Izolacja, identyfikacja i ocena lekooporności gronkowców w powietrzu domu studenckiego Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie



Podobne dokumenty
XIII. Staphylococcus, Micrococcus ćwiczenia praktyczne

Ćwiczenie 1 Morfologia I fizjologia bakterii

Ćwiczenie 1. Oznaczanie wrażliwości szczepów na metycylinę

- podłoża transportowo wzrostowe..

Staphylococcus ćwiczenia praktyczne. a. agarze z dodatkiem 5% odwłóknionej krwi baraniej (AK)

Maciej Bryl1, Dorota Łojko1, Ryszard Giersz1, Ewa Andrzejewska2 NOSICIELSTWO STAPHYLOCOCCUS AUREUS WŚRÓD STUDENTÓW RÓŻNYCH KIERUNKÓW NAUCZANIA

Podhalańska Państwowa Wyższa Szkoła Zawodowa w Nowym Targu

Dane opracowane ze środków finansowych będących w dyspozycji Ministra Zdrowia w ramach realizacji programu polityki zdrowotnej pn.

Oporność na antybiotyki w Unii Europejskiej Dane zaprezentowane poniżej zgromadzone zostały w ramach programu EARS-Net, który jest koordynowany przez

Oporność na antybiotyki w Unii Europejskiej

PROBLEMY TERAPEUTYCZNE WTÓRNYCH ZAKAŻEŃ KRWI POWODOWANE PRZEZ PAŁECZKI Enterobacterales W PRAKTYCE ODDZIAŁÓW ZABIEGOWYCH I ZACHOWAWCZYCH

Obszar niepewności technicznej oznaczania lekowrażliwościatu w rekomendacjach EUCAST 2019

Wrażliwość na antybiotyki i zdolność wytwarzania śluzu przez szczepy gronkowców koagulazo-ujemnych

Protokoły do zajęć praktycznych z mikrobiologii ogólnej i żywności dla studentów kierunku: Dietetyka

Numer 3/2018. Oporność na antybiotyki w Polsce w 2017 roku dane sieci EARS-Net

S Y LA BUS MODUŁU. In f o r m acje o gólne. Mikrobiologia

S Y LA BUS MODUŁU. In f o r m acje o gólne. Mikrobiologia

SPRAWOZDANIE Z BADAŃ MIKROBIOLOGICZNYCH Nr 20005/11858/09

XXV. Grzyby cz I. Ćwiczenie 1. Wykonanie i obserwacja preparatów mikroskopowych. a. Candida albicans preparat z hodowli barwiony metoda Grama

VI. Antybiotyki i chemioterapeutyki ćwiczenia praktyczne

1. Demonstracja preparatów bakteryjnych barwionych metodą negatywną ukazujących kształty komórek bakteryjnych.

Projekt Alexander w Polsce w latach

KARTA KURSU. Kod Punktacja ECTS* 4

Badanie mikrobiologiczne płynów z jam ciała

IV. Streptococcus, Enterococcus ćwiczenia praktyczne

Podsumowanie najnowszych danych dotyczących oporności na antybiotyki w krajach Unii Europejskiej Dane z monitorowania sieci EARS-Net

RAPORT 1.1/SRM/2017 Z BADAŃ PRZEWIDZIANYCH W UMOWIE Z DNIA R.

S YL AB US MODUŁ U. I nforma cje ogólne. Mikrobiologia i Biologia

Ochrony Antybiotyków. AktualnoŚci Narodowego Programu. Podsumowanie aktualnych danych nt. oporności na antybiotyki w Unii Europejskiej.

Ocena lekowrażliwości szczepów bakteryjnych wyizolowanych ze środowiska oddziału urologicznego

HARMONOGRAM ZAJĘĆ dla studentów Uniwersyteckiego Centrum Medycyny Weterynaryjnej UJ-UR Mikrobiologia weterynaryjna II rok 2016/2017 semestr letni

Zakład Mikrobiologii Klinicznej [1]

CZĘŚĆ TEORETYCZNA. Pseudomonas sp. Rodzaj Pseudomonas obejmuje 200 gatunków najważniejszy Pseudomonas aerugonosa.

Przedmiot : Mikrobiologia

Analiza mikrobiologiczna oddziałów szpitalnych - skumulowane dane na temat antybiotykowrażliwości dla celów empirycznej terapii zakażeń

Podstawy różnicowania bakterii i grzybów. Imię i nazwisko:

WYNIKI PUNKTOWEGO BADANIA ZAKAŻEŃ SZPITALNYCH ZE SZCZEGÓLNYM UWZGLĘDNIENIEM ZAKAŻEŃ MIEJSCA OPEROWANEGO PRZEPROWADZONEGO 2013 ROKU W WSZZ W TORUNIU

SPRAWOZDANIE Z BADAŃ MIKROBIOLOGICZNYCH Nr 20006/11859/09

Diagnostyka mikrobiologiczna zakażeń krwi Paweł Zwierzewicz

ANALIZA WYNIKÓW POSIEWÓW KRWI U DZIECI Z ZAŁOŻONYM CEWNIKIEM CENTRALNYM

18 listopada. Europejski Dzień Wiedzy o Antybiotykach

Analiza mikrobiologiczna powietrza oraz zapylenia i występowania aktywnych biologicznie substancji w powietrzu m. Kielce

