Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce patogenu mięty pieprzowej (Mentha piperita L.)

Podobne dokumenty
CHARACTERISTICS AND OCCURRENCE OF Phoma spp. ON HERBS FROM THE FAMILY Lamiaceae

2. POSIADANE DYPLOMY, STOPNIE NAUKOWE/ARTYSTYCZNE-Z PODANIEM NAZWY, MIEJSCA I ROKU ICH UZYSKANIA ORAZ TYTUŁU ROZPRAWY DOKTORSKIEJ

Kształtowanie się zbiorowiska grzybów izolowanych z nasion łubinu żółtego (Lupinus luteus L.) pod wpływem okresu przechowywania

Najważniejsze choroby rzepaku ozimego (BBCH 30-33). Jak je zwalczać?

Fungi isolated from diseased early green fruits and fruits of blueberry (Vaccinium corymbosum L.)

Zagrożenia ze strony grzyba Rhizoctonia solani na plantacjach buraka cukrowego

Ewa Zalewska, Zofia Machowicz-Stefaniak

Wciornastek tytoniowiec (Thrips tabaci Lindeman, 1888 ssp. communis Uzel, 1895

PW Zadanie 3.3: Monitoring zmian zdolności chorobotwórczych populacji patogenów z kompleksu Stagonospora spp. / S.

Wpływ szczepionek mykoryzowych na rozwój i zdrowotność borówki amerykańskiej, różaneczników oraz wrzosów

Ocena metod diagnozowania chorób korzeni i pochwy liściowej pszenicy ozimej EWA SOLARSKA, MAGDALENA GRUDZIŃSKA

Kompendium symptomów chorób roślin oraz morfologii ich sprawców

Podatność siewek różnych odmian pietruszki korzeniowej na porażenie przez patogeny grzybowe JACEK NAWROCKI

Hodowlą nazywamy masę drobnoustrojów wyrosłych na podłożu o dowolnej konsystencji.

ANNALES UNIVERSITATIS MARIAE CURIE-SKŁODOWSKA LUBLIN POLONIA

Masowe występowanie koguciego ogona na plantacji Objawy koguciego ogona niedługo po posadzeniu Objawy koguciego ogona niedługo po posadzeniu

Pozostałe choroby grzybowe ziemniaków

GRZYBY ZAGRA AJ CE UPRAWIE DZIURAWCA ZWYCZAJNEGO (Hypericum perforatum L.) W WOJEWÓDZTWIE LUBELSKIM. Beata Zimowska, Zofia Machowicz-Stefaniak

SHORT COMMUNICATIONS

Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Terenowa Stacja Doświadczalna w Toruniu. Agnieszka Kiniec

Sprawozdanie z prac PW obszar/zdanie 6.10 L. BOROS, T. GÓRAL

OMACNICA PROSOWIANKA. Ostrinia nubilalis (Hubner)

Zaraza ziemniaka - Phytophthora infestans (Mont.) de By 1. Systematyka Rząd: Pythiales Rodzina: Pythiaceae Rodzaj: Phytophthora

Instytut Ochrony Roślin - Państwowy Instytut Badawczy w Poznaniu. Tytuł zadania

Ochrona kukurydzy przed chorobami powinna być przeprowadzona wszystkimi dostępnymi metodami nie tylko chemicznymi

Monitoring zmian zdolności chorobotwórczych populacji organizmów szkodliwych dla roślin oleistych

SEGREGACJA TRANSGRESYWNA POKOLENIA F 2 KUKURYDZY W PODATNOŚCI NA FUSARIUM SPP.

XXV. Grzyby cz I. Ćwiczenie 1. Wykonanie i obserwacja preparatów mikroskopowych. a. Candida albicans preparat z hodowli barwiony metoda Grama

UNIWERSYTET PRZYRODNICZY WE WROCŁAWIU ZAKŁAD FITOPATOLOGII pl. Grunwaldzki 24 a Wrocław tel , Raport

Choroby grzybowe występujące na arcydzięglu litworze (Archangelica officinalis Hoffm.) na terenie Małopolski

Rhizoctonia solani a threat in carnation (Dianthus caryophyllus) production. Zagrożenie goździków (Dianthus caryophyllus) przez Rhizoctonia solani

Grzyby zasiedlające sucho gnijące bulwy ziemniaka

Apoloniusz Berbeć IUNG-PIB Puławy Koguci ogon

GRZYBY ZASIEDLAJĄCE OWOCE BORÓWKI WYSOKIEJ (VACCINIUM CORYMBOSUM L.) UPRAWIANEJ W POŁUDNIOWO-WSCHODNIEJ POLSCE

Grzyby powodujące zamieranie sadzonek wrzosu. Maria Kowalik, Agnieszka Wandzel

Grzyby zasiedlające nasiona stewarcji pseudokameliowatej (Stewartia pseudocamellia Max.) oraz ich chorobotwórczość

PRZĘDZIOREK CHMIELOWIEC

Zadanie 6.11 Monitorowanie zmian w populacjach patogena Rhizoctonia solani sprawcy rizoktoniozy korzeni buraka cukrowego

Metody zwalczania chorób grzybowych w kukurydzy

FUNGI ISOLATED FROM Verbena hybrida SEEDS, THEIR PATHOGENICITY TO SEEDLINGS AND ATTEMPTS AT THEIR CONTROL

Grisu 500 SC. celny strzał w choroby! ŚRODEK GRZYBOBÓJCZY

Grzyby uprawne w produkcji żywności tradycyjnej

ZAGROŻENIE CHOROBAMI GRZYBOWYMI PĘDÓW BORÓWKI WYSOKIEJ (VACCINIUM CORYMBOSUM L.)

