanie próbek Woda peptonowa (bez NaCl): K a 500 ml K a 20x9 ml Posiew na agar z ekstraktem dro d owym Agar z ekstraktem dro d owym: K a 180 ml K a 500 ml metod¹ p³ytek lanych próbka lub jej rozcieñczenie o obj. nie przekraczaj¹cej 2 ml Tryptone Yeast Extract Agar a 500 g Inkubacja (36+/-2) C przez (44+/-4) h (22+/-2) C przez (68+/-4) h Liczenie kolonii i okreœlenie liczby jtk 3

4 Pseudomonas aeruginosa PN-EN Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe Pseudomonas aeruginosa metod¹ filtracji membranowej Przygotowanie próbki okreœlon¹ objêtoœæ próbki wody lub jej rozcieñczenie przes¹cza siê przez filtr o œrednicy porów 0,45 µm Hodowla na pod³o u wybiórczym Pseudomonas agar (podstawa)/agar CN: K a 20 p³ytek - P2102 Pseudomonas Agar Base a 500 g Glycerol a 100 ml lub 250 ml lub 1 l - C8721 Cetrinix Supplement a 1 fl. Lub 10 fl. Pod³o a i odczynniki do potwierdzeñ wykonuje siê dla kolonii wymagaj¹cych potwierdzenia - kolonie wykazuj¹ce fluorescencjê inn¹ ni pochodz¹c¹ z piocjaniny (pigment niebieskozielony) lub maj¹ czerwonobr¹zowe zabarwienie Hodowla na agarze od ywczym Agar od ywczy: K a 20 p³ytek Nutrient Agar a 500 g Nutrient Agar Plates Test na oksydazê wykonuje siê dla kolonii, które pocz¹tkowo nie wykazywa³y fluorescencji Oxidase Test a 50 kr¹ ków Oxidase Strips a 100 pasków Test na zdolnoœæ wytwarzania fluoresceiny wykonuje siê dla kolonii oksydazododatnich Pseudomonas Agar F: K a 20 p³ytek King Agar B a 500 g Glycerol a 100 ml lub 250 ml lub 1 l - C8721 Cetrinix Supplement a 1 fl. lub 10 fl. Test na zdolnoœæ wytwarzania amoniaku z acetamidu wykonuje siê dla kolonii oksydazododatnich jak i kolonii, które pierwotnie wykazywa³y fluorescencjê Bulion z acetamidem: K a 20x5 ml Acetamide Nutrient Broth a 500 g Nessler Reagent a 500 ml 4

5 Escherichia coli i bakterie grupy coli PN-EN ISO Jakoœæ wody Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe Escherichia coli i bakterii grupy coli Czêœæ 1: Metoda filtracji membranowej Przygotowanie próbki Test standardowy badane próbki poddaje siê filtracji membranowej Posiew na pod³o e selektywne Agar z laktoz¹, TTC i Tergitolem: K a 20 p³ytek Lactose TTC Agar with Tergitol-7 a 500 g TTC Solution a 10 x 10 ml Test potwierdzenia Test na oksydazê Oxidase Test a 50 kr¹ ków Oxidase Strips a 100 pasków Test na wytwarzanie indolu: DEV Tryptophan Broth a 500 g Etap 1: inkubacja w bulionie tryptofanowym Etap 2: Kovacs Reagent a 100 ml reakcja wytwarzania indolu Przygotowanie próbki Test szybki badane próbki poddaje siê filtracji membranowej Posiew na podo e agarowe z kazein¹ - Etap 1: inkubacja (36+/-2) C przez 4 do 5 h CASO TSA: K a 20 p³ytek CASO TSA a 500 g z kazein¹ i solami ó³ci - Etap 2: inkubacja (44,0+/-0,5) C przez 19 do 20 h TBA: K a 20 p³ytek Test potwierdzenia Test do wykrywania indolu DMCA Indole Discs a 50 kr¹ ków Test na oksydazê Oxidase Test a 50 kr¹ ków Oxidase Strips a 100 pasków 5