CENTRALNY OŚRODEK BADAŃ JAKOŚCI

Nowe definicje klinicznych kategorii wrażliwości wprowadzone przez EUCAST w 2019 roku

Mikrobiologia jamy ustnej preparaty mikroskopowe i pożywki

Nowoczesna diagnostyka mikrobiologiczna

Zakażenia gronkowcowe w Podhalańskim Szpitalu Specjalistycznym im. Jana Pawła II w Nowym Targu w latach analiza antybiotykoporności

Harmonogram zajęć z Mikrobiologii z parazytologią i Immunologii dla studentów II roku kierunku lekarskiego WL 2018/2019 GRUPA 5

SHL.org.pl SHL.org.pl

Wpływ racjonalnej antybiotykoterapii na lekowrażliwość drobnoustrojów

S YLABUS MODUŁU (PRZEDMIOTU) I nformacje ogólne. Diagnostyka mikrobiologiczna. Nie dotyczy. 13 Wykłady: 30 h, ćwiczenia 120h;

OPIS PRZEDMIOTÓW REALIZOWANYCH W KATEDRZE MIKROBIOLOGII ŚRODOWISKOWEJ

Zalecenia rekomendowane przez Ministra Zdrowia. KPC - ang: Klebsiella pneumoniae carbapenemase

ETIOLOGIA ZAKAŻEŃ SZPITALNYCH REJESTROWANYCH W SZPITALU UNIWERSYTECKIM NR 2 W BYDGOSZCZY W LATACH

Ćwiczenie 8, 9, 10 Kontrola mikrobiologiczna środowiska pracy

Przedmiot zamówienia -Specyfikacja cenowa

I. Wykaz drobnoustrojów alarmowych w poszczególnych jednostkach organizacyjnych podmiotów leczniczych.

S YLABUS MODUŁU. I nformacje ogólne

Detekcja i identyfikacja drobnoustrojów. oznaczanie lekowrażliwości bakterii

[1ZKO/KII] Mikrobiologia skóry

Elżbieta Arłukowicz Streszczenie rozprawy doktorskiej

Mikrobiologia jamy ustnej treść ćwiczeń

Mikrobiologia - Bakteriologia

Barwienie złożone - metoda Grama

Interpretacja wg EUCAST S-wrażliwy I-średniowrażliwy R - oporny

METODY OZNACZANIA LEKOWRAŻLIWOŚCI DROBNOUSTROJÓW I WYKRYWANIA MECHANIZMÓW OPORNOŚCI NA LEKI MOŻLIWOŚCI TERAPII ZAKAŻEŃ PRZEWODU POKARMOWEGO

Ćwiczenie 1. Mikrobiologia ogólna - Pożywki bakteryjne. Techniki posiewów. Uzyskiwanie czystej hodowli.

Mikrobiologia - Bakteriologia

Monitorowanie oporności w Polsce dane sieci EARS-Net

ZAKAŻENIA SZPITALNE. Michał Pytkowski Zdrowie Publiczne III rok

S YL AB US MODUŁ U ( PRZEDMIOTU) I nforma cje ogólne. Zakażenia szpitalne

III. Zapotrzebowanie roczne na odczynniki do bakteriologii ogólnej i gruźlicy. A. Gotowe podłoża hodowlane do diagnostyki. mikrobiologicznej.

SHL.org.pl SHL.org.pl

OGÓLNY PLAN ĆWICZEŃ I SEMINARIÓW Z MIKROBIOLOGII OGÓLNEJ dla studentów STOMATOLOGII w roku akademickim semestr zimowy Seminarium 1.

RAPORT Z BADAŃ REALIZOWANYCH W RAMACH OCENY STĘŻENIA BIOAEROZOLU ZANIECZYSZCZAJĄCEGO POWIETRZE NA PODSTAWIE LICZEBNOŚCI WYBRANYCH GRUP DROBNOUSTROJÓW

Ochrony Antybiotyków. AktualnoŚci Narodowego Programu

Prezentacja Pracowni Ekologii Drobnoustrojów w Katedry Mikrobiologii UJCM

Program ćwiczeń z mikrobiologii dla studentów III roku Oddziału Analityki Medycznej, rok akademicki 2014/2015 SEMESTR LETNI

Podstawy mikrobiologii

Arkusz1. Nazwa artykułu opakowanie ilość opak. 1 Agar Columbia + 5% krew barania 20 płytek* 205

Zakład Higieny Środowiska Narodowy Instytut Zdrowia Publicznego Państwowy Zakład Higieny

Odpowiedzi ekspertów EUCAST na pytania najczęściej zadawane przez lekarzy klinicystów i mikrobiologów

RAPORT 1.2/SRM/2017 Z BADAŃ PRZEWIDZIANYCH W UMOWIE Z DNIA R.