Grzyby patogeniczne w uprawie pieczarki dwuzarodnikowej Agaricus bisporus (Lange.) Imbach. AGATA TEKIELA

Temat: Tkanki roślinne. 1. Tkanki miękiszowe.

Alternatywne kierunki użytkowania roślin motylkowatych drobnonasiennych

Początki uprawy buraków

Zwalczanie alternariozy ziemniaka oraz zarazy w jednym zabiegu!

Zakład Genetyki, Hodowli i Biotechnologii Roślin Warzywnych

ZASTOSOWANIE PULSUJĄCYCH FAL RADIOWYCH W USZLACHETNIANIU NASION ROŚLIN WARZYWNYCH

Grzyby pasożytnicze roślin z rodzajów Betula L. i Salix L. IWONA ADAMSKA

CHARAKTERYSTYCZNE CECHY GRZYBÓW

Aneks do I N S T R U K C J I. dla służby ochrony roślin z zakresu prognoz, sygnalizacji i rejestracji

Zwalczanie alternariozy i zarazy ziemniaka z dodatkową korzyścią!

WYMAGANIA EDUKACYJNE Z BIOLOGII KLASA 5 DOBRY. DZIAŁ 1. Biologia jako nauka ( 4godzin)

AKTUALNA SYGNALIZACJA WYSTĘPOWANIA CHORÓB I SZKODNIKÓW W UPRAWACH ROLNICZYCH NA DZIEŃ r.

Zbiorowiska mikroorganizmów w glebie spod leśnej uprawy żeń-szenia amerykańskiego

MO LIWO OGRANICZANIA WZROSTU GRZYBÓW PATOGENICZNYCH DLA LESZCZYNY PRZEZ BAKTERIE ANTAGONISTYCZNE. Ewa Król, Zofia Machowicz-Stefaniak, Ewa Zalewska

Wyniki badań klimatyzacji samochodowej z dnia 9 czerwca 2017

1. IMIĘ I NAZWISKO: Ewa Dorota Zalewska 2. POSIADANE DYPLOMY, STOPNIE NAUKOWE/ ARTYSTYCZNE Z PODANIEM

WZROST I PLONOWANIE PAPRYKI SŁODKIEJ (CAPSICUM ANNUUM L.), UPRAWIANEJ W POLU W WARUNKACH KLIMATYCZNYCH OLSZTYNA

Kiła kapusty w rzepaku: zabieg T0 receptą na sukces?

PATHOGENICITY OF SOME PHOMA EXIGUA VAR. EXIGUA ISOLATES. Abstract

Zwalczanie chorób buraka cukrowego może być proste i skuteczne!

a) Zapisz genotyp tego mężczyzny... oraz zaznacz poniżej (A, B, C lub D), jaki procent gamet tego mężczyzny będzie miało genotyp ax b.

Glebowe choroby grzybowe bez szans!

POZIOMY WYMAGAŃ EDUKACYJNYCH Z BIOLOGII KLASA V

Biuletyn agrotechniczny KWS 1/2002

Ocena przezimowania, aktualne zalecenia i rekomendacje.

BADANIA W IHAR-PIB W BYDGOSZCZY

The effect of different sulphur fertilization rates on seed health of white mustard seeds, cultivar Radena

PATHOGENIC SOILBORNE FUNGI OF ONION CULTIVATED AFTER COVER CROPS: SPRING RYE AND COMMON VETCH

Przedmiot: Biologia (klasa piąta)

Oprysk na opadanie płatków rzepaku

Ochrona zasobów genowych mikroorganizmów patogenicznych dla roślin

ANNALES UNIVERSITATIS MARIAE CURIE-SKŁODOWSKA LUBLIN POLONIA. Grzyby występujące na liściach i pędach róŝ uprawianych w tunelu foliowym

Nasilenie występowania głównych patogenów ziemniaka na terenie Polski w latach

Fungi occurring on narcissus plantation in annual and biennial cropping

Wymagania edukacyjne z biologii dla klasy 5 szkoły podstawowej oparte na Programie nauczania biologii Puls życia autorstwa Anny Zdziennickiej

PRZYCZYNY ZAMIERANIA ŁUSEK I PĘDÓW ŻYWOTNIKA ZACHODNIEGO (Thuja occidentalis L.) W TERENACH ZIELENI

Wpływ płynów pohodowlanych grzybów antagonistycznych na zdrowotność i plonowanie soi ALINA PASTUCHA, ELŻBIETA PATKOWSKA

CHARAKTERYSTYKA POPULACJI PYRENOPHORA TERES WYSTĘPUJĄCEJ NA JĘCZMIENIU JARYM W WIELKOPOLSCE*

WPŁYW MIESZANINY PROPIONIBACTERIUM FREUDENREICHII I LACTOBACILLUS RHAMNOSUS NA ZDROWOTNOŚĆ I PLON RZEPAKU OZIMEGO

FUNGI INHABITING THE RHIZOSPHERE OF PERSIAN CYCLAMEN AND THEIR IMPACT ON POTENTIAL PATHOGENS OF THE PLANT. Abstract. Introduction

Groźne choroby buraka cukrowego - czym je zwalczać?