6 Legionella spp. PN-ISO Jakoœæ wody Wykrywanie i oznaczanie bakterii z rodzaju Legionella Przygotowanie próbek próbkê wody poddaje siê filtracji lub wirowaniu; w przypadku osadów, z³ogów lub mu³u stosuje siê rozcieñczenie i hodowlê bezpoœredni¹ Próbka bez obróbki Próbka poddana dzia³aniu temp. próbka o obj. (1+/-0,5 ml); temp.(50+/-1) C;(30+/-2) min. Próbka poddana dzia³aniu kwasu próbkê o obj. 1 ml do 10 ml wirowaæ i dodaæ kwaœny bufor Posiew na pod³o e selektywne wszystkie trzy próbki o obj. 0,1 ml do 0,5 ml posiaæ na pod³o e selektywne GVPC (buforowane pod³o e z wêglem drzewnym, ekstraktem dro d owym i selektywnymi dodatkami): K000 X4017 a 20 p³ytek Buffered Charcoal Yeast Extract Agar a 100 g Legionella Selective Supplement IV a 2 amp. Potwierdzenie kolonii domniemanych Legionella BCYE w/cysteine: K a 20 p³ytek BCYE w/o cysteine: K a 20 p³ytek trzy kolonie charakterystyczne dla Legionella z ka dej p³ytki z pod³o em GVPC przeszczepiæ na p³ytkê z pod³o em BCYE bez cysteiny i z cystein¹ Buffered Charcoal Yeast Extract Agar a 100 g Legionella Supplement a 5 amp. Identyfikacja do gatunku identyfikacji do gatunku mo na dokonaæ przy pomocy testu lateksowego lub inn¹ metod¹ wymieniona w normie 6

7 Enterokoki ka³owe PN-EN ISO Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe enterokoków ka³owych Czêœæ 2: Metoda filtracji membranowej Przygotowanie próbek próbkê wody poddaje siê filtracji lub wirowaniu; w przypadku osadów, z³ogów lub mu³u stosuje siê rozcieñczenie i hodowlê bezpoœredni¹ Pod³o e selektywne zawiera azydek sodu i TTC, który enterokoki ka³owe redukuj¹ do czerwonego formazanu Agar Slanetz Bartley'a: K a 20 p³ytek Membrane Filter Enterococcus Selective Agar a 500 g Potwierdzanie sprawdza siê zdolnoœæ hydrolizy eskuliny Agar z ó³ci¹, zieleni¹ i azydkiem: K a 180 ml Agar z ó³ci¹, zieleni¹ i azydkiem: K a 20 p³ytek Bile Esculin Azide Agar a 500 g 7

8 Beztlenowce redukuj¹ce siarczyny (clostridia) PN-EN Jakoœæ wody Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny (clostridia) Czeœæ 1: Metoda namna ania w pod³o u p³ynnym Pobieranie próbek zgodnie z norm¹ ISO i ISO 8199 próbki wymagaj¹ ogrzania w temp. (75+/-5) C przez 15 min. Rozcieñczanie próbek Woda peptonowa (bez NaCl): K a 20 x 9 ml Woda peptonowa (bez NaCl): K a 500 ml Hodowla Clostridial Differential Broth* a 100 g lub 500 g * ró nice w sk³adzie w stosunku do normy 8

9 Beztlenowce redukuj¹ce siarczyny (clostridia) PN-EN Jakoœæ wody Wykrywanie i oznaczanie iloœciowe przetrwalników beztlenowców redukuj¹cych siarczyny (clostridia) Czeœæ 2: Metoda filtracji membranowej Przygotowanie próbki zgodnie z norm¹ ISO i ISO 8199 próbki wymagaj¹ ogrzania w temp. (75+/-5) C przez 15 min. filtracja próbki przy zastosowaniu filtra o œrednicy porów 0,2 µm Agar siarczynowo- elazawy* Agar tryptozowo-siarczynowy - pod³o e alternatywne: Hodowla w warunkach beztlenowych Perfingens TSC Agar: K a 20 p³ytek Agar Perfingens TSC: K a 180 ml Agar Perfingens TSC: K a 500 ml * brak w ofercie pod³o a o sk³adzie zgodnym z norm¹ TSC Agar a 500 g D-Cycloserin a 1 g lub 5 g TSC Agar Supplement a 5 g 9