1. Wykonanie preparatów bezpośrednich i ich ocena: 1a. Wykonaj własny preparat bezpośredni ze śliny Zinterpretuj i podkreśl to co widzisz:

Diagnostyka molekularna w OIT

DOTYCZY REGULAMINU OCENY WYNIKÓW SPRAWDZIANÓW POLMICRO

Nazwa studiów: KONTROLA ZAKAŻEŃ W JEDNOSTKACH OPIEKI ZDROWOTNEJ Typ studiów: doskonalące WIEDZA

WIEDZA. Zna podstawy prawne realizacji programu kontroli zakażeń.

ODNIESIENIA DO PODSTAW PROGRAMOWYCH. Kapsułki Antybiotyków

INFORMACJA NA TEMAT ZAKAŻEŃ SKÓRY WYWOŁYWANYCH PRZEZ GRONKOWCA ZŁOCISTEGO (STAPHYLOCOCCUS AUREUS) OPORNEGO NA METICYLINĘ (MRSA)

WYTYCZNE W-0018_001 WYTYCZNE WYDAWANIA RAPORTÓW Z BADAŃ MIKROBIOLOGICZNYCH. Data wprowadzenia:

Spis treœci. 1. Wstêp... 1

Zagadnienia egzaminacyjne z przedmiotu Mikrobiologia kosmetologiczna dla studentów II roku kierunku Kosmetologia

OGÓLNY PLAN ĆWICZEŃ I SEMINARIÓW Z MIKROBIOLOGII OGÓLNEJ dla studentów STOMATOLOGII w roku akademickim semestr zimowy

ZASADY BADAŃ BAKTERIOLOGICZNYCH

PAŃSTWOWA WYŻSZA SZKOŁA ZAWODOWA W NOWYM SĄCZU SYLABUS PRZEDMIOTU. Obowiązuje od roku akademickiego: 2011/2012

Krakowska Akademia im. Andrzeja Frycza Modrzewskiego. Karta przedmiotu. obowiązuje studentów, którzy rozpoczęli studia w roku akademickim 2016/2017

Instrukcje do ćwiczeń oraz zakres materiału realizowanego na wykładach z przedmiotu Mikrobiologia na kierunku chemia kosmetyczna

HARMONOGRAM ZAJĘĆ dla studentów Uniwersyteckiego Centrum Medycyny Weterynaryjnej UJ-UR Mikrobiologia weterynaryjna II rok 2017/2018 semestr letni

szt 5400 szt 1500 szt 2500 szt 4000 szt 1500 szt 400 szt 2000 szt 600 szt 500 szt 3000 szt 200

Transkrypt:

19 Polish Journal of Agronomy 2014, 16, 19 23 Izolacja, identyfikacja i ocena lekooporności gronkowców w powietrzu domu studenckiego Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie Anna Lenart-Boroń, Katarzyna Wolny-Koładka, Anna Kwaśniewska Katedra Mikrobiologii, Uniwersytet Rolniczy w Krakowie Al. Mickiewicza 24/28, 30-059 Kraków, Polska Abstrakt. Celem przedstawionej pracy była izolacja, identyfikacja gatunkowa oraz ocena lekooporności bakterii z rodzaju Staphylococcus, wyizolowanych z powietrza domu studenckiego Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie. Pobór próbek powietrza był wykonywany przy użyciu próbnika MAS-100 (Merck), z zastosowaniem podłoża Chapmana. Po uzyskaniu czystych izolatów bakterii przeprowadzono identyfikację gatunkową przy użyciu m.in. posiewów na podłoża chromogenne i testów biochemicznych. Badania lekooporności wykonano w oparciu o zalecenia Krajowego Ośrodka Referencyjnego ds. Lekowrażliwości Drobnoustrojów (KORLD). Pozyskano 10 izolatów należących do 5 gatunków: S. xylosus (2), S. epidermidis (1), S. cohniiurealyticum (5), S. aureus (1), S. haemolyticus (1). Wszystkie izolaty, poza S. aureus, były koagulazoujemne oraz dały negatywny wynik w teście na obecność białka A. Wszystkie izolaty charakteryzowały się