RZECZPOSPOLITA POLSKA (12) TŁUMACZENIE PATENTU EUROPEJSKIEGO (19) PL (11) PL/EP 2358214 (96) Data i numer zgłoszenia patentu europejskiego: 11.11.2009 09748799.5 (13) (51) T3 Int.Cl. A23K 1/16 (2006.01) A23K 1/18 (2006.01) Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (97) O udzieleniu patentu europejskiego ogłoszono: 02.10.2013 Europejski Biuletyn Patentowy 2013/40 EP 2358214 B1 (54) Tytuł wynalazku: Zastosowanie kantaksantyny i/lub 25-OH D3 dla poprawy wylęgowości u drobiu (30) Pierwszeństwo: 19.11.2008 EP 08020153 (43) Zgłoszenie ogłoszono: 24.08.2011 w Europejskim Biuletynie Patentowym nr 2011/34 (45) O złożeniu tłumaczenia patentu ogłoszono: 31.03.2014 Wiadomości Urzędu Patentowego 2014/03 (73) Uprawniony z patentu: DSM IP Assets B.V., Heerlen, NL (72) Twórca(y) wynalazku: PL/EP 2358214 T3 JOSE-MARIA HERNANDEZ, Magden, CH GILBERT WEBER, Magden, CH (74) Pełnomocnik: rzecz. pat. Mirosława Ważyńska JWP RZECZNICY PATENTOWI DOROTA RZĄŻEWSKA SP. J. ul. Żelazna 28/30 Sienna Center 00-833 Warszawa Uwaga: W ciągu dziewięciu miesięcy od publikacji informacji o udzieleniu patentu europejskiego, każda osoba może wnieść do Europejskiego Urzędu Patentowego sprzeciw dotyczący udzielonego patentu europejskiego. Sprzeciw wnosi się w formie uzasadnionego na piśmie oświadczenia. Uważa się go za wniesiony dopiero z chwilą wniesienia opłaty za sprzeciw (Art. 99 (1) Konwencji o udzielaniu patentów europejskich).
18583/13/P-RO/MW EP 2 358 214 Opis Zastosowanie kantaksantyny i/lub 25-OH D3 dla poprawy wylęgowości u drobiu DZIEDZINA WYNALAZKU [0001] Wynalazek dotyczy zastosowania kantaksantyny i opcjonalnie co najmniej jednego metabolitu witaminy D, korzystnie 25-hydroksywitaminy D3 (25-OH D3), dla poprawy wylęgowości u hodowcy. Wynalazek dotyczy również zastosowania kantaksantyny i opcjonalnie 25-hydroksywitaminy D3 w produkcji paszy lub kompozycji weterynaryjnej na obniżenie śmiertelności zarodków u drobiu. TŁO WYNALAZKU [0002] Aby zmaksymalizować płodność jaj i wylęgowość zarodków w fazie nieśności, optymalny stan odżywienia reproduktorów jest niezbędny dla efektywnego przeniesienia składników odżywczych do zarodka. [0003] Według wynalazku stwierdzono, że problemy w hodowli kurcząt można wyeliminować lub znacznie złagodzić poprzez podawanie zwierzętom skutecznej ilości kantaksantyny lub 25-OH-D3, opcjonalnie połączenia obydwu składników odżywczych. [0004] Ku zaskoczeniu, zgłaszający stwierdził, że stosunkowo wysokie stężenie niezbędnych składników odżywczych w zarodku, takich jak kantaksantyna lub 25-OH-D3, dostarczanych przez podawanie suplementów matce, wiąże się z lepszą wylęgowością, płodnością i niższą śmiertelnością zarodków w pierwszej fazie rozwoju zarodka. [0005] Atencio et al, Poultry Science 2005; 84: 1277-1285 stwierdzili, że 25-OH D3 poprawia płodność i wylęgowość i obniża śmiertelność zarodków u drobiu. Robert et al, 16 Europejskie Sympozjum Żywienia Drobiu, 26-30 sierpnia 