Pythium myriotylum as the causal agent of sweet pepper decay in Poland. Pythium myriotylum jako przyczyna zamierania papryki w Polsce

Choroby ziemniaka: choroby części nadziemnych

ARTYKUŁY REPORTS OCENA ODPORNOŚCI POWŁOK Z FARB ELEWACYJNYCH NA DZIAŁANIE GRZYBÓW PLEŚNIOWYCH DO CELÓW ZNAKOWANIA EKOLOGICZNEGO

Korzeń to podstawa! Wzmocnij go dzięki zaprawie

ANALIZA PORÓWNAWCZA WPŁYWU NATURALNYCH OLEJKÓW ETERYCZNYCH NA OGRANICZENIE WZROSTU GRZYBA TRICHODERMA HARZIANUM

ANNALES. Katedra Fitopatologii i Entomologii, Uniwersytet Warmińsko-Mazurski ul. Licznerskiego 4, Olsztyn, Poland. Bożena Cwalina-Ambroziak

ŁUKANOWSKI, CZESŁAW SADOWSKI

Poszukiwanie źródeł odporności owsa (Avena sativa L.) na nowy patogeniczny i mykotoksynotwórczy gatunek Fusarium langsethiae

46 Olimpiada Biologiczna

56 (3): , 2016 Published online: ISSN

Rozwój apotecjów grzyba Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary w warunkach in vitro

Mirosław Nowakowski Zakład Technologii Produkcji Roślin Okopowych IHAR-PIB Oddział w Bydgoszczy

Zabieg T3 - ochroń kłos przez groźnymi chorobami!

57 (4): xxx-xxx, 2017 Published online: ISSN

Transkrypt:

Polish Botanical Society Elektronicznie podpisany przez PolishBotanical Society DN: email=p.otreba@pbsociety.org.pl, c=pl, st=warszawa, o=polish Botanical Society, ou=standard Certificate, ou=support, serialnumber=pt2110520970, title=managing Editor, sn=otreba, givenname=piotr, cn=polish Botanical Society Data: 2013.06.1923:08:47 +01'00' ACTA AGROBOTANICA Vol. 58, z. 2 2005 s. 151 162 Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce patogenu mięty pieprzowej (Mentha piperita L.) Katedra Fitopatologii, Akademia Rolnicza w Lublinie, ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin Department of Plant Pathology, Agricultural University of Lublin, ul. Leszczyńskiego 7, 20-069 Lublin, Poland e-mail:beata.zimowska@ar.lublin.pl, e-mail:zofia machowicz@ar.lublin.pl Characteristics of Phoma strasseri isolates not reported in Poland pathogen of peppermint (Mentha piperita L.) (Otrzymano: 04.04.2005) Summary The studies on occurrence and some morphology elements of Phoma strasseri, the species not reported in Poland till now were carried out. The cultures of fungus were isolated from the stems and rhizomes of two-year-old plants showing symptoms of necrosis and softening of tissues. The morphology of conidia and pycnidia, character of the colonies growth and biochemical features of the examined isolates were the case for regarding this fungus as P. strasseri. Key words: Phoma strasseri, peppermint, morphology WSTĘP Grzyby z rodzaju Phoma występują na roślinach należących do różnych rodzin botanicznych i odległych od siebie grup użytkowych (M a r c i n k o w s k a, 1985; Ł a c i c o w a i in., 1990; M a c h o w i c z - S t e f a n i a k i in., 2002). Izolowane były między innymi z roślin zielarskich. Phoma dictamnicola, P. glaucii i P. multirostrata var. microspora zasiedlały liście i łodygi tymianku właściwego, a P. eupatori rozłupki (M a c h o w i c z - S t e f a n i a k i Z i m o w s k a, 2000; M a c h o w i c z - S t e f a n i a k i in., 2002). Z korzeni, łodyg oraz liści tymianku właściwego, melisy lekarskiej oraz dziurawca zwyczajnego uzyskiwano P. exigua var. exigua, P. capitulum