wrażliwością na metycylinę, natomiast wśród antybiotyków z grupy makrolidów i linkosamidów wyróżniono różne fenotypy oporności. Stwierdzono, że zanieczyszczenie powietrza gronkowcami w domu studenckim nie stwarza bezpośredniego niebezpieczeństwa dla osób tam przebywających, a wyizolowane gronkowce to głównie gatunki należące do mikroflory skóry człowieka. słowa kluczowe: Staphylococcus spp., lekooporność, antybiotyki, powietrze WSTĘP Mikroorganizmy występujące w powietrzu, szczególnie bakterie i grzyby, mogą powodować wiele dolegliwości. Wymienić tu należy m.in. katar sienny, zapalenie oskrzeli, zapalenie płuc, astmę, gruźlicę, choroby układu sercowo-naczyniowego czy reakcje alergiczne. Zanieczyszczone bakteriami powietrze sprzyja występowaniu Autor do kontaktu: Anna Lenart-Boroń, e-mail: annalenart82@gmail.com, tel. 48 12 662 4096 Praca wpłynęła do redakcji 17 lipca 2013 r. chorób układu oddechowego. Zakażenia dolnych dróg oddechowych stanowią wciąż jedną z najczęstszych przyczyn zachorowalności i śmiertelności zarówno w szpitalu, jak i poza nim (Stefaniuk, 2006). Wśród tworzących bioaerozol bakterii na szczególną uwagę zasługuje rodzaj Staphylococcus, do którego należą Gram-dodatnie ziarniaki o średnicy ok. 1 µm (Heczko, 2006). Są to bakterie nieruchliwe, nie wytwarzające przetrwalników. Są względnymi beztlenowcami, aczkolwiek lepszy ich wzrost obserwuje się w warunkach tlenowych, w środowisku o odczynie obojętnym lub lekko zasadowym (Grzybowski, Reiss, 2001). Dobrze rosną na większości podłoży, jednak istnieje wiele podłoży różnicujących, umożliwiających ich szybką identyfikację, np. Staphylococcus aureus ID agar (SAID), biomerieux czy SA select (Bio-Rad). Na podłożach z krwią baranią mogą powodować hemolizę typu β. Spośród innych ziarniaków wyróżnia je zdolność wzrostu nawet w obecności 15% NaCl, oporność na działanie lizozymu (100 µg ml -1 ) czy zdolność do fermentacji glukozy (Grzybowski, Reiss, 2001). Gronkowce mogą wytwarzać wielocukrowe otoczki i śluz w formie egzopolisacharydu (Irving i in., 2008). Śluz umożliwia bakteriom ścisłe przyleganie do powierzchni i utworzenie warstwy skupionych komórek stanowiącej biofilm, na przykład na powierzchni tkanek bądź na powierzchni ran. Na skutek różnych urazów mechanicznych ciągłość biofilmu może być przerwana i jego fragmenty obfite w bakterie mogą wraz z krwią dostać się do narządów, będąc przyczyną zakażeń (Bartoszewicz-Potyrała, Przondo-Mordarska, 2002). Ze względu na zdolność wytwarzania koagulazy gronkowce można podzielić na dwie główne grupy: wytwarzające koagulazę koagulazododatnie i nie wytwarzające koagulazy koagulazoujemne. Do pierwszej grupy zaliczamy m.in. S. aureus, S. intermedius, natomiast do drugiej S. epidermidis, S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. hominis (Irving i in., 2008). Cechą charakterystyczną gronkowców jest także wrażliwość na furazolidon i brak wraż-