2007, opisuje poprawę stanu oksydacyjnego u piskląt od kur, którym podawano kantaksantynę. [0006] Tritsch et al. (US 2003/0170324) ujawnia kompozycję premiksu z przynajmniej 25- OH D3 w ilości pomiędzy 5%, a 50% (wag/wag) rozpuszczonej w oleju i przeciwutleniaczu, środek zawierający kropelki 25-OH D3 i olej i dodatek żywieniowy (np. witaminę D3). Premiks można dodawać do pokarmu dla drobiu, świń, psów lub kotów. Kompozycja ta stabilizuje 25-OH D3 przed utlenianiem. [0007] Simoes-Nunes et al. (US 2005/0064018) ujawnia dodawanie połączenia 25-OH witaminy D3 i witaminy D3 do pokarmu zwierząt. Zwłaszcza, do paszy dla świń dodaje się około 10 µg/kg do około100 µg/kg 25-OH witaminy D3 i około 200 j.m./kg do około 4 000 j.m./kg witaminy D3. Dodatek ten poprawia wytrzymałość kości u świń. [0008] Stark et al. (US 5,695,794) ujawnia dodawanie kombinacji 25-OH witaminy D3 i witaminy D3 do paszy dla drobiu dla złagodzenia skutków dyschondroplazji piszczelowej. [0009] Borenstein et al US 5,043,170 ujawnia połączenie witaminy D3 i 1-alfahydroksycholekalcyferolu lub 1-alfa, 25-dihydroksycholekalcyferolu dla poprawy wytrzymałości jaj i siły kończyn dolnych u kur niosek i starszych kur.
2 [0010] Fleshner-Barak (WO 03/007916) ujawnia podawanie związku bisfosfonianu i pochodnej naturalnej witaminy D, takiej jak 1,25-dihydroksywitaminy D3 lub 24,25- dihydroksywitaminy D3, lub 25-OH witaminy D3. [0011] Daifotis et al. (WO 03/086415) ujawnia hamowanie resorpcji kości przez połączenie co najmniej jednego związku bisfosfonianu i od około 100 j.m. do około 60 000 j.m. nieaktywnego metabolitu witaminy D2 i/lub witaminy D3. [0012] Powyższe dokumenty nie ujawniają lub nie sugerują, że zastosowanie kantaksantyny i 25-OH D3 lub ich kombinacji było zaskakująco korzystne dla poprawy wylęgowości. SZCZEGÓŁOWY OPIS WYNALAZKU [0013] W opisie, jak i w zastrzeżeniach, następujące definicje oznaczają: "Metabolit witaminy D" oznacza jakikolwiek metabolit witaminy D, na przykład 25- hydroksywitamina D3, 1,25-dihydroksywitamina D3 lub 24,25-dihydroksywitamina D3. "25-OH D3" dotyczy w szczególności to 25-hydroksywitaminy D3. "Drób" ma obejmować indyki, kaczki i kurczaki (obejmując nieograniczająco pisklęta brojlerów, nioski, reproduktory). [0014] Kantaksantynę i 25-OH D3 można uzyskać z dowolnego źródła, a ich kompozycja może być przygotowywany z zastosowaniem dogodnej technologii. [0015] W pierwszym przykładzie wykonania, zapewniono jeden lub większą liczbę składników kompozycji odpowiedniej do zastosowania dla drobiu, celem podania kantaksantyny opcjonalnie w połączeniu z 25-OH D3, jako składniki odżywcze dla poprawy wylęgowości, płodności i obniżenia śmiertelności zarodków w pierwszej fazie rozwoju zarodka. [0016] W drugim przykładzie wykonania, zapewniona jest pasza dla drobiu, zawierająca od około 10 µg/kg do około 100 µg/kg 25-OH D3 i/lub od około 2 do 100 ppm kantaksantyny, korzystnie 2 do 10 ppm. [0017] W innym przykładzie