152 i P. glomerata (M a c h o w i c z - S t e f a n i a k i in., 2002; Z i m o w s k a i M a c h o - w i c z - S t e f a n i a k, 2004; M a c h o w i c z - S t e f a n i a k i in., 2004). W 1963 roku w Japonii z roślin mięty pieprzowej z objawami czarnej zgnilizny łodyg i rozłogów wyizolowano gatunek, który oznaczono jako Phoma spp. ( H o r n e r, 1971). Kilka lat później w USA, w stanach Oregon i Waszyngton z roślin mięty wykazujących takie same objawy uzyskano gatunek, który oznaczono jako Phoma menthae Strasser. (Melouk i Horner, 1967). W tym samym roku Boerema, na podstawie morfologii izolatów Phoma menthae otrzymanych od amerykańskich badaczy nadał gatunkowi ostateczną nazwę Phoma strasseri Moesz. (H o r n e r, 1971). Grzyb izolowano również z zamierających łodyg i rozłogów różnych gatunków mięty w Europie, Nowej Zelandii oraz Ameryce Północnej (D e G r u y t e r i in., 2002). Według D e G r u y t e r a i in. (2002) Phoma strasseri oprócz mięty może porażać inne rośliny z rodziny Labiatae. W Ameryce Płn. izolaty grzyba uzyskano z roślin pysznogłówki szkarłatnej (Monarda didyma L.), a w Bułgarii z bukwicy lekarskiej (Stachys officinalis Trev.). W Polsce gatunek ten do tej pory nie był notowany. Wobec sygnalizowanego w ostatnich latach przez producentów pogarszania się zdrowotności mięty pieprzowej, podjęto badania w celu ustalenia przyczyny zamierania roślin oraz poznania morfologii czynnika chorobotwórczego. MATERIAŁ I METODY Badaniami w 2003 roku objęto trzy próby 2-letnich roślin mięty pieprzowej pochodzące z trzech plantacji zlokalizowanych w Kołkowie, gmina Michałów, województwo Świętokrzyskie zaś w 2004 roku z trzech plantacji położonych w gminie Fajsławice, woj. Lubelskie. Próby roślin z objawami chorobowymi pobierano z trzech miejsc na każdym polu. W przypadku plantacji położonych w Fajsławicach rośliny pobierano na początku oraz w pełni okresu wegetacji. Próby roślin z Kołkowa otrzymano w pełni wegetacji. Do badań w laboratorium przeznaczano z każdej próby i plantacji po 20 roślin wykazujących objawy chorobowe. Obecność grzybów określano na podstawie oznak etiologicznych występujących na porażonych częściach roślin oraz analizy mikologicznej. Grzyby izolowano z powierzchniowo odkażonych korzeni, rozłogów, podstawy łodygi oraz liści metodą sztucznych kultur, przy zastosowaniu pożywki mineralnej (Z i m o w s k a i M a c h o w i c z - S t e f a n i a k, 2004). Otrzymane kolonie grzybów po ich segregacji i doprowadzeniu do jednozarodnikowych kultur oznaczano do gatunku na pożywce maltozowej lub na podłożach standardowych (R a m i r e z, 1982; N e l s o n i in., 1983). Uzyskane izolaty P. strasseri oznaczono na podłożach standardowych na podstawie monografii D e G r u y t e r a i in. (2002), przy uwzględnieniu aktualnych zasad taksonomii grzybów z rodzaju Phoma (D e G r u y t e r i N o o r d e l o o s, 1992). Do dalszych badań z populacji grzyba wybrano losowo 6 izolatów, które wyszczepiano punktowo na trzy zestalone agarem pożywki tj.: MA (maltozową), OA (owsianą) oraz CA (wiśniową) (D e G r u y t e r i N o o r d e l o o s,

Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce... 153 1992). Kultury inkubowano przez pierwszy tydzień w termostacie bez dostępu światła w temp. 22 C, a przez następne 13 godz. w świetle UV oraz 11 godz. w ciemności. Po tym czasie wykonano opis morfologii kolonii badanych izolatów. Dokonano pomiaru średnicy kolonii, określano barwę awersu i rewersu, charakter wzrostu brzegu kolonii i charakter wzrostu grzybni powietrznej. Po 14 dniach przetrzymywania kultur w termostacie opisywano te same cechy co po 7 dniach oraz na pożywkach MA i OA badano barwę kultur po ich reakcji z 2 3 kroplami 1N NaOH. Na pożywce OA zwracano uwagę na ułożenie piknidiów względem podłoża. Badano kształt piknidiów, charakter ujścia, barwę piknidiów oraz barwę wypływu konidiów oraz budowę powierzchni ściany piknidiów. Ponadto po 2 tygodniach wzrostu kultur na pożywce OA wykonano pomiary 600 konidiów (6 izolatów x 100 konidiów) oraz 300 piknidiów (6 izolatów x 50 piknidiów). Zwracano również uwagę na obecność chlamydospor. WYNIKI Dokładne obserwacje symptomów chorobowych oraz analiza mikologiczna wskazały na powszechne występowanie Phoma strasseri na badanych roślinach mięty pieprzowej, pochodzących z plantacji zlokalizowanych w gminie Fajsławice. Grzyb izolowano najczęściej z łodyg i rozłogów mięty wykazujących objawy nekrozy, a następnie dezintegracji i rozmiękczenia tkanek wymienionych organów. Na młodych 2-letnich łodygach roślin badanych na początku okresu wegetacji oraz na młodych pędach roślin analizowanych w pełni wegetacji obserwowano nekrozę tkanek. Objawy nekrozy widoczne były także na rozłogach. Ponadto na łodygach obserwowano redukcję ilości oraz wielkości blaszek liściowych. Takie liście i łodygi były często zabarwione na kolor czerwony (fot. 1). Na roślinach starszych badanych w pełni wegetacji nekroza łodyg i rozłogów rozszerzała się i obejmowała niekiedy całą powierzchnię rozłogów, a w przypadku łodyg występowała do wysokości około 7 10 cm od podstawy. Ponadto, na granicy chorej i zdrowej tkanki obserwowano często przewężenie łodyg. Na porażonych łodygach i rozłogach występowały liczne piknidia, a w nich zarodniki konidialne, o cechach typowych dla rodzaju Phoma i gatunku P. strasseri (fot. 2). Na roślinach mięty pochodzących z plantacji zlokalizowanych w Kołkowie obserwowano takie same objawy chorobowe, przy czym tkanki łodyg i rozłogów na skutek nekrozy i rozmiękczenia rozpadały się. Ponadto na powierzchni porażonych organów znajdowano oznaki etiologiczne w postaci grzybni oraz zarodników o cechach typowych dla grzybów z rodzaju Fusarium, Alternaria oraz Phoma.