20 Polish Journal of Agronomy, No. 16, 2014 liwości na bacytracynę, co pozwala odróżnić je od innych ziarniaków Gram-dodatnich. Wytwarzanie katalazy jest natomiast cechą różniącą je od paciorkowców (Jerzmanowski, 1996). Gronkowce kolonizują organizm człowieka i zwierząt. Zasiedlają głównie skórę, nabłonki i błony śluzowe, szczególnie wilgotne okolice nosa, rejony pod pachami i w pachwinach (Irving i in., 2008). Koagulazoujemne gronkowce należą do bakterii obecnych stale w środowisku naturalnym (gleba, kurz), u ludzi stanowią istotną (65 90%) część mikroflory fizjologicznej skóry, błon śluzowych jamy ustnej i nosogardzieli, a także pochwy i cewki moczowej (Bartoszewicz-Potyrała, Przondo-Mordarska, 2002). Z kolei koagulazododatni S. aureus zasiedla błony śluzowe nosa na stałe u 20% ludzi, a przejściowo u około 30% (Żabicka, 2010). Bakterie z rodzaju Staphylococcus mogą przeżyć w powietrzu wiele dni, z łatwością się przenosząc i skażając środowisko przez długi czas. Z punktu widzenia najważniejszych czynników etiologicznych zakażeń u ludzi najistotniejsze są trzy gatunki: S. aureus, S. epidermidis oraz S. saprophyticus (Bartoszewicz-Potyrała, Przondo-Mordarska, 2002). W obecnych czasach dysponujemy przepisami dotyczącymi jakości powietrza w różnych sektorach gospodarki. Bardzo ważne jest przestrzeganie tych norm, szczególnie w pomieszczeniach zamkniętych. W budynkach zamieszkiwanych przez większe grupy ludzi, zanieczyszczone powietrze może być bezpośrednią przyczyną wielu chorób. Takim miejscem jest np. dom studencki. Mimo iż mikroorganizmy w postaci bioaerozolu często nie stanowią zagrożenia w prawidłowych warunkach środowiskowych, to jednak należy kontrolować stan mikrobiologicznego zanieczyszczenia w pomieszczeniach, w których przebywają ludzie, by wykluczyć możliwość zakażenia. Obecnie w Polsce nie ma odpowiednich uregulowań prawnych, które jednoznacznie wskazywałyby na dopuszczalne stężenia mikroorganizmów w miejscach przebywania ludzi. Według Gąski-Jędruch i Dudzińskiej (2009) Od wielu lat krajowe komitety specjalistów, niezależne grupy naukowców i indywidualni badacze proponują zakresy wartości dopuszczalnych stężeń szkodliwych czynników biologicznych w pomieszczeniach zamkniętych. Jedna z propozycji została podana przez Zespół Ekspertów ds. Czynników Biologicznych Międzyresortowej Komisji ds. NDS (najwyższe dopuszczalne stężenie) i NDN (najwyższe dopuszczalne natężenie) w roku 2001. Dotyczy ona przyjęcia zalecanych wartości dopuszczalnych stężeń najczęściej spotykanych mikroorganizmów i endotoksyny bakteryjnej w powietrzu pomieszczeń przemysłowych oraz mieszkalnych. Wartości te mogą być pomocne w interpretacji wyników pomiarów szkodliwych czynników biologicznych oraz w ustaleniu ogólnie akceptowanych norm dotyczących jakości powietrza (Gołofit-Szymczak, Skowroń, 2005). Nie ulega zatem wątpliwości fakt, iż jakość powietrza jest niezwykle ważna w ocenie narażenia człowieka na negatywne skutki zanieczyszczenia środowiska. Spośród trzech składników środowiska (gleba, woda, powietrze), to właśnie ten ostatni ma największy wpływ na organizm ludzki (Zimny, 2010). Mikroorganizmy znajdujące się w powietrzu mogą stać się przyczyną wielu infekcji, a także zakażeń o charakterze ogólnoustrojowym. Domy studenckie są obiektami o dużej gęstości zamieszkania, a ich mieszkańcy mogą stać się źródłem różnorodnych drobnoustrojów, w tym gronkowców, stanowiących bioaerozol. Biorąc pod uwagę powyższe problemy, celem niniejszej pracy była ocena potencjalnego zagrożenia epidemiologicznego wynikającego z obecności bakterii z rodzaju Staphylococcus w powietrzu Domu Studenckiego OAZA Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie. Zadania badawcze w niniejszej pracy obejmowały: izolację bakterii z rodzaju Staphylococcus z powietrza znajdującego się w pomieszczeniach Domu Studenckiego OAZA Uniwersytetu Rolniczego w Krakowie, identyfikację gatunkową zgromadzonych izolatów, ocenę lekowrażliwości Staphylococcus spp. na wybrane antybiotyki bakteriobójcze lub bakteriostatyczne. MATERIAŁY I METODY Pobór próbek powietrza z Domu Studenckiego OAZA UR Kraków był wykonywany przy użyciu próbnika powietrza MAS-100 (Merck), z zastosowaniem podłoża Chapmana. Pobór próbek wykonano w kwietniu 2011 roku w godzinach popołudniowych w czterech bezpośrednio następujących po sobie powtórzeniach. Próbki pobrano w trzech stanowiskach: pokój, w którym mieszkały 3 osoby, ogólnodostępna dla całego piętra kuchnia i toaleta, wspólna dla dwóch pokoi (5 osób). W badanym okresie wszystkie pokoje Domu Studenckiego były zamieszkane. Szalki z podłożem Chapmana inkubowano w temperaturze 37 o C przez 48 h, następnie kolonie Staphylococcus spp. przeszczepiano na podłoże Columbia agar z krwią baranią (biomerieux) w celu izolacji czystych kultur. Z kolonii, które wyrosły na podłożu agarowym z krwią baranią, sporządzono preparaty, barwiono metodą Grama i dokonano obserwacji mikroskopowych. Równocześnie na podłoża z agarem krwawym w taki sam sposób posiano szczepy wzorcowe S. aureus ATTC 25923 oraz S. epidermidis ATTC 12228, hodowle inkubowano 24 h w temp. 37 o C. Stanowiły one odniesienie i pozwalały na weryfikację jakości uzyskanych w toku analiz wyników. Kolejnym etapem było wykonanie testów: koagulaza probówkowa, wrażliwość na nowobiocynę i furazolidon, posiew na podłoża różnicujące SAID (biomerieux, Francja) i SA selekt (Bio-Rad, Francja), test na obecność białka A (PastorexStaph Plus, Bio-Rad, Francja), API ID 32 STAPH (biomerieux, Francja). Po zidentyfikowaniu gatunków zgromadzonych izolatów badano ich wrażliwość na antybiotyki (cefoksytynę, erytromycynę, klindamycy-