wykonania, zapewniono zastosowanie kantaksantyny, opcjonalnie w połączeniu z 25-OH D3 dla reproduktorów drobiu dla poprawy wylęgowości, płodności i obniżenia śmiertelności zarodków w pierwszej fazie rozwoju zarodka. [0018] Zastosowanie dla poprawy wylęgowości u drobiu obejmuje podawanie zwierzęciu wymagającemu takiej kuracji, ilości od około 2 ppm do 100 ppm kantaksantyny, korzystnie 2 do 10 ppm, i/lub około 10 µg/kg do około 100 µg/kg 25-OH D3. [0019] W innym przykładzie wykonania, zapewniona jest kompozycja premiksu dla drobiu zawierająca kantaksantynę i 25-hydroksywitaminę D3. [0020] Kantaksantyna i 25-hydroksywitamina D3 są korzystnie podawane razem z pokarmem. Pojęcie pokarm zastosowane tutaj obejmuje zarówno pokarmy stałe jak i płynne, jak również płyny do picia, takie jak woda pitna. Zwłaszcza, składniki odżywcze według
3 wynalazku mogą być dodawane jako utworzony proszek do premiksu zawierającego inne składniki mineralne, witaminy, aminokwasy i pierwiastki śladowe, które dodaje się do zwykłego pokarmu dla zwierząt i dokładnie miesza dla osiągnięcia równomiernego rozprowadzenia. [0021] Podczas wytwarzania paszy dla drobiu według wynalazku, do zwykłego pokarmu dla drobiu dodaje się od około 2 ppm do 100 ppm, korzystnie 2-10 ppm kantaksantyny a, w razie potrzeby, od około 10µ/kg do około 100µg/kg 25-hydroksywitaminy D3. Alternatywnie, premiks pokarmowy może być przygotowywany na bazie zwykłych elementów pokarmu poprzez dodanie tych aktywnych składników do takich elementów pokarmu w wyższym stężeniu. [0022] Według wynalazku, związek kantaksantyny jest dostępny pod nawą handlową ROVIMIX Hy-D 1.25 %, a kantaksantyna pod nazwą handlową CAROPHYLL Red. [0023] Według wynalazku, dodatkowo korzystnym jest, jeśli kompozycja zawiera również jeden lub większą liczbę poniższych składników odżywczych: Witaminę A, witaminę E, biotynę, miedź (np. jako CuSO 4 ), cynk (np. jako ZnSO 4 ), kobalt (np. jako CoSO 4 ), selen (np. jako Na 2 SeO 3 ), jod (np. jako KI), mangan (np. jako MnSO 4 ) i/lub wapń (np. jako CaSO 4 ). [0024] Aby lepiej zilustrować wynalazek przedstawiono poniższe nieograniczające przykłady. Przykład 1: Wpływ Carophyll Red (Kantaksantyny) na produkcyjny i reprodukcyjny rozwój kurcząt brojlerów Materiał i Sposoby [0025] W tym badaniu wykorzystano 360 samic i 36 samców kurcząt brojlerów, wszystkie w wieku 45 tygodni, i rasy Cobb 500. Ptaki były trzymane razem w odpowiednich grupach co do kuracji według masy ciała i jednorodności partii. Faza przed badaniem - 37 do 45 tydzień: [0026] W fazie przed badaniem, ptaki poddano traktowaniu i karmieniu zalecanemu w instrukcji hodowcy. Aby ocenić płodność ptaków w każdej klatce, okres inkubacji trwał jeden tydzień, i za pomocą diagnostyki zarodków w jajach, które nie były wyklute określono odsetek płodności w każdej klatce. Poziom płodności brano pod uwagę podczas rozdziału kuracji do każdej z klatek, aby wszystkie kuracje miały ten sam poziom płodności na początku badania. Okres badania - od 46 do 66 tygodnia [0027] Na początku tego okresu, wszystkie ptaki zostały zważone i powtarzano to, co 28 tygodni, podczas okresu, w którym ptaki były poddawane kuracji. (Tabela 1). Podczas badania, zbierano informacje na temat dziennej produkcji jaj. Część ptaków była ważona raz na tydzień. Karmienie