154 Fot. 1 Objawy chorobowe na liściach i rozłogach mięty Photo 1 Symptoms of disease on peppermint and rhizomes a b x2 Fot. 2 Nerkoza łodyg (a) i piknidia Phoma strasseri (b) Photo 2 Necrosis of stems (a) and pycnidia of Phoma strasseri (b)

Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce... 155 Analiza mikologiczna badanych organów roślin pochodzących z plantacji położonych w gminie Fajsławice potwierdziła występowanie P. strasseri, bowiem uzyskano łącznie 159 izolatów tego gatunku. W tej liczbie 70 pochodziło z roślin badanych na początku okresu wegetacji a 89 z roślin analizowanych w pełni wegetacji (tab. 1). W zależności od terminu badań izolaty grzyba uzyskane z łodyg stanowiły odpowiednio 28,9% i 26,5% wyosobnień wszystkich grzybów uzyskanych z tego organu. Izolaty Phoma strasseri otrzymane z rozłogów stanowiły odpowiednio 32,1% i 42,9% wyosobnień wszystkich grzybów (tab. 1). Pojedyncze izolaty omawianego gatunku uzyskano z korzeni roślin (tab. 1). Z roślin mięty otrzymanych z Kołkowa nie wyizolowano P. strasseri. Do grzybów najczęściej wyosabnianych z łodyg oraz rozłogów należały gatunki z rodzajów Fusarium, Alternaria, Trichoderma oraz Botrytis cinerea i Phoma exigua var. exigua. Grzyby z rodzaju Fusarium zasiedlały również korzenie. Zaś z liści powszechnie izolowano gatunki A. alternata, Epicoccum purpurascens oraz Cladosporium cladosporioides. Tabela 1 Udział izolatów Phoma strasseri wśród grzybów uzyskanych z zamierających roślin mięty pieprzowej z plantacji w gminie Fajsławice Table 1 Percentage of Phoma strasseri isolates in fungal communities obtained from dying plants of peppermint from plantations in Fajsławice commune Liczba izolatów (%) Number of isolates (%) Organy Organs Rośliny na początku okresu wegetacji Plants at beginning of vegetation Phoma strasseri Pozostałe gatunki Other species Razem Total Phoma strasseri Rośliny w pełni wegetacji Plants at full vegetation Pozostałe gatunki Other species Razem Total Korzenie Roots Rozłogi Rhizomes Łodygi Stems Liście Leaves 4 (3,8) 25 (32,1) 41 (28,9) - 100 53 101 142 104 78 142 142 5 (3,9) 39 (42,9) 45 (26,5) - 123 52 125 112 128 91 170 112 Ogółem Total 70 (15,1) 396 466 89 (17,8) 412 501

156 Przeprowadzone badania dotyczące wzrostu analizowanych izolatów P. strasseri na standardowych podłożach wykazały, że kultury grzyba na pożywce maltozowej po 7 dniach charakteryzowały się oliwkowo-kremową, niską, delikatnie rozwiniętą, kłaczkowatą grzybnią powietrzną o oliwkowo-szarym rewersie (tab. 2). Po 14 dniach w starszej części kultur tj. bliżej inokulum grzybnia była silniej rozwinięta, puszysta. Strzępki grzybni powietrznej tworzyły wełnistą strukturę i miały biały kolor. Brzeg kultur wszystkich badanych izolatów odznaczał się nym wzrostem. Średnica kolonii mierzona po 7 dniach wynosiła od 60 do 66 mm zaś po 14 dniach 90 mm (tab. 2). Na pożywce wiśniowej po 7 i po 14 dniach wzrostu kolonie były koloru oliwkowozielonego o oliwkowym rewersie, a strzępki grzybni powietrznej tworzyły kłaczkowatą strukturę. Wzrost kolonii badanych izolatów był nieco słabszy aniżeli na pożywce MA, bowiem średnica kolonii mierzona po 7 dniach wynosiła od 58 do 62 mm zaś po 14 dniach od 80 do 85 mm. Brzeg kultur wszystkich izolatów cechował się nym wzrostem (tab. 2). Po 7 dniach hodowli izolatów P. strasseri na pożywce owsianej kolonie były koloru oliwkowo-kremowego, o oliwkowym rewersie a strzępki grzybni powietrznej tworzyły kłaczkowatą strukturę. Po 14 dniach wzrostu zwłaszcza w środkowej części kolonii strzępki grzybni powietrznej tworzyły wełnistą strukturę o biało- kremowym kolorze. Brzeg kolonii był ny, zaś średnica mierzona po 7 i 14 dniach wzrostu była zbliżona do średnicy kolonii izolatów wzrastających na pożywce CA (tab. 2).

Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce... 157 Podłoża Medium Badane cechy The studies features Średnica kolonii Diameter of colonies Barwa awersu Colour of averse Barwa rewersu Colour of reverse Charakter wzrostu brzegu kolonii Character of the growth of colonies margin Struktura grzybni powietrznej Structure of aerial mycelium Barwa kultur po reakcji z 1N Na OH Colour of cultures after reaction with 1N Na OH Tabela 2 Charakterystyka kultur izolatów Phoma strasseri na standardowych podłożach Table 2 Characteristic of cultures of Phoma strasseri isolates on standard medium Pożywka maltozowa Malt agar medium MA Pożywka owsiana Oatmeal agar medium OA Pożywka wiśniowa Cherry agar medium CA Według De Gruyter i in (2002) According to De Gruyter et al (2002) Po 7 dniach After 7 days Po 14 dniach After 14 days Po 7 dniach After 7 days Po 14 dniach After 14 days Po 7 dniach After 7 days Po 14 dniach After 14 days MA OA CA 60-66 mm 86-90 mm 58-60 mm 80-85 mm 58-62 mm 80-85 mm 65-69 mm 60-63 mm 60-62 mm oliwkowokremowy -cream oliwkowoszary grey oliwkowo-biały -white oliwkowo-brunatny -brown oliwkowokremowy -cream oliwkowy oliwkowy oliwkowy oliwkowobiały white oliwkowozielony green oliwkowozielony green oliwkowy biało-kremowy lub oliwkowo-szary white-cream or -grey oliwkowy lub ciemno niebieski or dark blue oliwkowy lub oliwkowo-szary or -grey oliwkowo-szary lub oliwkowo-biały -grey or white oliwkowoszary lub oliwkowy -grey or oliwkowy ny ny ny ny ny ny ny ny ny floccose do wełnistej floccose to wooly 2 izolaty-reakcja negatywna, pozostałe zmiana zabarwienia na kolor zielony a następnie czerwony 2 isolates reaction negative, others becoming green, then red floccose do wełnistej floccose to wooly tak jak na MA as on MA floccose floccose do wełnistej floccose to wooly zazwyczaj negatywna, u niektórych izolatów pozytywna, początkowo kolor zielony a następnie czerwony usually negative, however, some isolates showed a positive reaction becoming green, then red floccose do wełnistej floccose to wooly

158 Tworzące się licznie na pożywce OA piknidia były nienie rozrzucone po całej powierzchni kolonii, a z ujść piknidiów wypływały kremowo-łososiowe krople zarodników. Piknidia były okrągłe, oliwkowo-brunatne z jednym lub dwoma rzadziej trzema brodawkowatymi ujściami (tab. 3., fot. 3). Były one gładkie, niekiedy tylko obserwowano delikatne utwory strzępkowe, które najczęściej otaczały ujście. Wielkość piknidiów wynosiła średnio 120-260 µm (tab. 3). Konidia były hyalinowe, owalne lub elipsoidalne. Zawierały najczęściej po kilka małych kropli tłuszczu. Przeważały konidia 1-komórkowe, 2-komórkowe występowały sporadycznie (fot. 4). Wymiary konidiów badanych izolatów P. strasseri wynosiły średnio 5,3 x 2,1µm (tab. 3). Na pożywce MA i OA obserwowano zróżnicowaną reakcję kultur w miejscu nakropienia 1N wodorotlenku sodu. U dwóch z sześciu badanych izolatów P. strasseri nie obserwowano żadnego zabarwienia. U pozostałych reakcja była pozytywna. Brzeg kultur początkowo przybierał zielonkawe zabarwienie, a po kilku minutach zmienił zabarwienie na czerwone. Żaden z badanych izolatów grzyba nie tworzył chlamydospor (tab. 3) Tabela 3 Morfologia piknidiów i konidiów Phoma strasseri (średnia dla 6 izolatów) Table 3 Morphology of pycnidia and conidia of Phoma strasseri (mean for 6 isolates) Badane cechy The studies features Ułożenie piknidiów Arrangement of pycnidia Kształt piknidiów Shape of pycnidia Charakter ujścia piknidiów Character of pycnidia ostioles Barwa piknidiów Colour of pycnidia Barwa wypływu konidiów Colour of conidial exudate Budowa powierzchni ściany piknidiów Structure of pycnidia walls surface Wymiary piknidiów Size of pycnidia Kształt konidiów Shape of conidia Wymiary konidiów Size of conidia Badania własne Own studies nienie rozrzucone po całej kolonii, na powierzchni jak i zagłębione w podłoże irly scattered on the surface of colony, both on and in the agar okrągłe globose najczęściej 1 lub 2 brodawkowate ujścia usually with 1-2 verrucose ostioles brązowooliwkowa brown kremowołososiowa creamsalmon gładkie, niekiedy delikatne utwory strzępkowe glabrous, sometimes with softly mycelial outgrowts 120-260 µm owalne do elipsoidalnych oval to ellipsoidal 5,3x2,1 µm Według De Gruytera i in (2002) According to De Gruyter et al (2002) j w as above okrągłe globose 1-3 brodawkowate ujścia 1-3 verrucose ostioles miodowooliwkowa do ciemno oliwkowej honey to dark gładkie lub z utworami strzępkowymi glabrous or with mycelial outgrowts 100-230 µm różowołososiowa rosysalmon elipsoidalne elipsoidal 5,6x2,5 µm

Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce... 159 Fot. 3 Piknidia Phoma strasseri (x 160) Photo 3 Pycnidia of Phoma strasseri (x 160) Fot. 4 Konidia Phoma strasseri (x 640) Photo 4 Conodia of Phoma strasseri (x 640)

160 DYSKUSJA Częste izolowanie kultur P. strasseri z łodyg oraz rozłogów roślin mięty pieprzowej pochodzących z gminy Fajsławice i wykazujących objawy nekrozy a następnie zgnilizny wymienionych organów sugeruje, że takie właśnie symptomy były następstwem zasiedlania tkanek przez wymieniony gatunek grzyba. O słuszności tej tezy mogą również świadczyć wyniki badań H o r n e r a (1971), który z roślin wykazujących takie same objawy chorobowe uzyskał kultury P. strasseri, po czym potwierdził patogeniczny charakter grzyba w przeprowadzonych testach infekcyjnych (M e l o u k i H o r n e r, 1967; H o r n e r, 1971). Pomimo obserwowania charakterystycznych objawów chorobowych na rozłogach i łodygach roślin mięty pieprzowej otrzymanych z Kołkowa nie wyizolowano z nich kultur P. strasseri. Prawdopodobnie podczas transportu tkanki tych organów zostały opanowane przez szybko rosnące i znane z uzdolnień konkurencyjnych gatunki grzybów z rodzajów Fusarium, Trichoderma czy B. cinerea, jak również przez wtórne saprotrofy m.in. A. alternata (M a c h o w i c z - S t e f a n i a k i in., 2002; Z i m o w s k a i M a c h o w i c z - S t e f a n i a k, 2004 ). Przebadanie morfologii piknidiów i konidiów oraz charakteru wzrostu kolonii badanych izolatów grzyba, w zestawieniu z opisem zamieszczonym w monografii sekcji Phyllostictioides (D e G r u y t e r i in., 2002), upoważniły do uznania gatunku jako P. strasseri. Występowanie u badanych izolatów grzyba głównie konidiów 1-komórkowych, zaś rzadziej 2-komórkowych jest zgodne z informacjami innych autorów. Wiadomo bowiem, że u przedstawicieli rodzaju Phoma przegrody poprzeczne w konidiach powstają wtórnie, niezależnie od procesu konidiogenezy, toteż niewielki procent zarodników może posiadać wtórne przegrody (B o e r e m a i B o l l e n, 1975). Według D o r e n b o s c h a (1970), pomimo że wymiary konidiów są ważną cechą taksonomiczną, to w przypadku grzybów z rodzaju Phoma odgrywają drugorzędowe znaczenie diagnostyczne, gdyż są bardzo podobne do siebie. Dlatego klasyfikacja tych grzybów powinna być oparta zarówno na cechach morfologicznych jak i charakterze wzrostu kolonii (D o r e n b o s c h, 1970; M a r c i n k o w s k a, 1985). Mykolodzy brytyjscy wskazują również na istotne znaczenie cech fizijologicznych i biochemicznych w diagnostyce Phoma spp. (M o n t e i in., 1990). Wiadomo, że grzyby te mogą wytwarzać barwniki antrachinonowe lub różne metabolity, które w reakcji z 1N wodorotlenkiem sodu w zależności od pożywki mogą ją utleniać do koloru niebiesko-zielonego lub czerwono-purpurowego. Phoma exigua var. exigua tworzy w kulturach bezbarwny metabolit,,e, który zależnie od pożywki może ją utleniać do czerwono-purpurowego barwnika α lub żółtego albo czerwonego barwnika β (B o e r e m a i H o w e l e r, 1967). W przypadku badanych izolatów P. strasseri obserwowano zróżnicowaną reakcję z 1N NaOH. Wyniki tych obserwacji są zgodne z informacjami zawartymi w monografii sekcji Phyllostictioides, które mówią, że niektóre izolaty P. strasseri mogą reagować zabarwieniem kultur na kolor zielony a następnie czerwony, zaś w przypadku większości izolatów reakcja jest negatywna (D e G r u y t e r i in., 2002). Dane z literatury nie dają jednoznacznej odpowiedzi, które z metabolitów wchodzą w reakcję z 1N NaOH w przypadku P. strasseri. Wiadomo, że omawiany gatunek