A. Lenart-Boroń i in. Izolacja, identyfi kacja i ocena lekooporności gronkowców w powietrzu domu studenckiego 21 nę) oraz występowanie mechanizmu. Korzystano z metodyki zalecanej przez Krajowy Ośrodek Referencyjny ds. Lekowrażliwości Drobnoustrojów (KORLD) (Hryniewicz, Żabicka, 2010). WYNIKI I DYSKUSJA W wyniku analizy mikrobiologicznej powietrza stwierdzono obecność gronkowców w ilości: 370 jtk m -3 powietrza w pokoju, 150 jtk m -3 w toalecie oraz 27 jtk m -3 powietrza w kuchni. Pozyskano 10 izolatów należących do 5 gatunków: S. xylosus (2), S. epidermidis (1), S. cohnii urealyticum (5), S. aureus (1), S. haemolyticus (1). Wszystkie izolaty były wrażliwe na furazolidon i wszystkie poza S. aureus były koagulazoujemne oraz dały negatywny wynik w teście na obecność białka A. Bakterie z gatunków S. xylosus i S. cohnii urealyticum były oporne na działanie nowobiocyny. Na podłożu SAID S. aureus rósł w postaci zielonych kolonii, zaś pozostałe izolaty były białe. Na podłożu SA Select badane izolaty tworzyły kolonie w kolorach: różowym (S. aureus), białym (S. epidermidis, S. haemolyticus) i turkusowym (S. xylosus, S. cohnii urealyticum). Izolaty z gatunków: S. xylosus, S. cohnii urealyticum bardzo rzadko wywołują infekcje, ale mogą jednak powodować zakażenia ran czy zapalenie wsierdzia. Z kolei S. aureus, S. epidermidis i S. haemolyticus mogą wywoływać groźne dla zdrowia i życia infekcje. Gronkowce te mogą powodować posocznice, zapalenie otrzewnej, infekcje dróg moczowych, a także zakażenia ran, kości i stawów (Schleifer, Bell, 2009). Wszystkie izolaty charakteryzowały się wrażliwością na metycylinę, natomiast według reakcji na antybiotyki z grupy makrolidów (erytromycyna) i linkosamidów (klindamycyna) wyróżniono różne fenotypy (tab. 1): izolaty wrażliwe na erytromycynę i klindamycynę oznaczono jako izolaty wrażliwe S. aureus, S. haemolyticus oraz szczepy wzorcowe; izolat oporny na erytromycynę i wrażliwy na klindamycynę oznaczono jako izolat MS B ; w tym przypadku nie powinno się stosować makrolidów 14- i 15-członowych oraz streptogramin B S. epidermidis; izolat oporny na erytromycynę i wrażliwy na klindamycynę (spłaszczenie strefy zahamowania wzrostu) oznaczono jako izolat indukcyjny S. cohnii urealyticum 1; izolaty oporne na erytromycynę i klindamycynę oznaczono jako konstytutywne S. xylosus, S. cohnii urealyticum 2, 3, 4, 5. Zarówno w tym, jak i w poprzednim przypadku nie powinno się stosować linkosamidów, makrolidów i streptogramin B. Lekowrażliwość gronkowców izolowanych z różnych środowisk może się znacznie różnić (Kochman M. i in., 2005). Dotyczy to przede wszystkim izolatów z materiałów klinicznych, które zwykle cechuje większa oporność. Tabela 1. Wrażliwość izolatów Staphylococcus spp. na wybrane antybiotyki Table 1. Susceptibility of Staphylococcus spp. to selected antibiotics. Cefoksytyna Erytromycyna Klindamycyna Gatunek Cefoxitin Erythromycin Clindamycin Rodzaj fenotypu oporności Species Resistance phenotype A B A B A B S. aureus ATTC 25923 26 S 25 S 25 S - S. epidermidis ATTC 12228 32 S 35 S 32 S - S. aureus 34 S 28 S 30 S - S. cohnii urealyticum 1 24 S 13 R 20 S indukcyjny inductive S. cohnii urealyticum 2 26 S 6 R 12 R S. cohnii urealyticum 3 25 S 8 R 15 R S. cohnii urealyticum 4 25 S 12 R 16 R S. cohnii urealyticum 5 26 S 12 R 16 R S. epidermidis 30 S 0 R 25 S MS B S. haemolyticus 30 S 25 S 27 S - S. xylosus1 30 S 3 R 5 R S. xylosus2 25 S 0 R 0 R A strefa zahamowania wzrostu [mm]; growth inhibition zone [mm] B wrażliwość na antybiotyki; antibiotic susceptibility: S wrażliwy, sensitive; R oporny, resistant

