EGZEMPLARZ ARCHIWALNY RZECZPOSPOLITA POLSKA Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej m OPIS OCHRONNY PL 59703 WZORU UŻYTKOWEGO (2l) Numer zgłoszenia: 109049 Data zgłoszenia: 19.12.1998 13) Y1 @ Intel7: C12M 1/02 C12M 1/14 Przepływowa komora do badania komórkowych hodowli in vitro (43) Zgłoszenie ogłoszono: 03.07.2000 BUP 14/00 Uprawniony z prawa ochronnego: Dyszkiewicz Andrzej, Cieszyn, PL (5v O udzieleniu prawa ochronnego ogłoszono: 30.04.2003 WUP 04/03 Twórcawzoru użytkowego: Andrzej Dyszkiewicz, Cieszyn, PL O ON Pm
10 9 0-49 PRZEPŁYWOWA KOMORA DO BADANIA KOMÓRKOWYCH HODOWLI IN VITRO Przedmiotem wzoru użytkowego jest komora do badania komórkowych hodowli in vitro, służąca do oceny hodowanych komórek pod mikroskopem optycznym w jałowych warunkach, z zachowaniem stałej temperatury. Dotychczasowa procedura oceny hodowli wymagała otwarcia naczynia zawierającego pożywkę i komórki, pobrania próbki roztworu na szkiełko podstawowe mikroskopu. W takiej sytuacji zmiana temperatury powodująca często nieodwracalne procesy w pobranej próbce komórek, natomiast kontakt z potencjalnie zakaźnym otoczeniem, czyniły ocenianą próbkę nieprzydatną do dalszej hodowli z uwagi na możliwość jej zakażenia. Innym znanym rozwiązaniem była hodowla komórek w naczyniach Laytona umieszczonych w termostacie, w których przynajmniej jedna ściana była równą płaszczyzną, umożliwiającą obserwację wnętrza przez usytuowany tuż przy ścianie obiektyw mikroskopu. Wadą tego rozwiązania jest zbyt duża objętość obserwowanego obszaru i trudności w ogniskowaniu obiektywu na pływających obiektach, co praktycznie uniemożliwia uzyskiwanie dużych powiększeń. Celem wzoru użytkowego jest zapewnienie płynnej obserwacji rozwoju hodowli komórkowej, zlokalizowanej w termostacie w jałowym naczyniu, bez strat badanych komórek i groźby zakażenia z jednoczesną możliwością uzyskiwania dużych powiększeń mikroskopowych. Proces ten jest realizowany poprzez pobieranie porcji komórek hodowli do przeglądu w jałowych warunkach i stabilnym termicznie środowisku komory, następnie po dokonaniu obserwacji wprowadzaniu ich z powrotem do hodowli. Możliwość taka ma szczególnie duże znaczenie w przypadku nadzorowania procesów produkcyjnych w reaktorach biotechnologicznych, namnażaniu komórek szpiku do przeszczepu po chemioterapii oraz wielu pracach naukowo badawczych, w których dysponuje się niewielką ilością drogiego preparatu. Istota wzoru użytkowego polega na tym, że komora do badania hodowli komórkowych in vitro zbudowana jest z dwóch płaskich ścian, wykonanych z przezroczystego materiału /np. szkło, plexi/ oddzielonych uszczelką dystansującą o grubości poniżej lmm. Komora połączona jest z hodowlą komórkową i pompą wymuszająca obieg przy pomocy kapilarnych rurek. Szczelinowata komora usytuowana jest na na górnej ścianie nieco większej komory płaszcza wodnego, której ściany również zbudowane są również z przezroczystego materiału. Płaszcz wodny połączony jest z termostatem wodnym i pompą wymuszającą obieg przy pomocy przewodów zasilających. Przedmiot wzoru użytkowego uwidoczniony jest na rysunku, na którym fig. 1 przedstawia widok ogólny urządzenia, fig. 2 widok z góry, fig. 3 widok od
strony krótszego boku urządzenia, fig.4 widok od strony dłuższego boku komory. Przepływowa komora do badania hodowli komórkowych in vitro złożona jest z dwóch zasadniczych podzespołów: szczelinowatej komory przeglądowej 1 i komory płaszcza wodnego 2. Górna ściana 3 komory przeglądowej 1 utworzona jest z przezroczystego materiału i osadzona na uszczelce dystansującej 4. Dolną ścianę komory 1 tworzy górna ściana 8 komory płaszcza wodnego 2. Do komory i doprowadzona jest rurka zasilająca 5 i odprowadzona rurka odprowadzająca 6. Z naczynia do hodowli w termostacie /nie przedstawionego na rysunku/ poprzez rurkę 5 wprowadzana jest do komory 1 badana zawiesina, która następnie jest wypompowywana rurką odprowadzającą 6. W tylnej części komory 1 umieszczony jest czujnik temperatury 7. Komora płaszcza wodnego utworzona jest ze ściany górnej 8 i ściany dolnej 9, rozdzielonych uszczelką dystansującą 10. Komora 2 zasilana jest ogrzaną wodą z termostatu poprzez rurkę zasilającą H. Woda odprowadzana jest do termostatu rurką odprowadzającą 12. Funkcjonowanie przepływowej komory do badania hodowli komórkowych in vitro polega na tym, że do płaszcza wodnego 2, rurką H napływa ogrzana woda z termostatu /nie przedstawionego na rysunku/ i odpływa rurką 12 z powrotem do termostatu. Jednocześnie z hodowli komórek in vitro zostaje przepompowana do komory 1 porcja zawiesiny komórek, której temperaturę odczytuje czujnik 7. W przypadku obniżenia temperatury poniżej zamierzonej intensyfikuje się przepływ wody w rurkach 11,12. Komora 1 i 2 podświetlone są od spodu źródłem światła /nie przedstawionym na rysunku/, natomiast do ściany górnej 3 komory 1 zostaje przystawiony obiektyw mikroskopu /nie przedstawiony na rysunku/. Szczelinowate światło komory 1 /poniżej lmm/ umożliwia łatwe ogniskowanie optyki i zastosowanie do przeglądu nawet obiektywu imersyjnego.
10 9 049 ZASTRZEŻENIA OCHRONNE &\}Ob 7 1. Przepływowa komora do badania hodowli komórkowych in vitro, znamienna tym, że posiada szczelinowatą i przezroczystą komorę Q) w kształcie zbliżonym do prostopadłościanu oraz zaopatrzona jest w rurką doprowadzającą (5) i odprowadzająca (6) zawiesinę komórek, oraz czujnik temperatury (7). 2. Przepływowa komora do badania hodowli komórkowych in vitro według zastrzeżenia (i), znamienna tym, że posiada pod dnem komory (i), przezroczystą komorę płaszcza wodnego (2), połączoną z termostatem wodnym rurką doprowadzającą (ii) i odprowadzającą (12).
Fig.2 ~l B B Fig.4 B-B 5SSSSSSSSS5SSSSSSSS5SS5SS55SSS5SSS5S5S55SSSSSSSSSS5SSfc ^Ssssssssssssssssssssssssss ssssssss \^V^VA^\VA^ S^VV<Ami>AWAVWK<<