Charakterystyka izolatów Phoma strasseri nie notowanego w Polsce... 161 grzyba produkuje β- glukozydazę, enzym wyekstrahowany z konidiów oraz grzybni patogena, który najprawdopodobniej bierze udział w procesie patogenezy, powodując nekrozę i rozkład tkanek łodyg i rozłogów (M e l o u k i H o r n e r, 1973). Przeprowadzone badania pozwoliły poznać struktury morfologiczne oraz cechy P. strasseri, które zadecydowały o zaklasyfikowaniu badanych izolatów do sekcji Phyllostictioides. Uzyskanie kultur grzyba z zamierających rozłogów oraz łodyg mięty pieprzowej należy ocenić negatywnie ze względu na obniżenie jakości i ilości surowca Herba Menthae oraz niebezpieczeństwo rozprzestrzeniania patogenu poprzez porażone rozłogi. Jednak dokładne określenie szkodliwości uzyskanych izolatów P. strasseri dla roślin mięty pieprzowej wymaga dalszych badań. Literatura B o e r e m a G. H., B o l l e n G. J., 1975. Conidiogenesis and conidial septation as differentiating criteria between Phoma and Ascochyta. Persoonia 8: 111 144. B o e r e m a G. H., H o w e l e r L. H., 1967. Phoma exigua Desm. and its varieties. Persoonia 5: 15 28. D o r e n b o s c h M. M. J., 1970. Key to nine ubiquitous soliborne Phoma- like fungi. Persoonia 6: 1 14. G r u y t e r J. De, N o o r d e l o o s M. E., 1992. Contributions towards a monograph of Phoma (Coelomycetes) I. 1. Section Phoma: Taxa with very small conidia in vitro. Persoonia 15: 71 92. G r u y t e r J. De, B o e r e m a G. H., H. A. Va n D e r AA., 2002. Contributions towards a monograph of Phoma (Coelomycetes) VI-2. Section Phyllostictioides: Outline of its taxa. Persoonia, 18, (1): 1 53. H o r n e r C.E., 1971. Rhizome and stem rot of peppermint caused by Phoma strasseri. Plant Disease Reporter, 55, (1): 814 816. Ł a c i c o w a B., K i e c a n a I., P i ę t a D., 1990. Mikoflora nasion Cyclamen persicum Mill. I chorobotwórczość Phoma exigua Desm. dla tej rośliny. Acta Mycol., XXVI, 2: 25 32. M a c h o w i c z - S t e f a n i a k Z., Z i m o w s k a B., 2000. Grzyby przenoszone przez nasiona roślin zielarskich. Acta Agrobot., 53, (2): 25 38. M a c h o w i c z - S t e f a n i a k Z., Z i m o w s k a B., Z a l e w s k a E., 2002. Grzyby zasiedlające różne organy tymianku właściwego Thymus vulgaris L. uprawianego na Lubelszczyźnie. Acta Agrobot., 55, (1): 185 197. M a c h o w i c z - S t e f a n i a k Z., Z a l e w s k a E., Z i m o w s k a B., 2004. Grzyby zasiedlające nadziemne organy melisy lekarskiej (Melissa officinalis L.) i tymianku właściwego (Thymus vulgaris L.) uprawianych na Lubelszczyźnie. Folia Univ. Agric. Stetin., Agriculture, 239, (95): 229 232. M a r c i n k o w s k a J., 1985. Charakterystyka izolatów Phoma exigua. Acta Mycol. XXI, (1): 81 90. M e l o u k H., H o r n e r C. E., 1967. A disease of peppermint caused by Phoma menthae. Phytopathology, 57: 1007.

162 M e l o u k H., H o r n e r C.E., 1973. β-glucosidase from Phoma strasseri and its possible role in disease of peppermint. Phytopathology, 63: 973 975. M o n t e E., B r i d g e P. D., S u t t o n B. C., 1990. Physiological and biochemical studies in Coelomycetes. Phoma Stud. Mycol., 32: 21 28. N e l s o n P. E., To u s s o n T. A., M a r a s a s W. F. O., 1983. Fusarium species. An illustrated manual for identification. The Pensylv. St. Univ. Press., University Park and London. R a m i r e z C., 1982. Manual and atlas of the Penicillia. Elsivier Biomedical Press, Oxford: 874 pp. Z i m o w s k a B., M a c h o w i c z - S t e f a n i a k Z., 2004. Grzyby zagrażające uprawie dziurawca zwyczajnego (Hypericum perforatum L.) w województwie lubelskim. Acta Sci. Pol., Hortorum Cultus, 3 (1): 61 74. S t r e s z c z e n i e Badano występowanie i elementy morfologii izolatów Phoma strasseri, gatunku nie notowanego dotychczas w Polsce. Kultury grzyba izolowano z łodyg i rozłogów 2-letnich roślin mięty pieprzowej wykazujących objawy nekrozy i rozmiękczenia tkanek. Za uznaniem tego grzyba za P. strasseri przemawiały morfologia konidiów, piknidiów, charakter wzrostu kolonii oraz cechy biochemiczne przebadanych izolatów.