22 Polish Journal of Agronomy, No. 16, 2014 Jak ukazuje krajowy przegląd oporności gronkowców na działanie powszechnie stosowanych antybiotyków, przeprowadzony w 1998 roku przez zespół naukowców, oporność na metycylinę wykazywało 34% badanych izolatów S. aureus (Kochman M. i in., 2005). Chylak i Kopka (2002) pośród gronkowców izolowanych od chorych leczonych ambulatoryjnie stwierdzili 34,3% izolatów S. aureus opornych na erytromycynę, 17,3% opornych na klindamycynę oraz 1,5% izolatów metycylinoopornych. U gronkowców koagulazoujemnych badania wykazały większy odsetek oporności, dochodzący w przypadku erytromycyny do ponad 40%. Metycylinooporność gronkowców jest wciąż bardzo ważnym problemem w leczeniu zakażeń wywołanych szczególnie przez szczepy szpitalne. Jak podają Bednarek i Majda-Stanisławska (2006), wśród gronkowców złocistych wyizolowanych od hospitalizowanych dzieci 22% stanowiły szczepy MRSA. Wyizolowane w niniejszej pracy gronkowce stanowią mikroflorę skóry człowieka. Ruch powietrza oraz różny poziom czystości pomieszczeń ma wpływ na występowanie aerozolu bakteryjnego w powietrzu. Mimo że problem występowania gronkowców w domu studenckim wydaje się być oczywisty, ze względu na liczbę i zagęszczenie przebywających w nim osób, to na podstawie wyników niniejszej pracy można stwierdzić, iż gronkowce izolowane z domu studenckiego objętego doświadczeniem nie stanowią bezpośredniego zagrożenia epidemiologicznego. Naukowcy we Włoszech podczas prowadzenia badań na tamtejszym uniwersytecie stwierdzili, że rodzaj Staphylococcus spp. dominował wśród zidentyfikowanych izolatów (Di Giulio i in., 2010). Powyższe badania wskazują na potrzebę monitorowania składu mikroflory w pomieszczeniach akademickich, a także na konieczność oznaczania lekowrażliwości potencjalnie niebezpiecznych dla zdrowia ludzi patogenów (Wolny, Gołda-Matuszak, 2010). W przypadku zgłaszanych przez mieszkańców domu studenckiego problemów zdrowotnych należałoby zwrócić uwagę na możliwość zakażeń powodowanych przez gronkowce. Wśród izolatów znajdowały się bowiem gatunki S. aureus i S. epidermidis. Badanie lekowrażliwości wykazało jednak, że żaden izolat nie należał do metycylinoopornych, co umożliwiłoby w razie konieczności skuteczną antybiotykoterapię. Dla kontrastu, badania przeprowadzone w Teksasie wykazały, że spośród bakterii wyizolowanych z powietrza wewnątrz domów (w ilości 460,23 jtk m -3 ), gatunek S. aureus stanowił 15,39 jtk m -3. Oporność na ampicylinę wykazało 54,59% izolatów gronkowca złocistego, a oporność na penicylinę 60,46% (Gandara i in., 2006). Wysoką częstotliwość występowania lekooporności wśród koagulazoujemnych gronkowców wyizolowanych z powietrza stwierdzili Botelho i in. (2012). Spośród 108 pozyskanych przez nich izolatów S. epidermidis występował najczęściej (25%), a S. cohnii urealyticum stanowił tylko 9,3%. 63,9% badanych przez nich izolatów było opornych na metycylinę, 39,8% na gentamycynę, a 22,2% na klindamycynę. Można zatem stwierdzić, że izolaty pozyskane z domu studenckiego nie stanowią problemu w potencjalnej antybiotykoterapii. Przeprowadzone badanie jest pierwszą tego typu analizą powietrza wraz z wykonanym antybiogramem podstawowym. Większość prowadzonych badań skupia się na mikrobiologicznej analizie czystości powietrza uwzględniając ogólną liczbę bakterii i zakwalifikowanie powietrza do różnych klas czystości. Ważnym problemem w badaniu zagrożeń, jakie niesie ze sobą zanieczyszczenie powietrza, jest dokładne określenie przyczyn zakażeń ludzi i wyznaczenie antybiogramu lub antymykogramu, by możliwe było zastosowanie właściwej terapii. Taki właśnie tok postępowania przedstawiono w tej pracy. Mimo że otrzymane wyniki nie świadczą o istotnym problemie zanieczyszczenia powietrza przez gronkowce, warto zainteresować się możliwością zakażeń powodowanych przez te drobnoustroje w przypadku różnych dolegliwości zgłaszanych przez mieszkańców domów akademickich. WNIOSKI 1. Skażenie powietrza gronkowcami w domu studenckim, mimo występowania dużej liczby ludzi, nie stanowi bezpośredniego niebezpieczeństwa dla osób tam przebywających. 2. Wyizolowane gronkowce to głównie gatunki należące do mikroflory skóry człowieka i zwierząt i tylko w nielicznych przypadkach mogą być przyczyną zakażeń. 3. W przypadku zakażeń spowodowanych chorobotwórczymi izolatami gronkowców skuteczne będzie użycie podstawowych antybiotyków, jakimi są β-laktamy. 4. Żaden z badanych izolatów nie wykazał oporności na metycylinę, a więc potencjalna antybiotykoterapia będzie skuteczna. PIŚMIENNICTWO Bartoszewicz-Potyrała M., Przondo-Mordarska A., 2002. Cechy gronkowców koagulazoujemnych warunkujące ich chorobotwórczość. Post. Mikrobiol., 41: 351-366. Bednarek M., Majda-Stanisławska E., 2006. Występowanie szczepów metycylinoopornych gronkowców złocistych (MRSA) oraz trudności w leczeniu wywołanych przez nie infekcji u dzieci hospitalizowanych w klinice. Prz. Epidemiol., 60: 49-52. Botelho A.M.N., Nunes Z.G., Asensi M.D., Gomes M.Z.R., Fracalanzza S.E.L., Figueiredo A.M.S., 2012. Characterization of coagulase-negative staphylococci isolated from hospital indoor air and a comparative analysis between airborne and inpatient isolates of Staphylococcus epidermidis. J. Medic. Microbiol., 61: 1136-1145 Chylak J., Kopka A., 2002. Lekooporność gronkowców izolowanych od chorych leczonych ambulatoryjne. Med. Dośw. Mikrobiol., 54: 97-101. Di Giulio M., Grande R., Di Campli E., Di Bartolomeo S., Cellini L., 2010. Indoor air quality in university environments. Environ Monit. Assess., 170: 509-517.