4 [0028] Dieta podawana ptakom była standardową paszą dla kurcząt brojlerów z dodatkiem produktów, które zostały przebadane. Pasza spełniała wszystkie wymagania żywieniowe w odniesieniu do stadium rozwoju ptaków i zaleceń w podręczniku hodowców. Pasza była całkowicie na bazie warzyw, z kukurydzą i otrębami sojowymi (Załączniki 1, 2 i 3). TABELA 1. Kuracje zastosowane w badaniu kurcząt brojlerów (rasa - Cobb 500) dla okresu sześciu miesięcy. Kuracje 1 0 2 60 Carophyll Red (ppm) Model doświadczalny [0029] Model doświadczalny był całkowicie losowy, z dwoma kuracjami i sześcioma grupami 30 samic i 3 samców kurcząt. Metodologia [0030] Nieśność była obliczana co tydzień. Wszystkie jaja, które nie zostały uznane za nadające się do inkubacji, zebrane w danym dniu były wykorzystywane do oceny masy jaj, ciężaru właściwego, średniej masy jaj, masy żółtka, masy białka i barwy żółtka. Ciężar właściwy określono poprzez zanurzenie jaj w roztworach soli o gęstościach 1065; 1070; 1075; 1080; 1085; 1090 i 1095. Jaja, żółtka i białka były ważone za pomocą wagi o bardzo wysokiej dokładności ważenia (0,001 g). Barwę żółtek określono za pomocą wachlarza kolorów od DSM Nutritional Products. [0031] Aby ocenić wylęg, wylęgowość, płodność i śmiertelność zarodków, jaja były zbierane codziennie. Były one następnie klasyfikowane i oznaczane numerem odpowiedniej klatki. Te, które nie zostały uznane za nadające się do inkubacji były przechowywane przez maksymalnie siedem dni w klimatyzowanym pomieszczeniu z kontrolą temperatury i wilgotności. Inkubację prowadzono w inkubatorze wieloetapowym, a w dniu 18 jaja zostały przeniesione do aparatu wylęgowego. W dniu 21, pisklęta zostały wyjęte z aparatu wylęgowego, zaszczepione i sklasyfikowane. Jaja, z których nic się nie wykluło zostały poddane diagnozie zarodka, dla oceny płodności i fazy śmiertelności zarodka. Analiza statystyczna [0032] Po uzyskaniu danych, przeprowadzono analizę wariacji i obliczono standardowe odchylenie. Te procedury statystyczne przeprowadzono za pomocą programu statystycznego SAS. Wyniki
5 [0033] TABELA 2. Nieśność w okresach 46-55, 55-66 tygodnia i cały okres (21 tygodni) Kuracje Nieśność (%) od 46 do 55 tygodnia od 56 do 66 tygodnia Cały okres Próba kontrolna 58,19 ± 3,87 48,75 ± 3,19 53,25 ± 2,68 Carophyll Red 59,66 ± 2,97 51,35 ± 3,66 55,31 ± 2,22 Średnia arytmetyczna 58,93 50,05 54,28 C.V. (%) 5,86 6,87 4,54 P 0,4781 0,2207 0,1793 TABELA 3. Wylęgowość w okresach pomiędzy 44-56 i 56-66 tygodniem i cały okres (21 tygodni) Kuracje Wykluwalność (%) od 46 do 55 tygodnia od 56 do 66 tygodnia