10 Metodyka wykrywania i izolacji Clostridium perfingens ze œrodowiska wodnego PZH, 2006 Czêœæ I: Badanie wody w kierunku Clostridium perfingens na pod³o u TSC z cykloseryn¹ (ISO/CD ) Przygotowanie próbki Oznaczanie liczby przetrwalników niezbêdne ogrzanie próbki w temp. (60+/-2) C Oznaczanie liczby komórek wegetatywnych posiew bezpoœredni próbki poddanej filtracji przez 15 min. i filtracja przy zastosowaniu filtrów o œrednicy 47 mm i œrednicy porów 0,45 µm Hodowla na pod³o u Agar Perfingens TSC: K a 20 p³ytek Agar Perfingens TSC: K a 180 ml Agar Perfingens TSC: K a 500 ml TSC z cykloseryn¹ w warunkach beztlenowych TSC Agar a 500 g D-Cycloserin a 1 g lub 5 g TSC Agar Supplement a 5 g Badanie potwierdzaj¹ce potwierdza siê charakterystyczne kolonie przeszczepiaj¹c na dwie p³ytki agarowe z krwi¹ (inkubacja w warunkach tlenowych i beztlenowych w temp.(36+/-2) C Agar Columbia z krwi¹: K a 20 p³ytek Agar z krwi¹ barani¹: K a 20 p³ytek przez (21+/-3) h) Wykrywanie redukcji azotanów i ruchliwoœci bakterii tylko kolonie, które wyros³y na pod³o u z krwi¹ Motility Nitrate Medium a 500 g Glycerol a 100 ml, 250 ml lub 1 l Reagent A a 5 g, 100 g lub 500 g - D-4011 Reagent B a 10 ml, 25 ml, 100 ml lub 500 ml w warunkach beztlenowych 10

11 Metodyka wykrywania i izolacji Clostridium perfingens ze œrodowiska wodnego PZH, 2006 Czêœæ II: Badanie wody w kierunku Clostridium perfingens na pod³o u m-cp (wg dyrektywy 98/83/WE) Przygotowanie próbki Oznaczanie liczby przetrwalników niezbêdne ogrzanie próbki w temp. (60+/-2) C Oznaczanie liczby komórek wegetatywnych posiew bezpoœredni próbki poddanej filtracji przez 15 min. i filtracja przy zastosowaniu filtrów o œrednicy 47 mm i œrednicy porów 0,45 µm m-cp Agar: K a 20 p³ytekl Hodowla na pod³o u m-cp HiCrome m-cp Agar Base*a 100 g i 500 g m-cp Selective Supplement I** a 5 fl m-cp Selective Supplement II*** a 5 fl. * pod³o e zawiera ß-D glukozyd indoksylu i FeCl 3 ** zawiera D-Cycloserine i Polymyxin B sulfate *** zawiera Pfenolphtalein diphosphate sol. Potwierdzenie ekspozycja wyros³ych kolonii na dzia³anie par wodorotlenku amonu przez 30 sek. 11

12 REGION ZACHODNI Region dolnoœl¹ski, lubuski kom.: DKwroclaw@poch.com.pl tel.: fax: Wroclaw@poch.com.pl Region kujawsko-pomorski kom.: DKbydgoszcz@poch.com.pl tel.: fax: Bydgoszcz1@poch.com.pl Region ma³opolski kom.: DKkrakow@poch.com.pl tel.: Krakow@poch.com.pl tel.: Krakow1@poch.com.pl fax: Region pomorski, zachodnio-pomorski kom.: DKgdansk@poch.com.pl tel.: fax: Gdansk@poch.com.pl Region œl¹ski, opolski kom.: DKkatowice@poch.com.pl tel.: fax: Katowice@poch.com.pl REGION WSCHODNI Region lubelski, œwiêtokrzyski kom.: DKlublin@poch.com.pl tel.: lub 10 fax: Lublin@poch.com.pl Region ³ódzki kom.: DKlodz@poch.com.pl tel.: fax: Lodz@poch.com.pl Region mazowiecki, podlaski kom.: DKwarszawa1@poch.com.pl tel.: fax: Warszawa1@poch.com.pl Region mazowiecki, warmiñsko-mazurski kom.: DKwarszawa@poch.com.pl tel.: fax: Warszawa@poch.com.pl Region podkarpacki kom.: DKrzeszow@poch.com.pl tel.: lub 10 fax: Rzeszow@poch.com.pl Region wielkopolski kom.: DKpoznan@poch.com.pl tel.: fax: Poznan@poch.com.pl MENED ER REGIONALNY kom.: MRzachod@poch.com.pl MENED ER REGIONALNY kom.: MRwschod@poch.com.pl Sklep Firmowy POCH S.A. ul. Sowiñskiego Gliwice tel.: fax: Gliwice@poch.com.pl Centrum Regionalne POCH S.A. ul. Melgiewska Lublin tel.: , fax: Lublin@poch.com.pl POCH S.A Gliwice, ul. Sowiñskiego 11, Polska tel. (48 32) , fax (48 32) poch@poch.com.pl, NIP: S¹d Rejonowy w Gliwicach, X Wydzia³ Gospodarczy KRS nr Wysokoœæ kapita³u zak³adowego: ,00 z³., w ca³oœci op³acony