A. Lenart-Boroń i in. Izolacja, identyfikacja i ocena lekooporności gronkowców w powietrzu domu studenckiego 23 Gandara A., Mota L.C., Flores C.,Perez H.R., Green C.F., Gibbs S.G., 2006. Isolation of Staphylococcus aureus and Antibiotic-Resistant Staphylococcus aureus from Residential Indoor Bioaerosols. Environ. Health Perspect., 114: 1859-1864. Gąska-Jędruch U., Dudzińska M., 2009. Zanieczyszczenia mikrobiologiczne w powietrzu wewnętrznym. ss. 31-40. Materiały naukowe III Ogólnopolskiego Kongresu Inżynierii Środowiska, Materiały Zjazdowe, tom 3. Lublin, 13-17.09.2009. Gołofit-Szymczak M., Skowroń J., 2005. Zagrożenia mikrobiologiczne w pomieszczeniach biurowych. Bezpiecz. Pracy, 3: 29-31. Grzybowski J., Reiss J., 2001. Praktyczna bakteriologia lekarska i sanitarna. Dom Wydawniczy Bellona, Warszawa. Heczko P.B., 2006. Mikrobiologia. Podręcznik dla pielęgniarek, położnych i ratowników medycznych. Wyd. Lekarskie PZWL, Warszawa. Hryniewicz W., Żabicka D., 2010. Rekomendacje doboru testów do oznaczania wrażliwości bakterii na antybiotyki i chemioterapeutyki. Oznaczanie wrażliwości ziarniaków Gramdodatnich z rodzaju Staphylococcus spp. KORLD. Irving W., Ala Aldeen D., Boswell T., 2008. Mikrobiologia medyczna. Krótkie wykłady. Wyd. Naukowe PWN, Warszawa. Jerzmanowski A., 1996. Mikrobiologia lekarska. Akademia Medyczna w Łodzi, Łódź. Kochman M., Piekarska K., Ławrynowicz-Paciorek M. i in., 2005. Wrażliwość na wybrane antybiotyki bakterii izolowanych z próbek materiału klinicznego w Polsce w 1998 roku analiza wyników badań ankietowych. Cz. I. Lekowrażliwość gronkowców. Prz. Epidemiol., 59: 679-694. Schleifer K.H., Bell J.A., 2009. Family VIII. Staphylococcaceae fam. nov. 396-420. Vos P., Garrity G. M., Jones D., Kreig N. R., Ludwig W., Rainey F.A., Schleifer K.H., Whitman W.B. Bergey s Manual of Systematic Bacteriology, Second Edition, vol. 3: The Firmicutes, Springer. Stefaniuk E., 2006. Postępowanie w diagnostyce bakteryjnych zakażeń dolnych dróg oddechowych. Post. Mikrobiol., 46: 67-76. Wolny K., Gołda-Matuszak E., 2010. Streptococcus agalactiae (GBS) charakterystyka szczepów izolowanych z dróg rodnych kobiet w okresie rozrodczym. Medyc. Dośw. Mikrobiol., 62: 141-151. Zimny H,. 2010. Ekologia wnętrz. Zdrowy dom, zdrowe mieszkanie, zdrowi ludzie. Agencja Reklamowo-Wydawnicza Arkadiusz Grzegorczyk, Warszawa. Żabicka D., 2010. Epidemiologia zakażeń wywoływanych przez szczepy Staphylococcusaureus oporne na metycylinę. Nowa Klinika, 17: 309-313. A. Lenart-Boroń, K. Wolny-Koładka, A. Kwaśniewska ISOLATION, IDENTIFICATION AND DRUG-RESISTANCE ASSESSMENT OF STAPHYLOCOCCI FROM THE AIR OF A UNIVERSITY OF AGRICULTURE IN CRACOW DORMITORY Summary The aim of this study was the isolation, identification and evaluation of the drug-resistance of Staphylococcus spp., isolated from the air in a dormitory of the University of Agriculture in Cracow. Air sampling was performed using the MAS-100 sampler (Merck), using the Chapman medium. After collection of isolates, bacterial species were identified using cultures on chromogenic media and biochemical tests. The drug-resistance evaluation was performed based on the recommendations of the National Reference Centre for Antimicrobial Susceptibility (KORLD). The analyzed 10 isolates belonged to 5 species: S. cohnii urealyticum (5), S. xylosus (2), S. epidermidis (1), S. aureus (1), S. haemolyticus (1). All isolates except S. aureus were coagulase- -negative and gave a negative result in the test for the protein A. All isolates were susceptible to methicillin, whereas among the group of macrolide antibiotics and lincosamides different resistance phenotypes were distinguished. It was concluded that the air contamination with Staphylococcus spp. in a dormitory was not a direct threat to its residents, and the isolated staphylococci belong mainly to the human skin microflora. key words: Staphylococcus spp., drug resistance, antibiotics, air