Średnia z 21 tygodni Próba kontrolna 92,48 ± 0,98 b 93,42 ± 0,51 b 92,97 ± 0,54 b Carophyll Red 94,33 ± 0,76 a 95,96 ± 0,53 a 95,18 ± 0,56 a Średnia arytmetyczna 93,41 94,69 94,08 C.V. (%) 0,94 0,55 0,59 P 0,0047 0,0001 0,0001 (a>b test Duncana) TABELA 4. Wylęg, wylęgowość, płodność i śmiertelność zarodków podczas obserwowanego okresu (21 tygodni) Kuracje Próba kontrolna 83,03 ± 0,89 b Carophyll Red 86,03 ± 0,42 a Wylęg Wylęgowość Płodność 92,97 ± 0,54 b 95,18 ± 0,56 a (%) 90,98 ± 0,81 b 92,11 ± 0,48 a Śmiertelność zarodków 5,46 ± 0,75 a 3,72 ± 0,86 b
6 Średnia arytmetyczna 84,53 94,08 91,54 4,59 C.V. (%) 0,83 0,59 0,75 16,77 P 0,0001 0,0001 0,0171 0,0029 (a>b test Duncana) TABELA 5. Wpływ kuracji na średni wskaźnik śmiertelności zarodka w obserwowanym okresie Kuracje Śmiertelność zarodków (%) M1 M2 M3 M4 Próba kontrolna 1,80 ± 0,45 a 0,89 ± 0,70 0,69 ± 0,28 2,07 ± 0,23 a Carophyll Red 1,04 ± 0,41 b 0,66 ± 0,33 0,58 ± 0,33 1,44 ± 0,58 b Średnia arytmetyczna 1,42 0,77 0,64 1,76 C.V. (%) 28,02 40,41 54,07 21,86 P 0,0083 0,2225 0,5980 0,0171 (a>b test Duncana) M 1- Śmiertelność zarodków w pierwszych 48 godzinach inkubacji M 2- Śmiertelność zarodków występująca pomiędzy 3, a 7 dniem inkubacji M 3- Śmiertelność zarodków występująca pomiędzy 8, a 14 dniem inkubacji M 4- Śmiertelność zarodków występująca pomiędzy 15, a 21 dniem inkubacji TABELA 6. Śmiertelność zarodków pomiędzy 19, a 21 tygodniem i dla wszystkich 21 tygodni badania Kuracje Śmiertelność zarodków (%) Tydzień 19 Tydzień 20 Tydzień 21 21 tygodnie Próba kontrolna 5,32 ± 3,24 4,57 ± 1,57 5,18 ± 2,72 5,46 ± 0,75 a Carophyll Red 3,33 ± 4,12 3,51 ± 2,56 3,12 ± 2,12 3,72 ± 0,86 b Średnia arytmetyczna 4,33 4,04 4,15 4,59 C.V. (%) 57,93 52,75 54,88 16,77 P 0,0127 0,4081 0,1490 0,0029 (a>b test Duncana)
7 TABELA 7. Liczba jaj, jaj nieinkubowanych i piskląt trzymanego w zamknięciu ptaka w obserwowanym okresie (21 tygodni) Kuracje Produkcja jaj/ptak Nieinkubowane jaja/ptak Pisklęta/ptak Próba kontrolna 78,27 ± 3,95 71,71 ± 4,46 5952 ± 3,18 b Carophyll Red 81,30 ± 3,40 75,25 ± 3,46 64,73 ± 2,82 a Średnia arytmetyczna 79,79 73,48 62,13 C.V. (%) 4,55 5,36 4,76 P 0,1793 0,1503 0,0122 TABELA 8. Obliczone poziomy składników odżywczych w paszy zastosowanej w badaniu Średnia Energia metaboliczna (Kcal) 2850,00 Średnia Energia metaboliczna (Kcal) 2850,00 Białko brutto (%) 15,96 Witamina E (mg) 53,59 Arginina ogółem (%) 0,94 Witamina K3 (mg) 2,50 Lizyna ogółem (%) 0,80 Witamina B1 (mg) 5,77 Metionina ogółem (%) 0,35 Witamina B2 (mg) 10,82 Metionina + Cystyna ogółem (%) 0,55 Witamina B6 (mg) 10,85 Treonina ogółem (%) 0,59 Witamina B12 (mcg) 19,00 Tryptofan ogółem (%) 0,17 Biotyna (mg) 0,30 Izoleucyna ogółem (%) 0,63 Kwas foliowy (mg) 1,74 Leucyna ogółem (%) 1,46 Kwas nikotynowy (mg) 65,36 Walina ogółem (%) 0,72 Kwas pantotenowy (mg) 25,22 Histydyna ogółem (%) 0,42 Miedź (mg) 18,43 Chlor ogółem (%) 0,77 Żelazo (mg) 122,94 Wapń (%) 3,30 Jod (mg) 0,80 Dostępny fosfor (%) 0,40 Mangan (mg) 83,10 Sód (%) 0,19 Selen (mg) 0,69 Chlor (%) 0,28 Cynk (mg) 93,83 Potas (%) 0,60 Witamina A (j.m.) 10450,00 Kantaksantyna (j.m.) 1662,50
8 TABELA 9. Skład kompozycji paszy stosowanej w badaniu Składniki Procent Kukurydza 68,52 Otręby sojowe 46% 21,57 Wapień 38% Ca 7,21 Fosforan dwuwapniowy 1,64 Sól 0,4 Otręby pszenne 0,112 DL-Metionina 99% 0,045 Premiks 0,50 TABELA 10. Kompozycja premiksu dodawanego do diety kurcząt Składnik odżywczy Ilość na kilogram produktu Jednostka Kwas foliowy 237,5 mg Kwas nikotynowy 8500 mg Kwas pantotenowy 3800 mg Biotyna 38 mg Miedź 12400 mg Cholina 72000 mg Siarka 10222 mg Żelazo 12000 mg Jod 160 mg Magnez 14000 mg Metionina 118800 mg Oksytetracyklina 8000 mg Selen 108 mg Witamina A 2090000 j.m./kg
9 Witamina B1 475 mg Witamina B12 3800 mg Witamina B2 1900 mg Witamina B6 950 mg Kantaksantyna 332500 j.m./kg Witamina E 7600 mg Witamina K3 950 mg Cynk 14000 mg Przykład 2: Badanie dodawania kantaksantyny i 25-OH D3 u brojlerów kur hodowlanych Materiał i Sposoby: [0034] Badanie wykonano według Przykładu 1, dodając ROVIMIX Hy-D. Kuracje w przykładzie 2 były następujące: T1 - Dieta kontrolna T2 - Dieta kontrolna + 60 ppm Carophyll Red T3 - Dieta kontrolna + 69 ppm ROVIMIX Hy-D T4 - Dieta kontrolna + 60 ppm Carophyll Red + 69 ppb ROVIMIX Hy-D z 6 replikacjami/kurację 40 brojlerów reproduktorów i 4 kogutów na replikację. [0035] Produkcja jaj, płodność i wylęgowość są rejestrowane raz w tygodniu. Wyniki przedstawiono w Tabeli 11. Dane przedstawiają dobrą reakcję na ROVIMIX Hy-D i kantaksantynę. TRT TABELA 11: Średnia wylęgowość po 10 tygodniach Próba kontrolna 85,26 ROVIMIX Hy-D 86,85 CAROPHYLL RED 87,22 CAROPHYLL RED+ ROVIMIXO Hy-D 88,07 Mirosława Ważyńska Rzecznik patentowy
10 Zastrzeżenia patentowe 1. Zastosowanie kantaksantyny dla poprawy wylęgowości i płodności u drobiu. 2. Zastosowanie według zastrzeżenia 1, przy czym kantaksantyna jest połączona z co najmniej jednym metabolitem witaminy D. 3. Zastosowanie według zastrzeżenia 2, przy czym metabolitem witaminy D jest 25- hydroksywitamina D3. 4. Zastosowanie kantaksantyny w produkcji paszy lub kompozycji weterynaryjnych na obniżenie śmiertelności zarodków u drobiu. 5. Zastosowanie według zastrzeżenia 4, przy czym kantaksantyna jest połączona z co najmniej jednym metabolitem witaminy D. 6. Zastosowanie według zastrzeżenia 2, przy czym metabolitem witaminy D jest 25- hydroksywitamina D3. 7. Pokarm dla drobiu, zawierający od około 10 mg/kg do około 100 mg/kg 25- hydroksywitaminy D3 i od około 2 do 100 ppm kantaksantyny, korzystnie od około 2 ppm do 10 ppm. 8. Kompozycja premiksu, zawierająca kantaksantynę i 25-hydroksywitaminę D3, do zastosowania w paszy reproduktorów dla obniżenia śmiertelności zarodków. 9. Zastosowanie kompozycji premiksu zawierającej kantaksantynę i 25- hydroksywitaminę D3, dla poprawy wylęgowości i płodności u drobiu. Mirosława Ważyńska Rzecznik patentowy